Способ дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл


 


Владельцы патента RU 2518308:

Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) (RU)

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к диагностике инфекционных болезней. Способ предусматривает исследование сыворотки крови в реакции агглютинации, реакции связывания комплемента с единым бруцеллезным антигеном, реакции иммунной диффузии с О-ПС антигеном и дополнительное исследование положительно реагирующих проб в реакции связывания комплемента с R-антигеном. При этом в качестве R-антигена используют овисный антиген. Отрицательный результат реакции связывания комплемента с овисным антигеном подтверждает, что животное больно бруцеллезом, а положительный результат - здорово. Способ позволяет повысить достоверность дифференциальной диагностики и снизить необоснованный убой животных, а также обеспечить объективность эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированных живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл вида abortus. 3 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к диагностике инфекционных болезней.

В настоящее время в РФ официально принята система противобруцеллезных мероприятий, включающая проведение профилактической и вынужденной иммунизации крупного рогатого скота с использованием двух живых вакцин из диссоциированных штаммов бруцелл: В.abortus 82 и В.abortus 75/79-АВ [5]. Отмечены случаи выявления в благополучных стадах крупного рогатого скота положительных серологических реакций на бруцеллез с единым бруцеллезным антигеном, изготовленным из типичных бруцелл в S-форме, при проведении плановых диагностических исследований ранее вакцинированных животных, что требует проведения дополнительных исследований сывороток крови в реакции иммунной диффузии (РИД) с О-ПС-антигеном. Положительный результат РИД с О-ПС антигеном подтверждает наличие бруцеллезной инфекции, отрицательный результат - только отсутствие инфекции.

При этом вопрос о том, являются ли выявленные положительно реагирующие в РСК и отрицательно реагирующие в РИД с О-ПС антигеном животные больными или реакции носят поствакцинальный характер, остается не решенным, что значительно снижает объективность дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота. Дифференцировать больных бруцеллезом животных от здоровых, иммунизированных штаммом В.abortus 82, в благополучных и неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах позволяет применение R-бруцеллезного антигена.

Есть сообщения об использовании в дифференциациальной эпизоотической оценке при исследовании сывороток крови в РСК R-антигена, изготовленного из инагглютиногенного штамма B.abortus 82 (SR-диссоциант) [6]. Недостатком этого антигена является то, что невозможно дифференцировать инфицированных животных от вакцинированных, что снижает достоверность дифференциальной оценки.

Наиболее близким аналогом является дифференциальная диагностика бруцеллеза крупного рогатого скота, привитого вакциной из штамма 82 [1], включающая исследование сыворотки крови в реакции агглютинации (РА), реакции связывания комплемента (РСК) с единым и R-антигеном ВНИИБТЖ, полученным из штамма B.abortus 16/4 [2], реакции непрямой гемагглютинации (РИГА) и реакции иммунной диффузии (РИД) с О-ПС антигеном.

Следует отметить, что штамм В.abortus 16/4 является генетически не стабильным диссоциантом, а R-антиген, получаемый из него в лабораторных условиях, приходится поддерживать искусственно, и нередко он приобретает в своей антигенной структуре S-компонент, который может влиять на достоверность результатов, получаемых с дифференциальной целью [8], что значительно снижает объективность эпизоотичекой оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл вида abortus.

Техническим результатом изобретения является повышение достоверности дифференциальной диагностики, позволяющее снизить необоснованный убой животных, и обеспечение объективности эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл вида abortus.

Технический результат достигается тем, что способ дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл, включающий исследование сыворотки крови в РА, РСК с единым бруцеллезным антигеном, РИД с О-ПС антигеном и дополнительное исследование положительно реагирующих проб в РСК с R-антигеном, отличается тем, что в качестве R-антигена используется антиген овисный.

Есть сообщения, доказывающие, что существует практически полное антигенное родство между R-формами бруцелл видов abortus, melitensis, suis и бруцеллами видов ovis и canis, в природной стабильной R-форме [4, 7].

Известен, официально утвержден «Набор специфических компонентов для диагностики болезни овец, вызываемой Brucella ovis» (изготовитель ООО НПФ «Биоцентр», г.Омск) [3], в состав которого входит антиген овисный для реакции длительного связывания комплемента РДСК, изготавливаемый из B.ovis в природной стабильной R-форме, предназначенный только для серологической диагностики болезни овец, вызываемой бруцеллами вида ovis (инфекционный эпидидимит баранов).

Способ дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл, осуществляется следующим образом: проводят исследование сыворотки крови на бруцеллез в реакции РА, РСК с единым бруцеллезным антигеном, РИД с О-ПС антигеном, положительно реагирующие пробы дополнительно исследуют с овисным антигеном в РСК. Отрицательный результат РСК с овисным антигеном подтверждает инфицированность животных бруцеллезом, а при положительном - животное здоровое, иммунизированное живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл.

Природная стабильность R-форм B.ovis и генетическое родство с R-формой бруцелл вида abortus гарантирует достоверность дифференциальной диагностики и обеспечивает объективность эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл, что позволяет предотвратить необоснованный убой животных.

Сущность изобретения поясняется на конкретных примерах выполнения способа.

Пример 1. Определение чувствительности R-антигенов из разных штаммов бруцелл (ovis и abortus), изготовленных по аналогичной технологии, через 2 месяца после иммунизации, например, вакциной из штамма B.abortus 82.

Для сравнения чувствительности R-антигенов из разных штаммов бруцелл (ovis и abortus) изготовили R-антиген из R-штамма B.abortus по технологии, аналогичной изготовлению овисного диагностикума.

Исследовали 180 проб сывороток крови крупного рогатого скота благополучной по бруцеллезу фермы через 2 месяца после последней иммунизации вакциной из штамма B.abortus 82. Результаты исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1
Результат исследования сыворотки крови иммунизированного крупного рогатого скота из благополучного по бруцеллезу хозяйства
№ п/п Хозяйство Срок после иммуниза-
ции (мес)
Исследовано проб Реагировало положительно
РА+РСК с единым антигеном РИД РСК с R-антигеном из
В.ovis В.abortus
абс. % абс. % абс. % абс. %
1 Ферма №1 2 180 59 32,8 - - 134 74,4 127 70,6

Результаты исследования сывороток крови от животных фермы №1 (180 проб сывороток):

- РА с единым бруцеллезным антигеном и РИД с О-ПС антигеном - отрицательно во всех пробах;

- РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген) - положительно (титр 1:5-1:10) в 59 пробах (32,8%);

- РСК с овисным антигеном - положительно (титр 1:5-1:80) в 134 пробах (74,4%);

- РСК с R-антигеном, изготовленным из R-штамма B.abortus - положительно в 127 пробах (70,6%).

Результаты дополнительного исследования 59 проб с положительным результатом РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген):

- РСК с овисным антигеном - положительно во всех пробах;

- РСК с R-антигеном из R-штамма B.abortus - положительно в 55 пробах.

Титры РСК с овисным антигеном (R-антиген) превышали титры РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген) в 30 пробах, а с R-антигеном из R-штамма B.abortus - в 19 пробах.

Результаты дополнительного исследования 121 пробы с отрицательным результатом РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген):

- РСК с овисным антигеном - положительно в 75 пробах (титр 1:5-1:80);

- РСК с R-антигеном из B.abortus - положительно в 69 пробах.

Таким образом, в ранние сроки (2 месяца) после иммунизации крупного рогатого скота благополучного по бруцеллезу стада вакциной из диссоциированного штамма B.abortus 82 количество выявляемых животных с положительной РСК с R-антигенами превышало таковое с S-антигеном в 2,3 раза, в 51,7% случаев титры РСК с R-антигенами превышали таковые в РСК с S-антигеном. В 56,0% случаев РСК с R-антигеном была положительной при отрицательной РСК с S-антигеном. При этом преимущества овисного антигена в дифференциальной оценке поствакцинальных реакций были в 1,1 раза выше, чем у R-антигена из B.abortus.

Таким образом применение овисного антигена позволяет повысить достоверность дифференциальной диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота в благополучных хозяйствах, предотвращая необоснованный убой животных.

Пример 2. Определение чувствительности R-антигенов из разных штаммов бруцелл (ovis и abortus), изготовленных по аналогичной технологии, через 24 месяца после иммунизации на пример вакциной из штамма B.abortus 82.

Исследовали 63 пробы сывороток крови крупного рогатого скота трех благополучных по бруцеллезу ферм через 2 года после последней иммунизации вакциной из штамма В. abortus 82 (табл.2).

Таблица 2
Результат исследования сыворотки крови крупного рогатого скота через 24 месяца после вакцинации в благополучных по бруцеллезу хозяйств
№ п/п Хозяйство Срок после иммуниза-
ции (мес)
Исследова-
но проб
Реагировало положительно
РА+РСК с единым антигеном РИД РСК с R-антигеном из
В.ovis В.abortus
абс. % абс. % абс. % абс. %
1 Ферма №1 24 10 2 20,0 - - 9 90,0 - -
2 Ферма №2 24 9 2 22,2 - - 9 100 7 77,8
3 Ферма №3 24 44 14 31,8 - - 42 95,5 6 13,6

Результаты исследования сывороток крови от животных фермы №1 (10 проб сывороток):

- РА с единым бруцеллезным антигеном - отрицательно во всех пробах;

- РИД с О-ПС антигеном - отрицательно во всех пробах;

- РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген) - положительно в 2 пробах;

- РСК с официальным овисным антигеном (R-антиген) - положительно в 9 пробах;

- РСК с R-антигеном из R-штамма B.abortus - отрицательно во всех 10 пробах.

Результаты исследования сывороток крови от животных фермы №2 (9 проб сывороток):

- РА с единым бруцеллезным антигеном - отрицательно во всех пробах;

- РИД с О-ПС антигеном - отрицательно во всех пробах;

- РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген) - положительно в 2 пробах;

- РСК с официальным овисным антигеном (R-антиген) - положительно в 9 пробах;

- РСК с R-антигеном из R-штамма B.abortus - положительно в 7 пробах.

Результаты исследования сыворотки крови от животных фермы №3 (44 пробы сыворотки):

- РА с единым бруцеллезным антигеном - положительно в одной пробе;

- РИД с О-ПС антигеном - отрицательно во всех пробах;

- РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген) - положительно в 14 пробах;

- РСК с официальным овисным антигеном (R-антиген) - положительно в 42 пробах;

- РСК с R-антигеном из R-штамма B.abortus - положительно в 6 пробах.

Следовательно, в поздние сроки (24 месяца) после иммунизации крупного рогатого скота благополучных по бруцеллезу стад вакциной из диссоциированного штамма B.abortus 82 количество выявляемых животных с положительной РСК с R-антигенами превышало таковое с S-антигеном в среднем в 3,3 раза, а преимущества овисного антигена в дифференциальной оценке поствакцинальных реакций были в 4,6 раза выше, чем у R-антигена из B.abortus. Такой характер реакций также убедительно доказывает их вакцинную природу, повышает достоверность дифференциальной диагностики бруцеллеза животных и предотвращает необоснованный убой.

Пример 3. Определение эффективности РСК с овисным антигеном для дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота трех ферм с различной эпизоотической обстановкой.

Провели испытание эффективности РСК с овисным антигеном для дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота трех ферм с различной эпизоотической обстановкой (табл.3).

Ферма 1 - благополучная по бруцеллезу, животные иммунизированы вакциной из штамма B.abortus 82.

Результаты исследования 14 проб сывороток крови:

- РА с единым бруцеллезным антигеном - сомнительно в одной пробе, отрицательно в 13 пробах;

- РИД с О-ПС антигеном - отрицательно во всех пробах;

- РСК с единым бруцеллезным антигеном - положительно в 10 пробах;

- РСК с официальным овисным антигеном - положительно в 14 пробах. При этом титры РСК с овисным антигеном превышали титры РСК с единым бруцеллезным антигеном в 13 случаях из 14.

При бактериологическом исследовании биоматериала от реагирующих животных культуры бруцелл не выделены.

В результате исследований на ферме №1, благополучной по бруцеллезу, в инструктивные сроки после иммунизации вакциной из диссоциированного штамма B.abortus 82 при отрицательных результатах РИД с О-ПС антигеном количество выявляемых животных с положительной РСК с овисным антигеном превышало таковое с S-антигеном в 1,4 раза, полностью совпав с показаниями РСК с единым антигеном. При этом из числа отрицательно реагирующих животных в РСК с единым антигеном 28,6% реагировало в РСК с овисным антигеном.

Такой характер реакций убедительно доказывает их вакцинную природу.

Ферма 2 - неблагополучная по бруцеллезу, животные иммунизированы вакциной из штамма B.abortus 82.

Результаты исследований 107 проб сывороток крови:

- РА с единым бруцеллезным антигеном - положительно в 17 пробах;

- РИД с О-ПС антигеном - положительно в 13 пробах;

- РСК с единым бруцеллезным антигеном - положительно в 21 пробе;

- РСК с официальным овисным антигеном - положительно в 5 пробах.

При этом титры РСК с овисным антигеном были одинаковы с титрами РСК с единым бруцеллезным антигеном или ниже их.

При бактериологическом исследовании биоматериала от реагирующих животных выделены вирулентные культуры возбудителя.

В результате исследований на ферме №2, неблагополучной по бруцеллезу, в инструктивные сроки после иммунизации вакциной из диссоциированного штамма B.abortus 82 при наличии положительной РИД с О-ПС антигеном у 12,1% исследованных животных количество выявляемых животных с положительной РСК с овисным антигеном было ниже такового с единым антигеном практически в 3,4 раза. Титры РСК с овисным антигеном были одинаковыми или ниже, чем таковые в РСК с единым антигеном.

Такой характер реакций убедительно доказывает их инфекционную природу, что дополнительно было подтверждено бактериологически.

Таблица 3
Результаты исследования сывороток крови крупного рогатого скота из хозяйств с различной эпизоотической характеристикой
№ п/п Хозяйство Срок после иммунизации (мес) Исследовано проб Реагировало положительно
с единым антигеном РИД PCK c R-антигеном (В.ovis)
РА РСК
абс. % абс. % абс. % абс. %
1 Ферма №1 6 14 - - 10 71,4 - - 14 100
2 Ферма №2 6 107 17 15,9 21 19,6 13 12,1 5 4,7
3 Ферма №3 без вакцинации 76 8 10,5 22 28,9 12 15,8 - -

Ферма 3 - неблагополучная по бруцеллезу, животные против бруцеллеза не иммунизированы.

Результаты исследований 76 проб сывороток крови:

- РА с единым бруцеллезным антигеном - положительно в 8 пробах, сомнительно - в 20 пробах;

- РИД с О-ПС антигеном - положительно в 12 пробах;

- РСК с единым бруцеллезным антигеном - положительно в 22 пробах, сомнительно - в 53 пробах;

- РСК с овисным антигеном - отрицательно во всех пробах.

Диагноз на бруцеллез подтвержден бактериологически (выделение вирулентного возбудителя).

В результате исследований на ферме №3, неблагополучной по бруцеллезу, где иммунизацию животных вакциной из диссоциированного штамма B.abortus 82 не проводили, при наличии положительной РИД с О-ПС антигеном у 15,8% исследованных животных в РСК с овисным антигеном были получены отрицательные результаты, что доказывает - животные не подвергались иммунизации вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл. Положительная РСК с единым антигеном была зарегистрирована у 28,9% исследованных животных, что убедительно доказывает их инфекционную природу и дополнительно подтверждено бактериологически. Использование овисного антигена обеспечивает объективность эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл вида abortus, за счет выявления поствакцинальных реакций

По результатам опытов следует отметить, что способ дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл с использованием овисного антигена, повышает достоверность дифференциальной диагностики и позволяет снизить необоснованный убой животных, а также обеспечить объективность эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл вида abortus.

Литература

1. Дегтяренко Л.В. Дифференциальная диагностика бруцеллеза крупного рогатого скота, привитого вакциной из штамма 82. / Дегтяренко Л.В., Новицкий А.А., Разницына Г.В., Власова С.А. // Ветеринария. - 2002. - №1 - С.18-20.

2. Дегтяренко Л.В. Разработка и совершенствование средств, методов диагностики бруцеллеза животных и инфекционного эпидидимита баранов // Дегтяренко Л.В. // Автореф. дисс. док. вет. наук, Новосибирск. - 2005. - 40 с.

3. Инструкция по применению набора специфических компонентов для диагностики болезни овец, вызываемой Brucella ovis.

4. Косилов И.А., Аракелян П.К., Димов С.К. и др./ Монография: Инфекционный эпидидимит баранов. - Новосибирск. - 2005. - 27 с.

5. Наставление по диагностике бруцеллеза животных, утвержденное Министерством сельского хозяйства РФ, Москва, 2004. - 64 с.

6. Салмаков К.М. Изыскание и испытание новых вакцинных штаммов бруцелл / Салмаков К.М. // Автореф. дисс. док. вет. наук. - Казань. - 1977. - 29 с.

7. Троицкая Л.И. Антигенное родство вида овис и абортус / Троицкая Л.И., Клочков Г.С.: Сб. науч. тр. СибНИВИ. - Омск, 1976, т.27, с.24-30.

8. Шумилов К.В. Адъювант-вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота / Шумилов К.В., Калмыков В.В. / Тез. докл. науч.-практ. конф. Основные научные исследования по проблеме туберкулеза и бруцеллеза с.-х. животных, профилактика и организация мероприятий по ликвидации болезней в регионе Сибири. - Новосибирск. - 1995. - С.97-98.

Способ дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл, включающий исследование сыворотки крови в реакции агглютинации, реакции связывания комплемента с единым бруцеллезным антигеном, реакции иммунной диффузии с О-ПС антигеном и дополнительное исследование положительно реагирующих проб в реакции связывания комплемента с R-антигеном, отличающийся тем, что в качестве R-антигена используют овисный антиген, отрицательный результат реакции связывания комплемента с овисным антигеном подтверждает, что животное больно бруцеллезом, а положительный результат - здорово.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области ветеринарной медицины и касается вакцины ассоциированной против сальмонеллеза, эшерихиоза и вирусной геморрагической болезни кроликов.

Настоящее изобретение относится к генетически модифицированной бактерии Salmonella enterica, которые содержат, по меньшей мере, один оперон pgl из Campylobacter jejuni или его функциональное производное и относится к презентации, по меньшей мере, одного N-гликана из Campylobacter jejuni или производного этого N-гликана на их клеточной поверхности.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для получения бесклеточной вакцины для иммунопрофилактики коклюша. Для этого штаммы Bordetella pertussis выращивают на казеиново-угольном агаре с последующим смывом микробных клеток с поверхности питательной среды и устанавливают в полученной суспензии концентрацию микробных клеток 60-80 ME и рН 8,4±0,1.
Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к профилактике инфекционных болезней. Способ профилактики бруцеллеза животных осуществляют следующим образом.

Представленные изобретения относятся к области биомедицины и касаются полинуклеотидной последовательности, кодирующей сконструированный белок пертактин (Prn), вектора, включающего такую последовательность, и композиций, содержащих белок или вектор.
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к птицеводству. Перорально вводят вакцинный препарат с содержанием 1,0×105-3×105 микробных клеток штамма Е.
Изобретение относится к области биотехнологии. Описано применение бактерий Haemophilus parasuis серотипа 5 для получения вакцины для введения беременной свиноматке или молодой свинье, для защиты поросят от нарушения вследствие бактерий Haemophilus parasuis серотипа 4 путем употребления ими молозива указанной свиноматки или молодой свиньи после опороса.
Изобретение относится к вакцине, включающей в комбинации неживые антигены Lawsonia intracellularis, Mycoplasma hyopneumoniae и цирковируса свиней и фармацевтически приемлемый носитель.
Изобретение относится к области ветеринарной медицины и касается способа изготовления вакцины ассоциированной против сальмонеллеза, эшерихиоза и вирусной геморрагической болезни кроликов.
Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к получению эритроцитарного антительного диагностикума для индикации бруцелл в патматериале. Сущность изобретения включает способ получения эритроцитарного антительного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с целью индикации бруцелл в патматериале, посредством изготовления формалинизированных эритроцитов, с последующей сенсибилизацией позитивной бруцеллезной сывороткой, при этом для изготовления эритроцитарного антительного диагностикума позитивную бруцеллезную сыворотку для сенсибилизации формалинизированных эритроцитов разводят 1:50-1:100, инактивируют при 60°C в течение 30 минут, сенсибилизируют формалинизированные эритроциты, из расчета: осадок от 2 объемов 40%-ной взвеси эритроцитов барана, 1 объем 0,43-0,44% раствора свежеприготовленного амидола, 1,0-1,5 объем позитивной сыворотки, разведенной 1:50-1:100, и выдерживают в течение 28-32 минут при 55-56°C.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для получения гипериммунной сыворотки против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиозной диареи телят. Способ включает гипериммунизацию быков-продуцентов инактивированными антигенами C1. perfringens, содержащими анатоксины и соматические антигены бактерий серотипов А, С и Д в культуральной среде при следующем соотношении компонентов на 1 л антигена: анатоксин и соматический антиген штамма №28 (тип А) в культуральной среде с концентрацией 1012·(9-10) м.к. в 1 см3, см3 - 300,0-350,0; анатоксин и соматический антиген штамма №392 (тип С) в культуральной среде с концентрацией 1012·(9-10) м.к. в 1 см3, см3 - 300,0-350,0; анатоксин и соматический антиген штамма №213 (тип Д) в культуральной среде с концентрацией 1012·(9-10) м.к. в 1 см3, см3 - 300,0-350,0; формалин, см3 - 4,0-5,0. Проводят дополнительную гипериммунизацию быков-продуцентов инактивированными антигенами E.coli, содержащими соматические и адгезивные антигены K99, A20 в физиологическом растворе, ТЛ-, ТС-анатоксины E.coli в среде культивирования при следующем соотношении компонентов на 1 л антигена: соматический и адгезивный антиген штамма КВ-1 (К99) в физиологическом растворе с концентрацией 1012·(14-15) млрд.м.к. в 1 см3, см3 - 300,0-350,0; соматический и адгезивный антиген штамма ПЗ-3 (A20) в физиологическом растворе с концентрацией 1012·(14-15) м.к. в 1 см3, см3 - 300,0-350,0; формалин, см3 - 4,0-5,0; термостабильные и термолабильные анатоксины штаммов Е.coli KB-1 и ПЗ-3 в культуральной среде с титрами в РДП 1:8-1:16, л - до 1. Гипериммунизацию быков-продуцентов проводят четырехкратно путем подкожного введения в область шеи с одной стороны дозы антигена C1. perfringens и в область шеи с другой стороны - дозы антигена E.coli по следующей схеме: в первый день - по 8 см3, через 14 дней - по 10 см3, через 28 дней - по 15 см3 и через 42 дня - по 20 см3 с крови, затем отделяют сыворотку и консервируют. Заявленное изобретение последующим взятием позволяет получить гипериммунную сыворотку, обеспечивающую лечение и профилактику смешанной инфекции - анаэробной энтеротоксемии и эшерихиозной диареи телят. 5 табл., 7 пр.
Изобретение относится к ветеринарии и медицине, а именно к профилактике и лечению бруцеллезной инфекции. Способ экстренной профилактики и лечения бруцеллеза, включающий одновременное внутримышечное введение антибиотикорезистентного варианта вакцинного штамма бруцелл и противобруцеллезного препарата, отличающийся тем, что в качестве специфического препарата используют ципролетрезистентный вариант штамма бруцелл В.abortus 82 CR в дозе 1.109 м.к., а в качестве антибактериального препарата используют ципрофлоксацин (ципролет), который вводят в дозе 1 и 3 мл/кг 2 раза в день в течение 5-7 дней. Ципролетрезистентный вариант бруцелл В.abortus 82 CR получают путем выращивания исходной культуры бруцелл В.abortus 82 на МПГГА с содержанием 5, 10, 20 мг на 1 мл среды. Профилактику и лечение бруцеллеза проводят за 1-10 дней до начала периода наибольшего риска заражения и в период наибольшего риска заражения. Способ повышает эффективность лечения и профилактики бруцеллеза за счет интерференции (конкуренции) авирулентного штамма бруцелл по отношению к возбудителю бруцеллеза, индукции ципролетрезистентностным вариантом вакцинного штамма медиаторов иммуногенеза - активаторов фагоцитоза-цитокинов, а также мощного антибактериального агента-ципролета, которые в совокупности обеспечивают подавление репродукции микробной ДНК и гибель паразита. 2 з.п. ф-лы, 8 пр.
Группа изобретений относится к ветеринарии и медицине, в частности к получению и использованию биопрепаратов для иммунотерапии экопатологий. Группа изобретений включает получение белкового антигена из смеси анатоксинов из трех энтеропатогенных вирулентных штаммов возбудителя эшерихиоза телят E. coli №378, 379, 380 путем выращивания их на среде Хоттингера с последующим добавлением 0,4-0,5%-ного формалина, дальнейшим термостатированием в течение 10-12 дней и охлаждением смеси анатоксинов стерильным раствором гидроокиси алюминия, затем получения радиоантигена из E. coli «ПЛ-6» путем выращивания культур на мясопептонном агаре с последующим смывом биомассы физиологическим раствором и облучением полученной суспензии с концентрацией 1,2·1010 м.к./см3 на гамма-установке в дозе 140-150 Гр с дальнейшим термостатированием и экстрагированием радиотоксина 70%-ным подкисленным 0,05%-ной соляной кислотой до pH 5,5 этанолом, последующим упариванием экстрагента до исходного объема, далее получение белково-кадмиевого радиоантигена сначала путем предварительного дехлорирования кадмия хлорида, получения гидроокиси кадмия, добавления в полученный 2,7%-ный раствор радиоантигена 0,77%-ного раствора гидроокиси кадмия в соотношении 1:1 с последующим термостатированием при температуре 37°C в течение 30 мин, упариванием и растворением осадка до 12,8%-ной концентрации, дальнейшим получением белково-кадмиевого радиоантигена путем добавления 1,2%-ного раствора смеси трех анатоксинов E. coli и 12,8%-ного раствора кадмиевого радиоантигена в соотношении 1:9, конъюгирования компонентов при комнатной температуре в течение 8-10 часов, стандартизацию по сухому веществу до 10%-ной концентрации и розлив во флаконы, хранение при температуре 4-6°C. Группа изобретений также относится способу лечения радиационного, химического и/или биологического поражения организма введением 10%-ного раствора комплексного белково-кадмиевого радиоантигена. Применение группы изобретений эффективно в лечении радиационного, химического и/или биологического поражения. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 пр.
Представленная группа изобретений касается комбинированной вакцины, ее применения и способа получения. Охарактеризованная вакцина включает смесь антигенов для защиты от таких заболеваний, как дифтерия (D), столбняк (Т), ацеллюлярный коклюш (аР) и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae (Hib b) и полиовирусами (IPV). Ангитен Hib b в охарактеризованной вакцине конъюгирован с белком-носителем, выбранным из группы, включающей анатоксин столбняка, анатоксин дифтерии, CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides, или любым их эквивалентом, где IPV антигены представляют собой Salk штаммы, выбранные из группы, включающей Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3, или Sabin штаммы, выбранные из группы Sabin 1 или 2, и где аР включает, по меньшей мере, один или более антигенов из группы, включающей анатоксин коклюша (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (Р69 или PRN) и фимбриальные белки (FIM 1, 2 и 3). Все компоненты вакцины находятся в жидком состоянии и являются стабильными, а Hib b присутствует в количестве 10 мкг на 0,5 мл вакцины. Представленные изобретения обеспечивают защиту от различных инфекций. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 3 табл., 3 пр.
Представленная группа изобретений касается комбинированной вакцины, ее применения и способа получения. Охарактеризованная вакцина включает смесь антигенов для защиты от таких заболеваний, как дифтерия (D), столбняк (Т), ацеллюлярный коклюш (аР) и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae (Hib b) и полиовирусами (IPV). Ангитен Hib b в охарактеризованной вакцине конъюгирован с белком-носителем, выбранным из группы, включающей анатоксин столбняка, анатоксин дифтерии, CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides, или любым их эквивалентом, где IPV антигены представляют собой Salk штаммы, выбранные из группы, включающей Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3, или Sabin штаммы, выбранные из группы Sabin 1 или 2, и где аР включает, по меньшей мере, один или более антигенов из группы, включающей анатоксин коклюша (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (Р69 или PRN) и фимбриальные белки (FIM 1, 2 и 3). Все компоненты вакцины находятся в жидком состоянии и являются стабильными, а Hib b присутствует в количестве 10 мкг на 0,5 мл вакцины. Представленные изобретения обеспечивают защиту от различных инфекций. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 3 табл., 3 пр.
Изобретение касается способа получения бруцеллезного L-антигена. Представленный способ включает стадии. Культивируют штамм Brucella abortus 19 в L-форме на питательной среде, приготовленной на основе мясо-пептонного печеночного глюкозо-глицеринового агара (1,3-1,5% агара) с добавлением 10-15% нормальной лошадиной сыворотки и стрептомицина в дозе 2,5-5,0 ЕД/мл при 37-38°C в течение 4-5 суток. Полученную культуру смывают физиологическим раствором, инактивируют при 85-90°C в течение 60 минут. Взвесь центрифугируют при 3000-5000 об/мин в течение 15-20 минут, надосадочную жидкость убирают, а осадок дважды промывают физиологическим раствором и центрифугируют при 3000-5000 об/мин в течение 15-20 минут. К бактериальной массе добавляют расплавленный фенол в соотношении 1:1. Физиологическим раствором доводят раствор фенола до 5%. Фенольную суспензию центрифугирую при 5000-10000 об/мин 30-40 минут. Надосадочную жидкость отстаивают и используют в качестве антигена. Предложенный способ может быть использован в комплексе серологических исследований на бруцеллез для выявления дополнительных хронически больных животных. 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к технологии производства медицинских иммунобиологических препаратов и касается способа получения холерогена-анатоксина. Способ включает выделение холерогена-анатоксина методом тангенциальной ультрафильтрации с использованием мембран с номинальной отсечкой по мол. массе 300 кДа, концентрирование методом тангенциальной ультрафильтрации с использованием мембран с номинальной отсечкой по мол. массе 30 кДа с последующей очисткой диафильтрацией трехкратным объемом стерильной очищенной водой методом тангенциальной ультрафильтрации с использованием мембран с номинальной отсечкой по мол. массе 30 кДа. Изобретение обеспечивает увеличение выхода холерогена-анатоксина, сокращение времени и количества технологических стадий его получения. 1 ил., 2 табл., 1 пр.
Изобретение относится к ветеринарной медицине и касается способа изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота. Представленный способ включает: отбор патологического материала от больного и павшего крупного рогатого скота из местного эпизоотического очага, приготовление суспензии, проведение посева на дифференциально-диагностические среды, выделение клеток чистых культур возбудителей эшерихиоза Escherichia coli, стрептококкоза Streptococcus pneumoniae и стафилококкоза Staphylococcus aureus, раздельное их выращивание, инактивирование клеток формалином, смешивание в равных соотношениях и внесение в смесь адъюванта - гидроокись алюминия. Представленное изобретение может быть использовано в научно-исследовательских и производственных учреждениях, занимающихся конструированием биопрепаратов, и позволяет получать специфическую, безвредную, высокоиммуногенную ассоциированную вакцину для защиты от трех опасных инфекций болезней крупного рогатого скота. 1 табл.
Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии. Препарат для лечения некробактериоза крупного рогатого скота содержит поливалентный анатоксин против клостридиозов овец, культуральную жидкость штамма Escherichia coli А-5 с содержанием микробных клеток 7,0·108-1·109 КОЕ/мл и культуральную жидкость штамма Escherichia coli Б-5 с содержанием микробных клеток 7,0·108-1·109 КОЕ/мл в соотношении 1:1:1. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения и сократить сроки лечения. 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа получения коклюшного компонента комплексных вакцин. Представленный способ включает выращивание культуры B. pertussis на плотных питательных средах Борде-Жангу и/или КУА, селекцию выросших колоний по морфологическим признакам, пересев отобранных колоний, наращивание их бактериальной массы, смыв культуры, доведение мутности полученных коклюшных суспензий до 10 международных оптических единиц, определение в них с помощью реакции агглютинации количественного содержания агглютиногенов 1, 2, 3 и отбор коклюшных суспензий, в которых содержание агглютиногенов выявляется при разведении типоспецифической сыворотки 1:3200 и выше. Выявленная культура B. pertussis, активно экспрессирующая агглютиногены 1, 2, 3, после лиофильного высушивания используется для производства коклюшного компонента комплексных вакцин. Охарактеризованное изобретение позволяет получить высокоиммуногенный коклюшный компонент комплексных вакцин. 1 ил., 5 табл., 1 пр.
Наверх