Способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных



Способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных
Способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных
Способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных
Способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных

 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2522877:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского" Российской академии медицинских наук (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу лабораторной оценки эффективности лечения эндогенной интоксикации у реаниматологических больных, заключающийся в том, что в венозной крови или сыворотке венозной крови пациентов одновременно определяют концентрации фенилуксусной, парагидроксифенилуксусной, фенилмолочной и парагидроксифенилмолочной кислот и при увеличении или сохранении исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот по сравнению с их уровнем до проведенного лечения делают вывод о неэффективности лечения. Использование заявленного способа позволяет своевременно и объективно оценить эффективность лечения эндогенной интоксикации у различных групп реаниматологических больных. 4 ил., 9 табл., 5 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к реаниматологии и лабораторной диагностике. Способ может быть использован в медицинской практике для оценки эффективности лечения синдрома интоксикации у реаниматологических больных. Способ также может быть полезен в детской реаниматологии, включая период новорожденности, для оценки эффективности лечения синдрома интоксикации у детей. Также способ может быть полезен для оценки эффективности проведения экстракорпоральных методов очистки крови у детей и взрослых, находящихся в критическом состоянии.

Синдром эндогенной интоксикации - это совокупность симптомов, характеризующихся повреждением клеток и клеточных структур организма, вызванных избыточным содержанием в крови токсических продуктов и биологически активных веществ [Афанасьев А.Н., Одинцова И.Н., Удут В.В. Синдром эндогенной интоксикации и системного воспалительного ответа: общность и различия. Анестезиология и реаниматология. 2007; 4:67-71]. Синдром эндогенной интоксикации - это полиэтиологический и полипатогенетический синдром. В развитии эндотоксикоза одновременно или последовательно могут участвовать несколько механизмов образования эндогенных токсических субстанций. Наиболее тяжелые формы синдром эндогенной интоксикации приобретает у реаниматологических больных, особенно при таких критических состояниях как сепсис, деструктивный панкреатит, политравма, постреанимационная болезнь, ожоговая болезнь, тяжелая кровопотеря и др.

Полиэтиологичность и сложный механизм развития эндогенной интоксикации затрудняют разработку универсальных критериев, позволяющих оценить эффективность проводимого лечения. В целом маркерами эндогенной интоксикации считаются множество показателей и интегральных показателей гомеостаза: билирубин, трансаминазы, протеазы и их ингибиторы, фибриноген, гаптоглобин, церулоплазмин, С-реактивный белок, прокальцитонин, креатинин, мочевина, уровень общего белка и показатели протеинограммы, скорость оседания эритроцитов, характеристики клеточного, гуморального и неспецифического иммунитета. Каждый из этих показателей изменяется в зависимости от причины интоксикации, а изменение некоторых из них, может не быть связано с интоксикацией.

В результате перекисного окисления липидов в эритроцитах формируется малоновый диальдегид. Повышение концентрации малонового отмечено при различных заболеваниях, в том числе и при заболеваниях, сопровождающихся тяжелой эндогенной интоксикацией (Иванова 3.О. Изменение показателей малонового диальдегида при пневмонии бактериальной этиологии. Успехи современного естествознания. 2008; 1:105-105). Однако данный маркер не является специфичным маркером интоксикации и в большей степени характеризует общую тяжесть состояния, а не тяжесть интоксикации в данный момент времени, о чем свидетельствует медленная динамика его концентрации. Поэтому для быстрой оценки эффективности проводимого лечения у реаниматологических больных этот маркер не пригоден.

Одним из способов оценки эффективности лечения эндогенной интоксикации возможно использование расчетных индексов интоксикации, вычисляемых по формулам (лейкоцитарный индекс интоксикации по формуле Кальф-Калифа и его аналоги, ядерный индекс Г.Д.Даштаянца). Однако использование подобных индексов не дает полной оценки степени эндогенной интоксикации, а отражает, в основном, степень воспалительного ответа организма, что затрудняет их использование именно для оценки эффективности лечения при интоксикации. Существенными недостатками способов, основанных на оценке клеточного состава крови, является их непригодность при заболеваниях крови и кроветворных органов, в период новорожденности, у больных с нарушенной реактивностью иммунной системы, а также трудоемкость и субъективность результатов, так как предварительно требуется провести визуальный подсчет и анализ клеток в образце крови.

В качестве прототипа изобретения может выступать способ, предлагающий в качестве универсального биохимического маркера эндогенной интоксикации, на основе которого возможно и оценивать эффективность лечения интоксикации, использовать такой показатель, как содержание в крови и других биологических жидкостях молекул средней и низкой молекулярной массы [RU 2324943 С2; Карякина Е.В., Белова С.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2004; 3:3-8]. Вещества низкой и средней молекулярной массы состоят из олигопептидов с молекулярной массой 500-6000 дальтон и малых молекул с массой 150-300 дальтон. Существенным недостатком прототипа и его аналогов является то, что в качестве оценочного показателя содержания веществ низкой и средней молекулярной массы используют величину оптической плотности. Величина оптической плотности зависит не только от концентрации веществ низкой и средней молекулярной массы, но и условий проведения измерений (толщина и качество применяемых кювет, спектральное разрешение, погрешность и динамический диапазон используемого спектрофотометра, способ пробоподготовки), что сказывается на результатах определения эндогенной интоксикации. Существуют другие методики определения веществ низкой и средней молекулярной массы (методы ультрафильтрации, методы гельфильтрации на различных носителях, метод жидкостной хроматографии под высоким давлением), но все они являются более сложными и менее изученными. Недостатком прототипа является то, что в состав молекул средней и низкой молекулярной массы входит неопределенно большое количество химических веществ, обладающих разной специфичностью для оценки интоксикации, что затрудняет оценку эффективности лечения интоксикационного синдрома.

В целом в литературе нет рекомендаций, позволяющих оценить эффективность лечения интоксикации в диагностическом временном интервале, удовлетворяющем для принятия решения о правильности проводимого лечения у реаниматологических (тяжелых и крайне тяжелых) больных различных групп. Таким образом, перед исследователями стоит задача по разработке универсального способа, позволяющего своевременно и объективно оценить эффективность лечения интоксикации у реаниматологических больных различных групп. Поставленная задача решается способом лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных, заключающийся в том, что в крови пациентов определяют концентрации парагидроксифенилмолочной кислоты (п-ГФМК), фенилмолочной кислоты (ФМК), парагидроксифенилуксусной кислоты (п-ГФУК), фенилуксусной кислоты (ФУК) и при увеличении или сохранении исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот делают вывод о неэффективности лечения.

Отбор выбранных маркеров производился на основе результатов многолетнего анализа содержания различных веществ в крови у реаниматологических больных в динамике с помощью газовой хромато-масс-спектрометрии. Выявленная динамика концентраций определяемых химических веществ удовлетворяет потребности врача-реаниматолога для быстрой, динамичной оценки эффективности лечения интоксикационного синдрома у тяжелых и крайне тяжелых пациентов.

Способ может быть реализован с использованием стандартного лабораторного оборудования с привлечением персонала, квалификация которого не превосходит уровень специалиста в области химического, биохимического, иммуноферментного анализа. Хотя в исследовании выполнялось хромато-масс-спектральное определение указанных кислот, способ по изобретению в принципе заключает в себя также определение указанных кислот любым другим методом.

Сущность изобретения

Для лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации производится одновременное количественное определение концентрации пара-гидроксифенилмолочной кислоты (п-ГФМК), фенилмолочной кислоты (ФМК), парагидроксифенилуксусной кислоты (п-ГФУК), фенилуксусной кислоты (ФУК) в образце сыворотки крови до и после назначенного лечения. При интоксикационном синдроме уровни концентраций указанных соединений существенно превышают фоновые концентрации (у здоровых людей). При неэффективном лечении в динамике происходит увеличение или сохранение исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот.

Исходным материалом анализа является сыворотка венозной крови, которая подвергается процессу пробоподготовки (разбавлению, подкислению, введению внутреннего стандарта, экстракции в диэтиловый эфир, упариванию, силилированию) с последующим хромато-масс-спектральным анализом триметилсилильных производных определяемых кислот.

Методика количественного определения содержания определяемых кислот в сыворотке крови:

а) приготовление раствора внутреннего стандарта - 16 мг безводной D5-бензойной кислоты растворяют в 1 мл 96% этилового спирта. 10 мкл полученного раствора разбавляют 96% этиловым спиртом до объема 4 мл. Содержание D5-бензойной кислоты в конечном растворе составляет 40 нг/мкл или 40 мкг/мл. В процессе пробоподготовки в образец вводят 10 мкл конечного раствора (абсолютное содержание стандарта 400 нг);

б) пробоподготовка - 2 мл цельной венозной крови центрифугируют в течение 15 мин при скорости вращения ротора центрифуги 3000 об/мин.

Отбирают два параллельных образца по 0,2 мл полученной таким образом сыворотки, которые затем обрабатывают одновременно и независимо. Сыворотку помещают в пробирку вместимостью 10 мл, разбавляют 0,8 мл воды для инъекций, добавляют 20 мкл 50% серной кислоты (до рН=2,0) и 10 мкл спиртового раствора, содержащего 400 нг D5-бензойной кислоты (внутреннего стандарта). Затем полученную смесь дважды экстрагируют порциями по 1 мл диэтилового эфира. Полученные эфирные вытяжки объединяют и упаривают при температуре 40°С досуха. Сухой остаток обрабатывают 20 мкл N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида (BSTFA) в течение 15 минут при 80°С в замкнутом объеме (в герметично закрытом сосуде). Полученный силилированный продукт (ТМС-производное) разбавляют 80 мкл н-гексана (квалификации «о.с.ч.»), переносят во вставку виал для проведения хромато-масс-спектральномого анализа (ГХ-МС);

в) ГХ-МС анализ - хромато-масс-спектральное определение фенилсодержащих кислот проводят с использованием газового хроматографа Agilent Technologies 6890, оснащенного масс-спектральным детектором Agilent Technologies 5973. Хроматорафическое разделение компонентов прводят на кварцевой капиллярной колонке HP5MS диаметром 0,2 мм, длиной 25 м, с толщиной слоя 0,33 мкмоль/л.

Условия хроматографирования: газ-носитель - гелий, скорость потока - 24 мл/мин, скорость потока через колонку - 1,2 мл/мин; температура испарителя 280°С; режим работы термостата - программируемый: начальная температура термостата колонки 80°С, время выдержки 4 мин, далее нагрев до 240°С со скоростью 7°С/мин, до 320°С со скоростью 15°С /мин, затем термостатирование при 320°С до конца анализа; объем анализируемой пробы - 2 мкл, время анализа - 35 мин, время задержки работы детектора - 4 мин, режим работы детектора - режим полного сканирования.

Идентификация определяемых кислот производится в соответствии с временами удерживания основного и подтверждающего ионов (m/z), приведенных в табл.1;

Таблица 1. Времена удерживания, интенсивности основного и подтверждающего ионов (m/z) в хроматограммах и масс-спектрах определяемых карбоновых кислот.

Таблица 1

Вещество Время удерживания ТМС-производного, мин Основной ион, m/z Подтв. ион, m/z
1 D5-Бензойная кислота (стандарт) 10,45 184 110
2 n-Гидроксифенилмолочная кислота 22,02 179 147
3 Фенилмолочная кислота 17,12 193 147
4 n-Гидроксифенилуксусная кислота 18,04 179 296
5 Фенилуксусная кислота 11,71 164 91

г) обработка результатов - для расчетов используют хроматограммы, полученные в режиме тока селективных ионов (SIM). Проводят идентификацию пиков, соответствующих определяемым веществам по временам удерживания (табл.1).

Наличие вещества считается доказанным в случае присутствия в хроматограмме пиков для основного и подтверждающего ионов (m/z) с относительными интенсивностями, близкими к ним в масс-спектре из базы данных NIST-02.

Интегрирование (определение площади) пиков проводят по сигналу основного иона (m/z).

Массовую концентрацию (в нг/мл) определяемых кислот вычисляют методом внутреннего стандарта по формуле

c i = S i M r i m s t I max S s t M r s t V s I i ,

где сi - концентрация i-го компонента (нг/мл), Si - площадь пика i-го компонента, определенная по основному иону (m/z), Мri - молекулярная масса i-го компонента, mst - масса вводимого стандарта (400 нг), Imax - высота пика самого интенсивного иона (m/z) в масс-спектре ТМС-производного i-го компонента (999), Sst - площадь пика стандарта, Mrst - молекулярная масса стандарта (127), Vs - объем образца (0,2 мл), Ii - относительная интенсивность (высота) пика основного иона (m/z) в масс-спектре ТМС-производного i-го компонента. Масс-спектральные данные (m/z и относительные интенсивности пиков) взяты из международной базы данных масс спектров NIST-02.

На первом этапе исследования было установлено, что выбранные маркеры объективно отражают тяжесть интоксикационного синдрома (Табл. 2, 3, 4). На втором этапе проведено изучение содержания в сыворотке крови п-ГМФК, ФМК, п-ГФУК, ГФУ у реаниматологических больных разных групп с целью динамической оценки эффективности лечения интоксикационного синдрома до и после назначенного лечения. Было установлено, что уровень определяемых кислот в крови у больных при неэффективном лечении эндогенной интоксикации не снижался или возрастал.

Пример 1. Исследовано содержание определяемых кислот в сыворотке крови 52 пациентов, принадлежащих к 6 клиническим группам: №1 - здоровые добровольцы (16 человек), №2 - кардиохирургические больные с сердечно-сосудистыми заболеваниями до операции (36 человек), №3 - больные с неосложненным течением послеоперационного периода (11 человек), №4 - больные с неэффективным лечением интоксикационного синдрома на фоне неинфекционных осложнений (8 человек), №5 - пациенты с неэффективным лечением интоксикационным синдрома на фоне пневмонии (20 человек) и №6 - больные с неэффективным лечением интоксикационного синдрома на фоне генерализованного инфекционного процесса (22 человека). Проведен полный цикл пробоподготовки и количественного определения определяемых кислот. Полученные данные статистически обработаны и приведены в табл.2, 3, 4.

Таблица 2. Содержание определяемых кислот в сыворотке крови у кардиохирургических больных, разделенных на группы, оперированных в плановом порядке с применением искусственного кровообращения (медиана, М и интерквартильные размахи 25% и 75%), мкмоль/л.
ГРУППЫ №2 Исходные данные (до операции) (n=36) №3 Неосложненное течение послеоперационного периода/есть признаки эндогенной интоксика-ции как результат перенесенного искусственного кровообращения (на 3 сутки) (n=11) №4
Неэффективное лечение/прогрессирует эндогенная интоксика-ция на фоне неинфекционных
Осложнений (n=8)
№5
Неэффективное лечение/прогрессирует эндогенная интоксика-ция на фоне пневмонии (n=20)
№6
Неэффектиное лечение/прогрессирует эндогенная интоксикация на фоне генерализованного инфекционного процесса (n=22)
Концентрация ФМ, мкмоль/л М 25% 75% М 25% 75% М 25% 75% М 25% 75% М 25% 75%
Фенилуксус-ная кислота 0,4 0,2 0,7 0,3 0,1 0,4 0,0 0,0 0,3 0,1 0,0 0,3 0,4 0,1 0,7
п-Гидроксифенил-уксусная кислота 0,7 0,3 1,4 1,0 0,6 1,8 1,8 0,9 2,6 2,8 1,8 6,5 14,1 7,8 35,9
Фенилмолоч-ная кислота 0,4 0,2 0,6 0,3 0,2 0,5 1,0 0,6 1,2 0,7 0,6 1,3 2,7 1,4 5,1
п-Гидроксифе-нил-молочная кислота 1,4 0,7 2,1 1,4 1,1 1,6 2,9 1,3 4 1.9 1,3 3,4 7,6 2,9 15,5
Таблица 3. Содержание определяемых кислот в сыворотке крови у здоровых добровольцев и у кардиохирургических больных до операции (медиана, М и интерквартильные размахи 25% и 75%), мкмоль/л.
ГРУППЫ №1
Здоровые добровольцы
(п=16)
№2
Больные - исходные данные
(до операции)
(п=36)
Концентрация ФМ, мкмоль/л М 25% 75% М 25% 75%
Фенилуксусная кислота 0,4 0,3 0,6 0,4 0,2 0,7
п-Гидроксифенилуксусная кислота 0,5 0,4 0,6 0,7 0,3 1,4
Фенилмолочная кислота 0,3 0,2 0,4 0,4 0,2 0,6
п-Гидроксифенилмолочная кислота 1,1 0,9 2,0 1,4 0,7 2,1
Таблица 4. Достоверность различий по Mann-Whitney U Test (Spreadsheet2) при сравнении групп
Группы №1 vs №2 №2 vs №3 №2 vs №5 №2 vs №4 №2 vs №6 №4 vs №5 №4 vs №6 №5 vs №6
Фенил-уксусная кислота 0,87 0,01 0,002768 0,006 0,923401 0,575888 0,02438 0,017317
п-Гидрокс ифенил-уксусная кислота 0,04 0,002 0,000253 0,17 0 0,177772 0,000869 0,000077
Фенил-молочная кислота 0,37 0,008 0,000352 0,019 0 0,918987 0,007514 0,000261
п-Гидрокс ифенил-молочная кислота 0,66 0,022 0,020975 0,056 0 0,647173 0,012934 0,00056

Пример 2. Больная К-н, 52 лет (№ и/б 64730) поступила в стационар 22 ноября 2011 г.

Основной диагноз: Обширная флегмона левой нижней конечности. Целлюлит, некротический фасциит. На момент поступления у больной был тяжелый интоксикационный синдром с признаками органных нарушений на фоне генерализованной инфекции (гипертермия 38.5°С, лейкоцитов в крови 12,2*109 кл/л, в лейкоцитарной формуле - палочкоядерных нейтрофилов 28%, СОЭ 44 мм/ч, сывороточный креатинин 149.9 мкмоль/л, общий билирубин 39.4 ммоль/л, гипотензия 96/64 мм рт.ст, тахикардия 104 в мин).

Выполненное лечение: 22 ноября 2011 г. - вскрытие флегмоны мягких тканей левой голени + назначение антибиотикотерапии; 30 ноября 2011 г. - расширенная хирургическая санация гнойного очага.

На фоне проведенного комплексного лечения у больной положительная динамика в виде регрессии признаков органной недостаточности, снижение температуры до субфебрильных значений, снижение количества лейкоцитов в крови до нормальных значений. По данным ГХ-МС анализа в период благополучия после первой операции - отмечается прогрессивное снижение концентрации п-ГФМК, п-ГФУК практически до нормальных значений, а ФМК - до нормальных. Замедленное снижение концентрации ФУК между первой и третьей пробой говорит о нестойкости полученного положительного эффекта от лечения. Однако в целом оценка эффективности лечения интоксикационного синдрома за временной промежуток до 2 декабря 2011 г. - положительная (Таблица 5, Фиг.1).

Таблица 5. Динамика определяемых кислот в крови больной К-н, 52 лет (№ и/б 64730) по данным ГХ-МС, мкмоль/л
ФУК п-ГФУК ФМК п-ГФМК
23.ноя 1,067 3,655 1,173 2,781
29.ноя 0,934 1,647 0,2 0,541
02.дек 0,835 0,709 0,223 0,493
06.дек 0,946 0,755 0,273 0,604

Итог лечения: больная выписана из стационара.

Пример 3.

Больная К-ва, 70 лет (№ и/б 66300) поступила в стационар 28 ноября 2011 г.

Основной диагноз: Обширная межмышечная флегмона правой голени с переходом на нижнюю треть бедра. Давность заболевания 7 суток. На момент поступления у больной был тяжелый интоксикационный синдром (гипертермия 38.2°С, тахикардия 95 в мин, лейкоцитов в крови 18.2*109 кл/л, прокальцитонин 2,95 нг/мл).

Выполненное лечение: 28 ноября 2011 г. - вскрытие флегмоны мягких тканей правой ноги + назначение антибиотикотерапии.

На следующие сутки после операции клинически и по рутинным лабораторным данным отмечалась положительная динамика: температура тела не повышалась выше 37°С, лейкоцитов в крови определялось 12,0*109 кл/л, исчезла тахикардия. Однако на следующие сутки, 30 ноября 2011 отмечен рост содержания лейкоцитов в крови до 20,0*109 кл/л, рост температуры с повышением до 37,6°С, нарастание дыхательной недостаточности со снижением индекса оксигенации ниже 300 мм рт.ст. на фоне учащения дыхания до 23 в мин (Таблица 6, Фиг.2).

Таблица 6. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной К-ва, 70 лет (№ и/б 66300) по данным ГХ-МС, мкмоль/л.
ФУК п-ГФУК ФМК п-ГФМК
29.ноя 0 2,103 2,659 5,243
30.ноя 0 2,709 3,715 0,496
02.дек 0,152 4,259 1,087 0,947
06.дек 0,049 2,387 0,401 0,701
08.дек 0 0,608 0,21 0,572
09.дек 0,042 1,736 0,271 0,753
12.дек 0,057 1,086 0,251 0,146

На основе табличных данных видно, что определяемые кислоты, кроме ФУК, после первичной хирургической санации очага инфекции остались на высоком уровне и на момент развития ухудшения 30 ноября 2011 г. концентрации ФУК, п-ГФУК, п-ГФМК начали резко возрастать, что свидетельствует о неэффективности проводимого лечения и прогрессировании синдрома эндогенной интоксикации. Была проведена смена антибиотикотерапии, что сопровождалось снижением всех определяемых кислот. 6 декабря 2011 г. выполнена повторная операция с иссечением некротизированных тканей. На фоне проведенного лечения отмечалась положительная динамика в общем состоянии больной, по данным ГХ-МС продолжалось снижение концентрации всех определяемых кислот. Клинически в этот период также определялось улучшение состояния больной, по данным рутинных лабораторных показателей к 8 декабря 2011 г. отмечено снижение лейкоцитов до 6,8*109 кл/л, температура тела не повышалась выше 37°С, прокальцитонин 0,092 нг/мл. Однако достигнутый эффект от проведенного лечения оказался нестойким, у больной вновь стал прогрессировать синдром эндогенной интоксикации (временной отрезок от 8 декабря 2011 г. до 9 декабря 2011 г.), что потребовало срочного проведения расширенной хирургической обработки гнойного очага 9 декабря 2011 г. и пересмотра антибиотикотерапии. В результате был достигнут положительный эффект в лечении эндогенной интоксикации и основного заболевания, что отражается в динамике определяемых кислот на временном отрезке от 9 декабря до 12 декабря. Клинически, 12 декабря 2011 г. больная стала более активной, у нее появился хороший аппетит, температура не поднималась выше 37.0°С. Больная была переведена из отделения реаниматологии в профильное хирургическое отделение. С этого момента был достигнут стойкий положительный результат лечения эндогенной интоксикации до момента выписки больной из стационара.

Пример 4.

Больная С-ва, 54 лет (№67585) поступила в стационар с диагнозом: флегмона большого пальца левой стопы с переходом на свод стопы; сахарный диабет 2-го типа, ср. степени тяжести; метаболический синдром. На момент поступления лейкоцитов в крови 16,6*109 кл./л, температура тела 36,8°С, гликемия 20,1 ммоль/л, прокальцитонин 0,211 нг/мл. Больная в первый день отказалась от предложенного оперативного вмешательства, было назначено консервативное лечение. 7 декабря на фоне нарастающей интоксикации больная была прооперирована (лейкоцитов в крови 18,8*109 кл./л, температура тела 38,8°С, гликемия 21,2 ммоль/л, прокальцитонин 0,213 нг/мл).

Выполненное лечение: 07.12.2011 г. - ампутация нижней левой конечности на уровне нижней трети бедра. Вскрытие флегмоны мягких тканей левого бедра + назначение антибиотикотерапии + лечение сахарного диабета (Таблица 7, Фиг.3).

Таблица 7. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной С-ва, 54 лет (№67585) по данным ГХ-МС, мкмоль/л.
ФУК п-ГФУК ФМК п-ГФМК
05.12.2011 0,741 0,458 0,699 1,57
7.12.2011(1) 0,347 0,413 0,603 1,598
7.12.2011(2) 0,315 0,446 0,535 1,407
08.12.2011 0 0,623 0,229 1,048
12.12.2011 0,223 0,757 0,256 0,812

По данным ГХ-МС эффективность лечения интоксикационного синдрома можно оценить как неудовлетворительную, т.к. ни на одном временном промежутке не было достигнуто снижения концентрации всех определяемых кислот, что отразилось на длительности пребывания больной в стационаре. Например, на временном отрезке с 7 декабря 2011 г. по 8 декабря 2011 г. после выполненной операции происходило снижение всех определяемых кислот, кроме п-ГФУК.

Обращает на себя внимание проба 7.12.2011(1), взятая в день операции до начала оперативного вмешательства, и проба 7.12.2012 (2), взятая в операционной сразу после выполненной ампутации. Интервал между забором проб составил 40 минут. Но даже за этот небольшой промежуток времени заметна тенденция динамики определяемых веществ, что подтверждает приемлемость предлагаемого способа для быстрой оценки эффективности лечения интоксикационного синдрома у реаниматологических больных. Итог лечения: больная выписана.

Пример 5. Больной Д-в, 67 лет поступил в стационар с диагнозом: Мочекаменная болезнь. Коралловидный камень левой почки. Пионефроз слева. Осложнения: Гнойный паранефрит слева. Абсцесс забрюшинной клетчатки слева в области удаленной почки с прорывом в свободную брюшную полость, распространенный перитонит (Таблица 8, таблица 9, Фиг.4).

Таблица 8. Клинические и лабораторные данные больного Д-в, 67 за время наблюдения.
11.08 12.08 13.08 14.08 15.08 16.08 17.08 19.08
APACHE II 13 16 16 18
SOFA 2 4 4 8
температура тела,°С 37 38 38 38,2 38,3 39 39,5 39,7
Лейкоцитоз, *109 кл/л 14,7 12,8 12,3 14,5 14,5 13,3 12,9 27,8
Палочкоядерные нейтрофилы, % 10 40 28 23 30 28 19 48
ЧСС, уд./мин 98 100 95 96 95 97 110 125
Таблица 9. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больного Д-в, 67 лет, мкмоль/л.
ФУК п-ГФУК ФМК п-ГФМК
13.08.2011 3 1 1.006 3,828
15.08.2011 1,968 10,338 2,254 8,882
17.08.2011 3,613 30,837 4,399 24,811

За все время лечения у больного клинически и по данным ГХ-МС в соответствии с предложенным способом нарастал синдром интоксикации. Лечение интоксикационного синдрома было крайне неэффективным.

Исход заболевания: смерть больного.

Таким образом, способ по изобретению позволяет своевременно и объективно оценить эффективность лечения интоксикации у различных групп реаниматологических больных.

Краткое описание чертежей

Фиг.1. Динамика определяемых кислот в крови больной К-н, 52 лет (пример 2) по данным ГХ-МС, мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 5.

Фиг.2. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной К-ва, 70 лет (пример 3) по данным ГХ-МС, мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 6.

Фиг.3. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной С-ва, 54 лет (пример 4) по данным ГХ-МС, мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 7.

Фиг.4. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больного Д-в, 67 лет (пример 5), мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 9.

Способ лабораторной оценки эффективности лечения эндогенной интоксикации у реаниматологических больных, заключающийся в том, что в венозной крови или сыворотке венозной крови определяют концентрации фенилуксусной, парагидроксифенилуксусной, фенилмолочной и парагидроксифенилмолочной кислот и при увеличении или сохранении исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот по сравнению с их уровнем до проведенного лечения делают вывод о неэффективности лечения.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования тяжести течения хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ). При учете количества курсов приема антибиотиков по поводу обострения ХОБЛ за предшествующие 12 месяцев, проводят стандартный тест с 6-минутной ходьбой с оценкой расстояния, пройденного пациентом за 6 минут, частоты сердечных сокращений до проведения теста с ходьбой и уровня сатурации кислорода после выполнения теста с ходьбой, осуществляют забор биоматериала с задней стенки глотки методом орофарингеальных мазков с последующим выделением ДНК, проведением секвенирования и, при обнаружении протеобактерий, осуществляют перекодирование полученных данных в качественную переменную, выделяют геномную ДНК из крови пациентов с ХОБЛ с последующим проведением генотипирования по генам CD14 rs2569190 и IL18 rs1946518, предварительно перекодируют данные генотипирования в цифровые значения, рассчитывая дискриминантную функцию, и осуществляют прогноз.

Группа изобретений относится к системе и способу контроля по меньшей мере одного параметра крови конкретного пациента при использовании устройства доступа для создания доступа к крови пациента через кожу, устройства забора для забора крови для получения пробы крови, устройства анализа крови, вычислительного устройства для вычисления медикаментозных параметров лекарственного средства, которое необходимо ввести пациенту, и подающего устройства для подачи лекарственного средства с вычисленными медикаментозными параметрами.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования повышения сердечно-лодыжечно сосудистого индекса жесткости у больных хронической обструктивной болезнью легких в сочетании с ишемической болезнью сердца, при котором исследуют исходные значения биомаркеров системного воспаления C-реактивного белка (СРБ), фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-альфа) и противовоспалительного интерлейкина 4 (ИЛ-4) и решают дискриминантное уравнение Д=1,42*(ФНО-α)+0,78*(СРБ)-0,534*(ИЛ-4), и при величине Д больше 4,82 прогнозируют повышение сердечно-лодыжечно сосудистого индекса жесткости в течение года, а при Д меньше или равной 4,82 прогнозируют отсутствие повышения сердечно-лодыжечно сосудистого индекса жесткости.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ определения у спортсмена состояния утомления и состояния «перетренированности» по повышенной экспрессии гена триптофинил-тРНК-синтетазы (ТРСазы).
Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине. Более подробно изобретение относится к способу диагностики состояний, обуславливающих дорожно-транспортные происшествия.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и касается способа диагностики атопического дерматита у детей. Способ включает определение функционального состояния клеточных мембран, которое оценивают по максимальной скорости Na+-Li+-противотранспорта в мембране эритроцита, заключающийся в измерении обмена внутриклеточного лития в загруженных этим ионом клетках на внеклеточный натрий из среды инкубации.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования развития злокачественных новообразований у лиц, находящихся в условиях хронического радиационного воздействия низкой интенсивности.
Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедии, и может быть использовано для прогнозирования интраоперационной кровопотери при операциях на позвоночнике по поводу хирургической коррекции идиопатического сколиоза.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики инфекции желудка, вызванной Helicobacter pylori. Сущность способа состоит в том, что проводят фиброгастродуоденоскопию, во время которой производят забор пробы воздуха из желудка, анализируют ее состав на наличие аммиака, вводят нагрузочный раствор мочевины путем внутрижелудочного его распыления через катетер, производят повторный забор пробы воздуха из желудка, анализируют ее состав и при повышении концентрации аммиака в повторной пробе диагностируют инфекцию желудка, вызванную Helicobacter pylori.
Изобретение относится к области медицины, в частности к физиологии, неврологии, нейропсихологии, восстановительной медицине, и касается способа выявления групп риска лиц, склонных к агрессивным видам поведения, путем определения уровня элементов в волосах, где определяют содержание Са, Mg, Fe, находят соотношение Ca/Mg, Fe/Ca, Fe/Mg, и при значении Ca/Mg выше 7,5, Fe/Ca выше 0,04, Fe/Mg выше 0,29 у человека диагностируют склонность к агрессии.

Изобретение относится к фармацевтике и представляет собой способ идентификации соединения, пригодного для лечения заболевания пародонта, включающий: получение первого гингивального образца у млекопитающего, страдающего от заболевания или состояния ротовой полости; получение второго гингивального образца из ротовой полости млекопитающего; взаимодействие первого образца с исследуемым соединением; взаимодействие второго образца с положительным контролем - соединением, известным для подавления экспрессии одного или более биомаркеров, выбранных из группы, состоящей из DEFB4, CTSS, BGN, BF и IL-12А (галогенированный дифениловый эфир); измерение степени, с которой экспрессия одного или более биомаркеров подавляется с помощью исследуемого соединения; измерение степени, с которой экспрессия одного или более из биомаркеров подавляется с помощью положительного контроля; и сравнение степени, с которой экспрессия одного или более из биомаркеров подавляется с помощью исследуемого соединения, со степенью, с которой экспрессия одного или более из биомаркеров подавляется с помощью положительного контроля; в котором исследуемое соединение, которое подавляет экспрессию одного или более из биомаркеров в равной или большей степени, чем вышеуказанный положительный контроль, является соединением, пригодным для лечения пародонта. 3 з.п. ф-лы, 4 пр., 2 табл., 1 ил.

Изобретение относится к области медицины, кардиологии и может быть использовано для прогнозирования риска развития рестеноза после коронарного стентирования. Сущность способа: определяют значения дополнительных факторов риска - измерения толщины эпикардиальной жировой ткани, уровней лептина, липопротеина «a» и глюкозы в крови, после чего осуществляют математическую обработку числовых значений факторов риска с получением вероятности возникновения рестеноза по формуле: Р= [ехр(-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·Х5+0,0665·X6)]/ [1+ехр (-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·X5+0,0665·X6)], где P - вероятность возникновения рестеноза в %, X1 - значение лептина пациента в нг/мл; X2 - значение липопротеина «a» в мг/л; X3 - толщина эпикардиальной жировой ткани в миллиметрах; X4 - значение холестерина липопротеидов высокой плотности в ммоль/л; X5 - значение глюкозы крови в ммоль/л; X6 - значение интерлейкина-6 в пкг/мл; -8,0248 - свободный член уравнения. Изобретение дает возможность более точного определения прогнозирования риска развития рестеноза после коронарного стентирования у пациентов с ишемической болезнью сердца. Способ прогнозирования процента верного предсказания развития рестеноза составляет 82,5%, что указывает на эффективность предлагаемого способа и возможность его применения в практическом здравоохранении. 1 табл., 2 пр., 1 ил.
Изобретение относится к медицине. Более подробно изобретение относится к диагностике ревматоидного артрита. Способ диагностики по настоящему изобретению заключается в определении содержания Anti-MCV в ротовой жидкости (в смешанной слюне), использовании для обработки полученных показателей Anti-MCV в ротовой жидкости математического выражения: F=0,17×Anti-MCV-0,2537, диагностировании при положительном значении F наличия ревматоидного артрита, при отрицательном значении функции F ревматоидный артрит сомнителен. Заявленное изобретение предлагает малоинвазивный и достоверный способ диагностики ревматоидного артрита.
Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ диагностики гигиенического состояния полости рта у субъекта, в соответствии с которым у субъекта берут пробу жидкости десневой борозды и определяют в указанной пробе содержание одного или нескольких метаболитов. На основании уровня обнаруженного метаболита у субъекта диагностируют наличие периодонтального заболевания или нормальное состояние полости рта. 6 з.п. ф-лы, 1 пр., 5 табл.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использована в диагностике заболеваний печени при формулировке предварительного диагноза. Заявляемый способ и аппаратно-программный комплекс позволяют на базе использования простых параметров сформулировать один из предполагаемых диагнозов: неалкогольная жировая болезнь печени, алкогольная болезнь печени, гепатит C, гепатит B, холестатическое заболевание печени, аутоиммунное заболевание печени, лекарственное поражение печени, другие заболевания печени; или сделать вывод об отсутствии отклонений, характерных для заболеваний печени в момент обследования пациента путем использования комбинации ряда простых лабораторных тестов (АЛТ, ACT, ЩФ, ГГТП, гамма-глобулины, общий билирубин, антитела к вирусу гепатита C (anti-HCV), поверхностный антиген вируса гепатита B (HBsAg) и непосредственных характеристик пациента (пол и возраст, рост и вес), данных анамнеза о систематическом приеме алкоголя и приеме каких-либо лекарственных препаратов в указанные в изобретении сроки. Для построения предварительного диагноза (один из перечисленных выше) также необходимо рассчитать индекс Де-Ритиса (отношение АСТ/АЛТ) и индекс массы тела (ИМТ=вес/рост, вес изменяется в килограммах, вес - в метрах, возведенных в квадрат). При этом процесс аналитической обработки основан на том, что каждому параметру в алгоритме придается определенный вес (сила значимости). 2 н.п. и 15 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для выявления высокого риска развития нарушения толерантности к глюкозе у больных стабильной стенокардией напряжения на фоне приёма бета-адреноблокаторов (ББ) без дополнительных вазодилатирующих свойств. До начала терапии больному проводят в один и тот же день 2 теста с физической нагрузкой до достижения пороговой мощности нагрузки по одинаковому протоколу, исходно и через 2 часа после введения разовой дозы ББ. В случае выявления увеличения на 120 секунд и более интервала времени от начала нагрузки до появления приступа стенокардии и/или снижения на электрокардиограмме сегмента ST ишемического типа глубиной не менее 1 мм при 2-й нагрузке по сравнению с 1-й нагрузкой риск развития нарушения толерантности к глюкозе считают высоким. В связи с этим таким больным через 4-5 недель регулярного введения ББ проводят тест на толерантность к глюкозе. При этом при выявлении нарушенной толерантности к глюкозе лечение ББ прекращают. В случае, если при 2-й нагрузке по сравнению с 1-й нагрузкой интервал времени до появления приступа стенокардии и/или снижения на электрокардиограмме сегмента ST ишемического типа глубиной не менее 1 мм увеличивается менее чем на 120 секунд, риск развития нарушенной толерантности к глюкозе считают незначительным. Лечение таких больных ББ продолжают проводить без теста на толерантность к глюкозе. Способ обеспечивает профилактику нарушений углеводного обмена за счёт раннего определения высокого риска развития нарушения толерантности к глюкозе у данной группы больных путём выявления компенсаторного увеличения использования глюкозы в условиях инсулинорезистентности и сниженной доступности свободных жирных кислот для обеспечения энергетических потребностей миокарда. 6 пр.

Изобретение относиться к области микробиологии. Сущность способа обнаружения и идентификации микроорганизма на твердой и полутвердой среде состоит в том, что осуществляют a) сканирование твердой или полутвердой ростовой среды, о которой известно, что она содержит или может содержать одну или более чем одну колонию микроорганизма, для локализации любых колоний, присутствующих на среде; b) непосредственное исследование на указанной ростовой среде одной или более чем одной колонии, локализованной на стадии (а) с диаметром возбуждающего пучка менее чем приблизительно 1000 мкм, с получением измерений собственной флуоресценции (СФ), характеристических для микроорганизма в колонии; c) идентификацию микроорганизма в колонии на основании измерений СФ, где микроорганизмы характеризуют на уровне семейства, рода, вида или на уровне штамма. Использование заявленного способа позволяет определять и идентифицировать микроорганизмы непосредственно на флуоресцентных твердых и/или полутвердых ростовых средах, включая высоко флуоресцентные среды. 12 з.п. ф-лы, 5 ил., 6 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ идентификации соединения, пригодного для лечения гингивита, включающий: взаимодействие первого гингивального образца, полученного от млекопитающего, страдающего от гингивита, с исследуемым соединением; взаимодействие второго гингивального образца из ротовой полости млекопитающего с положительным контролем - соединением, подавляющим экспрессию одной или более матриксных металлопротеиназ (галогенированный дифениловый эфир); измерение степени, с которой экспрессия одной или более матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью исследуемого соединения; измерение степени, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью положительного контроля; и сравнение степени, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью исследуемого соединения, со степенью, с которой экспрессия одной или более из матриксных металлопротеиназ подавляется с помощью положительного контроля; в котором исследуемое соединение, которое подавляет экспрессию одной или более из матриксных металлопротеиназ в равной или большей степени, чем положительный контроль, является соединением, пригодным для лечения гингивита; где одна или более матриксных металлопротеиназ, для которых измеряют экспрессию, включают, по меньшей мере, ММР-9 и ММР-13. 6 з.п. ф-лы, 2 пр., 4 табл., 3 ил.

Изобретение относится к способу ранней детекции мышечных дегенеративных заболеваний и к способу прогнозирования и/или определения терапевтической эффективности терапевтического средства и/или способа терапии заболеваний посредством измерения тетранор-PGDM (11,15-диоксо-9α-гидрокси-2,3,4,5-тетранорпростан-1,20-диовой кислоты) в образце мочи субъекта и сравнения его содержания относительно образца, выделенного у здорового индивидуума. Мышечное дегенеративное заболевание у пациента обнаружено, если концентрация или содержание тетранор-PGDM в образце, выделенном у пациента, превышает концентрацию или содержание тетранор-PGDM в образце, выделенном у здорового индивидуума. Определяют эффективность терапевтического средства и/или способа терапии мышечного дегенеративного заболевания путем сравнения содержания тетранор-PGDM в образце, выделенном у пациента с мышечным дегенеративным заболеванием до и после введения терапевтического средства. Если измеренное содержание тетранор-PGDM в образце значительно или незначительно уменьшается после введения терапевтического средства, то способ терапии является эффективным. Изобретение также относится к набору для диагностики мышечных дегенеративных заболеваний, который включает антитело к тетранор-PGDM, меченный тетранор-PGDM и, необязательно, по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из антитела к иммуноглобулину, разбавляющего раствора для образца, разбавляющего раствора для антитела и меченного тетранор-PGDM, стандарта тетранор-PGDM известной концентрации, субстрата для иммуноферментного анализа и останавливающего раствора для иммуноферментного анализа. Изобретение является эффективным и простым в исполнении. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 пр., 2 ил.

Изобретение относится к медицине. Сущность способа оценки детоксикационной функции организма у работающих в условиях химического комплекса включает определение активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы в лизатах эритроцитов, глутатионредуктазы в эритроцитах, рассчитывают показатель детоксикационной функции организма (ПD) по формуле. При значении ПD выше 563 ед/г Hg выявляют компенсированное, требующее медикаментозной коррекции нарушение детоксикационной функции организма работника, при значении ПD ниже 378 ед/г Hg выявляют декомпенсированное нарушение детоксикационной функции организма, требующее углубленное обследование в условиях стационара с целью ранней диагностики патологии. Использование заявленного способа позволяет повысить точность оценки детоксикационной функции организма у работающих в условиях химического комплекса. 3 пр.
Наверх