Способ лечения и профилактики артериальной гипертензии и фармацевтическая композиция для лечения артериальной гипертензии

Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается лечения и профилактики артериальной гипертензии. Для этого вводят фармацевтическую композицию, содержащую активированные потенцированные антитела к рецептору ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе. Это обеспечивает эффективное лечение артериальной гипертензии за счет синергетичского антигипертензивного действия компонентов композиции. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 2 пр., 1 табл.

 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для повышения эффективности лечения артериальной гипертензии I-II степени, а также первичной и вторичной профилактики артериальной гипертензии.

Из уровня техники известен препарат для лечения артериальной гипертензии, на основе активированных потенцированных форм сверхмалых доз антител к рецептору ангиотензина II (Лечение артериальной гипертензии с использованием сверхмалых доз антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II. Петров В.И. и др. Артериальная гипертензия, 2008, с.236-238). Однако данный препарат не во всех случаях обеспечивает достаточную терапевтическую эффективность.

Изобретение направлено на повышение эффективности лечения артериальной гипертензии I-II степени, а также первичной и вторичной профилактики артериальной гипертензии.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе лечения и профилактики артериальной гипертензии путем введения в организм лекарственного средства на основе активированной потенцированной формы сверхмалых доз аффинно очищенных антител к рецептору ангиотензина II, приготовленной путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия согласно изобретению, дополнительно одновременно и сочетано вводят активированную потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе.

При этом используют активированную потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.

Кроме того, активированную потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

При этом используют приготовленные в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы смесь различных гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II в сочетании со смесью различных гомеопатических разведений антител к эндотелиальной NO-синтазе.

Возможно использование фармацевтической композиции на основе активированной потенцированной формы сверхмалых доз аффинно очищенных антител к C-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе в сочетании с известными стандартными лекарственными средствами, применяемыми для лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы следующих групп: β-адреноблокаторы, ингибиторы АПФ, в т.ч. комбинированные, диуретики, нитраты.

Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что лекарственное средство для лечения и профилактики артериальной гипертензии на основе активированной потенцированной формы сверхмалых доз аффинно очищенных антител к рецептору ангиотензина II, согласно изобретению, выполнено в виде фармацевтической композиции и дополнительно содержит в качестве усиливающего компонента активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.

При этом активированную потенцированную форму антител к рецептору ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора соответствующих антител в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

Кроме того, фармацевтическая композиция может быть выполнена в твердой лекарственной форме и содержит эффективное количество нейтрального носителя, насыщенного смесью активированной потенцированной формы антител к рецептору ангиотензина II и активированной потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе, и фармацевтически приемлемые добавки, которые могут включать лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

При этом водные или водно-спиртовые растворы активированных потенцированных форм антител к рецептору ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе получены путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричных растворов аффинно очищенных антител к рецептору ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.

Предпочтительно каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, гомеопатических разведений.

Кроме того, фармацевтическая композиция содержит действующие компоненты: активированную потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе в соотношении 1:1, при этом каждый компонент используют в сверхмалой дозе в виде смеси трех соответствующих матричных растворов, разведенных в 100¹², 100³⁰ и 100²⁰⁰ раз, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям C 12, C 30, C 200.

Возможно заявленную фармацевтическую композицию на основе активированной потенцированной формы сверхмалых доз аффинно очищенных антител к С-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе использовать в сочетании с известными стандартными лекарственными средствами, применяемыми для лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы следующих групп:

- β-адреноблокаторы (эгилок, атенолол, конкор, беталок ЗОК);

- ингибиторы АПФ, в т.ч. комбинированные (энап, эналаприл, капотен, ренитек, престариум (берлиприл, диротон, капотен, квадроприл, моноприл, ренитек, престариум, нолипрел-форте, энап-Н));

- диуретики (фуросемид, верошпирон, гипотиазид, арифон ретард, индапамид, гипотиазид, диувер, индап, индапамид);

- сердечные гликозиды (дигоксин);

- нитраты (диласидом, кардикет, кардикет-реторд, митролинат, МоноМак, моночинкве, нитроглицерин, нитросорбид, оликард, пектрол, сиднофарм).

Заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать, предпочтительно, по 1-2 таблетке 2-4 раза в день.

Предложенное сочетание активированных потенцированных форм антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной синтазе оксида азота (NO-синтазе) в фармацевтической композиции (т.е. формы антител к C-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе, приготовленные по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия - вертикального встряхивания, которые обладают активностью в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения гипертензии) обеспечивает получение неожиданного синергетического терапевтического эффекта, который заключается в более выраженном гипотензивном эффекте по сравнению с действием, оказываемым отдельными компонентами, что подтверждено экспериментально на адекватной модели.

Кроме того, заявленное лекарственное средство расширяет арсенал препаратов центрального действия, предназначенных для лечения, а также первичной и вторичной профилактики артериальной гипертензии без побочного действия.

Фармацевтическую композицию приготовляют, преимущественно, следующим образом.

Для приготовления активированной потенцированной формы действующих компонентов используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М., «Медицина», 1987, с.9-33; или, например, в статье Laffly Е., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol.14. - N 1-2. P.33-55.

Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.

Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемым в соответствии с изобретением веществом - антигеном: эндотелиальной NO-синтазой и C-концевым фрагментом AT₁ рецептора ангиотензина II. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифическую антисыворотку с высоким содержанием антител, которую и используют для получения активированной потенцированной формы. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.

Предпочтительным для приготовления заявленной фармацевтической композиции является использование поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе и к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II, которые в качестве матричного (первичного) раствора с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл используют для последующего приготовления активированной потенцированной формы.

Предпочтительным для приготовления каждого компонента является использование смеси трех водно-спиртовых разведений первичного матричного раствора антител, разведенных соответственно в 100¹², 100³⁰ и 100²⁰⁰ раз, что соответствует сотенным гомеопатическим разведениям C 12, C 30 и C 200. При выполнении заявленного лекарственного средства в твердой лекарственной форме на лактозу наносится смесь указанных компонентов.

Предпочтительным для приготовления заявленного лекарственного препарата является использование поликлональных антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и эндотелиальной NO-синтазе, которые могут быть получены иммунизацией кроликов следующим образом.

Для получения поликлональных антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов используют адъювант и C-концевой фрагмент AT₁ рецептора ангиотензина II, выбираемый, например, из следующей группы:

GKKFK RYFLQLLKYI PPKAKSHSNL STKMSTLSYR PSDNVSSSTK KPAPCFEVE

LNPF FYVFFGKNFK KYFLQLIKYI PPNVSTHPSL TTKMSSLSYR

PPENIRLPTK

KTAGSFDTE

QLLKYI PPKA

SSLSYRPPENIR

QLIKYI PPNVSTHP

SNL STKMSTLSYR PSDNVSSSTK KPAPCF

Возможно для получения поликлональных антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II использование в качестве иммуногена (антигена) C-концевого фрагмента рецептора AT1 ангиотензина II человека с добавленным к N концу Цистеином (С):

CGKKF KRYFL QLLKY IPPKA KSHSN LSTKM STLSY RPSDN VSSST ККРАР CFEVE

Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенные инъекции для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°C) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученная антисыворотка должна быть желтого цвета. Добавляют к антисыворотке 20% (весовая концентрация) NaN₃ до конечной концентрации 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°C. Для выделения из антисыворотки антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:

1) 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl, добавляют 6,26 г Na₂SO₄, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°C;

2) выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;

3) после удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;

4) фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.

Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II, который находится на нерастворимом матриксе с последующим элюированием концентрированными растворами соли.

Полученный таким образом буферный раствор поликлональных кроличьих антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,5÷3,0 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной потенцированной формы.

Поликлональные антитела к эндотелиальной NO-синтазе получают аналогичным вышеуказанным способом, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъювант и цельную молекулу эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:

1 MGNLKSVGQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PASPAPEPSR АРАРАТРНАР DHSPAPNSPT

61 LTRPPEGPKF PRVKNWELGS ITYDTLCAQS QQDGPCTPRR CLGSLVLPRK LQTRPSPGPP

121 PAEQLLSQAR DFINQYYSSIKRSGSQAHEE RLQEVEAEVA STGTIHLRES ELVFGAKQAW

181 RNAPRCVGRI QWGKLQVFDA RDCSSAQEMF TYICNHIKYA TNRGNLRSAI TVFPQRAPGR

241 GDFRIWNSQL VRYAGYRQQD GSVRGDPANV EITELCIQHG WTPGNGRFDV LPLLLQAPDE

301 APELFVLPPE LVLEVPLGAP HTGWRGPGL RWYALPAVSN MLLEIGGLEF SAAPFSGWYM

361 STEIGTRNLC DPHRYNILED VAVCMDLDTR TTSSLWKDKA AVEINLAVLH SFQLAKVTIV

421 DHHAATVSFM KHLDNEQKAR GGCPADWAWIVPPIYGSLPP VFHQEMVNYI LSPAFRYQPD

481 PWKGSATKGA GITRKKTFKE VANAVKISAS LMGTLMAKRV KATILYASET GRAQSYAQQL

541 GRLFRKAFDP RVLCMDEYDV VSLEHEALVL WTSTFGNGD PPENGESFAA ALMEMSGPYN

601 SSPRPEQHKS YKIRFNSVSC SDPLVSSWRR KRKESSNTDS AGALGTLRFC VFGLGSRAYP

661 HFCAFARAVD TRLEELGGER LLQLGQGDEL CGQEEAFRGW AKAAFQASCE TFCVGEEAKA

721 AAQDIFSPKR SWKRQRYRLS AQAEGLQLLP GLIHVHRRKM FQATVLSVEN LQSSKSTRAT

781 ILVRLDTAGQ EGLQYQPGDHIGISAPNRPG LVEALLSRVE DPPPPTESVA VEQLEKGSPG

841 GPPPSWVRDP RLPPCTVRQA LTFFLDITSP PSPRLLRLLS TLAEEPSEQQ ELETLSQDPR

901 RYEEWKLVRC PTLLEVLEQF PSVALPAPLL LTQLPLLQPR YYSVSSAPNA HPGEVHLTVA

961 VLAYRTQDGL GPLHYGVCST WLSQLKTGDP VPCFIRGAPS FRLPPDPYVP CILVGPGTGI

1021 APFRGFWQER LHDIESKGLQ PHPMTLVFGC RCSQLDF£LYR DEVQDAQERG VFGRVLTAFS

1081 REPDSPKTYV QDILRTELAA EVHRVLCLER GHMFVCGDVT MATSVLQTVQ RILATEGDME

1141 LDEAGDVIGV LRDQQRYHED IFGLTLRTQE VTSRIRTQSF SLQERHLRGA VPWAFDPPGP 1201 DTPGP

Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) цельной молекулы эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:

1 MGNLKSVAQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PATPAPEPSR APASLLPPAP EHSPPSSPLT

61 QPPEGPKFPR VKNWEVGSIT YDTLSAQAQQ DGPCTPRRCL GSLVFPRKLQ GRPSPGPPAP

121 EQLLSQARDF INQYYSSIKR SGSQAHEQRL QEVEAEVAAT GTYQLRESEL VFGAKQAWRN

181 APRCVGRIQW GKLQVFDARD CRSAQEMFTYICNHIKYATN RGNLRSAITV FPQRCPGRGD

241 FRIWNSQLVR YAGYRQQDGS VRGDPANVEI TELCIQHGWT PGNGRFDVLP LLLQAPDDPP

301 ELFLLPPELV LEVPLEHPTL EWFAALGLRW YALPAVSNML LEIGGLEFPA APFSGWYMST

361 EIGTRNLCDP HRYNILEDVA VCMDLDTRTT SSLWKDKAAV EINVAVLHSY QLAKVTIVDH

421 HAATASFMKH LENEQKARGG CPADWAWIVP PISGSLTPVF HQEMVNYFLS PAFRYQPDPW

481 KGSAAKGTGI TRKKTFKEVA NAVKISASLM GTVMAKRVKA TILYGSETGR AQSYAQQLGR

541 LFRKAFDPRV LCMDEYDVVS LEHETLWLVV TSTFGNGDPP ENGESFAAAL MEMSGPYNSS

601 PRPEQHKSYKIRFNSISCSD PLVSSWRRKR KESSNTDSAG ALGTLRFCVF GLGSRAYPHF

661 CAFARAVDTR LEELGGERLL QLGQGDELCG QEEAFRGWAQ AAFQAACETF CVGEDAKAAA

721 RDIFSPKRSW KRQRYRLSAQ AEGLQLLPGL IHVHRRKMFQ ATIRSVENLQ SSKSTRATIL

781 VRLDTGGQEG LQYQPGDHIG VCPPNRPGLV EALLSRVEDP PAPTEPVAVE QLEKGSPGGP

841 PPGWVRDPRL PPCTLRQALT FFLDITSPPS PQLLRLLSTL AEEPREQQEL EALSQDPRRY

901 EEWKWFRCPT LLEVLEQFPS VALPAPLLLT QLPLLQPRYY SVSSAPSTHP GEIHLTVAVL

961 AYRTQDGLGP LHYGVCSTWL SQLKPGDPVP CFIRGAPSFR LPPDPSLPCI LVGPGTGIAP

1021 FRGFWQERLH DIESKGLQPT PMTLVFGCRC SQLDHLYRDE VQNAQQRGVF GRVLTAFSRE

1081 PDNPKTYVQD ILRTELAAEV HRVLCLERGH MFVCGDVTMA TNVLQTVQRI LATEGDMELD

1141 EAGDVIGVLR DQQRYHEDIF GLTLRTQEVT SRIRTQSFSL QERQLRGAVP WAFEPPGSDT 1201 NSP

Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) синтетического пептида эндотелиальной NO-синтазы, выбранного, например, из следующих аминокислотных последовательностей:

1192-1195

PWAF

1189-1192:

RGAVP

1185-1205:

RHLRGAVPWAF DPPGPDTPGP

1194-1205:

AF DPPGPDTPGP

1186-1196:

HLRGAVPWAF D

1186-1205:

HLRGAVPWAF DPPGPDTPGP

Активированную потенцированную форму каждого компонента готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения) или в 99 частях (для сотенного разведения) или в 999 частях (для тысячного разведения) нейтрального растворителя с многократным вертикальным встряхиванием ("динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).

Например, для приготовления 12-го сотенного разведения C12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II с концентрацией 3,0 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя (преимущественно 70% этилового спирта) и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают потенцируют полученное 1-е сотенное C1 разведение. Из 1-го сотенного C1 разведения приготовляют 2-е сотенное разведение C2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение C12. Таким образом, 12-е сотенное разведение C12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-й части исходного матричного раствора антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II с концентрацией 3,0 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, приготовленный из матричного раствора, разведенного в 100¹² раз, что эквивалентно сотенному гомеопатическому разведению C12. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведений C 30 и C 200.

При использовании в качестве биологически активного жидкого компонента смеси различных гомеопатических, преимущественно сотенных, разведений действующего вещества каждый компонент состава (например, C 12, C 30, C 200) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения C 11, C 29, C 199) и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II в сверхмалой дозе каждого компонента, приготовленную из матричного раствора, разведенного в 100¹², в 100³⁰, в 100²⁰⁰, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведений C12, C30 и C200.

Возможно использование действующего вещества в виде смеси других различных гомеопатических, разведений, например десятичных и/или сотенных(С 20, C 30, C 100 или C12, C30, C50 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.

При потенцировании вместо встряхивания в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять внешнее воздействие ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.

Для получения заявленной фармацевтической композиции водные или водно-спиртовые растворы действующих компонентов смешивают, преимущественно, в соотношении 1:1 и используют в жидкой лекарственной форме. Предпочтительно фармацевтическая композиция содержит активированную потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе в сверхмалой дозе каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного в 100¹², в 100³⁰, в 100²⁰⁰, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведений C12, C30 и C200.

Заявленная фармацевтическая композиция может быть использована и в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя - лактозы, насыщенного путем пропитывания до насыщения смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной потенцированной формы антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и активированной потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие, преимущественно, лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

Для получения твердой оральной формы заявленного лекарственного средства производят в установке кипящего слоя (например, типа «Huttlin Pilotlab» производства компании Huttlin GmbH) орошение до насыщения вводимых в псевдоожиженный - кипящий слой гранул нейтрального вещества - лактозы (молочного сахара) с размером частиц 150÷300 мкм предварительно полученным водным или водно-спиртовым раствором активированных потенцированных форм антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной синтазе оксида азота (NO-синтазе), преимущественно, в соотношении 1 кг раствора антител на 5 или 10 кг лактозы (1:5-1:10) с одновременной сушкой в потоке подаваемого под решетку нагретого воздуха при температуре не выше 40°C. Расчетное количество 0,17÷0,34 от массы твердой оральной формы высушенных гранул, насыщенных активированной потенцированной формой антител, загружают в смеситель и смешивают с микрокристаллической целлюлозой, вводимой в количестве 3÷8 мас. ч. от общей массы загрузки - от массы твердой оральной формы. Затем в эту смесь добавляют 25÷45 мас. ч. от общей массы загрузки «ненасыщенной» чистой лактозы (для снижения стоимости и некоторого упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечебного воздействия), стеарат магния в количестве 0,1÷0,3 мас. ч. от общей массы загрузки и микрокристаллическую целлюлозу в количестве 3÷8 мас. ч. от общей массы загрузки. Полученную таблеточную массу равномерно перемешивают и таблетируют прямым сухим прессованием (например, в таблет-прессе Korsch - XL 400) с формированием круглых таблеток массой 150÷500 мг. После таблетирования получают таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (3,0-6,0 мг/табл.) активированной потенцированной формы антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и NO-синтазы в сверхмалой дозе каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного в 100¹², в 100³⁰ в 100²⁰⁰, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведений C12, C30 и C200.

Предпочтительно заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать по 1-2 таблетки 2-4 раза в день.

Для проведения экспериментальных исследований были использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной фармацевтической фирмой.

Пример 1

Для экспериментального исследования гипотензивного действия заявленного технического решения была использована фармацевтическая композиция, содержащая водный раствор активированных потенцированных форм (сверхмалые дозы - СМД) антител к С-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе, при этом каждый компонент взят в смеси гомеопатических разведений C12, C30, C200. Исследования проводились на 40 крысах-самцах линии SHR (вес 350±50 г, возраст 4,5-5 месяцев), обусловленных гипертонией, которые были разделены на 4 группы по 10 животных.

Животным перорально 1 раз в день в течение 28 дней вводили следующие препараты: группа 1 - 2,5 мл/кг СМД антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II человека (смесь водных разведений C12, C30, C200) в комбинации с 2,5 мл/кг дистиллированной воды, группа 2 - 2,5 мл/кг СМД антител к эндотелиальной NO синтазе (смесь водных разведений C12, C30, C200) в комбинации с 2,5 мл/кг дистиллированной воды, группа 3 - 5 мл/кг фармацевтической композиции на основе СМД антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II человека и СМД антител к эндотелиальной NO синтазе (смесь водных гомеопатических разведений C12, C30, С200 каждого компонента), группа 4 - 5 мл/кг дистиллированной воды.

Измерение величины систолического артериального давления (САД) у бодрствующих крыс проводили непрямым методом в хвостовой артерии (с помощью манжетки) один раз в неделю через 9 часов после последнего введения препаратов.

Все препараты обладали гипотензивным эффектом (p<0.05): к 28 дню систолическое артериальное давление (САД) уменьшилось по сравнению с исходным уровнем в группе 1, получавшей СМД антител к C-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II человека, - на 20,6%; в группе 2, получавшей СМД антител к эндотелиальной NO-синтазе, - на 14,4%; в группе 3, получавшей комбинированный препарат СМД антител, - на 27,6%. В контрольной группе 4 изменение САД относительно исходных значений составило 1,6%.

Полученные результаты свидетельствуют о более выраженном синергетическом гипотензивном эффекте заявленной фармацевтической композиции, содержащей активированные потенцированные формы сверхмалых доз антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе у крыс линии SHR, по сравнению с животными, получавшими отдельные компоненты (СМД антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II или СМД антител к эндотелиальной NO-синтазе).

Пример 2

Для экспериментального исследования гипотензивного действия заявленного технического решения была использована фармацевтическая композиция, содержащая водный раствор активированных потенцированных форм (сверхмалые дозы - СМД) антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе, при этом каждый компонент взят в смеси гомеопатических разведений C12, C30, С200. Исследования проводились на 50 крысах-самцах линии НИСАГ (вес 300 г, возраст 4 месяца) с наследственно обусловленной стресс-чувствительной артериальной гипертонией, которые были разделены на 5 групп по 10 животных.

Животные перорально 1 раз в день в течение 28 дней получали следующие препараты: группа 1 - 2,5 мл/кг СМД антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II человека (смесь разведений C12, C30, С200) в комбинации с 2,5 мл/кг дистиллированной воды, группа 2 - 2,5 мл/кг СМД антител к эндотелиальной NO-синтазе (смесь разведений C12, C30, С200) в комбинации с 2,5 мл/кг дистиллированной воды, группа 3-5 мл/кг фармацевтической композиции на основе СМД антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II человека и СМД антител к эндотелиальной NO синтазе (смесь гомеопатических водных разведений C12, C30, C200 каждого компонента), группа 4 - 5 мл/кг (доза 10 мг/кг) препарат сравнения лозартан, группа 5 - 5 мл/кг дистиллированной воды.

Два раза в неделю через 2÷6 часов после введения СМД антител и лозартана проводили измерение величины систолического артериального давления (САД) непрямым методом в хвостовой артерии (с помощью манжетки). В таблице 1 приведена динамика изменения систолического артериального давления у крыс линии НИСАГ, измеряемого непрямым методом.

Таблица 1
Показатель	САД исход., в мм рт.ст.	САД после 28 дневного введения препаратов, в мм рт.ст.	Δ по сравнению с исходным уровнем, в мм рт.ст.	% от исходного уровня
СМД антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II человека	176	150	-26	-14,7%
СМД антител к эндотелиальной NO синтазе	175	164,5	-10,5	-6%
Комбинированный препарат на основе СМД антител к C-концевому фрагменту ATI рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе	179,5	140	-39,5	-22%
Лозартан	173,5	140,5	-33	-19%
Контроль (дистиллированная вода)	181	178	-3	-1,6%

Полученные результаты свидетельствуют о более выраженном синергетическом гипотензивном эффекте заявленной фармацевтической композиции, содержащей активированные потенцированные формы сверхмалых доз антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе у крыс линии НИСАГ, по сравнению с животными, получавшими отдельные компоненты (СМД антител к C-концевому фрагменту AT₁ рецептора ангиотензина II или СМД антител к эндотелиальной NO-синтазе) комбинации. При этом по эффективности заявленная фармацевтическая композиция, содержащая активированные потенцированные формы сверхмалых доз антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе, по крайней мере, не уступает известному и широко применяемому антигипертензивному препарату лозартану.

1. Способ лечения и профилактики артериальной гипертензии путем введения в организм лекарственного средства на основе активированной потенцированной формы аффинно очищенных антител к рецептору ангиотензина II, приготовленной путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия, характеризующийся тем, что дополнительно одновременно и сочетано вводят активированную потенцированную форму аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе.

2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что используют активированную потенцированную форму антител к С-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.

3. Способ по п.1 или 2, характеризующийся тем, что активированную потенцированную форму антител к С-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - встряхивания каждого разведения.

4. Способ по п.1 или 2, характеризующийся тем, что используют фармацевтическую композицию, приготовленную в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы, которая включает смесь различных гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II в сочетании со смесью различных гомеопатических разведений антител к эндотелиальной NO-синтазе.

5. Способ по п.1 или 2, характеризующийся тем, что используют фармацевтическую композицию на основе активированной потенцированной формы аффинно очищенных антител к С-концевому фрагменту AT₁-рецептора ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе в сочетании с известными стандартными лекарственными средствами, применяемыми для лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы следующих групп: ингибиторы АПФ, в т.ч. комбинированные, диуретики, β-адреноблокаторы, нитраты, сердечные гликозиды, антагонисты кальция, гиполипидемические средства, антиагреганты, антигипоксанты, антикоагулянты.

6. Лекарственное средство для лечения артериальной гипертензии по п.1 на основе активированной потенцированной формы аффинно очищенных антител к рецептору ангиотензина II, характеризующееся тем, что выполнено в виде фармацевтической композиции и дополнительно содержит в качестве усиливающего компонента активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.

7. Лекарственное средство по п.6, характеризующееся тем, что активированную потенцированную форму антител к рецептору ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора соответствующих антител в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - встряхивания каждого разведения.

8. Лекарственное средство по п.6 или п.7, характеризующееся тем, что фармацевтическая композиция выполнена в твердой лекарственной форме и содержит эффективное количество насыщенных активированной потенцированной формой антител к рецептору ангиотензина II и активированной потенцированной формой антител к эндотелиальной NO-синтазе гранул нейтрального носителя и фармацевтически приемлемые добавки.

9. Лекарственное средство по п.6 или 7, характеризующееся тем, что водные или водно-спиртовые растворы активированных потенцированных форм антител к рецептору ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе получены путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричных растворов аффинно очищенных антител к рецептору ангиотензина II и к эндотелиальной NO-синтазе с концентрацией 0,5-5,0 мг/мл.

10. Лекарственное средство по п.6 или 7, характеризующееся тем, что каждый из компонентов аффинно очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, гомеопатических разведений.

11. Лекарственное средство по п.8, характеризующееся тем, что фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.