Способ получения комплексного антибактериального иммуномодулирующего препарата



 


Владельцы патента RU 2526184:

Государственное научное учреждение Курский научно-исследовательский институт агропромышленного производства Россельхозакадемии (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ получения комплексного препарата для применения в ветеринарии, обладающего иммуномодулирующими и антисептическими свойствами, который включает смешивание в дистилированной воде янтарной кислоты, левамизола и формалина при следующем соотношении компонентов, масс. %: левамизол - 3,0%-3,5%; янтарная кислота - 2,0%-2,5%; формалин - 0,3%-0,5%; дистиллированная вода - остальное; а стерилизацию раствора автоклавированием проводят в режиме 1 атм в течение 20 минут.

 

Изобретение относится к ветеринарии и касается способов получения комплексных препаратов, обладающих иммуномодулирующими и антисептическими свойствами.

Известен способ получения препарата «янтарный биостимулятор» для повышения резистентности организма животных (патент РФ №2303979, 2007 г.), который дает возможность получить биологически активный препарат в виде водного раствора, включающий в своем составе 1% янтарной кислоты, 4% антисептика стимулятора Дорогова второй фракции (АСД-2), 0,25% новокаина, pH 6,9-7,0. Способ получения комплексного препарата повышает устойчивость организма животных к неблагоприятным факторам внешней среды, нормализует обменные процессы в клетках при различного рода иммунодефицитах, нарушениях обмена веществ, экзо- и эндогенных интоксикациях. Однако препарат не обладает достаточным антибактериальным действием.

Известен способ получения комплексного иммунотропного антисептического препарата для лечения и профилактики инфекционных заболеваний животных, имеющего в своем составе дополнительно к вышеописанному формалин, обладающий антисептическими свойствами (патент РФ №2361579, 2009 г.), однако его действие не обладает выраженным иммуномодулирующим эффектом.

Задачей изобретения является получение инъекционной формы препарата с широким спектром биологического действия, обладающего целенаправленным воздействием на клеточную систему иммунитета и антибактериальными свойствами.

Поставленная задача достигается включением в комплексный препарат янтарной кислоты, левамизола и формалина при следующем соотношении компонентов, масс.%:

Левамизол - 3,0%-3,5%;

Янтарная кислота - 2,0%-2,5%;

Формалин - 0,3%-0,5%;

Дистиллированная вода - остальное.

Важным отличительным признаком изобретения является наличие левамизола, который является высокоэффективным иммуностимулятором, преимущественно клеточной системы иммунитета.

При изучении биологического действия левамизола было установлено, что он повышает общую сопротивляемость организма и может быть использован как средство для иммунотерапии. Опыты на изолированных клетках и наблюдения за здоровыми и больными людьми показали, что препарат способен восстановить измененные функции Т-лимфоцитов и фагоцитов и вследствие своего тимомиметического эффекта может регулировать клеточные механизмы иммунологической системы. Более подробные исследования продемонстрировали, что левамизол, избирательно стимулируя регуляторную функцию Т-лимфоцитов, может выполнять функции иммуномодулятора, способного усиливать слабую реакцию клеточного иммунитета, ослаблять сильную и не действовать на нормальную.

В связи с этими свойствами левамизол был предложен для лечения различных заболеваний, в патогенезе которых придают значение расстройствам иммуногенеза: первичные и вторичные иммунодефицитные состояния, аутоиммунные болезни, хронические и рецидивирующие инфекции, опухоли и др.

Однако левамизол обладает выраженным побочным, преимущественно судорожным действием на организм, вместе с тем известен способ снижения побочного действия левамизола за счет включения в состав препарата янтарной кислоты (патент РФ №2411944, 2011 г.).

В состав комплексного препарата, помимо янтарной кислоты и левамизола, в качестве антибактериального компонента входит витамин формалин.

Включение формалина в состав комплексного препарата обусловлено его исключительно высокой антисептической активностью. Так, в концентрации 1:6000 он прекращает рост тифозных бацилл, а в абсолютно низкой концентрации 1:30000 останавливает гниение бульона (Мозгов И.Е. Фармакология. Москва - «Колос», 1979, с.303).

Известно, что внутримышечное (парентеральное) введение формалина в концентрации 0,1-0,2% позволяет обеспечить снижение вирулентности возбудителя вирусного трансмиссивного гастроэнтерита свиней непосредственно в организме животных и одновременно стимулировать специфическую иммунную защиту (Ласкавый В.Н. Способ профилактики трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Патент РФ №2028804 от 20.02.1995).

Пример осуществления способа

Для приготовления комплексного препарата использовали 940,0 мл дистиллированной воды, в которой последовательно растворили 20,0 г янтарной кислоты, что соответствовало ее 2% концентрации; 30,0 г левамизола. Добавление 10 мл формалина (30%) позволило получить оптимальную среду для действия левамизола в пределах pH 4,5-5,0,

Полученный комплексный иммунометаболический препарат представляет собой прозрачный стерильный раствор. Качественный и количественный состав предлагаемого препарата по сравнению со стандартным раствором левамизола и прототипом позволяет выраженно снизить токсичность антгельминтика-иммуностимулятора левамизола, обеспечить высокий гепатопротекторный и иммунометаболический эффект. Качественный и количественный состав предлагаемого препарата обеспечивает достижение синергетического эффекта, что иллюстрируется примерами его экспериментального испытания.

Определение оптимальной концентрации формалина провели по результатам изучения безвредности и бактериальной активности опытных образцов комплексного препарата. С этой целью были изготовлены экспериментальные образцы препарата, содержащего 0,2%; 0,3%; 0,4%» и 0,5% формалина.

Бактерицидную активность определили в опыте in vitro, стандартным методом, по тесту задержки роста микроорганизмов вокруг бумажных дисков, пропитанных вышеуказанными растворами комплексного препарата. В качестве тест-объекта использовали культуру золотистого стафилококка, засеянного в бактериологические чашки на мясопептонный агар. После 24-часовой выдержки в термостате при 37°C диаметры зон задержки роста микроорганизмов составили: вокруг дисков, пропитанных комплексным препаратом, содержащим формалина 0,2% - 5-7 мм; 0,3% - 10-12 мм; 0,4% - 15-17 мм; 0,5% - 20-22 мм. Диаметр зон задержки 15 мм и более свидетельствовал о высокой бактерицидной активности.

Испытание безвредности провели на белых мышах. Ежедневное, на протяжении 5 дней внутрибрюшинное введение в объеме 0,5 мл испытуемых образцов препарата, содержащего 0,2%, 0,3% и 0,4% формалина, не сопровождалось угнетением общего состояния подопытных животных. Введение препарата, содержащего 0,5% формалина, на 5 сутки привело к снижению активности животных, тем не менее гибели их не наблюдалось.

Таким образом, по результатам экспериментальных опытов установлено, что для обеспечения антисептической активности комплексного препарата наиболее оптимальной является концентрация формалина не ниже 0,3%, но и не выше 0,5%.

Изучение антибактериальной активности

Опыт провели на коровах с клиническими признаками мастита по окончании лактационного периода. Подопытные животные были разделены по принципу аналогов на две группы. Коровам первой группы (n=3) с 7-ю больными долями молочной железы внутрицистернально в объеме 5 мл ввели препарат, содержащий 0,4% формалина. Животным второй группы (n=3) с 5 больными долями внутрицистернально был введен янтарный биостимулятор (патент РФ №2303979) в аналогичном объеме. Контроль антибактериальной активности препаратов при лечении мастита провели в день их введения и спустя 5 и 10 дней после введения. Результаты проведенного опыта представлены в таблице 1.

Результаты исследований свидетельствуют о том, что включение в состав препарата формалина обусловило ускоренный процесс обезвреживания микрофлоры в больных маститом долях молочной железы.

Изучение иммуностимулирующей активности заявляемого препарата на поросятах-сосунах

Для опыта были подобраны две группы свиноматок, по три головы в каждой, у которых на подсосе находились по 10 голов поросят-сосунов.

В 4-х суточном возрасте поросятам опытной группы (n=30) внутримышечно инъецировали испытуемый препарат в дозе 1,5 мл, а поросятам контрольной группы (n=30) суиферровит. Контрольные исследования и их результаты приведены в таблице 2.

При сопоставлении результатов исследований, проведенных на 7-е сутки, с фоновыми показателями установлено, что у поросят опытной и контрольной групп были выявлены определенные различия. Так, уровень содержания эритроцитов у поросят опытной группы увеличился на 5%, на 4% возросла насыщенность эритроцитов гемоглобином. Показатель состояния резервной щелочности увеличился до нижней границы физиологической нормы, что указывает на устранение алиментарного ацидоза. Это обусловлено тем, что янтарная кислота в сочетании с левамизолом является наиболее эффективным препаратом в устранении алиментарного ацидоза. Улучшение кислотно-щелочного баланса крови указывало и на нормализацию нарушенных обменных процессов. Особенно выраженные изменения произошли в белковом и минеральном обменах. Уровень белка и содержание в крови общего кальция у поросят опытной группы на 7 сутки достигли физиологической нормы. Уровень лимфоцитов в крови поросят опытной группы на 7-е сутки на 7,4% был больше, чем у особей из контрольной группы, что свидетельствовало об улучшении их иммунного статуса. На это же указывала выраженная тенденция роста БАСК и ФАЛ.

Изучение активности клеточного иммунитета на телятах-молочниках

Для опыта сформировали две группы телят аналогов по живой массе и возрастным параметрам. Контрольной группе телят вводили стандартный раствор левамизола 7,5% в дозе 2,5 мл, опытной группе - испытуемый вариант препарата в дозе 2,5 мл.

Полученные результаты (табл.3) позволяют отметить, что на 20-й день количество эритроцитов у телят опытной группы было выше на 12,4% (p<0,05), чем у животных контрольной группы, гематокрит в 10-дневном возрасте был выше на 9,7% (p<0,05). При этом отмечается тенденция к увеличению и уровня гемоглобина в крови телят опытной группы.

У телят опытной группы до первой выпойки молозива количество лейкоцитов было на 24,2% (p<0,05), а в 30-дневном возрасте на 14,6% (p<0,05) выше, чем у животных контрольной группы, что свидетельствует об активизации клеточных факторов иммунитета, при этом наблюдается положительная тенденция к повышению гемоглобина в крови телят.

Результаты исследования эффективности полученного препарата показали, что препарат обладает выраженным антибактериальным действием и эффективно воздействует на иммунную систему животных, что позволяет эффективно лечить инфекционные заболевания и иммунодефицитные состояния животных различной этиологии.

Таблица 1. Антимикробная эффективность заявляемого препарата и янтарного биостимулятора при лечении клинического мастита у коров

Коровы Препарат Видовой состав микрофлоры до и после введения препаратов
До введения Ha 5 день Ha 10 день
Заявляемый препарат с 0,3% формалина
1. Е. coli Str. agalactiae -
2. S. aureus Str. agalactiae S. aureus -
3. S. aureus Str. agalactiae -
Янтарный биостимулятор
1. E.coli Str. agalactiae Str. agalactiae -
2. S. aureus Str. agalactiae S. aureus Str. agalactiae -
3. S. aureus E.coli S. aureus -

Таблица 2. Влияние препарата на гематологические и иммунобиохимические показатели крови поросят, n=10

Показатели Периоды исследований, сут
Фоновые показатели 7 14 21 28
Эритроциты, 1012 3,8 ± 0,2 3,8 ± 0,2 4,0 ± 0,2 3,8 ± 0,2 4,1 ± 0,2 3,9 ± 0,2 4,4 ± 0,3 3,9 ± 0,2 4,5 ± 0,3 4,0 ± 0,2
Гемоглобин, г/л 78,56 ± 2,84 79,42 ± 3,26 81,37 ± 2,94 79,68 ± 2,75 82,47 ± 3,25 78,46 ± 2,67 88,72 ± 3,56 79,24 ± 2,27 89,24 ± 4,32 80,27 ± 2,78
Белок, г/л 52,3 ± 2,2 53,7 ± 2,4 54,8 ± 3,1 53,5 ± 2,6 57,2 ± 3,4 53,2 ± 3,6 58,6 ± 3,2 54,1 ± 3,1 59,3 ± 3,7 54,8 ± 3,6
Общий кальций, ммоль/л 1,44 ± 0,10 1,48 ± 0,18 1,56 ± 0,12 1,53 ± 0,11 1,98 ± 0,17 1,55 ± 0,16 2,02 ± 0,14 1,57 ± 0,18 2,05 ± 0,12 1,59 ± 0,13
Неорганический фосфор, ммоль 1,32 ± 0,16 1,31 ± 0,12 1,34 ± 0,12 1,33 ± 0,14 1,36 ± 0,18 1,33 ± 0,11 1,41 ± 0,12 1,36 ± 0,15 1,45 ± 0,14 1,38 ± 0,12
Резервная щелочность, об.% CO2 35,1 ± 1,6 35,3 ± 1,7 34,2 ± 2,1 35,2 ± 1,3 39,4 ± 3,2 * 35,4 ± 1,5 39,5 ± 3,1 * 35,6 ± 1,7 39,8 ± 2,6 * 35,8 ± 1,9
Лейкоциты,
109
7,22 ± 0,36 7,46 ± 0,28 7,48 ± 0,42 7,32 ± 0,44 7,56 ± 0,84 7,29 ± 0,32 7,92 ± 0,52 7,26 ± 0,22 8,02 ± 0,75 7,24 ± 0,23
Лимфоциты, % 48,18 ± 3,14 49,72 ± 2,98 54,15 ± 3,74 50,12 ± 2,84 59,85 ± 3,46 51,26 ± 2,48 59,73 ± 4,11 52,23 ± 2,36 61,48 ± 4,33 53,18 ± 2,75
БАСК, % 39,61 ± 2,7 40,32 ± 2,6 48,83 ± 2,9 41,23 ± 2,2 53,64 ± 3,2 42,34 ± 2,6 53,81 ± 2,9 47,21 ± 2,7 56,44 ± 3,28 48,63 ± 2,80
ФАЛ, % 21,8 ± 2,5 22,3 ± 2,4 25,4 ± 2,7 21,8 ± 2,5 29,3 ± 2,5 22,0 ± 2,5 30,1 ± 2,7 22,6 ± 2,4 32,3 ± 3,1 22,8 ± 2,9
Примечание: верхняя строка - показатели поросят опытной группы; нижняя строка - показатели поросят контрольной группы; p<0,05-0,01*

Таблица 3. Влияние препарата на гематологические показатели новорожденных телят, n=10

Показатели Возраст, дней
До выпойки молозива 10 20 30
Эритроциты, 1012 7,93±0,62 7,76±0,51 7,80±0,63 7,37±0,37 8,75±0,53* 7,67±0,36 8,10±0,64 7,50±0,37
Гемоглобин, г/л 116,4±6,75 116,6±4,0 114,5±6,1 110,1±4,38 118,9±4,25 111,4±6,46 96,1±6,16 92,0±3,52
Гематокрит, % 40,0±2,42 37,1±1,71 38,4±1,94* 34,7±1,48 37,3±3,01 39,7±1,78 31,5±2,31 29,7±1,43
Лейкоциты, 109 10,9±0,43* 8,28±0,78 8,40±0,59 8,3 5±0,59 9,33±1,2 9,10±0,75 8,07±0,59* 6,89±0,41
Палочкоядерные, % 1,83±0,31 1,90±0,31 - - -
- - -
Сегментно-ядерные, % 56,8±4,03 59,9±1,84 44,0±8,15 47,7±4,83 33,5±4,96 42,0±4,24 31,5±4,74 27,3±1,89
Моноциты, % 4,43±0,89 3,30±0,74 4,41±1,53 4,10±0,49 8,81±2,28 6,61±0,73 6,05±1,51* 3,63±0,51
Лимфоциты, % 37,4±3,95 35,3±1,99 50,6±7,13 41,б±4,97 57,0±5,21 48,7±4,53 62,0±3,27 64,8±3,16
Примечание: верхняя строка - показатели опытной группы; нижняя строка - показатели контрольной группы; * p<0,05-0,01

Способ получения комплексного антибактериального иммуномодулирующего препарата, включающий смешивание в дистилированной воде янтарной кислоты, формалина, стерилизацию автоклавированием, отличающийся тем, что в его состав дополнительно вводят левамизол при следующем соотношении компонентов, масс.%:
Левамизол - 3,0%-3,5%;
Янтарная кислота - 2,0%-2,5%;
Формалин - 0,3%-0,5%;
Дистиллированная вода - остальное,
а стерилизацию автоклавированием проводят в режиме 1 атм в течение 20 минут.



 

Похожие патенты:

Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к терапии и иммунологии, и касается лечения аутоиммунных заболеваний. Для этого вводят 3-(5-(4-(циклопентилокси)-2-гидроксибензоил)-2-((3-гидрокси-1,2-бензизоксазол-6-ил)метокси)фенил)пропионовую кислоту или ее соль в виде комбинации или фармацевтической композиции с одним или более из ингибиторов TNFα.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к персональному препарату из дождевых червей для лечения диабета. Способ получения персонального препарата для лечения диабета из дождевых червей, включающий помещение половозрелых дождевых червей в среду, состоящую из органики, которая дополнительно содержит раствор мочи больного человека, далее половозрелых особей червей удаляют и в течение 3-х месяцев каждые 7-10 дней к оставшейся массе добавляют свежий органический корм, после чего половозрелых червей отделяют, помещают в емкость и опрыскивают спиртовым раствором, перемешивают, заливают спиртовым раствором и помещают в темное место при определенной температуре, причем раствор ежедневно подвергают перемешиванию, далее экстракт отделяют от осадка.
Изобретение относится к области медицины, конкретно к фармацевтической композиции, обладающей противотромботическим, тромболитическим, иммуномодулирующим, противовоспалительным действиями, нормализующей липидный и углеводный обмен, конкретно к фармацевтической композиции на основе субстанции «пиявит» (далее пиявит), изготовленной из лиофилизированной медицинской пиявки.

Изобретение относится к новому противоопухолевому средству, представляющему собой 2-изобутил-4,6-диметил-5-оксипиримидин общей формулы I, указанной ниже. Средство может быть использовано для адъювантной противоопухолевой иммунотерапии.

Изобретение относится к области аллергологии и иммунологии и предназначено для оценки влияния иммунобиологических препаратов на кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ).
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству, обладающему адаптогенной и иммуномодулирующей активностью. Средство, обладающее адаптогенной и иммуномодулирующей активностью, содержащее соцветия календулы лекарственной; корни и корневища левзеи сафлоровидной; корневища девясила высокого; плоды мускатного ореха; плоды кардамона; корни аира болотного; корни алтея аптечного; корневища имбиря; траву горца птичьего; кору коричного дерева; плоды граната; плоды перца длинного; плоды можжевельника; листья черные бадана толстолистного; хитозан, взятые в определенном количестве.

Группа изобретений относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, и касается лечения язвенного колита или болезни Крона. Способ лечения включает введение в организм терапевтически эффективного количества прикрепляющихся клеток из плаценты, культивированных таким образом, что не дифференцируются в адипоциты или остеоциты.

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии и неонатологии, и может быть использовано для лечения глубоконедоношенных новорожденных детей в период стационарного этапа выхаживания.

Группа изобретений относится к области битехнологии и медицины. Предложен полисахарид, выделенный из штамма Bifidobacterium infantis NCIMB 41003 и имеющий структуру [-β(1,3)-D-GalpNAc-β(1,4)-D-Glcp-]n, где данная дисахаридная единица повторяется n раз, что дает полисахарид с молекулярной массой более 100000 Да.

Изобретение относится к соединению CL168, представленному общей структурной формулой I, где R представляет собой кислород. Также изобретение относится к способу получения соединения формулы I и к применению соединения формулы I при получении лекарственного средства для предупреждения и лечения опухолевых и иммунологических заболеваний.

Изобретение относится к фармацевтической композиции на основе 2,2′-ди(пиpидин-4-ил)-1H,1′H-5,5′-бибeнзo[d]имидaзoла, а также к его применению в производстве лекарственного средства для лечения C.

Изобретение относится к антибактериальным соединениям формулы (I) где R1 представляет собой алкоксигруппу; R2 представляет собой Н или F; каждый из R3, R4, R5 и R6 представляет собой независимо друг от друга Н или D; V представляет собой СН и W представляет собой СН или N, или V представляет собой N и W представляет собой СН; Y представляет собой СН или N; Z представляет собой О, S или СН2 и А представляет собой СН2, СН2СН2 или CD2CD2; или соль такого соединения.

Настоящее изобретение обеспечивает фармацевтические композиции, включающие эффективное количество цефтаролина фозамила или его фармацевтически приемлемой соли и антибактериальный агент или его фармацевтически приемлемую соль.

Антимикробная композиция для покрытия медицинского устройства включает материал, образующий полимерную пленку, и антимикробный препарат из традиционной китайской медицины, выбранный из группы: экстракт хауттюйнии сердцевидной, натрия хауттюйфонат и натрия новый хауттюйфонат, или их смеси.

Изобретение относится к области медицины и касается стабилизированного противомикробного гелевого состава, содержащего пероксид водорода (H2O2) и другие вспомогательные вещества.
Изобретение относится к медицине, а именно к колоректальной хирургии, и может быть использовано при восстановлении непрерывности толстой кишки после обструктивной резекции (операций типа Гартмана) и колостомии.
Группа изобретений относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использована для применения композиции для защиты от инфекции, вызываемой Lawsonia intracellularis.
Изобретение относится к композициям и полимерным материалам биомедицинского назначения, содержащим наночастицы серебра (0,0005-0,02 мас.%), стабилизированные амфифильными сополимерами малеиновой кислоты (0,0008-0,05 мас.%), низкомолекулярные органические амины (0,0002-0,04 мас.%) и воду.
Изобретение относится к способу получения материала с антибактериальными свойствами на основе монтмориллонитсодержащих глин. Неорганическую глину, представленную натрий-кальциевой, и/или кальциевой, и/или железистой формой монтмориллонита, модифицируют водным раствором нитрата серебра с концентрацией 0,16-9,9 масс.% в массовом соотношении глина:водный раствор нитрата серебра 1:5.

Данное изобретение относится к соединению Формулы I, его стереоизомерам, включая R и S изомеры, где: ′А′ представляет собой N; Y и Y′ представляют собой О; ′---′ отсутствует; R1 и R2 являются одинаковыми или различными и независимо представляют собой водород или С1-12 алкил; R3 представляет собой водород; R4 представляет собой гетероарил, который может быть факультативно замещенным в любом приемлемом положении одним или более заместителями Ra; Z представляет собой -(CH2)n-гетероарил, который может быть факультативно замещенным в любом приемлемом положении одним или более заместителями Ra; T, U, V и W являются одинаковыми или различными, и независимо представляют водород или галоген; Ra независимо выбран из водорода, галоген, С1-12 алкила, С1-12 галоалкила, -C(=Y)OR7, -(CH2)nYR7, каждый из которых факультативно может быть замещенным в любом приемлемом положении галогеном; R7 представляет собой водород или С1-12 алкил; m представляет собой 1; m′ представляет собой 0; n представляет собой 1; где: указанный гетероарил выбран из 1,2,3-триазолила, пиридинила, 1-оксипиридинила (пиридинил-N-оксида), пиразинила, изоксазолила, имидазо[1,2-α]пиримидинила, имидазо[1,2-α]пиразинила.

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для биологической терапии опухолей. Описан биоматериал, стимулирующий противоопухолевую активность, который содержит лиофилизат постнатальных индуцированных лимфатических узлов (ПНИЛУ) больного раком.
Наверх