Способ диагностики генетической предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости


 


Владельцы патента RU 2528900:

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "КРАСНОЯРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ ПРОФЕССОРА В.Ф. ВОЙНО-ЯСЕНЕЦКОГО МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ" (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики генетической предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости. Проводят анализ генотипов генов-кандидатов патологии сердечно-сосудистой системы: полиморфизмов -44A/G гена Cx40, A/G гена SCN5A, VNTR4a/4b гена NOS3 и I/D гена ADRα2β. К генотипам низкого риска нарушений сердечной проводимости относят генотипы -44GG гена Сх40, AA гена SCN5A, 4a/4a гена NOS3 и II гена ADRα2β, им присваивают 0%. К генотипам среднего риска относят генотипы -44AG гена Cx40, AG гена SCN5A, 4a/4b гена NOS3 и ID гена ADRα2β, им присваивают 50%. К генотипам высокого риска относят генотипы -44АА гена Cx40, GG гена SCN5A, 4b/4b гена NOS3 и DD гена ADRα2β, им присваивают 100%. Риск развития нарушений сердечной проводимости рассчитывают по формуле. Риск оценивают как низкий при значении от 0% до 30%, средний - от 30% до 60%, высокий - более 60%. Предлагаемый способ позволяет выделить генетические маркеры развития первичных нарушений сердечной проводимости: синдрома слабости синусового узла, атриовентрикулярной блокады, полной блокады правой ножки пучка Гиса, блокады левой ножки пучка Гиса и повысить качество диагностики наследственной предрасположенности к указанным патологиям. 5 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии и генетике, и может быть использовано для диагностики генетической предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости у человека.

Одной из причин сердечно-сосудистой смертности являются различные нарушения сердечной проводимости (блокады сердца). Генетическая диагностика наследственных нарушений сердечной проводимости, основанная на определении генов-предикторов развития заболевания, может способствовать их раннему выявлению и профилактике. К настоящему времени описано большое количество генетических маркеров различных форм нарушений сердечной проводимости: синдрома удлиненного и укороченного интервала QT, синдрома Вольфа-Паркинсона-Уайта, синдрома Бругада, Лева-Ленегра и др. Большинство из них представляют собой гены, кодирующие белки ионных каналов (калиевых, натриевых) кардиомиоцитов и их модуляторов (Заклязьминская, Е.В. Генетическое разнообразие сердечно-сосудистых заболеваний и возможности молекулярной диагностики / Е.В. Заклязьминская, С.И. Козлова, А.В. Поляков // Вестник Аритмологии. - 2005. - №37. - С.69-76). Однако недостаточно изучено влияние генов коннексина 40 (Cx40), сердечных натриевых каналов (SCN5A), α-2β-адренорецептора (ADRα2β), эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) на развитие первичных нарушений сердечной проводимости. На животной модели было доказано, что коннексин 40 необходим для быстрого проведения импульса в системе Гиса-Пуркинье (Simon, A.M. Mice lacking connexin40 have cardiac conduction abnormalities characteristic of atrioventricular block and bundle branch block / A.M. Simon, D.A. Goodenough. D.L. Paul // Curr. Biol. - 1998. - Vol.5, №8. - P.295-298). N. Makita и соавторы доказали участие гена Cx40 в нормальном функционировании проводящей системы сердца. Они обследовали 156 пробандов с прогрессивной семейной блокадой сердца I типа и выявили мутацию Cx40-Q58L, которая ухудшает образование щелевых контактов и межклеточное взаимодействие кардиомиоцитов (A connexin40 mutation associated with a malignant variant of progressive familial heart block type I/N. Makita, A. Seki, N. Sumitomo et al. // Circ. Arrhythm. Electrophysiol. - 2012. - V.5, №1. - P.163-172). Анализ гаплотипов больных с идиопатической фибрилляцией предсердий показал статистически значимое преобладание генотипа Cx40 (-44A, +71G) по сравнению с контрольной группой (The association of human connexin 40 genetic polymorphisms with atrial fibrillation / J.M. Juang, Y.R. Chern, C.T. Tsai et al. // Int. J. Cardiol. - 2007. - V.116, №1. - P.107-112). Замена G на A в гене SCN5A была выявлена у 2 детей, страдающих AB-блокадой. Указанная мутация приводила к замене серина на глицин (G298S) в домене I петли S5-S6 и аспарагина на аспарагиновую кислоту (D1595N) в сегменте S3 домена IV (Wang, D.W. Clinical, genetic, and biophysical characterization of SCN5A mutations associated with atrioventricular conduction block / D.W. Wang, P.C. Viswanathan, J.R. Balser // Circulation. - 2002. - V.105, №3. - P.341-346). Описаны четверо детей из немецкой семьи с анамнезом ранних нарушений сердечного ритма и проводимости, охватывающих синдром слабости синусового узла, тяжелые желудочковые тахикардии, все четверо детей являлись гомозиготными носителями миссенс-мутации SCN5A (p.I230T) (A homozygous SCN5A mutation in a severe, recessive type of cardiac conduction disease / A. Neu, M. Eiselt, M. Paul et al. // Hum. Mutat. - 2010. - 1609-1621). Определена роль мутации гена SCN5A в развитии синдрома слабости синусового узла. Мутация наследуется аутосомно-рецессивно и обусловливает образование нефункционирующих натриевых каналов в клетках синоатриального узла (Congenital sick sinus syndrome caused by recessive mutations in the cardiac sodium channel gene (SCN5A) / D.W. Benson, D.W. Wang, M. Dyment et al. // J. Clin. Invest. - 2003. - Vol.7, №112. - P.1019-1028). Экспериментально доказано, что носители генотипов DD и ID гена ADRα2β в большей степени подвержены риску внезапной сердечной смерти (ВСС), чем носители II генотипа полиморфизма I/D (Variation in the alpha2B-adrenoceptor gene as a risk factor for prehospital fatal myocardial infarction and sudden cardiac death / A. Snapir, J. Mikkelsson, M. Perola et al. // J. Am. Coll. Cardiol. - 2003. - V.41, №2. - P.190-194). Кроме того, известно, что мужчины-носители варианта DD гена ADRα2β в 2,2 раза чаще подвержены острому коронарному синдрому, чем носители других вариантов (An insertion/deletion polymorphism in the alpha2B-adrenergic receptor gene is a novel genetic risk factor for acute coronary events / A. Snapir, P. Heinonen, T.P. Tuomainen et al. // J. Am. Coll. Cardiol. - 2001. - V.37, №6. - P.1516-1522). При изучении влияния полиморфизмов NOS3 Т(-786)С и экзон 7 G(894)T на сердечно-сосудистую смертность было установлено значительное влияние T(-786)C) генотипа на выживаемость. Индивиды с генотипом TT, выживаемость которых была ниже, имели более высокий уровень миелопероксидазы в плазме крови и низкий уровень нитротирозина по сравнению с пациентами генотипа СС (The T(-786)C endothelial nitric oxide synthase genotype predicts cardiovascular mortality in high-risk patients / G.P. Rossi, G. Maiolino, M. Zanchetta et al. // J. Am. Coll. Cardiol. - 2006. - V.48, №6. - P.1166-1174). Полиморфизм VNTR гена NOS3 ассоциируется с увеличенными эхокардиографическими значениями гипертрофии левого желудочка у больных эссенциальной гипертонией (Косянкова, Т.В. Взаимосвязь гена эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) с сердечно-сосудистыми заболеваниями / Т.В. Косянкова, К.В. Пузырев, С.В. Буйкин, А.Г. Матафонов // Науки о человеке: сборник статей молодых ученых и специалистов / Под ред. Л.М. Огородова, Л.В. Капилевич. - Томск, СГМУ. - 2002. - 254 с.).

Однако представленные результаты исследований включают анализ однонуклеотидных полиморфизмов (ОНП) или мутаций одного или двух генов и рассматривают их роль в развитии лишь некоторых патологий сердечно-сосудистой системы. В частности, отсутствуют данные о роли ОНП -44A/G гена Cx40, A/G гена SCN5A, VNTR4a/4b гена NOS3, I/D гена ADRα2β в развитии таких нарушений сердечной проводимости как синдром слабости синусового узла (СССУ), атриовентрикулярные блокады (АВБ), полная блокада правой ножки пучка Гиса (ПБПНПГ), блокада левой ножки пучка Гиса (БЛНПГ) у человека. Кроме того, большинство исследований проводилось на европейском и азиатском населении, справедливость полученных данных в отношении сибирской популяции не изучалась.

Наиболее близким к предлагаемому является способ генетической диагностики подверженности к сердечно-сосудистым заболеваниям (патент РФ №2376372, C12N 15/00. Бюл.№35, 20.12.2009 г.). Способ основан на определении генотипов по полиморфным вариантам (однонуклеотидным полиморфизмам) гена рецептора 1 типа ангиотензина II, гена ангиотензин-превращающего фермента, гена метилентетрагидрофолат-редуктазы, гена ангиотензиногена, гена G-протеина бета 3, гена эндотелиальной синтазы оксида азота, гена фактора свертываемости F5, гена интегрина B3, гена фактора свертываемости F2 и оценке риска путем суммирования количества баллов, присвоенных каждому генотипу. При этом генотипам «низкого» риска сердечно-сосудистой патологии присваивается 0 баллов, генотипам «среднего» риска присваивается 0,5 баллов, генотипам «высокого» риска присваивается 1 балл. Риск сердечно-сосудистых болезней считается «низким» при сумме баллов от 0 до 3, средним - от 3,5 до 6, высоким - от 6,5 до 11 баллов.

Задача предлагаемого способа: выделить генетические маркеры, которые позволят повысить качество диагностики наследственной предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости: синдрому слабости синусового узла (СССУ), атриовентрикулярной блокаде (АВБ), полной блокаде правой ножки пучка Гиса (ПБПНПГ), блокаде левой ножки пучка Гиса (БЛНПГ).

Поставленную задачу решают за счет того, что выявляют генотип пациента, ген и полиморфизм для каждого из нарушений сердечной проводимости: синдрома слабости синусового узла, атриовентрикулярной блокады, полной блокады правой ножки пучка Гиса, блокады левой ножки пучка Гиса; для анализа используют 4 полиморфизма 4 генов: помимо анализа полиморфизма VNTR4a/4b гена NOS3 осуществляют анализ полиморфизмов -44A/G гена Cx40, A/G гена SCN5A и I/D гена ADRα2β; генотипам низкого риска нарушений сердечной проводимости присваивают 0%, к ним относят генотипы -44GG гена Cx40, AA гена SCN5A, 4a/4a гена NOS3 и II гена ADRα2β, генотипам среднего риска присваивают 50%, к ним относят генотипы -44AG гена Cx40, AG гена SCN5A, 4a/4b гена NOS3 и ID гена ADRα2β, генотипам высокого риска присваивают 100%, к ним относят генотипы -44AA гена Cx40, GG гена SCN5A, 4b/4b гена NOS3 и DD гена ADRα2β; риск развития нарушений сердечной проводимости рассчитывают по формуле: (a+b+c+d)/n, где: a - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену Cx40, b - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену SCN5A, c - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену NOS3, d - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену ADRα2β, n - количество анализируемых генов у человека; генетический риск считают низким при значении от 0% до 30%, средним - от 30% до 60%, высоким - более 60%.

Способ осуществляют следующим образом.

У человека забирают кровь из периферической вены в объеме 3 мл, проводят анализ любым из известных молекулярно-генетических методов однонуклеотидных полиморфизмов -44A/G гена Cx40, A/G гена SCN5A, VNTR4a/4b гена NOS3 и I/D гена ADRα2β. Каждому возможному генотипу, в зависимости от того, является ли он протективным или предрасполагающим к развитию патологии, присваивают определенное количество процентов в соответствии с данными, приведенными в табл.1. Эти данные были получены при анализе групп больных с различными нарушениями сердечной проводимости г. Красноярска и здоровых жителей г. Новосибирска (всего проанализировано 359 случаев). Генотипам низкого риска нарушений сердечной проводимости присваивают 0%, к ним относятся генотипы -44GG гена Cx40, AA гена SCN5A, 4a/4a гена NOS3 и II гена ADRα2β. Генотипам среднего риска присваивают 50%, к ним относятся генотипы -44AG гена Cx40, AG гена SCN5A, 4a/4b гена NOS3 и ID гена ADRα2β. Генотипам высокого риска присваивают 100%, к ним относятся генотипы -44AA гена Cx40, GG гена SCN5A, 4b/4b гена NOS3 и DD гена ADRα2β.

Табл. 1
Возможные варианты генотипов генов Cx40, SCN5A, NOS3 и ADRα2β у человека и количество присваиваемых им процентов.
Ген Генотип Количество процентов при СССУ Количество процентов при АВБ Количество процентов при ПБПНПГ Количество процентов при БЛНПГ
Ген коннексин 40 (Cx40) 44GG 0% Не влияет на развитие заболевания Не влияет на развитие заболевания Не влияет на развитие заболевания
44AG 50% Не влияет на развитие заболевания Не влияет на развитие заболевания Не влияет на развитие заболевания
44AA 100% Не влияет на развитие заболевания Не влияет на развитие заболевания Не влияет на развитие заболевания
Ген сердечных натриевых каналов (SCN5A) AA 0% 0% 0% 0%
AG 50% 50% 50% 50%
GG 100% 100% 100% 100%
Ген эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) 4a/4a 0% 0% 0% 0%
4a/4b 50% 50% 50% 50%
4b/4b 100% 100% 100% 100%
Ген альфа-2бета-адренорецептора (ADRα2β) II Не влияет на развитие заболевания 0% 0% Не влияет на развитие заболевания
ID Не влияет на развитие заболевания 50% 50% Не влияет на развитие заболевания
DD Не влияет на развитие заболевания 100% 100% Не влияет на развитие заболевания

Для оценки генетического риска развития заболевания (СССУ, и/или АВБ, и/или НБПНПГ, и/или БЛНПГ) необходим анализ не менее двух генов из четырех указанных в табл.1. В зависимости от выявленного генотипа у человека каждому исследуемому гену присваивают процент вероятности развития заболевания (согласно таблице 1). Затем полученные значения суммируют и делят на общее число генов, анализируемых у человека, т.е. определяют среднее значение генетического риска развития заболевания на основании имеющихся генотипов исследуемых генов у человека. Формула расчета риска развития заболевания: (a+b+c+d)/n, где: а - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену Cx40, b - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену SCN5A, c - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену NOS3, d - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену ADRα2β, n - количество анализируемых генов у человека.

Выделение генетических маркеров, которые позволят улучшить диагностику наследственной предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости, проводили на группах набранных индивидуумов с идиопатическими формами нарушений сердечной проводимости: синдромом слабости синусового узла (СССУ) - 98 человек, атриовентрикулярной блокадой (АВБ) - 73 человека, полной блокадой правой ножки пучка Гиса (ПБПНПГ) - 86 человек, блокадой левой ножки пучка Гиса (БЛНПГ) - 102 человека (из них 19 человек с полной блокадой левой ножки пучка Гиса и 83 человека с блокадой только передней ветви левой ножки пучка Гиса). Пациенты были набраны в ходе исследования, проводившегося сотрудниками кафедры внутренних болезней №1 Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого и повторно обследованы спустя 10 лет. Всем обследуемым после подписания информирования согласия было проведено стандартное кардиологическое обследование на базе МБУЗ ГКБ №20 им. И.С. Берзона г. Красноярска (сбор жалоб, анамнеза, клинический осмотр, электрокардиографию, атропиновый тест, эхокардиоскопию, велоэргометрию, чреспищеводную стимуляцию предсердий, суточное мониторирование ЭКГ по Холтеру) для верификации диагноза. Кроме того, всем обследуемым проведено молекулярно-генетическое исследование в ГУ НИИ терапии СО РАМН г.Новосибирска: определялись однонуклеотидные полиморфизмы -44AJG гена Сx40, A/G гена SCN5A, VNTR4a/4b гена NOS3 и I/D гена ADRα2β.

По однонуклеотидному полиморфизму (ОНП) -44A/G гена Cx40 прогенотипированы 67 больных с СССУ, 53 человека с АВБ, 86 человек с ПБПНПГ и 98 человек с БЛНПГ (табл.2).

Табл. 2
Распределение генотипов ОНП -44A/G гена Cx40 среди больных с СССУ, АВБ ПБПНПГ, БЛНПГ
Генотипы: СССУ (n=67) АВБ (n=53) ПБПНПГ (n=86) БЛНПГ (n=98)
абс % абс % абс % абс %
44AA 24 35,8 4 7,5 7 8,1 7 7,1
44AG 28 41,8 20 37,7 34 39,5 38 38,8
44GG 15 22,4 29 54,7 45 52,3 53 54,1

Как видно из табл.2, среди больных с идиопатическим СССУ преобладает гомозиготный генотип по редкому аллелю -44AA гена Cx40 (24 человека - 35,8%) по сравнению с гомозиготным генотипом по распространенному аллелю -44GG гена Cx40 (15 человек - 22,4%). Полученные результаты подтверждают, что генотип -44AA гена Cx40 является прогностически неблагоприятным фактором развития идиопатического СССУ (табл.1). В то же время среди больных с АВБ, ПБПНПГ, БЛПГ аналогичной закономерности не наблюдается. Это объясняется тем, что однонуклеотидный полиморфизм -44A/G гена Cx40 не участвует в развитии указанных заболеваний (табл.1).

По однонуклеотидному полиморфизму A/G гена SCN5A прогенотипированы 98 больных с СССУ, 73 больных с АВБ, 87 больных с ПБПНПГ, 102 больных с БЛНПГ (табл.3).

Табл. 3
Распределение генотипов ОНП A/G гена SCN5A среди больных с СССУ, АВБ, ПБПНПГ, БЛНПГ
Генотипы: СССУ (n=98) АВБ (n=73) ПБПНПГ (n=87) БЛНПГ (n=102)
абс % абс % абс % абс %
AA 2 2,0 5 6,8 3 3,4 9 8,8
AG 16 16,3 11 15,1 19 21,8 15 14,7
GG 80 81,6 57 78,1 65 74,7 78 76,5

Как видно из табл.3, среди больных с идиопатическими нарушениями сердечной проводимости (СССУ, АВБ, ПБПНПГ, БЛНПГ), преобладает гомозиготный генотип по редкому аллелю GG гена SCN5A (80 человек - 81,6% с СССУ, 57 человек - 78,1% с АВБ, 65 человек - 74,7% с ПБПНПГ, 78 человек - 76,5% с БЛНПГ) по сравнению с гомозиготным генотипом по распространенному аллелю AA гена SCN5A (2 человека - 2,0% с СССУ, 5 человек - 6,8% с АВБ, 3 человека - 3,4% с ПБПНПГ, 9 человек - 8,8% с БЛНПГ). Полученные результаты подтверждают, что генотип GG гена SCN5A является прогностически неблагоприятным фактором развития указанных заболеваний (табл.1).

По однонуклеотидному полиморфизму VNTR 4a/4a гена NOS3 прогенотипированы 90 больных с СССУ, 69 больных с АВБ, 83 больных с ПБПНПГ, 101 больной с БЛНПГ (табл.4).

Табл. 4
Распределение генотипов ОНП VNTR 4a/4b гена NOS3 среди больных с СССУ, АВБ, ПБПНПГ, БЛНПГ
Генотипы: СССУ (n=90) АВБ (n=69) ПБПНПГ (n=83) БЛНПГ (n=101)
абс % абс % абс % абс %
4a/4a 35 38,9 33 47,8 42 50,6 51 50,5
4a/4b 27 30,0 18 26,1 22 26,5 31 30,7
4b/4b 28 31,1 18 26,1 19 22,9 19 18,8

Как видно из табл.4, среди больных с идиопатическими нарушениями сердечной проводимости (СССУ, АВБ, ПБПНПГ, БЛНПГ), преобладает гомозиготный генотип 4a/4a гена NOS3 (35 человек - 38,9% с СССУ, 33 человека - 47,8% с АВБ, 42 человека - 50,6% с ПБПНПГ, 51 человек - 50,5% с БЛНПГ) по сравнению с генотипом 4b/4b гена NOS3 (28 человек - 31,1% с СССУ, 18 человек - 26,1% с АВБ, 19 человек - 22,9% с ПБПНПГ, 19 человек - 18,8% с БЛНПГ). Полученный результат можно объяснить тем, что аллель 4a является распространенным аллелем и преобладает в общей популяции людей, a аллель 4b - редкий аллель, частота встречаемости его значительно ниже.

По полиморфизму I/D гена ADRα2β прогенотипированы 92 больных с СССУ, 71 больной с АВБ, 86 больных с ПБПНПГ, 102 больных с БЛНПГ (табл.5).

Табл. 5
Распределение генотипов ОНП I/D гена ADRα2β среди больных с СССУ, АВБ, ПБПНПГ, БЛНПГ
Генотипы: СССУ (n=92) АВБ (n=71) ПБПНПГ (n=86) БЛНПГ (n=102)
абс % абс % абс % абс %
II 33 35,9 23 32,4 18 20,9 34 33,3
ID 36 39,1 17 23,9 37 43,0 44 43,1
DD 23 25,0 31 43,7 31 36,0 24 23,5

Как видно из табл.5, среди больных с идиопатической АВБ и ПБПНПГ преобладает гомозиготный генотип по редкому аллелю DD гена ADRα2β (31 человек - 43,7% с АВБ, 31 человек - 36,0% с ПБПНПГ) по сравнению с гомозиготным генотипом по распространенному аллелю II гена ADRα2β (23 человека - 32,4% с АВБ, 18 человек -20,9% с ПБПНПГ). Полученные результаты подтверждают, что генотип DD гена ADRα2β - является прогностически неблагоприятным фактором развития идиопатической АВБ и ПБПНПГ (табл.1). В то же время среди больных с наследственными СССУ и БЛНПГ аналогичной закономерности не наблюдается. Это объясняется тем, что полиморфизм I/D гена ADRα2β не участвует в развитии указанных заболеваний (табл.1).

Пример 1: молекулярно-генетическое исследование пациента С., 36 лет.

Проведен забор крови из вены в количестве 3 мл. Проанализированы следующие полиморфные аллельные варианты генов для установления генетической предрасположенности к идиопатической полной блокаде правой ножки пучка Гиса:

- Ген сердечных натриевых каналов (SCN5A) - A/G

- Ген эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) - VNTR4a/4b

- Ген альфа-2бета-адренорецептора (ADRα2β) - I/D

Результаты генетического тестирования пациента С.

- Ген SCN5A, полиморфизм A/G, генотип пациента AA - 0%

- Ген NOS3, полиморфизм VNTR4a/4b, генотип пациента 4a/4a - 0%

- Ген ADRα2β, полиморфизм I/D, генотип пациента ID - 50%

Расчет генетического риска: (0%+0%+50%)/3=16,7% - низкий риск.

Рекомендации для пациента С.

- Диспансерная группа Д-I

- Консультация врача-терапевта 1 раз в год

- Электрокардиограмма - 1 раз в 3 года, после 40 лет - 1 раз в год

- Рекомендации по здоровому образу жизни

Пример 2: молекулярно-генетическое исследование пациента Н., 21 год.

Проведен забор крови из вены в количестве 3 мл. Проанализированы следующие полиморфные аллельные варианты генов для установления генетической предрасположенности к идиопатической атриовентрикулярной блокаде:

- Ген сердечных натриевых каналов (SCN5A) - A/G

- Ген эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) - VNTR4a/4b

- Ген альфа-2бета-адренорецептора (ADRα2β) - I/D

Результаты генетического тестирования пациента Н.

- Ген SCN5A, полиморфизм A/G, генотип пациента AG - 50%

- Ген NOS3, полиморфизм VNTR4a/4b, генотип пациента 4a/4b - 50%

- Ген ADRα2β, полиморфизм I/D, генотип пациента ID - 50%

Расчет генетического риска: (50%+50%+50%)/3=50% - средний риск.

Рекомендации для пациента Н.

- Диспансерная группа Д-II

- Консультация врача-кардиолога 1 раз в год с обязательным проведением электрокардиограммы

- Атропиновый тест и мониторирование ЭКГ по Холтеру - 1 раз в 3 года

- Исключение лекарственных препаратов, ухудшающих сердечную проводимость (β-адреноблокаторы, антагонисты кальция группы верапамила и дилтиазема, ингибиторы If каналов)

- Рекомендации по здоровому образу жизни

Пример 3: молекулярно-генетическое исследование пациента М., 42 года.

Проведен забор крови из вены в количестве 3 мл. Проанализированы следующие полиморфные аллельные варианты генов для установления генетической предрасположенности к идиопатическому синдрому слабости синусового узла:

- Ген коннексин 40 (Cx40) - -44A/G

- Ген сердечных натриевых каналов (SCN5A) - A/G

- Ген эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) - VNTR4a/4b

Результаты генетического тестирования пациента М.

- Ген Cx40, полиморфизм -44A/G, генотип пациента 44AA - 100%

- Ген SCN5A, полиморфизм A/G, генотип пациента GG - 100%

- Ген NOS3, полиморфизм VNTR4a/4b, генотип пациента 4a/4b - 50%

Расчет генетического риска: (100%+100%+50%)/3=83,3% - высокий риск

Рекомендации для пациента М.

- Диспансерная группа Д-II

- Консультация врача-кардиолога 2 раза в год с обязательным проведением электрокардиограммы

- Атропиновый тест и мониторирование ЭКГ по Холтеру - 1 раз в год

- Биохимический анализ крови: электролитный состав - 1 раз в год

- Исключение лекарственных препаратов, ухудшающих сердечную проводимость (β-адреноблокаторы, антагонисты кальция группы верапамила и дилтиазема, ингибиторы If каналов)

- Рекомендации по здоровому образу жизни

Предлагаемый способ позволяет выделить генетические маркеры развития каждого из первичных нарушений сердечной проводимости: синдрома слабости синусового узла, атриовентрикулярной блокады, полной блокады правой ножки пучка Гиса, блокады левой ножки пучка Гиса у человека и повысить качество диагностики наследственной предрасположенности к указанным патологиям, что позволит проводить раннюю профилактику и осуществлять персонализированный подход к лечению данных заболеваний.

Способ диагностики генетической предрасположенности к нарушениям сердечной проводимости, включающий анализ генотипов генов-кандидатов патологии сердечно-сосудистой системы, одним из которых является полиморфизм VNTR4a/4b гена NOS3, отличающийся тем, что выявляют генотип пациента, ген и полиморфизм для каждого из нарушений сердечной проводимости: синдрому слабости синусового узла, атриовентрикулярной блокаде, полной блокаде правой ножки пучка Гиса, блокаде левой ножки пучка Гиса; для анализа используют 4 полиморфизма 4 генов: помимо анализа полиморфизма VNTR4a/4b гена NOS3 осуществляют анализ полиморфизмов -44A/G гена Cx40, A/G гена SCN5A и I/D гена ADRα2β; генотипам низкого риска нарушений сердечной проводимости присваивают 0%, к ним относят генотипы -44GG гена Сх40, AA гена SCN5A, 4a/4a гена NOS3 и II гена ADRα2β, генотипам среднего риска присваивают 50%, к ним относят генотипы -44AG гена Cx40, AG гена SCN5A, 4a/4b гена NOS3 и ID гена ADRα2β, генотипам высокого риска присваивают 100%, к ним относят генотипы -44АА гена Cx40, GG гена SCN5A, 4b/4b гена NOS3 и DD гена ADRα2β; риск развития нарушений сердечной проводимости рассчитывают по формуле: (a+b+c+d)/n, где a - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену Cx40, b - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену SCN5A, c - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену NOS3, d - количество процентов, соответствующее генотипу человека по гену ADRα2β, n - количество анализируемых генов у человека; генетический риск считают низким при значении от 0% до 30%, средним - от 30% до 60%, высоким - более 60%.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования неблагоприятного исхода гипертрофической кардиомиопатии. Методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) в крови пациента определяют величины тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 (TIMP 1) и терминального фрагмента мозгового натрийуретического пептида (NT pro BNP).

Изобретение относится к области медицины, кардиологии и может быть использовано для прогнозирования риска развития рестеноза после коронарного стентирования. Сущность способа: определяют значения дополнительных факторов риска - измерения толщины эпикардиальной жировой ткани, уровней лептина, липопротеина «a» и глюкозы в крови, после чего осуществляют математическую обработку числовых значений факторов риска с получением вероятности возникновения рестеноза по формуле: Р= [ехр(-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·Х5+0,0665·X6)]/ [1+ехр (-8,0248+0,0893·X1+0,00354·X2+0,1397·X3+1,1194·X4+0,3286·X5+0,0665·X6)], где P - вероятность возникновения рестеноза в %, X1 - значение лептина пациента в нг/мл; X2 - значение липопротеина «a» в мг/л; X3 - толщина эпикардиальной жировой ткани в миллиметрах; X4 - значение холестерина липопротеидов высокой плотности в ммоль/л; X5 - значение глюкозы крови в ммоль/л; X6 - значение интерлейкина-6 в пкг/мл; -8,0248 - свободный член уравнения.
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для оценки индивидуальной радиочувствительности больных местно-распространенным раком молочной железы и опухолями головы и шеи при лучевой терапии.
Изобретение относится к области медицины, а именно, к лабораторной диагностике, и касается прогнозирования прерывания беременности в первом триместре. Сущность способа: в сыворотке крови в ранние сроки гестации (до 13 недель) определяют содержание β-субъединицы хорионического гонадотропина (β-ХГЧ) и растворимого рецептора васкуло-эндотелиального фактора роста (sVEGFR-1), сочетание которых обладает высокой прогностической значимостью для оценки риска ранних репродуктивных потерь.

Группа изобретений относится к области медицинской диагностики, иммунологии и онкологии, в частности к новым онкомаркерам и способам диагностики онкологических заболеваний.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития сахарного диабета второго типа у уроженцев Центрального Черноземья, больных гипертонической болезнью.

Группа изобретений основана на выявлении механизмов модулирования активности eNOS и относится к способу скрининга на модулятор экспрессии эндотелиальной NO-синтазы (eNOS), способу диагностирования сердечно-сосудистого заболевания у индивида, применению HEBP1 для идентификации лекарственного средства для профилактики и/или лечения заболевания, связанного с дисфункцией eNOS, в частности сердечно-сосудистого заболевания, применению HEBP1 для обнаружения компонента передачи сигнала при экспрессии eNOS и применению HEBP1 для регуляции активности промотора eNOS.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ оценки воспаления и/или резистентности к инсулину у животного путем количественного определения присутствия анализируемого вещества в сыворотке или плазме.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения стадии патологического состояния печени на основе оценки параметров свободнорадикального гомеостаза.

Группа изобретений относится к способам идентификации аллергенных белков и пептидов. Более конкретно, данное изобретение относится к способам идентификации аллергенных белков и/или пептидов молока: альфаS1-, альфаS2-, бета- или каппа-казеина, включающим стадии: получение по меньшей мере одной экспрессионной библиотеки, содержащей ДНК или кДНК, полученную из ткани молочной железы лактирующего млекопитающего, предпочтительно, лактирующей коровы; экспрессии по меньшей мере одного белка или пептида, кодируемого указанной экспрессионной библиотекой; определения связывающей способности по меньшей мере одного белка или пептида с IgE по меньшей мере одной сыворотки индивидуума, который чувствителен к молоку млекопитающего, предпочтительно, молоку коровы; контактирования по меньшей мере одного белка или пептида, проявляющего IgE-связывающую способность, определенную в стадии с), с базофильными клетками, эозинофильными клетками или тучными клетками, и идентификации по меньшей мере одного белка или пептида как аллергена, если указанные базофильные клетки, эозинофильные клетки или тучные клетки выделяют по меньшей мере один медиатор после контакта с указанным по меньшей мере одним белком или пептидом стадии d).
Изобретение относится к области медицины, конкретно к аллергологии, иммунологии и дерматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития инфекционных осложнений при атопическом дерматите у детей. Согласно способу, во время лечения младенческой формы и детской формы атопического дерматита в стадии обострения проводят определение содержания в сыворотке крови ребенка компонента комплемента С3, интерлейкина 6 и интерлейкина 10. При содержании в сыворотке крови компонента комплемента С3 меньше 0,8 мг/мл, интерлейкина 6 больше 20,9 нг/мл и интерлейкина 10 больше 5,6 нг/мл прогнозируют развитие инфекционного осложнения атопического дерматита у ребенка. Применение изобретения обеспечивает возможность прогнозирования развития инфекционных осложнений младенческой формы и детской формы атопического дерматита в стадии обострения в период лечения. 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования гнойных послеоперационных осложнений у больных раком толстой кишки (колоректальный рак) путем динамического исследования крови. У больного раком толстой кишки на вторые и пятые сутки после операции определяют уровень С-реактивного белка (СРБ) в плазме крови. При значении уровня СРБ на пятые сутки менее 10,0 мг/дл прогнозируется относительно гладкое течение послеоперационного периода. В случае снижения уровня СРБ относительно вторых послеоперационных суток риск развития осложнений низкий. При нарастании уровня СРБ относительно вторых послеоперационных суток или сохранении его на одном уровне - риск развития осложнений средний. При значении уровня СРБ на пятые сутки более 10,0 мг/дл риск развития гнойных послеоперационных осложнений высокий. Изобретение обеспечивает эффективное прогнозирование развития гнойных осложнений у пациентов на вторые и пятые сутки после операции по поводу колоректального рака. 3 пр.

Группа изобретений относится к определению связанных с лечением данных для введения по меньшей мере одного медикамента пациенту, подлежащему лечению. Представлена система для определения относящихся к лечению данных для введения по меньшей мере одного медикамента пациенту, подлежащему лечению, содержащая: по меньшей мере одно устройство для отбора образцов крови для непрерывного и последовательного отбора крови у пациента для получения образцов крови; по меньшей мере одно устройство измерения показателей крови для измерения показателей крови отобранных образцов и получения наборов данных измерения показателей крови и по меньшей мере одно вычислительное устройство для вычисления относящихся к лечению данных из наборов данных измерения показателей крови, в которой каждому образцу крови и каждому связанному с ним набору данных измерения показателей крови, назначен по меньшей мере один связанный с пациентом первый идентификатор и один связанный со временем второй идентификатор, относящийся к моменту времени отбора образца крови, причем вычислительное устройство для вычисления связанных с лечением данных посредством первого оценивающего блока выполнено с возможностью назначения по меньшей мере одного индивидуального весового коэффициента каждому набору данных измерения показателей крови, с одинаковым первым идентификатором и отличающимся вторым идентификатором для характеристики взвешивания данных измерения показателя крови в вычислительной операции, при этом предусмотрены назначающее устройство, соединенное с каждым устройством измерения показателей крови, для назначения каждому набору данных измерения показателей крови третьего идентификатора, относящегося к измерительному оборудованию, назначенному для конкретных устройств измерения показателей крови, и четвертого идентификатора, относящегося к точности измерения; и второй оценивающий блок для назначения каждому набору данных измерения показателей крови, имеющему одинаковый первый идентификатор и отличающийся четвертый идентификатор, по меньшей мере одного индивидуального весового коэффициента для характеристики взвешивания данных измерения показателей крови в вычислительной операции. Также описан способ определения связанных с лечением данных для введения по меньшей мере одного медикамента пациенту, подлежащему лечению. Достигается возможность усовершенствованного лечения пациента. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 2 ил.
Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ оценки белоксинтезирующей функции лейкоцитов для клинических исследований методом иммуноферментного анализа путем выделения лейкоцитов из венозной крови с использованием системы Vacutainer BD, содержащей декстрозу, процедуры отмывания клеток, подготовки суспензии, содержащей 50000 клеток в 1 мкл, последующего 20-часового культивирования в среде Игла-MEM при добавлении фактора некроза опухоли-альфа в концентрации 0,005 мкг/мл, разрушения клеточных мембран лизирующим раствором и 50-кратным разведением образцов при определении концентрации альфа-дефензинов, а при определении содержания C-реактивного белка без разведения. Изобретение обеспечивает повышение точности и производительности метода. 1 таб., 3 пр.
Способ относится к области медицины, а именно к способам лабораторной диагностики в ревматологии, используется для диагностики тяжести остеоартроза коленного сустава. Сущность способа: устанавливают диапазон величин хрящевого гликопротеина и их среднее значение при различных стадиях заболевания, определяют тяжесть течения остеоартроза коленного сустава путем сопоставления полученных значений хрящевого гликопротеина с его стандартизированными показателями. При величине хрящевого гликопротеина от 56,99 до 71,02 нг/мл диагностируют компенсированную стадию заболевания, в диапазоне величин от 82,86 до 93,79 нг/мл диагностируют субкомпенсированную стадию остеоартроза, в диапазоне величин от 148,92 до 211,28 нг/мл диагностируют декомпенсированную стадию дегенеративно-дистрофического процесса в коленном суставе. Применение изобретения позволяет уточнить тяжесть течения остеоартроза коленного сустава, что определяет тактику лечения. 2 табл., 3 пр.

Группа изобретений относится к способу измерения тропонина I в образце. Для этого предоставляют образец. Затем приводят образец в контакт с моноклональным антителом к тропонину I, связанным с магнитной меткой. После чего осуществляют приведение образца в контакт с поликлональным антителом или с двумя различными антителами к тропонину I, связанным с поверхностью сенсора. Причем указанные антитела направлены на аминокислотную последовательность 30-110 тропонина I. Затем проводится детекция магнитной метки на поверхности сенсора. Группа изобретений также относится к устройству и к картриджу для измерения тропонина I в образце. Изобретения позволяют осуществлять диагностирование инфаркта миокарда в течение 5 минут и с использованием малого объема образца. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической и экспериментальной абдоминальной хирургии и может быть использовано для оценки характера течения репаративной регенерации после оперативного лечения механической травмы печени. Сущность способа: на 3-й и 7-й день после оперативного вмешательства на печени в сыворотке крови исследуют уровень альфа-фетопротеина, определяют коэффициент регенерации (КР) по формуле: К Р = А Ф П 7 А Ф П 3 , где: КР - коэффициент регенерации в условных единицах; АФП7 - уровень альфа-фетопротеина в сыворотке крови (нг/мл) на 3-й день после оперативного вмешательства на печени; АФП3 - уровень альфа-фетопротеина в сыворотке крови (нг/мл) на 7-й день после оперативного вмешательства на печени, и при величине КР, равной 1,0 и более условных единиц, прогнозируют вялый характер репаративной регенерации. Изобретение обеспечивает повышение точности и упрощение процедуры прогнозирования характера течения репаративной регенерации после оперативного лечения механической травмы печени. 1 табл., 2 пр., 1 ил.

Изобретение относится к области медицины. Сущность способа прогнозирования вероятности развития рестеноза с учетом локализации стента в правой коронарной артерии, огибающей артерии состоит в том, что на момент стентирования осуществляют забор крови пациента и регистрируют в физических величинах значения протромбинового индекса, коэффициента атерогенности, липопротеидов очень низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, вычисляют величину стеноза S. После чего рассчитывают коэффициент вероятности развития рестеноза R, соответствующий прогнозируемой величине рестеноза через 6 месяцев, по формуле. При этом адекватность прогнозируемой величины рестеноза через 6 месяцев после стентирования обеспечивается для следующих интервалов: при локализации стеноза в огибающей артерии 0<R<40; при локализации стеноза в ветвях тупого края 0<R<50, 90<R<100; при локализации стеноза в правой коронарной артерии 0<R<50; при локализации стеноза в передней межжелудочковой артерии 0<R<100. Использование заявленного способа позволяет осуществить раннее прогнозирование рецидивов сердечнососудистых осложнений, в частности развития рестеноза, повторного сужения сосудов сердца после стентирования в правой коронарной артерии, огибающей артерии, в передней межжелудочковой артерии и ветвях тупого края. 4 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для определения генетической предрасположенности к привычному невынашиванию беременности (ПНБ). Осуществляют выделение геномной ДНК из образца крови обследуемого лица. Проводят генотипирование полиморфных вариантов 34V/L гена FXIII, М235Т гена AGT, 4a/b гена eNOS, PLA1/A2 гена GpIIIa и 353R/Q гена FVII. После установления генотипа по всем 5 генам определяют влияние выявленных аллелей на формирование предрасположенности к ПНБ путем подсчета суммарного балла по формуле и составляют заключение на основании обработки полученных данных. Значение суммарного балла <0,16 является основанием для отнесения обследуемого лица к группе с низким риском, значение от 0,16 до 0,40 баллов - к группе со средним риском, а значение >0,40 баллов - к группе с высоким риском формирования ПНБ. Предлагаемый способ позволяет выделить группы женщин низкого, среднего или высокого риска развития ПНБ, что необходимо для своевременной профилактики или коррекции выявленных нарушений до наступления беременности. 5 ил., 9 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу характеристики микроорганизмов. Сущность способа состоит в (a) получении тестируемого образца, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы; (b) наслаивании тестируемого образца на плотностный буфер в контейнере, где указанный плотностный буфер обладает однородной плотностью от приблизительно 1,025 до приблизительно 1,120 г/мл; (c) добавлении идентификатора в указанный тестируемый образец и/или в указанный плотностный буфер; (d) центрифугировании указанного контейнера для разделения микроорганизмов от других компонентов указанного тестируемого образца и образовании осадка микроорганизмов; (e) спектроскопическом исследовании осадка и/или указанного одного или более чем одного идентификатора с получением измерений, которые характеризуют микроорганизмы, где указанные спектроскопические исследования проводят при нахождении указанного осадка в указанном контейнере; и (f) характеристике микроорганизмов в осадке на основании полученных измерений и/или присутствия или отсутствия указанного идентификатора или метаболизированной формы указанного идентификатора в осадке, где указанные микроорганизмы характеризуют по одной или более моделям классификации, выбранным из группы, состоящей из групп по Граму, клинических групп по Граму, терапевтических групп и функциональных групп. Использование заявленного изобретения позволяет повысить точность характеристики микроорганизмов. 14 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл., 4 пр.
Наверх