Способ прогнозирования задержки полового развития у мальчиков препубертатного возраста с ожирением


 


Владельцы патента RU 2530719:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования задержки полового развития у мальчиков препубертатного возраста при ожирении. Сущность способа состоит в том, что у мальчиков в возрасте 11-12 лет определяют методом ИФА в сыворотке крови уровень лептина, рассчитывают индекс массы тела (ИМТ) и соотношение лептина к ИМТ. Если их числовое значение соотношения более 0,4, дополнительно методом ИФА определяют уровни дегидротестостерона (ДГТС) и антимюллерова гормона (АМГ), если числовое значение данного соотношения составит 30,86 и менее, прогнозируют задержку полового развития у мальчиков в пубертатном периоде. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, и найдет использование при прогнозировании нарушения репродуктивной функции у мальчиков с ожирением в препубертатном периоде.

По данным эпидемиологических исследований в Российской Федерации распространенность избыточной массы тела у детей в разных регионах России колеблется от 5,5 до 11,8%, ожирением страдают 5,5% детей, проживающих в сельской местности, и 8,5% детей - в городах (Петеркова В.А. и соавторы 2004 г.)

Изучение репродуктивного здоровья мальчиков приобретает в последнее время все большую актуальность в связи с тем, что мужской фактор в бездетном браке составляет 40-60% и имеет тенденцию к росту. Предпосылки нарушений репродуктивного здоровья, выявляемых у взрослых людей, могут возникать уже на ранних стадиях онтогенеза - от момента образования зиготы, до самого момента реализации воспроизводства потомства. Как следствие, несвоевременные выявление и коррекция заболеваний такого типа у детей и подростков могут привести к крайне негативным последствиям.

Пубертат - период онтогенеза человека, на котором происходит окончательное созревание гипоталамо-гипофизарной системы. Следствиями синхронизации эндокринных явлений в пубертат становятся развитие вторичных половых признаков и фертильности, изменение интенсивности метаболизма и антропометрических характеристик - роста и пропорций тела (MeSH).

Функциональные нарушения репродуктивной системы, имеющие начало в детском и подростковом возрасте, изучаются сегодня в генетическом, эндокринном и метаболическом аспектах (Дедов, Мельниченко, Чеботникова, 2006). В настоящее время основным диагностическим алгоритмом, направленным на выявление и дифференциальную диагностику различных заболеваний, проявляющихся задержкой полового развития у мальчиков, является предложенный в «Эндокринологическом национальном руководстве» (под редакцией Дедова, Мельниченко 2009). В соответствии с этим подходом изучают анамнез, проводят физикальное обследование, оценку полового развития по Таннер и гормональное исследование, включающее в себя определение базальных уровней гонадотропных (лютеинизирующего (ЛГ) и фолликулостимулирующего (ФСГ)) и половых гормонов (в первую очередь тестостерон).

Дополнительно необходимо провести стандартную пробу с релизинг-фактором лютеинизирующего гормона, после внутривенного введения которого определяют через 24 часа ЛГ ФСГ и Тестостерон. При функциональной задержке полового развития повышается ЛГ и тестостерон до пубертатных значений. Однако данный тест имеет информативность, если костный возраст пациента не менее 12-13 лет, который отстает при функциональной задержки полового развития, в результате реакция на стимуляционную пробу может отсутствовать. Поэтому диагностическое исследование можно начинать проводить в 13-14 лет, тогда когда уже выражены задержка роста и развития мышечного каркаса, отсутствие мутации голоса, отсутствие вторичных половых признаков и стадия полового развития по Таннер 1. Столь позднее выявление даже функциональной задержки полового развития, не говоря уже о гипогонадотропном гипогонадизме, приводит к психосоциальной депривации подростка и может навсегда оставить отпечаток на всей его последующей жизни и развитии.

В связи с необходимостью ранней превентивной диагностики нарушений репродуктивной функции и ограничениями стандартного алгоритма нами разработана методика выявления предикторов репродуктивных расстройств, приводящих к задержке полового развития на фоне метаболических нарушений - у мальчиков, страдающих ожирением в препубертате (11-12 лет).

Задача изобретения - разработка эффективного способа прогнозирования задержки полового развития у мальчиков, страдающих ожирением в препубертате, что позволит определить эффективность проводимой терапии.

Поставленная задача решается тем, что у мальчиков препубертатного возраста (11-12 лет) при ожирении определяют ИМТ (вес в кг разделенный на м2 роста), проводят исследование в крови уровня лептина и рассчитывают соотношение лептин/ИМТ. Если числовое значение данного соотношения составляет 0,4 и более, дополнительно методом ИФА определяют уровни дегидротестостерона (ДГТС) антимюллерова гормона (АМГ), вычисляют их соотношение, и если его числовое значение составляет менее 30,86, прогнозируют задержку полового развития обследуемого в пубертатном периоде (13-14 лет).

Данный метод отличается малой инвазивностью, диагностикой метаболических расстройств в виде лептинорезистентности и позволяет оценивать риск формирования у мальчиков 11-12 лет задержки полового развития в пубертатном периоде. Новый технический результат, получаемый при использовании заявляемого способа, показывает высокую чувствительность и эффективность метода, позволяет получить объективные данные при однократном исследовании.

Главным посредником эндокринного взаимодействия жировой ткани и репродуктивной системы является система лептиновой сигнализации. Лептин действует на центры голода и насыщения в гипоталамусе, участвует в мозговой регуляции энергетического гомеостаза и контролирует массу тела путем снижения синтеза и высвобождения нейропептида, вызывающего чувство голода. Роль лептина и характер его регуляции у человека продолжают уточняться, но уже известно, что нарушение регуляции его секреции и лептинорезистентность рассматриваются как один из ведущих механизмов развития ожирения. Лептин и его рецепторы в организме тканеспецифичны для клеткок Лейдига, семенных канальцев яичек, эпидидимиса, а также в сперматозоидов (компартментализация в акросоме). Эти данные вместе позволяют предположить причастность лептиновой системы к модуляции процессов гаметогенеза и андрогенеза. Эта идея подтверждается там, что с увеличением количества жира мужской организм претерпевает феминизацию, поскольку в нем повышается уровень эстрогенов и лептина, что напрямую подавляет выработку тестостерона.

В нашем исследовании гиперлептинемия отмечена у детей с ожирением как в препубертате, так и в пубертате (медиана лептина 20,0 пг/мл и 13,9 пг/мл) и достоверно отличалась от детей контрольной группы (медиана лептина 5,04 пг/мл и 3,36 пг/мл соответственно). Уровень лептина значимо коррелировал с выраженностью ожирения и биохимическими показателями, а именно с ИМТ (r=0,79; p≤0,05), индексом инсулинорезистентности (r=0,61) и инсулином (r=0,75).

Нами было отмечено, что не все дети, страдающие ожирением, имели задержку полового развития, в связи с чем мы стали рассматривать взаимосвязь лептина с ИМТ. При выявлении соотношения лептина/ИМТ 0,4 и выше у большего числа исследуемых наблюдалась задержка полового развития.

Традиционные анализы крови на тестостерон, ЛГ и ФСГ, выполняемые обычно как стандарт диагностических исследований, не могут предсказать в 11-12 лет у каких мальчиков с ожирением будет сформирована задержка полового развития в 14 лет.

Особое место в функционировании репродуктивной системы занимает АМГ. По литературным данным АМГ отражает количество и качество клеток Сертоли у мальчиков до начала полового созревания, их определение возможно в оценки мужской фертильности в любом возрасте, начиная с периода новорожденности. Повышение уровня АМГ в препубертате ассоциировано со сниженной концентрацией андрогенов в сыворотке крови - ТС и ДГТС. По мере полового созревания уровень АМГ снижается, отражая созревание клеток Сертоли в ответ на действие андрогенов. АМГ подтверждает приближающееся половое созревание надежнее, чем более вариабельные тестостерон и ЛГ.

Проведенные нами исследования детей в препубертате 11-12 лет с половым развитием Таннер 1, страдающих ожирением, не выявили значимых отличий среди уровня антимюллерова гормона от детей с нормальным весом и начальной фазой полового развития (медиана АМГ 60,20 нг/мл и 79, 20 нг/мл соответственно). Тогда как между 1-й и 2-й стадией полового развития у мальчиков 11-12 лет с ожирением есть достоверные отличия (p<0,005). В связи с этим сам по себе АМГ не может быть специфическим диагностическим маркером.

Поэтому мы, рассмотрев корреляционные связи и соотношение АМГ с половыми гормонами (тестостероном, ЛГ, ФСГ, ДГТС), нашли интересующую нас закономерность только в связи с ДГТС.

Это объясняется тем, что ДГТС более тесно связывается с андрогеновым внутриклеточным рецептором, чем тестостерон, поэтому его показатели более стабильны и могут быть использованы в диагностике. Однако разброс его показателей велик и специфическим диагностическим маркером сам по себе он выступать не может. При использовании ROC-анализа нами были выявлены диагностические критерии соотношения ДГТС/АМГ.

Подробное описание метода и примеры его клинического использования.

У всех мальчиков с ожирением 11-12 лет определяют рост, вес и оценивают стадия полового развития по Таннер. У всех детей определяют ИМТ путем соотношения веса к росту (метр в квадрате). Далее проводят забор крови с целью определения гормонов в крови, в том числе - лептина.

Забор крови осуществляют в утренние часы (с 8.00 до 11.00) с соблюдением установленных требований, с использованием вакуумного метода. Сыворотку крови получают путем центрифугирования в течение 10 мин при 3000 об/мин. До проведения исследования сыворотку крови хранят в морозильной камере при температуре -20°C.

В крови определяют уровень лептина и при его соотношении к ИМТ 0,4 и более дополнительно проводят исследование крови на ДГТС и АМГ.

Исследования этих гормонов осуществляют методом иммуноферментного анализа на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Alisei» (Италия) с использованием тест-систем производства «Алкор Био» (Россия), ДРГ (Германия, США).

Принцип метода определения уровня лептина заключается в использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. В наборе использованы высокоспецифичные моноклональные антитела: моноклональные антитела, специфичные к лептину, иммобилизованы в лунках микропланшета, и другие моноклональные антитела, специфичные к другому эпитопу лептина, конъюгированы с биотином. На первой стадии анализа лептин, содержащийся в образцах и стандартах, связывается с иммобилизованными антителами и с биотинилированными антителами, формируя «сэндвич»-комплекс. Избыток и несвязавшиеся биотинилированные антитела удаляются на этапе промывки.

На второй стадии анализа добавляется конъюгат стрептавидин-пероксидаза хрена, который специфически связывается с биотинилированными антителами. Затем, несвязавшийся конъюгат удаляют при промывке. После этого вносят субстрат (IML), который в результате ферментативной реакции образует продукт голубого цвета, при этом окраска прямо пропорциональна количеству присутствующего лептина. Ферментативную реакцию останавливают добавлением стоп-реагента, преобразовывая голубой цвет в желтый. Оптическая плотность раствора измеряется на фотометре при длине волны 450 нм, которая необходима, чтобы подготовить стандартную кривую, из которой может быть непосредственно прочитано количество лептина в исследуемых образцах.

Ход анализа

1. Все реагенты нагрели до комнатной температуры перед использованием.

2. Приготовили рабочие растворы конъюгата стрептавидин/HRP и промывочного буфера.

3. Внесли по 20 мкл каждого стандарта, контроля и образца в дублях в соответствующим образом помеченные лунки.

4. Внесли по 80 мкл раствора моноклональных антител к лептину, конъюгированных с биотином, во все лунки.

5. Инкубировали 1 час при комнатной температуре на шейкере (приблизительно 200 об/мин).

9. Промыли ячейки 3 раза, используя по 300 мкл разведенного буфера для промывок на лунки, а затем постучали микропланшетом по фильтровальной бумаге, убедились, что лунки сухие.

10. Внесли по 100 мкл раствора конъюгата стрептавидин/HRP в каждую лунки.

11. Инкубировали на шейкере в течение 30 минут при комнатной температуре (приблизительно 200 об/мин).

12. Промыли лунки как указано в п.5.

13. Внесли по 100 мкл субстрата ТМБ в каждую лунку.

14. Инкубировали на шейкере в течение 10 минут при комнатной температуре.

15. Внесли по 50 мкл стоп-раствора во все лунки, в той же последовательности и с той же скоростью, как и в шаге 13.

16. Оптическую плотность раствора в лунках измерили при длине волны 450 нм.

17. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывали концентрацию гормона в определяемых образцах.

При исследовании дегидротестостерона использован «конкурентный» вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Принцип метода заключается в следующем: немеченый антиген (дегидротестостерон, присутствующий в образцах, контролях и стандартах) и меченый ферментом антиген (конъюгат) во время инкубации конкурируют за ограниченное количество сайтов связывания антител, иммобилизованных в лунках микропланшета. Затем, после промывки, добавляется ферментный субстрат. Энзиматическая реакция останавливается добавлением стоп-раствора. Степень окрашивания, сформировавшегося в ходе энзиматической реакции, обратно пропорциональна концентрации определяемого гормона в образце. Интенсивность развившегося окрашивания определяют, измеряя абсорбцию в лунках при длине волны 450 нм, используя две длины волны сравнения в диапазоне 600-630 нм и 405 нм. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается концентрация гормона в определяемых образцах.

Определение дегидротестостерона

Ход анализа

1. Все реагенты перед проведением анализа были перемешаны и доведены до комнатной температуры.

2. Во все лунки внесли по 100 мкл раствора конъюгата.

3. В соответствующие лунки внесли по 50 мкл калибровочных проб, контрольной и исследуемой сыворотки.

4. Инкубировали стрипы в течение 1 часа при комнатной температуре при встряхивании на шейкере со скоростью 200 об/мин.

5. По окончании инкубации удаляли содержимое лунок декантированием и промывали лунки 3 раза.

6. Внесли во все лунки по 150 мкл раствора ТМБ и инкубировали стрипы в темноте при комнатной температуре (+18…25°С) в течение 15-30 минут в зависимости от степени развития окраски.

7. Добавляли во все лунки по 50 мкл стоп-реагента для остановки ферментной реакции, встряхивать на шейкере в течение 1-2 мин.

8. Оптическую плотность раствора измеряли при длине волны 450 нм.

9. Концентрацию гормона в определяемых образцах рассчитывали на основании калибровочного графика.

При исследовании антимюллерова гормона в наборах «AMH Gen II» использован энзиматически усиленный «сэндвич»-вариант твердофазного иммуноферментного анализа. В ходе постановки стандарты, контроли и образцы инкубируют в лунках микропланшета, покрытых антителами к АМГ. После инкубации и промывки детектирующие анти-АМГ антитела, конъюгированные с биотином, вносят в лунки микропланшета. После второй инкубации и промывки, в лунки вносят конъюгат стрептавидин-пероксидаза (стрептавидин-HRP). После третьей инкубации и промывки в лунках вносят субстрат тетраметилбензидина (ТМБ). На последнем этапе процедуры в лунки вносят стоп-раствор (кислота). Интенсивность развившегося окрашивания определяют, измеряя абсорбцию в лунках при длине волны 450 нм, используя длину волны сравнения в диапазоне 600-630 нм. Измерение абсорбции прямо пропорционально концентрации определяемого гормона в образцах. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается концентрация гормона в определяемых образцах.

Определение антимюллерова гормона

Ход анализа

1. Все реагенты перед проведением анализа были перемешаны и доведены до комнатной температуры.

2. Внесли в соответствующие лунки по 20 мкл калибровочных проб, контрольной и исследуемой сыворотки.

3. Добавили 100 мкл буфера AMH Gen II в каждую лунку.

4. Инкубировали стрипы в течение 1 часа при комнатной температуре при встряхивании на шейкере со скоростью 600-800 об/мин.

5. По окончании инкубации удаляли содержимое лунок декантированием и промывали лунки 5 раз.

6. Добавляли во все лунки по 100 мкл конъюгата.

7. Инкубировали стрипы в течение 1 ч при комнатной температуре и встряхивании на шейкере со скоростью 600-800 об/мин.

8. По окончании инкубации удаляли содержимое лунок декантированием и промываем лунки 5 раз.

9. Добавляли по 100 мкл стрептавидин-ферментного конъюгата в каждую лунку.

10. В течение 30 мин инкубировали стрипы при комнатной температуре и встряхивании на шейкере со скоростью 600-800 об/мин.

11. По окончании инкубации удаляли содержимое лунок декантированием и промываем лунки 5 раз.

12. Внесли во все лунки по 100 мкл раствора ТМБ и инкубировали стрипы в темноте при комнатной температуре в течение 10 минут.

13. Добавляем во все лунки по 100 мкл стоп-реагента для остановки ферментной реакции.

14. Оптическую плотность раствора измеряли при длине волны 450 нм.

15. Концентрацию гормона в определяемых образцах рассчитывали на основании калибровочного графика.

Рассчитывают отношение ДГТС к АМГ, и если числовое значение данного соотношения составляет 30,86 или ниже, прогнозируют нарушение репродуктивной функции у данного мальчика в пубертатном периоде развития (13-14 лет).

Работоспособность заявляемого способа подтверждается следующими клиническими примерами.

Пример №1.

Пациент Т-ко Вадим, 11 лет 6 мес. При обследовании на поликлиническом приеме - жалобы на повышенный аппетит и избыточный вес. При объективном обследовании: правильное телосложение, повышенное питание с преимущественным отложением жира в абдоминальной области. ИМТ равен 23,53 кг/м2. Диагностировано ожирение 2 степени. Кожа чистая, стрий не выявлено, щитовидная железа не пальпируется. Запорами не страдает. Половые органы развиты по мужскому типу, половая формула A1P1G1. Проведены лабораторные исследования: половые гормоны ЛГ=1,32 мМЕ/мл, ФСГ=1,9 мМЕ/мл, тестостерон=3,97 нмоль/л, таким образом уровень гормонов соответствует допубертатным значениям. Дополнительно нами был определен уровень лептина=10,46 нг/мл, и рассчитано соотношение лептина/ИМТ=0,44, что говорит о развитии лептинорезистентности. В связи с чем нами далее исследованы уровни АМГ (18,8 нг/мл) и ДГТС (280,62 пг/мл). Хотя показатели АМГ не так высоки как в препубертате, однако низкие показатели ДГТС для данного возраста, по сравнению с контролем свидетельствуют о задержке реагирования половых гормонов, поэтому именно соотношение ДГТС/АМГ=14,93 может служить более точным диагностическим критерием к прогнозированию задержки полового развития, т.к. позволяет предположить риск задержки полового развития в пубертате. От дальнейшего проведения диагностической пробы с ХГЧ и назначения стимулирующей терапии родители мальчика отказались.

Пациенту была назначена субкаллорийная диета, занятия лечебной физкультурой, динамическое наблюдение. На повторном приеме через 6 месяцев выяснилось, что родители рекомендации по диете подростка не соблюдали, в возрасте 13 лет и 10 месяцев выявлены прежние жалобы на избыточный вес, отставание в росте. Диагностирована задержка полового развития.

Пример №2.

Пациент Б-ов Максим, 12 лет. Жалобы на отставание в росте и половом развитии. При объективном обследовании: гиперстеническое телосложение, повышенное питание с преимущественным отложением жира в абдоминальной области. Диагностировано ожирение 2 степени. ИМТ равен 23,92 кг/м2. Кожа чистая, стрий не выявлено, щитовидная железа не пальпируется. Запорами не страдает. Половые органы развиты по мужскому типу, половая формула A1P1G1. Проведены лабораторные исследования: половые гормоны ЛГ=0,78 мМЕ/мл, ФСГ=0,81 мМЕ/мл, тестостероне=1,41 нмоль/л, таким образом уровень гормонов соответствует допубертатным значениям. Проведены биохимические исследования с определением жирового, углеводного и липидного обмена, а также уровня лептина (10,89 нг/мл) и рассчитано соотношение лептина/ИМТ, равное 0,46, которое свидетельствует о развитии лептинорезистентности. В связи с чем нами дополнительно определены уровни ДГТС и АМГ, и рассчитано их соотношение ДГТС/АМГ, которое составило 30,86, что свидетельствует о возможной задержке полового развития в пубертатном периоде.

Пациенту была назначена субкалорийная диета, занятия лечебной физкультурой, динамическое наблюдение. Проведена стимуляционная проба с ХГЧ с положительным ответом. В связи с чем в стандартной дозе назначен с целью стимуляции полового развития ХГЧ. Через 6 месяцев на консультативном приеме у подростка отмечается снижение веса, увеличение роста и изменение половой формулы на A2P3G2. Данный пример показывает эффективность использования заявляемого способа для своевременной диагностики и начала стимулирующей терапии.

Пример №3.

На поликлинический прием поступил пациент М-в Курбан, 11 лет 8 мес, жалобы на избыточный вес. При объективном осмотре выявлено гиперстеническое телосложение, повышенное состояние питания с равномерным распределением подкожно жирового слоя. Диагностировано ожирение 2 степени. ИМТ равен 24,24 кг/м2. Кожа чистая, стрий не выявлено, щитовидная железа не пальпируется. Запорами не страдает. Половые органы развиты по мужскому типу, половая формула A1P2G2. Проведены лабораторные исследования: половые гормоны ЛГ=2,86 мМЕ/мл, ФСГ=3,16 мМЕ/мл, тестостерон=11, 67 нг/мл. Так как мальчик страдает ожирением, нами с прогностической целью определен уровень лептина (10,57 нг/мл) и рассчитано соотношение Лептина/ИМТ, равное 0,44, что свидетельствует о развитии лептинорезистентности. Дополнительно исследовали показатели ДГТС и АМГ и рассчитывали их соотношение ДГТС/АМГ=35,22. В данном случае исследованные показатели свидетельствуют об отсутствии угрозы задержки полового развития в пубертатном периоде у обследуемого и не требуют проведения диагностического теста с ХГЧ и назначения стимулирующей гормональной терапии. Пациенту была назначена субкаллорийная диета, занятия лечебной физкультурой, динамическое наблюдение.

Заявляемый способ был апробирован на большом клиническом материале. В нашем обследовании приняли участие 70 школьников 11-12 лет пяти районов г.Ростова-на-Дону. Исследования проводились на базе НИИ биологии ЮФУ. Все обследованные мальчики были осмотрены эндокринологами Научно-исследовательского института акушерства и педиатрии. Все исследования проводились в соответствии с международными биоэтическими нормами. Родители участников исследования были проинформированы о целях и рисках исследования и в письменном виде подтвердили согласие на участие своих детей в исследовании.

Обследование проводилось по единому алгоритму. Критериями исключения из обследования служили наличие генетических заболеваний, синдромов и органические поражения ЦНС. Для оценки избытка массы тела и степени ожирения рассчитывали индекс массы тела (ИМТ), определяли SDS ИМТ, соответствующие возрасту и полу и классификацию массы тела по Князеву Ю.А. (1982 г.). Оценку полового развития проводили на основании визуального осмотра и классификации стадий полового развития с помощью шкалы Таннер (Y. Tanner 1996 г.). Гормональные исследования включали определение в сыворотке крови: лютеинизирующего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), Тестостерона (ТС), антимюллерова гормона (АМГ), Ингибина-B, дегидротестостерона (ДГТС), пролактина, андростендиона, лептина.

Повышение уровня АМГ в препубертатном периоде ассоциировано со сниженной концентрацией дегидротестостерона (ДГТС) и именно соотношение ДГТС/АМГ более полно отражает функциональное состояние репродуктивных органов у мальчиков и косвенно свидетельствует о начале пубертата, когда импульсная секреция ЛГ стимулирует образование андрогенов в клетках Лейдига. Раннее выявление детей, относящихся к группе риска, и своевременное начало лечебных мероприятий позволит предотвратить формирование в дальнейшем репродуктивных нарушений. На начальных этапах на 1-й план выходят меры, направленные на борьбу с ИМТ. Это выработка мотивации, регулирование и исправление пищевых привычек, оптимизация двигательного режима.

Статистическая обработка результатов исследования включала следующие методы: анализ биохимических показателей проводили с использованием лицензионного пакета STATISTICA версии 6.0. Статистическую обработку данных проводили с помощью t-критерия Стьюдента. Статистически значимыми считались различия при p<0,05.

ROC-характеристики критериев:

- лептин/ИМТ - чувствительность 82%, специфичность 84%, AUC 0,833 (p=0,0005);

- ДГТС/АМГ - чувствительность 76%, специфичность 69%, AUC 0,738 (p=0,0125).

Преимущества заявляемого способа состоят в том, что

- он имеет достаточно высокие показатели чувствительности и специфичности, что делает данный метод информативным и позволяет судить о наличии лептинорезистентности, даже при второй степени ожирения;

- соотношение ДГТС/АМГ у детей с ожирением 11-12 лет позволяет прогнозировать на ранних стадиях формирование задержки полового развития;

- показатели ДГТС/АМГ у детей с ожирением 11-12 лет можно в дальнейшем использовать как критерий эффективности проводимой терапии;

- отсутствуют ограничения, характерные для стандартного диагностического алгоритма.

Таким образом, заявляемый способ прогнозирования задержки полового развития у мальчиков препубертатного возраста с ожирением будет способствовать своевременному принятию мер, направленных на безопасную стабилизацию функций организма и позволяющих избежать развития репродуктивных нарушений и проблем социальной адаптации в последующей жизни.

Способ прогнозирования задержки полового развития у мальчиков препубертатного возраста с ожирением путем исследования крови, отличающийся тем, что у мальчиков в 11-12 лет определяют методом ИФА в сыворотке крови уровень лептина, рассчитывают индекс массы тела (ИМТ) и соотношение лептина к ИМТ, и если оно 0,4 и более, дополнительно методом ИФА определяют уровни дегидротестостерона (ДГТС) и антимюллерова гормона (АМГ), и если их соотношение составляет 30,86 и менее, прогнозируют задержку полового развития у мальчиков в пубертатном периоде.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к терапии, пульмонологии, фтизиатрии. Изобретение представляет способ дифференциальной диагностики саркоидоза органов дыхания и туберкулеза у мужчин путем анализа биологической жидкости, отличающийся тем, что определяют количество прогестерона при первичном обследовании, затем определяют коэффициент вероятности P по формуле Р = 1 е − ( 3,243942 − 0,8692291 × Х 1 ) + 1 , где P - коэффициент вероятности того, что бинарный отклик примет значение 1; e - основание натурального логарифма, равное примерно 2,718282; 3,243942 - полученный нами коэффициент смещения; (-0,8692291) - полученный нами коэффициент наклона; X1 - значение уровня прогестерона у конкретного пациента в нмоль/л, при значении P выше 0,61 пациента относят к группе пациентов с активным туберкулезом, при значении P ниже чем 0,61 - к группе с саркоидозом органов дыхания.

Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и может быть использовано для оценки степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больных острыми заболеваниями брюшной полости.
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогнозирования течения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. Для этого определяют шкалу суммарного измерения качества жизни, а также показатель психического здоровья (MH), показатель жизнеспособности (VT), показатель стандартного отклонения полного массива кардиоинтервалов (SDNN), уровень показателей провоспалительных (IL-1β, IL-6, ФНО-α) и противовоспалительного (IL-4) интерлейкинов.

Изобретение относится к медицине, в частности к области лечения гнойных ран, и описывает способ определения эффективности лечения воспалительного процесса гнойных ран под физиотерапевтическим воздействием, а именно под воздействием низкочастотной ультразвуковой кавитации.
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для оценки эффективности терапии саркоидоза органов дыхания I-II стадии у мужчин.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ определения риска развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с гипертонической болезнью путем забора крови у больных, определения в крови уровня интерлейкина-1α, рецепторного антагониста интерлейкина-1 иммуноферментным методом, отличающийся тем, что определяют показатель, равный отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α, фактор ингибирования лейкозных клеток в крови и количество CD34 клеток с последующим диагностированием развития сердечно-сосудистых осложнений в течение 5 лет, при этом устанавливают высокий, средний или низкий риски развития осложнений.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для уменьшения риска повреждения органов фетоплацентарной системы в третьем триместре гестации при обострении герпес-вирусной инфекции на 12 неделе гестации.
Изобретение относится к ветеринарной медицине и биологии, в частности к гистологической технике, и может быть использовано для изготовления гистологических препаратов нематод (круглых гельминтов) при проведении научных морфологических исследований в ВУЗах и НИИ ветеринарного и биологического профиля.

Изобретение относится к ветеринарной медицине и биологии, в частности к гистологической технике, и может быть использовано для изготовления гистологических препаратов нематод (круглых гельминтов) при проведении научных морфологических исследований в ВУЗах и НИИ ветеринарного и биологического профиля.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования общей выживаемости у больных с метастазами колоректального рака в печени после ее резекции, включающий определение клинико-патологических (морфологических), гистологических и молекулярных факторов прогноза, отличающийся тем, что с помощью иммуногистохимического метода проводят исследование молекулярных характеристик микроокружения опухоли, а именно наличие и количество сосудов с гладкомышечным актином в их стенке для стромы метастаза печени в трех полях зрения микроскопа, при этом поля зрения выбирают по максимальной выраженной иммуногистохимической реакции с каждого среза биоптата печени с метастатической опухолью и при наличии в каждом из трех полей зрения сосудов с наличием гладкомышечного актина в их стенке, пациента определяют в группу благоприятного прогноза (дожитие после резекции печени три года и более), при отсутствии сосудов с наличием в стенке гладкой мускулатуры во всех трех полях зрения, пациента включают в группу неблагоприятного прогноза (с продолжительностью жизни меньше двух лет).
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано при проведении холецистэктомии у пациентов с желчнокаменной болезнью. Для этого предварительно определяют индекс массы тела (ИМТ) пациентов, уровень гликемии, глюкозурии, осуществляют измерение артериального давления, выявляют наличие остеохондроза позвоночника и артроза коленных суставов. После этого оценивают полученные результаты и присваивают им балльную оценку. При ИМТ, равном 28-30 кг/м2, присваивают 10 баллов. При значениях ИМТ 30-35 кг/м2 - 15 баллов. При ИМТ более 35 кг/м2 - 20 баллов. При наличии гликемии более 5,5 ммоль/л устанавливают 3 балла. В случае глюкозурии - 5 баллов. Наличие артериальной гипертензии более 140/190 мм рт.ст. оценивают в 3 балла. Выявленные остеохондроз позвоночника оценивают в 3 балла, артроз коленного сустава - в 3 балла. Полученные баллы суммируют. Если общая сумма баллов составляет 23, выполняют холецистэктомию с билиопанкреатическим шунтированием. Если от 14 до 22 баллов - осуществляют лапароскопическую холецистэктомию. В случае, если полученный результат составляет менее 13 баллов, - выполняют холецистэктомию традиционным способом. Изобретение обеспечивает выбор способа холецистэктомии с учетом метаболического статуса и степени ожирения и как следствие нормализацию массы тела и компенсацию компонентов метаболического синдрома. 2 табл., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано в лечебных учреждениях для оценки риска метаболического синдрома (МС). Определяют диагностические показатели клинико-лабораторными и функциональным методами с последующим расчетом прогностического индекса. У пациента в комплексе определяют следующие диагностические параметры: антропометрический - индекс Кетле, липидного обмена - апопротеиновый коэффициент атерогенности, функционального состояния печени - аланинаминотрансфераза, липопероксидации - отношение малонового диальдегида к антиоксидантной активности, показатели центральной гемодинамики - систолическое артериальное давление и сердечный индекс. В качестве прогностического показателя, определяющего степень выраженности метаболических нарушений, используют прогностический индекс как суммарное значение определенных клинико-лабораторными и функциональным методами значений диагностических показателей, который определяют по формуле. По полученному значению формулы прогнозируют отсутствие риска развития метаболического синдрома, низкий риск, средний риск или высокий риск развития метаболического синдрома. Способ позволяет прогнозировать выраженность МС за счет оценки диагностических показателей и своевременно проводить терапию для предотвращения прогрессирования МС и сердечно-сосудистых осложнений. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано для определения присутствия патогенных микроорганизмов в биологических образцах. Устройство для микробиологического анализа образцов жидкостей тела содержит зону инкубации для контейнеров, содержащих указанные образцы, анализатор для анализа внутренней атмосферы указанных контейнеров и систему сортировки для сортировки контейнеров в соответствии с содержанием диоксида углерода, обнаруженным указанным анализатором. При этом система сортировки сортирует контейнеры, приходящие из указанной зоны инкубации, для подразделения указанных контейнеров на положительные контейнеры, предназначенные для анализа для идентификации микроорганизмов, присутствующих в соответствующих образцах; отрицательные контейнеры, на которых не требуется выполнение анализа для идентификации микроорганизмов; неопределенные контейнеры, которые подвергаются второй инкубации. Изобретение обеспечивает упрощение и ускорение анализа биологических образцов на присутствие патогенных микроорганизмов. 9 з.п. ф-лы, 8 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки влияния искусственного света на факторы врожденного иммунитета. Для этого оценивают влияние света, генерируемого светодиодами, лампами накаливания, люминесцентными лампами на нейтрофильные гранулоциты, выделенные из периферической крови здоровых доноров. На нейтрофильные гранулоциты, in vitro, действуют искусственным светом в пределах световой температуры 4000 К с энергетической освещенностью излучения 0,03 Вт/м2 при длинах волн от 320 до 400 нм в течение различных временных интервалов. При этом регистрируют наличие или отсутствие изменений в виде повышения фагоцитарной, повышения лизосомальной активности, снижение биоцидных возможностей нейтрофилов, регистрируемых в тесте восстановления нитросинего тетразолия. Использование данного способа позволяет оценить биобезопасность новых искусственных источников света, внедряемых в цветосветовую среду обитания человека, используя культуру клеток врожденного иммунитета и исключая прямое участие человека. 3 табл.

Изобретение относится к области медицины. Сущность способа прогнозирования вероятности развития рестеноза с учетом локализации стента в правой коронарной артерии, огибающей артерии состоит в том, что на момент стентирования осуществляют забор крови пациента и регистрируют в физических величинах значения протромбинового индекса, коэффициента атерогенности, липопротеидов очень низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, вычисляют величину стеноза S. После чего рассчитывают коэффициент вероятности развития рестеноза R, соответствующий прогнозируемой величине рестеноза через 6 месяцев, по формуле. При этом адекватность прогнозируемой величины рестеноза через 6 месяцев после стентирования обеспечивается для следующих интервалов: при локализации стеноза в огибающей артерии 0<R<40; при локализации стеноза в ветвях тупого края 0<R<50, 90<R<100; при локализации стеноза в правой коронарной артерии 0<R<50; при локализации стеноза в передней межжелудочковой артерии 0<R<100. Использование заявленного способа позволяет осуществить раннее прогнозирование рецидивов сердечнососудистых осложнений, в частности развития рестеноза, повторного сужения сосудов сердца после стентирования в правой коронарной артерии, огибающей артерии, в передней межжелудочковой артерии и ветвях тупого края. 4 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития врожденных инфекций путем определения количества специфических антител классов Ig М и Ig G в биологическом материале, отличающееся тем, что в качестве биологического материала используют мазок со слизистой оболочки цервикального канала при первичном обследовании в сроке до 12-й недели гестации, одновременно в мазках определяют количество антител Ig М и Ig G к вирусу краснухи, цитомегаловирусу, парвовирусу B19V, токсоплазмам, вирусу простого герпеса 1 и 2 типов и величины авидности специфических Ig G к этим возбудителям, дополнительно в том же мазке определяют уровень секреторного неспецифического Ig A методом РИФ к антигенам цитомегаловируса, хламидий, микоплазм, и генетического материала этих микроорганизмов методом ПЦР и в зависимости от полученных результатов прогнозируют группы высокого, умеренного или низкого риска развития врожденных инфекций. Изобретение обеспечивает повышение точности прогноза риска наиболее актуальных врожденных инфекций за счет комплексной оценки совокупности клинико-анамнестических данных и количественных параметров результатов лабораторных исследований при первичном обследовании беременных. 3 пр.

Изобретение относится к судебной медицине и биохимии и может быть использовано для установления причины смерти, обусловленной наличием синдрома эндогенной интоксикации. Сущность изобретения: определяют содержание пептидов средней молекулярной массы (ПСММ) модифицированным способом определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях в стекловидном теле глаза и сыворотке крови трупа. При содержании ПСММ в стекловидном теле более 0,50 г/л и в сыворотке крови более 2,8 г/л диагностируют синдром эндогенной интоксикации. Использование способа обеспечивает повышение точности, достоверности способа, возможность диагностики в течение длительного постмортального периода. 4 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ оценки жизнеспособности клеток в микробиореакторе с помощью оптического световода. Способ включает помещение клеток в мембранную ячейку сменного клеточного блока микробиореактора, приготовление рабочего раствора витального красителя, внесение красителя в ячейку микробиореактора. После внесения осуществляют инкубацию клеток в растворе витального красителя и удаление несвязавшегося с клетками раствора витального красителя. Удаление осуществляют путем замены раствора инкубации на ростовую среду, не содержащую краситель. При этом оптический световод, соединенный со спектрометром, приводят в контакт с оптически прозрачным материалом сменного клеточного блока под мембранной ячейкой микробиореактора. Далее измеряют опорный спектр флуоресцентного сигнала как интеграл интенсивности флуоресценции на мембранной ячейке микробиореактора, в которой отсутствуют исследуемые клетки. Также измеряют спектр флуоресцентного сигнала как интеграл интенсивности флуоресценции на мембранной ячейке микробиореактора с исследуемыми клетками. После из полученного спектра флуоресцентного сигнала для мембранной ячейки с исследуемыми клетками вычитают опорный спектр флуоресцентного сигнала для мембранной ячейки микробиореактора без исследуемых клеток. Вычисляют количество жизнеспособных клеток в мембранной ячейке микробиореактора на основании полученной величины интенсивности сигнала флуоресценции. Изобретение позволяет быстро определить жизнеспособность клеток под влиянием воздействующих факторов в режиме реального времени в микробиореакторе. 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 5 табл., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения выраженности воспалительного процесса при остеоартрозе. Сущность способа состоит в том, что проводят люминолзависимую железоиндуцированную хемилюминесценцию модельной системы, которая имеет следующий состав: 2,72 г KH2PO4, 7,82 г KCl, 1,5 г цитрата натрия C6H8O7Na3*5,5H2O на 1 литр дистиллированной воды, pH 7,45 с 0,2 мл 10-5 М раствора люминола, затем в присутствии синовиальной жидкости определяют интенсивность свечения модельной системы до и после добавления синовиальной жидкости. Рассчитывают степень подавления интенсивности хемилюминесценции модельной системы по формуле. При ее значении от 1,71 до 6,48% определяют высокую активность воспалительного процесса, от 6,49 до 21,55% - среднюю активность, от 21,56 до 55,46% - малую активность. Использование способа позволяет уменьшить время определения и повышает точность оценки степени воспалительного процесса при остеоартрозе. 1 табл., 1 ил., 3 пр.
Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к исследованию биологических материалов и описывает способ лабораторной оценки состояния слизистой влагалища в процессе лучевой или химиолучевой терапии злокачественных новообразований на фоне сопроводительной терапии. Способ включает оценку лучевой реакции со стороны слизистой влагалища путем визуального осмотра, а также оценку степени сохранности эпителиального слоя влагалища путем определения наличия лактобацилл и их количества с помощью бактериоскопических и бактериологических исследований, проведение цитологического исследования поверхностных и промежуточных клеток плоского эпителия отделяемого влагалища, оценку количества и наличия повреждений в указанных клетках атрофического и дискератотического характера. Лабораторные исследования проводят до начала лучевого воздействия, повторяют при подведении суммарной очаговой дозы (СОД) 20 Гр, 40 Гр и 60 Гр и через 1 месяц после окончания лечения. Изобретение характеризуется доступностью и низкой себестоимостью и может быть использовано в клинической практике для объективной оценки состояния слизистой влагалища в процессе лучевой терапии злокачественных новообразований, в частности для оценки ранних лучевых реакций и повреждений слизистой влагалища, формирующихся в процессе терапии или в ближайшие 3 месяца после нее, для прогнозирования развития радиационных осложнений во влагалище и, при необходимости, корректировки режима лучевого воздействия, для повышения комплаентности лучевой терапии. 1 пр.
Наверх