Способ оценки воздействия искусственного света на функции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови


 


Владельцы патента RU 2531051:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Южно-Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки влияния искусственного света на факторы врожденного иммунитета. Для этого оценивают влияние света, генерируемого светодиодами, лампами накаливания, люминесцентными лампами на нейтрофильные гранулоциты, выделенные из периферической крови здоровых доноров. На нейтрофильные гранулоциты, in vitro, действуют искусственным светом в пределах световой температуры 4000 К с энергетической освещенностью излучения 0,03 Вт/м2 при длинах волн от 320 до 400 нм в течение различных временных интервалов. При этом регистрируют наличие или отсутствие изменений в виде повышения фагоцитарной, повышения лизосомальной активности, снижение биоцидных возможностей нейтрофилов, регистрируемых в тесте восстановления нитросинего тетразолия. Использование данного способа позволяет оценить биобезопасность новых искусственных источников света, внедряемых в цветосветовую среду обитания человека, используя культуру клеток врожденного иммунитета и исключая прямое участие человека. 3 табл.

 

Способ оценки воздействия искусственного света, генерируемого различными источниками, лампами накаливания, люминесцентными лампами, светодиодами, на функции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови относится к медицине, в частности к исследованиям нейтрофилов крови при действии факторов различной природы, и может быть использован для оценки влияния света, генерируемого искусственными источниками освещения, на клеточные факторы врожденного иммунитета.

В настоящее время для оценки влияния света, генерируемого искусственными источниками, используется анализ функций зрительного анализатора, который позволяет не только диагностировать патофизиологические процессы органа зрения, но и предложить решение гигиенических проблем, связанных с использованием осветительных приборов [Гусельников М.Э., 2008; Кучма В.Р. и соавт, 2013]. С обнаружением нового типа фоторецепторов в глазу и фотоакцепторов у нейтрофилов появилось понимание невизуального биологического влияния света на организм [Махмутхджаев А.Ш., 1999; Брейнард Г.К. и соавт, 2008]. При попадании света в клетки, имеющие специфические рецепторы, начинается сложная химическая реакция (с участием фотопигмента меланопсина) с продуцированием электрических импульсов. Эти клетки имеют тесные связи с двумя образованиями в мозгу: супрахиазматическими клетками (SCN) и с эпифизом, регулирующим секрецию определенных гормонов в организме [Brainard G.C. et al., 2002]. В сетчатке глаза световые волны определенной длины волны превращаются в энергию нервного импульса, которая передается по зрительному нерву в верхнюю часть спинного и в затылочную долю головного мозга, влияя на основные центры управления организмом, расположенные в головном мозге, в том числе на деятельность врожденных иммунных механизмов регуляции, осуществляемых нейтрофилами. Индивидуальная особенность нейтрофилов - наличие фоторецепторов, позволяющих данному типу клеток индивидуально реагировать на квант света [Долгушин И.И., 2001; Гизингер О.А. и соавт, 2013].

Способ оценки биологических эффектов действия искусственных источников света по изучению показателей зрительного анализатора имеет важное значение для определения риска возникновения как патологии органа зрения, так и системных патологических процессов [Биске К. и соавт., 2008; Зак П.П., 2012]. Однако используемый в качестве монометодики такой способ оценки действия света имеет определенные недостатки. В частности, использование человека как объекта исследования, дискомфорт, создаваемый для обследуемых при проведении эксперимента и приводящий к субъективной оценке результатов при проведении исследований in vivo, особенности нервно-психического статуса испытуемых на момент проведения исследования приводит снижению валидности получаемых результатов. Используется также биохимическая оценка влияния света, генерируемая различными искусственными носителями, в том числе и светодиодными, позволяющая выявлять возможные эндокринные нарушения [Анисимов В.Н., 2008] Однако чувствительность и специфичность такого метода не может быть очень высокой из-за вариабельности биохимических показателей, отсутствия строгих критериев включения и исключения испытуемых из обследования, высокой стоимости химических реактивов, человеческих трудозатрат.

В качестве одного из методов изучения действия искусственного света предлагается проведение анализа умственной работоспособности и утомляемости, свето- и цветовосприятия с применением методов психологического тестирования. При этом психологическое тестирование может установить лишь нервно-психическое состояние обследуемых, не затрагивая других физиологических показателей, и также не лишено субъективных подходов [Кришталь В.С., 2005]. Вместе с тем, значения отдельно взятых параметров, полученных по результатам тестирования, анкетирования либо комплекса тестирование + анкетирование не всегда отражают истинного состояния влияния света на все органы и системы человека, что связано с многообразием сопровождающих системные дисфункции нарушений [Долгушин И.И., 2001].

Известны литературные данные о прогнозировании риска возникновения патологии сердечно-сосудистой системы при действии освещения, генерируемого искусственными источниками освещения по оценке степени вариабельности сердечного ритма и анализе вегетативного показателя ритма сердца [Кудряшов Е.А., 2008]. Данный способ используется в медицине, но имеет ограниченное применение, вследствие сложного дорогостоящего оборудования, применяемого в данной методике.

Существуют методы, позволяющие при помощи анкетирования оценить влияние света на психосоматическое состояние обследуемых, однако при их использовании также не исключено влияние субъективных эндогенных и экзогенных факторов, влияющих на результаты исследования [Кучма В.Р., 2013]. Поскольку значения, полученные при данных методах исследований, могут быть ошибочными, например при проведении анкетирования или анализе биохимических показателей крови, то наиболее точным отражением выраженности действия света, генерируемого светодиодными носителями, может стать изучение действия света на модели клеток, имеющих фоторецепторы для квантов света [Клебанов Г.И., 1999; Козель А.И., 2000; Каш, T.I, 1987].

Известен способ «Оценки эффективности дезинтоксикационной терапии при воздействии токсинов различной природы» [Заявка №2334989 RU. МПК G01N 33/68. Способ; опубл. 27.09.2008]. Данный способ применяется в медицине, в частности при исследованиях нейтрофилов крови при действии токсинов различной природы, но имеет ограниченное применение, вследствие трудностей изучения ферментных систем нейтрофилов in vivo, дороговизны трудозатрат при проведении методики и невозможности его широкого использования в лабораториях. Поскольку других подобных методов оценки влияния экзогенных факторов на нейтрофильные гранулоциты нами найдено не было, то данный способ взят за прототип.

В основу изобретения положена задача, заключающаяся в создании экспериментальной модели, дающей возможность статистически грамотно оценить действие света, генерируемого светодиодными или иными искусственными источниками на нейтрофильные гранулоциты, выделенные из периферической крови здоровых доноров.

Указанная задача решается за счет того, что в нашем способе биологическая оценка действия света, генерируемого светодиодными или иными искусственными источниками света, происходит в более короткие сроки с полноценным клиническим и функциональным результатом, исключая прямое участие человека как модели для проведения эксперимента. Применение способа не требует дорогостоящей аппаратуры, дефицитных химических реактивов, доступно в практике санитарно-гигиенических служб, особенно важно при оценке биобезопасности новых, внедряемых в цветосветовую среду светодиодных источников, расширяет информацию о биологических эффектах света оптического диапазона.

Заявляемый способ позволяет объективно оценивать действия физических факторов на организм человека при использовании моделей клеточных культур нейтрофильных гранулоцитов. Ранее с помощью анализа клеточных культур проводилась оценка влияния низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы периферической крови доноров и секретов урогенитального тракта в условиях эксперимента [Гизингер О.А. и соавт, 2009].

Однако мы впервые предлагаем использовать данный метод изучения биологических эффектов влияния света, генерируемого светодиодными и иными искусственными источниками.

Для решения вышеуказанной задачи была исследована функциональная активность нейтрофилов клинически здоровых людей - добровольцев в возрасте от 18 до 22 лет. Для выделения нейтрофилов кровь забирали из локтевой вены в объеме 10 мл с антикоагулянтом гепарином в количестве 50 ед./мл. Для выделения чистой фракции нейтрофилов 2 мл крови смешивали с 3 мл стерильного физиологического раствора (0,9% раствор натрия хлористого), наслаивали на градиент плотности стерильных растворов фиколла («Pharmacia», Швеция) и верографина («Spofa», Чехия), плотность верхнего слоя 1,075-1,077 г/см3, нижнего - 1,093-1,095 г/см3 и центрифугировали 40 мин при 1500 оборотах в минуту. Кольцо нейтрофилов собирали, переносили в стерильные центрифужные пробирки, отмывали от градиента стерильным раствором Хенкса путем центрифугирования при 1500 оборотах в минуту дважды по 7 минут, после чего доводили до концентрации 5×106 клеток/мл случайным образом делили на 4 группы, на которые в течение 10, 20 и 30 мин при температуре 37°C в диапазоне длин волн 320-400 нм, цветовой температуре 4000-4500 К при интенсивности действия светового потока 0,03 Вт/м2 воздействовали различными искусственными источниками света: группа 1 (контрольная) - пробы находились при естественном освещении; группа 2 - на пробы воздействовали светом, генерируемым лампами накаливания; группа 3 - на пробы воздействовали светом, генерируемым люминесцентными лампами; группа 4 - на пробы воздействовали светом, генерируемым светодиодами. Опытные и контрольные пробы, содержащие суспензию нейтрофилов, во время облучения находились в специально оборудованных для проведения эксперимента термостатах. Световое поле было конфигурировано таким образом, чтобы в любой точке суспензии нейтрофилов отклонение плотности светового потока составляло не более 10% от заданных параметров излучения. Полученные результаты были подвергнуты статистической с вычислением средней арифметической и ее стандартной ошибки. О достоверности различий средних величин судили с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Различия считали значимыми при р≤0,05.

Качественный анализ показал, что десятиминутное воздействие света, генерируемого как светодиодными, источниками так и лампами накаливания на взвесь нейтрофильных гранулоцитов, не привело к достоверным изменениям их лизосомальной и фагоцитарной активности, кислородзависимого метаболизма, функционального резерва (р>0,05). НСТ-редуцирующая активность нейтрофилов в спонтанном режиме возрастала после воздействия света люминисцентных ламп по сравнению с естественным и светодиодным освещением (р=0,05). Результаты влияния различных источников света на функциональную активность нейтрофилов периферической крови в условиях in vitro представлены в таблице 1.

Таблица 1
Влияние различных источников света на функциональную активность нейтрофилов периферической крови в условиях in vitro (время экспозиции 10 минут), (М±m)
Показатели функциональной активности нейтрофилов Действие на нейтрофилы естественного освещения Действие на нейтрофилы светом, генерируемым лампами накаливания Действие на нейтрофилы светом, генерируемым люминесцентными лампами Действие на нейтрофилы светом, генерируемым светодиодами
люминесценция лизосом, у.е 305,81±14,1 302,91±14,31 306,81±13,92 304,91±14,7
активность лизосом, % 93,79±1,22 94,72±1,22 94,71±1,22 95,79±1,19
НСТ-спонтанный, % клеток 36,59±1,51 35,59±1,51 37,05±1,51 37,09±1,51
НСТ-спонтанный, у.е./клетку 0,41±0,05 0,45±0,03 0,47±0,03 0,47±0,03
НСТ-индуциров., % клеток 60,24±1,41 63,66±1,62 67,47±1,54*† 60,67±1,47
НСТ-индуциров., у.е./клетку 0,69±0,03 0,74±0,033 0,76±0,032 0,81±0,030
функциональный резерв. нейтрофилов 2,33±0,13 2,54±0,14 2,61±0,13 2,66±0,13
активность фагоцитоза, % клеток 57,13±1,50 60,49±1,60 62,21±1,57 64,01±1,34
интенсивность фагоцитоза, у.е./клетку 1,81±0,12 1,83±0,17 1,84±0,12 1,84±0,09
Примечание: * - различие по показателям функциональной активности находящихся при естественном освещении и облученных искусственным светом нейтрофилов in vitro недостоверно, р≥0,05; † - различие по показателям функциональной активности нейтрофилов in vitro между группами при воздействии света, генерируемого лампами накаливания и генерируемого светодиодами, недостоверно, р>0,05.

Анализ данных, полученных после изучения лизосомальной, фагоцитарной активности и биоцидных возможностей нейтрофилов в НСТ-тесте, функционального резерва нейтрофильных гранулоцитов после 20-минутного воздействия также выявил различия в показателях лизосомальной и фагоцитарной активности, освещенных естественным светом, лампами накаливания и светодиодными источниками (р>0,05). После воздействия света люминисцентных ламп резко увеличивалось количество активных клеток в спонтанном НСТ-тесте (р=0,05) по сравнению с естественным освещением и освещением светом, генерируемым светодиодами, усиливался их фагоцитоз и секреторная активность. Полученные результаты свидетельствуют о выраженном иммуностимулирующем влиянии света, генерируемого люминесцентными лампами, тогда как лампы накаливания и светодиодные носители генерируют свет, не вызывающий выраженных иммунологических изменений нейтрофильных гранулоцитов. Результаты представлены в таблице 2.

Таблица 2
Влияние различных источников света на функциональную активность нейтрофилов периферической крови в условиях in vitro (время экспозиции 20 минут), (М±m)
Показатели функциональной активности нейтрофилов Действие на нейтрофилы естественного освещения Действие на нейтрофилы светом, генерируемым лампами накаливания Действие на нейтрофилы светом, генерируемым люминесцентными лампами Действие на нейтрофилы светом, генерируемым светодиодами
люминесценция лизосом, у.е 285,81±15,19 281,91±12,00 387,81±12,92* 299,91±11,71**
активность лизосом, % 83,22±1,22 84,77±1,00 94,91±0,22* 85,69±1,09**
НСТ-спонтанный, % клеток 26,49±1,51 25,00±1,33 45,05±1,22* 26,09±1,09**
НСТ-спонтанный, у.е./клетку 0,37±0,05 0,41±0,034 0,59±0,03* 0,40±0,026**
НСТ-индуциров., % клеток 60,00±1,56 61,22±1,22 71,47±1,00* 61,67±1,33**
НСТ-индуциров., у.е./клетку 0,59±0,03 0,54±0,033 0,96±0,032* 0,51±0,013**
функциональный резерв нейтрофилов 2,00±0,13 2,04±0,14 2,91±0,13* 2,06±0,09**
активность фагоцитоза, % клеток 47,13±1,36 50,49±1,44 71,21±1,67* 50,01±1,24**
интенсивность фагоцитоза, у.е./клетку 1,61±0,12 1,63±0,67 1,94±0,42* 1,64±0,29**
Примечание: * - различие по показателям функциональной активности находящихся при естественном освещении и облученных искусственным светом нейтрофилов in vitro достоверно, р<0,05, ** - различие по показателям функциональной активности нейтрофилов, облученных светом, генерируемым люминесцентными лампами и светодиодами, находящихся при естественном освещении.

При анализе данных, полученных после 30-минутного воздействия света, генерируемого различными источниками, на функциональную активность нейтрофилов также не выявлено статистически значимых различий по показателям активности и интенсивности лизосомального аппарата нейтрофилов, фагоцитарной способности между лампами накаливания, светодиодами и естественным освещением. Отмечены значимые изменения активности нейтрофилов в спонтанном и индуцированном НСТ-тесте, их фагоцитарной функции у клеток, облученных светом, генерируемым люминесцентными лампами, по сравнению с результатами, полученными при естественном освещении клеточной взвеси, воздействии лампами накаливания и светодиодами. Результаты исследования влияния различных источников света на функциональную активность нейтрофилов периферической крови в условиях in vitro представлены в таблице 3.

Таблица 3
Влияние различных источников света на функциональную активность нейтрофилов периферической крови в условиях in vitro (время экспозиции 30 минут), (М±m)
Показатели функциональной активности нейтрофилов Действие на нейтрофилы естественного освещения Действие на нейтрофилы светом, генерируемым лампами накаливания Действие на нейтрофилы светом, генерируемым люминесцентными лампами Действие на нейтрофилы светом, генерируемым светодиодами
люминесценция лизосом, у.е 280,81±14,19 277,91±12,99 377,81±12,00* 280,91±11,98**
активность лизосом, % 80,22±1,02 81,77±1,12 92,91±0,22* 83,69±1,13**
НСТ-спонтанный, % клеток 22,09±1,51 23,00±1,11 46,05±1,09* 24,09±1,12**
НСТ-спонтанный, у.е./клетку 0,27±0,02 0,26±0,004 0,47±0,03* 0,28±0,016**
НСТ-индуциров., % клеток 50,00±1,16 51,22±1,13 76,47±1,20* 53,67±1,00**
НСТ-индуциров., у.е./клетку 0,59±0,03 0,54±0,011 0,76±0,02* 0,51±0,01**
функциональный резерв нейтрофилов 2,10±0,13 2,04±0,14 2,89±0,13* 2,06±0,19**
активность фагоцитоза, % клеток 27,13±1,36 30,49±1,44 41,21±1,67* 30,01±1,24**
интенсивность фагоцитоза, у.е./клетку 1,61±0,12 1,63±0,67 1,44±0,42* 1,64±0,29**
Примечание: * - различие по показателям функциональной активности находящихся при естественном освещении и облученных искусственным светом нейтрофилов in vitro достоверно, р<0,05, ** - различие по показателям функциональной активности нейтрофилов, облученных светом, генерируемым люминесцентными лампами и светодиодами, находящихся при естественном освещении.

Таким образом, воздействие света, генерируемого лампами накаливания, светодиодными источниками света в пределах световой температуры 4000-4500 К, с интенсивностью светового воздействия 0,03 Вт/м2 в диапазоне длин волн 320-400 нм в течение 10-30 минут не приводит к статистически значимому изменению функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов, выделенных из периферической крови клинически здоровых людей-добровольцев при сравнении с естественным освещением. Воздействие на нейтрофилы света люминесцентных ламп приводит к активации кислородзависимого метаболизма и фагоцитарной активности по показателям активности НСТ-теста.

Применение способа оценки воздействия света, генерируемого светодиодными и иными искусственными источниками, на функции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови позволяет решить проблему лабораторного контроля эффективности и биобезопасности искусственных источников света, генерируемых лампами накаливания, люминесцентными лампами и светодиодами.

Предлагаемый способ отличается от существующих тем, что используя культуру клеток врожденного иммунитета, имеющих фоточувствительные рецепторы есть возможность более качественно, без использования человека как объекта при проведении исследований, в in vitro условиях лаборатории оценить биобезопасность искусственных источников света спрогнозировать возможные риски, возникающие при использовании люминесцентных ламп, светодиодов и ламп накаливания, при создании цветосветовой среды обитания человека. Ввиду дешевизны метода и простоты выполнения указанный способ оценки доступен большинству санитарно-гигиенических, иммунологических и микробиологических лабораторий.

Заявляемый способ может найти широкое применение в иммунологии, при проведении санитарно-гигиенической оценки освещенности, что свидетельствует о его соответствии критерию "промышленная применимость".

Литература

1. Анисимов В.Н. Эпифиз, биоритмы и старение организма / В.Н. Анисимов // Успехи физиологических наук. - 2008. - Т.39. - №4. - С.52-60.

2. Брейнард Г.К. Восприятие света как стимула незрительных реакций человека / Г.К. Брейнард, И. Провенсио // Светотехника. - 2008. - №1. - С.6-12.

3. Биске К. Субъективные оценки цветопередачи в зависимости от спектра излучения источников света / К. Биске, К. Вандаал, К. Юнгнич // Светотехника. - 2007. - №5. - C.14-17.

4. Гизингер О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы периферической крови доноров в условиях эксперимента / О.А. Гизингер, К.Г. Ишпахтина, О.Л. Колесников // Иммунология. - 2009. - Т.30, №5. - С.263-267.

5. Гизингер О.А. Исследовательские подходы в области безопасности освещения в условиях мегаполиса / О.А. Гизингер, М.В. Осиков, О.Р. Бокова, и др. // Полупроводниковая светотехника. - 2013. - Т.1, №21. - С.60-61.

6. Гизингер О.А. Функционально-метаболический статус нейтрофилов под воздействием лазерного излучения ИК-диапазона (850 нм) / О.А. Гизингер, К.Г. Ишпахтина, О.Л. Колесников // Актуальные проблемы медицинской науки и практического здравоохранения: тр. науч. сессии, посвящ. 65-летию ЧелГМА. - Челябинск, 2009. - С.11.

7. Долгушин И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин; УрО РАН. - Екатеринбург, 2001. - 258 с.

8. Гигиенические характеристики энергосберегающих источников света [Электронный ресурс] / М.Э. Гусельников [и др.] // Энергетика: экология, надежность, безопасность: материалы докл. 14 Всерос. науч.-техн. конф., 9-11 дек. 2008 г., Томск - Томск, 2008. - Режим доступа: URL: http://www.lib.tpu.ru/fulltexVm/2009/m19.pdf#page=204, (дата обращения 30.05.2013).

9. Зак П.П. Потенциальная опасность освещения светодиодами для глаз детей и подростков / П.П. Зак, М.А. Островский // Светотехника. - №3 - 2012. - С.125-134.

10. Клебанов Г.И. Низкоинтенсивное лазерное облучение вызывает priming лейкоцитов / Г.И. Клебанов // Использование лазеров для диагностики и лечения заболеваний: сб. - М.: ЛАС, 1996. - С.11-14.

11. Козель А.И. Механизм действия лазерного излучения на тканевом и клеточном уровне / А.И. Козель, Г.К. Попов // Вестн. РАМН. - 2000. - №2. - С.41-43.

12. Кришталь B.C. Влияние цветности освещения на психофизиологическое состояние человека / B.C. Кришталь, Ф.П. Говоров // Свiтлотехнiка та електроенергетика. - №5. - 2005. - С.20-24.

13. Кудряшов Е.А. Применение вариабельности сердечного ритма для оценки организма и прогноза заболеваний / Е.А. Кудряшов, Л.М. Лавров // Нижегородский медицинский журнал. - №5. - 2008. - С.52-60.

14. Кучма В.Р. Гигиенические основы использования светодиодов в системах искусственного освещения / В.Р. Кучма, Л.М. Текшева // М. - ФГБУ «Научный центр здоровья детей» РАМН, 2013. - 246 с.

15. Махмутхджаев А.Ш. Метаболические особенности форменных элементов крови после облучения низкоэнергетическим гелий-неоновым лазером / А.Ш. Махмутхджаев // Вопросы медико-биологических наук: сб. ст. по материалам науч. конф. «XXXII Евсеевские чтения». - Саранск, 1999. - С.60-64.

16. Методы изучения фагоцитарных клеток при оценке иммунологического статуса человека: учеб.-метод. пособие / под ред. И.С. Фредлин. - М., 1986. - 37 с.

17. Brainard G.C. Photoreception for regulation ofmelatonin and the circadian system in humans / G.C. Brainard // Fifth International LRO Lighting research symposium, Orlando. 2002. - C.23-26.

18. Karu T.I. Photobiological fundamentals of low-level laser therapy / T.I. Karu // IEEE J. Quant. Elect. - 1987. - Vol.QE-23. - P.1703-1717.

Способ оценки воздействия искусственного света на функции нейтрофильных гранулоцитов периферической крови, включающий оценку эффективности и биобезопасности излучений оптического диапазона света, генерируемых светодиодами, люминесцентными лампами, лампами накаливания с цветовой температурой 4000 К с энергетической освещенностью излучения 0,03 Вт/м2 в диапазоне длин волн 320-400 нм в течение различных временных интервалов, отличающийся тем, что проведен на культуре нейтрофильных гранулоцитов, выделенных из периферической крови доноров, при котором регистрируют наличие или отсутствие изменений в виде повышения фагоцитарной, повышения лизосомальной активности, снижение биоцидных возможностей нейтрофилов, регистрируемых в тесте восстановления нитросинего тетразолия.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано для определения присутствия патогенных микроорганизмов в биологических образцах.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано в лечебных учреждениях для оценки риска метаболического синдрома (МС). Определяют диагностические показатели клинико-лабораторными и функциональным методами с последующим расчетом прогностического индекса.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может быть использовано при проведении холецистэктомии у пациентов с желчнокаменной болезнью. Для этого предварительно определяют индекс массы тела (ИМТ) пациентов, уровень гликемии, глюкозурии, осуществляют измерение артериального давления, выявляют наличие остеохондроза позвоночника и артроза коленных суставов.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования задержки полового развития у мальчиков препубертатного возраста при ожирении. Сущность способа состоит в том, что у мальчиков в возрасте 11-12 лет определяют методом ИФА в сыворотке крови уровень лептина, рассчитывают индекс массы тела (ИМТ) и соотношение лептина к ИМТ.

Изобретение относится к терапии, пульмонологии, фтизиатрии. Изобретение представляет способ дифференциальной диагностики саркоидоза органов дыхания и туберкулеза у мужчин путем анализа биологической жидкости, отличающийся тем, что определяют количество прогестерона при первичном обследовании, затем определяют коэффициент вероятности P по формуле Р = 1 е − ( 3,243942 − 0,8692291 × Х 1 ) + 1 , где P - коэффициент вероятности того, что бинарный отклик примет значение 1; e - основание натурального логарифма, равное примерно 2,718282; 3,243942 - полученный нами коэффициент смещения; (-0,8692291) - полученный нами коэффициент наклона; X1 - значение уровня прогестерона у конкретного пациента в нмоль/л, при значении P выше 0,61 пациента относят к группе пациентов с активным туберкулезом, при значении P ниже чем 0,61 - к группе с саркоидозом органов дыхания.

Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и может быть использовано для оценки степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больных острыми заболеваниями брюшной полости.
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогнозирования течения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. Для этого определяют шкалу суммарного измерения качества жизни, а также показатель психического здоровья (MH), показатель жизнеспособности (VT), показатель стандартного отклонения полного массива кардиоинтервалов (SDNN), уровень показателей провоспалительных (IL-1β, IL-6, ФНО-α) и противовоспалительного (IL-4) интерлейкинов.

Изобретение относится к медицине, в частности к области лечения гнойных ран, и описывает способ определения эффективности лечения воспалительного процесса гнойных ран под физиотерапевтическим воздействием, а именно под воздействием низкочастотной ультразвуковой кавитации.
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для оценки эффективности терапии саркоидоза органов дыхания I-II стадии у мужчин.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ определения риска развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с гипертонической болезнью путем забора крови у больных, определения в крови уровня интерлейкина-1α, рецепторного антагониста интерлейкина-1 иммуноферментным методом, отличающийся тем, что определяют показатель, равный отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α, фактор ингибирования лейкозных клеток в крови и количество CD34 клеток с последующим диагностированием развития сердечно-сосудистых осложнений в течение 5 лет, при этом устанавливают высокий, средний или низкий риски развития осложнений.

Изобретение относится к области медицины. Сущность способа прогнозирования вероятности развития рестеноза с учетом локализации стента в правой коронарной артерии, огибающей артерии состоит в том, что на момент стентирования осуществляют забор крови пациента и регистрируют в физических величинах значения протромбинового индекса, коэффициента атерогенности, липопротеидов очень низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, вычисляют величину стеноза S. После чего рассчитывают коэффициент вероятности развития рестеноза R, соответствующий прогнозируемой величине рестеноза через 6 месяцев, по формуле. При этом адекватность прогнозируемой величины рестеноза через 6 месяцев после стентирования обеспечивается для следующих интервалов: при локализации стеноза в огибающей артерии 0<R<40; при локализации стеноза в ветвях тупого края 0<R<50, 90<R<100; при локализации стеноза в правой коронарной артерии 0<R<50; при локализации стеноза в передней межжелудочковой артерии 0<R<100. Использование заявленного способа позволяет осуществить раннее прогнозирование рецидивов сердечнососудистых осложнений, в частности развития рестеноза, повторного сужения сосудов сердца после стентирования в правой коронарной артерии, огибающей артерии, в передней межжелудочковой артерии и ветвях тупого края. 4 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития врожденных инфекций путем определения количества специфических антител классов Ig М и Ig G в биологическом материале, отличающееся тем, что в качестве биологического материала используют мазок со слизистой оболочки цервикального канала при первичном обследовании в сроке до 12-й недели гестации, одновременно в мазках определяют количество антител Ig М и Ig G к вирусу краснухи, цитомегаловирусу, парвовирусу B19V, токсоплазмам, вирусу простого герпеса 1 и 2 типов и величины авидности специфических Ig G к этим возбудителям, дополнительно в том же мазке определяют уровень секреторного неспецифического Ig A методом РИФ к антигенам цитомегаловируса, хламидий, микоплазм, и генетического материала этих микроорганизмов методом ПЦР и в зависимости от полученных результатов прогнозируют группы высокого, умеренного или низкого риска развития врожденных инфекций. Изобретение обеспечивает повышение точности прогноза риска наиболее актуальных врожденных инфекций за счет комплексной оценки совокупности клинико-анамнестических данных и количественных параметров результатов лабораторных исследований при первичном обследовании беременных. 3 пр.

Изобретение относится к судебной медицине и биохимии и может быть использовано для установления причины смерти, обусловленной наличием синдрома эндогенной интоксикации. Сущность изобретения: определяют содержание пептидов средней молекулярной массы (ПСММ) модифицированным способом определения веществ группы средних молекул в биологических жидкостях в стекловидном теле глаза и сыворотке крови трупа. При содержании ПСММ в стекловидном теле более 0,50 г/л и в сыворотке крови более 2,8 г/л диагностируют синдром эндогенной интоксикации. Использование способа обеспечивает повышение точности, достоверности способа, возможность диагностики в течение длительного постмортального периода. 4 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ оценки жизнеспособности клеток в микробиореакторе с помощью оптического световода. Способ включает помещение клеток в мембранную ячейку сменного клеточного блока микробиореактора, приготовление рабочего раствора витального красителя, внесение красителя в ячейку микробиореактора. После внесения осуществляют инкубацию клеток в растворе витального красителя и удаление несвязавшегося с клетками раствора витального красителя. Удаление осуществляют путем замены раствора инкубации на ростовую среду, не содержащую краситель. При этом оптический световод, соединенный со спектрометром, приводят в контакт с оптически прозрачным материалом сменного клеточного блока под мембранной ячейкой микробиореактора. Далее измеряют опорный спектр флуоресцентного сигнала как интеграл интенсивности флуоресценции на мембранной ячейке микробиореактора, в которой отсутствуют исследуемые клетки. Также измеряют спектр флуоресцентного сигнала как интеграл интенсивности флуоресценции на мембранной ячейке микробиореактора с исследуемыми клетками. После из полученного спектра флуоресцентного сигнала для мембранной ячейки с исследуемыми клетками вычитают опорный спектр флуоресцентного сигнала для мембранной ячейки микробиореактора без исследуемых клеток. Вычисляют количество жизнеспособных клеток в мембранной ячейке микробиореактора на основании полученной величины интенсивности сигнала флуоресценции. Изобретение позволяет быстро определить жизнеспособность клеток под влиянием воздействующих факторов в режиме реального времени в микробиореакторе. 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 5 табл., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения выраженности воспалительного процесса при остеоартрозе. Сущность способа состоит в том, что проводят люминолзависимую железоиндуцированную хемилюминесценцию модельной системы, которая имеет следующий состав: 2,72 г KH2PO4, 7,82 г KCl, 1,5 г цитрата натрия C6H8O7Na3*5,5H2O на 1 литр дистиллированной воды, pH 7,45 с 0,2 мл 10-5 М раствора люминола, затем в присутствии синовиальной жидкости определяют интенсивность свечения модельной системы до и после добавления синовиальной жидкости. Рассчитывают степень подавления интенсивности хемилюминесценции модельной системы по формуле. При ее значении от 1,71 до 6,48% определяют высокую активность воспалительного процесса, от 6,49 до 21,55% - среднюю активность, от 21,56 до 55,46% - малую активность. Использование способа позволяет уменьшить время определения и повышает точность оценки степени воспалительного процесса при остеоартрозе. 1 табл., 1 ил., 3 пр.
Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к исследованию биологических материалов и описывает способ лабораторной оценки состояния слизистой влагалища в процессе лучевой или химиолучевой терапии злокачественных новообразований на фоне сопроводительной терапии. Способ включает оценку лучевой реакции со стороны слизистой влагалища путем визуального осмотра, а также оценку степени сохранности эпителиального слоя влагалища путем определения наличия лактобацилл и их количества с помощью бактериоскопических и бактериологических исследований, проведение цитологического исследования поверхностных и промежуточных клеток плоского эпителия отделяемого влагалища, оценку количества и наличия повреждений в указанных клетках атрофического и дискератотического характера. Лабораторные исследования проводят до начала лучевого воздействия, повторяют при подведении суммарной очаговой дозы (СОД) 20 Гр, 40 Гр и 60 Гр и через 1 месяц после окончания лечения. Изобретение характеризуется доступностью и низкой себестоимостью и может быть использовано в клинической практике для объективной оценки состояния слизистой влагалища в процессе лучевой терапии злокачественных новообразований, в частности для оценки ранних лучевых реакций и повреждений слизистой влагалища, формирующихся в процессе терапии или в ближайшие 3 месяца после нее, для прогнозирования развития радиационных осложнений во влагалище и, при необходимости, корректировки режима лучевого воздействия, для повышения комплаентности лучевой терапии. 1 пр.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано при анализе сыворотки венозной крови человека и животных методом жидкостной хроматографии, а также любым другим методом, непосредственным объектом исследования которого может являться водно-метанольный экстракт, получаемый из высушенной сыворотки крови. Способ получения проб для спектрального биохимического анализа крови, включающий этапы подготовки, высушивания сыворотки крови и получения экстракта для хроматографических исследований, отличается тем, что процесс получения сухого остатка сыворотки крови проводится в условиях постоянного встряхивания при температуре 50-60°C в течение 21-27 часов до получения сухого остатка в виде пробки с уплотнением в центре и пленкой на поверхности, которая прокалывается стерильным и химически интактным предметом, после чего в пробирку с сухим остатком помещается 85% раствор метанола. Полученная смесь снова помещается в устройство для встряхивания при температуре 48-52°C в течение 21-27 часов, после чего уплотняется в центрифуге при ускорении 11500-12500g. Готовая проба переносится в пробирку автосемплера жидкостного хроматографа в объеме, занимающем 3/4-2/3 объема пробирки. Использование настоящего изобретения позволяет получить хроматограммы с воспроизводимостью с относительной погрешностью не более 5% в пределах одной пробы, что является достаточным для обеспечения достоверности результатов анализа сыворотки с использованием жидкостной хроматографии.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики нарушений агрегации тромбоцитов при муковисцидозе у детей, включающий проведение теста на агрегацию тромбоцитов с индукторами на агрегометре «Multiplate», при этом в кюветы с магнитной мешалкой и электродами добавляют 400 мкл NaCl при 37°C и затем сразу добавляют 400 мкл цельной крови из пробирки с гирудином, инкубируют в камере прибора две минуты, затем добавляют в кювету 30 мкл индуктора агрегации, выбранного из группы: растворимый рецептор тромбина - пептид-6, аденозиндифосфат, арахидоновая кислота, при этом скорость агрегации тромбоцитов изображается на экране прибора в виде кривой и автоматически рассчитывается площадь под кривой U, по значению площади U под кривой судят о состоянии агрегации трмбоцитов в сравнении с референсными значениями в группе здоровых детей и при повышении порогового значения площади U выше референсного судят о гиперагрегации тромбоцитов, а при понижении порогового значения площади U ниже референсного судят о гипоагрегации тромбоцитов. Изобретение обеспечивает своевременную диагностику нарушений в микроциркуляторном русле при муковисцидозе. 2 пр., 1 ил.
Изобретение относиться к медицине, а именно к стоматологии, и касается способа диагностики эрозиогенности ротовой жидкости у пациентов с гастроэзофагеальнооральным рефлюксом при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. Способ диагностики эрозиогенности ротовой жидкости у пациентов с гастроэзофагеальнооральным рефлюксом при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, включает забор ротовой жидкости в 7, 14, 19, 23 часа, 3 часа ночи следующего дня и определение химического свойства ротовой жидкости у пациентов с эрозиями зубов и без таковых при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, при этом в ротовой жидкости дополнительно исследуется количество хлоридов и бикарбонатов, изменения которых в наибольшей степени выражены в 23 ч и 3 ч следующего дня, при выявлении количества хлоридов выше референтного, а бикарбонатов ниже референтного значения, выносится решение о эрозиогенности ротовой жидкости, а при выявлении количества хлоридов и бикарбонатов в пределах референтных значений, об отсутствии эрозиоогенности ротовой жидкости гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. Вышеописанный способ позволяет более точно диагностировать эрозиогенность ротовой жидкости у пациентов с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью. 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням. Определяют клинико-анамнестический данные: индекс массы тела (ИМТ), кг/м2; окружность талии (ОТ), окружность бедер (ОБ), отношение ОТ/ОБ, наличие сахарного диабета 2 типа у близких родственников, наличие артериальной гипертензии (АГ). Определяют лабораторные данные: уровень ингибитора активатора плазминогена-1 (ИАПГ-1), нмоль/л; метаболиты окиси азота (NO), %; резистин, нг/мл; инсулинорезистентность (ИР), мМЕ/мл; триглицериды (ТГ), ммоль/л; холестерин липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), ммоль/л; фибриноген, мг/дл; нарушение глюкозы натощак (НГН), ммоль/л; гликированный гемоглобин (HbAlc), %; нарушение толерантности к глюкозе (НТГ), ммоль/л; гомоцистеин (ГЦ), мкмоль/л; ФНО-α, пг/мл; С-реактивный белок, мг/л; эндотелин и фибриноген. Полученным значениям присваивают балльные оценки. На основании значения суммы баллов определяют степень риска развития атеросклероза у больных СД 2 типа: крайне высокий, высокий, средний и низкий. С учетом выявленной степени определяют дозы аспирина и статинов, а также режим мониторинга липидного спектра крови, экскреции альбумина с мочой и показателя креатинина крови. Способ позволяет определить степень риска развития атеросклероза за счет клинико-анамнестических и лабораторных данных, а также выбрать индивидуальную патогенетически терапию для пациента, что приводит к уменьшению развития сердечно-сосудистых осложнений. 4 табл., 1 пр.
Наверх