Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот



Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот
Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот
Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот
Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот
Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот
Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот
Сополимеры на основе n-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых солей кислот

 


Владельцы патента RU 2533113:

Кедик Станислав Анатольевич (RU)

Изобретение относится к химии биологически активных сополимеров, которые могут найти применение в медицине и ветеринарии. Сополимер на основе N-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых аддитивных солей кислот представлен общей формулой (I):

где R обозначает водород или метил; содержание мономерных звеньев n составляет 25-90 мол.%; X обозначает анион фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислоты; k равно 1 или 2; m принимает значения от 0,1 до 1,0; и средневязкостная молекулярная масса сополимера Мµ равна 15-150 кДа. Изобретение позволяет расширить арсенал биологически активных сополимеров, обладающих улучшенными характеристиками растворимости, и проявляющих большую активность в качестве иммуностимулятора, пролонгатора действия антибиотиков, активатора продуцирования IL-1 и фагоцитоза, чем известные аналогичные соединения. 6 табл., 11 пр.

 

Область техники

Изобретение относится к химии биологически активных полимеров. Более конкретно, изобретение обеспечивает сополимер на основе N-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых аддитивных солей кислот, представленный общей формулой (I):

где R обозначает водород или метил;

содержание мономерных звеньев n составляет 25-90 мольн.%;

X обозначает анион фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислоты;

k равно 1 или 2;

m принимает значения от 0,1 до 1,0;

и средневязкостная молекулярная масса сополимера Mµ равна 15-150 кДа.

Уровень техники

В патенте RU 2000004 (опубл. 15.02.1993) раскрыты сополимеры N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина со средневязкостной молекулярной массой в диапазоне 29-45 кДа, содержащие 25-40 мольн.% 2-метил-5-винилпиридиновых звеньев, обладающие иммуностимулирующим действием, а также пролонгирующим действием при введении антибиотиков.

В патенте RU 2015993 (опубл. 15.07.1994) раскрыто получение группы сополимеров со средневязкостной молекулярной массой 40 кДа, аналогичных описанным в публикации RU 2000004, в которых среднестатистическое число 2-метил-5-винилпиридиновых звеньев n равно 35, а также показано их противоопухолевое действие.

В патенте RU 2415876 (опубл. 10.04.2011) раскрыты сополимеры на основе N-винилпирролидона, представленные общей формулой:

где мономерное звено M представляет фрагмент 2-метил-5-винилтетразола (МВТ) или 2-метил-5-винилпиридина (МВП), содержание мономерных звеньев n составляет 25-90 мольн.%, а средневязкостная молекулярная масса сополимера Mµ=46-150 кДа, если М представляет МВП, пригодные для применения в качестве адъювантов при изготовлении вакцин.

В патенте RU 2430932 (опубл. 10.10.2011) раскрыты сополимеры на основе N-винилпирролидона, представленные общей формулой:

где мономерное звено M представляет фрагмент 2-метил-5-винилтетразола (МВТ) или 2-метил-5-винилпиридина (МВП), содержание мономерных звеньев n составляет 25-50 мольн.%, а средневязкостная молекулярная масса сополимера Mµ=15-28 кДа, если M представляет МВП, которые являются активаторами продуцирования интерлейкинов-1, вследствие чего могут быть полезны в качестве противораковых агентов.

В патенте RU 2430933 (опубл. 10.10.2011) раскрыто применение сополимеров на основе М-винилпирролидона, структура которых описывается приведенной выше общей формулой, в качестве активаторов фагоцитоза.

Все перечисленные сополимеры на основе N-винилпирролидона, содержащие фрагменты 2-метил-5-винилпиридина, рассматриваются авторами данного изобретения как его ближайшие аналоги. Их главным недостатком является малая растворимость в слабокислых и нейтральных водных средах (pH 6-7), что затрудняет их эффективное применение при изготовлении инъекционных лекарственных форм. При этом растворимость сополимеров в таких средах при постоянстве их средневязкостной молекулярной массы довольно резко уменьшается с увеличением доли 2-метил-5-винилпиридиновых фрагментов. В результате в слабокислых и нейтральных водных растворах сополимеров, содержащих свыше 55 мольн.% фрагментов МВП, не достигаются эффективные концентрации.

Целью данного изобретения является расширение арсенала биологически активных сополимеров на основе N-винилпирролидона, обладающих улучшенными характеристиками растворимости и активности, которые могут найти применение в медицине и ветеринарии.

Описание изобретения

В результате проведенных исследований авторы изобретения установили, что недостатки известного уровня техники могут быть преодолены путем перевода сополимеров на основе N-винилпирролидона в форму их фармацевтически приемлемых аддитивных солей кислот, представленных общей формулой (I):

где R обозначает водород или метил;

содержание мономерных звеньев n составляет 25-90 мольн.%;

X обозначает анион фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислоты;

k равно 1 или 23;

m принимает значения от 0,1 до 1,0;

и средневязкостная молекулярная масса сополимера Mµ равна 15-150 кДа.

Неожиданно было обнаружено, что, по сравнению с соответствующими основными формами, предлагаемые солевые формы сополимеров общей формулы (I) обладают большей физиологической активностью, например в качестве иммуностимуляторов, активаторов продуцирования цитокинов, таких как интерлейкины-1, пролонгаторов действия антибиотиков при лечении тяжелых бактериальных инфекций и активаторов фагоцитоза. Это позволяет рассматривать их как потенциальные активные компоненты лекарственных средств, в частности, эффективных при лучевых, онкологических и бактериальных поражениях организма.

Предлагаемые солевые формы сополимеров формулы (I) получают радикальной сополимеризацией N-винилпирролидона (N-ВП) и любого из незамещенных (НВП) или замещенных (ЗВП) коммерчески доступных винилпиридинов: 2-винилипиридина (CAS 100-69-6), 4-винилпиридина (CAS 100-43-6), 2-метил-5-винилпиридина (CAS 140-76-1), 3-метил-5-винилпиридина (CAS 51961-51-4), 4-метил-2-винилпиридина (CAS 13959-34-7), 6-метил-2-винилпиридина (CAS 1122-70-9), а также 4-метил-3-винилпиридина в присутствии инициатора, например, динитрила азобис-изомасляной кислоты (ДАК) и агентов обрыва цепи, таких как пероксид водорода и циклогексан, с последующим взаимодействием с кислотой, взятой в виде раствора или в свободном виде.

Ввиду большого различия в константах сополимеризации N-ВП и НВП или N-ВП и ЗВП, последние сомономеры быстро расходуются в процессе сополимеризации, поэтому синтез сополимера заданного состава обеспечивается поддержанием их постоянного соотношения путем компенсации расхода более реакционно-способных мономеров добавлением смеси, содержащей такие мономеры и агенты обрыва цепи. Объем указанной смеси вычисляют каждые 20 минут по результатам определения соотношения концентраций N-ВП и НВП (N-ВП и ЗВП) в реакционной смеси.

Реакцию сополимеризации проводят при температуре 60-70°C. По достижении степени конверсии по мономерам 15-30% реакционную массу охлаждают до 20°C и передают на стадию получения аддитивной соли фармацевтически приемлемой кислоты.

Было установлено, что атомы азота пиридиновых фрагментов сополимеров на основе N-винилпирролидона обладают достаточной основностью для образования солей заданного стехиометрического состава при взаимодействии в водных растворах с сильными неорганическими кислотами, а также с органическими кислотами, имеющими pKa порядка 5. Это позволяет получать сополимеры на основе N-винилпирролидона общей формулы (I) с требуемой растворимостью в водных системах, таких как, например, физиологический солевой раствор.

Не существует принципиальных ограничений, налагаемых на применяемую кислоту, кроме ее силы (pKa порядка 5), физиологической переносимости ее солей и достаточной растворимости получаемой соли общей формулы (I) в заданной водной среде. Поэтому примерами кислот, пригодных для целей изобретения, являются хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, уксусная кислота [в формуле (I) k равно 1], серная кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, яблочная кислота [в формуле (I) k равно 2]. Наиболее предпочтительны хлористоводородная кислота, уксусная кислота, лимонная кислота и янтарная кислота.

Перед взаимодействием с кислотой продукт сополимеризации предпочтительно выделяют осаждением диэтиловым эфиром (ДЭ), отфильтровывают и растворяют в ином растворителе, например, в воде или водно-органическом растворителе, содержащем ацетон или этанол. Такой вариант осуществления изобретения предпочтителен при получении солей прибавлением рассчитанного количества раствора кислоты с последующим выпариванием растворителя.

Альтернативно, гидрохлориды указанных сополимеров могут быть получены барботированием осушенного хлористого водорода через раствор основания сополимера в безводном полярном органическом растворителе, таком как ацетон, хлороформ, хлористый метилен или их смеси.

Строение любого полученного сополимера на основе N-винилпирролидона характеризуется, в частности, числом мономерных звеньев НВП или ЗВП (n) и числом присоединенных молекул кислоты (m). Число n может быть вычислено по данным элементного анализа с учетом стехиометрии сополимера. Число m определяют по результатам титрования. Например, содержание хлорид-, сукцинат- и сульфат-анионов может быть установлено по результатам аргентометрического и бариметрического титрований. Получение необходимых расчетных формул доступно среднему специалисту в данной области.

Альтернативно строение полученного продукта определяют по данным ЯМР-спектрометрии, например 1H-, 13C- или 15N-ЯМР, по соотношениям интегральных интенсивностей сигналов определенных ядер. Решение данной задачи также доступно среднему специалисту в данной области.

Полученные продукты в форме оснований также характеризуют средневязкостной молекулярной массой, которую вычисляют по характеристической вязкости сополимеров. Это необходимо для расчета количества кислот, которое следует прибавить для переведения сополимеров в форму аддитивных солей. Выбор методики и подбор условий измерения вязкости являются рутинной процедурой, доступной среднему специалисту в данной области. В одном варианте изобретения характеристическую вязкость определяют в растворителе, состоящем из 85 об.% ДМФА и 15 об.% 0,1 М водного раствора LiBr.

Сополимер в форме аддитивной соли фармацевтически приемлемой кислоты в соответствии с любым из вариантов осуществления настоящего изобретения является нетоксичным, что может быть подтверждено исследованиями in vivo. В качестве признаков токсического воздействия сополимера на подопытных животных могут рассматриваться, например, гибель, снижение массы тела, изменения походки и поведения, цвета мочи, консистенции экскрементов, состояния глаз и ушей, выпадение зубов и шерсти, а также раздражение кожи в месте введения препарата.

Предлагаемые сополимеры в форме аддитивной соли фармацевтически приемлемой кислоты обладают иммуностимулирующим действием, а также продлевают период эффективного действия антибиотиками. Последнее позволяет снизить терапевтически эффективную дозу антибиотика или повысить эффективность лечения как в отношении срока выздоровления, так и в отношении процента случаев успешного излечения.

Предлагаемые сополимеры в форме аддитивной соли фармацевтически приемлемой кислоты стимулируют производство интерлейкинов-1 в организме, а также активируют фагоцитоз в организме. При этом в любом из перечисленных проявлений своей биологической активности предлагаемые сополимеры в форме аддитивной соли фармацевтически приемлемой кислоты значимо превосходят действие соответствующих основных форм, что будет показано далее на адекватных моделях in vivo. Выбор подопытных животных, в качестве которых могут быть использованы млекопитающие и птицы, не представляет затруднений для специалиста в данной области. Например, млекопитающими предпочтительно являются беспородные белые мыши, кролики или морские свинки.

Достижение технического результата при осуществлении изобретения будет далее проиллюстрировано примерами, способствующими точному и полному пониманию его сути. Специалисту в каждой конкретной области очевидны возможные модификации и замены, например, относящиеся к протоколам исследований, которые не выходят за рамки объема изобретения, определяемые его формулой.

Пример 1. Получение сополимера N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина (2-М-5-ВП) в форме гидрохлорида

А. Синтез основания

В реактор загружают исходную реакционную смесь, содержащую 1,00 кг (960 мл) N-ВП, 16,8 г (17,6 мл) 2-М-5-ВП, 1,6 г (1,7 мл) 30% водного раствора пероксида водорода, 109,2 г (140 мл) циклогексана и 35 г динитрила азо-бис-изомасляной кислоты (ДАК). Реакционную массу нагревают до 65-70°C и в течение 5 часов ведут синтез при данной температуре, периодически отбирая пробы для хроматографического анализа (ВЭЖХ, Сферисорб С-18, 5 мкм, 4,6×250 мм, EtOR/H2O 6:94, 2,5 мл/мин (50°C), 254 нм). Подают смесь, содержащую 150 г (144 мл) N-ВП, 57,3 г (55 мл) 2-М-5-ВП, 0,51 г (0,5 мл) 30% водного раствора пероксида водорода и 7,5 г ДАК. По достижении степени конверсии по мономерам 20% реакционную массу охлаждают до 20°C и выливают при перемешивании в 30 л диэтилового эфира, оставляют при перемешивании на ночь, образовавшийся осадок выделяют фильтрацией и сушат: сначала при атмосферном давлении при 40-60°C, а затем - в вакуумном сушильном шкафу при 80-90°C. Получают 167,4 г продукта со средневязкостной молекулярной массой 15-21 кДа и n, равным 25 мольн.%.

Б. Получение гидрохлорида в водном растворе

В 2,0 л дистиллированной воды при перемешивании растворяют 100,0 г полученного сомономера, добавляют 0,5 мл 35% соляной кислоты и перемешивают в течение 1 часа. Целевой гидрохлорид выделяют выпариванием воды при пониженном давлении, после чего высушивают до постоянной массы в вакуумном сушильном шкафу при 80-90°C. Получают гидрохлорид сополимера общей формулы (I), в которой, по данным аргентометрического титрования, m имеет значение 0,97±0,02 (Mµ принята равной 18 кДа).

В. Получение гидрохлорида в неводном растворителе

В 1,0 л безводного хлороформа растворяют 50,0 г полученного сомономера и при перемешивании в течение 15 минут барботируют осушенный хлористый водород с расходом 10 мл/мин. Полученный раствор выпаривают при пониженном давлении, твердое вещество высушивают как описано выше. Получают гидрохлорид сополимера общей формулы (I), в которой, по данным аргентометрического титрования, m имеет значение 0,98±0,02 (Mµ принята равной 18 кДа).

Примеры 2-6. Получение сополимеров N-винилпирролидона и других НВП или ЗВП в форме фармацевтически приемлемых солей

Аналогично методике, раскрытой в примере 1, и используя указанные в таблице 1 количества веществ, получают следующие сополимеры на основе N-винилпирролидона (загрузка 1,00 кг) в форме фармацевтически приемлемых солей.

Таблица 1
Пр. Исходная смесь Подаваемая смесь
НВП/ЗВП (масса, г) 30% H2O2 (мл) ЦГ (мл) ДАК (Г) N-ВП (г) НВП/ЗВП (масса, г) 30% H2O2 (мл) ДАК (г)
2 3-М-5-ВП (17,5) 6,2 105 4,1 187,5 3-М-5-ВП (71,7) 2,1 1,0
3 3-М-5-ВП (21,3) 5,9 110 3,8 154,7 3-М-5-ВП (175,0) 1,8 0,8
4 4-М-3-ВП (18,1) 5,7 75 2,5 164,3 4-М-3-ВП (149,3) 1,5 0,6
5 4-ВП (16,0) 5,0 66,2 2,2 145,0 4-ВП (131,7) 1,3 0,5
6 4-ВП (18,8) 5,2 97,1 3,4 136,5 4-ВП (154,4) 1,6 0,7

Выход и характеристики сополимеров, полученных в соответствии с примерами, представлены в таблице 2. Уксусную кислоту прибавляют в виде 70% раствора (в таблице 2 отмечено *), другие кислоты прибавляют в виде водных растворов, близких к насыщенным.

Таблица 2
Пр. Выход, г Mµ, кДа n Кислота m
название масса, г (объем, мл*)
2 233,4 46 37 уксусная (0,80) 0,5
3 228,7 77 85 янтарная 0,25 0,85
4 241,4 89 74 лимонная (дигидрат) 0,35 0,75
5 209,3 86 69 лимонная (дигидрат) 0,19 0,5
6 202,1 64 81 уксусная (0,16) 0,75

Пример 7. Исследование острой токсичности сополимеров N-винилпирролидона и НВП или ЗВП в форме фармацевтически приемлемых солей in vivo

Испытание проводят на 5 здоровых мышах гибридах F1 (СВА×С57В1) весом 18-20 г. Испытуемые соединения растворяют в стерильном изотоническом растворе NaCl из расчета 10 масс.% и вводят каждому животному 0,4 мл этого раствора. Время наблюдения за животными составляет 7 суток. Препарат считают выдержавшим испытание, если в течение предусмотренного срока наблюдения не погибнет ни одна подопытная мышь.

Гибели животных в опыте не наблюдали, что указывает на величину LD50 для мышей, превышающую 5000 мг/кг. Таким образом, сополимеры, полученные в соответствии с примерами 1-6, можно отнести к нетоксичным веществам.

Кроме того, установлено, что соединения примеров 1-6 в дозе 500 мг/кг в месте подкожного введения не вызывают раздражающего действия на белых мышей, а также выпадения волосяного покрова.

Пример 8. Исследование иммуностимулирующего действия соединений методом миграционной активности колониеобразующих клеток селезенки (эндогенное колониеобразование)

Методика выполнения исследования описана в монографии Переверзев А.Е. Кроветворные колониеобразующие клетки и физические стресс-факторы. - Л.: Наука, 1986. - 172 с. стр.43-44. Мышей линии BALB в кассетах по 30 мышей облучают γ-излучением 137Cs с экспозиционной дозой 600 рентген (поглощенная доза 1,5 Гр, что вызывает гибель 50% животных в течение 1-2 месяцев). За 24 часа до облучения мышам подкожно (в область холки) вводят 0,5 мл растворов соединений с концентрацией 2500 мг/кг (доза соединений составляет 1250 мг/мышь) или равный объем стерильного изотонического раствора NaCl (контрольная группа). На 10 сутки мышей умерщвляют разрывом шейного отдела позвоночника, извлекают селезенки, которые помещают в фиксатор Боэна. Колонии подсчитывают визуально под лупой.

Иммуностимулирующее действие полимеров оценивают по разности числа колоний в опытных группах по сравнению с контрольной группой. Результаты представлены в таблице 3.

Таблица 3
Пр. Свойства сополимеров Среднее число колоний на 1 селезенку
Mµ, кДа n форма m
1 18 25 гидрохлорид 0,97 >35,0 (сливной рост)
2 46 37 ацетат 0,5 31,3±2,6
3 77 85 сукцинат 0,85 >35,0 (сливной рост)
4 89 74 цитрат 0,75 >35,0 (сливной рост)
5 86 69 цитрат 0,5 27,9±3,2
6 64 81 ацетат 0,75 29,6±3,8
1c 40 35 основание 0 25,1±2,8
2c 45 25 основание 0 28,0±3,7
3c 38 31 основание 0 >35,0 (сливной рост)
Контрольная группа 11,3±2,6

Приведенные данные показывают, что фармацевтически приемлемые соли сополимеров, полученные в соответствии с изобретением, на 10-30% активнее соединений, раскрытых в публикации RU 2000004 (примеры 1c, 2c и 3c в таблице выше).

Пример 9. Исследование сочетанного действия антибиотиков и сополимеров на основе N-винилпирролидона при сибирской язве

Исследования проводят на беспородных белых мышах массой 18-20 г, разделенных на группы по 10 особей. За 24 часа до введения препаратов мышей заражают подкожной инъекцией (102 спор/1 мл) вирулентного штамма №76 возбудителя сибирской язвы. Антибиотики (тетрациклин, 500 Ед; стрептомицин, 1500 Ед) вводят подкожно в объеме 0,2 мл 2%-ного раствора сополимера в физиологическом растворе однократно (I) или в течение 7 суток (VII). Оценкой эффективности является процент выживания мышей в опытных группах по сравнению с контрольной группой и сроки гибели мышей за период наблюдения 14 суток. Результаты представлены в таблице 4.

Таблица 4
Пр. Свойства сополимеров Кратность введения % выживания Сроки гибели, сутки
Mµ, кДа n форма m
1 18 25 гидрохлорид 0,97 (I) 10 3, 4, 5
(VII) 90 10
2 46 37 ацетат 0,5 (I) 20 4, 6
(VII) 100 -
3 77 85 сукцинат 0,85 (I) 30 5, 6
(VII) 100 -
4 89 74 цитрат 0,75 (I) 20 3, 5
(VII) 90 12
5 86 69 цитрат 0,5 (I) 20 6, 7
(VII) 80 9, 10
6 64 81 ацетат 0,75 (I) 20 3, 5
(VII) 100 -
1c 40 35 основание 0 (I) 0 3, 4, 6
(VII) 20 9, 11
2c 45 25 основание 0 (I) 0 3, 4, 5
(VII) 80 9
3c 38 31 основание 0 (I) 0 3, 4
(VII) 80 6
4c 30 40 основание 0 (I) 0 3, 4
(VII) 100 -

Приведенные данные показывают, что фармацевтически приемлемые соли сополимеров, полученные в соответствии с изобретением, эффективнее соединений, раскрытых в публикации RU 2000004 (примеры 1c, 2c, 3c и 4c в таблице выше).

Пример 10. Исследование действия сополимеров на основе N-винилпирролидона на продуцирование интерлейкина-1

Эффективность сополимеров, полученных в соответствии с изобретением, в качестве активаторов продуцирования интерлейкина-1α (IL-1α) и интерлейкина-1β (IL-1β) оценивают в соответствии с требованиями Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (Минздрав РФ, 2000, с.257-260). Полученные данные приведены в таблице 5.

Таблица 5
Пр. Свойства сополимеров IL Норма Уровень IL (y.e.) при концентрации сополимера в крови крыс (мкг/мл)
Mµ, кДа n (Ф) m 0,01 0,1 1 10
1 18 25 ГХ 0,97 2,1±1,1 2,8±1,2 6,8±2, 7,0±2,1 4,7±1,7
2,7±1,3 4,0±1,4 4,2±2,1 4,9±2,4 3,5±1,9
2 46 37 Ац 0,5 2,1±1,1 2,9±1/3 6,5±2,4 7,1±2,3 4,9±1,6
2,7±1,3 3,7±1,5 3,9±2,3 4,5±2,3 3,2±1,8
3 77 85 Сц 0,85 2,1±1,1 2,7±0,9 6,4±2,5 6,5±2,5 4,6±1,7
2,7±1,3 3,8±1,2 4,0±2,0 4,6±2,2 3,1±1,9
4 89 74 Цт 0,75 2,1±1,1 3,0±1,1 6,9±2,2 7,2±2,7 5,0±1,5
2,7±1,3 3,9±1,3 4,3±2,1 4,8±2,2 3,5±1,6
5 86 69 Цт 0,5 2,1±1,1 2,7±1,2 6,4±2,6 6,6±2,4 4,6±1,8
2,7±1,3 4,0±1,0 4,3±2,2 4,9±2,1 3,5±1,7
6 64 81 Ац 0,75 2,1±1,1 2,9±1,2 6,6±2,4 6,9±2,5 4,8±1,5
2,7±1,3 3,8±1,5 4,1±2,3 4,7±2,0 3,3±1,6
22 25 Ос 0 2,1±1,1 2,2±1,0 5,1±2,2 5,3±2,4 3,7±1,9
2,7±1,3 3,1±2,1 3,3±2,4 3,8±1,8 2,7±1,7
Форма (Ф):
ГХ - гидрохлорид; Ац - ацетат; Сц - сукцинат; Цт - цитрат; Ос - основание.

Приведенные данные показывают, что фармацевтически приемлемые соли сополимеров, полученные в соответствии с изобретением, на 20-30% эффективнее соединений, раскрытых в публикации RU 2430932 (пример 1c).

Пример 11. Исследование действия сополимеров на основе N-винилпирролидона в качестве активаторов фагоцитоза (активация перитонеальных макрофагов)

Беспородных белых мышей массой 18-25 г разделяют на группы по 5 животных. Животным внутримышечно вводят раствор сополимера в объеме около 250 мкл из расчета получения дозы 5 мг/кг или 50 мг/кг. Животным контрольной группы внутримышечно вводят 250 мкл физиологического раствора.

Исследование проводят через 24 часа после введения сополимера мышам. Через 10 минут после внутрибрюшинного введения 2 мл 0,05% суспензии коллоидной туши брюшную полость мышей промывают 5 мл изотонического раствора NaCl. Собранные клетки перитонеального экссудата трижды отмывают и суспендируют в 1 мл изотонического раствора NaCl. Процент фагоцитирующих клеток (% ФК) определяют по результатам микроскопического подсчета.

После этого клетки осаждают центрифугированием, удаляют супернатант и осадок клеток лизируют водой для инъекций. Лизаты помещают в фотометрические планшеты и определяют светопоглощение при длине волны 620 нм, пропорциональное количеству туши, поглощенной перитонеальными фагоцитами. Фагоцитарный индекс (ФИ), вычисляемый как отношение светопоглощения к числу фагоцитирующих клеток, отражает степень активации фагоцитоза. Индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ), т.е. отношение среднего числа частиц (ФК), поглощенное одной фагоцитирующей клеткой за 1 ч, к ФК за 2,5 ч, отражает переваривающую способность фагоцитов (таблица 6). Приведенные в ней данные показывают, что фармацевтически приемлемые соли сополимеров, полученные в соответствии с изобретением, на 25-35% эффективнее соединений, раскрытых в публикации RU 2430932 (пример 1c в таблице выше).

Таблица 6
Свойства сополимеров Доза, мг/кг Характеристики
Пр. Mµ, кДа n (Ф) m % ФК ФИ ИЗФ
1 18 25 ГХ 0,97 5 80,4±4,1 8,3±0,6 32,3±6,1
50 91,9±1,7 11,1±0,9 42,0±11,3
2 46 37 Ац 0,5 5 81,6±4,2 8,4±0,8 32,8±5,8
50 90,0±1,3 10,9±1,0 41,1±10,9
3 77 85 Сц 0,85 5 81,0±2,9 8,4±0,7 32,5±5,9
50 94,3±1,1 11,4±0,9 43,1±11,6
4 89 74 Цт 0/75 5 81,0±2,3 8,4±0,5 32,5±5,3
50 91,8±1,0 11,1±1,0 42,0±11,8
5 86 69 Цт 0,5 5 77,4±3,9 8,0±0,6 31,1±5,6
50 87,9±1,5 10,6±0,9 40,2±10,7
6 64 81 Ац 0,75 5 83,7±2,8 8,6±0,7 33,6±5,7
50 90,9±1,3 11,0±0,9 41,5±10,6
22 25 Ос 0 5 61,0±3,9 6,3±0,7 24,5±5,5
50 68,7±1,3 8,3±1,0 31,4±12,8
Контрольная группа 0 56,0±5,7 7,0±1,0 13,5±5,1
Форма (Ф):
ГХ - гидрохлорид; Дц - ацетат; Сц - сукцинат; Цт - цитрат; Ос - основание.

Сополимер на основе N-винилпирролидона в форме фармацевтически приемлемых аддитивных солей кислот, представленный общей формулой (I):

отличающийся тем, что R обозначает водород или метил;
содержание мономерных звеньев n составляет 25-90 мол.%;
Х обозначает анион фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислоты;
k равно 1 или 2;
m принимает значения от 0,1 до 1,0;
и средневязкостная молекулярная масса сополимера Мµ равна 15-150 кДа.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области химии биологически активных полимеров. .

Изобретение относится к сополимерам на основе N-винилпирролидона. .

Изобретение относится к химии биологически активных полимеров. .

Изобретение относится к способу получения полимерной водорастворимой формы биологически активного соединения - бетулоновой кислоты, которое может найти применение в пищевой, фармацевтической промышленности и в сельском хозяйстве.
Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, в частности к способу получения поливинилпирролидона. .

Изобретение относится к технологии получения мягких контактных линз (МКЛ) путем введения тонирующего красителя в процесс сополимеризации мономеров. .
Изобретение относится к способам получения биосовместимых полимеров медицинского назначения. .

Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, точнее к водорастворимым полимерным комплексам антибиотиков-аминогликозидов общей формулы: где AG - антибиотик-аминогликозид (основание); m1=100-m2 мол.%; m2=17,0-19,0 мол.%;с ММ 20000-29000 Да; содержание AG 13,0-17,2 мас.%;AG - аминогликозид из ряда, включающего гентамицин, канамицин, неомицин (их структурные формулы изображены на фиг.1-3 соответственно),Изобретение относится также к низкомолекулярным сополимерам акриламида и (мет)акриловой кислоты формулы: где R=Н, СН3,m 1=100-m2 мол.%; m 2=15,0-20,4 мол.%;с MM 10000-39000 Да.
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначено для применения в хирургии стекловидного тела. Вискоэластичный раствор для контрастирования задней гиалоидной мембраны содержит краситель, метилцеллюлозу, гиалуроновую кислоту, поливинилпирролидон низкой молекулярной массы и инъекционную воду.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для фармакопрофилактики мастита у коров после перевода их в сухостой. Средство для профилактики мастита у дойных коров в сухостойный период, характеризуется тем, что в качестве ингредиентов содержит полимер PVP/VA, силикон, полигексаметиленбигуанид, спирт этиловый, глицерин - в качестве смягчающего компонента, гелеобразователи - триэтаноламин и карбопол и очищенную воду в следующих соотношениях ингредиентов, %: полимер PVP/VA 9-10 силикон 5-6 спирт этиловый 35-40 полигексаметиленбигуанид 0,008-0,01 глицерин 5 гелеобразователи - триэтаноламин и карбол по 0,1 очищенная вода остальное Технический результат состоит в том, что предлагаемый способ позволяет свести к минимуму или исключить использование химиотерапевтических средств, антибиотиков и их производных, сульфаниламидов, нитрофуранов и, таким образом, исключить побочное действие препарата на организм животных, а также сократить число визитов ветеринарного врача в период сухостоя коров, повысить профилактическую эффективность.
Изобретение относится к водорастворимой бактерицидной композиции. Композиция включает бактерицидную субстанцию катапол в количестве 2,1-2,5 мас.%, зостерин в количестве 1,1-5,0 мас.% и дистиллированную воду.
Изобретение относится к водорастворимой бактерицидной композиции. Композиция включает бактерицидную субстанцию повиаргол в количестве 2,1-7,0 мас.% и зостерин в количестве 1,1-7,0 мас.%.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для лечения инфекций бактериальной этиологии у животных. Композиция содержит, масс.%: доксициклина хиклат - 5,0-15,0, бромгексина гидрохлорид - 0,25-0,75, лактулоза - 0,5-1,5, 2-пирролидон - остальное.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологическим препаратам в виде капель, и предназначено для лечения синдрома сухого глаза и бактериальных конъюнктивитов.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой лекарственное средство, содержащее 97,0-59,5 мас.% основания налтрексона, 0,5-3,0 мас.% кортикостероида, выбранного из триамцинолона, бетаметазона, беклометазона или дексаметазона, 2,0-37,0 мас.% композиции азотсодержащих полимеров и 0,2-0,5 мас.% стеариновой кислоты или стеарата магния.

Изобретение относится к биоцидным капсулам, препарату, содержащему биоцидные капсулы, и тампону, содержащему препарат. .

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии. Для этого в брыжейку кишки устанавливают полиэтиленовую трубку. Затем через установленную трубку вводят раствор, включающий прозерин в дозе до 50 мг. Дополнительно вблизи межкишечного анастомоза вводят синовиальную жидкость по 2 мл, растворенную в 10 мл физиологического раствора. Способ обеспечивает профилактику спаечной болезни после проведения хирургической операции в брюшной полости за счет введения препаратов, способствующих усилению перистальтики и одновременно скольжения кишечных петель в брюшной полости. 1 табл.
Наверх