Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента



Владельцы патента RU 2533241:

Кочурова Екатерина Владимировна (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Способ осуществляют путем определения содержания биомаркеров - матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в ротовой жидкости пациента, забранной до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. На основании полученных значений диагностируют папиллому или рак слизистой оболочки дна полости рта пациента. Применение изобретения обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной экспресс-диагностики, достижение высокой вероятности выявления процессов доброкачественных и злокачественных новообразований в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, а также значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала. 2 з.п. ф-лы, 5 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, и может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.

Известен способ прогнозирования и диагностики плоскоклеточного рака головы и шеи по содержанию матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в плазме крови пациента, включающий исследования плазмы венозной крови, при этом сыворотку крови забирали стандартным способом у больных плоскоклеточным раком головы и шеи после постановки диагноза до начала лечебных процедур. Сыворотку хранили при температуре -50°C не более 10 месяцев и размораживали не более 1 раза для иммуноферментного определения содержания матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа на ИФА-анализаторе (см. Клишо Е.В. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при плоскоклеточном раке головы и шеи, автореферат диссертации д.м.н., Томск, 2011 г., с.43).

Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта в день обращения пациента,

- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта,

- недостаточность вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,

- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала,

- возможность инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала,

- сложность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Задачей изобретения является создание способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента.

Техническим результатом является достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Технический результат достигается тем, что предложен способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для качественных экспресс-исследований новообразований слизистой оболочки дна полости рта, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) группы клинического контроля принимают уровень 1,7-2,9 нг/мл, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 42,5-70,9 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки дна полости рта пациента, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 5,98-9,98 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки дна полости рта пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) группы клинического контроля принимают уровень 70,2-195,6 нг/мл, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 218-313 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки дна полости рта пациента, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 325,5-532,9 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки дна полости рта пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C. При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Выполняют забор ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) группы клинического контроля принимают уровень 1,7-2,9 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 42,5-70,9 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки дна полости рта пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 5,98-9,98 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки дна полости рта пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) группы клинического контроля принимают уровень 70,2-195,6 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 218-313 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки дна полости рта пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 325,5-532,9 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки дна полости рта пациента.

Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:

- отсутствие выполнения забора венозной крови у пациента для качественных экспресс-исследований новообразований слизистой оболочки дна полости рта,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 1,7-2,9 нг/мл отсутствие новообразования слизистой оболочки дна полости рта у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 42,4-70,9 нг/мл папилломы слизистой оболочки дна полости рта пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2)в количестве 5,98-9,98 нг/мл рака слизистой оболочки дна полости рта пациента,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 70,2-195,6 нг/мл отсутствие новообразования слизистой оболочки дна полости рта у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 218-313 нг/мл папилломы слизистой оболочки дна полости рта пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 325,5-532,9 нг/мл рака слизистой оболочки дна полости рта пациента,

- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента тактики его лечения,

- выполнение при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед проведением анализа ее центрифугирования при 3000 об/мин в течение 15 минут, забора поверхностной части в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещения в пробирку «salicaps» и сразу замораживания в морозильной камере при температуре минус 80°C,

- дополнительное осуществление в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента контрольного определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Экспериментальные исследования предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей). Кроме того, предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента обеспечил при практическом использовании значительное повышение качества жизни пациентов.

Реализация предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациент С., 66 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки дна полости рта слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 62,8 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 220 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки дна полости рта слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки дна полости рта.

Пример 2. Пациентка Н., 91 год, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки дна полости рта справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. При этом в связи с преклонным возрастом пациентки возникла необходимость кратковременного хранения ее ротовой жидкости, поэтому перед выполнением анализа ее центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирали поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещали в пробирку «salicaps» и сразу замораживали в морозильной камере при температуре минус 80°C. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 54,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 276,5 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки дна полости рта справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки дна полости рта.

Пример 3. Пациент К., 49 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки дна полости рта слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 70,9 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 236,4 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки дна полости рта слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки дна полости рта.

Пример 4. Пациентка Е., 36 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки дна полости рта слева».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 5,98 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 439,1 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки дна полости рта слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе - иссечение новообразования слизистой оболочки дна полости рта и лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 2-м этапе.

Пример 5. Пациентка X., 52 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки дна полости рта справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 8,76 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 325,5 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки дна полости рта справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе - иссечение новообразования слизистой оболочки дна полости рта и лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 2-м этапе.

Пример 6. Пациент О., 62 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки дна полости рта справа».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 6,8 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 493,08 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки дна полости рта слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациенту было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе - иссечение новообразования слизистой оболочки дна полости рта и лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 2-м этапе.

Установленные клинические диагнозы впоследствии подтвердились результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у всех пациентов биопсийного материала из очага поражения.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациентов, дополнительно осуществляли контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациентов, по результатам которых судили об эффективности выбранного лечения у пациентов.

1. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об./мин. в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 3000 об./мин. в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, отличающийся тем, ротовую жидкость забирают у пациента для исследований новообразований, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) группы клинического контроля принимают уровень 1,7-2,9 нг./мл., при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 42,5-70,9 нг./мл., то диагностируют папиллому слизистой оболочки дна полости рта пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) в количестве 5,98-9,98 нг./мл., то диагностируют рак слизистой оболочки дна полости рта пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) группы клинического контроля принимают уровень 70,2-195,6 нг./мл., при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 218-313 нг./мл., то диагностируют папиллому слизистой оболочки дна полости рта пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 325,5-532,9 нг./мл., то диагностируют рак слизистой оболочки дна полости рта пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл., помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу выделения ДНК Mycoplasma hominis (М. hominis) для дальнейшего применения в диагностическом алгоритме.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития врожденных инфекций путем определения количества специфических антител классов Ig М и Ig G в биологическом материале, отличающееся тем, что в качестве биологического материала используют мазок со слизистой оболочки цервикального канала при первичном обследовании в сроке до 12-й недели гестации, одновременно в мазках определяют количество антител Ig М и Ig G к вирусу краснухи, цитомегаловирусу, парвовирусу B19V, токсоплазмам, вирусу простого герпеса 1 и 2 типов и величины авидности специфических Ig G к этим возбудителям, дополнительно в том же мазке определяют уровень секреторного неспецифического Ig A методом РИФ к антигенам цитомегаловируса, хламидий, микоплазм, и генетического материала этих микроорганизмов методом ПЦР и в зависимости от полученных результатов прогнозируют группы высокого, умеренного или низкого риска развития врожденных инфекций.

Изобретение относится к медицине. Способ включает последовательность этапов количественного определения содержания фактора дифференцировки клеток HLDF у пациента, страдающего заболеванием сердечно-сосудистой системы.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидива рака вульвы. Для этого перед началом лечения определяют содержание в крови больших гранулярных лимфоцитов (БГЛ) и уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК).
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении сарком мягких тканей для прогнозирования возникновения рецидива. Сущностью изобретения является то, что определяют наличие клеток, экспрессирующих EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, и при выявлении клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 26 прогнозируют благоприятный исход.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у пациентов с постинфарктной хронической сердечной недостаточностью, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для интермиттирующей терапии у пациентов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ).

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к исследованию физических и химических свойств биологических жидкостей, и может быть использовано для прогнозирования хронического течения вирусного гепатита В у детей с пищевой аллергией в острый период заболевания.
Изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням, и может быть использовано в терапии для дифференциальной диагностики алкогольной болезни печени (АБП).
Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и описывает способ прогнозирования развития осложнений при остром коронарном синдроме в остром периоде, включающий одномоментный забор и определение в 1-3 сутки госпитализации концентрации интерлейкина-6 в крови и слюне, при этом производят расчет коэффициента распределения (КР) интерлейкина-6 (ИЛ-6) как отношение его количества в крови к его количеству в слюне и при значении КРИЛ-6 менее 1,0 прогнозируют развитие кардиоваскулярных осложнений в течение острого периода.
Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии и иммунологии, и может быть использовано для патогенетического лечения хронического тонзиллита и/или гипертрофии небных миндалин у детей дошкольного возраста с лимфопролиферативным синдромом. Для этого осуществляют санацию небных миндалин. В смывах с небных миндалин определяют уровень интерлейкина-1β(ИЛ-1β). При его значениях менее 5,8 пг/мл осуществляют локальное введение рекомбинантного интерлейкина-1β (ИЛ-1β) с помощью фонофореза аппаратом «Тонзиллор-ММ». Проводят два курса по 10 процедур с 14-дневным перерывом. Эффективность терапии оценивают на основании положительной динамики уровня ИЛ-1β, определяемого в смывах с небных миндалин через 17 и 41 день от начала иммуномодулирующей терапии. Способ обеспечивает повышение эффективности лечения за счёт диффернцированного отбора детей для проведения иммуномодулирующей терапии, снижение частоты инфекционных поражений нёбных миндалин у заявленной группы больных за счёт патогенетически обоснованного применения рекомбинантного ИЛ-1β. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к нейрохирургии, и касается способа диагностики опухоли мозга у пациентов. Сущность способа: в забранной крови определяют процентное количество CD25-лимфоцитов. При его значении 13,7 устанавливают отсутствие опухоли мозга, а при его значении меньше 13,7 диагностируют наличие опухоли мозга у пациента. Изобретение обеспечивает нулевой уровень ошибок, что свидетельствует о высокой вероятности правильного распределения испытуемых по группам здоровых и больных с опухолью головного мозга, что позволяет реально использовать данный метод в дополнительной диагностике церебральной патологии. Способ прост для практического применения. 2 табл., 1 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и позволяет проводить морфологическую дифференциальную диагностику трофобластической, эндометриальной и смешанной формы первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре. Способ заключается в том, что при иммуногистохимическом исследовании ворсинчатого хориона и децидуальных клеток гравидарного эндометрия оценивают индекс экспрессии сосудисто-эндотелиального (СЭФР) и трансформирующего (ТФР-β2) факторов роста. При индексе экспрессии в ворсинчатом хорионе СЭФР, равном или менее 1,5 у.е., а ТФР-β2, равном или менее 1,4 у.е., диагностируют трофобластическую форму первичной плацентарной недостаточности. При индексе экспрессии в децидуальных клетках СЭФР, равном или менее 1,6 у.е., а ТФР-β2, равном или более 2,7 у.е., диагностируют эндометриальную форму первичной плацентарной недостаточности; при одновременном выявлении вышеуказанных критериев диагностируют смешанную форму первичной плацентарной недостаточности. Предлагаемый способ является высокоинформативным, повышает качество гистологического заключения, способствует индивидуальному подходу к дальнейшей диагностике, лечению и реабилитации репродуктивного здоровья женщины в зависимости от патогенетической формы плацентарной недостаточности. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогноза течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом. Сущность способа: проводят забор анализируемого образца крови, при этом осуществляют в динамике цитофлюориметрический анализ полученного тестируемого образца на наличие маркеров эндотелиальной дисфункции - растворимых молекул адгезии sICAM-1 и sVCAM-1. При значении уровней экспрессии молекул адгезии sICAM-1 591,9 нг/мл и более и sVCAM-1 632 нг/мл и более в первые дни острейшего периода ишемического инсульта с последующим сохранением в динамике данных уровней или их повышением относительно исходных уровней прогнозируют неблагоприятное течение ишемического инсульта у данной категории больных. Применение способа обеспечивает высокую чувствительность, специфичность и точность прогноза в первые дни острейшего периода ишемического инсульта у больных сахарным диабетом. 5 ил 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. Сущность способа: определяют титр антител к цитомегаловирусу, оценивают нарушение оксигенации гемоглобина в эритроцитах, гистохимическим методом определяют активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и содержание метгемоглобина в эритроцитах, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, снижении активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы до 15,0±0,8 усл.ед. и увеличении содержания метгемоглобина в эритроцитах до 1,7±0,09% и снижении оксигемоглобина в периферической крови до 90,0±1,3% оценивают угрозу формирования гемической гипоксии. 2 ил.
Изобретение относится к медицине и касается способа количественного определения D-антигена полиовирусов 1-3 типов иммуноферментным анализом (ИФА). В качестве иммуносорбента используют поливалентный (к трем типам полиовируса) аффинно очищенный иммуноглобулин класса Y (IgY), полученный из яичных желтков куриц, иммунизированных полиовирусами, а в качестве детекторных антител - аффинно очищенный препарат IgG кролика против каждого из трех полиовирусов. Изобретение обеспечивает более низкий неспецифический фон и, соответственно, более высокую достоверность результата анализа. 1 н.п. ф-лы, 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине и касается способа проведения иммунохроматографического анализа с диссоциирующей флуоресцентной меткой, в котором на мембранной тест-полоске формируют комплексы, в состав которых входят молекулы антигена или антигенов, специфичные к ним антитела и молекулы метки. При этом после проведения анализа метка экстрагируется из рабочей мембраны тест-полоски и флуоресцентный сигнал измеряется в объеме жидкости. Способ по изобретению обеспечивает оптимальные условия для флуоресценции метки, а так же устранение мешающего влияния мембраны, которая, будучи непрозрачной, уменьшает интенсивность как возбуждающего, так и испускаемого света. 1 ил., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к элюированию сконцентрированного на магнитной матрице патогена. Способ элюции осуществляется следующим образом: 0,1 мл 10% взвеси магнитно-иммунного сорбента (МИС) туляремийного, чумного или бруцеллезного инкубируют с микробными взвесями возбудителей туляремии, бруцеллеза или чумы в течение 30 мин, удаляют надосадок, далее МИС инкубируют с 0,5 мл элюирующего раствора в течение 10 мин, pH элюата возвращают к физиологическому значению, проводят постановку реакции непрямой гемагглютинации или реакции агглютинации латекса. Технический результат: способ позволяет качественно элюировать патоген с магнитной иммобилизованной матрицы для последующего исследования в серологических реакциях и сохранять функциональную активность антитела на магнитной матрице для повторного использования. 3 пр., 1 табл.
Изобретение относится к области медицины, а именно к медицинской диагностике, и описывает способ качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента. Способ включает забор ротовой жидкости у пациента, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100, повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. В качестве независимых биомаркеров выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9). Способ характеризуется высокой точностью и чувствительностью дифференциальной экспресс-диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, упрощением подготовки пациента для забора и хранения диагностического материала, возможностью получения результата в день обращения пациента, высокой вероятностью выявления доброкачественных и злокачественных новообразований в организме пациента как на ранних, так и на более поздних стадиях заболевания. Изобретение может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ экспресс-диагностики острых кишечных инфекций (ОКИ), включающий выявление маркеров-индикаторов этиологии ОКИ, с использованием иммунологического лабораторного исследования, отличается тем, что этиологию ОКИ устанавливают у детей ранней возрастной категории, предпочтительно у новорожденных, при этом определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-10 и наличие хронической фетоплацентарной недостаточности (ХФПН), после чего рассчитывают вероятность (Р) бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о бактериальной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует об отсутствии бактериальной этиологии ОКИ, и необходимости проведения второго этапа диагностики, на котором определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-4, выявляют срок прикладывания к груди, а также вид вскармливания, при этом рассчитывают вероятность (Р) вирусной либо вирусно-бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о вирусной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует о вирусно-бактериальной ОКИ. Изобретение обеспечивает повышение точности выявления этиологии острой кишечной инфекции и упрощение процедуры диагностирования. 2 табл.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2014-11-20 2014-11-19T23:55:28
Наверх