Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин



Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин
Композиция для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта, содержащая в качестве активного ингредиента s-аллил-l-цистеин

 


Владельцы патента RU 2533268:

ФАРМЕЙКИНГ КО., ЛТД. (KR)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композции против Helicobacter pylori. Фармацевтическая композиция, которая содержит S-аллил-L-цистеин или его фармацевтически приемлемую соль, или их сольват, или гидрат, для производства лекарственного средства против Helicobacter pylori при профилактике или лечении желудочно-кишечных нарушений, при которых Helicobacter pylori является фактором, вносящим основной вклад в их развитие. Фармацевтический состав против Helicobacter pylori. Питательная композиция против Helicobacter pylori. Применение S-аллил-L-цистеина или его фармацевтически приемлемой соли, или их сольвата, или гидрата для производства лекарственного средства против Helicobacter pylori. Применение S-аллил-L-цистеина или его фармацевтически приемлемой соли, или их сольвата, или гидрата для производства питательной композиции против Helicobacter pylori. Вышеописанные композиции эффективны против Helicobacter pylori при профилактике или лечении желудочно-кишечных нарушений. 5 н. и 9 з.п. ф-лы, 18 ил., 3 табл., 7 пр.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к композиции, обладающей активностью против Helicobacter pylori и оказывающей защитное воздействие на слизистую желудка, к композиции для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта и к способу применения композиций.

Уровень техники

Нарушения желудочно-кишечного тракта вызываются различными факторами и, как известно, вызываются нарушением баланса между агрессивными факторами, такими как Helicobacter pylori, кислота желудочного сока, пепсин, чрезмерный труд, стресс, алкоголь, и защитными факторами, такими как секреция слизи, тканевосстанавливающая способность и антикоагулянтная активность. Гастрит, вызванный чрезмерным трудом, стрессом, инфекцией Helicobacter pylori и т.п., является распространенным симптомом, и при отсутствии лечения может развиться в хронический гастрит, язву желудка и изредка в рак желудка. Поражение слизистой желудка, вызванное алкоголем, может быть вылечено в течение нескольких дней путем удаления стимулирующего фактора, но может развиться в желудочно-кишечное кровотечение, перфорацию желудка или т.п. (Taeyoung Oh, et al, J. Applied Pharmacology, Vol.5, p.202-210, 1997). Для лечения нарушений желудочно-кишечного тракта использовали различные лекарственные средства, такие как циметидин, ранитидин, фамотидин, омепразол или висмут. Однако частота рецидивов после прекращения приема этих лекарственных средств очень высокая, и, таким образом, существует потребность в разработке нового лекарственного средства.

Helicobacter pylori является грамотрицательной бактерией, которая колонизирует слизистую желудка человека. Считается, что инфекция Helicobacter pylori является фактором, который вносит основной вклад в развитие большей части нарушений желудочно-кишечного тракта, таких как острый хронический гастрит, атрофический гастрит, язва, рак желудка и язвы двенадцатиперстной кишки (Crowe, Curr Opin Gastrenterol, 21(1), p.32-38, 2005). Более того, сообщалось, что инфекция Helicobacter pylori является фактором риска для печеночной энцефалопатии, артериосклероза и заболеваний, связанных с гепатобилиарной системой, не говоря уже о заболеваниях связанных с пищеварительной системой (Karahalil, et al., Curr Drug Saf, 2, pp43-46, 2007; Scragg, et al, J. Epidemiol Community Health, 50(5), p.578-579, 1996). По утверждению Системы центров контроля и профилактики заболеваний США (CDC), инфекция Helicobacter pylori может вызвать хроническую усталость, крапивницу, мигрень, низкорослость, бесплодие, пищевую аллергию и т.д., которые все являются симптомами ′странного синдрома Helicobacter′. Как правило для уничтожения Helicobacter pylori применяют антибиотики. Однако после устранения Helicobacter pylori часто случается повторная инфекция, и для полного удаления Helicobacter pylori требуется высокодозированное лечение в течение длительного периода времени. Соответственно, длительное применение высоких доз антибиотиков может привести к побочным эффектами и повысить уровень бактерий, устойчивых к антибиотикам.

Недавно в качестве безопасного способа для лечения заболеваний, связанных с инфекцией Helicobacter pylori, были проведены исследования различных материалов, которые ингибируют рост бактерий в пище. Ферментируемое с помощью пробиотиков Lactobacillus молоко, иммуноглобулины из яичного желтка (IgY), включающие нейтрализующее Helicobacter pylori антитело, и катехин, содержащийся в вине и зеленом чае, рассматриваются как эффективные вещества против инфекции Helicobacter pylori (McMahon, et al., Aliment Pharmacol Ther 23(8), pp1215-1223, 2006; Sachdeva, et al., Eur J Gastroenterol Hepatol, 21(1), p.45-53, 2009; Shin, et al., J Med Microbiol., 53(Pt 1), p.31-34, 2004).

При этом чеснок (Allium Sativum L.), который принадлежит к роду Allium, обладает противомикробными, противогрибковыми, антиоксидантными и противоопухолевыми свойствами (Ankri, et al., Microbes Infect. 1(2), p. 125-129, 1999), предотвращает тромбоз, воспаление и окислительный стресс клеток (Sener, et al, Mol Nutr Food Res., 51(11), p.1345-1352, 2007), и, таким образом, привлекает к себе внимание. Чеснок содержит различные компоненты, включая стероидный сапонин, такой как эрубозид-В, обладающий противогрибковыми и противоопухолевыми свойствами (Matsuura Н, et al, Chem Pharm Bull (Tokyo), 36: 3659-3663, 1988), гликозидные фракции, обладающие эффектом снижения холестерина (Slowing, et al., J Nutr., 131, p.994S-9S, 2001), не содержащие серу соединения, такие как β-хлорогенин, обладающие эффектом ингибирования агрегации тромбоцитов (Rahman К. et al., J. Nutr. 2006), и различные сероорганические соединения. Примерами сероорганических соединений, содержащихся в растениях, принадлежащих роду Allium, являются жирорастворимые сероорганические соединения, такие как сульфоксиды S-аллил-L-цистеина (аллиин), диаллидисульфиды (англ. Diallydisulfide, DADS) и диаллилсульфиды (англ. Diallyl sulfide, DAS) и водорастворимые сероорганические соединения, такие как S-аллил-L-цистеин (англ. S-allyl-L-cysteine, SAC) и S-аллилмеркаптоцистеин (англ. S-allylmercaptocysteine, SAMC).

Сообщалось, что SAC, который является активным ингредиентом зрелого чеснока, обладает антиоксидантной активностью, ингибирующей артериосклероз, и противоопухолевой активностью в некоторых злокачественных опухолевых линиях (Proceedings of the American Association for Cancer Research, 30, pi81, 1989). Однако не сообщалось, что SAC оказывает терапевтические воздействия на заболевания желудочно-кишечного тракта и активен против Helicobacter pylori.

Раскрытие изобретения

Техническая проблема

Как правило для уничтожения Helicobacter pylori применяют антибиотики. Однако после устранения Helicobacter pylori часто случается повторная инфекция, и для полного удаления Helicobacter pylori требуется высокодозированное лечение в течение длительного периода времени. Соответственно, при применении антибиотиков могут возникнуть побочные эффекты и может вырасти уровень бактерий, устойчивых к антибиотикам. Следовательно, существует потребность в альтернативном лекарственном средстве, отличном от антибиотиков. В настоящем изобретении предлагается лекарственное средство, обладающее активностью против Helicobacter pylori и эффектом защиты слизистой желудка. В изобретении также предлагается безопасная композиция для профилактики, облегчения или лечения желудочно-кишечных расстройств.

Решение проблемы

Согласно одному аспекту настоящего изобретения предлагается композиция, содержащая в качестве активного ингредиента S-аллил-L-цистеин (SAC), который является водорастворимым сероорганическим соединением, содержащимся в растении? принадлежащем роду Allium, и который обладает активностью против Helicobacter pylori и оказывает защитное воздействие на слизистую. Согласно другому аспекту настоящего изобретения предлагается композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC, для профилактики, облегчения или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта.

Полезные эффекты изобретения

В соответствии с настоящим изобретением композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC, ингибирует инфекцию Helicobacter pylori и защищает против поражений желудка, вызванных Helicobacter pylori. Соответственно, композиция может быть применена в качестве лекарственного средства против Helicobacter pylori.

В соответствии с настоящими изобретением композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC, предотвращает и лечит поражения слизистой желудка, вызванные соляной кислотой-этанолом, аспирином или индометацином, и, таким образом, может быть эффективно применена для профилактики, облегчения или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта. В соответствии с изобретением композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC, может быть применена в качестве фармацевтической или пищевой композиции.

Описание чертежей

Вышеуказанные и другие признаки и преимущества настоящего изобретения будут более очевидны при подробном описании его примерных воплощений со ссылкой на чертежи, где:

на фиг.1 показаны средние массы животных контрольных и экспериментальных групп в течение всего периода тестирования, где все значения представлены как средние;

на фиг.2А и 2В показано воздействие S-аллил-L-цистеина (SAC) на среднее значение выработки сывороточных IgG антител животных контрольных и экспериментальных групп, измеренное после инфекции Helicobacter pylori, где все значения представлены как средние и стандартные ошибки, **:Р<0,01 и *:Р<0,05;

на фиг.3 показано воздействие SAC на среднее значение сывороточного TNF-α животных контрольных и экспериментальных групп, измеренные в течение всего 10-тестового периода тестирования, где все значения представлены как средние и стандартные ошибки;

на фиг.4 показаны патологические изменения в тканях животных контрольных и экспериментальных групп;

на фиг.5 показаны патологические изменения в тканях и количество эозинофилов у животных контрольных и экспериментальных групп, где все значения представлены как средние и стандартные ошибки; **:Р<0,01 и *:Р<0,05;

на фиг.6 показаны патологические изменения в тканях (митотические фигуры) у животных контрольных и экспериментальных групп, где все значения представлены как средние и стандартные ошибки;

на фиг.7 показаны уровни сывороточной глютамино-щавелево-уксусной трансаминазы (англ. glutamic oxaloacetic transaminase, GOT) у животных контрольных и экспериментальных групп, где все значения представлены как средние и стандартные ошибки;

на фиг.8 показаны уровни сывороточной глутамат-пируват-трансаминазы (англ. glutamate pyruvate transaminase, GPT) у животных контрольных и экспериментальных групп, где все значения представлены как средние и стандартные ошибки;

на фиг.9 показаны уровни сывороточной медь- и цинксодержащей супероксиддисмутазы (англ. copper and zinc containing-superoxide dismutase, Cu/Zn-SOD) у животных контрольных и экспериментальных групп, где все значения представлены как средние и стандартные ошибки;

на фиг.10 показано воздействие SAC на длину поражений желудка у крыс, индуцированных соляной кислотой-этанолом, где ** указывает на значимое отличие от контрольной группы, получавшей носитель G1, р<0,01, G1: контрольная группа, получавшая носитель (дистиллированную воду), G2: 100 мг/кг SAC, G3: 200 мг/кг SAC, G4: 400 мг/кг SAC, и G5: группа положительного контроля (55,6 мг/кг «Stillen®» в качестве активного ингредиента);

на фиг.11 показаны скорости ингибирования поражений желудка у крыс, в модели индукции поражений соляной кислотой-этанолом, где ** указывает на значимое отличие от контрольной группы, получавшей носитель G1, р<0,01, G1: контрольная группа, получавшая носитель (дистиллированную воду), G2: 100 мг/кг SAC, G3: 200 мг/кг SAC, G4: 400 мг/кг SAC, и G5: группа положительного контроля (55,6 мг/кг «Stillen®» в качестве активного ингредиента);

на фиг.12 представлены фотографии желудков крыс в модели индукции поражений желудка соляной кислотой/этанолом, где G1: контрольная группа, получавшая носитель (дистиллированную воду), G2: 100 мг/кг SAC, G3: 200 мг/кг SAC, G4: 400 мг/кг SAC, и G5: группа положительного контроля (55,6 мг/кг «Stillen®» в качестве активного ингредиента);

на фиг.13 показано воздействие SAC на площадь поражений желудка у крыс, индуцированных аспирином, где *** указывает на значимое отличие от контрольной группы, получавшей носитель G1, р<0,01, G1: контрольная группа, получавшая носитель (дистиллированную воду), G2: 100 мг/кг SAC, G3: 200 мг/кг SAC, G4: 400 мг/кг SAC, и G5: группа положительного контроля (55.6 мг/кг «Stillen®» в качестве активного ингредиента);

на фиг.14 представлены скорости ингибирования поражений желудка у крыс в модели поражений желудка, индуцированных аспирином;

на фиг.15 представлены фотографии желудков крыс в модели поражений желудка, индуцированных аспирином;

на фиг.16 показано воздействие SAC на длину поражений желудка у крыс, индуцированных индометацином, где * указывает на значимое отличие от контрольной группы, получавшей носитель G1, р<0,01, G1: контрольная группа, получавшая носитель (дистиллированную воду), G2: 100 мг/кг SAC, G3: 200 мг/кг SAC, G4: 400 мг/кг SAC, и G5: группа положительного контроля (55.6 мг/кг «Stillen®» в качестве активного ингредиента);

на фиг.17 представлены скорости ингибирования поражений желудка у крыс в модели поражений желудка, индуцированных индометацином;

на фиг.18 представлены фотографии желудков крыс в модели поражений желудка, индуцированных индометацином;

Осуществление изобретения

Далее настоящее изобретение будет описано более полно со ссылкой на сопутствующие чертежи, в которых показаны примеры воплощения изобретения.

Композиция, включающая S-аллил-L-цистеин (SAC), обладает прекрасной активностью против Helicobacter pylori и оказывает защитное воздействие на слизистую желудка.

Авторы обнаружили, что мыши группы положительного контроля, которым вводили Helicobacter pylori, имеют значительно более высокий титр антител (анти-Н. pylori IgG) по сравнению с мышами группы отрицательного контроля, которым Helicobacter pylori не вводили (р<0,01), но экспериментальные группы, которым вводили SAC и Helicobacter pylori, имели значимо меньше Helicobacter pylori IgG по сравнению с группой положительного контроля (фиг.2А и 2В). Этот результат указывает на то, что SAC обладает эффектом ингибирования инфекции Helicobacter pylori у мышей. Авторы также обнаружили, что количество TNF-α, который является связанным с Т-клетками провоспалительным фактором, повысилось у мышей группы положительного контроля, которым вводили Helicobacter pylori, но его количество снижалось, если вместе с Helicobacter pylori вводили SAC (фиг.3). В итоге было обнаружено, что SAC ингибирует воспаление, вызванное инфекцией мышей Helicobacter pylori.

Для наблюдения воздействия SAC на поражения желудка, вызванные инфекцией Helicobacter pylori, срезы ткани мышиного желудка красили гематоксилином и эозином (окрашивание Н&Е). В результате в группах, в которых вводили Helicobacter pylori, наблюдали денатурацию клеток слизистой желудка и инфильтрацию эозинофилов в lamina propria (фиг.4), а количество эозинофилов, инфильтрующих эпителий слизистой желудка в группе положительного контроля, которая была инфицирована Helicobacter pylori, было больше, чем в группе отрицательного контроля, которая не была инфицирована (р<0,01), но количество значительно снизилось в экспериментальной группе, которой вводили SAC (р<0,05, фиг.5). Количество митотических фигур, которые представляют клеточные ядра в делящихся клетках, также увеличилось в группе, инфицированной Helicobacter pylori, по сравнению с группой отрицательного контроля, но снизилось в группах, в которых вводили SAC (фиг.6). Таким образом, показано, что поражения желудка, вызванные Helicobacter pylori, могут быть предотвращены или вылечены с помощью SAC.

По результатам анализа воздействий SAC на сывороточные биохимические уровни у животных, уровни глютамино-щавелево-уксусной трансаминазы (GOT) и глутамат-пируват-трансаминазы (GPT) оказались наиболее низкими в группе отрицательного контроля, которая не была инфицирована, а уровни GOT и GPT в группах, в которых вводили SAC, были меньше, чем в группе положительного контроля (фиг.7 и 8).

Уровень медь- и цинксодержащей супероксиддисмутазы (Cu/Zn-SOD) в сыворотке измеряли для изучения воздействий SAC на поражение окислением. По результатам, в группах, инфицированных Helicobacter pylori, уровни Cu/Zn-SOD были повышены по сравнению с группой отрицательного контроля, которая не была инфицирована. Однако уровень Cu/Zn-SOD в экспериментальной группе, которой вводили SAC, был выше, чем уровень в группе положительного контроля, которой вводили Helicobacter pylori (фиг.9). Было установлено, что SAC повышает SOD, которая экспрессируется защитным механизмом против инфекции Helicobacter pylori.

Кроме того авторы обнаружили, что SAC оказывает значимое воздействие на ингибирование поражений слизистой желудка, которые были индуцированы в крысах введением лекарственных соединений. При поражении желудка, индуцированном в крысах соляной кислотой-этанолом, SAC продемонстрировал значимое снижение поражения при сравнении с контрольной группой, которой вводили только носитель (фиг.10 и 12), и продемонстрировал скорость ингибирования поражения желудка (%) вплоть до 66% (фиг.11). SAC также демонстрирует значительное снижение в поражений желудка, индуцированных аспирином (фиг.13-15) или индометацином (фиг.16-18) по сравнению с группой отрицательного контроля. При поражениях желудка, индуцированных аспирином, скорость ингибирования SAC поражений желудка (%) составляет вплоть до около 85%, а при поражениях желудка, индуцированных индометацином, скорость ингибирования SAC поражений желудка (%) составляет вплоть до 94%, что сходно или лучше защитных воздействий, оказываемых на слизистую желудка «Stillen®», который использовался в группе положительного контроля. Результаты указывают на то, что SAC оказывает разнообразные защитные воздействия на слизистую желудка при поражениях желудка, вызванных различными факторами.

В изобретении предлагается фармацевтическая композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC с фармацевтически приемлемым носителем, которая, как определено на основании результатов экспериментов, обладает активностью против Helicobacter pylori.

В изобретении предлагается фармацевтическая композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC с фармацевтически приемлемым носителем и оказывающая защитное воздействие на слизистую желудка.

В изобретении предлагается пищевая композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC и обладающая активностью против Helicobacter pylori и защитным воздействием на слизистую желудка.

В изобретении предлагается способ ингибирования инфекции Helicobacter pylori и профилактики поражений желудка, вызванных инфекцией Helicobacter pylori? путем применения композиции, включающей в качестве активного ингредиента SAC.

В изобретении предлагается фармацевтическая композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC и фармацевтически приемлемый носитель для профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта.

В изобретении предлагается пищевая композиция, включающая в качестве активного ингредиента SAC для профилактики или облегчения нарушений желудочно-кишечного тракта.

Композиция по изобретению в дополнение к SAC может включать терапевтический агент для нарушений желудочно-кишечного тракта или агент, действующий против Helicobacter pylori.

В изобретении предлагается способ профилактики или лечения нарушений желудочно-кишечного тракта с помощью композиции, включающей в качестве активного ингредиента SAC и фармацевтически приемлемый носитель.

Инфекция Helicobacter pylori или нарушения желудочно-кишечного тракта также распространены у животных, и, таким образом, в изобретении также предлагаются композиции для животных.

Нарушения желудочно-кишечного тракта, для которых могут быть применены композиции по воплощению, включают хронический гастрит, острый гастрит, язву желудка, рак желудка, кровотечение в желудочно-кишечном тракте, желудочно-пищеводный рефлюкс, дуоденит и язвы двенадцатиперстной кишки, без ограничения перечисленным.

Активность против Helicobacter pylori может включать профилактику или лечение печеночной энцефалопатии, артериосклероза, заболеваний, связанных с гепатобиллиарной системой, уртикарии, мигрени, низкорослости, бесплодия, пищевой аллергии, хронического гастрита, острого гастрита, язвы желудка, рака желудка, кровотечения в желудочно-кишечном тракте, желудочно-пищеводного рефлюкса, дуоденита или язвы двенадцатиперстной кишки, без ограничения перечисленным.

В композиции по изобретению, в качестве активного ингредиента могут быть применены фармацевтически или ситологически приемлемая соль SAC. Соль может быть солью присоединения кислоты или четвертичной аммониевой солью. Примеры солей присоединения кислоты включают неорганические соли присоединения кислоты, такие как хлорид, гидробромид, гидроиодид, сульфат и фосфат, и органические соли присоединения кислоты, такие как оксалат, малеат, фумарат, лактат, малат, сукцинат, тартрат, бензоат и метансульфонат. Примерами четвертичной аммониевой соли являются короткоцепочечный алкилгалогенид, такой как метилиодид, метилбромид, этилиодид и этилбромид; короткоцепочечный алкилсульфонат, такой как метилметансульфонат и этилметансульфонат; и короткоцепочечный алкил арилсульфонат, такой как метил-п-толуолсульфонат.

SAC или его фармацевтически или ситологически приемлемая соль может существовать в виде сольвата или гидрата, и, таким образом, сольват или гидрат SAC или его фармацевтически или ситологически приемлемой соли может быть применен в качестве активного ингредиента для терапевтической композиции по данному воплощению.

SAC, примененный в данной заявке, может быть получен из растения, принадлежащего роду Allium, такого как чеснок, слоновий чеснок, лук или лук-шалот, с помощью способа, раскрытого в Европейской патентной публикации ЕР 0429080 А1, может быть получен синтезом, ферментацией или любым другим известным способом.

SAC, фармакологически или ситологически приемлемая соль SAC, или его сольват или гидрат, в качестве активного ингредиента могут быть прямо введены пациенту. Однако также пациентам могут быть введены композиция, включающая один или несколько активных ингредиентов, или сложный состав, приготовленный смешиванием активных ингредиентов с агентом против Helicobacter pylori или лекарственным средством для лечения нарушений желудочно-кишечного тракта.

В настоящем изобретении предлагается фармацевтическая композиция в виде состава для перорального введения, состава для введения через слизистую, состава для инъекции, состава для ингаляции, состава для внешнего применения, без ограничения перечисленным. Состав для перорального введения может включать твердые и мягкие капсулы, таблетки, суспензии, порошки, составы с замедленным высвобождением, энтеральные составы, гранулы, олеосахара, микрогранулы, пилюли, экстракты, жидкости, ароматические воды, эмульсии, сиропы, эликсиры, жидкие экстракты, настойки-отвары, настойки, лекарственные спирты и экстракционное масло, без ограничения перечисленным. Состав для введения через слизистую может быть пастилками, таблетками для медленного растворения в щечном кармане, подъязычными таблетками, суппозиториями и внутриносовыми спреями, без ограничения перечисленным. Инъекционный состав может быть подкожными инъекциями, внутримышечными инъекциями, внутривенными инъекциями и таблетками-имплантами, без ограничения перечисленным. Состав для внешнего применения может быть каплями для носа, офтальмологическими растворами, ушными растворами, пастами, припаркой, линиментами, лосьонами, спреями, присыпками и жидкостями для внешнего применения, без ограничения перечисленным.

Состав по изобретению дополнительно может включать один или несколько носителей, в дополнение к одному или нескольким активным ингредиентам, например наполнители, такие как крахмал, лактоза, карбоксиметилцеллюлоза и каолин, связующие, такие как вода, желатин, спирт, глюкоза, гуммиарабик, и трагакантовая камедь, разрыхлители, такие крахмал, декстрин и альгинат натрия, смазочные материалы, такие как тальк, стеариновая кислота, стеарат магния, и жидкий парафин, а также другие добавки, такие как солюбилизирующие агенты.

Ежедневная доза SAC может варьировать в зависимости от различных факторов, таких как тяжесть заболевания, возникновение заболевания и возраст, состояние и осложнения пациента. В целом, ежедневная доза SAC для взрослого может находиться в диапазоне от 1 мг до 10 г, предпочтительно от 100 мг до 4 г и более предпочтительно от 200 до 2000 мг. Однако ежедневная доза может дополнительно повышаться для пациентов, имеющих тяжелые симптомы или осложнения для улучшения терапевтической эффективности. Составы могут быть введены в одиночной дозе или разделены на дозы, вводимые 2 или 3 раза в день. Например, составы однократной или двухкратной дозы, каждый содержащий от 200 до 500 мг SAC, могут быть перорально введены один раз или дважды в день, но введение может быть скорректировано при необходимости.

Если композиция является пищевой композицией, то, при необходимости, количество активных ингредиентов может быть скорректировано, например, в виде пищевых добавок или добавок для поддержания здоровья для профилактики или лечения заболеваний. В целом, количество SAC в пищевом продукте или в напитке может находиться в диапазоне от 0,0001 до 90% масс, предпочтительно от 0,1 до 50% от общей массы пищевого продукта или напитка. Несмотря на то, что количество SAC в добавках для поддержания здоровья может находиться в описанном выше диапазоне, для длительного применения оно может быть увеличено, поскольку активный ингредиент является безопасным. Пищевой продукт, включая пищевую композицию по изобретению, может быть мясом, колбасным изделием, хлебом, шоколадом, конфетой, снэком, пиццей, лапшей быстрого приготовления, жевательной резинкой, молочными продуктами, супом, напитками, чаем, алкогольными напитками и витаминами, без ограничения перечисленным. Далее в заявке, одно или несколько воплощений будут описаны подробно со ссылкой на представленные ниже примеры. Однако эти примеры не предназначены для ограничения цели и объема притязаний изобретения.

Экспериментальные примеры

I. Воздействие SAC на животных, инфицированных Helicobacter pylori

Тестируемый материал

S-аллил-L-цистеин (SAC) приобрели у TCI Chemical Со. (Токио, Япония). Helicobacter pylori является штаммом 43504 Американской коллекции типовых культур (АТСС) (cagA+, vacA si-ml тип) и этот штамм культивировали на агаре Мюллера-Хинтона при 37°С в течение 48 часов, в микроаэрофильных условиях в атмосфере 5% СO2 в концентрации 1X109 КОЕ/мл.

Тестируемые животные

Использовали S-недельных самцов беспатогенных (англ. specific pathogen-free, SRF) мышей C57BL/6. Массы мышей измеряли в лаборатории для проведения экспериментов на животных, Отдела Патологии Колледжа Ветеринарной Медицины, Национального Университета Кенбук. Затем мышей разделяли на 4 группы и кормили так, чтобы средние массы каждой из групп были похожими. Мышей акклимировали и выращивали в лаборатории для проведения экспериментов на животных, Колледжа ветеринарной медицины национального университета Кенбук при температуре 22±3°С, при относительной влажности 50±10%, с 12-часовым световым днем (свет включался в 8:00 и выключался в 20:00) с помощью автоматической системы контроля за температурой и влажностью. Другие условия среды при выращивании, способные оказать влияние при тестировании, не рассматривались для применения в течение всего периода тестирования. Мыши получали свободный доступ к твердой лабораторной диете (PMI Nutrition International, 505 North 4th Street Ричмонд, Индиана 47374, США) и к бутылкам с фильтрованной водопроводной водой.

Тестируемая группа и введение

8-недельных самцов мышей C57BL/6 разделили на 4 группы, т.е. группу положительного контроля (которой вводили Helicobacter pylori; PC), группу отрицательного контроля (которой вводили раствор соли; NC), экспериментальную группу 1 (которой вводили Helicobacter pylori и 200 мг/кг SAC; SAC1), экспериментальную группу 2 (которой вводили Helicobacter pylori и 400 мг/кг SAC; SAC2). В каждой группе было по 10 мышей. Белый порошкообразный SAC разводили в водопроводной воде до концентраций 20 мг/мл и 40 мг/мл и вводили 10 мкл/г (массы тела) разведенного SAC перорально мышам групп SAC1 и SAC2 три раза в неделю в течение 10 недель. Мыши получали свободный доступ к водопроводной воде в течение всего периода тестирования. Helicobacter pylori собирали с помощью раствора соли в концентрации 1×109 КОЕ/мл и 0,2 мл разведенных Helicobacter pylori перорально вводили в каждую мышь в течение 8 недель через две недели после введения SAC. Мышей держали без пищи в течение 8 часов перед инфекцией и 0,15 мл 0,2 М бикарбоната натрия (NаНСО3) вводили в каждую мышь за 10 минут перед введением Helicobacter pylori для нейтрализации кислой из-за голодания среды желудка. Такое же количество солевого раствора вместо инфекционных веществ вводили в группу NC. Мыши всех групп при питании получали нормальную диету. После 10-недельного периода тестирования у всех мышей были взяты аутопсии, и для анализа патологии тканей собирали образцы крови и внутренних органов. Тестирование осуществляли в соответствии с представленным на фиг.19 способом.

Статистический способ

Статистическую значимость полученных данных проверяли с помощью t-критерия для независимых выборок. Статистический анализ осуществляли с помощью «SPSS 14.0К», и р-значение меньше чем 0,05 рассматривали как значимое.

Экспериментальный пример 1. Воздействие SAC на массу тела

Для изучения изменений массы тела мышей три раза в неделю в течение всего 10-недельного периода тестирования измеряли массы самцов мышей C57BL/6, инфицированных Helicobacter pylori. Массы мышей постепенно повышались во всех группах, за исключением того, что массы незначительно и временно снизились в период инфекции Helicobacter pylori и получения сыворотки для определения инфекции (ФИГ.1). Скорость прироста массы группы NC составила 31,3%, а в группе PC, группе SAC1 и группе SAC2 соответственно 28,9%, 26,9% и 28,7%. Скорость прироста массы группы PC была меньше, чем в группе NC на 2,4%, скорость прироста массы группы SAC1 была меньше, чем у группы PC на 2%, и скорость прироста массы группы SAC2 была меньше, чем у группы PC на 0,2%. Несмотря на то, что скорость прироста массы группы SAC2 была больше, чем у группы SAC1 на 1,8%, этот результате считаем незначимым, и, таким образом, инфекция Helicobacter pylori и тестируемые материалы не оказывали значимое воздействие на изменения массы.

Экспериментальный пример 2. Воздействие SAC на способность образования сывороточных антител против Helicobacter pylori (анти-Н. pylori IgG)

Метод

Иммуноферментный твердофазный анализ (ИФА) использовали для обнаружения воздействия SAC на способность образовывать сывороточные антитела против Helicobacter pylori. Перорально инфекционный штамм Н. pylori АТСС 43504 и рекомбинантный токсин VacA, как правило продуцируемый Helicobacter pylori, применяли в качестве антигенов в мышах. Их добавляли в 96-луночный микропланшет для анализа концентраций, 1 мкг/лунку и 10 нг/лунку, соответственно, и выдерживали микропланшет при 4°С для образования покрытия. Надосадочную жидкость удаляли и добавляли в микропланшет блокирующий буфер (1% обезжиренное молоко) для ингибирования нежелательных реакций, после чего выдерживали микропланшет при 37°С в течение 1 часа. 10 мкл сыворотки мышей из всех групп добавляли в микропланшет и выдерживали при 37°С в течение 2 часов. Микропланшет отмывали Трис-буферным раствором, включающим Твин20, и в качестве вторичного антитела добавляли в него IgG, связанное с пероксидазой хрена (HRP). Затем микропланшеты выдерживали при 37°С в течение 1 часа. Затем после такой же отмывки 100 мкл смеси, включающей хромофорный реагент 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин (ТМВ) и равное количество Н2О2, добавляли в микропланшет, который выдерживали в темноте. В результате в течение 30 минут обнаруживали окрашивание. 100 мкл 0,2 М серной кислоты добавляли в микропланшет для остановки реакции и измеряли поглощение при 450 нм.

Результат

В результате измерения в сыворотке уровня антител IgG против Н. Pylori было установлено, что антитело против Helicobacter pylori (анти-Н. pylori IgG) вырабатывалось в группе PC, группе SAC1 и группе SAC2, в которых вводили Helicobacter pylori, и не вырабатывалось в группе NC, в которой Helicobacter pylori не вводили (фиг.2А и 2В). При этом титр анти-Н. pylori IgG в группах SAC1 и SAC2 был меньше, чем в группе PC, а титр антитела в группе SAC2 был значимо меньше, чем в группе SAC1. Соответственно, выработка антитела против Helicobacter pylori ингибировалась зависимым от концентрации SAC образом (фиг.2А). Кроме того, выработка антитела против вырабатываемого Helicobacter pylori токсина Vac А (анти-slml VacA IgG) ингибировалась также, как и в случае анти-Н. pylori IgG (фиг.2В). В результате было установлено, что инфекция Helicobacter pylori ингибируется зависимым от концентрации SAC образом.

Экспериментальный пример 3. Воздействие SAC на уровень сывороточного TNF-α

Метод

Для изучения воздействия SAC на воспалительный фактор TNF-α в сыворотке использовали коммерчески доступный микропланшетный набор для определения TNF-α с помощью мышиного антитела (R&D systems Inc., США) и концентрации TNF-α в сыворотке мышей измеряли в соответствии с руководствами набора.

Результат

При сравнении с группой NC уровень TNF-α повышался в группах, которым вводили Helicobacter pylori (р<0,1). Уровень TNF-a в группах SAC1 и SAC2 был меньше, чем в группе PC (р<0,09) (фиг.3). В результате было обнаружено, что SAC ингибирует воспаление, вызванное инфекцией мышей Helicobacter pylori.

Экспериментальный пример 4. Воздействие SAC на гистологическое изменение в желудке, вызванное Helicobacter pylori

Метод

Среди поражений, вызванных инфекцией Helicobacter pylori и произошедших в течение 8-недельного периода тестирования, наблюдали патологические изменения ткани желудка у самцов мышей C57BL/6 в модели инфекции Helicobacter pylori. Образец желудка фиксировали в 10% формалине и формировали парафиновый блок. Парафиновый блок нарезали на срезы, имеющие толщину 4 мкм, и срезы окрашивали гематоксилином-эозином (окрашивание Н&Е) и рассматривали с помощью оптического микроскопа. Все патологические признаки, такие как тяжесть клеточных повреждений, количество инфильтрованных эозинофилов и количество митотических фигур по всему желудку проверяли дважды. Кроме того, проверяли количество эозинофилов в участке, на котором соединяются пищевод и желудок, и подсчитывали с трех участков желудка, т.е. кардиального отдела желудка, желудочной ямки и желудочных крипт lamina propria. Количество митотических фигур подсчитывали на двух участках, выбранных из всего антрального отдела желудка от кардиального отдела желудка до пилоруса. Таким образом, из каждого животного были получены два образца и осмотрены при 400х увеличении и для каждой группы было рассчитано среднее значение.

Результат

По результатам окрашивания гематоксилином-эозином во всех группах изучали инфильтрацию эозинофилов и количество митотических фигур. Исследовали количество эозинофилов, обнаруженных в lamina propria желудка, и количество эозинофилов, инфильтрованных в эпителий слизистой желудка (фиг.4). Количество эозинофилов было значимо повышено в группах, инфицированных Helicobacter pylori, по сравнению с группой NC (р<0,01, фиг.5В). С другой стороны, количество эозинофилов в группах SAC1 и SAC2 было меньше, чем в группе PC и в частности, количество эозинофилов в группе SAC1 было значимо меньше, чем в группе PC (р<0,05, фиг.5В). Количество митотических фигур также увеличилось в группах, инфицированных Helicobacter pylori, по сравнению с группой NC. Несмотря на то, что между группой PC, группой SAC1 и группой SAC2 не было значимой разницы, количество митотических фигур было незначительно снижено в группе SAC2. Повышение инфильтрации эозинофилов в желудке, вызванной инфекцией Helicobacter pylori, было показано в различных предшествующих исследованиях. Снижение инфильтрации эозинофилов посредством SAC указывает на то, что SAC оказывает защитное воздействие против поражений желудка, вызванных инфекцией Helicobacter pylori.

Экспериментальный пример 5. Воздействие SAC на серологические параметры в модели мышей, инфицированных Helicobacter pylori.

По результатам анализа сывороточной глютамино-щавелево-уксусной трансаминазы (GOT), которая является показателем, связанным с общими поражениями, группа PC демонстрирует наиболее высокий уровень GOT. Несмотря на то, что группы SAC1 и SAC2 значимо не отличались от группы PC, уровни GOT групп SAC1 и SAC2 были меньше, чем уровень группы PC (р<0,08, фиг.7).

По результатам анализа сывороточной глутамат-пируват-трансаминазы (GPT), которая является показателем, связанным поражением печени, группа PC демонстрирует наиболее высокий уровень GPT. Несмотря на то, что группы SAC1 и SAC2 значимо не отличались от группы PC, уровни GPT групп SAC1 и SAC2 были меньше, чем уровень группы PC (фиг.8).

Экспериментальный пример 6. Измерение уровня сывороточной Cu/Zn-SOD

Метод

Воздействие SAC на медь- и цинксодержащую супероксиддисмутазу (Cu/Zn-SOD), которая является антиоксидантным ферментом в сыворотке, наблюдали в модели инфекции самцов мышей C57BL/6 Helicobacter pylori в течение всего 10-недельного периода тестирования. Для этого применяли набор для измерения активности супероксиддисмутазы (BioVision, Маунтин-Вью, Калифорния, США). Смешивали 20 мкл сыворотки и 200 мкл рабочего раствора WST в качестве субстрата. Добавляли 20 мкл ферментного рабочего раствора и выдерживали смесь при 37°С в течение 20 минут. Поглощение измеряли при 450 нм. Контрольную реакцию проводили также, как описано выше, за исключением того, что вместо сыворотки добавляли 20 мкл дистиллированной воды. Рассчитывали активность SOD (% скорости ингибирования).

Результат

Уровни Cu/Zn-SOD групп SAC1 и SAC2 были выше, чем у группы PC, на около 4% и около 3%, соответственно. Было отмечено, что уровни Cu/Zn-SOD в группе SAC2 были немного меньше, чем в группе SAC1. Соответственно, было обнаружено, что SAC стимулирует экспрессию SOD, которая вырабатывается защитным механизмом в ответ на инфекцию Helicobacter pylori.

II. Защитное воздействие SAC на слизистую желудка животных, имеющих поражения желудка лекарственными средствами.

Защитное воздействие SAC на слизистую желудка оценивали на животных, имеющих поражения желудка, индуцированные соляной кислотой-этанолом, аспирином или индометацином.

Тестируемый материал

SAC приобрели у TCI Chemical Со. (Токио, Япония). В качестве носителя использовали стерильную воду для инъекций (Model No. 73H5F21, Dae Han Pharmaceutical Co. Ltd.), а в качестве материала положительного контроля использовали «Stillen®». 0,5% CMC-Na и стерильную воду для инъекций использовали в качестве инертных носителей для «Stillen®». Соляную кислоту приобрели у Samjung Chemical, Co., этанол приобрели у Baker, Co., аспирин приобрели у Sigma, Co., а индометацин приобрели у Sigma, Со.

Тестируемые животные

7-8-недельных самцов беспатогенных (SPF) крыс HsdKoat.Sprague-Dawley®™SD®TN (масса 7-недельных самцов находилась в диапазоне от 208,44 до 227,39 г, а масса 8-недельных самцов находилась в диапазоне от 223,85 до 245,03 г, крысы были приобретены у Koatech, Co. Ltd., Кенгидо, Корея) карантинировали и акклимировали в лаборатории для проведения экспериментов на животных в течение 7 дней. Крыс выращивали в лаборатории для проведения экспериментов на животных в Биоцентре Кенгидо при температуре 23,3°С, при относительной влажности 55-15% с 12-часовым световым днем (свет включался в 8:00 и выключался в 20:00), при этом воздух вентилировался 10-20 раз в час. Другие условия среды при выращивании, способные оказать влияние при тестировании, не рассматривались для применения в течение всего периода тестирования. Крысы получали свободный доступ к твердой лабораторной диете (Harlan Co. Ltd., США. сертифицированная «Teklad» диета для грызунов с общим содержанием белка 18%, 2918С), которая поставлялась «Folas International». Согласно анализу сертификата диетической композиции в ней отсутствовали ингредиенты или контаминанты, которые могли бы оказывать побочное воздействие при тестировании. Крысы получали свободный доступ к бутылям с водопроводной водой, которая была стерилизована с помощью УФ-стерилизатора и микрофильтра.

Тестируемая группа и введение

Крыс разделяли на контрольную группу G1, которой вводили только носитель, экспериментальную группу G2, которой вводили 100 мг/кг SAC, и экспериментальную группу G3, которой вводили 200 мг/кг SAC, экспериментальную группу G4, которой вводили 400 мг/кг SAC, и группу положительного контроля G5, которой в качестве положительного контроля вводили 100 мг/кг «Stillen®» (55,6 мг/кг в качестве активного ингредиента). В модели на животных с индукцией соляной кислотой-этанолом каждая группа включала 8 крыс (Экспериментальный пример 7), а в модели на животных с индукцией аспирином (Экспериментальный пример 8) и в модели на животных с индукцией индометацином (Экспериментальный пример 9) каждая группа включала 6 крыс.

Таблица 1
Группа Пол Общее количество животных Количество животных Вводимый объем (мл/кг) Доза (мг/кг)
G1 Муж. 8(6) 1~8(1~6) 10 0
G2 Муж. 8(6) 9~16(7~12) 10 100
G3 Муж. 8(6) 17~24(13~18) 10 200
G4 Муж. 8(6) 25~32(19~24) 10 400
G5 Муж. 8(6) 33~40(25~30) 10 55,6а)

G1: Контрольная группа, получавшая носитель

G2-G4: Экспериментальные группы, которым вводили SAC

G5: Группа положительного контроля, которой вводили материал положительного контроля

а): Доза активного ингредиента

Тестируемое вещество вводили напрямую в желудок с помощью инъекционной трубки, оборудованной зондом для перорального введения в одиночной дозе один раз в день.

Ни одно из животных не умерло, и ни в одной из групп не наблюдали каких-либо других изменений, а значимое изменение массы в связи с введением SAC не было отмечено ни при введении, ни в течение всего периода тестирования.

Статистический способ

Сравнение группы, получавшей носитель, с экспериментальными группами и экспериментальной группой, которой вводили материал положительного контроля, осуществляли с помощью однофакторного дисперсионного анализа (One-way ANOVA). В связи с этим были приняты значимость и гомоскедастичность и поэтому провели апостериорный тест с помощью критерия Дункана. Значимость принимали, если р<0,05, и использовали «SPSS 10.1».

Экспериментальный пример 7. Воздействие SAC на длину поражений желудка и на скорость ингибирования поражений желудка в животной модели поражения желудка, вызванного соляной кислотой-этанолом.

Метод

Водили тестируемые вещества. Через один час, в каждую крысу перорально вводили 1,5 мл 150 мМ НСl в 60% этаноле. Крыс, которым вводили этанол и SAC, держали голодными без воды в клетках из нержавеющей стали в течение 1 часа. Через один час после введения соляной кислоты-этанола крыс умерщвляли под наркозом эфиром и выделяли их желудки, включая части двенадцатиперстной кишки и пищевода. Внутренние стороны желудков были незамедлительно отмыты 13 мл 2% нейтрального буферного формалина и части двенадцатиперстной кишки и пищевода были зафиксированы зажимами. Затем в них добавили 13 мл 2% нейтрального буферного формалина и выдержали в течение 5 минут для фиксации. Большой изгиб каждого желудка разрезали, фиксировали на секционном столе и разворачивали для измерения длин поражений желудка с помощью штангенциркуля с нониусом. Делали фотографии развернутых желудков (фиг.12) и фиксировали желудки 10% нейтральным буферным формалином.

Результат

Согласно этой модели поражения желудка этанол напрямую стимулирует слизистую желудка, индуцирует отек в мышечном слое под слизистой оболочкой, для того чтобы вызвать временное ишемическое состояние и, таким образом, индуцировать некроз клеток вследствие окислительного повреждения, а соляная кислота напрямую стимулирует слизистую желудка и ускоряет двигательную функцию желудка, вызывая острый гастрит. При макроскопическом исследовании поражение наблюдали по всей слизистой желудка, а геморрагию наблюдали в длинной линии. Через час после введения соляной кислоты-этанола крысы контрольной группы, получавшей носитель, имели поражения всей слизистой желудка, что было установлено с помощью аутопсии (209,60±28,39 мм). Экспериментальная группа, которой вводили 200 мг/кг SAC (106,65±16,70 мм, р<0,01), экспериментальная группа, которой вводили 400 мг/кг SAC (72,25±19,33 мм, р<0,01), и группа положительного контроля, которой вводили «Stillen®» (102,51±11,35, р<0,01), демонстрировали значимо меньше поражений, чем в контрольной группе, получавшей носитель (ссылка на фиг.10 и 12).

Скорость ингибирования поражений желудка (%)=(средняя длина контрольной группы, получавшей носитель - длина поражения желудка в каждом животном)/среднюю длину контрольной группы, получавшей носитель X 100. Экспериментальная группа, которой вводили 200 мг/кг SAC (41,12±7,97%, р<0,01), экспериментальная группа, которой вводили 400 мг/кг SAC (65,53±9,22%, р<0,01), и группа положительного контроля, которой вводили «Stillen®» (51,09±5,41%, р<0,01), демонстрировали значимо большую скорость ингибирования поражений желудка (%), чем в контрольной группе, получавшей носитель (ссылка на фиг.11).

Экспериментальный пример 8. Воздействие SAC на площадь поражения желудка и скорость ингибирования поражения желудка в животной модели поражения желудка, вызванного аспирином.

Метод

Крыс держали без пищи в течение больше 24 часов в нормальной среде, вводили тестируемое вещество, а через 30 минут перорально вводили 200 мг/кг аспирина в 0,15 моль/л НСl. Через три часа после введения аспирина крыс умерщвляли под наркозом эфиром и выделяли их желудки, включая части двенадцатиперстной кишки и пищевода. Желудки фиксировали в течение 10 минут путем инъекции 12 мл 2% формалина. Большой изгиб каждого желудка разрезали и разворачивали, делали фотографии железистой области желудка, а затем измеряли площади поражений с помощью анализатора изображений.

Результат

Таблица 2
группа Количество животных (n=6) Площадь язвы (мм2) SD СИ(%)
1 2 3 4 5 6
G1 165,76 1555,77 216,14 231,88 285,72 236,67 215,3 48,35
G2 91,68 44,12 40,95 63,52 63,52 64,67 68,6 25,94 -68,2
G3 46,29 19,37 5,41 27,07 27,07 43,86 31,4 16,99 -85,4
G4 63,26 9,34 70,28 40,03 40,03 11,58 32,5 29,78 -84,9
G5 16,86 29,58 7,82 71,91 71,91 61,96 32,5 28,09 -84,9

Согласно модели поражения желудка аспирин, который является нестероидным противовоспалительным лекарственным средством, ингибирует синтез простагландина, защищающего стенки желудка, что вызывает язву желудка. Поражения наблюдали по всей слизистой желудка и наблюдали кровотечение в чистом виде. После введения аспирина крысы контрольной группы, получавшей носитель, имели кровотечения и поражения по всей слизистой желудка, что было установлено с помощью аутопсии (215,3±48,35 мм2). Экспериментальная группа, которой вводили 100 мг/кг SAC (68,6±25,94 мм2), экспериментальная группа, которой вводили 200 мг/кг SAC (31,4±16,99 мм2), экспериментальная группа, которой вводили 400 мг/кг SAC (32,5±29,78 мм2), и группа положительного контроля (32,5±28,09 мм2) демонстрировали значимо меньше поражений желудка (%), чем контрольная группа, получавшая носитель (ссылка на фиг.13 и 15).

Скорость ингибирования поражений желудка (%)=(средняя площадь контрольной группы, получавшей носитель - площадь поражения желудка в каждом животном) /среднюю площадь контрольной группы, получавшей носитель X 100. Экспериментальная группа, которой вводили 100 мг/кг SAC (68,2%), экспериментальная группа, которой вводили 200 мг/кг SAC (85,4%), экспериментальная группа, которой вводили 400 мг/кг SAC (84,9%), и группа положительного контроля (84,9%) демонстрировали значимо большую скорость ингибирования поражений желудка (%), чем контрольная группа, получавшая носитель (ссылка на фиг.14).

Экспериментальный пример 9. Воздействие SAC на площадь поражения желудка и скорость ингибирования поражения желудка в животной модели поражения желудка, вызванного индометацином.

Метод

Крыс держали без пищи в течение больше 24 часов в нормальной среде, вводили SAC, а через 30 минут перорально вводили 25 мг/кг индометацина в дистиллированной воде. Через шесть часов после введения индометацина крыс умерщвляли под наркозом эфиром и выделяли их желудки, включая части двенадцатиперстной кишки и пищевода. Желудки фиксировали в течение 10 минут путем инъекции 12 мл 2% формалина, большой изгиб каждого желудка разрезали и разворачивали, делали фотографии поражений и затем измеряли площади поражений с помощью анализатора изображений.

Результат

Таблица 3
группа Количество животных (n=6) Площадь язвы (мм2) SD СИ(%)
1 2 3 4 5 6
G1 6,4 18,0 6,7 4,2 0,9 9,6 7,6 5,85
G2 1,3 1,6 1,5 9,4 - 2,3 3,2 3,47 -57,9
G3 0,0 0,3 0,9 0,6 0,7 0,4 0,5 0,30 -93,8
G4 0,8 0,4 0,1 0,2 0,1 1,0 0,4 0,36 -94,4
G5 3,7 0,6 2,7 0,7 7,7 5,2 3,4 2,75 -55,2

Согласно модели поражения желудка индометацин, который является нестероидным противовоспалительным лекарственным средством, ингибирует синтез простагландина, защищающего стенки желудка, что вызывает поражения желудка. В слизистой желудка наблюдали местные поражения и кровотечение. После введения индометацина крысы контрольной группы, получавшей носитель, имели поражения с площадью 7,6±5,85 мм, что было идентифицировано аутопсией. В экспериментальной группе, которой вводили 100 мг/кг SAC, площадь поражений составляла 3,2±3,47 мм2, что было меньше чем на половину по сравнению с контрольной группой, получавшей носитель. Экспериментальная группа, которой вводили 200 мг/кг SAC (0,5±0,30 мм2), экспериментальная группа, которой вводили 400 мг/кг SAC (0,4±0,36 мм2), и группа положительного контроля (3,4±2,75 мм) демонстрировали значимо меньше поражений, чем контрольная группа, получавшая носитель. В частности, экспериментальные группы, которым вводили 200 мг/кг и 400 мг/кг SAC, демонстрировали несущественные поражения желудка без кровотечения (фиг.16 и 18).

Скорость ингибирования поражений желудка (%) рассчитывали также, как и в экспериментальном примере 8. Экспериментальная группа, которой вводили 100 мг/кг SAC (57,9%), экспериментальная группа, которой вводили 200 мг/кг SAC (93,8%),экспериментальная группа, которой вводили 400 мг/кг SAC (94,4%), и группа положительного контроля (55,2%) демонстрировали значимо большую скорость ингибирования поражений желудка (%), чем контрольная группа, получавшая носитель. В частности, было обнаружено, что поражение желудка может полностью ингибироваться при введении 200 мг/кг или большего количества SAC (ссылка на фиг.17).

Примеры составов

Различные составы, включающие SAC в качестве активного ингредиента, были приготовлены следующим образом.

Пример состава 1. Изготовление таблетки

SAC 200 мг

Лактоза 50 мг

Крахмал 10 мг

Целесообразное количество стеарата магния.

Вышеуказанные ингредиенты были смешаны и таблетированы с помощью известного способа приготовления таблеток.

Пример состава 2. Изготовление порошка

SAC 250 мг

Лактоза 30 мг

Крахмал 20 мг

Целесообразное количество стеарата магния.

Вышеуказанные ингредиенты были смешаны и помещены в пакет, покрытый полиэтиленом и пакет был заклеен для приготовления порошка.

Пример состава 3. Изготовление капсулы

SAC 500 мг

Лактоза 30 мг

Крахмал 28 мг

Целесообразное количество стеарата магния.

Вышеуказанные ингредиенты были смешаны и помещены в твердую желатиновую капсулу с помощью способа приготовления капсул. Пример состава 4. Изготовление суспензии

SAC 50 мг

Изомеризованный сахар 10 г

Сахар 30 мг

Натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы 100 мг

Целесообразное количество лимонной вкусо-ароматической добавки

Общий объем, включающий очищенную воду, 100 мл.

Вышеуказанные ингредиенты были смешаны для приготовления суспензии с помощью известного способа, 100 мл бутыли коричневого стекла заполняли суспензией и стерилизовали.

Пример состава 5. Изготовление мягкой капсулы (количество в одной мягкой капсуле)

SAC 500 мг

Полиэтиленгликоль 400 400 мг

Концентрированный глицерин 55 мг

Очищенная вода 35 мг.

Полиэтиленгликоль и концентрированный глицерин смешивали и добавляли к ним очищенную воду. К ним добавляли флавон, выдерживали смесь при около 60°С и смесь перемешивали на скорости около 1500 об/мин с помощью лабораторной мешалки. Смесь охлаждали до комнатной температуры, при медленном перемешивании и удаляли пузыри с помощью вакуумного насоса для приготовления содержимого мягких капсул. Покрытие мягкой капсулы приготовляли с помощью известных в данной области желатина и пластификатора. 132 мг желатина, 52 мг концентрированного глицерина, 6 мг 70% раствора дисобитола, целесообразное количество этилванилина в качестве ароматизирующего средства и карнаубского воска в качестве основы для покрытия использовали для приготовления одной мягкой капсулы с помощью известного способа.

Пример состава 6. Изготовление инъекции

SAC 200 мг

Маннит 180 мг

Стерилизованная дистиллированная вода для инъекций 2974 мг

Na2HPО412H2О 26 мг.

Ампулу с вышеуказанными ингредиентами готовили с помощью известного способа.

Пример состава 7. Изготовление напитка

SAC 0.01 г

Лимонная кислота 8.5 г

Белый сахар 10 г

Глюкоза 2,5 г

DL-яблочная кислота 0.3 г

Целесообразное количество очищенной воды.

Вышеуказанные ингредиенты и соответствующее количество очищенной воды были смешаны до общего объема 100 мл и размешаны для приготовления напитка с помощью известного способа.

Хотя настоящее изобретение было конкретно представлено и описано со ссылкой на примеры его воплощения, специалистам в этой области будет понятно, что различные изменения в форме и деталях могут быть внесены без отхода от духа и объема притязаний настоящего изобретения, которые определяются представленной ниже формулой изобретения.

1. Фармацевтическая композиция, которая содержит S-аллил-L-цистеин или его фармацевтически приемлемую соль, или их сольват, или гидрат, для производства лекарственного средства против Helicobacter pylori при профилактике или лечении желудочно-кишечных нарушений, при которых Helicobacter pylori является фактором, вносящим основной вклад в их развитие.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, где желудочно-кишечное заболевание представляет собой хронический гастрит, острый гастрит, язву желудка, рак желудка, кровотечение в желудочно-кишечном тракте, желудочно-пищеводный рефлюкс, дуоденит или язву двенадцатиперстной кишки.

3. Фармацевтическая композиция по п.1, которая кроме того оказывает защитное воздействие на слизистую желудка.

4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой S-аллил-L-цистеин выделен и очищен из растения, принадлежащего к роду Allium, синтезирован или получен ферментацией.

5. Фармацевтический состав против Helicobacter pylori при профилактике или лечении желудочно-кишечных нарушений, при которых Helicobacter pylori является фактором, вносящим основной вклад в их развитие, содержащий композицию по любому из пп.1 или 2, который выбран из группы, состоящей из состава для перорального введения, состава для введения через слизистую, инъецируемого состава, состава для ингаляции и состава для внешнего применения.

6. Фармацевтический состав по п.5 для перорального введения, который выбран из группы, состоящей из твердых и мягких капсул, таблеток, суспензий, порошка, составов с замедленным высвобождением, энтеральных составов, гранул, олеосахаров, микрогранул, пилюль, экстрактов, жидкостей, ароматических вод, эмульсий, сиропов, эликсиров, жидких экстрактов, настоек-отваров, настоек, лекарственных спиртов и экстракционных масел.

7. Питательная композиция, которая содержит в качестве активного ингредиента S-аллил-L-цистеин или его фармацевтически приемлемую соль, или их сольват, или гидрат и которая полезна против Helicobacter pylori при профилактике и/или облегчении нарушений желудочно-кишечного тракта, при которых Helicobacter pylori является фактором, вносящим основной вклад в их развитие.

8. Питательная композиция по п.7, где нарушения желудочно-кишечного тракта выбирают из группы, состоящей из хронического гастрита, острого гастрита, язвы желудка, рака желудка, кровотечения в желудочно-кишечном тракте, желудочно-пищеводного рефлюкса, дуоденита или язвы двенадцатиперстной кишки.

9. Питательная композиция по п.8, которая кроме того оказывает защитное воздействие на слизистую желудка.

10. Применение S-аллил-L-цистеина или его фармацевтически приемлемой соли, или их сольвата, или гидрата для производства лекарственного средства против Helicobacter pylori при профилактике или лечении желудочно-кишечных нарушений, при которых Helicobacter pylori является фактором, вносящим основной вклад в их развитие.

11. Применение по п.10, при котором желудочно-кишечное заболевание представляет собой хронический гастрит, острый гастрит, язву желудка, рак желудка, кровотечение в желудочно-кишечном тракте, желудочно-пищеводный рефлюкс, дуоденит или язву двенадцатиперстной кишки.

12. Применение по п.10, при котором лекарственное средство кроме того оказывает защитное воздействие на слизистую желудка.

13. Применение S-аллил-L-цистеина или его фармацевтически приемлемой соли, или их сольвата, или гидрата для производства питательной композиции, полезной против Helicobacter pylori при предотвращении или облегчении желудочно-кишечного заболевания, при котором Helicobacter pylori является фактором, вносящим основной вклад в их развитие.

14. Применение по п.13, при котором питательная композиция кроме того оказывает защитное воздействие на слизистую желудка.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения средства, обладающего противоязвенным действием. Способ получения средства, обладающего противоязвенным действием, путем экстракции коры осины 40% спиртом этиловым с использованием многоступенчатого противоточного экстрагирования с последующей очисткой, сгущением под вакуумом и сушкой в вакуумном шкафу, добавления к полученному сухому экстракту лудипресса, при определенных условиях, с последующим наполнением твердых желатиновых капсул.

Группа изобретений относится к новым оксииндольным производным формулы (I) или их фармацевтически приемлемым солям, фармацевтическим композициям на их основе и их применению для лечения различных расстройств, которые опосредованы через мотилиновый рецептор (GPR38).
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, и касается эндоскопического лечения гастродуоденальных язв. Способ включает проведение лечебной эндоскопии в первой фазе язвенного процесса.

Изобретение относится к таблетированной многоединичной лекарственной форме, содержащей активное вещество, выбранное из омепразола, одного из его индивидуальных энантиомеров, щелочной соли омепразола и одного из ее индивидуальных энантиомеров.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения противоязвенного гастроретентивного средства. Способ получения противоязвенного гастроретентивного средства путем экстракции коры осины при определенных условиях, добавления к экстракту коры осины сухому гуаровой камеди (гуар) и карбоксиметилцеллюлозы натриевой соли (Na-КМЦ) в определенном соотношении, полученную смесь перемешивают до получения однородной массы, подвергают сухой грануляции путем прессования брикетов, которые размалывают и полученный гранулят таблетируют.

Изобретение относится к медицине, а именно к средствам профилактики и лечения язвенных поражений желудка, вызываемых лекарственными средствами, содержащими нестероидные противовоспалительные препараты класса салицилатов и класса производных уксусной кислоты.
Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой пероральную фармацевтическую композицию для лечения кишечных нарушений, содержащую масляную кислоту или ее соли, в сочетании с растворимым или диспергируемым в воде пищевым волокном, выбранным из инулина, мальтодекстрина или их смеси, по меньшей мере одним ароматизирующим агентом, выбранным из ванилина, ванильной эссенции или их смеси и одним или более фармакологически приемлемыми наполнителями, отличающуюся тем, что она включает: a) матрицу, содержащую липофильные соединения с точкой плавления ниже 90оC, и амфифильную матрицу, в которой активный компонент по меньшей мере частично является шаровидным; b) амфифильную матрицу; c) внешнюю гидрофильную матрицу, в которой диспергированы липофильная матрица и амфифильная матрица; e) покрытие; и часть указанного по меньшей мере одного ароматизирующего агента диспергирована в одной или более указанных матриц и часть ароматизирующего агента диспергирована в покрытии.

Изобретение относится к медицине, а именно к средствам профилактики и лечения язвенных поражений желудка, вызываемых воздействием стресса на организм и описывает использование в качестве профилактического и терапевтического средства производных фенилтиоацетамидов.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для профилактики и лечения язвенных поражений желудка, вызываемых пероральным употреблением жидкостей, содержащих этиловый спирт.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к пероральной фармацевтической композиции, содержащей полисахариды из кладодия Opuntia Ficus Indica, экстракт из листьев Olea Europeae, альгинат и бикарбонат натрия в определенном соотношении.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается инъецируемого инсулинового препарата для снижения уровня глюкозы в крови у субъекта. Препарат содержит инсулиновое соединение, соединение никотиновой кислоты и аргинин.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине. Предлагается применение гидрохлорида диметилового эфира трео-3-фенилглутаминовой кислоты следующей структурной формулы: в качестве средства, обладающего кардиопротекторными свойствами в условиях стрессорного воздействия.
Изобретение относится к медицине, а именно к токсикологии, и касается профилактики вредных эффектов наносеребра в группах риска, охватывающих лиц, которые подвергаются воздействию этого наноматериала в условиях его производства и применения.

Изобретение относится к ветеринарной медицине. Средство для оптимизации воспроизводительной функции коров содержит фумаровую, аскорбиновую, янтарную и лимонную кислоты из расчета на дозу, мг/кг живой массы: фумаровая кислота - 3,0-5,0; аскорбиновая кислота - 4,5-7,5; янтарная кислота - 6,0-10,0; лимонная кислота - 1,5-2,5.
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для повышения эффективности лечения пациентов с синдромом диспепсии в сочетании с избыточной массой тела.

Группа изобретений относится к фармацевтике и касается твердого фармацевтического продукта, твердой композиции для применения в способах фотодинамической диагностики раковых, предраковых и нераковых состояний в нижней части желудочно-кишечной системы.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной морфологии, а также к разработке и изучению способов коррекции негативных эффектов низких температур на организм животного в эксперименте.

Группа изобретений относится к области фармацевтики и медицины и касается полутвердой композиции и полутвердого фармацевтического продукта для применения в фотодинамическом лечении (PDT) раковых, предраковых и нераковых состояний женской репродуктивной системы, ануса и пениса и содержат активный ингредиент, который представляет собой сложный эфир 5-аминолевулиновой кислоты (5-ALA) или его фармацевтически приемлемые соли, один или более триглицеридов, один или более усилителей вязкости, выбранных из целлюлозы и ее производных, синтетических полимеров, полиэтиленгликолей, растительных камедей, крахмала и производных крахмала, каррагинана, агара, желатина, воска и воскообразных твердых веществ.
Изобретение относится к медицине. Описано биодеградируемое гемостатическое лекарственное средство для остановки кровотечений, согласно которому на 1 г диальдегидцеллюлозы со степенью окисления 12% соиммобилизуют: ε-аминокапроновой кислоты 50 мг, лизоцима 5 мг в 6,5 л дистиллированной воды в течение 3 часов при комнатной температуре.

Изобретение относится к области медицины, в частности к фармакологии и фармацевтике, и касается средства, обладающего противоинсультным действием и представляющего собой аминокислоту глицин, иммобилизованную на частицах детонационного наноалмаза размером 2-10 нм, и способа его получения.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии. Терминальные ветви верхней прямокишечной артерии прошивают и перевязывают на 2,5-3,0 см выше зубчатой линии.
Наверх