Способ контроля качества дезинфекции птицеводческих помещений


 


Владельцы патента RU 2534356:

Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) (RU)

Изобретение относится к области контроля качества дезинфекции. Способ предусматривает дезинфекцию помещений, отбор тест-объектов, в качестве которых используют суспензию Bacillus subtilis штамма АТСС-РТА 6737 (РВ6), сорбированную на носителе - фильтровальной бумаге с клейким участком поверхности. Тест-объекты помещают в объекте дезинфекции и вносят в питательную среду. Прогревают пробирки до 60-80°С и культивируют при 37°С в течение 12-24 часов с последующим учетом результата путем регистрации роста бактерий через 12 часов. Помутнение питательной среды с образованием слизистой пленки свидетельствует о неудовлетворительном качестве дезинфекции, отсутствие помутнения и образования пленки через 24 часа - об удовлетворительной дезинфекции. Изобретение позволяет упростить контроль качества дезинфекции помещений. 2 табл.

 

Изобретение относится к ветеринарной санитарии, а именно к способам контроля качества аэрозольной и газовой дезинфекции помещений для содержания птицы.

Известен метод контроля качества дезинфекции, основанный на микробиологических методах, предложенный А.А.Поляковым в 1957 году (Поляков А.А. Еще раз о теории и практике ветеринарной дезинфекции / А.А.Поляков, А.В.Куликовский // - Ветеринария. - 1989. - №2. - С.19-23). Критерий этого метода - наличие или отсутствие в исследуемых объектах бактерий группы кишечной палочки.

Также качество дезинфекции можно определять по отсутствию стафилококков (Правила проведения дезинфекции и дезинвазии объектов государственного ветеринарного надзора"(утв. Минсельхозом РФ 15.07.2002 N 13-5-2/0525)).

Данные методы не позволяют достоверно подтвердить отсутствие более устойчивой микрофлоры на объекте, т.к. указанные тестовые микроорганизмы, по степени устойчивости к дезинфектантам, относятся ко второй группе, а большинство патогенных микроорганизмов, имеющих значение для птицеводства, по устойчивости относятся ко второй и третьей группам: возбудители сальмонеллеза, гриппа, бурсальной болезни, реовирусного теносиновита, оспы птиц.

Прототипом предлагаемого метода является биотест, основанный на уничтожении спор штамма Bacillus stearothermophilus ВКМ В-718, нанесенных на тест-объект (Санитарные правила СП 1.2.011-94. Госкомсанэпиднадзор России. М., 1994, с.138). Однако культивирование данного микроорганизма требует дорогостоящих питательных сред и температурный режим 55°С.

Задачей заявляемого решения является расширение арсенала способов контроля качества дезинфекции помещений для содержания птицы.

Поставленная задача решается тем, что в способе контроля качества дезинфекции птицеводческих помещений, включающем размещение в помещении до дезинфекции тест-объектов на носителе, с нанесенным на них тестовым микроорганизмом - спорами Bacillus subtilis, согласно изобретению, в качестве тестового микроорганизма используют штамм Bacillus subtilis АТСС-РТА 6737 (РВ6).

Сущность изобретения заключается также в том, что в качестве носителя используют фильтровальную бумагу с клейким участком поверхности.

Сущность изобретения заключается также в том, что культивирование проводят при 37°С в течение 1 суток на мясопептонном бульоне. Способ осуществляют следующим образом:

Материалы и оборудование: термостат 37°С, водяная баня 70-80°С, сушильный шкаф 70°С, центрифуга 10 G, шейкер, шредер, бактериологические пробирки со стерильным МПБ, фильтровальная бумага, двусторонняя липкая лента, физиологический раствор.

Протокол получения тест-объекта:

1. Наращивание бак. массы: культивировать Bacillus subtilis РВ6 на МПБ с использованием шейкера для аэрации и увеличения скорости накопления бак. массы при 37°С - 2 суток.

2. Перевод вегетативной формы в споровую: анаэробные условия - 1 сутки.

3. Отмывка и концентрация спор: центрифугировать суспензию спор в питательной среде при 10 G - 20 мин. Удалить супернатант и ресуспендировать натант в дистиллированной воде в соотношении 1:100.

4. Сорбция спор на носитель - погрузить фильтровальную бумагу «синяя лента» в суспензию спор, высушить в сушильном шкафу при 60-70°С.

5. Изготовление тест-полосок: нанести на лист носителя полосы двусторонней липкой ленты шириной 1 см с интервалом 5 см и пропустить через шредер в поперечном направлении.

6. Хранение: при 2-8°С и относительной влажности воздуха не более 20% - 2 года.

Образцы для исследования: тест-объекты, подвергнутые дезинфекции, отбирать после удаления или инактивации дезинфектанта в период 0-6 часов.

Протокол контроля качества дезинфекции:

1. Размещают тест-объекты в объекте дезинфекции заблаговременно или непосредственно перед ее началом.

2. Дезинфицируют объект аэрозолем или газом.

3. После удаления или инактивации дезинфектанта, асептично отбирают тест-объекты целиком, отделяя их стерильным пинцетом, или частично, отсекая концевую часть полоски стерильными ножницами и помещают в бактериологические пробирки с МПБ.

4. Прогревают пробирки с объектами в МПБ на водяной бане при 80°С в течение 20 минут для уменьшения риска вторичной контаминации.

5. Культивируют отобранный материал при 37°С 12-24 часа. Через 12 часов можно констатировать рост, а через 24 - его отсутствие.

6. Интерпретируют результат исследования в зависимости от отсутствия или наличия роста Bacillus subtilis (помутнение МПБ с образованием слизистой пленки на поверхности питательной среды) как отрицательный или положительный.

Испытания метода контроля качества дезинфекции в биотесте со спорами B.subtilis штамма АТСС-РТА 6737 (РВ6) в сравнении с референтными методиками проводили при объемной дезинфекции птичников для напольного и клеточного методов содержания цыплят-бройлеров с использованием аппарата для генерации аэрозоля АГ-УД-2 и препарата «Вироцид» 2% из расчета 1 л/40 м (табл.1) и аппарата «АИСТ-2М» с формалином из расчета 20 мл/м (табл.2) при экспозиции - 12 часов.

Бактериальную обсемененность помещений контролировали после выгрузки из помещений птицы до этапа механической очистки (мойки) помещений и после мойки - референтными способами: обнаружение бактерий группы кишечной палочки и рода Staphylococcus, а после дезинфекции - и испытуемым методом. Отбирали с поверхностей помещения по 20 проб материала (смывы с участка 10∗10 см или тест-объекты) с разных уровней по вертикали и горизонтали помещения для бактериологического исследования.

Учет результатов исследования референтными методиками проводили через 2 суток после посева, а испытуемой - через 1 сутки.

Таблица 1
Дезинфекция аппаратом АГ-УД-2 препаратом «Вироцид» 2% из расчета 1 л/40 м с экспозицией 12 часов Бактерии группы кишечной палочки, положительных проб, % Staphylococcus spp., положительных проб, % Биотест со спорами В.subtilis, положительных проб, %
Корпус напольного содержания бройлера, 20 проб до мойки и дезинфекции 85 100 Не проводили
После мойки 35 80 Не проводили
После дезинфекции 0 5 10
Корпус клеточного содержания бройлера, 20 проб до мойки и дезинфекции 90 100 Не проводили
После мойки 40 80 Не проводили
После
дезинфекции
0 10 15

Представленные данные свидетельствуют, что предложенный способ контроля качества дезинфекции может быть использован для контроля объемной аэрозольной дезинфекции с применением аппарата АГ-УД-2 и дезинфектанта «Вироцид» в концентрации 2% при насыщении 1 л/40 м с экспозицией 12 часов.

Таблица 2
Дезинфекция аппаратом АИСТ-2М препаратом формалин из расчета 20 мл/м3 с экспозицией 12 часов и нейтрализацией аэрозолем 5% водного раствора аммиака из расчета 15 мл/м Бактерии группы кишечной палочки, положительных проб, % Staphylococcus spp., положительных проб, % Биотест со спорами B.subtilis, положительных проб, %
Корпус клеточного содержания бройлера, 20 проб до мойки и дезинфекции 75 100 Не проводили
После мойки 30 85 Не проводили
После дезинфекции 0 0 0
Корпус клеточного содержания бройлера, 20 проб до мойки и дезинфекции 95 100 Не проводили
После мойки 45 75 Не проводили
После дезинфекции 0 0 0

Представленные данные также свидетельствуют, что предложенный способ контроля качества дезинфекции может быть использован для контроля объемной аэрозольной дезинфекции с применением аппарата АИСТ-2М препаратом формалин из расчета 20 мл/м3 с экспозицией 12 часов и нейтрализацией аэрозолем 5% водного раствора аммиака из расчета 15 мл/м3.

Представленные в таблицах данные свидетельствуют о большей, в сравнении с референтными методами, чувствительности и надежности способа, а использование в нем режима культивирования при 37°С в течение 1 суток на МПБ обеспечивает скорость исследования - 1 сутки.

Способ контроля качества дезинфекции птицеводческих помещений, предусматривающий дезинфекцию помещения, отбор тест-объектов, представляющих собой суспензию Bacillus subtillis штамма АТСС-РТА 6737 (РВ6) на носителе - фильтровальной бумаге с клейким участком поверхности, помещение тест-объектов в питательную среду, прогрев пробирок с тест-объектами на водяной бане до 60-80°С, культивирование при 37°С в течение 12-24 часов с последующим учетом результата путем регистрации роста бактерий через 12 часов - помутнение питательной среды с образованием слизистой пленки свидетельствует об неудовлетворительном качестве дезинфекции, отсутствие помутнения и образования пленки через 24 часа- об удовлетворительной дезинфекции.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии и представляет собой способ идентификации кластера генов, кодирующих стафилококковые белки, являющиеся экзотоксинами.

Представленные решения касаются способа генерирования заквасочной культуры, заквасочной культуры и способа ферментации с использованием такой заквасочной культуры.
Изобретение относится к области микробиологии. Готовят две взвеси.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для дифференцированного определения числа жизнеспособных актинобактерий рода Rhodococcus, иммобилизованных в нерастворимом гелевом носителе.
Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает отбор проб почвы, внесение в почву метсульфурон метила (МСМ) в заданном количестве с последующей инкубацией и определением удельной метаболической активности (УМА) сапрофитного комплекса почвы при помощи мультисубстратного тестирования (МСТ) и учета числа КОЕ (колониеобразующих единиц) на разбавленной агаризованной среде.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложен способ выращивания колоний микробных клеток на поверхности пористой пластины.

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при мониторинговых эколого-микробиологических исследованиях контроля качества морской воды для определения численности нефтеокисляющих микроорганизмов.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ оценки токсичности продукции из полимерных и текстильных материалов.

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроорганизмов к антибиотикам и факта присутствия бактериальных биопленок на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический дигуанозинмонофосфат, с пороговой чувствительностью 50 пг/мл, включающий: 1) выделение фосфодиэстеразы-мишени из лизированных бактериальных клеток; 2) связывание фосфодиэстеразы биотинилированными антителами, специфичными к некаталитическим доменам фосфодиэстеразы; 3) аффинную очистку комплексов, сформированных фосфодиэстеразой-мишенью и биотинилированным антителом при помощи парамагнитных частиц, содержащих нейтравидин или его аналоги, связывающие биотин; 4) взаимодействие комплексов фосфодиэстераза/биотинилированное антитело, иммобилизованных на парамагнитных частицах, с комплексами, содержащими с-di-GMP в форме G-квадруплексов с интеркалированным красителем, сопровождающееся падением интенсивности флуоресценции по мере разрушения комплексов интеркалирующего красителя c-di-GMP; 5) измерение падения флуоресценции при гидролизе c-di-GMP и разрушении комплекса c-di-GMP с интеркалирующим красителем с последующим количественным определением активности фосфодиэстеразы на основании калибровочных кривых, построенных с использованием известных количеств рекомбинантного фермента фосфодиэстеразы, идентичного исследуемой мишени; 6) выявление повышенного уровня фосфодиэстеразной активности, обнаруживаемого тестируемыми антибиотикоустойчивыми бактериальными штаммами, способными к формированию биопленок, по сравнению с уровнем фосфодиэстеразной активности, обнаруживаемым для контрольных штаммов бактерий того же вида, не обладающих антибиотикоустойчивостью и способностью к формированию биопленок.
Изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается способа определения активации плазминогена бактериями. Способ включает внесение протамина сульфата в подготовленный супернатант, инкубацию полученной смеси, осаждение клеток центрифугированием, инкубацию супернатанта с протамин сульфатом, осаждение белка и регистрацию активации плазминогена бактериями по количеству отщепившегося аргинина, содержание которого определяют методом Сакагуши по окрашиванию проб в красный цвет.
Группа изобретений относится к биотехнологии и может быть использована для биотестирования токсичности объектов окружающей среды. Заявлены штамм бактерий Vibrio aquamarinus, способ определения токсичности проб с его помощью и применение штамма в качестве тест- культуры для определения химической токсичности проб. Измеряют люминесценцию штамма Vibrio aquamarinus ВКПМ В-11245 в присутствии по меньшей мере одного химического токсиканта пробы, в качестве которого могут быть использованы ZnSO4 или CuSO4, или K2Cr2O7, или нефть, или дизельное топливо, или льяльная вода, или фенол, или тяжелый металл. Измеряют люминесценцию указанного штамма при отсутствии химического токсиканта и сравнивают измеренные уровни люминесценции. При этом изменение люминесценции свидетельствует о токсичности исследуемой пробы. Изобретение позволяет повысить достоверность определения наличия токсических веществ в окружающей среде.3 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к медицинской бактериологии и медицинской микологии, и описывает способ количественной оценки адгезивных свойств условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от человека и объектов окружающей среды. Способ включает предварительную сорбцию в лунках полистиролового планшета специфического лиганда, выбранного из ряда: гемоглобин, миоглобин, коллаген, фибриноген, фибронектин, иммуноглобулин А, добавление в лунки планшета с сорбированным лигандом суспензии клеток микроорганизма, инкубирование суспензии клеток в лунках планшета в течение 15 минут, отбор аликвоты суспензии из лунки и добавление ее в лунки другого или этого же планшета, содержащие водный раствор соли 0,5% натрия хлористого или 0,2 М фосфата натрия, при этом оценку уровня адгезии клеток бактерий проводят путем определения уменьшения оптической плотности полученных разбавленных суспензий при длине волны 600 нм при сравнении их с контрольными вариантами лунок, не содержащих лиганд. Изобретение характеризуется высокой скоростью проведения определения уровня адгезии микроорганизмов к лигандам различной природы, высокой воспроизводимостью результатов, использованием минимального количества биомассы микроорганизмов, отсутствием необходимости использования опасных химических реагентов и может быть использовано для in vitro характеристики вирулентных свойств условно-патогенных микроорганизмов, выделенных от человека и объектов окружающей среды, по уровню их адгезии к лигандам различной природы. 7 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа получения коклюшного компонента комплексных вакцин. Представленный способ включает выращивание культуры B. pertussis на плотных питательных средах Борде-Жангу и/или КУА, селекцию выросших колоний по морфологическим признакам, пересев отобранных колоний, наращивание их бактериальной массы, смыв культуры, доведение мутности полученных коклюшных суспензий до 10 международных оптических единиц, определение в них с помощью реакции агглютинации количественного содержания агглютиногенов 1, 2, 3 и отбор коклюшных суспензий, в которых содержание агглютиногенов выявляется при разведении типоспецифической сыворотки 1:3200 и выше. Выявленная культура B. pertussis, активно экспрессирующая агглютиногены 1, 2, 3, после лиофильного высушивания используется для производства коклюшного компонента комплексных вакцин. Охарактеризованное изобретение позволяет получить высокоиммуногенный коклюшный компонент комплексных вакцин. 1 ил., 5 табл., 1 пр.
Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к получению плотной питательной среды, с помощью которой возможно определение антибиотикочувствительности культур возбудителя легионелеза - Legionella pneumophila. Питательная среда содержит ферментоаутолизат селезенки крупного рогатого скота, калия фосфат однозамещенный, калия фосфат двузамещенный, глюконат калия, мезоинозит, крахмал растворимый, желатин, L-цистеин, железо(III) натриевую соль, тушь высококачественную и дистиллированную воду в заданном соотношении компонентов. Изобретение позволяет повысить точность определения антибиотикочувствительности культур возбудителя легионелеза - Legionella pneumophila. 3 табл., 8 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам определения активности веществ, обладающих способностью встраиваться в биологические мембраны клеточных стенок с нарушением функционирования клеток. В измерительные ячейки прибора для автоматизированного подсчета числа живых инфузорий вносят суспензию клеток Tetrahymena pyriformis и испытуемое вещество с последующим определением числа живых клеток в каждую минуту, при этом совпадение динамики изменения числа живых клеток во времени для сравниваемых веществ делают заключение о равенстве их активностей. Методы расчета основаны либо на определении времени инкубации инфузорий с испытуемым веществом, необходимого для гибели половины инфузорий, либо на определении константы скорости гибели клеток, которую удобно рассчитывать по тангенсу угла наклона прямой, характеризующей зависимость логарифма числа подвижных клеток от времени в период наблюдаемого падения числа живых клеток. Обе величины, зависящие от мембранной активности, характеризуют мембранную активность изучаемых веществ и пригодны для сравнения активностей. Способ позволяет определять мембранную активность веществ, обеспечивая возможность стандартизации процесса. 3 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области микробиологии, в частности к методам определения чувствительности штаммов Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) к антибиотикам. Способ определения чувствительности по спектрам флуоресценции включает культивацию штаммов P. aeruginosa на питательных средах, стимулирующих синтез пиовердина, центрифугирование и фильтрование культур для получения пробы, облучение пробы спонтанным ультрафиолетовым излучением в интервале длин волн 200-300 нм, получение спектров флуоресценции, маркером резистентности штамма к антибиотикам служит наличие в полосе флуоресценции максимума в диапазоне длин волн 435-445 нм. Маркером чувствительности штамма к антибиотикам служит наличие в полосе флуоресценции максимума в диапазоне длин волн 455-470 нм. Изобретение позволяет упростить технологию оптических методов исследования и оптимизировать лечение бактериальных инфекций. 2 ил.

Изобретение относится к медицинской микробиологии. Изобретение представляет собой набор для лабораторной диагностики инфекций, вызываемых урогенитальными микоплазмами Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum, содержащий лиофилизированную транспортную среду для хранения исследуемых проб, лиофилизированную питательную среду для выявления Mycoplasma hominis и/или Ureaplasma urealyticum и стрипы для идентификации Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum, для полуколичественного определения титра возбудителя и для определения чувствительности Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum к антибиотикам, который содержит три вида стрипов, первый из которых предназначен для идентификации Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum и для полуколичественного определения их титра, причем часть лунок первого вида стрипов, которые предназначены для выявления и определения титра Mycoplasma hominis, содержат аргинин, бриллиантовый синий и кларитромицин, другая часть лунок этого стрипа, которые предназначены для выявления и определения титра Ureaplasma urealyticum, содержат мочевину и линкомицин, второй вид стрипов предназначен для определения антибиотикочувствительности Mycoplasma hominis, содержит специфические реагенты для выявления Mycoplasma hominis - аргинин, бриллиантовый синий и кларитромицин, а также восемь антибиотиков - доксициклин, джозамицин, мидекамицин, офлоксацин, ципрофлоксацин, спарфлоксацин, моксифлоксацин, клиндамицин, сорбированных в лунки стрипов в одной концентрации, третий вид стрипов предназначен для определения антибиотикочувствительности Ureaplasma urealyticum, содержит специфические реагенты для выявления Ureaplasma urealyticum - мочевина и линкомицин, а также восемь антибиотиков - доксициклин, джозамицин, кларитромицин, эритромицин, рокситромицин, азитромицин, офлоксацин и спарфлоксацин, сорбированных в лунки стрипов в одной концентрации. Использование набора позволяет одновременно выявлять Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum, оценивать их титр и определять чувствительность к различному спектру антибиотиков, причем для Mycoplasma hominis и для Ureaplasma urealyticum используют разные антибиотики. 2 ил., 2 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области гельминтологии и касается способа сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя Fasciola hepatica при жизни. Охарактеризованный способ включает стадии: отбор из желчных протоков печени зараженных фасциолами домашних и/или диких животных только живых половозрелых F. hepatica. Помещение их в отдельные пробирки с отфильтрованной и отцентрифугированной желчью, разбавленной изотоническим раствором хлорида натрия 1:1. Экспозицию пробирок при t=38-39°С, если F. hepatica от крупного рогатого скота, и при t=39-40°C, если F. hepatica от овец и/или коз, в условиях термостата в течение 5 часов. Последующее отмывание яиц в изотоническом растворе хлорида натрия. Представленное изобретение позволяет получить до 100% оплодотворенных яйц фасциол вида Fasciola hepatica и может быть использовано для исследований в условиях лаборатории и/или полевых экспериментов, при решении фундаментальных и прикладных научных задач в области эпизоотологии, терапии и профилактики фасциолеза домашних или/и диких животных. 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению ингибиторов адгезии и/или агрегации тромбоцитов, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем с использованием матрицы кДНК слюнной железы Anopheles stephensi получают полипептид, который используют в составе фармацевтической композиции и в наборах для скрининга ингибиторов адгезии или агрегации тромбоцитов. Изобретение позволяет получить полипептид, обладающий ингибиторной активностью в отношении агрегации тромбоцитов и/или ингибиторной активностью в отношении адгезии тромбоцитов. 6 н. и 4 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ определения функциональной устойчивости сапротрофного микробного комплекса почвы. Проводят компостирование образца почвы в лабораторных условиях. Методом МСТ определяют выравненность функционального спектра микробного сообщества по формуле E = 1 / ∑ ( p i ) 2 . Учет показателя выравненности функционального спектра проводят 3 раза: через 0, 15 и 30 суток после начала компостирования. По результатам учетов рассчитывают коэффициент вариации показателя выравненности функционального спектра сапротрофного микробного сообщества почвы (VE) между сроками учета. Оценивают функциональную устойчивость сапротрофного микробного комплекса почвы. Устойчивость считается высокой, если величина критерия VE не превышает 20%, средней, если колеблется в пределах 20-50%, низкой - 50-100%, очень низкой - превышает 100%. Преимуществом способа является оценка функционального спектра наиболее мобильной, культивируемой части микробного сообщества почвы, а также почва подвергается относительно мягкому стрессу - компостированию без дополнительных источников углерода. 5 табл., 3 пр.
Наверх