Способ дифференциальной диагностики форм первичной плацентарной недостаточности


 


Владельцы патента RU 2535011:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и позволяет проводить морфологическую дифференциальную диагностику трофобластической, эндометриальной и смешанной формы первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре. Способ заключается в том, что при иммуногистохимическом исследовании ворсинчатого хориона и децидуальных клеток гравидарного эндометрия оценивают индекс экспрессии сосудисто-эндотелиального (СЭФР) и трансформирующего (ТФР-β2) факторов роста. При индексе экспрессии в ворсинчатом хорионе СЭФР, равном или менее 1,5 у.е., а ТФР-β2, равном или менее 1,4 у.е., диагностируют трофобластическую форму первичной плацентарной недостаточности. При индексе экспрессии в децидуальных клетках СЭФР, равном или менее 1,6 у.е., а ТФР-β2, равном или более 2,7 у.е., диагностируют эндометриальную форму первичной плацентарной недостаточности; при одновременном выявлении вышеуказанных критериев диагностируют смешанную форму первичной плацентарной недостаточности. Предлагаемый способ является высокоинформативным, повышает качество гистологического заключения, способствует индивидуальному подходу к дальнейшей диагностике, лечению и реабилитации репродуктивного здоровья женщины в зависимости от патогенетической формы плацентарной недостаточности. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и позволяет проводить морфологическую дифференциальную диагностику трофобластической, эндометриальной и смешанной формы первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре.

Актуальность

Актуальность предлагаемого способа определяется тем, что первичная плацентарная недостаточность является основной причиной самопроизвольного прерывания беременности в первом триместре, удельная доля которого составляет, по оценке разных авторов, 75-80% от числа всех репродуктивных потерь. Применение заявляемого способа позволяет не только проводить морфологическую диагностику первичной плацентарной недостаточности, но и в каждом случае установить ее патогенетическую форму с целью разработки индивидуального подхода к дальнейшей диагностике и коррекции нарушений репродуктивной функции женщины.

Известен способ диагностики хронической плацентарной недостаточности, согласно которому при уровне фактора роста плаценты в крови 126-315 пкг/мл; уровне термостабильной щелочной фосфатазы 67-233 Ед/л; содержании лимфоцитов СД95+ 31-74%; концентрации ФНОα 220-1710 пкг/мл диагностируют хроническую плацентарную недостаточность (Патент №2313795. Российская Федерация. Способ диагностики хронической плацентарной недостаточности. / Липатов И.С., Мельников В.А., Тезиков Ю.В., и др. // Изобретения. Полезные модели. - 2007. - №36). Однако способ разработан для хронической плацентарной недостаточности, развивающейся в третьем триместре беременности. Является неморфологическим методом, о наличии плацентарной недостаточности судят косвенно, по факторам, определяемым в периферической крови. Не учитывается патогенетическая неоднородность синдрома.

Известно несколько способов диагностики плацентарной недостаточности с помощью ультразвукового исследования. Способ ранней диагностики плацентарной недостаточности, основанный на проведении допплерометрии спиральных артерий у беременных женщин в 20-24 недели гестации. При отношении индексов резистентности в спиральных артериях периферической к центральной части плаценты менее 1,0 диагностируют плацентарную недостаточность (Патент №2257850. Российская Федерация. Способ ранней диагностики плацентарной недостаточности. / Посисеева Л.В., Зимина С.И., Перетятко Л.П., и др. // Изобретения. Полезные модели. - 2005. - №22). Способ диагностики фетоплацентарной недостаточности путем оценки системного и плацентарного кровотока при ультразвуковом допплерометрическом исследовании. Высчитывают плодово-материнский гематологический индекс, на основании которого судят о наличии фетоплацентарной недостаточности (Патент №2402271. Российская Федерация. Способ диагностики фетоплацентарной недостаточности. / Тривоженко О.В., Евтушенко И.Д. // Изобретения. Полезные модели. - 2010. - №30). Недостатками ультразвуковых методов являются: использование дорогостоящего оборудования, хронологические рамки, не позволяющие проводить диагностику первичной плацентарной недостаточности в первом триместре.

Наиболее близким по техническому решению является используемый в патологоанатомической практике способ дифференциальной диагностики первичной плацентарной недостаточности в первом триместре при самопроизвольных абортах (Морфологическая характеристика хориона при спонтанных абортах хромосомной этиологии / Пальцев М.А., Горбачева Ю.В., Волощук И.Н. и др. // Архив патологии. - 2004. - №6. - С.11-15). Способ осуществляется путем иммуногистохимического исследования ворсинчатого хориона с определением уровня экспрессии протеина Ki-67 (маркера пролиферации) и протеина р53 (маркера апоптоза). При индексе пролиферации вневорсинчатого цитотрофобласта менее 4,2 и индексе апоптоза ворсинчатого цитотрофобласта выше 26,2 диагностируют самопроизвольный аборт с патологическим кариотипом, при других значениях индексов пролиферации и апоптоза - самопроизвольный аборт с нормальным кариотипом. Способ имеет ряд недостатков: оцениваются неспецифические факторы (пролиферация и апоптоз), не учитывает состояние гравидарного эндометрия, не проводится дифференциальная диагностика других форм первичной плацентарной недостаточности.

Указанные недостатки перечисленных способов предлагается устранить в заявляемом способе.

Заявляемым техническим результатом является разработка способа морфологической дифференциальной диагностики трофобластической, эндометриальной и смешанной форм первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре. Технический результат достигается тем, что при иммуногистохимическом исследовании ворсинчатого хориона и децидуальных клеток гравидарного эндометрия оценивают индекс экспрессии сосудисто-эндотелиального (СЭФР) и трансформирующего (ТФР-β2) факторов роста. При индексе экспрессии в ворсинчатом хорионе СЭФР, равном или менее 1,5 у.е., а ТФР-β2, равном или менее 1,4 у.е., диагностируют трофобластическую форму первичной плацентарной недостаточности; при индексе экспрессии в децидуальных клетках СЭФР, равном или менее 1,6 у.е., а ТФР-β2, равном или более 2,7 у.е., диагностируют эндометриальную форму первичной плацентарной недостаточности; при одновременном выявлении вышеуказанных критериев диагностируют смешанную форму первичной плацентарной недостаточности.

Отличительные признаки способа

Установлены дифференциально-диагностические параметры экспрессии СЭФР и ТФР-β2 в ворсинчатом хорионе и децидуальных клетках гравидарного эндометрия. При индексе экспрессии в ворсинчатом хорионе СЭФР, равном или менее 1,5 у.е., а ТФР-β2, равном или менее 1,4 у.е., диагностируют трофобластическую форму первичной плацентарной недостаточности; при индексе экспрессии в децидуальных клетках СЭФР, равном или менее 1,6 у.е., а ТФР-β2, равном или более 2,7 у.е., диагностируют эндометриальную форму первичной плацентарной недостаточности; при одновременном выявлении вышеуказанных критериев диагностируют смешанную форму первичной плацентарной недостаточности.

Новизна способа

Впервые предложен способ морфологической дифференциальной диагностики трофобластической, эндометриальной и смешанной форм первичной плацентарной недостаточности, основанный на оценке результатов иммуногистохимической реакции с антителами к СЭФР и ТФР-β2. Дифференциальная диагностика первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре будет способствовать разработке индивидуального подхода к дальнейшему лечению и реабилитации репродуктивного здоровья женщины в зависимости от патогенетической формы плацентарной недостаточности.

Факторы роста играют одну из ведущих ролей в регуляции процессов имплантации, плацентации и раннего эмбриогенеза в первом триместре беременности. Сосудисто-эндотелиальный фактор роста (СЭФР) обнаруживают в высоких концентрациях как в периферической крови беременных женщин, так и в тканях развивающейся плаценты и эндометрии (Иммунологическая загадка беременности / Под ред. Сотниковой Н.Ю. - Иваново: Изд-во МИК, 2005. - 276 с.). Его продукция осуществляется клетками плаценты (синцитио- и цитотрофобласт, стромальные клетки ворсин), а также децидуальными клетками и эндотелиоцитами (Localization of angiogenic growth factors and their receptors in the human placental bed throughout normal human pregnancy / Schiessl В., Innes B.A., Bulmer J.N., et al. // Placenta. - 2009. - Vol.30, №1. - P.79-87). Под контролем СЭФР находится не только васкуляризация ворсинчатого хориона. Показано, что вышеуказанный фактор стимулирует рост плацентарной ткани, контролирует процессы дифференцировки и пролиферации цитотрофобласта, активизирует цитотрофобластическую инвазию в гравидарный эндометрий (The effects of angiogenic growth factors on extravillous trophoblast invasion and motility / Lash G.E., Cartwright J.E., Whitley G. StJ., et al. // Placenta. - 1999. - Vol.20, №8. - P.661-667). Последний процесс является ключевым для ранних и последующих сроков беременности, поскольку инвазия клеток цитотрофобласта приводит к гестационному ремоделированию спиральных артерий матки (эндометриальных и миометриальных сегментов), преобразуя их в маточно-плацентарные артерии, т.е. обеспечивает установление адекватного маточно-плацентарного кровотока (Милованов А.П., Кириченко А.К. Цитотрофобластическая инвазия - ключевой механизм развития нормальной и осложненной беременности. - Красноярск: Литера-принт, 2009. - 188 с.). Данные о характере продукции СЭФР при плацентарной недостаточности и невынашивании беременности противоречивы: существуют исследования, демонстрирующие как снижение уровня экспрессии СЭФР (Expression of angiogenesis - and apoptosis-related genes in chorionic villi derived from recurrent pregnancy loss patients / Choi H.K., Choi B.C., Lee S.H., et al. // Molecular Reproduction and Development. - 2003. - Vol.66, №1. - P.24-31), так и, напротив, повышение (Крукиер И.И. Погорелова Т.Н. Продукция сосудисто-эндотелиального фактора роста и эндотелина в плаценте и пуповине при нормальной и осложненной беременности. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2006. - Т.141, №2. - С.177-179). Различия, по нашему мнению, обусловлены рядом причин: применяемая методика, срок беременности, исследуемый материал (периферическая кровь, плацентарная ткань, эндометрий).

Трансформирующий фактор роста (ТФР-β2) в настоящее время рассматривается в качестве основного иммуносупрессивного цитокина, обеспечивающего иммунную толерантность материнского организма к чужеродным антигенам плода (Nagaeva О., Jonsson L., Mincheva-Nilsson L. Dominant IL-10 and TGF-beta mRNA expression in gammadeltaT cells of human early pregnancy decidua suggests immunoregulatory potential // American Journal of Reproductive Immunology. - 2002. - Vol.48, №1. - P.9-17). По признаку продукции ТФР-β2 среди иммунных клеток выделяют регуляторные Т-лимфоциты. Однако, кроме лимфоцитов ТФР-β2 обнаруживают в синцитио- и цитотрофобласте, а также стромальных децидуальных клетках эндометрия (Transforming growth factor beta expression in human placenta and placental bed during early pregnancy / Simpson H., Robson S.C., Bulmer J.N., et al. // Placenta. - 2002. - Vol.23, №1. - P.44-58). Другой не менее важной функцией ТФР-β2, осуществляемой в зоне плацентанции гравидарного эндометрия, является ограничение цитотрофобластической инвазии (Graham C.H. Effect of transforming growth factor-beta on the plasminogen activator system in cultured first trimester human cytotrophoblasts // Placenta. - 1997. - Vol.18, №2-3. - P.137-143). Исследованиями показано, что ТФР-р2 блокирует активность матричных металлопротеиназ цитотрофобластических клеток посредством увеличения продукции тканевого ингибитора (TIMP-1) (Cytokine-mediated regulation of 92-kilodalton type IV collagenase, tissue inhibitor or metalloproteinase-1 (TIMP-1), and TIMP-3 messenger ribonucleic acid expression in human endometrial stromal cells / Huang H.Y., Wen Y., Irwin J.C., et al. // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. - 1998. - Vol.83, №5. - P.1721-1729). Данные о характере изменений экспрессии ТФР-β2 при патологии беременности также противоречивы. На основании снижения уровня ТФР-β2 в сыворотке крови у женщин во втором триместре беременности прогнозируют невынашивание (Патент №2340899. Российская Федерация. Способ прогнозирования невынашивания во втором триместре беременности. / Левченко М.В., Орлов В.И. // Изобретения. Полезные модели. - 2008. - №34). При повышении уровня ТФР-β2, начиная с 5-й недели гестации, прогнозируют развитие фетоплацентарной недостаточности (Патент №2238567. Российская Федерация. Способ прогнозирования фетоплацентарной недостаточности. / Орлов А.В., Крукмер И.И., Погорелова Т.Н. и др. // Изобретения. Полезные модели. - 2004. - №29). Исследованиями, проведенными при угрозе и самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре, показано повышение спонтанной продукции ТФР-β2 лимфоцитами как периферической крови, так и базальной децидуальной оболочки, однако общий уровень ТФР-β2 в экстрактах децидуальной ткани снижен по сравнению с неосложненным течением беременности (Иммунологическая загадка беременности / Под ред. Сотниковой Н.Ю. - Иваново: Изд-во МИК, 2005. - 276 с.).

Поскольку в процессе плацентации на ранних сроках беременности происходит тесное взаимодействие и интеграция развивающихся внезародышевых структур и базального эндометрия с формированием в последующем базальной пластинки плаценты и плацентарного ложа, то, вероятно, причиной развития первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном аборте является морфо-функциональная несостоятельность как трофобласта, так и эндометрия.

Трофобластическая недостаточность характеризуется выраженной задержкой роста и дифференцировки ворсинчатого хориона с преобладанием аваскуляризированных ворсин и редукцией ворсинчатого цитотрофобласта, а также слабовыраженной трофобластической инвазией в эндометрий. Резкое снижение индекса экспрессии СЭФР (равного или менее 1,5 у.е.) и ТФР-β2 (равного или менее 1,4 у.е.) в ворсинчатом хорионе отражает, по нашему мнению, функциональную недостаточность трофобласта вследствие его первичного повреждения, связанного прежде всего с генетическими аномалиями. Вышеуказанные значения индекса экспрессии обоих факторов роста предлагаем использовать в качестве диагностического критерия трофобластической формы первичной плацентарной недостаточности.

Эндометриальная недостаточность при самопроизвольном прерывании беременности в ранние сроки связана, прежде всего, с гормональными нарушениями и, в частности, с недостаточностью гравидарного желтого тела. Морфологический субстрат несостоятельности эндометрия составляют незавершенная децидуализация стромы эндометрия, неполноценная секреторная трансформация эндометриальных желез, слабая спирализация артерий эндометрия. Децидуальные клетки эндометрия посредством продукции факторов роста и других цитокинов оказывают регулирующее влияние на дифференцировку ворсинчатого хориона и цитотрофобластическую инвазию. По нашему мнению, иммуногистохимические признаки эндометриальной недостаточности при самопроизвольных абортах в первом триместре сочетают снижение экспрессии децидуоцитами СЭФР, оказывающего стимулирующее влияние на васкуляризацию, рост, дифференцировку ворсинчатого хориона и ремоделирование спиральных артерий, с одновременным увеличением экспрессии ТФР-β2, ингибирующим, как было сказано выше, цитотрофобластическую инвазию в эндометрий. Критериями эндометриальной формы первичной плацентарной недостаточности, согласно результатам проведенного исследования, являются значение индекса экспрессии СЭФР в децидуальных клетках, равного или менее 1,6 у.е., а индекса экспрессии ТФР-β2, равного или более 2,7±0,08 у.е.

В ряде случаев самопроизвольного прерывания беременности при наличии, как правило, базального и париетального эндометрита и нарушениях дифференцировки ворсинчатого хориона с преобладанием склерозированных ворсин профиль экспрессии СЭФР и ТФР-β2 в ворсинах хориона и децидуальных клетках сочетает признаки трофобластической и эндометриальной несостоятельности, что позволяет на основании иммуногистохимического исследования и вышеуказанных критериев диагностировать смешанную форму первичной плацентарной недостаточности.

Таким образом, иммуноморфологическое исследование ворсинчатого хориона и гравидарного эндометрия с изучением экспрессии двух факторов роста (СЭФР и ТФР-β2) при самопроизвольных абортах в первом триместре позволяет дифференцировать три различные по патогенезу формы первичной плацентарной недостаточности: трофобластическую, эндометриальную и смешанную.

Способ осуществляется следующим образом.

Материал, полученный путем выскабливания полости матки при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре, фиксируют в 10% нейтральном забуференном формалине в течение 24 часов. После гистологической проводки кусочки ткани заливают в парафин, изготавливают срезы толщиной 5 мкм, содержащие фрагменты ворсинчатого хориона и гравидарного эндометрия. Иммуногистохимическую реакцию проводят с использованием первичных антител фирмы Santa Cruz Biotechnology (моноклональные анти-VEGF антитела (клон С-1) в рабочем разведении 1:200 и поликлональные анти-ТОР-β2 антитела в рабочем разведении 1:400) и системы детекции LSAB + System HRP (Dako) по следующему протоколу:

1. Депарафинирование.

2. Демаскировка антигенных структур путем кипячения в скороварке в цитратном буфере рН 6,0 в течение 10 минут, остывание до комнатной температуры.

3. Блокирование эндогенной пероксидазы - инкубация с 3% перекисью водорода 20 минут во влажной камере при комнатной температуре.

4. Инкубация с первичными антителами в течение 20 часов (на ночь) во влажной камере при температуре +4°С.

5. Инкубация с вторичными биотинилированными антителами 20 минут во влажной камере при комнатной температуре.

6. Инкубация со стрептавидин-пероксидазным комплексом 20 минут во влажной камере при комнатной температуре.

7. Реакция с DAB-хромогеном 3 минуты при комнатной температуре.

8. Докраска ядер гематоксилином, заключение срезов. После каждого этапа срезы промывают в фосфатном буфере рН 7,4.

Оценку иммуногистохимической реакции проводят путем подсчета индекса экспрессии на 100 хориальных ворсин и 100 децидуальных клеток в 10 полях зрения микроскопа при увеличении ×100 и х400 соответственно.

Предварительно оценивают интенсивность иммуногистохимической реакции в баллах по следующему алгоритму:

0 баллов - отсутствие реакции;

1 балл - слабое или умеренное окрашивание только цитотрофобластического слоя эпителиального покрова ворсин / слабое окрашивание цитоплазмы децидуальных клеток;

2 балла - слабое или умеренное окрашивание ворсинчатого синцитио- и цитотрофобласта / умеренное окрашивание цитоплазмы децидуальных клеток;

3 балла - выраженное окрашивание синцитио-, цитотрофобласта и стромы ворсин / выраженное окрашивание цитоплазмы децидуальных клеток.

Индекс экспрессии изучаемых факторов высчитывают по формуле:

Индекс экспрессии = Σ P(i)·i/100,

где i - интенсивность реакции в баллах от 0 до 3;

P(i) - процент структур (ворсин хориона или децидуальных клеток), окрашенных с разной интенсивностью.

При индексе экспрессии СЭФР и ТФР-β2 в ворсинчатом хорионе, равном или менее 1,5 у.е. и равном или менее 1,4 у.е. соответственно, диагностируют трофобластическую форму первичной плацентарной недостаточности; при индексе экспрессии СЭФР в децидуальных клетках, равном или менее 1,6 у.е., а ТФР-β2, равном или более 2,7 у.е., диагностируют эндометриальную форму первичной плацентарной недостаточности; при одновременном выявлении вышеуказанных критериев диагностируют смешанную форму первичной плацентарной недостаточности.

Сущность способа поясним следующими примерами.

Пример 1

Женщина Г-ва, 32 лет. Начавшийся самопроизвольный выкидыш в сроке 9 недель. В анамнезе 2 беременности: 1 артифициальный аборт, 1 самопроизвольный выкидыш в раннем сроке. В стационаре выполнено выскабливание полости матки.

При гистологическом исследовании отмечено преобладание крупных аваскуляризированных ворсин с отеком стромы, эпителиальный покров истончен в результате почти полного отсутствия цитотрофобластического слоя. В компактном слое гравидарного эндометрия преобладают промежуточные децидуальные клетки, скудная диффузная инфильтрация лимфоцитами. В спонгиозном слое -вытянутые и пилообразные эндометриальные железы со светлым цилиндрическим эпителием. В зоне плацентации определяются небольшие разрозненные депозиты фибриноида, единичные клетки инвазивного цитотрофобласта в поверхностных отделах компактного слоя.

Проведено иммуногистохимическое исследование. Индекс экспрессии в ворсинах хориона составил: СЭФР - 1,3 у.е., ТФР-β2 - 1,4 у.е. Индекс экспрессии в децидуальных клетках составил: СЭФР - 2,3 у.е., ТФР-β2 - 2,1 у.е. Согласно заявляемому способу диагностирована трофобластическая форма первичной плацентарной недостаточности. Даны рекомендации к генетическому обследованию супружеской пары.

Пример 2

Женщина Б-ва, 26 лет. Начавшийся самопроизвольный выкидыш в сроке 9 недель. Беременность первая. Выполнено выскабливание полости матки.

При гистологическом исследовании выявлено преобладание гиповаскуляризированных ворсин с незавершенным дихотомическим делением с формированием синцитиальных почек и свободных симпластов. Цитотрофобластический слой в эпителии отдельных ворсин редуцирован. Признаки дифференцировки стволовых ворсин отсутствуют. В строме гравидарного эндометрия преобладают веретенообразные предецидуальные клетки, эндометриальные артерии слабо спирализованы, железы вытянутые и округлые с гладким внутренним контуром.

При проведении иммуногистохимического исследования индекс экспрессии в ворсинах хориона составил: СЭФР - 1,9 у.е., ТФР-β2 - 2,1 у.е. Индекс экспрессии в децидуальных клетках составил: СЭФР - 1,6 у.е., ТФР-β2 - 2,8 у.е. Согласно заявляемому способу диагностирована эндометриальная форма первичной плацентарной недостаточности. Даны рекомендации о первоочередном исследовании гормональной функции системы гипоталамус-гипофиз-яичники.

Пример 3

Женщина К-ва, 20 лет. Начавшийся самопроизвольный выкидыш в сроке 12 недель. Беременность вторая, 1-я - артифициальный аборт. Выполнено выскабливание полости матки.

При гистологическом исследовании диагностировано нарушение дифференцировки ворсинчатого хориона с преобладанием склерозированных аваскуляризированных ворсин. Гравидарный эндометрий с очаговыми некрозами и диффузной инфильтрацией полиморфно-ядерными лейкоцитами в компактном слое. В спонгиозном слое обнаружены очаговые перигландулярные воспалительные инфильтраты с преобладанием лимфоцитов. Децидуализация стромы эндометрия недостаточна: преобладают промежуточные децидуальные и предецидуальные клетки.

При проведении иммуногистохимического исследования индекс экспрессии СЭФР в ворсинах хориона составил: - 1,2 у.е., ТФР-β2 в ворсинах хориона - 1,1 у.е. Индекс экспрессии в децидуальных клетках составил: СЭФР - 1,4 у.е., ТФР-β2 - 2,7 у.е. Согласно заявляемому способу диагностирована смешанная форма первичной плацентарной недостаточности. Даны рекомендации к диагностике генитальных инфекций и проведению антибактериальной и противовоспалительной терапии.

Преимущества способа

1. Является объективным иммуноморфологическим методом дифференциальной диагностики патогенетических форм первичной плацентарной недостаточности: трофобластической, эндометриальной и смешанной.

2. Проводится прямая оценка состояния ворсинчатого хориона и децидуальных клеток гравидарного эндометрия на местном уровне.

3. В диагностике используются специфические для ворсинчатого хориона и децидуальных клеток ростовые факторы, непосредственно контролирующие процессы развития плаценты в первом триместре.

4. Повышает качество гистологического заключения и позволяет в индивидуальном порядке определить первоочередные мероприятия диагностики и реабилитации нарушений репродуктивной функции.

5. Заявленный способ высокоинформативен и прост в осуществлении оценки результатов.

Способ морфологической дифференциальной диагностики форм первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре путем иммуногистохимического исследования ворсинчатого хориона, отличающийся тем, что дополнительно исследуют децидуальные клетки гравидарного эндометрия, при этом оценивают индекс экспрессии сосудисто-эндотелиального и трансформирующего факторов роста, и при индексе экспрессии в ворсинчатом хорионе сосудисто-эндотелиального фактора роста, равном или менее 1,5 у.е., а трансформирующего фактора роста, равном или менее 1,4 у.е., диагностируют трофобластическую форму первичной плацентарной недостаточности; при индексе экспрессии в децидуальных клетках сосудисто-эндотелиального фактора роста, равном или менее 1,6 у.е., а трансформирующего фактора роста, равном или более 2,7 у.е., диагностируют эндометриальную форму первичной плацентарной недостаточности; при одновременном выявлении вышеуказанных критериев диагностируют смешанную форму первичной плацентарной недостаточности.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, в частности к нейрохирургии, и касается способа диагностики опухоли мозга у пациентов. Сущность способа: в забранной крови определяют процентное количество CD25-лимфоцитов.
Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии и иммунологии, и может быть использовано для патогенетического лечения хронического тонзиллита и/или гипертрофии небных миндалин у детей дошкольного возраста с лимфопролиферативным синдромом.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу выделения ДНК Mycoplasma hominis (М. hominis) для дальнейшего применения в диагностическом алгоритме.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования риска развития врожденных инфекций путем определения количества специфических антител классов Ig М и Ig G в биологическом материале, отличающееся тем, что в качестве биологического материала используют мазок со слизистой оболочки цервикального канала при первичном обследовании в сроке до 12-й недели гестации, одновременно в мазках определяют количество антител Ig М и Ig G к вирусу краснухи, цитомегаловирусу, парвовирусу B19V, токсоплазмам, вирусу простого герпеса 1 и 2 типов и величины авидности специфических Ig G к этим возбудителям, дополнительно в том же мазке определяют уровень секреторного неспецифического Ig A методом РИФ к антигенам цитомегаловируса, хламидий, микоплазм, и генетического материала этих микроорганизмов методом ПЦР и в зависимости от полученных результатов прогнозируют группы высокого, умеренного или низкого риска развития врожденных инфекций.

Изобретение относится к медицине. Способ включает последовательность этапов количественного определения содержания фактора дифференцировки клеток HLDF у пациента, страдающего заболеванием сердечно-сосудистой системы.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидива рака вульвы. Для этого перед началом лечения определяют содержание в крови больших гранулярных лимфоцитов (БГЛ) и уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК).
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении сарком мягких тканей для прогнозирования возникновения рецидива. Сущностью изобретения является то, что определяют наличие клеток, экспрессирующих EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2, и при выявлении клеток с гиперэкспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 2 прогнозируют появление рецидива в короткие сроки, а при наличии клеток со слабой экспрессией EGFR, CD 34, bcl 6, bcl 26 прогнозируют благоприятный исход.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у пациентов с постинфарктной хронической сердечной недостаточностью, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для интермиттирующей терапии у пациентов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ).

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогноза течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом. Сущность способа: проводят забор анализируемого образца крови, при этом осуществляют в динамике цитофлюориметрический анализ полученного тестируемого образца на наличие маркеров эндотелиальной дисфункции - растворимых молекул адгезии sICAM-1 и sVCAM-1. При значении уровней экспрессии молекул адгезии sICAM-1 591,9 нг/мл и более и sVCAM-1 632 нг/мл и более в первые дни острейшего периода ишемического инсульта с последующим сохранением в динамике данных уровней или их повышением относительно исходных уровней прогнозируют неблагоприятное течение ишемического инсульта у данной категории больных. Применение способа обеспечивает высокую чувствительность, специфичность и точность прогноза в первые дни острейшего периода ишемического инсульта у больных сахарным диабетом. 5 ил 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. Сущность способа: определяют титр антител к цитомегаловирусу, оценивают нарушение оксигенации гемоглобина в эритроцитах, гистохимическим методом определяют активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и содержание метгемоглобина в эритроцитах, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, снижении активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы до 15,0±0,8 усл.ед. и увеличении содержания метгемоглобина в эритроцитах до 1,7±0,09% и снижении оксигемоглобина в периферической крови до 90,0±1,3% оценивают угрозу формирования гемической гипоксии. 2 ил.
Изобретение относится к медицине и касается способа количественного определения D-антигена полиовирусов 1-3 типов иммуноферментным анализом (ИФА). В качестве иммуносорбента используют поливалентный (к трем типам полиовируса) аффинно очищенный иммуноглобулин класса Y (IgY), полученный из яичных желтков куриц, иммунизированных полиовирусами, а в качестве детекторных антител - аффинно очищенный препарат IgG кролика против каждого из трех полиовирусов. Изобретение обеспечивает более низкий неспецифический фон и, соответственно, более высокую достоверность результата анализа. 1 н.п. ф-лы, 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине и касается способа проведения иммунохроматографического анализа с диссоциирующей флуоресцентной меткой, в котором на мембранной тест-полоске формируют комплексы, в состав которых входят молекулы антигена или антигенов, специфичные к ним антитела и молекулы метки. При этом после проведения анализа метка экстрагируется из рабочей мембраны тест-полоски и флуоресцентный сигнал измеряется в объеме жидкости. Способ по изобретению обеспечивает оптимальные условия для флуоресценции метки, а так же устранение мешающего влияния мембраны, которая, будучи непрозрачной, уменьшает интенсивность как возбуждающего, так и испускаемого света. 1 ил., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к элюированию сконцентрированного на магнитной матрице патогена. Способ элюции осуществляется следующим образом: 0,1 мл 10% взвеси магнитно-иммунного сорбента (МИС) туляремийного, чумного или бруцеллезного инкубируют с микробными взвесями возбудителей туляремии, бруцеллеза или чумы в течение 30 мин, удаляют надосадок, далее МИС инкубируют с 0,5 мл элюирующего раствора в течение 10 мин, pH элюата возвращают к физиологическому значению, проводят постановку реакции непрямой гемагглютинации или реакции агглютинации латекса. Технический результат: способ позволяет качественно элюировать патоген с магнитной иммобилизованной матрицы для последующего исследования в серологических реакциях и сохранять функциональную активность антитела на магнитной матрице для повторного использования. 3 пр., 1 табл.
Изобретение относится к области медицины, а именно к медицинской диагностике, и описывает способ качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента. Способ включает забор ротовой жидкости у пациента, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100, повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. В качестве независимых биомаркеров выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9). Способ характеризуется высокой точностью и чувствительностью дифференциальной экспресс-диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, упрощением подготовки пациента для забора и хранения диагностического материала, возможностью получения результата в день обращения пациента, высокой вероятностью выявления доброкачественных и злокачественных новообразований в организме пациента как на ранних, так и на более поздних стадиях заболевания. Изобретение может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ экспресс-диагностики острых кишечных инфекций (ОКИ), включающий выявление маркеров-индикаторов этиологии ОКИ, с использованием иммунологического лабораторного исследования, отличается тем, что этиологию ОКИ устанавливают у детей ранней возрастной категории, предпочтительно у новорожденных, при этом определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-10 и наличие хронической фетоплацентарной недостаточности (ХФПН), после чего рассчитывают вероятность (Р) бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о бактериальной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует об отсутствии бактериальной этиологии ОКИ, и необходимости проведения второго этапа диагностики, на котором определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-4, выявляют срок прикладывания к груди, а также вид вскармливания, при этом рассчитывают вероятность (Р) вирусной либо вирусно-бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о вирусной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует о вирусно-бактериальной ОКИ. Изобретение обеспечивает повышение точности выявления этиологии острой кишечной инфекции и упрощение процедуры диагностирования. 2 табл.

Группа изобретений относится к способу обнаружения множественных цитокинов из отдельно взятых клеток и предназначено для создания набора иммунологических характеристик заболеваний. Для воплощения изобретения предусматривается наличие суспензии живых мононуклеарных клеток периферической крови индивида, нанесенной на пластичный планшет, который содержит по меньшей мере одну микролунку в матрице микролунок. При этом по меньшей мере одна микролунка в указанной матрице микролунок содержит одну клетку в объеме менее одного нанолитра. Матрицу микролунок приводят в контакт с субстратом, причем субстрат предварительно обрабатывают по меньшей мере двумя средствами для обнаружения и каждое средство для обнаружения связывается с секретированным цитокином указанной клетки. Измеряют уровень каждого указанного секретированного цитокина на указанном субстрате, при этом уровень соответствует количеству указанного секретированного цитокина указанной единичной клетки. Определяют скорость секреции каждого указанного секретированного цитокина из указанной клетки, определяя, таким образом, характеристики указанных секретированных цитокинов. Измеряют динамическое изменение указанных характеристик секретированных цитокинов. Использование группы изобретений обеспечивает создание иммунологических характеристик заболеваний. 2 н. и 39 з.п. ф-лы, 4 табл., 21 ил., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к вопросу изучения антиадгезивной активности противохолерных иммуноглобулинов и усиления ее для совершенствования специфической профилактики холеры. Для оценки местного гуморального противохолерного белых мышей иммунизируют 5×107 микробными клетками Vibrio cholerae 5879, через 10 дней выделяют общий пул противохолерных Ig из тонкокишечных промывных жидкостей. Дополнительно получают первичную культуру энтероцитов тонкой кишки от интактных мышей. Затем противохолерные Ig в двукратном разведении наносят в объеме 3 мл на монослой энтероцитов, сформированных в лунках культуральных панелей. В последние наносят живые холерные вибрионы штамма Vibrio cholerae 5879, 40 м.к. на 1 энтероцит и инкубируют в течение 3 часов. После панели трижды отмывают, фиксируют этанолом в течение 20 минут и окрашивают по Романовскому - Гимза. Оценку местного гуморального противохолерного иммунитета проводят под микроскопом по количеству вибрионов, окрашенных в темно-синий цвет и прикрепившихся к одному энтероциту. Способ позволяет оценить специфический местный гуморальный иммунитет и усилить антиадгезивную активность общего пула противохолерных иммуноглобулинов. 3 з.п. ф-лы, 2 пр., 2 табл.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки устойчивости мембран эритроцитов периферической крови у беременных с цитомегаловирусной инфекцией на третьем триместре гестации. Способ характеризуется тем, что определяют титр антител к цитомегаловирусу, коэффициент эксимеризации в липидном бислое и в белок-липидном слое, оценивают микровязкость в мембранах эритроцитов и определяют активность аденозинтрифосфата в эритроцитах. При титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, снижении активности аденозинтрифосфата до 0,40±0,008 мкмоль/мл, нарушении микровязкости в мембранах эритроцитов, снижении коэффициента эксимеризации в липидном бислое до 0,59±0,006 Fэ/Fм, а в белок-липидном слое до 0,70±0,004 Fэ/Fм оценивают угрозу устойчивости мембран эритроцитов.
Наверх