Способ определения биологического возраста трупа при длительной кровопотере


 


Владельцы патента RU 2535042:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к судебной медицине, а именно к судебно-медицинской экспертизе, и предназначено для определения биологического возраста трупа при длительной кровопотере. Для осуществления способа в базальном слое эпидермиса при длительной кровопотере определяют экспрессию иммуногистохимических маркеров Ki67, р53 и bcl-2. При величине Ki67 более 18,0%, величине р53 менее 0,3%, величине bcl-2 более 12,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет. При величине Ki67 7,3-11,6%, величине р53 1,0-2,28%, величине bcl-2 2,5-7,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет. При величине Ki67 менее 3,0%, величине р53 более 5,5%, величине bcl-2 менее 0,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет. Изобретение обеспечивает определение биологического возраста трупа и позволяет более объективно решать задачи, поставленные перед судебно-медицинским экспертом следственными органами. 2 пр.

 

Изобретение относится к судебной медицине, в частности к судебно-медицинской экспертизе.

На сегодняшний день не выявлены объективные признаки определения возраста человека при длительной кровопотере, являющейся причиной хронической постгеморрагической анемии.

Известен способ определения возраста человека при помощи гистологического исследования хрящевой и костной ткани. При этом определенные гистологические изменения хряща и костей позволяют разделить весь материал на определенные возрастные группы (Атлас по судебной медицине под редакцией Пиголкина Ю.И., Богомоловой И.Н, 2006, с.303-306).

Недостатки: невозможность использования способа при длительной кровопотере и хронической постгеморрагической анемии, когда нарушаются процессы созревания хрящевой ткани эпифизов, развивается остеопороз и деформация костей скелета вследствие компенсаторной гипертрофии костного мозга (Reimann F, Gedikoglu G, Celik E. et all // Rofo. - 1981. - Vol.135. - №1. - p.20-24; Korkmaz U, Korkmaz N, Yazici S. et all // Eur. J. Intern Med. - 2012. - Vol.23. - №2. - P.154-58).

Известен способ определения биологического возраста по срокам окостенения скелета кисти и дистального отдела предплечья по рентгенограммам кистей и лучезапястных суставов (Жуковский М.А., Бухман А.И. Сроки окостенения скелета кисти и дистального отдела предплечья у детей и подростков г. Москвы в кн. Детская эндокринология: Руководство для врачей. М.: Медицина, 1995, с.40; Атлас по судебной медицине под редакцией Пиголкина Ю.И., Богомоловой И.Н., 2006, с.306-308).

Недостатки: невозможность использования способа при длительной кровопотере, хронической постгеморрагической анемии, заболеваниях костно-суставной системы и нарушении обмена кальция, когда нарушается процесс формирования ядер окостенения кисти и лучезапястных суставов (Reimann F., Gökmen М., Inceman S. // Blut. - 1968. - Vol.17. - №4. - P.214-226; Rutten E.P., Franssen F.M., Spruit M.A., Wouters E.F. // COPD. 2012 Dec 28. [Epub ahead of print]); сложность использования рентгеновских аппаратов в условиях судебно-медицинских отделений.

Известен способ определения биологического возраста человека по состоянию зубов (Попов В.Л., Дудаев А.Л., Прокопчук Н.И. Комплексная методика определения возраста по состоянию зубов с использованием аналоговых ЭВМ. // Судебно-медицинская экспертиза. - 1992. - №1. - с.6-10.).

Недостатки: невозможность использования способа при длительной кровопотере и хронической постгеморрагической анемии, а также при других видах анемии вследствие выраженных изменений дентина, пульпы и тканей перидонта (Benoist Н.М., Seek Diallo А., Diop S. Et all. // Dakar Med. - 2008. - Vol.53. - №2. - P.91-98; Hatipoglu M.G., Cagirankaya L.B., et all. // Eur J Dent. - 2012. - Vol.6. - №1. - P.95-100).

Задачей изобретения является способ определения биологического возраста трупа при длительной кровопотере.

Поставленная задача решается способом определения биологического возраста трупа при длительной кровопотере, заключающимся в том, что в базальном слое эпидермиса неповрежденной кожи определяют экспрессию иммуногистохимических маркеров Ki67, р53 и bcl-2 1 мкм2, и при величине Ki67 более 18,0%, величине р53 менее 0,3%, величине bcl-2 более 12,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет; при величине Ki67 7,3-11,6%, величине р53 1,0-2,28%, величине bcl-2 2,5-7,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет; при величине Ki67 менее 3,0%, величине р53 более 5,5%, величине bcl-2 менее 0,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет.

Практически способ осуществляют гистологическим исследованием тканей по (Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Микроскопическая техника. - М.: - Медицина. - 1996 г. - С.4-50, 339-445) следующим образом:

1. Исследуют участки кожи семи областей тела: шеи, груди, спины, ягодицы, передневнутренней поверхности бедра, передней поверхности предплечья и подошвенной поверхности стопы. На шее кусочек кожи вырезают с передней ее поверхности, на 0,5 см ниже проекции нижнего края щитовидного хряща, на груди - по срединной линии на уровне 4-го межреберья, на спине - в межлопаточной области, в проекции остистых отростков 4-5 грудных позвонков по срединной линии, на ягодице - с центральной ее части, на бедре - в области передневнутренней его поверхности на границе верхней и средней трети, на предплечье - на передней его поверхности на середине расстояния между проекцией локтевого и лучезапястного суставов, на подошвенной поверхности стопы - в области свода стопы на середине расстояния между проекцией головок плюсневых костей и пяточного бугра.

2. Кусочки фиксируют в 10% нейтральном забуференном формалине в течение 24 часов.

3. Материал промывают в проточной воде в течение 30 минут, а затем подвергается обезвоживанию и заливке в парафин по следующей схеме: спирт 60,0% - 2 часа, спирт 70,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт + ксилол (1:1) - 2 часа, ксилол + парафин (1:1) - 2 часа, парафин I 56° - 2 часа, парафин II 56° - 1 час.

4. Кусочки заливают в парафиновые блоки.

5. На ротационном микротоме изготавливают гистологические срезы толщиной 4-6 микрон.

6. Срезы подвергают депарафинизации и антигенной демаскировке в 0,1 М цитратном буфере pH 6,0 в течение 30 минут (Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина. - Казань: Титул, 2004).

7. Осуществляют обработку срезов первичными антителами Monoclonal Mouse а Hu Ki67 Clone ММ1 (фирма Novocastra), Monoclonal Mouse a Hu bcl-2 Clone bcl-2/100/D5 (фирма Novocastra), Monoclonal Rb a Hu p53 Clone 318-6-11 (фирма Dako) (Петров С.В., Райхлин H.T., см. выше).

8. Срезы обрабатывают реагентами системы визуализации En Vision + System-HRP (DAV), code К4010 (фирма Dako) (Петров С.В., Райхлин Н.Т., см. выше).

10. Полученные данные обрабатывают статистически по методу Стьюдента-Фишера с 95%-ным уровнем статистической достоверности с определением средней арифметической М, средней ошибки средней арифметической m, средней ошибки относительных величин mp и коэффициента достоверности разности t. Также статистическую обработку производят с использованием таблиц сопряженности, критерия χ2 и метода множественных сравнений с поправкой Бонферрони (Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. - М.: Практика, 1998. - 459 с).

С помощью данных методов изучались ткани кожи, полученные при судебно-медицинском исследовании 100 трупов (56 лиц мужского пола и 44 лиц женского пола в возрасте от 5 до 85 лет, не имеющих повреждений и патологических изменений кожи, при наличии признаков длительной кровопотери и хронической постгеморрагической анемии. Длительность кровопотери выясняли с помощью способа определения длительности терминального периода при острой кровопотере (патент на изобретение Российской Федерации №2453844).

Проведенный статистический анализ установил, что иммуногистохимические маркеры Ki67, bcl-2, р53 можно использовать для определения биологического возраста человека при наличии признаков длительной кровопотери и хронической постгеморрагической анемии.

Способ определения биологического возраста трупа по фрагментам неповрежденной кожи апробирован на кафедре судебной медицины Первого Московского Государственного медицинского университета им. И.М. Сеченова и имеет большое практическое значение.

Пример 1.

Согласно акту судебно-медицинского исследования на месте происшествия были обнаружены фрагменты расчлененного трупа.

По данным фрагментам было затруднительно определить биологический возраст трупа.

При судебно-медицинском исследовании выявлена хроническая язва тела желудка с признаками незначительно выраженного кровотечения, в тонкой и толстой кишке определялось небольшое количество крови. С помощью способа определения длительности терминального периода при острой кровопотере (патент на изобретение Российской Федерации №2453844) обнаружены морфологические признаки длительной кровопотери и хронической постгеморрагической анемии.

Учитывая наличие хронической постгеморрагической анемии, было невозможно использовать стандартные способы определения биологического возраста человека.

При иммуногистохимическом исследовании в базальном слое эпидермиса выявлена позитивная экспрессия следующих маркеров: Ki67 от 1,5 до 2,0%; р53 от 7,0 до 9,8%; bcl-2 от 0,2 до 0,3%.

На основании указанных признаков был сделан вывод, что расчлененные фрагменты трупа принадлежат лицу старческого возраста 70-85 лет (нормативные данные для этой возрастной группы составляют: Ki67 менее 3,0%, р53 более 5,5%, bcl-2 менее 0,5%).

Пример 2.

Согласно акту судебно-медицинского исследования на месте происшествия был обнаружен труп с ожогами лица и шеи 3-й-4-й степени. Ожоговая травма не позволяла определить биологический возраст трупа.

При судебно-медицинском исследовании выявлены признаки хронической наркотической интоксикации, в нижней трети пищевода определялись варикозно расширенные вены с незначительно выраженным кровотечением, в тонкой и толстой кишке обнаружено небольшое количество крови. С использованием способа определения длительности терминального периода при острой кровопотере (патент на изобретение Российской Федерации №2453844) были выявлены морфологические признаки длительной кровопотери и хронической постгеморрагической анемии.

Учитывая наличие хронической постгеморрагической анемии, было невозможно использовать стандартные способы определения биологического возраста человека.

При иммуногистохимическом исследовании в базальном слое эпидермиса неповрежденной ожогами кожи выявлена позитивная экспрессия следующих маркеров: Ki67 8,2%; р53 1,5%; bcl-2 5,6%.

На основании указанных признаков был сделан вывод, что биологический возраст трупа составляет 35-45 лет (нормативные данные для этой возрастной группы составляют: Ki67 7,3-11,6%, р53 1,0-2,28%, bcl-2 2,5-7,5%).

Способ по изобретению позволяет определить биологический возраст человека и более объективно решать задачи, поставленные перед судебно-медицинским экспертом следственными органами.

Способ определения биологического возраста трупа при длительной кровопотере, заключающийся в том, что в базальном слое эпидермиса неповрежденной кожи определяют экспрессию иммуногистохимических маркеров Ki67, р53 и bcl-2 на 1 мкм2, и при величине Ki67 более 18,0%, величине р53 менее 0,3%, величине bcl-2 более 12,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет; при величине Ki67 7,3-11,6%, величине р53 1,0-2,28%, величине bcl-2 2,5-7,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет; при величине Ki67 менее 3,0%, величине р53 более 5,5%, величине bcl-2 менее 0,5% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогноза течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования уровня гликированного гемоглобина y индивидуумов русской национальности, больных сахарным диабетом 2 типа.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования течения и эффективности терапии сахарного диабета 2-го типа у индивидуумов русской национальности.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способу характеристики микроорганизмов. Сущность способа состоит в (a) получении тестируемого образца, о котором известно, что он содержит или может содержать микроорганизмы; (b) наслаивании тестируемого образца на плотностный буфер в контейнере, где указанный плотностный буфер обладает однородной плотностью от приблизительно 1,025 до приблизительно 1,120 г/мл; (c) добавлении идентификатора в указанный тестируемый образец и/или в указанный плотностный буфер; (d) центрифугировании указанного контейнера для разделения микроорганизмов от других компонентов указанного тестируемого образца и образовании осадка микроорганизмов; (e) спектроскопическом исследовании осадка и/или указанного одного или более чем одного идентификатора с получением измерений, которые характеризуют микроорганизмы, где указанные спектроскопические исследования проводят при нахождении указанного осадка в указанном контейнере; и (f) характеристике микроорганизмов в осадке на основании полученных измерений и/или присутствия или отсутствия указанного идентификатора или метаболизированной формы указанного идентификатора в осадке, где указанные микроорганизмы характеризуют по одной или более моделям классификации, выбранным из группы, состоящей из групп по Граму, клинических групп по Граму, терапевтических групп и функциональных групп.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для определения генетической предрасположенности к привычному невынашиванию беременности (ПНБ).

Изобретение относится к области медицины. Сущность способа прогнозирования вероятности развития рестеноза с учетом локализации стента в правой коронарной артерии, огибающей артерии состоит в том, что на момент стентирования осуществляют забор крови пациента и регистрируют в физических величинах значения протромбинового индекса, коэффициента атерогенности, липопротеидов очень низкой плотности, липопротеидов высокой плотности, вычисляют величину стеноза S.

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической и экспериментальной абдоминальной хирургии и может быть использовано для оценки характера течения репаративной регенерации после оперативного лечения механической травмы печени.

Группа изобретений относится к способу измерения тропонина I в образце. Для этого предоставляют образец.
Способ относится к области медицины, а именно к способам лабораторной диагностики в ревматологии, используется для диагностики тяжести остеоартроза коленного сустава.
Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ оценки белоксинтезирующей функции лейкоцитов для клинических исследований методом иммуноферментного анализа путем выделения лейкоцитов из венозной крови с использованием системы Vacutainer BD, содержащей декстрозу, процедуры отмывания клеток, подготовки суспензии, содержащей 50000 клеток в 1 мкл, последующего 20-часового культивирования в среде Игла-MEM при добавлении фактора некроза опухоли-альфа в концентрации 0,005 мкг/мл, разрушения клеточных мембран лизирующим раствором и 50-кратным разведением образцов при определении концентрации альфа-дефензинов, а при определении содержания C-реактивного белка без разведения.
Изобретение относится к судебной медицине, а именно к судебно-медицинской экспертизе, и предназначено для определения биологического возраста трупа при повторной кровопотере. Для осуществления способа в сосочковом слое дермы неповрежденной кожи определяют экспрессию следующих иммуногистохимических маркеров на 1 мкм2: elastin, fibrillin, amyloid Р, vitronectin, fibulin-5. При величине elastin менее 11,0%, величине fibrillin менее 6,0%, величине amyloid Р менее 0,2%, величине vitronectin менее 0,1%, величине fibulin-5 более 57,0% делают вывод о биологическом возрасте трупа 5-10 лет. При величине elastin 43,0-64,0%, величине fibrillin 23,0-47,0%, величине amyloid Р 3,5-7,8%, величине vitronectin 4,6-6,8%, величине fibulin-5 0,5-4,7% делают вывод о биологическом возрасте трупа 35-45 лет. При величине elastin менее 3,0%, величине fibrillin менее 1,5%, величине amyloid Р более 27,0%, величине vitronectin более 12,0%, величине fibulin-5 менее 0,1% делают вывод о биологическом возрасте трупа 70-85 лет. Изобретение позволяет определять биологический возраст человека и более объективно решать задачи, поставленные перед судебно-медицинским экспертом следственными органами. 1 пр.

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности аралии высокой (Aralia elata (Miq.) Seem.). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий прямой и обратный праймеры и разрушаемый зонд. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет быстро и достоверно провести идентификацию лекарственного растения. 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности сушеницы болотной (Filaginella uliginosa (L.) Opiz). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий прямой и обратный праймеры и разрушаемый зонд. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет быстро и достоверно провести идентификацию лекарственного растения. 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности свободноягодника колючего, элеутерококка (Eleutherococcus senticocus (Rupr. et Maxim.) Maxim.). Предложен набор синтетических олигонуклеотидов для ПЦР с фрагментом ITS2 ядерной ДНК, включающий прямой и обратный праймеры и разрушаемый зонд. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет быстро и достоверно провести идентификацию лекарственного растения. 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и описывает способ диагностики стадий распространенного рака яичников, включающий исследование плазмы крови, где у пациентки определяют стадию заболеванию по международной гинекологической классификации (FIGO) и относят его к III или IV клинической стадии по уровню окислительной модификации белков (ОМБ) в плазме крови, причем III стадия определяется уровнем ОМБ от 4,638 до ∞, а IV стадия - уровнем ОМБ от 0 до 4,638. Использование предлагаемого изобретения обеспечивает уточнение стадий распространенного рака яичников по международной гинекологической классификации FIGO. 8 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, предназначено для прогнозирования патологии в родах, в частности дискоординации родовой деятельности (дистоции шейки матки). Сущность способа: при доношенной беременности в начале I периода родов в сыворотке крови женщин иммуноферментным методом определяют содержание кортикотропин-рилизинг гормона, субстанции Р, нейрокининов А и В, интерлейкинов 6 и 8, релаксина и кортизола, и рассчитывают прогностическую вероятность П по формуле: П=(-0,0011229·CRH+(-0,15119·NA)+(-0,0071961·NB)+(-0,021071·IL6)+0,0032637·IL8+(-0,00085785·pF2α)+9,5773·REL+(-0,0098088·SP)+0,0058058·cort)·2,719. При уровне вероятности П больше 0,51 прогнозируют высокий риск развития дискоординации родовой деятельности и завершения родового процесса экстренным оперативным путем. Применение изобретения обеспечивает повышение точности прогнозирования дискоординации родовой деятельности, что позволит своевременно сформировать группу высокого риска, дифференцировать характер нарушения РД, тем самым выбрать адекватную тактику ведения пациентки. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, к лабораторной диагностике и может быть использовано для дифференциальной диагностики анемии у детей. На гематологическом анализаторе определяют показатели гемограммы и индексы красной крови, такие как: гемоглобин (НВ) и гемоглобин ретикулоцитов (Ret-He), а в сыворотке крови определяют уровень растворимого рецептора трансферрина (p-ТФР), эритропоэтина сыворотки (ЭПО), сравнивают полученные показатели с референсными интервалами. При значениях: НВ<120 г/л, p-ТФР<25 нМЕ/мл, Ret>He>29 пг, ЭПО≤21 мМЕ/мл делают вывод об анемии на фоне воспаления (АВ). При значениях: НВ<120 г/л, p-ТФР>25 нМЕ/мл, Ret-He<29 пг, ЭПО>50 мМЕ/мл делают вывод о железодефицитной анемии (ЖДА), а при промежуточных значениях, попадающих в интервалы, характеризующие ЖДА или АВ, говорят о сочетанном варианте АВ+ЖДА. Изобретение позволяет проводить дифференциальную диагностику анемического синдрома, развивающегося при различных заболеваниях в детском возрасте, а не только диагностику железодефицитной анемии, позволяет проводить адекватную оценку метаболизма железа в организме. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к психиатрии, и может быть использовано для оценки тяжести течения текущего депрессивного эпизода у больных рекуррентным депрессивным расстройством. Способ осуществляют путем определения отношения GSK-3β/β-актин, расчета суммарного балла по шкале SIGH-SAD. При повышении показателя отношения GSK-3β/β-актин в мононуклеарах крови пациентов с депрессивными расстройствами выше 0,70 и значении суммы баллов по шкале SIGH-SAD выше 30 прогнозируют тяжелую степень текущего депрессивного эпизода при рекуррентном типе депрессивного расстройства. Способ позволяет на основе определения биологического показателя оценивать тяжесть депрессии, целенаправленно проводить реабилитационные психотерапевтические и фармакологические мероприятия. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования риска развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных. Осуществляют забор периферической венозной крови и выделение ДНК. Проводят анализ генов факторов коагуляции 20210G/A FII, 1691G/A FV и 10976G/A FVII. В случае выявления аллеля 10976G FVII и генотипа 10976GG FVII прогнозируют повышенный риск развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у беременных. При наличии комбинаций генотипа 20210GG FII и аллеля 10976А FVII; аллелей 20210G FII, 10976А FVII с генотипом 1691GG FV или аллелей 20210G FII и 10976А FVII прогнозируют низкий риск развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени. Изобретение обеспечивает эффективный способ прогнозирования риска развития плацентарной недостаточности с синдромом задержки роста плода 2-3-ей степени у женщин во время беременности или до ее наступления. 3 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и неонатологии, и описывает способ ранней диагностики вентрикуломегалии при церебральной ишемии тяжелой степени у новорожденных с внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией. Способ осуществляют путем определения среднемолекулярных пептидов в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата у новорожденных, где при концентрации среднемолекулярных пептидов, равной 0,785-0,815 единиц оптической плотности, диагностируют отсутствие вентрикуломегалии, а при концентрации среднемолекулярных пептидов, равной 0,816-0,844 единиц оптической плотности, диагностируют вентрикуломегалию. Изобретение позволяет осуществить раннюю диагностику вентрикуломегалии, что позволяет своевременно осуществлять лечебно-профилактические мероприятия, направленные на снижение риска чрезмерного повышения внутричерепного давления у новорожденных при церебральной ишемии тяжелой степени, обусловленной внутриутробной цитомегаловирусно-герпетической инфекцией. 2 табл., 3 пр.
Наверх