Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента

Авторы патента:

Кочурова Екатерина Владимировна (RU)

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2535076:

Кочурова Екатерина Владимировна (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к медицинской диагностике, и описывает способ качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента. Способ включает забор ротовой жидкости у пациента, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100, повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. В качестве независимых биомаркеров выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9). Способ характеризуется высокой точностью и чувствительностью дифференциальной экспресс-диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, упрощением подготовки пациента для забора и хранения диагностического материала, возможностью получения результата в день обращения пациента, высокой вероятностью выявления доброкачественных и злокачественных новообразований в организме пациента как на ранних, так и на более поздних стадиях заболевания. Изобретение может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, и может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.

Известен способ прогнозирования и диагностики плоскоклеточного рака головы и шеи по содержанию матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в плазме крови пациента, включающий исследования плазмы венозной крови, при этом сыворотку крови забирали стандартным способом у больных плоскоклеточным раком головы и шеи после постановки диагноза до начала лечебных процедур. Сыворотку хранили при температуре -50°C не более 10 месяцев и размораживали не более 1 раза для иммуноферментного определения содержания матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа на ИФА-анализаторе (см. Клишо Е.В. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при плоскоклеточном раке головы и шеи, автореферат диссертации д.м.н., Томск, 2011 г., с.43).

Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностики новообразований слизистой оболочки губы в день обращения пациента,

- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы,

- недостаточность вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,

- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала,

- возможность инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала,

- сложность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Задачей изобретения является создание способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента.

Техническим результатом является достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Технический результат достигается тем, что предложен способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для качественных экспресс исследований новообразований слизистой оболочки губы, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,47-180,47 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C. При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняют забор ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента.

В качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,47-180,47 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента.

Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:

- отсутствие выполнения забора венозной крови у пациента для качественных экспресс исследований новообразований слизистой оболочки губы,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 23,85-39,65 нг/мл отсутствия новообразования слизистой оболочки губы у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл папилломы слизистой оболочки губы пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл рака слизистой оболочки губы пациента,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 108,47-180,47 нг/мл отсутствия новообразования слизистой оболочки губы у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл папилломы слизистой оболочки губы пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл рака слизистой оболочки губы пациента,

- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента тактики его лечения,

- выполнение при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед проведением анализа ее центрифугирования при 3000 об/мин в течение 15 минут, забора поверхностной части в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещения в пробирку «salicaps» и сразу замораживания в морозильной камере при температуре минус 80°C,

- дополнительное осуществление в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента контрольного определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Экспериментальные исследования предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей). Кроме того, предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента обеспечил при практическом использовании значительное повышение качества жизни пациентов.

Реализация предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациент Л., 58 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки верхней губы слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 223,5 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 728,1 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки верхней губы слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки губы.

Пример 2. Пациентка Е., 91 год, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки нижней губы справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. При этом в связи с преклонным возрастом пациентки возникла необходимость кратковременного хранения ее ротовой жидкости, поэтому перед выполнением анализа ее центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирали поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещали в пробирку «salicaps» и сразу замораживали в морозильной камере при температуре минус 80°C. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 350,8 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 932,2 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки нижней губы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки губы.

Пример 3. Пациент Ф., 42 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки нижней губы слева».

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 290,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 806,4 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки нижней губы слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки губы.

Пример 4. Пациентка С., 64 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки верхней губы слева».

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 2562,8 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки верхней губы слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования и иссечение новообразования слизистой оболочки губы на 2-м этапе.

Пример 5. Пациентка П., 47 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки нижней губы справа».

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 628,1 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1890,7 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки нижней губы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования и иссечение новообразования слизистой оболочки губы на 2-м этапе.

Пример 6. Пациент Н., 76 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки верхней губы справа».

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 791,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 2397,4 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки верхней губы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования и иссечение новообразования слизистой оболочки губы на 2-м этапе.

Установленные клинические диагнозы впоследствии подтвердились результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у всех пациентов биопсийного материала из очага поражения.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациентов дополнительно осуществляли контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациентов, по результатам которых судили об эффективности выбранного лечения у пациентов.

1. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследование ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, отличающийся тем, что ротовую жидкость забирают у пациента для исследования новообразований, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,47-180,47 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Изобретение относится к медицине, в частности к элюированию сконцентрированного на магнитной матрице патогена. Способ элюции осуществляется следующим образом: 0,1 мл 10% взвеси магнитно-иммунного сорбента (МИС) туляремийного, чумного или бруцеллезного инкубируют с микробными взвесями возбудителей туляремии, бруцеллеза или чумы в течение 30 мин, удаляют надосадок, далее МИС инкубируют с 0,5 мл элюирующего раствора в течение 10 мин, pH элюата возвращают к физиологическому значению, проводят постановку реакции непрямой гемагглютинации или реакции агглютинации латекса.

Способ проведения иммунохроматографического анализа с диссоциирующей флуоресцентной меткой // 2535061

Изобретение относится к медицине и касается способа проведения иммунохроматографического анализа с диссоциирующей флуоресцентной меткой, в котором на мембранной тест-полоске формируют комплексы, в состав которых входят молекулы антигена или антигенов, специфичные к ним антитела и молекулы метки.

Способ количественного определения d-антигена полиовирусов 1-3 типов // 2535058

Изобретение относится к медицине и касается способа количественного определения D-антигена полиовирусов 1-3 типов иммуноферментным анализом (ИФА). В качестве иммуносорбента используют поливалентный (к трем типам полиовируса) аффинно очищенный иммуноглобулин класса Y (IgY), полученный из яичных желтков куриц, иммунизированных полиовирусами, а в качестве детекторных антител - аффинно очищенный препарат IgG кролика против каждого из трех полиовирусов.

Способ оценки нарушения оксигенации гемоглобина в эритроцитах периферической крови беременных на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции // 2535055

Изобретение относится к области медицины, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Способ прогнозирования течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом // 2535039

Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогноза течения ишемического инсульта у больных сахарным диабетом.

Способ дифференциальной диагностики форм первичной плацентарной недостаточности // 2535011

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и позволяет проводить морфологическую дифференциальную диагностику трофобластической, эндометриальной и смешанной формы первичной плацентарной недостаточности при самопроизвольном прерывании беременности в первом триместре.

Способ диагностики опухоли мозга у пациента // 2535000

Изобретение относится к области медицины, в частности к нейрохирургии, и касается способа диагностики опухоли мозга у пациентов. Сущность способа: в забранной крови определяют процентное количество CD25-лимфоцитов.

Способ дифференцированной иммуномодулирующей терапии хронического тонзиллита и/или гипертрофии небных миндалин у детей дошкольного возраста // 2533845

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии и иммунологии, и может быть использовано для патогенетического лечения хронического тонзиллита и/или гипертрофии небных миндалин у детей дошкольного возраста с лимфопролиферативным синдромом.

Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки дна полости рта по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента // 2533241

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки дна полости рта.

Способ выявления днк mycoplasma hominis из образцов крови // 2533238

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу выделения ДНК Mycoplasma hominis (М. hominis) для дальнейшего применения в диагностическом алгоритме.

Способ экспресс-диагностики острых кишечных инфекций // 2536243

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ экспресс-диагностики острых кишечных инфекций (ОКИ), включающий выявление маркеров-индикаторов этиологии ОКИ, с использованием иммунологического лабораторного исследования, отличается тем, что этиологию ОКИ устанавливают у детей ранней возрастной категории, предпочтительно у новорожденных, при этом определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-10 и наличие хронической фетоплацентарной недостаточности (ХФПН), после чего рассчитывают вероятность (Р) бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о бактериальной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует об отсутствии бактериальной этиологии ОКИ, и необходимости проведения второго этапа диагностики, на котором определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-4, выявляют срок прикладывания к груди, а также вид вскармливания, при этом рассчитывают вероятность (Р) вирусной либо вирусно-бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о вирусной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует о вирусно-бактериальной ОКИ. Изобретение обеспечивает повышение точности выявления этиологии острой кишечной инфекции и упрощение процедуры диагностирования. 2 табл.

Способ диагностики аллергических реакций // 2536291

Группа изобретений относится к способу обнаружения множественных цитокинов из отдельно взятых клеток и предназначено для создания набора иммунологических характеристик заболеваний. Для воплощения изобретения предусматривается наличие суспензии живых мононуклеарных клеток периферической крови индивида, нанесенной на пластичный планшет, который содержит по меньшей мере одну микролунку в матрице микролунок. При этом по меньшей мере одна микролунка в указанной матрице микролунок содержит одну клетку в объеме менее одного нанолитра. Матрицу микролунок приводят в контакт с субстратом, причем субстрат предварительно обрабатывают по меньшей мере двумя средствами для обнаружения и каждое средство для обнаружения связывается с секретированным цитокином указанной клетки. Измеряют уровень каждого указанного секретированного цитокина на указанном субстрате, при этом уровень соответствует количеству указанного секретированного цитокина указанной единичной клетки. Определяют скорость секреции каждого указанного секретированного цитокина из указанной клетки, определяя, таким образом, характеристики указанных секретированных цитокинов. Измеряют динамическое изменение указанных характеристик секретированных цитокинов. Использование группы изобретений обеспечивает создание иммунологических характеристик заболеваний. 2 н. и 39 з.п. ф-лы, 4 табл., 21 ил., 4 пр.

Способ оценки местного гуморального противохолерного иммунитета in vitro на модели экспериментальных животных // 2536707

Изобретение относится к медицине, в частности к вопросу изучения антиадгезивной активности противохолерных иммуноглобулинов и усиления ее для совершенствования специфической профилактики холеры. Для оценки местного гуморального противохолерного белых мышей иммунизируют 5×107 микробными клетками Vibrio cholerae 5879, через 10 дней выделяют общий пул противохолерных Ig из тонкокишечных промывных жидкостей. Дополнительно получают первичную культуру энтероцитов тонкой кишки от интактных мышей. Затем противохолерные Ig в двукратном разведении наносят в объеме 3 мл на монослой энтероцитов, сформированных в лунках культуральных панелей. В последние наносят живые холерные вибрионы штамма Vibrio cholerae 5879, 40 м.к. на 1 энтероцит и инкубируют в течение 3 часов. После панели трижды отмывают, фиксируют этанолом в течение 20 минут и окрашивают по Романовскому - Гимза. Оценку местного гуморального противохолерного иммунитета проводят под микроскопом по количеству вибрионов, окрашенных в темно-синий цвет и прикрепившихся к одному энтероциту. Способ позволяет оценить специфический местный гуморальный иммунитет и усилить антиадгезивную активность общего пула противохолерных иммуноглобулинов. 3 з.п. ф-лы, 2 пр., 2 табл.

Способ оценки нарушения микровязкости мембран эритроцитов периферической крови беременных на третьем триместре гестации, при обострении цитомегаловирусной инфекции // 2537119

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки устойчивости мембран эритроцитов периферической крови у беременных с цитомегаловирусной инфекцией на третьем триместре гестации. Способ характеризуется тем, что определяют титр антител к цитомегаловирусу, коэффициент эксимеризации в липидном бислое и в белок-липидном слое, оценивают микровязкость в мембранах эритроцитов и определяют активность аденозинтрифосфата в эритроцитах. При титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, снижении активности аденозинтрифосфата до 0,40±0,008 мкмоль/мл, нарушении микровязкости в мембранах эритроцитов, снижении коэффициента эксимеризации в липидном бислое до 0,59±0,006 Fэ/Fм, а в белок-липидном слое до 0,70±0,004 Fэ/Fм оценивают угрозу устойчивости мембран эритроцитов.

Способ оценки ингибирующего действия цитомегаловирусной инфекции на активность карбоангидразы в эритроцитах периферической крови беременных // 2537180

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гемической гипоксии у беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции. Для этого при обострении у беременной цитомегаловирусной инфекции в периферической крови измеряют титр антител IgG к цитомегаловирусу и активность продуктов гистохимической реакции на карбоангидразу в эритроцитах, и при титре IgG 1:1600 и показателях активности реакции на карбоангидразу до 0,015±0,002 усл.ед. в 65,0±2,2% эритроцитов, снижении оксигемоглобина до 95,0±1,5% определяют угрозу формирования гемической гипоксии. Способ позволяет оценить угрозу формирования гемической гипоксии на доклиническом уровне. 2 ил.

Способ прогнозирования дискоординации родовой деятельности // 2537241

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, предназначено для прогнозирования патологии в родах, в частности дискоординации родовой деятельности (дистоции шейки матки). Сущность способа: при доношенной беременности в начале I периода родов в сыворотке крови женщин иммуноферментным методом определяют содержание кортикотропин-рилизинг гормона, субстанции Р, нейрокининов А и В, интерлейкинов 6 и 8, релаксина и кортизола, и рассчитывают прогностическую вероятность П по формуле: П=(-0,0011229·CRH+(-0,15119·NA)+(-0,0071961·NB)+(-0,021071·IL6)+0,0032637·IL8+(-0,00085785·pF2α)+9,5773·REL+(-0,0098088·SP)+0,0058058·cort)·2,719. При уровне вероятности П больше 0,51 прогнозируют высокий риск развития дискоординации родовой деятельности и завершения родового процесса экстренным оперативным путем. Применение изобретения обеспечивает повышение точности прогнозирования дискоординации родовой деятельности, что позволит своевременно сформировать группу высокого риска, дифференцировать характер нарушения РД, тем самым выбрать адекватную тактику ведения пациентки. 2 пр.

Способ получения биотинилированного производного окисленного декстрана // 2537246

Изобретение относится к медицине, экспериментальной и клинической фармакологии. Суть способа: окисленный декстран растворяют в трис-ацетатном буферном растворе с рН 5,0-5,5, добавляют к полученному раствору гидразид биотина в соотношении к окисленному декстрану, равном 1:(20-25), после чего полученный раствор нагревают до 80-90°С и выдерживают в течение 30-60 минут. Технический результат: получение биотинилированного производного окисленного декстрана высокого качества, обеспечивающее повышение чувствительности его иммуноферментного анализа в сыворотке крови. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл., 4 пр.

Электрохимический способ иммуноанализа для определения микроорганизмов // 2538153

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к определению содержания микроорганизмов в различных объектах и средах. Способ предусматривает конъюгацию бактерий с электрохимической меткой, в качестве которой используют Fe0, MgFe2O4 или Fe3O4, осуществляемую в водной среде при заданных параметрах. Осуществляют отделение несвязавшихся наночастиц с использованием магнитного поля и помещение рабочего электрода, изготовленного из золота, платины или графитсодержащих материалов, поверхность которого предварительно модифицирована антителами, специфичными к определяемому штамму бактерий, в исследуемый раствор. Электрод выдерживают при заданных параметрах с образованием иммунокомплекса на его поверхности и промывают буферным раствором, содержащим нормальную лошадиную сыворотку и Твин-20. Электрод извлекают из раствора и помещают в электрохимическую ячейку, содержащую LiClO4, растворенный в ацетонитриле, диметилформамиде или диметилсульфоксиде, определяют содержание бактерий по величине аналитического окисления наночастиц, локализованных в иммунокомплексе на поверхности рабочего электрода. Изобретение позволяет увеличить чувствительность анализа, повысить производительность и упростить анализ. 7 ил., 6 пр.

Способ прогнозирования исхода мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после комбинированного лечения // 2538632

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования исходов мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря. Способ включает проведение исследования активности 26S протеасом и содержания NF-кВ р65 и р50 в опухолевой ткани. При активности 26S протеасом более 18-1000 Ед/мг белка и при коэффициенте NF-кВ р65/р50 более 1,0 прогнозируют низкую вероятность развития рецидива; при активности 26S протеасом менее 18-1000 Ед/мг белка и при коэффициенте NF-кВ р65/р50 менее 1,0 прогнозируют высокую вероятность развития рецидива опухоли. Изобретение может быть использовано для определения прогрессирования заболевания в виде появления рецидивов опухоли после проведения трансуретральной резекции опухоли и полихимиотерапии по схеме M-VAC. Применение изобретения обеспечивает повышение точности и информативности прогнозирования исхода рака мочевого пузыря. 2 пр., 2 ил.

Способ прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гтперплазии // 2538642

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гиперплазии. Сущность способа: определяют позитивную ядерную экспрессию маркера пролиферации Ki67 и мембранную экспрессию маркера дифференцировки клеток плоского эпителия CD 138 в бронхиальном эпителии. При уровне экспрессии Ki67≥25%, a CD138 - ≤3,5% прогнозируют риск развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов. Способ обладает большой информативностью и позволяет на ранних этапах сформировать группу больных с высоким риском развития плоскоклеточного рака легкого и соответственно оптимизировать тактику ведения таких пациентов. 2 табл., 3 пр.