Способ выявления рецессивных факторов наследственной предрасположенности к раку молочной железы


 


Владельцы патента RU 2535157:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии имени Н.Н. Петрова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области онкологии и представляет собой способ выявления факторов наследственной предрасположенности к раку молочной железы, включающий регистрацию генетических маркеров путем массивного параллельного секвенирования с последующим отбором и детальным анализом только вредоносных мутаций среди больных раком молочной железы, отличающийся тем, что для выявления рецессивных факторов наследственной предрасположенности к раку молочной железы в исследование включают больных, имеющих в анамнезе ранний возраст начала заболевания, первично-множественный рак и не имеющих в семье родственников, больных раком молочной железы или раком яичников, при этом анализируют только те мутации, которые присутствуют в гомозиготном состоянии. Результатом осуществления изобретения является расширение методов выявления генетической предрасположенности к раку молочной железы.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной онкологии, молекулярной медицинской генетике, молекулярной диагностике, и может быть использовано для выявления факторов наследственной предрасположенности к раку молочной железы (РМЖ).

Известен способ выявления факторов наследственной предрасположенности к раку молочной железы, включающий выявление новых мутаций в высокопенетрантных генах РМЖ (BRCA1, BRCA2, CHEK2, PALB2, BRIP1 и др.) путем прямого секвенирования кодирующей последовательности генов-кандидатов (Blay P, Santamaría I, Pitiot AS, Luque M, Alvarado MG, Lastra A, Fernández Y, Paredes A, Freije JM, Balbín M. Mutational analysis of BRCA1 and BRCA2 in hereditary breast and ovarian cancer families from Asturias (Northern Spain). BMC Cancer. 2013 May 17; 13:243).

Известен способ выявления факторов наследственной предрасположенности к РМЖ, включающий детекцию повторяющихся мутаций BRCA1, BRCA2, NBS1, CHEK2 5382insC, BRCA1 185delAG, BRCA2 6174delT с помощью ПЦР (Sokolenko АР, Rozanov ME, Mitiushkina NV, Sherina NY, Iyevleva AG, Chekmariova EV, Buslov KG, Shilov ES, Togo AV, Bit-Sava EM, Voskresenskiy DA, Chagunava OL, Devilee P, Cornelisse C, Semiglazov VF, Imyanitov EN. Founder mutations in early-onset, familial and bilateral breast cancer patients from Russia. Fam Cancer. 2007; 6(3):281-6).

Известен способ выявления факторов наследственной предрасположенности к РМЖ, включающий анализ родословных и поиск наследственных мутаций в семейных случаях. (Walsh Т, Casadei S, Coats KH, Swisher E, Stray SM, Higgins J, Roach KC, Mandell J, Lee MK, Ciernikova S, Foretova L, Soucek P, King MC. Spectrum of mutations in BRCA1, BRCA2, CHEK2, and TP53 in families at high risk of breast cancer. JAMA. 2006 Mar 22; 295(12):1379-88).

Известные гены наследственного РМЖ - BRCA1, BRCA2, CHEK2, NBS1, PALB2 и т.д. - отвечают менее чем за 20% случаев семейной агрегации заболевания. Несмотря на все усилия, большая часть случаев врожденной высокой предрасположенности к РМЖ до сих пор не имеет объяснения. Интересно, что все описанные на сегодняшний день гены наследственного РМЖ являются доминантными, до сих пор не удалось открыть ни одного рецессивного гена, опосредующего высокий риск РМЖ.

Применяемые в настоящее время методики выявления наследственной предрасположенности к РМЖ оказались неэффективными в плане поиска рецессивных раковых генов. Все дело в том, что большинство известных раковых мутаций были открыты либо путем анализа передачи аллелей в семьях с множественными случаями онкологической патологии, либо посредством генетического тестирования больных с семейной историей. Мы полагаем, что предпочтительное использование больных с семейной историей полностью оправдано при поиске доминантных мутаций, ассоциированных с наследственным раком, однако случаи заболевания, связанные с наличием рецессивных мутаций в гомозиготном состоянии, при таком подходе могут быть легко упущены. Напротив, пациенты с множественными новообразованиями представляют из себя выборку, значительно обогащенную наследственными случаями, обусловленными в равной степени как доминантными, так и рецессивными генами предрасположенности.

Известен способ выявления факторов генетической предрасположенности к РМЖ, включающий секвенирование всей кодирующей части генома пациентов с семейным РМЖ с помощью метода массивного параллельного секвенирования (NGS - "Next Generation Sequencing") (Walsh T, Lee MK, Casadei S, Thornton AM, Stray SM, Pennil C, Nord AS, Mandell JB, Swisher EM, King MC. Detection of inherited mutations for breast and ovarian cancer using genomic capture and massively parallel sequencing. Proc Nati Acad Sci USA. 2010 Jul 13; 107(28):12629-33.). Этот способ принят авторами за прототип.

Недостатком прототипа является выборочный анализ только семейных случаев, что практически исключает возможность обнаружить рецессивные раковые гены.

Техническим результатом изобретения является возможность выявления рецессивных генов РМЖ за счет принципиально нового подхода к исследованию, уменьшение времени и стоимости экспериментов.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе выявления факторов наследственной предрасположенности к РМЖ, включающем регистрацию генетических маркеров путем массивного параллельного секвенирования с последующим отбором и детальным анализом только вредоносных мутаций среди больных РМЖ, согласно изобретению, для выявления рецессивных факторов наследственной предрасположенности к РМЖ в исследование включают больных, имеющих в анамнезе ранний возраст начала заболевания, первично-множественный рак и не имеющих в семье родственников, больных РМЖ или раком яичников, при этом анализируют только те мутации, которые присутствуют в гомозиготном состоянии.

Проведенные расчеты доказывают, что если рецессивный аллель а имеет частоту в популяции 0.1 и пенетрантность, равную 100%, то только у небольшой категории пациентов, составляющей менее 0,2%, может быть зарегистрирована семейная история.

Для проверки наших расчетов мы исследовали частоту потенциально значимой гомозиготной мутации c.2515_2519delAAGTT в гене GEN1 в группах больных билатеральным раком молочной железы (БРМЖ), монолатеральным РМЖ и здоровых женщин. Оказалось, что в выборке пациентов БРМЖ частота гомозигот по исследуемой мутации действительно превышает таковую в выборке здоровых контролей (11/360 (3.1%) vs. 18/1305 (1.4%); отношение шансов (OR)=2.25 (1.02-4.75); p=0.031). В подтверждение приведенных выше соображений, все пациенты с биаллельными мутациями c.2515_2519delAAGTT оказались в группе без признаков вертикальной передачи предрасположенности к РМЖ. Интересно, что, как и в случае с БРМЖ, так и в случае монолатерального РМЖ, биаллельные мутации GEN1 встречались только у тех пациенток, матери которых не страдали данным заболеванием. При объединении данных по монолатеральному и билатеральному РМЖ, ассоциация между гомозиготностью по аллелю c.2515_2519delAAGTT и отсутствием РМЖ у матери достигла порога статистической значимости (тест Мантеля-Ханзеля, p=0.041).

По результатам метода массивного параллельного секвенирования (NGS) в дальнейшее рассмотрение следует принимать только мутации, чье влияние на функцию гена, несомненно - сдвиги «рамки считывания», нонсенс-мутации, повреждения сплайс-сайтов и т.д. При этом из полученного списка мутаций должны быть удалены те варианты, которые уже присутствуют в базе данных полиморфизмов.

Валидация частоты обнаруженных вредоносных наследственных мутаций (c.2515_2519delAAGTT) в группах РМЖ высокого риска из популяции Северо-Запада России с выраженным «эффектом основателя» позволит прогнозировать наследственную предрасположенность к РМЖ в данной популяции.

Таким образом, проведенное исследование подтверждает изобретательский уровень изобретения и дает основание утверждать, что включение в исследование пациентов с первично-множественными опухолями, ранним возрастом начала заболевания и отсутствием в семье родственников, больных РМЖ или раком яичников, позволяет выявить рецессивные факторы наследственной предрасположенности к раку молочной железы.

Способ осуществляют следующим образом.

Материал для исследования: ДНК лейкоцитов периферической крови, полученной от тестируемых лиц, выделяют стандартным соль-хлороформным методом.

Коллекция образцов ДНК для исследования: не менее 25 женщин с билатеральным РМЖ. Для дальнейшего исследования должны быть выбраны образцы ДНК, которые не содержат известные РМЖ-ассоциированные мутации (в генах BRCA1, BRCA2, CHEK2, NBS1, BLM, PALB2, RAD50, BRIP1, ATM, TP53, BLM).

Используют следующие методы исследования.

1. Секвенирование генома человека с использованием_технологии NGS на платформе Illumina MiSeq System: не менее 50 образцов проб биологического происхождения, полученных от пациентов, и не менее 2 контрольных образцов с охватом не менее 5% генома с покрытием кратностью ×6 или выше.

На основании результатов секвенирования для дальнейших исследований должны быть выбраны только те мутации, чье влияние на функцию гена представляется несомненным, - сдвиги «рамки считывания», нонсенс-мутации, повреждения сплайс-сайтов и т.д. При этом из полученного списка мутаций должны быть удалены те варианты, которые уже присутствуют в базе данных полиморфизмов.

Все представляющие интерес мутации должны пройти процедуру верификации посредством стандартного секвенирования исходных образцов ДНК. В результате сортировки, фильтрации и ранжирования обнаруженных мутаций, а также секвенирования исходных образцов ДНК, должно быть обнаружено примерно 200 представляющих интерес гетерозиготных и гомозиготных мутаций.

2. Молекулярно-эпидемиологическое исследование. Частоту гетерозиготных мутаций оценивают на панели, состоящей из 190 образцов «семейных» РМЖ. Частота гомозиготных мутаций может быть установлена на аналогичной выборке, состоящей из билатеральных РМЖ. Дальнейшее молекулярно-эпидемиологическое исследование проводят на выборке из 200 образцов ДНК здоровых женщин. В дальнейшее исследование должны быть включены только те мутации, которые продемонстрируют нулевую (или значительно меньшую по сравнению с группой РМЖ) встречаемость в контролях. Должно быть проведено генотипирование всех оставшихся случаев РМЖ (не менее 2000 штук) и всех доступных здоровых контролей (не менее 2000 образцов ДНК от здоровых женщин среднего возраста и не менее 1000 пожилых (>75 лет) онкологически-здоровых женщин).

3. Фенотипическая и молекулярно-генетическая характеристика опухолей, ассоциированных с новыми мутациями. Те гены, которые будут расценены как причастные к возникновению наследственных раков по результатам молекулярно-эпидемиологического исследования, должны быть подвергнуты дальнейшим экспериментам уточняющего характера, а именно:

а) анализ фенотипических характеристик опухолей с мутациями (TNM-статус, гистологический тип, степень дифференцировки, экспрессия рецепторов ER, PR и HER2, и т.д.);

б) анализ соматического статуса вовлеченного гена, в частности, тест на «потерю гетерозиготности» (утрату оставшегося (нормального) аллеля);

При необходимости, в отношении наиболее интересных генов должно быть выполнено секвенирование всей кодирующей последовательности на расширенной панели (100-200 случаев) РМЖ высокого риска.

Предлагаемое изобретение позволяет выявить новый класс генов предрасположенности к РМЖ - рецессивные гены РМЖ. Это в свою очередь поможет выявить здоровых лиц с высокой предрасположенностью к развитию данной онкологической патологии, а также оптимизировать терапевтические подходы к лечению больных носителей мутаций, нуждающихся в особых, отличных от «спорадических» случаев, схемах лечебных воздействий. Способ позволяет сократить время и стоимость экспериментов.

Способ выявления факторов наследственной предрасположенности к раку молочной железы, включающий регистрацию генетических маркеров путем массивного параллельного секвенирования с последующим отбором и детальным анализом только вредоносных мутаций среди больных раком молочной железы, отличающийся тем, что для выявления рецессивных факторов наследственной предрасположенности к раку молочной железы в исследование включают больных, имеющих в анамнезе ранний возраст начала заболевания, первично-множественный рак и не имеющих в семье родственников, больных раком молочной железы или раком яичников, при этом анализируют только те мутации, которые присутствуют в гомозиготном состоянии.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики нарушений менструальной функции, возникающих на фоне синдрома поликистозных яичников (СПКЯ).

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и может быть использовано для оценки травматичности липосакции. Сущность способа: липоаспират собирают в контейнер, производят забор жидкой части липоаспирата из нижней части контейнера, разводят его в физиологическом растворе и производят подсчет эритроцитов в камере Горяева в пяти больших квадратах, каждый из которых состоит из 16-ти малых, по формуле: где х - количество эритроцитов в 1 литре аспирата; а - количество эритроцитов, подсчитанных в 80 малых квадратах камеры Горяева; n - разведение аспирата в n раз; 80 - количество малых квадратов в камере Горяева; 4000 - множитель, приводящий к объему 1 мкл; 106 - количество мкл в 1 литре.
Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии, и может быть использовано для определения прогноза течения заболевания у больных апластической анемией после спленэктомии.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к терапевтическому лечению подагры и предупреждению сопутствующих побочных реакций и осложнений у пациентов. Способ предупреждения и прогноз риска инфузионных реакций при внутривенном введении ПЭГилированной уриказы пациентам с подагрой заключается в определении содержания мочевой кислоты в сыворотке крови пациента с последующим указанием на прекращение терапии на уровне примерно 4 мг/дл.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки активности воспалительного процесса, локализованного в трахеобронхиальном дереве. Сущность способа состоит в том, что в образцах венозной крови определяют количество палочкоядерных лейкоцитов в общем анализе, C-реактивного белка в биохимическом анализе, фибриногена в коагулологическом анализе, в образцах аспирата трахеи определяют количество нейтрофильных лейкоцитов при цитологическом исследовании, наличие изолированных грампозитивных и грамнегативных клинических штаммов микроорганизмов или их комбинации и количественное значение темпа роста микробной биомассы.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, кардиологии, патофизиологии, биохимии, фармакологии, и предназначено для оценки степени развития гипертонической болезни.
Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для лечения хронического калькулёзного простатита. Для этого осуществляют курс из 5-7 процедур трансректального ультразвукового воздействия в импульсном режиме, интенсивностью 0,2-0,4 Вт/см2 по 5-7 минут ежедневно.
Изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням. Определяют клинико-анамнестический данные: индекс массы тела (ИМТ), кг/м2; окружность талии (ОТ), окружность бедер (ОБ), отношение ОТ/ОБ, наличие сахарного диабета 2 типа у близких родственников, наличие артериальной гипертензии (АГ).
Изобретение относиться к медицине, а именно к стоматологии, и касается способа диагностики эрозиогенности ротовой жидкости у пациентов с гастроэзофагеальнооральным рефлюксом при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ диагностики нарушений агрегации тромбоцитов при муковисцидозе у детей, включающий проведение теста на агрегацию тромбоцитов с индукторами на агрегометре «Multiplate», при этом в кюветы с магнитной мешалкой и электродами добавляют 400 мкл NaCl при 37°C и затем сразу добавляют 400 мкл цельной крови из пробирки с гирудином, инкубируют в камере прибора две минуты, затем добавляют в кювету 30 мкл индуктора агрегации, выбранного из группы: растворимый рецептор тромбина - пептид-6, аденозиндифосфат, арахидоновая кислота, при этом скорость агрегации тромбоцитов изображается на экране прибора в виде кривой и автоматически рассчитывается площадь под кривой U, по значению площади U под кривой судят о состоянии агрегации трмбоцитов в сравнении с референсными значениями в группе здоровых детей и при повышении порогового значения площади U выше референсного судят о гиперагрегации тромбоцитов, а при понижении порогового значения площади U ниже референсного судят о гипоагрегации тромбоцитов.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, может быть использовано для уточнения стадии обострения или ремиссии для пациентов с рассеянным склерозом (РС). Способ основан на использовании стандартно определяемых при обследовании пациентов показателей биохимического статуса. Для определения стадии рассеянного склероза используют регрессионное уравнение: Стадия течения РС=2,5235 - 0,914006*пол+0,00355359*возраст+0,0702341*глюкоза+0,0131744*AcAт - 0,00412952*AлAт - 0,0484807*билирубин+0,153119*тимоловая проба+0,196675*мочевина+0,00223117*холестерин - 0,207918*амилаза -0,00755805*общий белок, где женский пол обозначают цифрой ноль, мужской - цифрой один, возраст выражают в количестве полных лет на момент обследования, для показателей глюкоза, AлAт, билирубин, тимоловая проба, мочевина, холестерин используют абсолютное значение регистрируемых величин в венозной крови. Если вычисленный показатель находится в диапазоне 2,89-3,48, то у пациента стадия ремиссии РС; если показатель более 3,48, то у пациента стадия обострения РС.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки индуцирующего действия цитомегаловирусной инфекции на содержание метгемоглобина и оксигемоглобина в эритроцитах новорожденного. Для этого в периферической крови новорожденного при обострении у беременной в третьем триместре гестации цитомегаловирусной инфекции определяют количество эритроцитов, предварительно окрашенных 0,1% раствором метиленового синего. При титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, повышении количества эритроцитов через 45 мин после окрашивания до 62,5±1,9%, увеличении метгемоглобина до 1,8±0,08%, снижении оксигемоглобина до 96,5±2,9% оценивают как нарушение восстановления метгемоглобина и снижение оксигенации гемоглобина, что приводит к формированию у новорожденного гемической анемии. Способ позволяет изучить характер оксигенации гемоглобина в эритроцитах периферической крови новорожденных, родившихся от матерей с обострением цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. 2 ил.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ экспресс-диагностики острых кишечных инфекций (ОКИ), включающий выявление маркеров-индикаторов этиологии ОКИ, с использованием иммунологического лабораторного исследования, отличается тем, что этиологию ОКИ устанавливают у детей ранней возрастной категории, предпочтительно у новорожденных, при этом определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-10 и наличие хронической фетоплацентарной недостаточности (ХФПН), после чего рассчитывают вероятность (Р) бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о бактериальной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует об отсутствии бактериальной этиологии ОКИ, и необходимости проведения второго этапа диагностики, на котором определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-4, выявляют срок прикладывания к груди, а также вид вскармливания, при этом рассчитывают вероятность (Р) вирусной либо вирусно-бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о вирусной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует о вирусно-бактериальной ОКИ. Изобретение обеспечивает повышение точности выявления этиологии острой кишечной инфекции и упрощение процедуры диагностирования. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии и неонатологии, и может быть использовано для оценки тяжести течения и возможного исхода ретинопатии у недоношенных детей. Для этого на первом этапе субтотальной витреоэктомии проводят забор проб стекловидного тела и анализ его биохимических параметров. В пробах стекловидного тела без доступа воздуха при температуре 37°C с помощью автоматического анализатора газов крови и кислотно-основного состояния определяют значения следующих показателей: pH, парциального давления углекислого газа pCO2, истинное содержание иона бикарбоната ( H C O 3 − ) и показателя BE избытка/дефицита оснований. При обнаружении во время офтальмоскопического осмотра признаков экссудативно-пролиферативных реакций в заднем отрезке глаза, а также при значении pH стекловидного тела <6,9, парциального давления углекислого газа pCO2<8 мм рт.ст., истинной концентрации бикарбонатов H C O 3 − < 2 ммоль/л и показателя BE<-25 ммоль/л оценивают течение ретинопатии как агрессивное с низкой вероятностью формирования адекватных зрительных функций в исходе заболевания. Способ позволяет оценить тяжесть течения и возможный исход ретинопатии у недоношенных детей на основании исследования показателей кислотно-основного состояния стекловидного тела. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики отклонений в репродуктивном здоровье подростков мужского и женского пола с хронической патологией (ХПП). Сущность способа состоит в том, что проводят исследование уровня тиреотропного гормона, мкЕд/мл, свободного тироксина, пмоль/л, пролактина, мМе/мл, фолликулостимулирующего гормона, мМе/мл, лютеинизирующего гормона, мМе/мл, тестостерона, нмоль/л, дегидроэпиандростерон-сульфата, мкг/мл, кортизола, нмоль/л, эстрадиола, пг/мл, 17-ОН прогестерона, нмоль/л в сыворотке крови. Рассчитывают интегральный показатель гормонального статуса (ИПГС) по формуле. При ИПГС до 0,799 диагностируют привычное отклонение, когда минимален риск наличия отклонений в репродуктивном здоровье. При значении ИПГС от 0,800 до 1,000 констатируют напряженность процессов гормональной регуляции, отражающих средний риск наличия отклонений в репродуктивном здоровье. Нарушение межгормональной кооперации соответствует ИПГС от 1,001 до ≤1,210, что отражает высокий риск наличия отклонений в репродуктивном здоровье. Недостаток резервных возможностей диагностируют при ИПГС, равном или превышающем 1,211, что свидетельствует об очень высоком риске наличия отклонений в репродуктивном здоровье. Способ позволяет улучшить диагностику отклонений в репродуктивном здоровье подростков. 5табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиоваскулярным заболеваниям, и может быть использовано для оценки тяжести эндотелиальной дисфункции у пациентов с ревматоидным артритом. Сущность изобретения основана на определении комплекса показателей, по диапазонам (Д) значений которых присваивают диагностические коэффициенты (ДК). Затем полученные значения ДК суммируют и получают значение диагностического индекса (ДИ). При его значении меньше или равном минус 50 определяют отсутствие ЭД, при его значении больше минус 50 и меньше или равном 0 определяют неопределенное состояние, при его значении больше 0 и меньше 40 определяют начальные проявления ЭД, при его значении больше или равном 40 определяют выраженную эндотелиальную дисфункцию. Применение изобретения позволяет дифференцировать тяжесть эндотелиальной дисфункции, уточнить тактику ведения больных и достичь более высокого терапевтического эффекта. 1 табл., 4 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки степени тяжести внебольничной пневмонии. Сущность способа состоит в том, что у больного определяют в крови абсолютное количество лейкоцитов, относительное количество эритроцитов-макроцитов, абсолютное количество моноцитов 3-го класса с сегментированным лопастным ядром, относительное количество гранулярных лимфоцитов среднего размера, относительное количество нейтрофилов с 7-ю сегментами в ядре, количественный показатель C-реактивного белка, а также физиологический показатель числа дыхательных движений пациента в 1 минуту. Производят математический расчет по формуле показателя тяжести внебольничной пневмонии (ПТ) и при значении меньше 0,795 пневмонию оценивают как среднетяжелую, а при значении больше или равно 0,795 оценивают как тяжелую. Использование заявленного способа позволяет эффективно оценить степень тяжести внебольничной пневмонии. 2 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, и заключается в проведении хроматографического анализа образца биопробы. Для этого образец наносят на бумажный фильтр и на этот же фильтр наносят радиально стандартные калибровочные растворы метронидазола в интервале концентраций 10-100 мкл. Фильтр обрабатывают реагентом-проявителем, содержащим 5%-ный водный раствор едкого калия и ацетона, взятых в соотношении 2:1, и термостатируют при 100°С до появления окрашенных пятен. Интенсивность окраски пятна пробы сравнивают с окраской пятен стандартных калибровочных растворов, по которым и устанавливают концентрацию метронидазола в анализируемом образце. Способ позволяет быстро и достоверно проводить мониторинг содержания метронидазола и, тем самым, своевременно корректировать процесс лечения. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности клинической биохимии, цитологии, патоморфологии и может быть использовано для определения способности клеток костного мозга к делению. Клетки хранят в стандартном растворе стабилизатора при комнатной температуре, отбирают из суспензии первую исходную пробу и через 3-3,5 часа хранения суспензии отбирают вторую пробу, пробы обрабатывают флуоресцентным потенциалчувствительным витальным зондом иодид 2-(п-диметиламиностирил)-1-метилпиридиния, измеряют интенсивность флуоресценции зонда в клетках, рассчитывают долю клеток с интенсивностью флуоресценции более 100 усл.ед. в каждой пробе, и при увеличении доли клеток с интенсивностью флуоресценции более 100 усл.ед. более чем в 1,5 раза во второй пробе по сравнению с первой, судят о способности клеток костного мозга к делению. Способ позволяет оценить спонтанную способность ККМ к делению, обусловленную эффектом собственных ростовых факторов, и исключает причины, влияющие на деление и дифференцировку клеток. Способ методически прост и позволяет получить результаты через 3-3,5 часа. 3 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития у детей кариеса временных зубов с незаконченной минерализацией. Для осуществления способа прогнозирования развития кариеса у детей исследуют анамнез и собранную натощак нестимулированную ротовую жидкость ребенка. Согласно анамнезу определяют продолжительность грудного вскармливания ребенка (ПР), в целых месяцах, показатель использования (ПИ) в течение первых трех лет жизни ребенка одной или более пищевых фторсодержащих, витаминных, иммуномодулирующих добавок и/или пробиотиков, величине которого, в случае их использования, присваивают числовое значение, равное «1», в случае отсутствия использования - «0». В нестимулированной ротовой жидкости ребенка определяют концентрацию кальция (Ca) в мМоль/л, концентрацию фосфора (Р) в мМоль/л и рассчитывают их соотношение (Ca/P), а также определяют уровень лактоферрина (УЛ) в мкг/мл. После этого рассчитывают коэффициент прогнозирования (КП) по формуле: КП=1,44-2,28×(Ca/P)-0,07×ПР-0,12×ПИ+0,16×УЛ и при выполнении условия КП≥0,7 прогнозируют развитие у ребенка кариеса временных зубов с незаконченной минерализацией. Предлагаемый способ позволяет с высокой достоверностью прогнозировать развитие у ребенка кариеса временных зубов с незаконченной минерализацией, при этом не требует длительного времени на проведение исследования. 2 пр.
Наверх