Средство, обладающее гастропротекторной активностью


 


Владельцы патента RU 2536225:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) (RU)
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) (RU)

Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к применению водорастворимого полиэлектролитного комплекса каппа-каррагинан:хитозан при соотношении компонентов 1:10 в/в с молекулярной массой каппа-каррагинана 311 кДа и с молекулярной массой хитозана 115 кДа и степенью N-ацетилирования 6% в качестве средства, обладающего гастропротекторной активностью. Изобретение обеспечивает расширение арсенала природных средств, обладающих гастропротекторным действием, предотвращающих ульцерогенное воздействие на слизистую оболочку желудка путем создания на ее поверхности защитного слоя, а также демонстрирует бóльшую эффективность снижения язвообразования по сравнению с каппа-каррагинаном и хитозаном, взятыми по отдельности. 1 з.п. ф-лы, 4 пр., 4 табл., 1 ил.

 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к созданию лекарственных средств природного происхождения, обладающих гастропротекторной активностью.

Гастропротекторные препараты используются в медицине для защиты слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки от повреждающего действия химических и физических факторов. Применяются в основном в комплексной терапии язвенной болезни, в том числе осложненной инфицированием Helicobacter pillory. Особая востребованность этих средств связана с их защитным эффектом на фоне лечения гормональными препаратами и нестероидными противовоспалительными средствами (НПВС), на долю которых приходится до 25% всех выявленных язв желудка, а среди язв, осложненных кровотечением, - до 60% [Л. Фридман, У. Питерсон. Язвенная болезнь, гастрит и другие заболевания желудка. - Из «Внутренние болезни по Тинсли Р. Харрисону». М.: «Практика», 2005. С. 1925 - 1949; Клиническая фармакология по Гудману и Гилману - М.: «Практика», 2006. С.785].

Современные гастропротекторные средства представлены двумя основными группами: синтетическими аналогами простагландинов, повышающими секрецию слизи в желудке, и препаратами, образующими защитную пленку на поверхности слизистой оболочки. Вторая группа гастропротекторов, создающих механическую защиту слизистой оболочки, состоит из препаратов на основе солей алюминия, магния и висмута. Эти неорганические вещества, нерастворимые в воде, образуют в кислой среде невсасывающиеся комплексы с белками язвенных дефектов, что затрудняет доступ к последним хлористоводородной кислоты и ускоряет заживление язв. Среди гастропротекторов этого типа наиболее эффективны препараты солей алюминия (Сукралфат, Фосфалюгель) и висмута (Де-нол, Пилорид, Алцид).

Сукралфат (алюминиевая соль октасульфата сахарозы) - аморфный порошок, в кислой среде полимеризуется, образуя вязкий липкий гель. Фосфалюгель (фосфат алюминия с пектином и агар-агаром) применяется в виде коллоидной суспензии, которая быстро распределяется по поверхности слизистой оболочки, образуя гелеобразную пленку. Фосфалюгель не вызывает характерного для Сукралфата дефицита фосфатов в желудочно-кишечном тракте. Де-нол (висмута субцитрат) также применяется в виде суспензии, образующей в кислой среде полимерный комплекс с гликопротеинами слизистой оболочки. Особенностью препаратов висмута является их антибактериальное действие, направленное на Helicobacter pillory [Д.А. Харкевич «Фармакология». - М.: «Гэотар-Медиа», 2010. С.379-371]. Недостатком гастропротекторов на основе неорганических веществ является их побочное действие в виде запора, тошноты, рвоты, а при длительном применении они способствуют развитию остеопороза. При заболеваниях почек их токсичность возрастает за счет усиления всасывания ионов алюминия и висмута. Кроме того, на их фоне снижается всасывание и биодоступность других препаратов [Клиническая фармакология по Гудману и Гилману. - М.: «Практика», 2006. С.782].

Среди природных гастропротекторов, применяемых в терапии язвенной болезни, известен растительный препарат глицирризиновой кислоты - Карбеноксолон, получаемый из экстракта солодкового корня. Эффект препарата связан со стимуляцией секреции и усилением вязкости слизи за счет повышения в ней сиаловых кислот, а также с понижением активности пепсина [Д.А. Харкевич «Фармакология». - М.: «Гэотар-Медиа», 2010. С.381]. Однако побочные эффекты Карбеноксолона, связанные с его минералокортикоидной активностью (отеки, задержка ионов натрия, гипертензия), ограничивают его применение.

В качестве противоязвенных средств с гастрозащитной активностью описаны водорастворимые экстракты корневища аира, коры крушины, корня солодки, листьев березы [RU 2264822 C1, 27.11.2005], коры и побегов облепихи крушиновидной, корней и травы шлемника, сухого экстракта коры осины и др. растений [Крылова С.Г. Растения Сибири и Дальнего Востока в терапии язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки: экспериментальное исследование. Дисс. Докт. Биол. Наук. Томск, 2005].

Действие растительных экстрактов в целом направлено на снижение протеолитической активности и кислотности желудочного сока, стимуляцию секреции слизи и процессов, способствующих регенерации язвенного дефекта, однако эффективность их действия невысока. Поэтому задача изыскания новых природных материалов, в том числе биогенных соединений, с высокой гастропротекторной активностью, остается актуальной.

В последние годы для получения различных композиционных материалов используются полиионные полисахариды морского происхождения. Один из них - хитозан - катиоонный (1-4)-2-амино-2-деокси-β-d-глюкан, получают из панциря ракообразных [Скрябин К.Г., Вихорева Г.А., Варламов В.П. Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение //М.: Наука. - 2002. - С.217-246]. Хитозан и его производные, проявляющие широкий спектр биологической активности, в том числе иммуностимулирующие и антибактериальными свойства, может применяться в качестве ранозаживляющих пленок [RU 2460532 C1, 10.09.2012; RU 2254145 C1, 20.06.2005], носителя для лекарственных средств [RU 2482133 C2, 20.05.2013], матрикса для размножения клеток [Them-Ham W.W., Kitiyanant Y. //J. Biomed. Mater. Res. 2007. Vol.80. №1. P. 92-101] и вектора для доставки генетического материала в клетку [Краюхина М.А. и др. //Успехи химии, 2008. Т. 77, №9. С.854-869].

На моделях язвы желудка, индуцированной этанолом, уксусной кислотой или индометацином показано, что хитозан с низкой молекулярной массой (25-50 кДа) проявляет небольшую гастропротекторную активность, которая носит дозозависимый характер (250 - 1000 мг/кг) [Ito M., Ban A., Ishihara M. Anti-ulcer effects of chitin and chitosan, healthy foods, in rats //The Japanese journal of pharmacology. - 2000. - Т. 82. - №. 3. - С.218-225; Ahmed J.H., Jala'a A., Al-Masoodi E.A. Evaluation of the gastroprotective effect of misoprostol, chitosan and their combination on indomethacin induced gastric ulcer in rats, MJBU, Vol 29, No. 1&2, 2011].

Другими перспективными компонентами гидробиоты могут считаться каррагинаны - сульфатированные полисахариды красных водорослей [M. Yermak, Yu.S. Khotimchenko, in: Recent Advances in Marine Biotechnology M Fingerman, R. Nagabhushanam (Eds.), Sci. Publ. Inc. USA-UK. 2003, P.207-255]. В зависимости от структурного типа каррагинаны проявляют ярко выраженную антивирусную, антимикробиальную, иммуномодулирующую или антикоагулирующую активность [RU 2012118600 A, 20.11.2013; Yermak I. M., Khotimchenko Yu. S. //In Recent Advances in Marine Biotechnology /Ed. by Fingerman M, Nagabhushanam R. Sci. Publ. Inc., USA-UK. 2003. Vol.3. P. 207-255; Yermak I.M., Barabanova A.O., Aminin D.L.,.Davydova B.N., Sokolova E.V., Yong Hwan Kim, Kwang Soon Shin, Solov'eva T.F. //Carbohydr. Polym. 2012. Vol.87. P. 713-720].

Показано, что каррагинан является эффективным комплексообразователем для некоторых транквилизаторов и антибиотиков [A.G. Schmidt, S. Wartewig, K.M. Picker, Eur. J. Pharm. Biopharm., 2003, 56, P. 101-110]. Полиэлектролитные комплексы (ПЭК) на основе каррагинана используются для создания систем с контролируемым высвобождением активных веществ [F.van de Velde, N.D.Lourenco, H.M. Pinheiro, M.Bakken. Adv.Synth.Catal.,2002, 334., №8, P. 815-835].

В литературе описаны ПЭК каррагинан:хитозан, полученные в виде пленок [X. L. Yan, E. Khor, L. Y. Lim. J. Biomed. Mater. Res. Part B Appl. Biomater., 58, №4, 358-365 (2001)], микрокапсул [N. Devi, T. K. Maji. J. Macromol. Sci. Part A,. 46, №11, 1114-1121 (2009)] и гелей [DE 102005050895 A1, 26.04.2007], которые в основном рассматриваются в качестве векторов доставки различных биологически активных субстанций и компонентов для пролонгированного высвобождения медицинских препаратов.

Заявителями были получены растворимые ПЭК каррагинан:хитозан путем смешивания полисахаридов при разных соотношениях исходных компонентов и показано, что растворимый комплекс каррагинан:хитозан обладает антивирусной активностью на модели вируса табачной мозаики [Володько А.В., Давыдова В.Н. «Растворимые комплексы хитозан-каррагинан» XIII Всерос. молодеж. школа-конф. по актуал. проблемам химии и биологии, МЭС ТИБОХ, Владивосток, 7-14 сент. 2010 г. С.10].

Ранее заявителями было установлено, что и каррагинан и хитозан проявляют выраженный иммунопротекторный эффект против эндотоксинов грамотрицательных бактерий. [RU 2351351 C1, Yermak I., Davidova V., Gorbach V.. et al Forming and immunological properties of some lipopolysaccharide-chitosan complexes //Biochimie. - 2006. - Т. 88. - №. 1. - С.23-30].

Приведенные данные свидетельствует о высокой перспективности морских полисахаридов как комплексообразователей с высокой биологической активностью. Однако указания на то, что ПЭК каррагинан:хитозан обладает гастропротекторным действием в доступной патентной и другой научно-технической литературе не обнаружено.

Задача изобретения - расширение арсенала природных средств, обладающих гастропротекторным действием, предотвращающих ульцерогенное воздействие на слизистую оболочку желудка путем создания на ее поверхности защитного слоя.

Задача решена применением водорастворимого полиэлектролитного комплекса каппа-каррагинан:хитозан при соотношении компонентов 1:10 в/в (весовое соотношение) в качестве средства, обладающего гастропротекторной активностью. При этом ПЭК каппа-каррагинан:хитозан в качестве полианиона содержит каппа-каррагинан с молекулярной массой 311 кДа. По своим характеристикам (молекулярной массе и степени сульфатирования) каррагинан полностью соответствует требованиям международного кодекса, предъявляемым к пищевым добавкам [Codex Alimentarius Comisson (2006) Report of the thirty-eighth session of the Codex Committee on Food Additives and Contaminants (CCFAC), The Hague, The Netherlands, 24-28 April 2006].

В качестве поликатиона в комплекс входит хитозан с молекулярной массой 115 кДа и степенью N-ацетилирования 6%. Заявляемое средство не имеет аналогов по составу среди современных гастропротекторных препаратов. Оно может применяться в качестве гастропротекторного средства для профилактики и лечения ульцерогенного поражения слизистой желудка, в том числе при длительном лечении НПВС.

Водорастворимые ПЭК каппа-каррагинан:хитозан были получены при двух весовых соотношениях 1:10 в/в и 10:1 в/в, путем смешивания водных растворов полисахаридов. Для получения ПЭК-1 каппа-каррагинан:хитозан 1:10 в/в к 50 мл раствора каппа-каррагинана C=0,1 мг/мл добавляли 50 мл раствора хитозана C=1 мг/мл. Для получения ПЭК-2 каппа-каррагинан:хитозан 10:1 в/в к 50 мл раствора хитозана C=0,1 мг/мл добавляли 50 мл раствора каппа-каррагинана C=1 мг/мл.

Формирование ПЭК каппа-каррагинан:хитозан регистрировали методом ИК-спектроскопии, проведя разложение спектров на индивидуальные компоненты и сравнив соотношение характерных для каррагинана полос поглощения в исходном полисахариде и его комплексе с хитозаном. Для регистрации ПЭК были использованы полосы поглощения каппа-каррагинана при 1259 см-1 (валентные колебания (SO3-)) и при 842 см-1 (деформационные колебания (S~O~C(4)).

На фигуре представлен ИК-спектр исходных каппа-каррагинана, хитозана и их ПЭК каппа-каррагинан:хитозан.

В ИК-спектре комплекса по сравнению с ИК-спектром исходного каппа-каррагинана наблюдается уменьшение площадей интенсивности полосы поглощения сульфатных групп практически в два раза. Так в исходном каппа-каррагинане отношение площадей полос S1259 и S842 равно 4,0, а в ПЭК каппа-каррагинан:хитозан это отношение составляет 1,7, что свидетельствует о связывании сульфатных групп каппа-каррагинана с аминогруппами хитозана и образовании ими комплекса.

Технический результат, обеспечиваемый изобретением, заключается в способности водорастворимого ПЭК каппа-каррагинан:хитозан при соотношении компонентов 1:10 в/в с молекулярной массой каппа-каррагинана 311 кДа и с молекулярной массой хитозана 115 кДа и степенью N-ацетилирования 6% проявлять гастропротективное действие.

Гастропротекторные свойства растворимого ПЭК каппа-каррагинан:хитозан, ранее не описанные в литературе, были выявлены экспериментальным путем на модели язвы желудка, индуцированной индометацином. Опыты проводили в трех независимых сериях на самках крыс массой 200-220 г, в каждой группе было по 6 животных. В дополнительном эксперименте на беспородных мышах-самцах определяли способность ПЭК купировать воспалительный отек лапы, вызванный субпланарным введением гистамина. Обе модели воспроизводили в соответствии с методическими рекомендациями для проведения доклинических испытаний новых соединений [«Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ», Москва, 2005].

При оценке гастропротекторного эффекта животных на сутки лишали пищи при свободном доступе к воде. После этого всем крысам вводили в желудок субстанцию индометацина в дозе 20 мг/кг в виде взвеси в воде с твином. Через сутки после введения индометацина животных наркотизировали хлороформом, проводили вскрытие, извлекали желудки и подсчитывали под лупой количество язв и эрозий на слизистой оболочке.

Изучаемые образцы вводили внутрижелудочно в двух режимах. В первом случае каппа-каррагинан, хитозан и их комплексы вводили однократно за 1 час до введения индометацина. Во втором полисахариды вводили профилактически в течение трех дней до введения индометацина (последний раз за сутки до ульцерогенного агента). В качестве эталонного препарата использовали гастропротектор Фосфалюгель (алюминия фосфат гель, «Astellas Pharma», Нидерланды). Раствор ПЭК вводили перорально в дозе 5 мг/кг (или по 0,5 мг/мл/100 г массы тела). Растворы каррагинана и хитозана вводили в дозе 4,55 мг/кг, которая соответствует их дозе в составе ПЭК. Референсный препарат Фосфалюгель вводили в дозе 4,55 мг/кг. Контрольные животные получали воду в эквивалентном количестве.

В каждом эксперименте подсчитывали индекс Паулса (ИП) по формуле:

ИП=А·В/100, где А - среднее количество язв на одно животное; В - количество животных с язвами в группе (в %).

Противоязвенную активность (ПА) определяли как отношение ИП контрольной группы/ИП опытной группы. Считается, что исследуемый агент обладает противоязвенной активностью при ПА больше 2 ед. [Pauls F., Wick A.M., Mac Key E.M. et al., 1947].

Влияние агентов на состояние слизистой оболочки оценивали визуально в баллах, исходя из следующих критериев: выраженная гиперемия - 5 баллов; умеренная гиперемия - 4 балла; слабая гиперемия - 3 балла; отсутствие гиперемии (норма) - 2 балла; бледная слизистая - 1 балл.

Результаты обрабатывали с помощью программы STATISTICA 6. Значения признаны статистически верными при p<0.05.

Установлено, что при внутрижелудочном введении за час до ульцерогенного воздействия, ПЭК каппа-каррагинан:хитозан, в зависимости от состава, оказывает различный протекторный эффект. ПЭК-1 состава каппа-каррагинан:хитозан 1:10 в/в снижает количество язв в желудке в 3, а ПЭК-2 состава каппа-каррагинан:хитозан 10:1 в/в - в 2 раза по сравнению с контролем. Таким образом оптимальным для гастропротекторного эффекта является соотношение полисахаридных компонентов в ПЭК-1 каппа-каррагинан:хитозан 1:10 в/в.

Дальнейшее исследование гастрозащитной активности ПЭК-1 в сравнении с исходными полисахаридами и эталонным препаратом Фосфалюгель показало, что ПЭК-1 не уступает Фосфалюгелю и превосходит полисахариды каппа-каррагинан и хитозан (в 2 и 4,7 раз соответственно). Кроме того, ПЭК-1 полностью купирует гиперемию слизистой оболочки, в то время как эталонное средство и компоненты ПЭК-1 не оказывают положительного влияния на состояние ее микрососудистой гемодинамики.

Трехдневное профилактическое введение ПЭК-1, а также его полисахаридных компонентов и Фосфалюгеля, не оказывает противоязвенного действия, однако улучшает гемодинамику в стенке желудка, достоверно уменьшая гиперемию слизистой оболочки. Это указывает на разрушение гелевого слоя, образованного комплексом и референсным препаратом в желудке крыс, через 24 часа после их внутрижелудочного введения. Следует отметить, что, по данным литературы, гастрозащитный эффект Фосфалюгеля обеспечивается трехразовым приемом препарата в сутки, а стабильность пленки препарата Сукралфат (алюминиевой соли октасульфата сахарозы) поддерживается в желудке в течение 6 часов после приема [Клиническая фармакология по Гудману и Гилману.- М.: «Практика», 2006. С.782, Д.А. Харкевич «Фармакология».- М.: «Гэотар-Медиа», 2010. С. 379]. В соответствии с этими данными, можно заключить, что противоязвенный эффект ПЭК-1 обеспечивается в основном за счет обволакивающих свойств его геля. Улучшение состояние микроциркуляторного русла под влиянием профилактического введения ПЭК-1, как и его исходных полисахаридов, возможно, обеспечивается за счет уменьшения секреции гистамина, который является активным вазодилататором и паракринным стимулятором секреции хлористоводородной кислоты обкладочными клетками эпителия желудка.

Влияние ПЭК-1 на активность гистамина изучалось в модели воспалительного отека лапы мышей, индуцированного субпланарным введением 0,01% раствора последнего. Показано, что раствор ПЭК-1, введенный парентерально в дозе 10 мг/кг за час до гистамина, снижает выраженность отека на 51%. При этом эффект комплекса не значимо отличается от соответствующего эффекта препарата сравнения индометацина, введенного тем же путем в дозе 50 мг/кг.

Таким образом, комплекс ПЭК-1 состава каппа-каррагинан:хитозан при соотношении компонентов 1:10 в/в представляет собой средство с выраженной гастропротекторной активностью, не уступающей эталонному гастропротектору Фосфалюгелю. К преимуществам ПЭК-1 состава каппа-каррагинан:хитозан 1:10 в/в следует отнести:

• Природное (морское) происхождение исходных полисахаридов.

• Высокую биологическую активность каппа-каррагинана и хитозана.

• Выраженный противоязвенный эффект комплекса.

• Уменьшение гиперемии слизистой оболочки желудка.

• Уменьшение отека и воспаления, вызванного гистамином.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Зависимость гастропротекторной активности ПЭК каппа-каррагинан:хитозан от соотношения полисахаридных компонентов.

Для определения влияния соотношения полисахаридных компонентов в ПЭК на его гастропротекторную активность брали 2 композиции каппа-каррагинана с хитозаном с весовым отношением 1:10 (ПЭК-1) и 10:1 (ПЭК-2) в/в.

Сравнительную гастропротекторную активность комплексов определяли в эксперименте на 18-и самках крыс линии Вистар в модели индометациновой язвы желудка. Растворы ПЭК-1 и ПЭК-2 концентрацией 0,5 мг/мл готовили за сутки до введения животным путем растворения в дистиллированной воде при 37°. На ночь растворы оставляли при комнатной температуре.

За сутки до воспроизведения язвы животных лишали пищи при свободном доступе к воде. В качестве ульцерогенного агента использовали субстанцию индометацина («Fluka»), которую вводили всем животным внутрижелудочно в дозе 20 мг/кг в виде взвеси в воде с твином. За 1 час до индометацина опытным группам вводили внутрижелудочно растворы ПЭК-1 и ПЭК-2 в дозе 5 мг/кг, контрольной группе - воду. Через сутки животных наркотизировали хлороформом, проводили вскрытие, извлекали желудки и подсчитывали под лупой количество язв на слизистой оболочке.

Для оценки противоязвенного эффекта рассчитывали Индекс Паулса по формуле: ИП=А·В/100, где А - среднее количество язв на одно животное; В - количество животных с язвами в группе (в %). Противоязвенную активность определяли как отношение ИП контрольной группы к ИП опытной группы. Исследуемый агент обладает противоязвенной активностью, если индекс ПА больше 2 единиц.

Состояние слизистой оболочки оценивали визуально в баллах, исходя из следующих критериев: выраженная гиперемия - 5 баллов; умеренная гиперемия - 4 балла; слабая гиперемия - 3 балла; отсутствие гиперемии (норма) - 2 балла; бледная слизистая - 1 балл.

Статистическую обработку данных проводили с помощью программы STATISTICA 6. Результаты считали достоверными при Р<0,05.

Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1
Сравнительная гастрозащитная активность ПЭК-1 и ПЭК-2 с различным соотношением полисахаридных компонентов
Агент Доза, мг/кг Среднее количество язв на крысу Индекс Паулса Противоязвенная активность Гиперемия слизистой в баллах
Контроль - 5,8±1,1 5,8 - 3,5±0,5
ПЭК-1 5,0 1,8±1,0* 0,9 6,4 2,0±0,3*
ПЭК-2 5,0 2,8±1,0 2,3 2,5 2,7±0,7
*Р<0.05, относительно контрольной группы.

В результате эксперимента установлено, что обе полисахаридных композиции в условиях ульцерогенного воздействия оказывают защитное действие на слизистую желудка, которое выражается как в снижении количества язв, так и уменьшении раздражимости стенки желудка. Наиболее высокую активность проявляет ПЭК-1, который достоверно уменьшает язвообразование (в 3 раза относительно контроля) и нормализует состояние слизистой оболочки. У ПЭК-2 гастрозащитный эффект имел недостоверный характер.

Таким образом, было установлено, что оптимальным для гастропротекторного эффекта является соотношение полисахаридных компонентов в ПЭК каппа-каррагинан:хитозан 1:10 в/в.

Пример 2. Эффективность гастропротекторного действия ПЭК-1 в сравнении с его полисахаридными компонентами и эталонным средством Фосфалюгелем.

Исследование гастропротекторного действия ПЭК-1 в сравнении с каппа-каррагинаном, хитозаном и эталонным гастропротекторным средством Фосфалюгель (алюминия фосфат гель, «Astellas Pharma», Нидерланды) проводили на 30 самках крыс линии Вистар на модели индометациновой язвы желудка, описанной выше в примере 1.

Растворы ПЭК-1 и его исходных компонентов (хитозана и каппа-каррагинана) концентрацией 0,5 мг/мл готовили за сутки до введения животным путем растворения в дистиллированной воде при 37°. Приготовленные растворы ПЭК-1, хитозана и каппа-каррагинана вводили внутрижелудочно опытным животным, Фосфалюгель тем же путем референсной группе, контрольной группе - воду.

Дальнейшие манипуляции с животными, отбор материала и расчет показателей гастропротектрного действия проводили, как описано выше. Статистическую обработку данных проводили с помощью программы STATISTICA 6. Результаты считали достоверными при Р<0,05.

Результаты приведены в таблице 2.

Таблица 2
Показатели гастрозащитного эффекта ПЭК-1 и его компонентов в сравнении с Фосфалюгелем у крыс с индуцированной индометацином язвой желудка
Агент Доза, мг/кг Среднее количество язв на крысу Индекс Паулса Противоязвенная активность Гиперемия слизистой в баллах
Контроль - 9,2±1,6 9,2 - 3,17±0,40
ПЭК-1 5,0 1,3±1,0*** 0,44 20,9 1,50±0,22 **##
Каппа-каррагинан 4,55 2,8±1,5** 1,86 4,9 3,00±0,37
Хитозан 4,55 6,2±1,9## 6,2 1,5 3,67±0,21
Фосфалюгель 4,55 1,0±0,4*** 0,55 16,7 3,33±0,42
**Р<0,01, ***Р<0,001 относительно контрольной группы; ##Р<0,01 относительно референсной группы.

Данные, приведенные в таблице 2, показывают, что по эффекту снижения интенсивности язвообразования в желудке ПЭК-1 не уступает Фосфалюгелю и превосходит каппа-каррагинан и хитозан (в 2-4,7 раз соответственно). Кроме того, ПЭК-1 полностью купирует гиперемию слизистой оболочки, в то время как эталонное средство и компоненты ПЭК-1 не оказывают положительного влияния на ее состояние.

Таким образом, показано, что в результате комплексообразования морских полисахаридов каппа-каррагинана и хитозана гастропротекторная активность ПЭК-1 состава каппа-каррагинан:хитозан 1:10 в/в возрастает. Данная полисахаридная композиция не уступает по противоязвенному эффекту Фосфалюгелю и дополнительно существенно устраняет раздражающее действие НПВС на слизистую желудка.

Пример 3. Оценка гастропротекторного эффекта ПЭК каппа-каррагинан:хитозан при профилактическом введении.

С целью решения вопроса, повышает ли ПЭК-1 резистентность слизистой желудка к ульцерогенному воздействию НПВС, его вводили внутрижелудочно (как описано выше) крысам в течение трех дней до воспроизведения язвы желудка. Аналогично вводили полисахариды каппа-каррагинан и хитозан, а также референсный агент Фосфалюгель. Контрольная группа получала воду. После трехдневного введения агентов всех животных лишали пищи при свободном доступе к воде. Через сутки после отъема корма животным вводили в желудок субстанцию индометацина в дозе 20 мг/кг в виде взвеси в воде с твином. Через сутки после введения индометацина животных наркотизировали хлороформом, проводили вскрытие, извлекали желудки и подсчитывали под лупой количество язв на слизистой оболочке. Расчеты показателей гастропротекторной активности проводились, как указано выше.

Результаты приведены в таблице 3.

Таблица 3
Показатели гастрозащитного эффекта ПЭК-1 и его компонентов при профилактическом введении в сравнении с Фосфалюгелем у крыс с индуцированной индометацином язвой желудка
Агент Доза, мг/кг Среднее количество язв на крысу Индекс Паулса Противоязвенная активность Гиперемия слизистой в баллах
Контроль - 7,0±1,2 0,42 - 4,00±0,00##
ПЭК-1 5,0 6,7±1,8 0,44 0,75 2,33±0,33***
Каппа-каррагинан 4,55 7,3±1,4 0,44 0,95 2,83±0,40*
Хитозан 4,55 7,5±1,8 0,45 0,93 2,67±0,49*
Фосфалюгель 4,55 7,2±2,0 0,43 0,97 2,83±0,31**
*Р<0.05, **Р<0.01, ***Р<0.001 относительно контрольной группы; #Р<0.05, ##Р<0.01, ###Р<0.001 относительно референсной группы.

Установлено, что профилактическое введение ПЭК-1 и его компонентов не оказывает противоязвенного действия, однако улучшает гемодинамику в стенке желудка, достоверно уменьшая гиперемию слизистой оболочки. Аналогичный эффект проявляет Фосфалюгель.

Таким образом, при профилактическом введении ПЭК-1 состава каппа-каррагинан:хитозан 1:10 в/в и его полисахаридных компонентов снижают раздражимость слизистой оболочки желудка и улучшают состояние микроциркуляторного русла в подслизистом слое. Однако противоязвенный эффект ПЭК-1 и Фосфалюгеля исчезает через 24 часа после внутрижелудочного введения, что, по-видимому, обусловлено разрушением образованного ими гелевого слоя.

Пример 4. Противовоспалительный эффект ПЭК каппа-каррагинан:хитозан на модели воспалительного отека лапы, индуцированного гистамином.

Противовоспалительную активность ПЭК-1 оценивали по снижению воспалительного отека лапы мышей, вызванного субпланарным введением 0,01% раствора гистамина. ПЭК-1, а также его полисахариды каппа-каррагинан и хитозан, в виде водных растворов концентрацией 0,5 мг/мл вводили внутрибрюшинно за 1 час до флогогена. Контрольным животным вводили тем же способом водно-твиновую взвесь. Референсным препаратом являлась субстанция индометацина («Fluka»), которую вводили внутрибрюшинно в эффективной дозе 50 мг/кг. Величину отека определяли через 6 часов после введения агентов по разности масс воспаленной и здоровой лап. Для каждого животного рассчитывали индекс воспаления как отношение этой разности к массе здоровой лапы. Различия считали достоверными с вероятностью Р<0,05. Для опытной и референсной группы рассчитывали величину отека относительно контроля, который принимали за 100%. За противовоспалительный эффект принимали разность относительной величины отека в контрольной группе и соответствующим значением в опытных группах.

Результаты приведены в таблице 4.

Таблица 4
Противовоспалительный эффект комплексов и их компонентов
в модели гистаминового отека лапы
Группа Доза, мг/кг в/бр. Средний индекс отека Размер отека, % Противовоспалительный эффект, %
Контроль - 35,84±3,56### 100 0
ПЭК-1 10 17,45±3,04** 49 51
Каппа-каррагинан 9,0 20,77±2,56**# 63 37
Хитозан 9,0 16,70±3,66** 47 53
Индометацин 50 12,61±1,11*** 35 65
**Р<0,01, ***Р<0,001 относительно контрольной группы;
#Р<0,05, ###Р<0,001 относительно группы с введением индометацина.

Установлено, что парентеральное введение ПЭК-1 и отдельно взятых полисахаридов мышам достоверно снижает выраженность воспалительной реакции, индуцированной гистамином. При этом сам комплекс, а также хитозан не уступают по активности эталонному препарату (достоверные различия отсутствуют). У каппа-каррагинана противовоспалительная активность меньше, чем у ПЭК-1 и индометацина соответственно в 1,4 и 1,8 раз.

1. Применение водорастворимого полиэлектролитного комплекса каппа-каррагинан:хитозан при соотношении компонентов 1:10 в/в в качестве средства, обладающего гастропротекторной активностью.

2. Применение по п.1 водорастворимого полиэлектролитного комплекса каппа-каррагинан:хитозан с молекулярной массой каппа-каррагинана 311 кДа и с молекулярной массой хитозана 115 кДа и степенью N-ацетилирования 6%.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композции против Helicobacter pylori. Фармацевтическая композиция, которая содержит S-аллил-L-цистеин или его фармацевтически приемлемую соль, или их сольват, или гидрат, для производства лекарственного средства против Helicobacter pylori при профилактике или лечении желудочно-кишечных нарушений, при которых Helicobacter pylori является фактором, вносящим основной вклад в их развитие.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения средства, обладающего противоязвенным действием. Способ получения средства, обладающего противоязвенным действием, путем экстракции коры осины 40% спиртом этиловым с использованием многоступенчатого противоточного экстрагирования с последующей очисткой, сгущением под вакуумом и сушкой в вакуумном шкафу, добавления к полученному сухому экстракту лудипресса, при определенных условиях, с последующим наполнением твердых желатиновых капсул.

Группа изобретений относится к новым оксииндольным производным формулы (I) или их фармацевтически приемлемым солям, фармацевтическим композициям на их основе и их применению для лечения различных расстройств, которые опосредованы через мотилиновый рецептор (GPR38).
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, и касается эндоскопического лечения гастродуоденальных язв. Способ включает проведение лечебной эндоскопии в первой фазе язвенного процесса.

Изобретение относится к таблетированной многоединичной лекарственной форме, содержащей активное вещество, выбранное из омепразола, одного из его индивидуальных энантиомеров, щелочной соли омепразола и одного из ее индивидуальных энантиомеров.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения противоязвенного гастроретентивного средства. Способ получения противоязвенного гастроретентивного средства путем экстракции коры осины при определенных условиях, добавления к экстракту коры осины сухому гуаровой камеди (гуар) и карбоксиметилцеллюлозы натриевой соли (Na-КМЦ) в определенном соотношении, полученную смесь перемешивают до получения однородной массы, подвергают сухой грануляции путем прессования брикетов, которые размалывают и полученный гранулят таблетируют.

Изобретение относится к медицине, а именно к средствам профилактики и лечения язвенных поражений желудка, вызываемых лекарственными средствами, содержащими нестероидные противовоспалительные препараты класса салицилатов и класса производных уксусной кислоты.
Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой пероральную фармацевтическую композицию для лечения кишечных нарушений, содержащую масляную кислоту или ее соли, в сочетании с растворимым или диспергируемым в воде пищевым волокном, выбранным из инулина, мальтодекстрина или их смеси, по меньшей мере одним ароматизирующим агентом, выбранным из ванилина, ванильной эссенции или их смеси и одним или более фармакологически приемлемыми наполнителями, отличающуюся тем, что она включает: a) матрицу, содержащую липофильные соединения с точкой плавления ниже 90оC, и амфифильную матрицу, в которой активный компонент по меньшей мере частично является шаровидным; b) амфифильную матрицу; c) внешнюю гидрофильную матрицу, в которой диспергированы липофильная матрица и амфифильная матрица; e) покрытие; и часть указанного по меньшей мере одного ароматизирующего агента диспергирована в одной или более указанных матриц и часть ароматизирующего агента диспергирована в покрытии.

Изобретение относится к медицине, а именно к средствам профилактики и лечения язвенных поражений желудка, вызываемых воздействием стресса на организм и описывает использование в качестве профилактического и терапевтического средства производных фенилтиоацетамидов.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для профилактики и лечения язвенных поражений желудка, вызываемых пероральным употреблением жидкостей, содержащих этиловый спирт.
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к средствам и способам лечения паразитозов животных. Инсектицидная мазь для лечения миазов жвачных животных содержит, масс.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для терапии эндометритов кошек и собак. Способ включает введение средства, содержащего гентамицин, гамавит, бензоат натрия, сорбат калия и пропиленгликоль.
Изобретение относится к области ветеринарной медицины, а именно к клинической фармакологии и терапии животных. Способ заключается во введении комплексного железодекстранового препарата Ферранимал-75М, внутримышечно, на 5-й день жизни теленка, в дозе 3 мл, одновременно с внутримышечной инъекцией препарата Гидропептон в дозе 10 мл.

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для коррекции иммунной недостаточности и профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят.

Группа изобретений относится к медицине, противораковой терапии, и касается способа лечения лимфомы, выбранной из диффузной B-крупноклеточной лимфомы, лимфомы краевой зоны и нодулярного склероза Ходжкина с помощью органического производного мышьяка, такого как даринапарсин (S-диметиларсиноглутатион, SGLU-1): или его фармацевтически приемлемой соли.

Изобретение относится к средствам очистки и обеззараживания различных типов вод. Описано дезинфицирующее средство, содержащее первый компонент полигексаметиленгуанидингидрохлорид, второй компонент алкилдиметилбензиламмонийхлорид и воду, при этом содержание компонентов в растворе выбрано в следующих количествах, мас.

Изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения диабета 2 типа, которая включает(R)-7-[3-амино-4-(2,4,5-трифторфенил)-бутирил]-3-трифторметил-,6,7,8-тетрагидро-имидазо[1,5-а]пиразин-1-карбоновой кислоты метиловый эфир или его фармацевтически приемлемую соль, метформин или его соль и вспомогательные вещества.

Изобретение относится к молекулярной биологии, в частности к коротким интерферирующим РНК (siRNA), и может быть использовано в противоопухолевой терапии. На основе геномного анализа сконструированы последовательности siRNA против гена HIF1A человека с SEQ ID NO:1-2, siRNA против гена HSP8A человека с SEQ ID NO:3-4, siRNA против гена APEX1 человека с SEQ ID NO:5-6 и siRNA против гена CCND3 человека с SEQ ID NO:7-8, ассоциированных с пролиферацией клеток аденокарциномы поджелудочной железы человека.

Изобретение относится к новым соединениям структурной формулы (I) , которые могут быть использованы для лечения или профилактики заболеваний или нарушений, ассоциированных с воспалением.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и описывает способ компенсации нарушений поступления желчи в кишечник у пациентов с наружным дренированием желчных путей.

Изобретение относится к медицине и представляет собой гелеобразную биологически активную композицию для нанесения на кожу, содержащую гидрохлорид хитозана в количестве 10-20 % масс., органическую кислоту в количестве 1-10 % масс., дистиллированную воду - остальное.
Наверх