Гетероарильные соединения и их применение

Изобретение относится к соединению структурной формулы I-b, обладающему ингибирующей активностью в отношении ВТК, TEC, BMX, ITK, ErbB1, ErbB4 и/или JAK3 киназ. В формуле (I-b) кольцо A и кольцо B представляют собой фенил; R^y представляет собой -CN, -CF₃, C_1-4 алифатическую группу, C_1-4галогеналифатическую группу, -OR, -C(O)R или -C(O)N(R)₂; каждая группа R независимо представляет собой водород или группу, выбранную из C_1-6алифатической группы, возможно содержащей в качестве заместителя галоген, -(CH₂)_0-4R°, -(CH₂)_0-4OR°, -(CH₂)_0-4N(R°)₂, -(CH₂)_0-4N(R°)C(O)OR°, -(CH₂)_0-4C(O)R°, -(CH₂)_0-4S(O)₂R°, или 5-6-членного насыщенного или арильного кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота или кислорода, возможно замещенного группой =O, -(CH₂)_0-4R°, -(CH₂)_0-4N(R°)₂ или -(CH₂)_0-4OR°; фенила; 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, возможно замещенного группой -(CH₂)_0-4R°, -(CH₂)_0-4OR° или =O; или 6-членного моноциклического гетероарильного кольца, содержащего 1 атом азота; W¹ и W² представляют собой -NR²-; R² представляет собой водород, C_1-6алифатическую группу или -C(O)R; m и p независимо равны 0, 1, 2, 3 или 4; R^x независимо выбран из -R, -OR, -O(CH₂)_qOR или галогена, где q=2; R^v независимо выбран из -R или галогена; значения радикалов R¹ и R° приведены в формуле изобретения. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей указанные соединения. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 25 ил., 20 табл., 286 пр.

 

Область техники

[0001] Настоящее изобретение относится к соединениям, которые можно применять в качестве ингибиторов протеинкиназ. Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтически приемлемые композиции, содержащие соединения согласно настоящему изобретению и способы применения указанных композиций в лечении различных заболеваний.

Уровень техники

[0002] Поиску новых терапевтических агентов в последние годы в значительной степени способствовало лучшее понимание структуры ферментов и других биомолекул, связанных с заболеваниями. Одним из важных классов ферментов, который интенсивно исследовался, являются протеинкиназы.

[0003] Протеинкиназы составляют обширное семейство структурно близких ферментов, ответственных за регуляцию разнообразных процессов передачи сигнала в клетке. Считается, что протеинкиназы произошли от общего гена-прародителя, поскольку они обладают общностью структуры и каталитической функции. Почти все киназы содержат каталитический домен размером 250-300 аминокислот. Киназы можно разделить на семейства в зависимости от фосфорилируемых ими субстратов (например, протеин-тирозин, протеин-серин/треонин, липидкиназы, и т.д.).

[0004] В целом, протеинкиназы опосредуют внутриклеточную передачи сигнала путем осуществления переноса фосфатной группы с нуклеозид-трифосфата на белок-акцептор, участвующий в передаче сигнала. Указанные события фосфорилирования действуют как молекулярные переключатели типа вкл./выкл., которые могут модулировать или регулировать биологическую функцию белка-мишени. В конечном счете, данные события фосфорилирования запускаются в ответ на внеклеточные и другие стимулы. Примеры таких стимулов включают сигналы из внешней среды и стрессовые сигналы (например, осмотический шок, тепловой ток, ультрафиолетовое излучение, бактериальный цитотоксин и Н₂О₂, цитокины (например, интерлейкин-1 (IL-1) и фактор некроза опухолей α (TNF-α)) и факторы роста (например, гранулоцитарно-колониестимулирующий фактор гранулоцитов-макрофагов GM-CSF) и фактор роста фибробластов (FGF)). Внеклеточные стимулы могут влиять на один или более клеточных ответов, связанных с ростом, миграцией, дифференцировкой клеток, секрецией гормонов, активацией факторов транскрипции, сокращением мышц, метаболизмом глюкозы, контролем синтеза белка и регуляцией клеточного цикла.

[0005] Многие заболевания связаны с анормальными клеточными ответами, запускаемыми событиями, опосредуемыми протеинкиназами, как описано выше. Указанные заболевания включают, но не ограничиваются перечисленными: аутоиммунные заболевания, воспалительные заболевания, заболевания костей, заболевания, связанные с метаболизмом, неврологические и нейродегенеративные заболевания, рак, сердечнососудистые заболевания, аллергии и астму, болезнь Альцгеймера и заболевания, связанные с гормонами. Соответственно, сохраняется потребность в поиске ингибиторов протеинкиназ, которые можно применять в качестве терапевтических агентов.

Краткое описание изобретения

[0006] Было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению и фармацевтически приемлемые композиции, содержащие указанные соединения, могут действовать как ингибиторы одной или более протеинкиназ. Такие соединения имеют общую формулу I-a или I-b:

или представляют собой фармацевтически приемлемую соль соединения с такой формулой, при этом Кольцо А, Кольцо В, m, р, R^x, R^y, R^v, W¹, W² и R¹ определены в настоящем тексте.

[0007] Соединения согласно настоящему изобретению и фармацевтически приемлемые композиции, содержащие указанные соединения, могут применяться для лечения различных заболеваний, нарушений или состояний, связанных с анормальными клеточными ответами, запускаемыми событиями, опосредуемыми протеинкиназами. Такие заболевания, нарушения или состояния включают заболевания, нарушения или состояния, описанные в настоящем тексте.

[0008] Соединения согласно настоящему изобретению также можно применять для исследования киназ в биологических и патологических явлениях, в исследовании путей внутриклеточной передачи сигнала, опосредуемых такими киназами, и в сравнительной оценке новых ингибиторов киназ.

Краткое описание графических материалов

На Фигуре 1 показана зависимость доза - ответ для ингибирования фосфо-фосфолипазы гамма 2 (р-plc γ 2) соединением I-2 в клетках Ramos; и результаты соединения I-2 в «отсеивающем» эксперименте.

На Фигуре 2 показана зависимость доза - ответ для ингибирования р-plc γ 2 соединением I-4 в клетках Ramos; и результаты соединения I-4в «отсеивающем» эксперименте.

На Фигуре 3 показана зависимость доза - ответ для ингибирования p-plc γ 2 соединением I-7 в клетках Ramos; и результаты соединения I-7в «отсеивающем» эксперименте.

На Фигуре 4 показана зависимость доза - ответ для ингибирования p-plc γ 2 соединением I-35 в клетках Ramos.

На Фигуре 5 показана зависимость доза - ответ для ингибирования p-plc γ 2 соединением I-38 в клетках Ramos.

На Фигуре 6 показаны результаты МС анализа, подтверждающие ковалентную модификацию киназы ТЕС в положении Cys449 под действием соединения I-2.

На Фигуре 7 показаны результаты МС анализа, подтверждающие ковалентную модификацию киназы ТЕС в положении Cys449 под действием соединения I-4.

На Фигуре 8 показаны результаты МС анализа, подтверждающие ковалентную модификацию киназы ТЕС в положении Cys449 под действием соединения I-7.

На Фигуре 9 показаны результаты соединения I-2в «отсеивающем» эксперименте в сравнении с результатами соединения I-4 и соединения I-7 в том же «отсеивающем» эксперименте в клетках НСС827, содержащих мутантный EGFR с делецией.

На Фигуре 10 показаны результаты соединения I-7в «отсеивающем» эксперименте в сравнении с результатами для контроля с EGF в клетках А431, содержащих EGFR дикого типа.

На Фигуре 11 показаны результаты МС анализа, подтверждающие ковалентную модификацию киназы JAK-3 в положении Cys909 под действием соединения I-7.

На Фигуре 12 показана зависимость доза - ответ для ингибирования P-Stat5 соединением I-2 в клетках CTLL-2, стимулированных IL-2; и зависимость доза - ответ для ингибирования P-JAK-3 соединением I-2 в клетках CTLL-2, стимулированных IL-2.

На Фигуре 13 показана зависимость доза - ответ для ингибирования P-Stat5 соединением I-4 в клетках CTLL-2, стимулированных IL-2; и зависимость доза - ответ для ингибирования P-JAK-3 соединением I-4 в клетках CTLL-2, стимулированных IL-2.

На Фигуре 14 показана зависимость доза - ответ для ингибирования P-Stat5 соединением I-7 в клетках CTLL-2, стимулированных IL-2.

На Фигуре 15 показаны результаты МС анализа, подтверждающие ковалентную модификацию ВТК под действием соединения I-7.

На Фигуре 16 показан Вестерн-блот, демонстрирующий белок ВТК, доступный для соединения-зонда I-215 после обработки различными количествами I-7.

На Фигуре 17 показан количественный анализ результатов Вестерн-блотинга, показанного на Фигуре 16.

На Фигуре 18 показан Вестерн-блот эксперимента с промывкой с соединением I-7 и соединением-зондом I-215.

На Фигуре 19 показан количественный анализ результатов Вестерн-блотинга, показанного на Фигуре 18.

На Фигуре 20 показана аминокислотная последовательность для ВТК (SEQ ID 1).

На Фигуре 21 показана аминокислотная последовательность для TEC (SEQ ID 2).

На Фигуре 22 показана аминокислотная последовательность для ITK (SEQ ID 3).

На Фигуре 23 показана аминокислотная последовательность для ВМХ (SEQ ID 4).

На Фигуре 24 показана аминокислотная последовательность для ТХК (SEQ ID 5).

На Фигуре 25 показана аминокислотная последовательность для JAK3 (SEQ ID 6).

Подробное описание некоторых вариантов осуществления

1. Общее описание соединений согласно настоящему изобретению

[0009] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы I-a или I-b:

или фармацевтически приемлемую соль такого соединения, где:

Кольцо А представляет собой возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: фенил, 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 8-10-членное бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 8-10-членное бициклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы;

Кольцо В представляет собой возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: фенил, 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 8-10-членное бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 8-10-членное бициклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы;

R¹ представляет собой реакционноспособную группу;

R^y представляет собой водород, галоген, -CN, -CF₃, С_1-4 алифатическую группу, С_1-4 гало-алифатическую группу, -OR, -C(O)R, или -C(O)N(R)₂;

каждая группа R независимо представляет собой водород или возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: С_1-6 алифатическую группу, фенил, 4-7-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы и 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы;

W¹ и W² каждый независимо представляет собой ковалентную связь или бивалентную С_1-3 алкиленовую цепь, причем одно метиленовое звено в W¹ или W² возможно заменено на -NR²-, -N(R²)C(O)-, -C(O)N(R²)-, -N(R²)SO₂-, -SO₂N(R²)-, -О-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- или -SO₂-;

R² представляет собой водород, возможно содержащую заместители С_1-6 алифатическую группу, или -C(O)R, или:

R² и заместитель на Кольце А, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-6-членное насыщенное, частично ненасыщенное или ароматическое конденсированное кольцо, или:

R² и R^y, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-7-членное частично ненасыщенное или ароматическое конденсированное кольцо;

m и р независимо равны 0-4; и

R^x и R^v независимо выбраны из: -R, галогена, -OR, -O(CH₂)_qOR, -CN, -NO₂, -SO₂R, -SO₂N(R)₂, -SOR, -C(O)R, -CO₂R, -C(O)N(R)₂, -NRC(O)R, -NRC(O)NR₂, -NRSO₂R, или -N(R)₂, причем q равно 1-4; или:

R^x и R¹, если они одновременно присутствуют на Кольце В, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 5-7-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы, причем указанное кольцо содержим в качестве заместителя реакционноспособную группу и 0-3 группы, независимо выбранные из оксо, галогена, -CN, или С_1-6 алифатической группы; или

R^v и R¹, если они одновременно присутствуют на Кольце А, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 5-7-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, причем указанное кольцо содержит в качестве заместителя реакционноспособную группу и 0-3 группы, независимо выбранные из оксо, галогена, -CN, или С_1-6 алифатической группы.

2. Соединения и определения

[0010] Соединения, составляющие суть этого изобретения, включают кратко описанные выше, и подробно описанные ниже с делением на классы, подклассы и виды. Данные ниже определения будут применяться во всех случаях, когда не указано иное. Для целей настоящего изобретения химические элементы идентифицировались в соответствии с Периодической таблицей элементов, CAS-номенклатурой, «Справочником по химии и физике» (75-я ред.). Кроме того, общие принципы органической химии описаны в следующих изданиях: «Organic Chemistry», Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999; «March's Advanced Organic Chemistry», 5^th Ed., Ed.: Smith, M.B. & March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001, вследствие чего оба издания полностью включены в список источников.

[0011] Термин «алифатический» или «алифатическая группа», используемый здесь, подразумевает углеводороды с линейной (т.е. неразветвленной) или разветвленной структурой, замещенные или незамещенные углеводородные цепи, полностью насыщенные или содержащие одну/или более одной ненасыщенной связи; моноциклические или бициклические углеводороды, полностью насыщенные или содержащие одну/более одной ненасыщенной связи, но не являющиеся ароматическими (также называемыми здесь «карбоциклами» «циклоалифатическими углеводородами» или «циклоалкилами») с одной точкой крепления к остальной части молекулы. Если не указано иное, алифатические группы содержат 1-6 алифатических атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-5 алифатических атомов углерода. В других вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-4 алифатических атомов углерода; есть варианты осуществления с 1-3 алифатических атомов углерода; и также с 1-2 алифатическими атомами углерода. В некоторых вариантах осуществления термин «циклоалифатический» («карбоцикл»/«циклоалкил») подразумевает моноциклический С₃-С₆ углеводород, полностью насыщенный или содержащий по крайней мере один ненасыщенный участок, но не ароматический, имеющий одну точку крепления к остальной части молекулы. Подходящие алифатические группы представлены (но не ограничиваются) следующими вариантами: линейные или разветвленные, замещенные или незамещенные алкилы, алкенилы, алкинилы и смешанные варианты: (циклоалкил)алкилы, (циклоалкенил)алкилы или (циклоалкил)алкенилы.

[0012] Термин «низший алкил» относится к прямой или разветвленной С_1-4-алкильной группе. Примерами низших алкильных групп являются метил, этил, пропил, изо пропил, бутил, изобутил и трет-бутил.

[0013] Термин «низший галоидалкил» относится к прямой или разветвленной С_1-4-алкильной группе, замещенной одним или несколькими атомами галогена

[0014] Термин «гетероатом» означает одну/более одной единицы кислорода, серы, азота, фосфора, кремния (в том числе любые окисленные формы азота, серы, фосфора, кремния; или кватернизованная форма любого азотистого основания; или замещенная азотная группа гетероциклического кольца, например N (как в 3,4-дигидро-2Н-пирролиле), NH (как в пирролидиниле) или NR+ (как в N-замещенных пирролидинила)).

[0015] Термин «ненасыщенный», используемый здесь, означает, что соединение содержит по крайней мере одну ненасыщенную связь.

[0016] В настоящем описании термин «двухвалентная С1-8 (или С1-6) насыщенная или ненасыщенная, линейная или разветвленная углеводородная цепь» подразумевает двухвалентные алкиленовые, алкениленовые, алкиниленовые цепи, прямые или разветвленные согласно данному здесь определению.

[0017] Термин «алкилен» относится к двухвалентной алкильной группе. «Алкиленовая цепь» является полиметиленовой группой, т.е., -(СН₂)n-, где N - натуральное число, предпочтительно от 1 до 6, от 1 до 4, от 1 до 3, от 1 до 2, или от 2 до 3. Замещенная алкиленовая цепь - полиметиленовая группа, в которой один или несколько атомов водорода метиленовой группы замещены. Подходящие заместители включают описанные ниже для замещенных алифатических групп.

[0018] Термин «алкенилен» относится к двухвалентной алкениловой группе. Замещенная алкениленовая цепь - это полиметиленовая группа, содержащая по крайней мере одну двойную связь, в которой один или несколько атомов водорода замещены. Подходящие заместители включают описанные ниже для замещенных алифатических групп.

[0019] В настоящем описании термин «циклопропиленил» подразумевает двухвалентный циклопропил следующей структуры:

[0020] Термин «галоген» означает F, Cl, Br, или I.

[0021] Термин «арил», используемый самостоятельно или при описании фрагментов молекул, как «аралкил», «аралкокси-», или «арилоксиалкил», относится к моноциклическим и бициклическим кольцевым структурам, имеющим обычно 5-14-членные кольца, и в которых по крайней мере одно кольцо является ароматических, и каждое кольцо в системе включает 3-7 членов. Термин «арил» может использоваться наравне с термином «арильное кольцо». В некоторых вариантах изобретения понятие «арил» относится к ароматическим циклам, включающим следующие группы (но не ограниченным ими): фенил, дифенил, нафтил, антрацил и т.п., и которые могут быть однократно или многократно замещены. Также в понятие «арил», как оно понимается в настоящем документе, входит группа, в которой ароматическое кольцо сопряжено по крайней мере с одним неароматическим: инданил, флалимидил, нафтимидил, фенантридинил или тетрагидронафтидил, и т.п.

[0022] Термины «гетероарил» и «гетероар-» используемые самостоятельно или при описании фрагментов молекул, - например, «гетероаралкил», или «гетероаралкокси», - относятся к группам с 5-10 атомами в кольце (преимущественно 5, 6, 9), имеющих π-электронную систему из 6, 10 или 14 обобществленных электронов, и от одного до пяти гетероатомов, помимо атомов углерода. Термин «гетероатом» подразумевает азот, кислород и серу, а также любые окисленные формы азота или серы, и любые кватернизованные формы азотистых оснований. Гетероарильные группы включают, помимо прочего, тиенил, фуранил, пирролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тиазолил, изотиазолил, тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, индолихинил, пуринил, нафтиридинил и птеридинил. В используемые здесь понятия «гетероарил» и «гетероар-» также входят группы, в которых гетероароматическое кольцо соединено с одним или более арильным, циклоалифатическим, или гетероциклическим кольцом, где радикал или точка крепления расположены на гетероароматическом кольце. Многочисленные примеры включают индолил, изоиндолил, бензотиенил, бензофуранил, дибензофуранил, индазолил, бензимидазолил, бензотиазолил, хинолил, изохинолил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, 4Н-хинолизинил, карбазолил, акридинил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил и пиридо-[2,3-b]-1,4-оксазин-3(4Н)-он. Гетероарильная группа может быть моно- или бициклической. Термин «гетероарил» может использоваться наравне с терминами «гетероарильное кольцо», «гетероарильная группа», или «гетероароматический»; во всех этих случаях подразумеваются циклические соединения, которые могут быть замещенными или незамещенными. Термин «гетероаралкил» относится к алкильной группе, замещенной гетероарилом, при этом алкильные и гетероарильные фрагменты независимо и необязательно замещены.

[0023] В настоящем описании термин «гетероцикл», «гетероциклил», «гетероциклический радикал», и «гетероциклическое кольцо» взаимозаменяемы и относятся к стабильным 5-7-членным моноциклическим или 7-10-членным бициклическим гетероциклическим фрагментам, насыщенным или частично ненасыщенным, и включающим, помимо атомов углерода, по крайней мере один и преимущественно 1-4 гетероатома, в том смысле, как это определено выше. При упоминании атома, входящего в состав кольца гетероцикла, термин «азот» подразумевает в том числе замещенный азот. Например, в насыщенном или частично ненасыщенным кольце, включающем 0-3 гетероатома кислорода, серы или азота, азот может быть в форме N (как в 3,4-дигидро-2Н-пирролиле), или -NH (как в пирролидиниле), или +NR (как в N-замещенных пирролидинилах).

[0024] Гетероциклическое кольцо может присоединяться к боковой группе через любой гетероатом или атом углерода, что приводит к формированию стабильной структуры; любой атом кольца может быть замещен. Примерами таких насыщенных или частично ненасыщенных гетероциклических радикалов могут быть, в том числе, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил пирролидинил, пиперидинил, пирролинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, деканидрохинолинил, оксазолидинил, пиперазинил, диоксанил, диоксоланил, диазепинил, оксазепинил, тиазепинил, морфолинил и хинуклидинил. Термины «гетероцикл», «гетероциклил», «гетероциклильное кольцо», «гетероциклические группы», «гетероциклический фрагмент» и «гетероциклический радикал» являются взаимозаменяемыми в настоящем документе, и включают также группы, в которых гетероциклильное кольцо соединено по крайней мере с одним арильным, гетероарильным или циклоалифатическим кольцом, например, индолинильным, 3Н-индолильным, хроманильным, фенантридинильным или тетрагидрохинолинильным, при этом радикал или точка крепления расположены на гетероциклильном кольце. Гетероциклильные группы могут быть моно- или бициклическими. Термин «гетероциклалкил» относится к гетероциклил-замещенной алкильной группе, в которой алкильная и гетероциклильная составляющие независимо друг от друга и необязательно замещены.

[0025] В настоящем описании термин «частично ненасыщенный» относится к циклическим соединениям, которые содержат по крайней мере одну двойную или тройную связь. Термин «частично ненасыщенный» охватывает циклы, имеющие несколько ненасыщенных участков, но не включает арильные или гетероарильные соединения в том смысле, в котором они определены здесь.

[0026] Согласно настоящему документу, соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут содержать «опционально замещенные» фрагменты. В целом, термин «замещенный», предварен он термином «опционально» или нет, означает, что по крайней мере один атом водорода означенного фрагмента синтезируемого соединения замещен подходящей группой. Если не указано иное, «опционально замещенный» фрагмент может быть многократно замещен подходящими группами в каждой из возможных для замещения позиций; при этом, если замещение происходит более чем в одной позиции, и существует несколько подходящих замещающих групп, то эти замещающие группы могут быть как одинаковыми, так и разными. Настоящим изобретением предусмотрены комбинации заместителей, предпочтительно приводящие к формированию стабильных или химически реализуемых соединений. Термин «стабильный», используемый здесь, относится к соединениям, которые не претерпевают существенных изменений в условиях, необходимых для их производства, определения и, - в некоторых вариантах- осуществления, восстановления, очистки и использования для одной или более описанных здесь целей.

[0027] Подходящие моновалентные заместители атома углерода «возможно замещенной» (возможно содержащей заместители) группы представлены независимо выбранными: галогенами, -(CH₂)_0-4R^o; -(CH₂)_0-4OR^o; -O(CH₂)_0-4R^o, -O-(CH₂)_0-4C(O)OR^o; -(CH₂)_0-4CH(OR^o)₂; -(CH₂)_0-4SR^o; -(CH₂)_0-4Ph, который может быть замещен на R^o; -(CH₂)_0-4O(CH₂)o-)Ph, который может быть замещен на R^o; -CH=CHPh, который может быть замещен на R^o; -(СН₂)_0-4О(СН₂)_0-1-пиридил, который может быть замещен на R^o; -NO₂; -CN; -N₃; -(CH₂)_0-4N(R^o)₂; -(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)R^o; -N(R^o)C(S)R^o; -(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)NR^o ₂; -N(R^o)C(S)NR^o ₂; -(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)OR^o; -N(R^o)N(R^o)C(O)R^o; -N(R^o)N(R^o)C(O)NR^o ₂; -N(R^o)N(R^o)C(O)OR^o; -(CH₂)_0-4C(O)R^o; -C(S)R^o; -(CH₂)_0-4C(O)OR^o; -(CH₂)_0-4C(O)SR^o; -(CH₂)_0-4C(O)OSiR^o ₃; -(CH₂)_0-4OC(O)R^o; -OC(O)(CH₂)_0-4SR^o, SC(S)SR^o; -(CH₂)_0-4SC(O)R^o; -(CH₂)_0-4C(O)NR^o ₂; -C(S)NR^o ₂; -C(S)SR^o; -SC(S)SR^o, -(CH₂)_0-4OC(O)NR^o ₂; -C(O)N(OR^o)R^o; -C(O)C(O)R^o; -C(O)CH₂C(O)R^o; -C(NOR^o)R^o; -(CH₂)_0-4SSR^o; -(CH₂)_0-4S(O)₂R^o; -(CH₂)_0-4S(O)₂OR^o; -(CH₂)_0-4OS(O)₂R^o; -S(O)₂NR^o ₂; -(CH₂)_0-4S(O)R^o; -N(R^o)S(O)₂NR^o ₂; -N(R^o)S(O)₂R^o; -N(OR^o)R^o; -C(NH)NR^o ₂; -P(O)₂R^o; -P(O)R^o ₂; -OP(O)R^o ₂; -OP(O)(OR ^o)₂; SiR^o ₃; -(C_1-4 линейный или разветвленный алкилен)O-N(R^o)₂; или -(С_1-4 линейный или разветвленный алкилен)C(O)O-N(R^o)₂, где каждый R^o может быть замещен, как описано ниже, и представлен независимо выбранными: водородом, C_1-6 алифатическим углеводородом, -CH₂Ph, -O(CH₂)_0-1Ph, -СН₂-(5-6-членным гетероарильным кольцом), или 5-6-членным насыщенным/частично ненасыщенным/арильным кольцом с 0-4 гетероатомами, независимо скомбинированными из следующих возможных: азот, кислород, сера; или, несмотря на определение выше, два независимых появления R^o вместе с промежуточным(и) атомом(ами) образуют 3-12-членное насыщенное/частично ненасыщенное арильное моно- или бициклическое кольцо с 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из следующих возможных: азот, кислород, сера, которые могут быть замещены, как описано ниже.

[0028] Подходящие моновалентные заместители R^o (либо кольца, образованного двумя независимыми R° вместе с промежуточными атомами), представлены независимо выбранными группами из следующих возможных: галогены, -(CH₂)_0-2R^●, -(галоR^●), -(CH₂)_0-2OH, -(CH₂)_0-2OR^●, -(CH₂)_0-2CH(OR^●)₂; -O(галоR^●), -CN, -N₃, -(CH₂)_0-2C(O)R^●, -(CH₂)_0-2C(O)OH, -(CH₂)_0-2C(O)OR^●, -(CH₂)_0-2SR^●, -(CH₂)_0-2SH, -(CH₂)_0-2NH₂, -(CH₂)_0-2NHR^●, -(CH₂)_0-2NR^● ₂, -NO₂, -SiR^● ₃, -OSiR^● ₃, -C(O)SR^●, -(C_1-4 линейный или разветвленный алкилен)С(O)OR^●, или -SSR^●, где каждый R^● незамещен либо, в случае уточнения «гало-», замещен одним или несколькими атомами галогена и независимо выбран из: С_1-4 алифатической группы, -CH₂Ph, -O(CH₂)_0-1Ph, или 5-6-членного насыщенного/частичного ненасыщенного/арильного кольца с 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из следующих: азот, кислород, сера. Подходящие бивалентные заместители насыщенного углерода: =O и =S.

[0029] Подходящие бивалентные заместители насыщенного атома углерода «возможно замещенной» группы включают: =O, =S, =NNR^* ₂, =NNHC(O)R^*, =NNHC(O)OR^*, =NNHS(O)₂R^*, =NR^*, =NOR^*, -O(C(R^* ₂))_2-3O- или -S(C(R^* ₂))_2-3S- где R^* независимо в каждом случае представлен: водородом, С_1-6 алифатическим углеводородом, замещенным, как описано выше, или незамещенным 5-6-членным насыщенным/частично ненасыщенным/арильным кольцом с 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из азота, кислорода и серы. Подходящие бивалентные заместители, способные связываться с соседними замещаемыми атомами углерода «возможно замещенной» группы, представлены следующими вариантами: -O(CR^* ₂)_2-3O-, где в каждом случае R^* представлен следующими возможными вариантами: водород, С_1-6 алифатическая цепь, незамещенная или замещенная, как описано ниже, или 5-6-членное насыщенное/частично ненасыщенное арильное кольцо с 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из следующих: азот, кислород, сера.

[0030] Подходящие заместители алифатической группы R^*: галогены, -R^●, -(галоR^●), -ОН, -OR^●, -O(галоR^●), -CN, -С(O)ОН, -C(O)OR^●, -NH₂, -NHR^●, -NR^● ₂, или -NO₂, где каждый R^● замещен либо, в случае уточнения «гало-», замещен исключительно одним или несколькими атомами галогена, и независимо выбран из групп: С_1-4 алифатическая цепь, -CH₂Ph, -O(CH₂)_0-1Ph, или 5-6-членное насыщенное/частично ненасыщенное арильное кольцо с 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из следующих: азот, кислород, сера.

[0031] Подходящие заместители азота в «возможно замещенной» группе включают: -R^†, -NR^† ₂, -C(O)R^†, -C(O)OR^†, -C(O)C(O)R^†, -C(O)CH₂C(O)R^†, -S(O)₂R^†, -S(O)₂NR^† ₂, -C(S)NR^† ₂, -C(NH)NR^† ₂, или -N(R^†)S(O)₂R^†; где каждый R^† независимо представлен следующими возможными вариантами: водород, C_1-6 алифатическая цепь, незамещенная/замещенная, как описано ниже; незамещенный -OPh, или незамещенное 5-6-членное насыщенное/частично ненасыщенное арильное кольцо с 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из следующих: азот, кислород, сера; либо, несмотря на данное выше определение, два независимых R^†, вместе с промежуточным(и) атомом(амии) образуют незамещенное 3-12-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное моно- или бициклическое кольцо 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из азота, кислорода и серы.

[0032] Подходящие заместители для алифатической группы R^† представлены независимо выбираемыми вариантами: галоген, -R^●, -(гaлoR^●), -ОН, -OR^●, -O(гaлoR^●), -CN, -С(O)ОН, -C(O)OR^●, -NH₂, -NHR^●, -NR^● ₂, или -NO₂, где каждый R^● является незамещенным или, в случае приставки «гало», замещен одним или более атомами галогена, и представлен независимыми вариантами: С_1-4 алифатическая группа, -CH₂Ph, -O(CH₂)_0-1Ph, или 5-6-членное насыщенное/частично ненасыщенное/арильное кольцо с 0-4 гетероатомами, независимо выбранными из следующих возможных: азот, кислород, сера.

[0033] В настоящем описании термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к тем солям, которые, согласно медицинскому заключению, могут быть использованы в контакте с тканями человека и животных: не являющиеся неоправданно токсичными, вызывающими раздражение, аллергические реакции и т.п., риск от использования которых соизмерим с ожидаемой пользой. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны. Например, такие соли описаны в работе S.М.Berge et al. (J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19), включенной в список источников настоящего исследования. Фармацевтически приемлемые соли соединений, составляющих предмет данного изобретения, включают производные от соответствующих неорганических и органических кислот и оснований. Примеры фармацевтически приемлемых, нетоксичных кислотно-аддитивных солей - аминовые соли, полученные посредством добавления неорганических кислот, таких, как соляная, бромистоводородная, фосфорная, серная и хлорная кислоты; или путем добавления органических кислот, таких как уксусная, щавелевая, малеиновая, винная, лимонная, янтарная, малоновая; или с помощью других методов, используемых в данной области, например, ионообмена. Другие фармацевтически приемлемые соли включают: адипинат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, хемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталенсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, р-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т.п.

[0034] Соли, полученные из соответствующих оснований, включают соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов, аммонийные соли и N⁺(С_1-4алкил)₄-соли. Типичные соли щелочных и щелочноземельных металлов включают натриевые, литиевые, калийные, кальциевые, магниевые соли и т.п. Также фармацевтически приемлемыми, при необходимости, являются нетоксичные аммонийные соли, четвертичные соли аммония, соли аминовых катионов, получаемые с использованием противоионов - галогенидов, гидроксидов, карбоновой кислоты, сульфатов, фосфатов, нитратов, сульфаната низших алкилов и арил-сульфаната.

[0035] Если не указано иное, описанные здесь структуры включают также все изомерические формы данных структур (такие, как энантиомеры, диастереомеры, геометрические (конформационные) изомеры); например, R- и S-оптические изомеры для каждого центра асимметрии, Z- и Е-диастереомеры с разными вариантами расположения заместителей относительно плоскости двойной связи, Z- и Е-конформационные изомеры. Таким образом, изобретение включает как простые стереоизомеры, так и энантиомеры, диастереомеры и геометрические (конформационные) настоящих соединений в различных сочетаниях. Если не указано иное, все таутомеры описанных соединений также относятся к данному изобретению. Кроме того, если не указано иное, к структурам, описанным выше, также относятся соединения, отличающиеся только наличием одного или более атома, обогащенного по изотопу. Например, соединения, имеющие описанную структуру и содержащие водород в форме дейтерия или трития; либо обогащенные ¹³С- или ¹⁴С-углеродом, также включены в данное изобретение. Такие соединения можно применять, например, в качестве аналитических инструментов, в качестве зондов для биологических исследований или в качестве терапевтических агентов в соответствии с настоящим изобретением. В некоторых вариантах осуществления группа R¹ в формулах Ia и Ib включает один или несколько атомов дейтерия.

[0036] В настоящем описании термин «необратимый» или «необратимый ингибитор» относится к ингибиторам (т.е. соединениям), способным ковалентно связываться с протеинкиназой-мишенью по существу необратимо. В то время как обратимый ингибитор способен связываться с протеинкиназой-мишенью, но, как правило, ковалентной связью, и, следовательно, способен в дальнейшем отделиться, необратимый ингибитор после того, как произошло формирование ковалентной связи, прочно сцеплен с киназой-мишенью. Необратимые ингибиторы обычно демонстрируют временнýю зависимость: прямо пропорциональную зависимость эффективности ингибирования от времени контакта ингибитора с ферментом. Методы выявления необратимых ингибиторов хорошо известны специалистам. Такие методы включают, например: кинетический анализ активности целевой протеинкиназы в присутствии ингибитора, масс-спектрометрическое исследование целевого белка в присутствии ингибитора, дискретная экспозиция («отмывание»), использование радиомеченых ингибиторов, позволяющих детектировать ковалентные модификации фермента, а также другие известные специалистам способы.

[0037] Для специалиста очевидно, что определенные функциональные группы могут выступать в качестве реакционноспособных групп («боеголовок»). В настоящем описании термин «реакционноспособная группа» относится к функциональной группе, присутствующей в соединении согласно настоящему изобретению и способной ковалентно связываться с аминокислотными остатками (например, с остатками цистеина, лизина, гистидина или другими, способными к ковалентной модификации), присутствующими в связывающем кармане белка-мишени, и способной тем самым необратимо ингибировать белок. Следует иметь в виду, что группа -L-Y, в том смысле, в каком она определена и описана в настоящем документе, включает «реакционноспособные группы», ковалентно и необратимо инактивирующие белок.

[0038] В настоящем описании термин «ингибитор» определяется как соединение, которое связывается с и/или ингибирует целевую протеинкиназу с достаточным сродством. В некоторых вариантах осуществления ингибитор имеет IC₅₀ и/или константу связывания менее 50 мкМ, менее 1 мкМ, менее 500 нм, менее 100 нм, или менее 10 нм.

[0039] Термины «достаточное сродство» и «эффективное ингибирование», используемые здесь, подразумевают регистрируемые изменения активности по крайней мере для одной из следующих киназ: ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС, и/или JAK3 при сравнении образцов, содержащих соединение-предмет настоящего изобретения, или его компоненты плюс по крайней мере одну киназу из перечисленных: ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС и/или JAK3, и эквивалентный образец, содержащий по крайней мере одну киназу из перечисленных: ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС и/или JAK3 в отсутствие указанного соединения или его компонентов.

3. Описание примеров соединений

[0040] Согласно одному аспекту настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы I-a или I-b,

или фармацевтически приемлемую соль такого соединения, где:

Кольцо А представляет собой возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: фенил, 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 8-10-членное бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 8-10-членное бициклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы;

Кольцо В представляет собой возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: фенил, 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 8-10-членное бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 8-10-членное бициклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы;

R¹ представляет собой -L-Y, где:

L представляет собой ковалентную связь или бивалентную C_1-8 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно, два или три метиленовых звена в L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -NR-, -N(R)C(O)-, -C(O)N(R)-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -C(=S)-, -C(=NR)-, -N=N- или -C(=N₂)-;

Y представляет собой водород, C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген или CN, или 3-10-членное моноциклическое или бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, и при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 группами, независимо выбранными из -Q-Z, оксо, NO₂, галогена, CN, или С_1-6 алифатическую группу, где:

Q представляет собой ковалентную связь или бивалентную С_1-6 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно или два метиленовых звена в Q возможно и независимо заменены на -NR-, -S-, -О-, -С(О)-, -SO-, или -SO₂-; и

Z представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген или CN;

R^y представляет собой водород, галоген, -CN, -CF₃, С_1-4 алифатическую группу, С_1-4 гало-алифатическую группу, -OR, -C(O)R или -C(O)N(R)₂;

каждая группа R независимо представляет собой водород или возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: С_1-6 алифатическая группа, фенил, 4-7-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы и 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы;

W¹ и W² каждый независимо представляет собой ковалентную связь или бивалентную С_1-3 алкиленовую цепь, причем одно метиленовое звено в W¹ или W² возможно заменено на -NR²-, -N(R²)C(O)-, -C(O)N(R²)-, -N(R²)SO₂-, -SO₂N(R²)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- или -SO₂-;

R² представляет собой водород, возможно содержащую заместители C_1-6 алифатическую группу, или -С(O)R, или:

R² и заместитель на Кольце А, взятые вместе с разделяющими из атомами, образуют 4-6-членное частично ненасыщенное или ароматическое конденсированное кольцо; или

R² и R^y, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-6-членное насыщенное частично ненасыщенное или ароматическое конденсированное кольцо;

m и р независимо равны 0-4; и

R^x и R^v независимо выбраны из: -R, галогена, -OR, -O(CH₂)_qOR, -CN, -NO₂, -SO₂R, -SO₂N(R)₂, -SOR, -C(O)R, -CO₂R, -C(O)N(R)₂, -NRC(O)R, -NRC(O)NR₂, -NRSO₂R или -N(R)₂, или

R^x и R¹, если они одновременно присутствуют на Кольце В, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 5-7-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, причем указанное кольцо содержит в качестве заместителя реакционноспособную группу и 0-3 группы, независимо выбранные из оксо, галогена, -CN или С_1-6 алифатической группы; или

R^v и R¹, если они одновременно присутствуют на Кольце А, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 5-7-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, причем указанное кольцо содержит в качестве заместителя реакционноспособную группу и 0-3 группы, независимо выбранные из оксо, галогена, -CN, или С_1-6 алифатическую группу.

[0041] Как определено в общем выше, Кольцо А представляет собой возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: фенил, 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 8-10-членное бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 8-10-членное бициклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. В некоторых вариантах осуществления Кольцо А представляет собой возможно замещенную фенильную группу. В некоторых вариантах осуществления Кольцо А представляет собой возможно замещенное нафтильное кольцо или бициклическое 8-10-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. В некоторых других вариантах осуществления Кольцо А представляет собой возможно замещенное 3-7-членное карбоциклическое кольцо. В других вариантах осуществления Кольцо А представляет собой возможно замещенное 4-7-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы.

[0042] В некоторых вариантах осуществления Кольцо А замещено, как описано в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Кольцо А замещено одной, двумя или тремя группами, выбранными из галогена, R^o, или -(CH₂)_0-4OR^o или -O(СН₂)_0-4R^o, где каждый R^o определен в настоящем описании. Примеры заместителей на Кольце А включают Br, I, Cl, метил, -CF₃, -С≡СН, -ОСН₂фенил, -ОСН₂(фторфенил), или -ОСН₂пиридил.

[0043] Примеры групп, представляющих Кольцо А, приведены в Таблице 1.

Таблица 1.
Примеры групп Кольца А

причем каждый R^o и R^† R¹ имеют значения, определенные выше, и их классы и подклассы описаны в настоящем тексте.

[0044] В некоторых вариантах осуществления Кольцо А выбрано из i, ii, iv, v, vi, vii, ix, xiv, xvi, lii, lxxiii, lxxi, lxxiv, lxxvi, lxxviii и lxxxi.

[0045] Как определено в общем выше, Кольцо В представляет собой возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: фенил, 3-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, 8-10-членное бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо. 5-6-членное моноциклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 7-10-членное бициклическое насыщенное или частично ненасыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, 8-10-членное бициклическое гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. В некоторых вариантах осуществления Ring В представляет собой возможно замещенную фенильную группу. В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой возможно замещенное нафтильное кольцо или а бициклическое 8-10-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. В некоторых других вариантах осуществления Кольцо В представляет собой возможно замещенное 3-7-членное карбоциклическое кольцо. В других вариантах осуществления Кольцо В представляет собой возможно замещенное 4-7-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы.

[0046] В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой фенил. В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой 6-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 атома азота. В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой 5-членное гетероарильное кольцо, содержащее1 или 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы.

[0047] В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой 5-6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1 атом азота. В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой 9-10-членное бициклическое частично насыщенное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 атома азота. В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой 9-10-членное бициклическое частично насыщенное гетероарильное кольцо, содержащее 1 атом азота. В некоторых вариантах осуществления Кольцо В 9-10-членное бициклическое частично насыщенное гетероарильное кольцо, содержащее 1 атом азота 1 атом кислорода.

[0048] В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой возможно содержащую заместители группу, выбранную из следующих: фенил, пиридид, пиразинил, пиримидинил, имидазолил, пирролидинил, пиперидинил, индолинил. индазолил и изоиндолинил.

[0049] Примеры групп Кольца В приведены в Таблице 2.

Таблица 2.
Группы Кольца В

причем каждый R¹ и R^x имеют значения, определенные выше, и их классы и подклассы описаны в настоящем тексте.

[0050] В некоторых вариантах осуществления Кольцо В выбрано из i, ii, iii, iv, v, ix, x, xi, xiii, xvi, xvii, xix, xx, xxv, xxvi, xxxii, xxxiv, xxxv, xxxviii, xlii, xlvi, xlviii, l, lviii, lxiv, lxxviii, lxxxiii, lxxxvi, xciv, c, ci, cii, ciii, civ и cv.

[0051] В некоторых вариантах осуществления m в формуле I равно 1, 2, 3 или 4. В некоторых вариантах осуществления m равно 1. В других вариантах осуществления m равно 0.

[0052] В некоторых вариантах осуществления р в формуле I равно 1, 2, 3 или 4. В некоторых вариантах осуществления р равно 1. В других вариантах осуществления р равно 0.

[0053] Как определено в общем выше каждая группа R^x в формуле I независимо выбрана -R, галогена, -OR, -O(CH₂)_qOR, -CN, -NO₂, -SO₂R, -SO₂N(R)₂, -SOR, -C(O)R, -CO₂R, -C(O)N(R)₂, -NRC(O)R, -NRC(O)NR₂, -NRSO₂R или -N(R)₂, причем q равно 1-4, или R^x и R¹, если они одновременно присутствуют на Кольце В, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 5-7-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, причем указанное кольцо содержит в качестве заместителя реакционноспособную группу и 0-3 группы, независимо выбранные из оксо, галогена, CN и С_1-6 алифатической группы.

[0054] В некоторых вариантах осуществления каждый пример R^x независимо выбран из следующих: -R, -OR, -O(CH₂)_qOR и галогена. В некоторых вариантах осуществления R^x представляет собой низший алкил, низший алкокси, низший алкоксиалкокси или галоген. Примеры групп R* включают метил, метокси, метоксиэтокси и фтор. В некоторых вариантах осуществления R^x представляет собой водород.

[0055] Как определено в общем виде выше, каждая группа R^v в формуле I независимо выбрана из -R, галогена, -OR, -O(CH₂)_qOR, -CN, -NO₂, -SO₂R, -SO₂N(R)₂, -SOR, -C(O)R, -CO₂R, -C(O)N(R)₂, -NRC(O)R, -NRC(O)NR₂, -NRSO₂R и -N(R)₂, причем q равно 1-4, или R^v и R¹, если они одновременно присутствуют на Кольце А, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 5-7-членное насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, причем указанное кольцо содержит в качестве заместителя реакционноспособную группу и 0-3 группы, независимо выбранные из оксо, галогена, CN или С_1-6 алифатической группы.

[0056] В некоторых вариантах осуществления R^v в каждом случае независимо выбран из следующих: -R, -OR, -O(CH₂)_qOR и галогена. В некоторых вариантах осуществления R^v представляет собой низший алкил, низший алкокси, низшей алкоксиалкокси или галоген. Примеры групп R^ включают метил, метокси, трифторметокси, метоксиэтокси и хлор. В некоторых вариантах осуществления R^v представляет собой водород.

[0057] В некоторых вариантах осуществления q равно 1, 2, 3 или 4. В некоторых вариантах осуществления q равно 1. В некоторых других вариантах осуществления q равно 2.

[0058] Как определено в общем виде выше, R^y представляет собой водород, галоген, -CN, -CF₃, С_1-4 алифатическую группу, С_1-4 галоалифатическую группу, -OR, - C(O)R или -C(O)N(R)₂, причем R имеет значение определенное выше, и описан в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления R^y представляет собой водород, галоген, -CN, -CF₃, низший алкил или низший галоалкил, -C≡CR и циклопропил. В других вариантах осуществления R^y представляет собой -OR, -C(O)R или -C(O)N(R)₂. В некоторых вариантах осуществления R^y представляет собой -ОСН₃. В некоторых других вариантах осуществления R^y представляет собой -С(O)СН₃. В других вариантах осуществления R^y представляет собой -C(O)NHR. В некоторых вариантах осуществления R^y представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R^y представляет собой фтор. В некоторых других вариантах осуществления R^y представляет собой метил.

[0059] Как определено в общем виде выше, W¹ и W² каждый независимо представляет собой ковалентную связь или бивалентную С_1-3 алкиленовую цепь, причем одно метиленовое звено в W¹ или W² возможно заменено на -NR²-, -N(R²)C(O)-, -C(O)N(R²)-, -N(R²)SO₂-, -SO₂N(R²)-, -О-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- или -SO₂-. В некоторых вариантах осуществления W¹ и W² одинаковы. В некоторых вариантах осуществления W¹ и W² различны.

[0060] В некоторых вариантах осуществления W¹ представляет собой ковалентную связь. В некоторых вариантах осуществления W¹ представляет собой бивалентную С_1-3 алкиленовую цепь, причем одно метиленовое звено в W¹ возможно заменено на -NR², -N(R²)C(O)-, -C(O)N(R²)-, -N(R²)SO₂-, -SO₂N(R²)-, -О-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- или -SO₂-. В некоторых вариантах осуществления W¹ представляет собой -С(=O), -NR²-, -S-, или -O-. В некоторых вариантах осуществления W¹ представляет собой -NR²-. В других вариантах осуществления W¹ представляет собой -О-. В некоторых вариантах осуществления W¹ представляет собой -NH-, -S- или -О-. В некоторых вариантах осуществления W¹ представляет собой -СН₂О-, -CH₂S- или -CH₂NH-. В некоторых аспектах W¹ представляет собой -ОСН₂-, -SCH₂-, -NHCH₂- или -СН₂СН₂-.

[0061] В некоторых вариантах осуществления W² представляет собой ковалентную связь. В некоторых вариантах осуществления W² представляет собой бивалентную С_1-3 алкиленовую цепь, причем одно метиленовое звено в W² возможно заменено на -NR²-, -N(R²)C(O)-, -C(O)N(R²)-, -N(R²)SO₂-, -SO₂N(R²)-, -О-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)O-, -S-, -SO- или -SO₂-. В некоторых вариантах осуществления W² представляет собой -С(=O), -NR²-, -S- или -О-. В некоторых вариантах осуществления W² представляет собой -NR²-. В других вариантах осуществления W² представляет собой -О-. В некоторых вариантах осуществления W² представляет собой -NH-, -S- или -О-. В некоторых вариантах осуществления W² представляет собой -СН₂О-, -CH₂S- или -CH₂NH-. В некоторых аспектах W² представляет собой -ОСН₂-, -SCH₂-, -NHCH₂- или -СН₂СН₂-.

[0062] В некоторых вариантах осуществления Кольцо В представляет собой фенил, и таким образом образует соединение формулы II-a или II-b:

или фармацевтически приемлемая соль такого соединения, где каждое из Кольца А, m, р, R^x, R^y, R^v, W¹, W² и R¹ имеют значения, определенные выше, и их классы и подклассы описаны в настоящем тексте.

[0063] В некоторых вариантах осуществления Кольцо А представляет собой фенил, и таким образом образует соединение формулы III-a или III-b:

или фармацевтически приемлемая соль такого соединения, где каждый из Кольца В, m, р, R^x, R^y, R^v, W¹, W², и R¹ имеют значения, определенные выше, и их классы и подклассы описаны в настоящем тексте.

[0064] В некоторых вариантах осуществления Кольцо А представляет собой фенил и Ring В представляет собой фенил, и таким образом образует соединение формулы IV-a или IV-b:

или фармацевтически приемлемая соль такого соединения, где каждый из m, р, R^x, R^y, R^v, W¹, W² и R¹ имеют значения, определенные выше, и их классы и подклассы описаны в настоящем тексте.

[0065] Как определено в общем виде выше, каждый R² независимо представляет собой водород, возможно содержащую заместители С_1-6 алифатическую группу или -C(O)R, или R² и заместитель на Кольце А, взятые вместе с разделяющими из атомами, образуют 4-6-членное частично ненасыщенное или ароматическое конденсированное кольцо, или R² и R^y взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-6-членное насыщенное, частично ненасыщенное или ароматическое конденсированное кольцо. Согласно одному аспекту R² представляет собой водород. Согласно другому аспекту R² представляет собой -C(O)R, причем R представляет собой возможно содержащую заместители С_1-6 алифатическую группу.

[0066] Согласно некоторым аспектам и заместитель на Кольце А, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное кольцо, и таким образом образует соединение формулы I-a-i или I-b-i:

или фармацевтически приемлемая соль такого соединения, где каждый из A, R¹, R^x и m имеют значения, определенные выше, и их классы и подклассы описаны в настоящем тексте.

[0067] По аналогии с образованием соединений формул I-a-i и I-b-i выше, для специалиста в данной области очевидно, что соединения формул II-a, II-b, III-а, III-b, IV-а, и IV-b образуют, соответственно, соединения II-a-i, II-b-i, III-а-i, III-b-i, IV-a-i и IV-b-i, е R² и заместитель на Кольце А, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-7-членное насыщенное или частично ненасыщенное кольцо.

[0068] Согласно некоторым аспектам R² и R^y, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-7-членное частично ненасыщенное кольцо, и таким образом образует соединение формулы I-a-ii или I-b-ii:

или фармацевтически приемлемая соль такого соединения, где каждый их Кольца A, R¹, R^x, и m имеют значения, определенные выше, и их классы и подклассы описаны в настоящем тексте.

[0069] По аналогии с образованием соединений формул I-a-ii и I-b-ii, описанных выше, для специалиста в данной области очевидно, что соединения формул II-а, II-b, III-a, III-b, IV-a, и IV-b образуют, соответственно, соединения формул II-a-ii, II-b-ii, III-a-ii, III-b-ii, IV-a-ii и IV-b-ii в случаях, когда R² и R^y, взятые вместе с разделяющими их атомами, образуют 4-7-членное частично ненасыщенное кольцо.

[0070] Как определено в общем виде выше, группа R¹ в формулах I и II представляет собой -L-Y, где:

L представляет собой ковалентную связь или бивалентную C_1-8 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно, два или три метиленовых звена в L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -NR-, -N(R)C(O)-, -C(O)N(R)-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -O-, -C(O)-, -OC(O)-, -C(O)0-, -S-, -SO-, -SO₂-, -C(=S)-, -C(=NR)-, -N=N- или -C(=N₂)-;

Y представляет собой водород, С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN, или 3-10-членное моноциклическое или бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, и при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 групп R^e; и

каждый R^e независимо выбран из следующих: -Q-Z, оксо, NO₂, галогена, CN, подходящей уходящей группы и С_1-6 алифатической группы, возможно замещенные оксо, галогеном, NO₂ или CN, где:

Q представляет собой ковалентную связь или бивалентную С_1-6 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно или два метиленовых звена в Q возможно и независимо заменены на -N(R)-, -S-, -О-, -С(О)-, -ОС(О)-, -С(O)O-, -SO-, или -SO₂-, - N(R)C(O)-, -C(O)N(R)-, -N(R)SO₂- или -SO₂N(R)-; и

Z представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN.

[0071] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой ковалентную связь.

[0072] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную C_1-8 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь. В некоторых вариантах осуществления L представляет собой -СН₂-.

[0073] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой ковалентную связь, -СН₂-, -NH-, -CH₂NH-, -NHCH₂-, -NHC(O)-, -NHC(O)CH₂OC(O)-, -CH₂NHC(O)-, -NHSO₂-, -NHSO₂CH₂-, -NHC(O)CH₂OC(O)- или -SO₂NH-.

[0074] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-, -C(O)O-, циклопропилен, -O-, -N(R)- или -C(O)-.

[0075] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-, -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-или -C(O)O-, и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -О-, -N(R)- или -С(О)-.

[0076] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-, и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -О-, -N(R)- или -С(О)-.

[0077] Как описано выше, в некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь. Для среднего специалиста очевидно, что такая двойная связь может существовать в углеводородном каркасе или может быть «экзо» по отношению к каркасной цепи, что приводит к образованию алкилиденовой группы. В качестве примера, такая группа L, содержащая разветвленную алкилиденовую цепь, включает -СН₂С(=СН₂)СН₂-. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь в составе алкилиденила. Примеры групп L включают -NHC(O)C(=CH₂)CH₂-.

[0078] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-. В некоторых вариантах осуществления L представляет собой - С(O)СН=СН(СН₃)-, -С(O)СН=CHCH₂NH(СН₃)-, -С(С-)СН=СН(СН₃)-, -С(O)СН=СН-, -СН₂С(O)СН=СН-, -СН₂С(O)СН=СН(СН₃)-, -СН₂СН₂С(O)СН=СН-, СН₂СН₂С(O)СН=СНСН₂-, -СН₂СН₂С(O)СН=CHCH₂N(СН₃)-, или -СН₂СН₂С(O)СН=СН(СН₃)- или -СН(СН₃)ОС(O)СН=СН-.

[0079] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -ОС(О)-.

[0080] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-, или -C(O)O-, и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -О-, -N(R)- или -С(О)-. В некоторых вариантах осуществления L представляет собой -CH₂OC(O)СН=СНСН₂-, -СН₂-ОС(O)СН=СН- или -СН(СН=СН₂)ОС(O)СН=СН-.

[0081] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой -NRC(O)CH=CH-, -NRC(O)CH=CHCH₂N(CH₃)-, -NRC(O)CH=CHCH₂O-, -CH₂NRC(O)CH=CH-, -NRSO₂CH=CH-, -NRSO₂CH=CHCH₂-, -NRC(O)(C=N₂)C(C-)-, -NRC(O)CH=CHCH₂N(CH₃)-, -NRSO₂CH=CH-, -NRSO₂CH=CHCH₂-, NRC(O)CH=CHCH₂O-, -NRC(O)C(=CH₂)CH₂-, -CH₂NRC(O)-, -CH₂NRC(O)CH=CH-, -CH₂CH₂NRC(O)-, или -CH₂NRC(O)циклопропилен-, причем каждый R независимо представляет собой водород или возможно содержащую заместители С_1-6 алифатическую группу.

[0082] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой -NC(O)СН=СН-, -NC(O)СН=CHCH₂N(СН₃)-, -NHC(O)CH=CHCH₂O-, -CH₂NHC(O)CH=CH-, -NHSO₂CH₂CH-, -NHSO₂CH=CHCH₂-, -NHC(O)(C=N₂)C(O)-, -NHC(O)CH=CHCH₂N(CH₃)-, -NHSO₂CH₂CH-, -NHSO₂CH=CHCH₂-, NHC(O)CH=CHCH₂O-, -NHC(O)C(=CH₂)CH₂-, -CH₂NHC(O)-, -CH₂NHC(O)CH=CH-, -CH₂CH₂NHC(O)- или -CH₂NHC(O)циклопропилен-.

[0083] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну тройную связь. В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну тройную связь и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на -NRC(O)-, -C(O)NR-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -C(=S)-, -C(=NR)-, -O-, -N(R)-, или -C(O)-. В некоторых вариантах осуществления L содержит по меньшей мере одну тройную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -N(R)-, -N(R)C(O)-, -С(О)-, -С(O)O-, или -ОС(О)-, или -О-.

[0084] Примеры групп L включают -С≡С-, -С≡CCH₂N(изопропил)-, -NHC(O)C≡CCH₂CH₂-, -СН₂-С≡С-СН₂-, -С≡CCH₂O-, -СН₂С(O)С≡С-, -С(O)С≡С-, или -CH₂OC(=O)С≡С-.

[0085] В некоторых вариантах осуществления L представляет собой бивалентную C_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно метиленовое звено в L заменено циклопропиленом и одно или два дополнительных метиленовых звена в L независимо заменены на -С(О)-, -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, или -SO₂N(R)-. Примеры групп L включают -NC(O)-циклопропилен-SO₂- и -NHC(O)-циклопропилен-.

[0086] Как определено в общем виде выше, Y представляет собой водород, C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN, или 3-10-членное моноциклическое или бициклическое насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, и при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей at 1-4 R^e groups, each R^e независимо выбран из следующих: -Q-Z, оксо, NO₂, галогена, CN, подходящей уходящей группы, или С_1-6 алифатическую группу, причем Q представляет собой ковалентную связь или бивалентную C_1-6 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно или два метиленовых звена в Q возможно и независимо заменены на -N(R)-, -S-, -О-, -С(О)-, -ОС(О)-, -С(O)O-, -SO-, или -SO₂-, -N(R)C(O)-, -C(O)N(R)-, -N(R)SO₂- или -SO₂N(R)-; и Z представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN.

[0087] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой водород.

[0088] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой С_2-6 алкенил, возможно замещенный оксо, галогеном, NO₂ или CN. В других вариантах осуществления Y представляет собой С_2-6 алкинил, возможно замещенный оксо, галогеном, NO₂ или CN. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой С_2-6 алкенил. В других вариантах осуществления Y представляет собой С_2-4 алкинил.

[0089] В других вариантах осуществления Y представляет собой С_1-6 алкил, замещенный оксо, галогеном, NO₂, или CN. Такие группы Y включают -CH₂F, -CH₂Cl, -CH₂CN и -CH₂NO₂.

[0090] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой насыщенное 3-6-членное моно циклическое кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, причем Y замещен 1-4 группами R^e, где каждая R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0091] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой насыщенное 3-4-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1 гетероатом, выбранный из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-2 группы R^e, где каждая R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. Примерами таких колец являются эпоксидное и океэтановое кольца, где каждое кольцо замещено 1-2 группами R^e, причем каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0092] В других вариантах осуществления Y представляет собой насыщенное 5-6-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 групп R^e, причем каждая R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. Такие кольца включают пиперидин и пирролидин, где каждое кольцо замещено 1-4 группами R^e, причем каждая R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой или , причем каждый из R, Q, Z, и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0093] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой насыщенное 3-6-членное карбоциклическое кольцо, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 групп R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил, где каждое кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 группы R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой , где R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой циклопропил, возможно замещенный галогеном, CN или NO₂.

[0094] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой частично ненасыщенное 3-6-членное моноциклическое кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0095] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой частично ненасыщенное 3-6-членное карбоциклическое кольцо, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил или циклогексенил, причем каждое кольцо замещено 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой причем каждый имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0096] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой частично ненасыщенное 4-6-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y выбран из:

,

причем каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0097] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой 6-членное ароматическое кольцо, содержащее 0-2 атома азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой фенил, пиридил или пиримидинил, причем каждое кольцо замещено 1-4 R^e где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0098] В некоторых вариантах осуществления Y выбран из:

,

где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[0099] В других вариантах осуществления Y представляет собой 5-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-3 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой 5-членное частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. Примерами таких колец являются изоксазолил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, пирролил, фуранил, тиенил, тиазол, тиадиазол и оксадиазол, причем каждое кольцо замещено 1-3 R^e, где каждая группа R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. В некоторых вариантах осуществления Y выбран из:

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[00100] В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой 8-10-членное бициклическое, насыщенное, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 группы R^e, где R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. Согласно другому аспекту Y представляет собой 9-10-членное бициклическое, частично ненасыщенное или арильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 группы причем каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте. Примеры таких бициклических колец включают 2,3-дигидробензо[е]изотиазол, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 группы R^e причем R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[00101] Как определено в общем виде выше, каждая группа R^e независимо выбрана из следующих: -Q-Z, оксо, NO₂, галогена, CN, подходящей уходящей группы, или С_1-6 алифатической группы, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN, где Q представляет собой ковалентную связь или бивалентную C_1-6 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно или два метиленовых звена в Q возможно и независимо заменены на -N(R)-, -S-, -О-, -С(О)-, -ОС(О)-, -С(O)O-, -SO-, или -SO₂-, -N(R)C(O)-, -C(O)N(R)-, -N(R)SO₂-, или -SO₂N(R)-; и Z представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN.

[00102] В некоторых вариантах осуществления R^e представляет собой С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN. В других вариантах осуществления R^e представляет собой оксо, NO₂, галоген или CN.

[00103] В некоторых вариантах осуществления R^e представляет собой -Q-Z, где Q представляет собой ковалентную связь и Z представляет собой водород (т.е., R^e представляет собой водород). В других вариантах осуществления R^e представляет собой -Q-Z, где Q представляет собой бивалентную С_1-6 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно или два метиленовых звена в Q возможно и независимо заменены на -NR-, -NRC(O)-, -C(O)NR-, -S-, -О-, -С(О)-, -SO- или -SO₂-. В других вариантах осуществления Q представляет собой бивалентную С_2-6 линейную или разветвленную углеводородную цепь, содержащую по меньшей мере одну двойную связь, причем одно или два метиленовых звена в Q возможно и независимо заменены на -NR-, -NRC(O)-, -C(O)NR-, -S-, -О-, -С(О)-, -SO-, или -SO₂-. В некоторых вариантах осуществления группа Z группы R^e представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления -Q-Z представляет собой -NHC(O)CH-CH₂ или -С(O)СН=СН₂.

[00104] В некоторых вариантах осуществления каждый R^e независимо выбран из from оксо, NO₂, CN, фтора, хлора, -NHC(O)CH=CH₂, -С(O)СН=СН₂, -СН₂СН=СН₂, -С≡СН, -С(O)OCH₂Cl, -C(O)OCH₂F, -C(O)OCH₂CN, -C(O)CH₂Cl, -C(O)CH₂F, -C(O)CH₂CN или -СН₂С(O)СН₃.

[00105] В некоторых вариантах осуществления R^e представляет собой подходящую уходящую группу, т.е. группу, способную к нуклеофильному замещению. «Подходящая уходящая» группа представляет собой химическую группу, легко замещаемую желаемой входящей химической группой, такой как тиоловая группа представляющего интерес цистеина. Подходящие уходящие группы хорошо известны в данной области техники, см., например, «Advanced Organic Chemistry,» Jerry March, 5^th Ed., pp.351-357, John Wiley и Sons, N.Y. Такие уходящие группы включают, но не ограничиваются перечисленными, галоген, алкокси, сульфонилокси, возможно замещенный алкилсульфонилокси, возможно замещенный алкенилсульфонилокси, возможно замещенный арлсульфонилокси, ацил и диазониевый фрагмент. Примеры подходящих уходящих групп включают хлор, иод, бром, фтор, ацетокси, метансульфонилокси (мезилокси), тозилокси, трифлилокси, нитро-фенилсульфонилокси (нозилокси) и бром-фенилсульфонилокси (брозилокси).

[00106] В некоторых вариантах осуществления реализуются следующие комбинации -L-Y:

(а) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-, -C(O)O-, циклопропилен, -O-, -N(R)-, или -C(O)-; и Y представляет собой водород или C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(b) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-, -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-, или -C(O)O-, и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -О-, -N(R)-, или -С(О)-; и Y представляет собой водород или C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве замести гелей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(c) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-, и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -О-, -N(R)-, или -С(О)-; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(d) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(e) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -ОС(О)-; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(f) L представляет собой -NRC(O)CH=CH-, -NRC(O)CH=CHCH2N(CH3)-, -NRC(O)CH=CHCH₂O-, -CH₂NRC(O)CH=CH-, -NRSO₂CH=CH-, -NRSO₂CH=CHCH₂-, -NRC(O)(C=N₂)-, -NRC(O)(C=N₂)C(O)-, -NRC(O)CH=CHCH₂N(CH_-)-, -NRSO₂CH=CH-, -NRSO₂CH-CHCH₂-, NRC(O)CH=CHCH₂O-, -NRC(O)C(=CH2)CH2-, -CH₂NRC(O)-, -CH₂NRC(O)CH=CH-, -CH₂CH₂NRC(O)-, или -CH₂NRC(O)циклопропилен-; где R представляет собой или возможно содержащую заместители алифатическую группу; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(g) L представляет собой -NHC(C-)CH=CH-, -NHC(O)CH=CHCH₂N(CH₃)-, -NHC(O)CH-CHCH₂O-, -CH₂NHC(O)CH=CH-, -NHSO₂CH=CH-, -NHSO₂CH=CHCH₂-, -NHC(O)(C=N2)-, -NHC(O)(C=N₂)C(O)-, -NHC(O)CH=CHCH₂N(CH₃)-, -NHSO₂CH=CH-, -NHSO₂CH=CHCH₂-, NHC(O)CH=CHCH₂O-, -NHC(O)C(=CH₂)CH₂-, -CH₂NHC(O)-, -CH₂NHC(O)CH=CH-, -CH₂CH₂NHC(O)-, или -CH₂NHC(O)циклопропилен-; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(h) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь в составе алкилиденила и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-, -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-, или -C(O)O-, и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на циклопропилен, -О-, -N(R)-, или -С(О)-; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(i) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну тройную связь и один или два дополнительных метиленовых звена L возможно и независимо заменены на -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-, или -C(O)O-, и Y представляет собой водород или C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(j) L представляет собой -С≡С-, -С≡CCH₂N(изопропил)-, -NHC(O)C≡CCH₂CH₂-, -СН₂-С≡С-СН₂-, -С≡CCH₂O-, -СН₂С(O)С≡С-, -С(O)С≡С-, или -CH₂OC(=0)С≡С-; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(k) L представляет собой бивалентную С_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем одно метиленовое звено в L заменено циклопропиленом и одно или два дополнительных метиленовых звена в L независимо заменены на -NRC(O)-, -C(O)NR-, -N(R)SO₂-, -SO₂N(R)-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -OC(O)-, или -C(O)O-; и Y представляет собой водород или С_1-6 алифатическую группу, возможно содержащей в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(l) L представляет собой ковалентную связь и Y выбран из:

(i) С_1-6 алкила, замещенного оксо, галогеном, NO₂ или CN;

(ii) С_2-6 алкенила, возможно замещенного оксо, галогеном, NO₂ или CN; или

(iii) С_2-6 алкинила, возможно замещенного оксо, галогеном, NO₂ или CN; или

(iv) насыщенного 3-4-членного гетероциклического кольца, содержащего 1 гетероатом, выбранный из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-2 R^e где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(v) насыщенного 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vi) или , где каждый R, Q, Z и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vii) насыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(viii) частично ненасыщенного 3-6-членногомоноциклического кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(ix) частично ненасыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(х) , где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xi) частично ненасыщенного 4-6-членноегогетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xii)

причем каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiii) 6-членного ароматического кольца, содержащего 0-2 атом азота, причем указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждая группа R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiv)

где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xv) а 5-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-3 R^e, где каждая группа R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvi)

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvii) 8-10-членнсто бициклического насыщенного, частично ненасыщенного или арильного кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 группы R^e, причем R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте;

(m) L представляет собой -С(О)- и Y выбран из:

(i) С_1-6 алкила, содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(ii) С_2-6 алкенила, возможно содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(iii) С_2-6 алкинила, возможно содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂ или CN; или

(iv) насыщенного 3-4-членного гетероциклического кольца, содержащего 1 гетероатом, выбранный из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-2 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(v) насыщенного 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vi) или , причем каждый R, Q, Z и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vii) насыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(viii) частично ненасыщенного 3-6-членного моноциклического кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(ix) частично ненасыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(х) где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xi) частично ненасыщенного 4-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xii)

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiii) 6-членного ароматического кольца, содержащего 0-2 атома азота при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiv) ,

где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xv) 5-членное гетероарильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-3 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvi)

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvii) 8-10-членного бициклического насыщенного, частично ненасыщенного или арильного кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей групп 1-4 R^e, где R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте;

(n) L представляет собой -N(R)C(O)- и Y выбран из:

(i) С_1-6 алкила, содержащего в качестве заместителя оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(ii) С_2-6 алкенила, возможно содержащего в качестве заместителя оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(iii) С_2-6 алкинил, возможно содержащего в качестве заместителя оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(iv) насыщенного 3-4-членного гетероциклического кольца, содержащего 1 гетероатом, выбранный из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-2 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(v) насыщенного 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vi) , или , причем каждый R, Q, Z и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vii) насыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(viii) частично ненасыщенного 3-6-членного моноциклического кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(ix) частично ненасыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(х) , где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xi) частично ненасыщенного 4-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xii) или ,

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiii) 6-членного ароматического кольца, содержащего 0-2 атома азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiv)

причем каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xv) 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-3 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvi)

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvii) 8-10-членного бициклического насыщенного, частично ненасыщенного или арильного кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 групп R^e, причем каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте;

(о) L представляет собой бивалентную C_1-8 насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную цепь; и Y выбран из:

(i) С_1-6 алкила, содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN;

(ii) С_2-6 алкенила, содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(iii) С_2-6 алкинила, содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(iv) насыщенного 3-4-членного гетероциклического кольца, содержащего 1 гетероатом, выбранный из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-2 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(v) насыщенного 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vi) или , где каждый R, Q, Z и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vii) насыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(viii) частично ненасыщенного 3-6-членного моноциклического кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(ix) частично ненасыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(х) , где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xi) частично ненасыщенного 4-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xii)

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiii) 6-членного ароматического кольца, содержащего 0-2 атома азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждая группа R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiv)

причем каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xv) 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-3 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvi)

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvii) 8-10-членного бициклического насыщенного, частично ненасыщенного или арильного кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 группы R^e, где R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте;

(р) L представляет собой ковалентную связь, -СН₂-, -NH-, -С(О)-, -CH₂NH-, -NHCH₂-, -NHC(O)-, -NHC(O)CH₂OC(O)-, -CH₂NHC(O)-, -NHSO₂-, -NHSO₂CH₂-, -NHC(O)СН₂ОС(O)-, или -SO₂NH-; и Y выбран из:

(i) C_1-6 алкила, содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(ii) С_2-6 алкенила, содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(iii) С_2-6 алкинила, содержащего в качестве заместителей оксо, галоген, NO₂, или CN; или

(iv) насыщенного 3-4-членного гетероциклического кольца, содержащего) гетероатом, выбранный из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-2 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(v) насыщенного 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из кислорода и азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vi) , или , где каждый R, Q, Z и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(vii) насыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(viii) частично ненасыщенного 3-6-членного моноциклического кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(ix) частично ненасыщенного 3-6-членного карбоциклического кольца, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(х) , где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xi) частично ненасыщенного 4-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранные из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xii) или ,

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiii) 6-членного ароматического кольца, содержащего 0-2 атома азота, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xiv)

причем каждый R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xv) 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-3 R^e, где каждый R^e group имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvi)

где каждый R и R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте; или

(xvii) 8-10-членного бициклического насыщенного, частично ненасыщенного или арильного кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, при этом указанное кольцо содержит в качестве заместителей 1-4 групп R^e, где R^e имеет значение, определенное выше и описанное в настоящем тексте.

[00107] В некоторых вариантах осуществления группа Y в формуле Ia или Ib выбрана из групп, приведенных в Таблице 3 ниже, при этом каждая волнистая линия указывает точку присоединения к остальной части молекулы.

Таблица 3.
Примеры групп Y:

где каждый R^e независимо представляет собой подходящую уходящую группу, NO₂, CN или оксо.

[00108] В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой -С≡СН, -С≡CCH₂NH(изопропил), -NHC(O)С≡ССН₂СН₃, -СН₂-С≡С-СН₃, -С≡CCH₂OH, СН₂С(O)С≡СН, -С(O)С≡СН, или -CH₂OC(=0)С≡СН. В некоторых вариантах осуществления R¹ выбран из -NHC(O)CH≡CH₂, -NHC(O)СН≡CHCH₂N(СН₃)₂ или -CH₂NHC(O)CH≡CH₂.

[00109] В некоторых вариантах осуществления R¹ выбрана из групп, приведенных в Таблице 4 ниже, при этом каждая волнистая линия указывает точку присоединения к остальной части молекулы.

Таблица 4:
Примеры групп R1

где каждый R^e независимо представляет собой подходящую уходящую группу, NO₂, CN или оксо.

[00110] Как определено в общем виде выше, R¹ представляет собой реакционноспособную группу, или, если R¹ и R^x образуют кольцо, то -Q-Z представляет собой реакционноспособную группу. Без какого-либо конкретного теоретического обоснования считается, что такие группы R¹, т.е. реакционноспособные группы, особенно подходят для ковалентного связывания с ключевым остатком цистеина в связывающем домене некоторых протеинкиназы, содержащих остаток цистеина в связывающем домене, известны специалистам и включают ErbB1, ErbB2 и ErbB4 или их мутанты В некоторых вариантах осуществления соединения согласно настоящему изобретению включают реакционно-способные группы, характеризующиеся тем, что соединения согласно настоящему изобретению направленно взаимодействуют с одним или более из следующих остатков цистеина:

ERBB1 ITQLMPFG $$\underset{\_}{C}$$ LLDYVREH

ERBB2 VTQLMPYG $$\underset{\_}{C}$$ LLDHVREN

ERBB4 VTQLMPHG $$\underset{\_}{C}$$ LLEYVHEH

[00111] Соответственно, в некоторых вариантах осуществления R' характеризуется тем, что группа -L-Y способна ковалентно связываться с остатком цистеина, что приводит к необратимому ингибированию фермента. В некоторых вариантах осуществления остаток цистеина представляет собой Cys797 в составе ErbB1, Cys805 в составе ErbB2 и Cys803 в составе ErbB4 или мутанта указанных киназ. Нумерация остатков дана в соответствии с Uniprot (код Р00533 для ErbB1; код Р04626 для ErbB2, и Q15303 для ErbB4). Очевидно, что Cys в составе ErbB1 (ECFR) может называться 773 или 797 в зависимости от того, содержит ли исходная последовательность сигнальный пептид. Таким образом, согласно настоящему изобретению соответствующие остатки цистеина ErbB1 могут быть обозначены Cys773 или Cys797 и употребляться взаимозаменяемо в таком контексте.

[00112] Для среднего специалиста в данной области очевидно, что разнообразные реакционноспособные группы, описанные в настоящему тексте, пригодны для такого ковалентного связывания. Такие группы R¹ включают, но не ограничиваются группами, описанными в настоящему тексте и приведенными в Таблице 3 ниже.

[00113] Как показано выше в формулах I-a и I-b реакционноспособная группа R¹ может находиться в орто-, мета- или пара-положении. В некоторых вариантах осуществления реакционноспособная группа R¹ находится в мета-положении фенильного кольца относительно остальной молекулы.

[00114] В некоторых вариантах осуществления R¹ характеризуется тем, что группа -L-Y способна ковалентно связывать остаток цистеина ТЕС, что приводит к необратимому ингибированию этого фермента. В некоторых вариантах осуществления указанный остаток цистеина представляет собой Cys449.

[00115] В некоторых вариантах осуществления R¹ характеризуется тем, что группа -L-Y способна ковалентно связывать остаток цистеина ВТК, что приводит к необратимому ингибированию этого фермента. В некоторых вариантах осуществления указанный остаток цистеина представляет собой Cys481.

[00116] В некоторых вариантах осуществления R¹ характеризуется тем, что группа -L-Y способна ковалентно связывать остаток цистеина ITK, что приводит к необратимому ингибированию этого фермента. В некоторых вариантах осуществления указанный остаток цистеина представляет собой Cys442.

[00117] В некоторых вариантах осуществления R¹ характеризуется тем, что группа-L-Y способна ковалентно связывать остаток цистеина BMX, что приводит к необратимому ингибированию этого фермента. В некоторых вариантах осуществления указанный остаток цистеина представляет собой Cys496.

[00118] В некоторых вариантах осуществления R¹ характеризуется тем, что группа -L-Y способна ковалентно связывать остаток цистеина f JAK3, что приводит к необратимому ингибированию этого фермента. В некоторых вариантах осуществления указанный остаток цистеина представляет собой Cys909.

[00119] В некоторых вариантах осуществления R¹ характеризуется тем, что группа -L-Y способна ковалентно связывать остаток цистеина ТХК, что приводит к необратимому ингибированию этого фермента. В некоторых вариантах осуществления указанный остаток цистеина представляет собой Cys350.

[00120] Для среднего специалиста в данной области очевидно, что описанные в настоящем тексте различные реакционноспособные группы пригодны для ковалентного связывания. Такие группы R¹ включают группы, изображенные ниже в Таблице 3, но не ограничиваются или.

[00121] Примеры соединений согласно настоящему изобретению приведены ниже в Таблице 5.

Таблица 5
Примеры соединений

[00122] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает любое соединение, представленное выше в Таблице 5 или фармацевтически приемлемую моль указанного соединения.

[00123] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает соединения, выбранные из:

или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.

[00124] Как описано в настоящем тексте, соединения согласно настоящему изобретению представляют собой необратимые ингибиторы по меньшей мере одной киназы из ErbB1, ErbB2, ErbB3 и ErbB4 или мутанта указанной киназы. В некоторых вариантах осуществления соединения согласно настоящему изобретению представляют собой необратимые ингибиторы киназы ТЕС (например, ВТК) и JAK3. Среднему специалисту в данной области понятно, что соединения согласно настоящему изобретению представляют собой необратимые ингибиторы. В некоторых вариантах осуществления такие соединения можно применять в качестве соединений для разделения. В других вариантах осуществления такие обратимые соединения можно применять в качестве ингибиторов ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназы и/или JAK3, или мутантов указанных киназ, и, соответственно, для лечения одного или более заболеваний, описанных в настоящей заявке. Примеры обратимых соединений согласно настоящему изобретению имеют следующую структуру.

или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.

4. Применение, лекарственные формы и назначения

Фармацевтически приемлемые композиции

[00125] В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения, настоящее изобретение предоставляет композицию, включающую соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемое производное, и фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или разбавитель. Количество соединения в композиции согласно настоящему изобретению является таковым, чтобы эффективно детектируемо ингибировать протеинкиназу, в частности одну из ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназу, и/или JAK3, или их мутант, в биологическом образце или в пациенте. В некоторых вариантах осуществления изобретения количество соединения в композиции согласно настоящему изобретению является таковым, чтобы эффективно детектируемо ингибировать по крайней мере одну из ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназу, и/или JAK3, или их мутант, в биологическом образце или в пациенте. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция согласно настоящему изобретению изготавливается для назначения пациенту, нуждающемуся в такой композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция согласно настоящему изобретению изготавливается для орального применения пациентом.

[00126] Термин «пациент», используемый здесь, означает животное, предпочтительно млекопитающее, и наиболее предпочтительно человека.

[00127] Термин «фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или разбавитель» относится к нетоксичному носителю, адъюванту или разбавителю, который не разрушает фармакологическую активность указанного соединения, вместе с которым он используется при изготовлении. Фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или разбавитель, который может быть использован в композиции согласно настоящему изобретению, включает ионообменники, глинозем, стеарат алюминия, лецитин, белки сыворотки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные субстанции, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, частично глицеридные смеси насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как сульфат протамина, двузамещенный фосфат натрия, двузамещенный фосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный кремнезем, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен блок-сополимеры, полиэтиленгликоль и ланолин, но не ограничивается ими.

[00128] «Фармацевтически приемлемое производное» означает любую нетоксичную соль, сложный эфир, соль сложного эфира или другое производное соединения согласно настоящему изобретению, которое, будучи назначено реципиенту, способно предоставить либо прямо, либо косвенно, соединение согласно настоящему изобретению или метаболит с ингибирующей активностью или его остаток.

[00129] В настоящем описании термин «метаболит с ингибирующей активностью или его остаток» означает, что метаболит или его остаток также является ингибитором по крайней мере одной из ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназы, и/или JAK3, или их мутанта.

[00130] Композиции согласно настоящему изобретению могут назначаться орально, парентерально, в виде спрея для ингаляции, местно, ректально, назально, букально, вагинально или с использованием имплантируемого резервуара. Термин «парентерально», используемый здесь, включает подкожную, внутривенную, внутримышечную, интраартикулярную, интрасиновиальную, внутригрудинную, внутрипеченочную и внутричерепную инъекционную или инфузионную методики, а также методику введения в пораженные ткани. Предпочтительно, указанные композиции назначаются орально, внутрибрюшинно или внутривенно. Стерильные инъекционные формы композиции согласно настоящему изобретению могут быть водными или масляными суспензиями. Такие суспензии могут назначаться в соответствии методиками, известными в предшествующем уровне техники, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих веществ. Стерильная инъекционная композиция также может представлять собой стерильный раствор или суспензию для инъекций в нетоксичном приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутандиоле. Среди таких приемлемых разбавителей и растворителей, которые могут применяться, присутствуют вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Вдобавок стерильные, связанные масла традиционно применяют в качестве растворителей или среды для приготовления суспензии.

[00131] Для этой цели может применяться любое легкое связанное масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, являются подходящими для препаратов в виде инъекций, также как и природные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированных вариантах. Такие масляные растворы или суспензии также могут содержать спиртовые разбавители или диспергирующие вещества с длинной цепью, такие как карбоксиметилцеллюлоза или сходные диспергирующие вещества, которые обычно используют в лекарственных средствах в виде фармацевтически приемлемых дозированных форм, включая эмульсии и суспензии. Другие обычно используемые поверхностно-активные вещества, такие как Твин, Спан и другие эмульгирующие вещества или вещества, усиливающие биодоступность, которые обычно используют в производстве фармацевтически приемлемых твердых, жидких или других дозированных формах, также могут быть использованы для целей создания лекарственной формы.

[00132] Фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению могут назначаться орально в любой приемлемой для орального применения дозированной форме, включая капсулы, таблетки, водные суспензии или растворы. В случае таблеток для орального применения, обычно используемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал, но не ограничиваются ими. Также обычно добавляют лубриканты, такие как стеарат магния. Разбавители, пригодные для орального назначения в форме капсул, включают лактозу и сухой кукурузный крахмал. В случае, когда требуются водные суспензии для орального применения, активный ингредиент комбинируют эмульгирующими и суспендирующими агентами. При желании также могут быть добавлены некие подсластители, вкусовые вещества или красители.

[00133] С другой стороны, фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению могут назначаться в форме суппозиториев для ректального назначения. Они могут быть изготовлены смешением указанного агента с подходящим не раздражающим наполнителем, который находится в твердой форме при комнатной температуре, но в жидкой форме при ректальной температуре, и, следовательно, будет расплавляться в прямой кишке с высвобождением указанного лекарства. Такие материалы включают кокосовое масло, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.

[00134] Фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению также могут назначаться местно, особенно когда объект для обработки включает области или органы, легко доступные для местного применения, включая заболевания глаз, кожи или нижнюю часть кишечного тракта. Соответствующие лекарственные формы легко изготавливаются для каждой из этих областей или органов.

[00135] Формы местного применения для нижней части кишечного тракта могут быть выполнены в виде ректальных суппозиториев (смотри ниже) или в виде соответствующей лекарственной формы в виде клизмы. Также могут быть использованы трансдермальные пластыри местного назначения.

[00136] Предоставляемые фармацевтически приемлемые композиции для местного применения могут быть выполнены в виде соответствующей мази, содержащей активный компонент, суспендированный или растворенный в одном или нескольких носителях. Носители для местного применения соединений согласно настоящему изобретению включают минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен, полиоксипропилен, эмульгирующий воск и воду, но не ограничиваются ими. С другой стороны, предоставляемые фармацевтически приемлемые композиции могут быть выполнены в форме соответствующего лосьона или крема, содержащего активные компоненты, суспендированные или растворенные в одном или нескольких фармацевтически приемлемых носителях. Соответствующие носители включают минеральное масло, сорбитмоностеарат, полисорбат 60, цетиловые сложные эфиры воска, цетиариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и воду, но не ограничиваются ими.

[00137] Предоставляемые фармацевтически приемлемые композиции для офтальмологического применения могут быть выполнены в форме тонкодисперсных суспензий в изотоническом стерильном солевом растворе с доведенным рН, или, предпочтительно, в форме раствора в изотоническом стерильном солевом растворе с доведенным рН с консервантом, таким как бензалкониумхлорид, либо без него. С другой стороны, фармацевтически приемлемые композиции для офтальмологического применения могут быть выполнены в форме мази, такой как вазелин.

[00138] Фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению также могут назначаться в виде назального аэрозоля или ингаляции. Такие композиции изготавливают в соответствии с методами, хорошо известными из предшествующего уровня техники для фармацевтических лекарственных форм, и могут быть изготовлены в виде раствора в соляном растворе с применением бензилового спирта или других подходящих консервантов, инициаторов абсорбции для увеличения биодоступности, фторуглеродов, и/или других традиционно используемых растворяющих или диспергирующих веществ.

[00139] Наиболее предпочтительно, фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению изготавливают в форме для орального назначения.

[00140] Количество соединений согласно настоящему изобретению, которое может быть смешано с материалом носителя для получения композиции в форме единичной дозировки варьируется в зависимости от организма, подвергающегося лечению, от специфического способа назначения. Предпочтительно, представленные композиции могут быть изготовлены таким образом, что дозировка ингибитора в количестве от 0.01 до 100 мг на кг веса в день может быть назначена пациенту, принимающему указанные композиции.

[00141] Также должно быть ясно, что специфическая дозировка и режим лечения для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, включающих активность используемого специфического соединения, возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол, диету, время назначения, скорость выведения, комбинирование с другими лекарствами, решение лечащего доктора и тяжесть конкретного заболевания, которое предполагается излечить. Количество соединения согласно настоящему изобретению в указанной композиции также будет зависеть от конкретного соединения в указанной композиции.

Использование соединений и фармацевтически приемлемых композиций

[00142] Соединения и композиции, описанные здесь, в целом пригодны для ингибирования протеинкиназной активности одного или нескольких ферментов.

[00143] Устойчивость к лекарственным средствам является значительным вызовом для терапий, направленных на определенные мишени. Например, устойчивость к лекарственным средствам описана для Gleevec® и Iressa®, а также для нескольких других разрабатывающихся ингибиторов киназ. В дополнение, устойчивость к лекарственным средствам описана для рецепторов cKit и PDGFR. Сообщалось, что необратимые ингибиторы могут быть эффективными против форм протеинкиназ, устойчивых к лекарственных средствам (Kwak, Е.L., R.Sordella, et al. (2005). «Irreversible inhibitors of the EGF receptor may circumvent acquired resistance to gefitinib.» PNAS 102(21): 7665-7670.) He стремясь быть ограниченными какой-либо конкретной теорией, предполагается, что соединения согласно настоящему изобретению могут являться эффективными ингибиторами форм протеинкиназ, устойчивых к лекарственных средствам.

[00144] В настоящем описании термин «клиническая устойчивость к лекарственным средствам» означает потерю восприимчивости мишени для лекарственного средства к обработке этим лекарственным средством вследствие мутаций в этой мишени для лекарственного средства.

[00145] В настоящем описании термин «устойчивость» относится к изменениям в последовательности природной нуклеиновой кислоты, кодирующей целевой белок, и/или последовательности целевого белка, при этом такие изменения снижают или сводят на нет ингибирующий эффект ингибитора такого целевого белка.

[00146] Примеры киназ, ингибирующихся соединениями и композициями, описанными здесь, и против которых применимы способы, описанные здесь, включают ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназу (включая ВТК, ITK, ТЕС, ВМХ и RLK), и/или JAK3, или их мутанты.

[00147] Активность соединения, используемого в настоящем изобретении в качестве ингибиторов ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназы, и/или JAK3, или их мутантов, может быть проверена in vitro, in vivo или в клеточных линиях. Проверка in vitro включает эксперименты, в которых определяется ингибирование либо фосфорилирующей активности и/или последующих функциональных следствий, или АТФ-азной активности активированных ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназы, и/или JAK3, или их мутантов. В альтернативных экспериментах in vitro производится количественный анализ способности ингибитора связываться с ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназой, и/или JAK3. Связывание ингибитора может быть измерено методом мечения ингибитора радиоактивной меткой перед связыванием, выделения комплексов ингибитор/ErbB1, ингибитор/ErbB2, ингибитор/ErbB3, ингибитор/ErbB4, ингибитор/ТЕС-киназа (например, ТЕС, ВТК, ITK, RLK и ВМХ), или ингибитор/JAK3 и определения количества радиоактивных комплексов. С другой стороны, связывание ингибитора может быть проверено путем проведения эксперимента по конкурентному связыванию, когда новые ингибиторы инкубируют с ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназой, и/или JAK3, связанными с известными радиоактивно меченными лигандами. Подробные условия методики обнаружения соединения, используемого в настоящем изобретении в качестве ингибитора ErbB1, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ТЕС-киназы, и/или JAK3, или их мутантов, изложены ниже в Примерах.

[00148] Тирозиновые протеинкиназы являются классом ферментов, катализирующих перенос фосфатной группы с АТФ или ГТФ на остаток тирозина, расположенный в белковом субстрате. Рецепторные тирозинкиназы передают сигналы снаружи внутрь клетки путем активации вторичных эффекторов, передающих сигналы, в ходе события фосфорилирования. Множество клеточных процессов активизируются этими сигналами, включая пролиферацию, утилизацию углеводов, синтез белков, ангиогенез, клеточный рост, и выживаемость клеток.

(а) Семейство ErbB

[00149] Рецепторы ErbB, основное семейство рецепторных тирозинкиназ, состоят из внеклеточного домена, связывающего лиганд, одного трансмембранного домена, и внутриклеточного домена с активностью тирозинкиназы. В семейство ErbB входят ErbB1 (общеизвестный как EGFR), ErbB2 (общеизвестный как HER2 или neu), ErbB3 (общеизвестный как HER3), и ErbB4 (общеизвестный как HER4). Идентифицировано более 10 лигандов (включая EGF, TGFα, AR, ВТС, EPR, HB-EGF, NRG-1, NRG-2, NRG-3, NRG-4) для различных членов семейства рецепторов. При связывании лиганда конформация внутриклеточного домена изменяется, что приводит к образованию гомодимеров или гетеродимеров с другими членами семейства ErbB. Димеризация индуцирует фосфорилирование определенных остатков тирозина внутриклеточного домена, служащих местом связывания для белков-адапторов и эффекторов передающих сигнал дальше. В некоторых случаях происходит активация путей фосфатидил-инозитол-3-киназы (PI3K) и митоген-активируемой протеинкиназы, что приводит к пролиферации выживанию клеток (Lin, N.U.; Winer, Е.P., Breast Cancer Res 6: 204-210, 2004).

[00150] Взаимодействие между членами семейства влечет за собой дефицит ErbB2, лиганд которой не известен, ErbB3, которая не обладает киназной активностью. EGFR, ErbB3, и ErbB4 связываются с лигандом, что приводит к индукции гомодимеризации или гетеродимеризации рецептора ErbB, тогда как ErbB2 выступает в качестве предпочтительного партнера для димеризации. Состав парных комбинаций является важным для диверсификации сигналов, так как тождественность димеров определяет, какой из последующих путей активируется. Типичные продукты генов в последующих стадиях пути передачи сигналов ErbB включают She, Grb2, SOS1, Ras, Rafl, Mek, ERK1, ERK2, ERα, Akt, mTOR, FKHR, p27, Cyclin D1, FasL, GSK-3, Bad и STAT3.

[00151] Существуют твердые доказательства того, что EGFR и другие члены семейства ErbB связаны у человека с наличием опухолей, поскольку в более чем 60% всех твердых опухолей наблюдается повышенная экспрессия, по крайней мере, одного из этих белков или их лигандов. Сообщалось, что конститутивно активный онкогенный EGFR vIII, мутант, содержащий укороченный внеклеточный домен, присутствует в 78% случаев карцином молочной железы, а также он был обнаружен глиобластомах. Повышенную экспрессию EGFR обычно обнаруживают в опухолях молочной железы, легких, головы и шеи, мочевого пузыря, в то время как экспрессия ErbB2 часто повышена в опухолях эпителиального происхождения человека. Активирующие мутации в домене тирозинкиназы были идентифицированы у пациентов с немелкоклеточным раком легких (Lin, N.U.; Winer, Е.P., Breast Cancer Res 6: 204-210, 2004). Амплификация ErbB1 и/или ErbB2 также происходит в эпидермоидных раках, карциномах слюнных желез, яичников и раках поджелудочной железы (Cooper, G.C. Oncogenes. 2^nd ed. Sudbury: Jones and Barlett, 1995; Zhang, Y., et al., Cancer Res 66: 1025-32, 2006). Повышенная экспрессия ErbB2 обладает сильной трансформирующей активностью, вероятно ввиду его способности к взаимодействию с другими рецепторами ErbB (Sherman, L., et al., Oncogene 18: 6692-99. 1999). В действительности, некоторые опухоли человека, в которых наблюдается повышенная экспрессия как EGFR, так и ErbB2, характеризуются худшим прогнозом, чем опухоли, в которых наблюдается повышенная экспрессия какого-либо одного рецептора.

[00152] Система передачи сигналов ErbB часто является ключевым компонентом в патогенезе рака молочной железы. Амплификация ErbB2 ассоциирована с фенотипом агрессивной опухоли, который характеризуется относительно быстрым ростом опухоли, распространением метастаз во внутренних органах и устойчивостью к лекарствам. Было показано, что ErbB2 амплифицирован в 20% случаев рака молочной железы без поражения подмышечных лимфоузлов (axillary node-negative, ANN), и такая амплификация рассматривается как независимый прогностический фактор риска рецидива в указанном раке молочной железы ANN (Andruiis, I.L., et al., J Clin Oncol 16: 1340-9, 1998).

[00153] Было показано, что целевая блокада передачи сигналов ErbB трастузумабом (trastuzumab, Herceptin), моноклональным антителом против ErbB2, улучшает выживаемость женщин ErbB2-положительным раком молочной железы в прогрессирующей стадии. К другим моноклональным антителам против рецепторов ErbB относятся цетуксимаб (cetuximab, Erbitux) и панитумумаб (panitumumab, Vectibix).

[00154] Было обнаружено, что несколько малых молекул-ингибиторов тирозинкиназы (TKIs) действуют селективно на членов семейства ErbB. К известным примерам относятся гефитиниб (gefitinib, Iressa) и эрлотиниб (erlotinib, Tarceva), оба нацеленные на EGFR. Эти малые молекулы конкурируют с АТФ за связывание с киназным доменом рецептора. По сравнению с моноклональными антителами, TKIs имеют несколько преимуществ в том, что они биодоступны орально, хорошо переносятся и производят впечатление активных против укороченных форм рецепторов ErbB2 и EGFR (например, EGFR vIII) in vitro. В дополнение, малый размер малых молекул TKIs может позволить им проникнуть в труднодоступные места, такие как центральная нервная система. Наконец, гомология между киназными доменами рецепторов ErbB позволяет разрабатывать TKIs, которые нацелены одновременно на более чем одного члена семейства ErbB, преимущества чего описаны в настоящей заявке.

[00155] Хотя некоторые злокачественные опухоли связаны с повышенной экспрессией индивидуальных рецепторов, эффективная передача сигналов основана на совместной экспрессии членов семейства рецепторов ErbB. Такая кооперация членов семейства рецепторов ErbB в передаче сигналов и трансформации злокачественных опухолей может ограничить успешность агентов, нацеленных на индивидуальные рецепторы, в лечении рака; потенциальный механизм устойчивости к агентам, нацеленным на единственный рецептор ErbB, является повышенная экспрессия других членов семейства рецепторов (Britten, С.D., Mol Cancer Ther 3: 1335-42, 2004).

[00156] Агенты, нацеленные на два или несколько рецепторов ErbB, называют общими регуляторами ErbB. ERRP является общим негативным регулятором ErbB, экспрессирующимся в большинстве доброкачественных клеток эпителия протоков и островков поджелудочной железы. Обнаружено, что в опухолях происходит прогрессирующая утрата экспрессии ERRP. То, что Эрбитукс (Erbitux) и Герцептин (Herceptin) оказываются успешными на ограниченном числе пациентов (опухоли, обладающие повышенной экспрессией EGFR или ErbB2), может быть частично из-за совместной экспрессии множества членов семейства ErbB.

[00157] В моделях как in vitro, так in vivo стратегии, которые используют двойной подход по отношению к ErbB, кажутся обладающими большей противоопухолевой активностью, чем использование агентов, нацеленных на единичный рецептор ErbB. Таким образом, агенты, нацеленные на множество членов семейства ErbB, с большей вероятностью дадут терапевтический выигрыш на более широкой популяции пациентов (Zhang, Y., et al., Cancer Res 66: 1025-32, 2006). В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения, предложенные соединения ингибируют один или несколько ErbB1, ErbB2, ErbB3 и ErbB4. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, предложенные соединения ингибируют два или более ErbB1, ErbB2, ErbB3 и ErbB4, или их мутантов, и поэтому являются общими ингибиторами ErbB.

[00158] Несомненно, наблюдается растущее число доказательств, подтверждающих одновременное ингибирование двух или более рецепторов ErbB (то есть, общий ErbB) в противораковой терапии. Вероятные подходы с общим ErbB с малыми молекулами включают использование комбинаций агентов, нацеленных на индивидуальные рецепторы ErbB, использование единичных агентов, нацеленных на множество рецепторов ErbB, или использование агентов, влияющих на взаимодействия рецепторов ErbB (например, димеризацию). Дополнительные стратегии включают терапии, использующие малые молекулы в комбинации с антителами, или хемопревентивные терапии (Lin, N.U.; Winer, Е.P., Breast Cancer Res 6: 204-210, 2004).

[00159] Примером малой молекулы - общего ингибитора ErbB является CI-1033, необратимый общий ингибитор ErbB, ковалентно связывающийся с сайтом связывания АТФ внутриклеточного киназного домена. Другим необратимым общим ингибитором рецептора ErbB тирозинкиназы является HKI-272, ингибирующий рост клеток опухоли, которые экспрессируют ErbB-1 (EGFR) и ErbB-2 (HER-2) в культуре и ксенотрансплантатах, и обладающий противоопухолевой активностью в HER-2-положительном раке молочной железы (Andruiis, I.L., et al., J Clin Oncol 16: 1340-9, 1998). Необратимые ингибиторы продемонстрировали превосходную противоопухолевую активность по сравнению с обратимыми ингибиторами.

[00160] Нейрофиброматоз I типа (NF1) является по существу наследственным заболеванием, которым страдает один из 2500-3500 индивидуумов. Поражаются несколько систем органов, включая кости, кожные покровы, радужную оболочку глаз и центральную нервную систему, что проявляется в неспособности к обучению и глиомах. Признаком NF1 является развитие доброкачественных опухолей периферической нервной системы (нейрофибром), сильно различающихся по числу и размеру среди пациентов. Нейрофибромы являются гетерогенными опухолями, состоящими из Шванна, нейронов, фибробластов и других клеток, где клетки Шванна являются основным типом клеток (60-80%).

[00161] Аберрантная экспрессия EGFR ассоциирована с развитием опухоли при NF1 и в моделях NF1 на животных, что предполагает некую роль в патогенезе и представляет новую потенциальную терапевтическую мишень. Экспрессия EGFR вызывает рост опухолевых клеточных линий, полученных из пациентов с NF1, в условиях, когда RGF не является первичным фактором, вызывающим рост клеток. Эти данные наводят на мысль, что EGFR может играть важную роль в онкогенезе NF1 и трансформации клеток Шванна (DeClue, J.Е., et al., J Clin Invest 105: 1233-41, 2000).

[00162] У пациентов с NF1 развивается агрессивная неоплазма клеток Шванна, известная как злокачественная опухоль оболочек периферических нервов (MPNSTs). Клетки Шванна являются главной популяцией вспомогательных клеток в периферической нервной системе. Неопластические клетки Шванна в этих неоплазмах с разным уровнем экспрессируют тирозинкиназы ErbB, что вызывает ответ NRG-1 (ErbB2, ErbB3, ErbB4). Белки нейрсгулина-1 (NRG-1) вызывают дифференциацию, выживание, и/или пролиферацию множества типов клеток в развивающейся нервной системе, а повышенная экспрессия NRG-1 в клетках Шванна, образующих миелиновый слой, индуцирует формирование злокачественных опухолей оболочек периферических нервов (MPNSTs) (Fallon, К.В., et al., J Neuro Oncot 66: 273-84, 2004).

[00163] Нарушенная регуляция роста клеток Шванна является первичным дефектом, приводящим к развитию как доброкачественных нейрофибром, так и MPNST у пациентов с нейрофиброматозом I типа (NF1). Рост MPNSTs и транобразованных клеток Шванна мыши in vitro сильно зависит от EGF и может быть блокирован ингибиторами EGFR в условиях, когда EGF является первичным фактором роста. У некоторых MPNST линий клеток человека обнаружили конститутивное фосфорилирование ErbB. Хотя обработка ингибиторами ErbB предотвращает фосфорилирование ErbB и снижает синтез ДНК в этих линиях, эффективные хемотерапевтические режимы для MPNST остаются труднодостижимыми (Stonecypher, М.S., et al., Oncogene 24: 5589-5605, 2005).

[00164] Невриномы являются опухолями периферических нервов, почти полностью состоящими из клеток, подобных клеткам Шванна, и обычно содержащими мутации в гене супрессора опухоли нейрофиброматоза II типа (NF2). У девяноста процентов пациентов с NF2 развиваются двусторонние вестибулярные невриномы и/или спинномозговые невриномы. Увеличивающиеся невриномы могут сдавливать соседние структуры, что приводит к глухоте и другим неврологическим проблемам. Хирургическое удаление этих опухолей затруднительно и часто приводит к усилению клинических проявлений заболевания у пациентов.

[00165] Как нормальные человеческие клетки Шванна, так и клетки неврином экспрессируют рецепторы нейрегулина (то есть, рецепторы ErbB), а клетки неврином пролиферируют в ответ на нейрегулин. Возможно, что аберрантная продукция нейрегулина или ответ вносят вклад в аберрантную пролиферацию клеток невриномы (Pelton, P.D., et al., Oncogene 17: 2195-2209, 1998).

[00166] Супрессор опухоли NF2, Мерлин, является белком, ассоциированным с мембраной/цитоскелетом, вовлеченным в регуляцию активности тирозинкиназы. Генетические взаимодействия между мутациями в белке Мерлин и мутациями в пути EGFR описаны в Drosophila (LaJeunesse, D.R., et al., Genetics 158: 667-79, 2001). Другое доказательство наводит на мысль, что Мерлин может ингибировать интернализацию EGFR и передачу сигнала через контакт клетка-клетка путем удерживания EGFR в мембранном компартменте, от которого не может быть передан ни сигнал, ни который не может быть интернализован (McClatchey, А.I., et al., Genes and Development 19: 2265-77, 2005; Curto, M.C., et al., J Cell Biol 177: 893-903, 2007).

[00167] Используемые здесь термины «лечение», «лечить» и «излечивание» относятся к реверсии, облегчению, замедлению проявления или ингибированию прогресса заболевания или нарушения, или одного или нескольких его симптомов, как описано в настоящем описании. В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения, лечение может быть назначено после того, как обнаружен один или несколько симптомов. В других вариантах реализации настоящего изобретения, лечение может быть назначено в отсутствие симптомов. Например, лечение может быть назначено восприимчивому индивидууму перед наступлением симптомов (например, в свете истории симптомов и/или в свете генетических факторов или других факторов восприимчивости). Лечение может быть продолжено после того, как исчезли симптомы, например, чтобы предотвратить или замедлить ее повторение.

[00168] Предложенные соединения являются ингибиторами одного или нескольких ErbB1, ErbB2, ErbB3 и ErbB4, и поэтому пригодны для лечения одного или нескольких нарушений, ассоциированных с активностью одного или нескольких ErbB1, ErbB2, ErbB3 и ErbB4. Таким образом, в определенных вариантах реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения нарушения, опосредованного ErbB1, ErbB2, ErbB3 и/или ErbB4, включающего стадию введения соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой композиции пациенту, нуждающемуся в нем/в ней.

[00169] Использованные здесь термины нарушения или состояния, «опосредованные ErbB1», «опосредованные ErbB2», «опосредованные ErbB3», и/или «опосредованные ErbB4», означают любое заболевание или другое болезнетворное состояние, для которого известно, что оно связано с одним или несколькими ErbB1, ErbB2, ErbB3 и/или ErbB4, или их мутантами. Соответственно, другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к лечению или снижению тяжести одного или нескольких заболеваний, для которого известно, что оно связано с одним или несколькими ErbB1, ErbB2, ErbB3 и/или ErbB4 или их мутантами. В частности, настоящее изобретение относится к способу лечения или снижению тяжести одного или нескольких заболеваний или состояний, выбранных из пролиферативного заболевания, причем указанный способ включает введение соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой композиции пациенту, нуждающемуся в нем/в ней.

[00170] В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижению тяжести одного или нескольких заболеваний, представляющих собой рак. В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения рак ассоциирован с твердой опухолью. В определенных вариантах реализации настоящего изобретения таким раком является рак молочной железы, глиобластома, рак легких, рак головы и шеи, рак толстой кишки, рак мочевого пузыря или немелкоклеточный рак легких. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний, выбранных из карциномы сквамозных клеток, карциномы слюнных желез, карциномы яичников или рака поджелудочной железы.

[00171] В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести нейрофиброматоза I типа (NF1), нейрофиброматоза II типа (NF2), неоплазм клеток Шванна (например, MPNST's) или неврином.

(b) Семейство TEC

[00172] Семейство ТЕС нерецепторных тирозинкиназ, обозначенное здесь как «ТЕС-киназы», играет центральную роль в передаче сигналов через антигены-рецепторы, такие как рецепторы TCR, BCR и Fc (обзор Miller A, et al. Current Opinion in Immunology [4; 331-340 (2002). ТЕС-киназы являются необходимыми для активации Т-клеток. Три члена указанного семейства, Itk, Rlk и, активируются после контакта антигена с рецептором в Т-клетках и передают сигналы последующим эффекторам, включая PLC-γ. Совместная делеция Itk и Rlk в мышах приводит к полному ингибированию ответов TCR, включая пролиферацию, продукцию цитокинов и иммунные ответы на внутриклеточных паразитов (Toxoplasma gondii) (Schaeffer et al., Science 284; 638-641 (1999)). Внутриклеточная передача сигналов после контакта рецептора TCR наблюдается в дефицитных по ITK/RLK Т-клетках; при этом снижаются продукция инозитолтрифосфата, мобилизация кальция и активация МАР-киназы. ТЕС-киназы также являются существенными для развития и активации В-клеток.

[00173] К ТЕС-киназам относятся пять членов семейства, которые экспрессируются главным образом в гемопоэтических клетках: ТЕС, ВТК, ITK (также известный как TSK и ЕМТ), RLK (также известный как ТХК) и ВМХ (также известный как ЕТК). Другие родственные ТЕС-киназы были обнаружены в Drosophila melanogaster, в полосатом данио (Danio rerió), в скате (Raja eglanteria) и морском еже (Anthocidaris crassispina).

[00174] Предоставленные соединения являются ингибиторами одной или нескольких ТЕС-киназ и поэтому пригодны для лечения одного или нескольких заболеваний, ассоциированных с активностью одной или нескольких ТЕС-киназ. Таким образом, в определенных вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения заболевания, опосредованного ТЕС, включающий стадию введения соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой композиции пациенту, нуждающемуся в нем/в ней.

[00175] Термин «состояние, опосредованное ТЕС», использованный в настоящей заявке, означает любое заболевание или другое болезнетворное состояние, про которое известно, что оно связано с ТЕС-киназами. Такие состояния включают состояния, описанные в настоящей заявке, а также у Melcher, М et al., «The Role of TEC Family Kinases in Inflammatory Processes», Anti-Inflammatory & Anti-Allergy Agents in Medicinal Chemistry, Vol.6, No.1, pp.61-69 (Feb. 2007). Соответственно, другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к лечению или снижению тяжести одного или нескольких заболеваний, про которые известно, что оно связано с ТЕС-киназами. В частности, настоящее изобретение относится к способу лечения или снижения тяжести заболевания или состояния, выбранного из аутоиммунного, воспалительного, пролиферативного и гиперпролиферативного заболеваний и иммунологически опосредованных заболеваний, включая отторжение трансплантированных органов или тканей и синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) (также известного как ВИЧ), при этом указанный способ включает введение фармацевтически приемлемой композиции согласно настоящему изобретению пациенту, нуждающемуся в ней.

[00176] В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, включающих заболевания дыхательных путей, включая заболевания, при которых происходит обратимое закупоривание дыхательных путей, включающие астму, такую как бронхиальная, аллергическая, врожденная, неврожденная и пылевая астма, в частности хроническая или застарелая астма (например, поздняя стадия астматической гиперчувствительности дыхательных путей) и бронхит, но не ограничивающихся ими. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, включая состояния, характеризующиеся воспалением носовой слизистой мембраны, включая острый ринит, аллергический, атрофический ринит и хронический ринит, включающий хронический ринит с образованием казеозных масс, гипертрофический ринит, гнойный ринит, сухой ринит и медикаментозный ринит; мембранный ринит, включая крупозный, фибринозный и нревдомембранный ринит и скрофулезный ринит, сезонный ринит, включая нейроринит (сенная лихорадка) и вазомоторный ринит, саркоидоз, «легкие фермера» (экзогенный аллергический альвеолит) и связанные с ним заболевания, пневмофиброз, и идиопатическая интерстициальная пневмония.

[00177] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, включая заболевания костей и суставов, включающих ревматоидный артрит, серонегативные спондилоартропатии (включая анкилозирующий спондилоартрит, псориатический артрит и болезнь Рейтера), болезнь Бехчета, синдром Шегрена, системный склероз, остеопороз, рак костей и метастаз костей, но не ограничивающихся ими.

[00178] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, включая заболевания кожи, включая псориаз, системный склероз, атипичный дерматит, контактный дерматит и другие экзематозные дерматиты, себорейный дерматит, красный плоский лишай, пемфигус, буллезный пемфигус, буллезный эпидермолиз, крапивница, ангиодермит, васкулиты, эритемы, кожную эозинофилию, увеит, аллопецию, круговой и весенний конъюнктивит, но не ограничивающихся ими.

[00179] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, включая заболевания и расстройства желудочно-кишечного тракта, включая глютеновую болезнь, проктит, эозинофильный гастроэнтерит, мастоцитоз, панкреатит, болезнь Крона, язвенный колит, аллергии, ассоциированные с пищей, проявляющиеся вдали от пищеварительного тракта, например мигрень, ринит и экзема, но не ограничивающихся ими.

[00180] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, включая заболевания и расстройства других тканей и системные заболевания, включая множественный склероз, артериосклероз, красную волчанку, системную красную волчанку, тиреоидит Хасимото, тяжелую миастению, диабет I типа, нефротический синдром, элзинофильный фасцит, гипер-IgE-синдром, лепроматозная лепра, синдром Сезари и идиопатическая розовая тромбоцитопения, последующая за рестенозом ангиопластика, опухоли (например, лейкемии, лимфомы и раки простаты) и артериосклероз, но не ограничивающихся ими.

[00181] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, включающих отторжение аллотрансплантата, включая острое или хроническое отторжение аллотрансплантата после, например, трансплантации почки, сердца, печени, легкого, костного мозга, кожи и роговой оболочки глаза; и хроническую реакцию «трансплантат против хозяина», но не ограничивающихся ими.

[00182] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ТЕС-киназами, описанных выше, причем указанный способ включает введение соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой композиции пациенту, нуждающемуся в нем/в ней.

(с) Брутоновская тирозинкиназа (ВТК)

[00183] Брутоновская тирозинкиназа (ВТК), член семейства ТЕС-киназ, является ключевым сигнальным ферментом, экспрессирующимся во всех гемопоэтических типах клеток, за исключением Т-лимфоцитов и природных клеток-киллеров. ВТК играет существенную роль в пути передачи сигналов в В-клетках, опосредуя стимуляцию рецептора на поверхности В-клетки (BCR) с последующими ответами внутри клетки.

[00184] ВТК является ключевым регулятором развития, активации, передачи сигналов и выживаемости В-клеток (Kurosaki, Curr Op Imm, 2000, 276-281; Schaeffer and Schwartzberg, Curr Op Imm 2000, 282-288). В дополнение, ВТК играет роль в нескольких других сигнальных путях гемопоэтических клеток, например, в продукции Toll-подобного рецептора (TLR) и опосредованной рецептором цитокина продукции TNF-α в макрофагах, в передаче сигналов рецептором IgE (Fc_epsilon_RI) в мастоцитах, ингибирование апоптотической передачи сигналов Fas/APO-1 в лимфоидных клетках В-линии, и стимулированной коллагеном агрегации тромбоцитов. Смотри, например, С.A.Jeffries, et al., (2003), Journat of Biological Chemistry 278: 26258-26264; N.J.Horwood, et al., (2003), The Journal of Experimental Medicine 197: 1603-1611; Iwaki et al. (2005), Journal of Biological Chemistry 280(48): 40261 -40270; Vassilev et al. (1999), Journal of Biological Chemistry 274(3): 1646-1656, и Quek et al. (1998), Current Biology 8(20): 1137-1140.

[00185] У пациентов с мутациями в ВТК наблюдается полный блок в развитии В-клеток, что приводит к практически полному отсутствию зрелых В-лимфоцитов и клеток плазмы, сильному понижению уровня иммуноглобулинов и сильному ингибированию гуморального ответа на антигены тканей донора (обзор в Vihinen et al, Frontiers in Bioscience 5: d917-928). У мышей, дефицитных по ВТК, также снижено количество периферических В-клеток и существенно снижены уровни IgM и IgG3 в сыворотке. Делеция ВТК в мышах приводит к сильному эффекту по пролиферации В-клеток, индуцированному анти-IgM, и ингибирует иммунные ответы на тимус-независимые антигены II типа (Ellmeier et al, J Exp Med 192: 1611-1623 (2000)). ВТК также играет критическую роль в активации мастоцитов через высокоаффинный рецептор IgE (Fc_epsilon_RI). У мастоцитов мыши, дефицитных по ВТК, снижена дегрануляция и снижена продукция провоспалительных цитокинов, что приводит поперечным сшивкам Fc_epsilon_RI (Kawakami et al. Journal of Leukocyte Biology 65: 286-290).

[00186] Предложенные соединения являются ингибиторами ВТК и поэтому являются полезными при лечении одного или нескольких заболеваний, ассоциированных с активностью ВТК. Таким образом, в некоторых вариантах реализации настоящее изобретение обеспечивает способ лечения заболевания, ассоциированного с ВТК, включающий введение соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой композиции пациенту, нуждающемуся в нем/в ней.

[00187] Использованный в настоящей заявке термин заболевание или состояние, «ассоциированное с ВТК» означает любое заболевание или болезнетворное состояние, про которое известно, что оно связано с ВТК или его мутантом. Соответственно, другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к лечению или снижению тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, про которые известно, что они связано с ВТК или его мутантом. В частности, настоящее изобретение относится к способу лечения или снижения тяжести заболевания или состояния, выбранного из пролиферативного заболевания или аутоиммунного нарушения, причем указанный способ включает введение соединения согласно настоящему изобретению или его композиции пациенту, нуждающемуся в нем/в ней.

[00188] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения таким заболеванием или состоянием является аутоиммунное заболевание, например, воспалительное заболевание кишечника, артрит, волчанка, ревматоидный артрит, псориатический артрит, остеоартрит, болезнь Стилла, подростковый артрит, диабеты, тяжелая миастения, тиреоидит Хасимото, тиреоидит Орда, базедова болезнь, синдром Шергена, множественный склероз, синдром Гийена-Барре, острый рассеянный энцефаломиелит, болезнь Эддисона, синдром пляшущих глаз, деформирующий спондилез, синдром антифосфолипидного антитела, апластическая анемия, аутоиммунный гепатит, брюшные заболевания, синдром Гудпасчера, идиопатическая розовая тромбоцитопения, глазной неврит, склеродерма, первичный желчный цирроз, синдром Рейтера, артрит Такаясу, височный артрит, warm аутоиммунная гемолитическая анемия, гранулематоз Вегенера, псориаз, общая аллопеция, синдром Бехчета, хроническая усталость, вегетативная дистопия, эндометриоз, интерстициальный цистит, нейромиотония, склеродерма или вульводиния. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения таким заболеванием или состоянием является гиперпролиферативное заболевание или иммунологически опосредованное заболевание, включающее отторжение трансплантированных органов или тканей и синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД, также известный как ВИЧ).

[00189] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК, причем указанное заболевание или состояние выбрано из гетероиммунных состояний или заболеваний, которые включают реакцию «трансплантат против хозяина», трансплантацию, трансфузию, анафилаксию, аллергии (например, аллергии к растительной пыльце, латексу, лекарственным препаратам, пище, ядам насекомых, шерсти животных, перхоти животных, пылевым клещам или стенкам яиц таракана), гиперчувствительность I типа, аллергический конъюнктивит, аллергический ринит и атопический дерматит, но не ограничиваются ими.

[00190] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК, причем указанное заболевание или состояние выбрано из воспалительного заболевания, например, астмы, аппендицита, блефарита, бронхиолита, бронхита, бурсита, цервицита, холангита, холецистита, колита, конъюнктивита, цистита, дакриоаденита, дерматита, дерматомиозита, энцефалита, эндокардита, эндометрита, энтерита, энтероколита, эпикондилита, эпидидимита, фасцита, фиброзита, гастрита, гастроэнтерита, гепатита, гнойного гидраденита, ларингита, мастита, менингита, миелита, миокардита, миозита, нефрита, оофорита, орхита, остеита, отита, панкреатита, паротита, перикардита, перитонита, фарингита, плеврита, флебита, пневмонита, пневмонии, проктита, простатита, пиелонефрита, ринита, сальпингита, синусита, стоматита, синовита, тендинита, тонзиллита, увеита, вагинита, васкулита или вульвита.

[00191] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК, причем указанное заболевание или состояние выбрано из рака. В одном варианте осуществления настоящего изобретения к раку относится пролиферативное заболевание В-клеток, например, диффузная лимфома больших В-клеток, фолликулярная лимфома, хроническая лимфоцитная лимфома, хроническая лимфоцитная лейкемия, острая лимфоцитная лейкемия, пролимфоцитная лейкемия В-клеток, лимоплазмицитная лимфома/макроглобулинемия Вальденстрома, лимфома краевых зон селезенки, множественная миелома (также известная как миелома клеток плазмы), неходжскинская лимфома, ходжскинская лимфома, плазмацитома, внеузловая В-клеточная лимфома краевых зон, внутриузловая В-клеточная лимфома краевых зон, лимфома клеток коры головного мозга, медиастенальная (тимусная) лимфома больших В-клеток, внутрисосудистая лимфома больших В-клеток, первичная эффузионная лимфома, лимфома/лейкемия Буркитта или лимфоматоидный грануломатоз. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения раком является рак молочной железы, рак простаты или рак мастоцитов (например, мастоцитома, лейкемия мастоцитов, саркома мастоцитов, системный мастоцитоз). В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанным раком является рак костей. В другом варианте осуществления настоящего изобретения указанным раком является рак другого первичного происхождения с метастазами в костях.

[00192] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК, включающих заболевания костей и суставов включая ревматоидный артрит, серонегативную спондилоартропатию (включающую анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и заболевание Рейтера), болезнь Бехчета, синдром Шергена, системный склероз, остеопороз, рак костей и метастаз костей, но не ограничивающихся ими.

[00193] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК, где указанное заболевание или состояние выбрано из тромбоэмболических нарушений, например, инфаркт миокарда, стенокардия, реокклюзия после ангиопластики, рестеноз после ангиопластики, реокклюзия после аортокоронарного шунтирования, рестеноз после аортокоронарного шунтирования, внезапного приступа, транзиторная ишемия, окклюзивные нарушения в периферических артериях, эмболия легких или глубокий венозный тромбоз.

[00194] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК, включающих инфекционные и неинфекционные воспалительные события, а также аутоиммунные и другие воспалительные заболевания. Такие аутоиммунные и воспалительные заболевания, нарушения и синдромы включают воспалительные заболевания таза, уретрит, солнечный ожог кожи, синусит, пневмонит, энцефалит, менингит, миокардит, нефрит, остиомиелит, миозит, гепатит, гастрит, энтерит, дерматит, гингивит, аппендицит, панкреатит, хлороцистит, агаммаглобулинемию, простатит, аллергию, болезнь Крона, синдром раздраженного кишечника, язвенный колит, болезнь Шергена, отторжение тканевого трансплантата, сверхострое отторжение трансплантированных органов, астму, аллергический ринит, хроническое закупоривающее легочное заболевание (COPD), аутоиммунное полигранулярное заболевание (также известное как аутоиммунный полигранулярный синдром), аутоиммунная аллопеция, пернициозная анемия, гломерулонефрит, дерматомозит, множественный склероз, склеродерма, васкулит, аутоиммунные гемолитические и тромбоцитопенические состояния, синдром Гудпасчера, артериосклероз, болезнь Эддисона, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, диабет I типа, септический шок, системная красная волчанка (SLE), ревматоидный артрит, псориатический артрит, подростковый артрит, остеоартрит, хроническая идиопатическая розовая тромбоцитонения, болезнь Вальденстрема, тяжелая миастения, тиреоидит Хасимото, атопичный дерматит, дегенеративное поражение сустава, витилиго, аутоиммунный гипопитуитаризм, синдром Гийена-Барре, болезнь Бехчета, склерадерма, фунгоидный микоз, острые воспалительные ответные реакции (такие как синдром острой дыхательной недостаточности и ишемия/реперфузионное повреждение), болезнь Грейвса.

[00195] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, ассоциированных с ВТК, выбранных из ревматоидного артрита, множественного склероза, В-клеточной хронической лимфоцитной лейкемии, острой лимфоцитной лейкемии, лейкемии ворсистых клеток, не-ходжкинской лимфомы, ходжкинской лимфомы, множественной миеломы, рака костей, метастаз костей, остеопороз, синдром раздраженного кишечника, болезнь Крона, волчанка и ренальный трансплантат.

(d) ITK

[00196] Индуцируемая интерлейкином-2 Т-клеточная киназа (ITK) экспрессируется в Т-клетках, мастоцитах и природных клетках-киллерах. Она активирована в Т-клетках за счет стимулирования рецептора Т-клеток (TCR) и в мастоцитах за счет активации высокоаффинного рецептора IgE. При последующей стимуляции рецептора в Т-клетках, Lck, члена семейства Src тирозинкиназ, он фосфорилирует Y511 в петле ITK, активирующей киназный домен (S.D.Heyeck et al., 1997, J. Biol. Chem, 272, 25401-25408). Активированный ITK вместе с Zap-70 требуется для фосфорилирования и активации PLC-гамма (S. С.Bunnell et al., 2000, J. Biol. Chem., 275, 2219-2230). PLC-гамма катализирует образование инозитол-1,4,5-трифосфата и диацилглицерина, что приводит к мобилизации кальция и активации РКС, соответственно. Эти события активируют множество последующих путей и приводят в конечном итоге к дегрануляции (мастоциты) и экспрессии гена цитокина (Т-клетки) (Y.Kawakami et al., 1999, J.Leukocyte Biol., 65, 286-290).

[00197] Роль ITK в активации Т-клеток подтверждена в мышах, нокаутированных по ITK. CD4⁺ Т-клетки из мышей, нокаутированных по ITK, демонстрировали ослабленный пролиферативный ответ в смешанной лимфоцитной реакции или при Con А или анти-CD3 стимуляции. (X.С.Liao and D.R.Littman, 1995, Immunity, 3, 757-769). Также, Т-клетки из мышей, нокаутированных по ITK, производили немного ИЛ-2 при стимуляции TCR, что приводило к пониженной пролиферации этих клеток. В другом исследовании CD4⁺ Т-клетки, дефицитные по ГТК, производили пониженный уровень цитокинов, включая IL-4, IL-5 и IL-13 при стимуляции TCR, даже после примирования в индуцирующих условиях (D.J.Fowel), 1999, Immunity, 11, 399-409).

[00198] Роль ITK в PLC-гамма активации и мобилизации кальция также была подтверждена в Т-клетках этих нокаутированных мышей, у которых были значительно снижены образование IP₃ и не внеклеточный транспорт кальция при стимуляции TCR (К.Liu et al., 1998, J. Exp. Med. 187, 1721-1727). Подобные исследования подтверждают ключевую роль ITK в активации Т-клеток и мастоцитов. Таким образом, ингибитор ITK будет обладать терапевтическими преимуществами в заболеваниях, опосредованных несоответствующей активацией этих клеток.

[00199] Является широко признанным тот факт, что Т-клетки играют важную роль в регулировании иммунного ответа (Powrie and Coffman, 1993, Immunology Today, 14, 270-274). Действительно, активация Т-клеток часто является инициирующим событием в иммунологических заболеваниях. Следом за активацией TCR происходит транспорт кальция, который требуется для активации Т-клеток. При активации Т-клетки производят циокины, включая IL-2, 4, 5, 9, 10 и 13, что приводит к пролиферации, дифференцировке и эффекторной функции Т-клеток. Клинические исследования с использованием ингибиторов 1L-2 продемонстрировали, что взаимное влияние активации Т-клеток и пролиферации эффективно подавляет иммунный ответ in vivo (Waldmann, 1993, Immunology Today, 14, 264-270). Соответственно, агенты, которые ингибируют активацию Т-лимфоцитов и последующую продукцию цитокинов, являются терапевтически пригодными для селективного подавления иммунного ответа у пациентов, нуждающихся в такой иммуносупрессии.

[00200] Тучные клетки играют важную роль в развитии астмы и аллергических заболеваний, высвобождая медиаторы воспаления и цитокины. Антиген-опосредованная аггрегация Fc eRI, высокоаффинных рецепторов иммуноглобулина IgE, приводит к активации тучных клеток (D.B.Corry et al., 1999, Nature, 402, B18-23), запуская таким образом сигнальную систему, ответственную за освобождение медиаторов, в том числе гистамина, протеаз, лейкотриенов и цитокинов (J.R.Gordon et al., 1990, Immunology Today, 11, 458-464). Высвобождение медиаторов приводит к повышению проницаемости сосудов, продуцированию слизи, бронхоспазму, деградации тканей и воспалению, играя, таким образом, ключевую роль в этиологии и симптоматике астмы и аллергических заболеваний.

[00201] Опубликованные данные, полученные в результате экспериментов на нокаутных по ITK-киназе мышах, позволяют предположить, что в отсутствие активной ITK происходит увеличение числа Т-клеток памяти (А.Т.Miller et al., 2002 The Journal of Immunology, 168, 2163-2172). Одним из путей увеличения эффективности вакцинации является стимуляция образования большего количества Т-клеток памяти (S.М.Kaech et al., Nature Reviews Immunology, 2, 251-262). Кроме того, делеция гена ITK у мышей приводит к снижению уровней обусловленной рецепторами Т-клеток (TCR-индуцированной) пролиферации и секреции цитокинов IL-2, ИЛ-4, IL-5, IL-10 и IFN-y (Schaeffer et al, Science 284; 638-641 (1999)), Fowetl et al, Immunity 11, 399-409 (1999), Schaeffer et al, Nature Immunology 2 (12): 1183-1188 (2001))). Иммунологические признаки аллергической астмы у ITK-делетированных (ITK(-)) мышей выражены в меньшей степени. Воспаление легких, эозинофильная инфильтрация и производство слизи в ответ на овальбумин (OVA) у ITK(-) - мышей резко снижены (Mueller et al, Journal of Immunology 170: 5056-5063 (2003)). ITK также вовлечена в формирование атопического дерматита. Было показано, что ген ITK интенсивнее экспрессируется в Т-клетках периферической крови у пациентов с умеренной и/или тяжелой формой атопического дерматита, чем в контрольной группе или в группе пациентов с мягкой формой атопического дерматита (Matsumoto et al, International Archives of Allergy and Immunology 129: 327-340 (2002)).

[00202] Спленоциты RLK-делетированных мышей секретируют в два раза меньшее количество IL-2 по сравнению с клетками животных дикого типа в ответ на предъявление TCR ((Schaeffer et al, Science 284: 638-641 (1999)); а одновременная деления ITK и RLK у мышей приводит к выраженному ингибированию TCR-индуцированных реакций, включая пролиферацию и синтез цитокинов IL-2, IL-4, IL-5 и интерферона-гамма (Schaeffer et al, Nature Immunology 2 (12): 1183-1188 (2001), Schaeffer et al, Science 284: 638-641 (1999)). Работа внутриклеточной сигнальной системы, активируемой при предъявлении TCR, в ITK/RLK-дефицитных Т-клетках нарушена; снижены уровни производства инозитолтрифосфата, подавлены мобилизация кальция, активация МАР-киназного пути и факторов транскрипции NFAT и АР-1 (Schaeffer et al, Science 284: 638-641 (1999), Schaeffer et al, Nature Immunology 2 (12): 483-1188 (2001)).

[00203] Данные соединения являются ингибиторами ITK и поэтому могут применяться для лечения одного или более заболеваний, связанных с активностью ITK-киназы. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает способ лечения ITK-опосредованных расстройств, в том числе стадию введения пациенту, нуждающемуся в лечении указанного заболевания(ий), соединения-предмета настоящего изобретения или содержащих его фармацевтически приемлемых композиций.

[00204] В настоящем описании термин «ITK-опосредованные» заболевания или состояния означает любую болезнь или другие угрожающие здоровью состояния, возникновение которых опосредовано активностью ITK-киназы или ее модифицированных(мутантных) версий. Таким образом, в одном из вариантов осуществления изобретение относится к лечению или уменьшения тяжести течения одного или нескольких заболеваний, возникновение которых опосредовано активностью ITK-киназы или ее модифицированных(мутантных) версий. В частности, настоящее изобретение относится к способу лечения или уменьшения тяжести заболевания или состояния, вызванных функционированием тучных клеток или базофилов, иммунными или аллергическими нарушениями, при этом указанный метод лечения подразумевает введение пациенту соединения или содержащие эти соединения композиции, являющиеся предметом настоящего изобретения.

[00205] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает способ лечения или уменьшения тяжести одного или нескольких заболеваний или состояний, связанных с активностью ITK-киназы, а именно иммунных расстройств, в том числе воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, отторжения трансплантированных органов и костного мозга и других нарушений, связанных с Т-клеточным или опосредованным тучными клетками иммунным ответом.

[00206] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает способ лечения или уменьшения тяжести одного или нескольких заболеваний или состояний, связанных с активностью ITK, а именно острого или хронического воспаления, аллергий, контактного дерматита, псориаза, ревматоидного артрита, рассеянного склероза, сахарного диабета I типа, воспалительных заболеваний кишечника, синдрома Гийена-Барре, болезни Крона, язвенного колита, рака, реакции ТПХ («трансплантат против хозяина») и других форм отторжения трансплантата органа или костного мозга, красной волчанки.

[00207] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает способ лечения или уменьшения тяжести одного или нескольких заболеваний и состояний, связанных с активностью ITK, а именно заболеваний или состояний, вызванных дисфункциями тучных клеток или базофилов, обструктивной болезни дыхательных путей, астмы, ринита, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), периферической лимфомы Т-клеток или ВИЧ [синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД)]. Такие состояния включают описанные у Readinger, et al., PNAS 105: 6684-6689 (2008).

(е) Семейство JAK-киназ

[00208] Янус-киназы (JAK) - семейство тирозинкиназ, состоящее из JAK1, JAK2, JAK3 и TYK2. Jak-киназы играют важную роль в цитокиновой сигнализации. Субстраты JAK-киназ включают белок-трандуктор сигнала и активатор транскрипции (STAT). JAK/STAT сигнализация задействована при различных нарушениях иммунного ответа, таких, как аллергии, астма, аутоиммунные заболевания: отторжение трансплантатов, ревматоидный артрит, боковой амиотрофический склероз и рассеянный склероз, а также злокачественные новообразования: опухоли и гемобластозы, такие, как лейкоз и лимфома Фармацевтическое вмешательства в активность JAK/ STAT сигнального пути было рассмотрено у [Frank, Mol. Med. 5: 432-456 (1999) & Seidel, et al, Oncogene 19: 2645-2656 (2000)].

[00209] JAK1, JAK2, и TYK2 экспрессируются во всех клетках, в то время как JAK3 по существу экспрессируется в кроветворных клетках. JAK3 избирательно связывается с гамма цепью цитокинового рецептора (γС) и активируется интерлейкинами IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 и IL-15.

[00210] Было показано, что пролиферация и выживание тучных клеток мышей, индуцированных IL-4 и IL-9, зависит от JAK3 и γС-сигнализации [Suzuki et al, Blood 96: 2172-2180 (2000)].

[00211] Перекрестное связывание высокоаффинных иммуноглобулиновых IgE рецепторов в сенсибилизированных тучных клетках приводит к освобождению медиаторов воспаления, в том числе ряда вазоактивных цитокинов; в результате формируется острая аллергическая реакция, или реакция гиперчувствительности немедленного типа (типа I), [Gordon et al, Nature 346: 274-276 (1990) & Galli, N. Eng). J. Med., 328: 257-265 (1993)]. Была установлена решающая роль JAK3 в опосредованном рецепторами IgE ответе тучных клеток in vitro и in vivo [Malaviya, et al, Biochem. Biophys. Res. Commun. 257: 807-813 (1999)]. Кроме того, было показано, что предотвращение реакций гиперчувствительности I типа, в том числе анафилактического шока, опосредовано активацией тучных клеток ингибированием JAK3 [Malaviya et al, J. Biol. Chem. 274: 27028-27038 (1999)]. Обработка тучных клеток ингибиторами JAK3 модулирует дегрануляцию тучных клеток in vitro и предотвращает IgE-R/антиген-oпocpeдoвaннst анафилактические реакции in vivo.

[00212] Недавние исследования успешно подтвердили роль JAK3 в подавлении иммунитета и приживлении аллотрансплантатов. Было продемонстрировано дозозависимое приживление аллотрансплантата сердца буйвола у крыс линии Вистар (Wistar Furth) при введении ингибиторов JAK3, что указывает на возможность регулирования нежелательных иммунных реакций «трансплантат против хозяина» [Kirken, Transpl. Proc. 33: 3268-3270 (2001)].

[00213] IL-4-опосредованное STAT-фосфорилирование, как установлено, вовлечено в формирование ранних и поздних стадий ревматоидного артрита (РА). Позитивная регуляция активности цитокинов воспаления синовиальной оболочки и синовиальной жидкости при РА является характеристикой данного заболевания. Показано, что IL-4-опосредованная активация IL-4/STAT пути опосредована янус-киназами (JAK 1 и 3), и что IL-4-ассоциированные JAK-киназы экспрессируются в синовиальной оболочке при РА [Muller-Ladner, et al, J. Immunol. 164: 3894-3901 (2000)].

[00214] Семейный боковой амиотрофический склероз (FALS) является фатальным нейродегенеративным расстройством, поражающим около 10% от пациентов, страдающих от бокового амиотрофического склероза. Выживаемость мышей с синдромом FALS увеличивается при введении им специфического ингибитора JAK3-киназы. Это подтверждает, что JAK3 играет определенную роль в формировании FALS [Trieu и др., Biochem. Biophys. Res. Commun. 267: 22-25 (2000)].

[00215] Белок-трансдуктор сигнала и активатор транскрипции (STAT-белки) активируются, в частности, киназами семейства JAK. Результаты недавнего исследования указывают на возможность вмешательства в JAK/STAT сигнальную систему путем модуляции активности янус-киназ специфическими ингибиторами при лечении лейкемии [Sudbeck, et al., Clin. Cancer Res. 5: 1569-1582 (1999)]. JAK3-специфические агенты препятствуют клональной пролиферации JAK3-экспрессирующих клеточных линий DAUDI, RAMOS, LC1; 19, NALM-6, MOLT-3 и HL-60. Ингибирование JAK3 и TYK 2 блокирует тирозин-фосфорилирование STAT3 и останавливает пролиферацию клеток фунгоидной гранулемы (формы кожной Т-клеточной лимфомы).

[00216] В другом варианте осуществления изобретение относится к способу лечения или уменьшения тяжести JAK3-опосредованных заболеваний или состояний, включающий стадию введения пациенту, страдающему от указанного заболевания/состояния, композиции, являющейся предметом настоящего изобретения..

[00217] Термин «JAK3-опосредованное заболевание», используемый здесь, означает какое-либо заболевание или другое патологическое состояние, в формировании которого участвует JAK3-киназа. Соответственно, в одном из вариантов осуществления, настоящее изобретение включает способ лечения или уменьшения тяжести одного или нескольких заболеваний, в формировании которого участвует JAK3-киназа. В частности, настоящее изобретение относится к способу лечения или уменьшения тяжести заболевания или состояния из следующих перечисленных: иммунные реакции, такие, как аллергические реакции или реакции гиперчувствительности I типа; астма; аутоиммунные заболевания, такие, как отторжение трансплантатов, реакции «трансплантат против хозяина», ревматоидный артрит, боковой амиотрофический склероз, рассеянный склероз; нейродегенеративные расстройства, таких как семейный боковой амиотрофический склероз (Fals), а также злокачественные опухоли и болезни крови, такие, как лейкозы и лимфомы, когда данный способ лечения включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, композиции, являющейся предметом настоящего изобретения.

[00218] Соединения и их композиции, в соответствии с методикой, представленной в настоящем изобретении, могут быть введены в любых дозах и любыми способами, эффективными для лечения или уменьшения тяжести рака, аутоиммунных расстройств, нейродегенеративных и неврологических расстройств, шизофрении, заболеваний костей, болезней печени и сердца. Дозировка зависит от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного типа лекарственного вещества, формы введения и т.п. Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно должны быть представлены в лекарственных формах, удобных для приема и обеспечивающих однородность единиц дозирования. Термин «лекарственная форма», используемый здесь, относится к физически дискретной единице лекарственного вещества, назначаемого при терапии. Необходимо понимать, что совокупное количество соединения-предмета настоящего изобретения и его композиций, назначаемое пациенту ежедневно, должно определяться лечащим врачом по результатам тщательного медицинского обследования. Эффективная доза для каждого конкретного пациента/организма зависит от ряда факторов, включая характер заболевания и степень его тяжести, активность конкретного используемого соединения; характеристики используемого препарата, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и рацион пациента; время введения, способ введения и скорость выведения из организма конкретного используемого соединения; длительность лечения; лекарства, используемые параллельно или в комбинации с конкретным соединением, и т.п. факторы, известные специалистам. Термин «пациент», используемый здесь, означает животных, преимущественно млекопитающих, и чаще всего людей.

[00219] Фармацевтически приемлемые композиции, составляющие предмет данного изобретения, могут быть введены людям и животным орально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, внутрибрюшинно, местно (в виде порошков, мазей, капель), буккально (сублингвально), распылением в носовую/ротовую полость (в виде спрея) и т.п., в зависимости от тяжести инфекции. В некоторых вариантах осуществления соединения - предмет настоящего изобретения могут быть введены перорально или парентерально в дозировке 0,01-50 мг/кг, предпочтительно от 1 мг/кг до приблизительно 25 мг/кг массы тела, один или несколько раз в день, для получения желаемого терапевтического эффекта.

[00220] Жидкие лекарственные формы для перорального применения включают (но не ограничиваются ими) фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо активных компонентов жидкие лекарственные формы могут содержать стандартные инертные разбавители, например, воду или другие растворители, солюбилизирующие агенты, эмульгаторы, такие, как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензил бензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутилен гликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло зародышей пшеницы, оливковое, касторовое, кунжутное), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоль и сложные эфиры жирных кислот сорбитана, и их смеси. Кроме инертных разбавителей составы для перорального применения могут включать вспомогательные вещества, такие как увлажняющие агенты, эмульгаторы и замедлители растворения, подсластители, ароматизаторы, ароматизаторы.

[00221] Препараты для инъекций, например, стерильные инъекционные водные или масляные суспензии могут быть приготовлены в соответствии с общеизвестными методиками, с использованием подходящих диспергирующих или увлажняющих агентов и суспендирующих агентов. Стерильный инъекционный препарат может быть также представлен стерильным инъекционным раствором, суспензией и эмульсией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе/растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Примеры приемлемых связующих/растворителей: вода, раствор Рингера, U.S.P. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, часто в качестве связующих/растворителей применяются стерильные жирные масла. С этой целью может быть использовано любое нейтральное жирное масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, для приготовления инъекций используются жирные кислоты, например, олеиновая кислота.

[00222] Составы для инъекций могут быть стерилизованы, например, путем фильтрации через бактериальный фильтр, или путем включения стерилизующих агентов в виде твердых стерильных композиций, которые перед использованием могут быть растворены или суспензированы в стерильной воде или других стерильных инъекционных средах.

[00223] Для пролонгации эффекта соединения - предмета настоящего изобретения, часто желательно замедлить всасывание действующего вещества, введенного подкожно или внутримышечно. Это может быть достигнуто путем использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного вещества, плохо растворимого в воде. Скорость всасывания соединения в этом случае будет зависеть от скорости растворения указанного вещества, что, в свою очередь, зависит от размера кристаллов и типа кристаллизации. Кроме того, при парентеральном введении замедлить всасывание можно путем растворения или суспензирования соединения в масляном связующем. Лекарственные формы для инъекций замедленного всасывания изготавливаются путем встраивания микрокапсул с действующим веществом в биоразлагаемые полимеры, такие, как полилактид-полигликоль. Скорость всасывания соединения может регулироваться, так как зависит от изменений количественного соотношения соединения и полимера, и свойств конкретного используемого полимера. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Составы для инъекций замедленного всасывания также могут быть изготовлены путем помещения действующего вещества в липосомы или путем приготовления микроэмульсий, совместимых с тканями организма.

[00224] Составы для ректального или вагинального введения, предпочтительно в форме суппозиториев, могут быть получены путем смешивания соединений, являющихся предметом данного изобретения, с подходящими нераздражающими наполнителями или носителями, такими, как какао-масло, полиэтиленгликоль или воск; твердыми при комнатной температуре и жидкими при температуре тела, и поэтому растворяющимися в прямой кишки или вагинальной полости, высвобождая активное вещество.

[00225] Твердые лекарственные формы для перорального применения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение смешивают по крайней мере с одним инертным, фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом или носителем, например, с цитратом натрия или дикальцийфосфатом и/или а.) наполнителями и добавками, такими, как крахмал, лактоза, сахароза, глюкоза, маннитол, кремниевая кислота; б) связующими веществами, такими, как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза, гуммиарабик; в.) влагоудерживающие вещества, такие как глицерин г.), разрыхлители, например, агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты, карбонат натрия; д.) замедлители растворения, такие как парафин; е.) ускорители абсорбции, например, соединения четвертичного аммония; ж.) увлажняющие агенты, такие, как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина; з.) абсорбенты, например, каолин и бентонитовая глина; и.) любриканты, такие, как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственная форма может также содержать буферизующие вещества.

[00226] Подобные твердые композиции могут быть также использованы при изготовлении желатиновых капсул с мягким/твердым содержимым в качестве наполнителей, в этом случае могут быть использованы лактоза (молочный сахар), полиэтиленгликоли с высокими молекулярными массами и т.п. Твердые лекарственные формы - таблетки, драже, капсулы, пилюли, гранулы - могут производиться с разнообразными покрытиями и оболочками, согласно используемым в фармацевтической промышленности рецептурам, например, кишечнорастворимыми (энтеросолюбильными) и пр. Они могут дополнительно содержать замутняющие агенты, а также могут иметь состав, обеспечивающий высвобождение активного ингредиента/ингредиентов только или преимущественно в определенной части кишечного тракта, иногда отложенное во времени. Примеры капсулирующих композиций, которые могут быть использованы при производстве лекарственных форм, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции указанного типа могут быть также использованы в качестве наполнителей в желатиновых капсулах с мягким/твердым содержимым, включающим такие вспомогательные вещества, как лактоза (молочный сахар), высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п..

[00227] Активные соединения могут также быть представлены микроинкапсулированными формами, в состав которых входит одно или несколько вспомогательных веществ из описанных выше. Твердые лекарственные формы - таблетки, драже, капсулы, пилюли, гранулы - могут производиться с различными покрытиями/оболочками, например, кишечнорастворимым покрытием, покрытием, контролирующим высвобождение действующего вещества и пр., согласно применяемым в фармацевтике рецептурам. В таких твердых лекарственных формах активные вещества могут быть смешаны по крайней мере с одним инертным разбавителем, таким, как сахароза, лактоза или крахмал. Обычной практикой является также добавление в такие лекарственные формы дополнительных веществ, помимо инертных разбавителей, например, смазочных веществ и других вспомогательных таблетирующих агентов, таких, как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. При производстве капсул, таблеток и пилюль лекарственные формы могут также содержать буферные агенты. Они могут дополнительно содержать замутняющие агенты, а также могут иметь состав, обеспечивающий высвобождение активного ингредиента/ингредиентов только или преимущественно в определенной части кишечного тракта, иногда отложенное во времени. Примеры капсулирующих композиций, которые могут быть использованы при производстве этих лекарственных форм, включают полимерные вещества и воски.

[00228] Лекарственные формы соединений, являющихся предметом настоящего изобретения, для местного применения или чрескожного введения включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляторы и пластыри. Активные компоненты смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами и буферизующими веществами. Офтальмологические препараты, ушные капли и глазные капли также входят в состав данного изобретения. Кроме того, настоящее изобретение предусматривает использование трансдермальных пластырей, которые имеют дополнительное преимущество, обеспечивая контролируемое поступление действующего вещества в организм. Такие лекарственные формы могут быть изготовлены путем растворения или разведения действующего вещества в подходящей среде. Для увеличения эффективности проникновения через кожу могут быть использованы усилители абсорбции. Скорость проникновения можно регулировать либо при помощи мембраны, обеспечивающей определенный уровень поступления действующего вещества, либо путем диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.

[00229] В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу ингибирования активности протеинкиназы в биологическом образце, включая стадию осуществления контакта биологической пробы с соединением - предметом данного изобретения, или композиции, содержащей указанное соединение.

[00230] В другом варианте осуществления изобретение относится к способу ингибирования активности ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС-киназы и/или JAK3, или их модифицированных (мутантных) версий в биологическом образце, включая стадию осуществления контакта биологического образца с соединением-предметом данного изобретения, или композиции, содержащей указанное соединение. В некоторых вариантах, изобретение относится к методу необратимо ингибирующие ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЭС-киназы, и/или JAK3, или мутант их, деятельности в биологическом образце, включающий стадию осуществления контакта биологических образцов с соединением согласно настоящему изобретению, или композиции, содержащей указанное соединение.

[00231] В настоящем описании термин «биологический образец» включает в себя неограниченные варианты культур клеток или их экстрактов, материалы биопсии, полученные из тканей млекопитающих или их экстрактов, а также кровь, слюну, мочу, кал, сперму, слезы или другие жидкости или их экстракты.

[00232] Ингибирование протеинкиназной активности, или активности протеинкиназ из следующих перечисленных: ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС-киназы и/или JAK3, или их модифицированных (мутантных) версий в биологических образцах может быть использовано с различными целями, очевидными для специалистов, включая следующие примеры (но не ограничиваясь ими): переливание крови, пересадка органов, хранение биологических образцов и биологических проб.

[00233] В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу ингибирования активности протеинкиназы в организме пациента, включая стадию введения указанному пациенту соединения-предмета настоящего изобретения, или композиции, содержащей указанное соединение.

[00234] В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу ингибирования активности одной или нескольких киназ из следующих перечисленных: ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС-киназы, и/или JAK3, или их модифицированных (мутантных) версий, в организме пациента, включая стадию введения указанному пациенту соединения-предмета настоящего изобретения, или композиции, содержащей указанное соединение. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к методу необратимого ингибирования активности одной или нескольких киназ из следующих перечисленных: ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС-киназы, и/или JAK3, или их модифицированных (мутантных) версий, в организме пациента, включая стадию введения указанному пациенту соединения-предмета настоящего изобретения, или композиции, содержащей указанное соединение. В других вариантах осуществления настоящее изобретение включает способ лечения заболеваний (расстройств), опосредованных активностью одной или нескольких киназ из следующих перечисленных: ErbB1, ErbB2, ErbB3, ERBB4, ТЕС-киназы, и/или JAK3, или их модифицированных (мутантных) версий, у пациентов, нуждающихся в этом, включая стадию введения указанному пациенту соединения-предмета настоящего изобретения или фармацевтически приемлемой композиции, включающей указанное соединение. Такие заболевания (расстройства) подробно описаны здесь.

[00235] В зависимости от конкретного целевого состояния или заболевания, в композиции-предмете данного изобретения могут присутствовать дополнительные лекарственные средства, обычно назначаемые при терапии данного состояния/заболевания. Такие дополнительные лекарственные средства, назначаемые для лечения конкретного заболевания, упоминаются здесь как «принятые для лечения данного заболевания или состояния»

[00236] Например, соединения согласно настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые композиции назначают в сочетании с химиотерапевтическими препаратами для лечения пролиферативных заболеваний и рака. Примеры известных химиотерапевтических препаратов включают (не ограничиваясь перечисленными): адриамицин, дексаметазон, винкристин, циклофосфамид, фторурацил, топотекан, таксол, интерфероны, производные платины, таксан (например, паклитаксел), алкалоиды барвинка (например, винбластин), антрациклины (например, доксорубицин), эпиподофиллотоксины (например, этопозид), цисплатин, ингибиторы MTOR (например, рапамицин), метотрексат, актиномицин D, доластатин 10, колхицин, эметин, триметрексат, метоприн, циклоспорин, даунорубицин, тенипосид, амфотерицин, алкилирующие агенты (например, хлорамбуцил), 5-фторурацил, камптотецин, цисплатин. метронидазол, «Гливек»™ и др. В других вариантах осуществления соединения согласно настоящему изобретению вводят в сочетании с биологическим агентом, таким как «Авастин» или VECTIBIX.

[00237] В некоторых вариантах осуществления соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения или их фармацевтически приемлемые композиции вводятся в сочетании с одним или несколькими антипролиферативными или химиотерапевтическими веществами, выбранными из следующих: абареликс, альдеслейкин, алемтузумаб. алитретиноин, аллопуринол, альтретамин, амифостин, анастрозол, триоксид мышьяка, аспарагиназа, азацитидин, живая БЦЖ, бевацизумаб, фторурацил, бексаротен, блеомицин, бортезомиб, бусульфан, калустерон, капецитабин, камптотецин, карбоплатин, кармустин, целекоксиб, цетуксимаб, хлорамбуцил, кладрибин, клофарабин, циклофосфамид, цитарабин, дактиномицин, дарбепоэтин альфа, даунорубицин, денилейкин, декеразоксан, доцетаксел, доксорубицин (нейтральный), доксорубицина гидрохлорид, дромостанолон пропионат, эпирубицин, эпоэтин альфа, эрлотиниб, эстрамустин, этопозида фосфат, этопозид, экземестан, филграстим, флоксуридин, флударабин, фулвестрант, гефитиниб, гемцитабин, гемтузумаб, госерелина ацетат, гистрелина ацетат, гидроксимочевина, ибритумомаб, идарубицин, ифосфамид, иматиниба мезилат, интерферон альфа-2а, интерферон альфа-2b, иринотскан, леналидомид, летрозол, лейковорин, лейпролида ацетат, левамизол, ломустин, мегестрол ацетат, мелфалан, меркаптопурин, 6-меркаптопурин, месна, метотрексат, метоксален, митомицин С, митотан, митоксантрон, нандролон, неларабин, нофетумомаб, опрелвекин, оксалиплатин, паклитаксел, налифермин, памидронат, пегадемаза, пегаспаргаза, пэгфилграстим, пеметрексед динатрия, пентостатин, пипоброман, пликамицин, порфимер натрия, прокарбазин, акрихин, расбуриказа, ритуксимаб, сарграмостим, сорафениб, стрептозоцин, сунитиниб малеат, тальк, тамоксифен, темозоломид, тенипозид, VM-26, тестолактон, тиогуанин, 6-тиогуанин, тиотепа, топотекана, торемифен, тоситумомаб, трастузумаб, третиноин, ATRA, урамустин, вальрубицин, винбластин, винкристин, винорельбин, золедронат или золедроновая кислота.

[00238] Примеры других агентов, с которыми могут быть скомбинированы ингибиторы, являющиеся предметом данного изобретения, включают (без ограничения): препараты для лечения болезни Альцгеймера, такие, как доненезила гидрохлорид (Арисепт®) и ривастигмин (Экселон®); препараты для лечения болезни Паркинсона, такие как леводопа/карбидопа, энтакапон, ропинирол, прамипексол, бромокриптин, перголид, тригексифенидил и амантадин; средства для лечения рассеянного склероза, такие как бета-интерферон (например, Авонекс® и Ребиф®), глатирамера ацетат (Копаксон®) и митоксантрон; препараты для лечения астмы, такие, как альбутерол и монтелукаст (Сингуляр®); препараты для лечения шизофрении, такие, как зипрекса, риспердал, сероквель и галоперидол; противовоспалительные средства, такие как кортикостероиды, блокаторы ФНО (фактора некроза опухолей), ИЛ-1 РА (блокаторы интелейкина-1), азатиоприн, циклофосфамид и сульфасалазин; иммуномодулирующие и иммуносупрсссивные препараты, такие, как циклоспорин, такролимус, рапамицин, микофеполата мофетил, интерфероны, кортикостероиды, циклофосфамид, азатиоприн, сульфасалазин; и нейротрофические факторы, такие, как ингибиторы ацетилхолинэстеразы, ингибиторы моноаминоксидазы, интерфероны, противосудорожные препараты, блокаторы ионных каналов, рилузол; препараты для лечения болезни Паркинсона; препараты для лечения сердечно-сосудистых заболеваний - бета-блокаторы, ингибиторы АПФ (ангиотензинпревращающего фермента), диуретики, нитраты, блокаторы кальциевых каналов и статины; препараты для лечения заболеваний печени - кортикостероиды, холестирамин, интерфероны; антивирусные препараты; препараты для лечения заболеваний крови - кортикостероиды, антилейкемические препараты, факторы роста, а также препараты для лечения иммунодефицитных состояний, такие, как гамма-глобулин.

[00239] В некоторых вариантах осуществления соединения согласно настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые композиции вводят в сочетании с моноклональными антителами или препаратами миРНК.

[00240] Эти дополнительные средства могут вводиться отдельно от композиций, содержащих соединения - предмет данного изобретения, в составе комплексной схемы лечения. Также эти средства могут быть частью одной лекарственной формы, составляя единую композицию вместе с соединением-предметом этого изобретения. При назначении в составе комплексной схемы, два активных вещества могут приниматься одновременно, последовательно или с временным интервалом, обычно равным пяти часам.

[00241] Используемые здесь термины «сочетание», «комбинация», «комбинированный» и связанные с ними термины относятся к одновременному или последовательному назначению лекарственных средств в соответствии с настоящим изобретением. Например, соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут быть введены одновременно или последовательно с другим лекарственным средством, в виде отдельных лекарственных форм или в составе одной лекарственной формы. Таким образом, настоящее изобретение касается дозированных единичных лекарственных форм, включающих указанные соединения, дополнительные лекарственные средства и фармацевтически приемлемые вещества-носители, вспомогательные или связующие вещества.

[00242] Количество обоих веществ: соединения-предмета изобретения и дополнительного лекарственного средства (в тех композициях, которые включают дополнительное лекарственное средство, как описано выше), которое может быть соединено с веществами-носителями для производства одной лекарственной формы, будет меняться в зависимости от целевого объекта и способа введения. Преимущественно, рецептура композиций согласно настоящему изобретению должна обеспечивать возможность введения указанной композиции в дозировке 0,01-100 мг/кг массы тела в день.

[00243] В композициях, включающих дополнительное лекарственное средство, данное дополнительное лекарственное средство и соединение-предмет данного изобретения могут действовать синергически (взаимно усиливая эффект от применения). Таким образом, количество дополнительного лекарственного средства в таких композициях будет меньше, чем требуется при мототерапии с использованием одного указанного лекарственного средства. При терапии с использованием указанных композиций может назначаться дополнительное лекарственное средство в дозировках 0,01-1,000 µг/кг массы тела в день.

[00244] Количество дополнительного лекарственного средства в составах, являющихся предметом данного изобретения, не будет превышать количество, в норме присутствующее в композициях, где лекарственное средство является единственным активным веществом. Преимущественно, количество дополнительного лекарственного средства в данных композициях будет варьировать от 50% до 100% от количества, в норме присутствующего в композициях, где лекарственное средство является единственным активным веществом.

[00245] Соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, или фармацевтические композиции, в состав которых входят указанные соединения, также могут быть включены в составы для покрытия имплантируемых медицинских устройств, таких как протезы, искусственные клапаны, сосудистые импланты, стенты и катетеры. Сосудистые стенты, например, используются для профилактики рестеноза (повторного сужения просвета сосуда). Однако при использовании стентов или других имплантируемых устройств существует риск образования тромбов или активации тромбоцитов. Эти нежелательные эффекты могут быть предотвращены или смягчены путем предварительного покрытия имплантируемое устройства фармацевтически приемлемым составом, содержащим ингибитор киназной активности. Имплантируемые устройства, покрытые соединением-предметом данного изобретения, также являются вариантом осуществления настоящего изобретения.

5. Соединения-зонды

[00246] В некоторых аспектах соединение согласно настоящему изобретению может быть связано с детектируемой группой с образованием соединения-зонда. В одном аспекте соединение-зонд согласно настоящему изобретению включает необратимый ингибитор протеинкиназы формулы I-а или I-b, как описано выше, детектируемую группу и связывающую группу, которая присоединяет ингибитор к детектируемой группе.

[00247] В некоторых вариантах осуществления такие соединения-зонды включают предложенное соединение формулы I-а или I-b, связанное с детектируемой группой, R^t, бивалентной связывающей группой, -Т-. Связывающая группа может быть присоединены к соединению формулы I-а или I-b через Кольцо Л, Кольцо В или, что если связывающая группа присоединена к R¹, R¹ представляет собой бивалентную реакционную группу, обозначенную R^1'. В некоторых вариантах осуществления предложенное соединение-зонд выбрано из соединений любой из формул V-a, V-b, VI-a, VI-b, VII-a или VII-b:

где каждый из Кольца А, Кольца В, R¹, m, р, R^x, R^y, R^v, W¹ и W² имеет значение, приведенные выше для формул I-а и I-b и описанные в классах и подклассах в настоящему тексте R^1' представляет собой бивалентную реакционноспособную группу, Т представляет собой бивалентную соединительную группу; и R^t представляет собой бивалентную детектируемую группу.

[00248] В некоторых вариантах осуществления R^t представляет собой бивалентную детектируемую группу, выбранную из первичной метки и вторичной метки. В некоторых вариантах осуществления R^t представляет собой бивалентную детектируемую группу, выбранную из флюоресцентной метки (например, флюоресцентного красителя или флюорофора), масс-метки, хемилюминесцентной группы, хромофора, электронно-плотной группы или вещества, переносящего энергию.

[00249] В настоящем тексте термин «детектируемая метка» используется взаимозаменяемо с терминами «метка» и «репортер» и относится к любой группе, которую можно детектировать, например, к первичным метками и вторичным меткам. Присутствие детектируемой группы моет быть измерено с использованием методов количественного анализа (в абсолютных, приблизительных или относительных единицах) детектируемой группы в исследуемой системе. В некоторых вариантах осуществления такие методы хорошо известны средним специалистам в данной области и включают любые методы количественного анализа репортерной группы (например, метки, красителя, агента, образующего поперечные сшивки под действием света, цитотоксического соединения, лекарственного средства, аффинной метки, реактивного соединения, антитела или фрагмента антитела, биоматериала, наночастицы, спиновой метки, флюорофора, металл-содержащего соединения, радиоактивной группы, квантовой точки (точек), новой функциональной группы, группы, которая ковалентно или нековалентно взаимодействует с другими молекулами, фотосвязываемой группы, группы, возбуждаемой актиничным излучением, лиганда, фотоизомеризуемого соединения, биотина, аналога биотина (например, биотин сульфоксида), фрагмента, содержащего тяжелый атом, химически расщепляемой группы, фоторасщепляемой группы, редокс-активного агента, группы, меченой изотопом, биофизического зонда, фосфоресцентной группы, хемилюминесцентной группы, электронноплотной группы, магнитной группы, интеркалирующей группы, хромофора, агента, переносящего энергию, биологически активного вещества, детектируемой метки и любой комбинации вышеперечисленного).

[00250] Первичные метки, такие как радиоизотопы (например, тритий, ³²Р, ³³Р, ³⁵S, ¹⁴С, ¹²³I, ¹²⁴I, ¹²⁵I или ¹³¹I), масс-метки, включая, без ограничения, стабильные изотопы (например, ¹³С, ²Н, ¹⁷О, ¹⁸О, ¹⁵N, ¹⁹F и ¹²⁷I), позитрон-испускающие изотопы (например, ¹¹С, ¹⁸F, ¹³N, ¹²⁴I и ¹⁵О) и флюоресцентные метки, представляют собой репортерные группы, генерирующие сигнал, которые моно детектировать без дополнительных модификаций. Детектируемые группы можно анализировать способами, включающими, но не ограничивающимися перечисленными: флюоресценция, позитронно-эмиссионная томография, медицинская визуализация SPECT, хемилюминесценция, электрон-спиновый резонанс, спектроскопия поглощения в УФ- и видимой области, масс-спектрометрия, ядерный магнитный резонанс, магнитный резонанс, проточная цитометрия, авторадиография, регистрация сцинтилляции и методы электрохимии.

[00251] Термин «вторичная метка» в настоящем тексте относится к группам, таким как биотин и антигены различных белков, которые генерируют детектируемый сигнал только в присутствии второго промежуточного соединения. Для биотина вторичным промежуточным соединением могут быть конъюгаты стрептавидин-фермент. Для меток, являющихся антигенами, вторичные промежуточные соединения могут включать конъюгаты антитело-фермент. Некоторые флюоресцентные группы действуют как вторичные метки, поскольку они переносят энергию на другую группу в процессе нерадиоактивного резонансного переноса энергии (FRET), и указанная вторая группа генерирует сигнал.

[00252] Термины «флюоресцентная метка», «флюоресцентный краситель» и «флюорофор» в настоящем тексте относятся к группам, которые поглощают энергию света на определенной длине волны возбуждения и испускают световую энергию на другой длине волны. Примеры флюоресцентных меток включают, но не ограничиваются перечисленными: (Alexa Fluor 350, Alexa Fluor 488, Alexa Fluor 532, Alexa Fluor 546, Alexa Fluor 568, Alexa Fluor 594, Alexa Fluor 633, Alexa Fluor 660 и Alexa Fluor 680), AMCA, AMCA-S, BODIPY dyes (BODIPY FL, BODIPY R6G, BODIPY TMR, BODIPY TR, BODIPY 493/503, BODPPY 530/550, BODIPY 558/568, BODIPY 564/570, BODIPY 576/589, BODIPY 581/591, BODIPY 630/650, BODIPY 650/665), Карбоксиродамин 6G, карбокси-Х-родамин (ROX), Cascade Blue, Cascade Yellow, Coumarin 343, цианиновые красители (Су3, Су5, Су3.5, Су5.5), Dansyl, Dapoxyl, диалкиламинокумарин, 4',5'-дихлор-2',7'-диметокси-флюоресцин, DM-NERF, Eosin, Erythrosin, Fluorescein, FAM, Гидроксикумерин, IRDyes (IRD40, IRD 700, IRD 800), JOE, Lissamine rhodamine B, Marina Blue, Methoxycoumarin, Naphthofluorescein, Oregon Green 488, Oregon Green 500, Oregon Green 514, Pacific Blue, PyMPO, Pyrene, Rhodamine B, Rhodamine 6G, Rhodamine Green, Rhodamine Red, Rhodol Green, 2',4',5',7'-тетра-бромсульфон-флюоресцеин, тетраметил-родамин (TMR), карбокситетраметилродамин (TAMRA), Texas Red, Texas Red-X, 5(6)-карбоксифлюоресцеин, 2,7-Dichlorofluorescein, N,N-Bis(2,4,6-trimethylphenyl)-3,4:9,10-perylenebis(dicarboximide, HPTS, Ethyl Eosin, DY-490XL MegaStokes, OY-485XL MegaStokes, Adirondack Green 520, ATTO 465, ATTO 488, ATTO 495, YOYO-1,5-FAM, BCECF, дихлорфлюоресцеин, родамин ПО, родамин 123, YO-PRO-1, SYTOX Green, Sodium Green, SYBR Green 1, Alexa Fluor 500, F1TC, Fluo-3, Fluo-4, fluoro-emerald, YoYo-1 ssDNA, YoYo-1 dsDNA, YoYo-1, SYTO RNASelect, Diversa Green-FP, Dragon Green, EvaGreen, Surf Green EX, Spectrum Green, NeuroTrace 500525, NBD-X, MitoTracker Green FM, LysoTracker Green DND-26, CBQCA, PA-GFP (пост-активационный), WEGFP (пост-активационный), FlASH-CCXXCC, Azami Green мономерный, Azami Green, зеленый флюоресцирующий белок (GFP), EGFP (Campbell Tsien 2003), EGFP (Patterson 2001), Kaede Green, 7-бензиламино-4-нитробенз-2-окса-1,3-диазол, Bexl, Doxorubicin, Lumio Green и SuperGlo GFP.

[00253] Термин «масс-метка» в настоящем тексте относится к любой группе, которую возмоно однозначно детектировать по ее массе посредством методик детектирования на основе масс-спектрометрии (MS). Примеры масс-меток включают метки, высвобождающие электрофор, такие как N-[3-[4'-[(p-метокситетрафторбензил)окси]венил]-3-метилглицсронил]изонипекотиновая кислота, 4'-[2,3,5,6-тетрафтор-4-(пентафторфеноксил)]метил ацетофенон и их производные. Синтез и использование этих масс-меток описаны в патентах США 4,650,750, 4,709,016, 5,360,8191, 5,516,931, 5,602,273, 5,604,104, 5,610,020 и 5,650,270. Другие примеры масс-меток включают, но не ограничиваются перечисленными: нуклеотиды, дидеоксинуклеотиды, олигонуклеотиды различной длины и состава оснований, олигопептиды, олигосахариды и другие синтетические полимер, имеющие различную длину и состав мономеров. Разнообразные органические молекулы как нейтральные, так и заряженные (биомолекулы и синтетические соединения), масса которых лежит в подходящем диапазоне (100-2000 Дальтон), также моно использовать в качестве масс-меток. Также в качестве масс-меток моно использовать стабильные изотопы (например, ¹³С, ²Н, ¹⁷О, ¹⁸О, и ¹⁵N).

[00254] Термин «хемилюминесцентная группа» в настоящем тексте относится к группе, которая испускает свет в результате химической реакции без добавления тепла. В качестве пример, люмино(5-амино-2,3-дигидро-1,4-фталазиндион) реагирует с окисляющими веществами, такими как перекись водорода (Н₂О₂) в присутствии основания и металлического катализатора с образованием продукта в возбужденном состоянии (3-аминофталат, 3-АРА).

[00255] Термин «хромофор» в настоящем тексте относится к молекуле, которая поглощает свет видимых длин волн, УФ длин волн или ИК длин волн.

[00256] Термин «краситель» в настоящем тексте относится к растворимому красящему веществу, которое включает хромофор.

[00257] Термин «электронно-плотная группа» в настоящем тексте относится к группе, которая при облучении пучком электронов рассеивает электроны. Такие группы включают, но не ограничиваются перечисленными: молибдат аммония, субнитрат висмута, иодид кадмия, карбогидразид, гексагидрат хлорида железа, гексаметилен тетрамин, безводный трихлорид индия, нитрат лантана, тригидрат цитрата свинца, нитрат свинца, периодная кислота, фосфомолибденовая кислота, фосфовольфрамовая кислота, феррицианид калия, рутениевый красный, нитрат серебра, протеинат серебра (Тест на Ag: 8.0-8.5%) «Strong», тетрафенилпорфин серебра (S-TPPS), хлораурат натрия, вольфрамат натрия, нитрат таллия, тиосемикарбазид (TSC), уранилацетат, уранил сульфат и ванадил сульфат.

[00258] Термин «вещество, переносящее энергию» в настоящем тексте относится к молекуле, которая либо отдает, либо принимает энергию от другой молекулы. Исключительно в качестве примера: флюоресцентный резонансный перенос энергии (FRET) представляет собой процесс диполь-дипольного взаимодействия, в результате которого энергия возбужденного состояния флюоресцентной молекулы-донора нерадиоактивным путем переносится на невозбужденную молекулу-акцептор, которая затем испускает полученную энергию на более длинных волнах (флюоресцирует).

[00259] Термин «группа, включающая тяжелый атом» в настоящем тексте относится к группе, которая включает ион или атом, который обычно тяжелее углерода. В некоторых вариантах осуществления такие ионы или атомы включают, но не ограничены перечисленными: кремний, вольфрам, золото, свинец и уран.

[00260] Термин «фотоаффинная метка» в настоящем тексте относится к метке с группой, которая под воздействием света образует связь с молекулой, к которой эта метка обладает аффинностью.

[00261] Термин «фотосвязываемая группа» в настоящем тексте относится к группе, которая после освещения на определенной длине волны ковалентно или нековалентно связывается с другими ионами или молекулами.

[00262] Термин «фотоизомеризуемая группа» в настоящем тексте относится к группе, которая после освещения светом переходит из одной изоформы в другую.

[00263] Термин «радиоактивная группа» в настоящем тексте относится к группе, ядра которой спонтанно выдают ядерное излучение, такое как альфа-, бета-, или гамма-частицы; где альфа-частицы - это ядра гелия, бета-частицы - это электроны, а гамма-частицы - это фотоны с высокой энергией.

[00264] Термин «спиновая метка» в настоящем тексте относится к молекулам, которые содержат атом или группу атомов, демонстрирующих неспаренный электронный спин (т.е. стабильная парамагнитная группа), которую в некоторых вариантах осуществления детектируют путем электрон-спиновой резонансной спектроскопии, а в других вариантах реализации присоединяют к другой молекуле. Такие спин-метящие молекулы включают, но не ограничиваются перечисленными: нитрильные радикалы и нитроксиды и, в некоторых вариантах осуществления представляют собой отдельные спиновые метки или двойные спиновые метки.

[00265] Термин «квантовые точки» в настоящем тексте относится к коллоидным полупроводниковым нанокристаллам, которые в некоторых вариантах реализации детектируют в ближнем инфракрасном свете и которые обладают исключительно высокими квантовыми выходами (т.е., очень ярко светятся после умеренного освещения).

[00266] Для специалиста в данной области очевидно, что детектируемая группа может быть присоединена к предложенному соединению через подходящий заместитель. В настоящем тексте термин «подходящий заместитель» относится к группе, которая способна к ковалентному присоединению детектируемой группы. Такие группы хорошо известны специалистам и включают группы, включающие например, карбоксилатнную группу, аминогруппу, тиольную группу, гидроксильную группу или одну из многих других групп. Очевидно, что такие группа могут быть присоединены к предложенному соединению непосредственно или через связывающую группу, такую как бивалентная насыщенная или ненасыщенная углеводородная цепь.

[00267] В некоторых вариантах осуществления детектируемые группы присоединены к предложенному соединению посредством приемов «клик»-химии. В некоторых вариантах осуществления такие группы присоединены через 1,3-циклоприсоединение азида с алкином, возможно в присутствии медного катализатора. Методы использования клик-химии известны и включают методы, описанные в ст. Rostovtsev et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 2596-99 и Sun et al., Bioconjugate Chem., 2006, 17, 52-57. В некоторых вариантах осуществления обеспечивают клик-доступную ингибирующую группу и осуществляют ее реакцию с клик-доступной группой-T-R^t. В настоящем тексте «клик-доступный» относится к группе, содержащей азид или алкин для использования в реакции клик-химиию В некоторых вариантах осуществления клик-доступная ингибиторная группа включает азид. В некоторых вариантах осуществления клик-доступная группа -Т-R^t включает напряженный циклооктин для использования в реакции клик-химии без использования меди (например, с использованием методов, описанных в Baskin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2007, 104, 16793-16797).

[00268] В некоторых вариантах осуществления клик-доступная группа ингибитора имеет одну из следующих формул:

где кольцо А, кольцо В, W¹, W², R^y, R^v, p, R^x и m имеют значения, определенные выше для Формулы I и описанные в настоящем тексте, a q равно 1, 2 или 3.

[00269] Примеры клик-доступных ингибиторов включают:

и

[00270] В некоторых вариантах осуществления клик-доступная группа -T-R^t имеет формулу:

[00271] Примером реакций, в которых клик-доступная группа ингибитора и клик-доступная группа -T-R^t присоединяются друг к другу путем [2+3]-циклоприсоединения, является следующая реакция:

[00272] В некоторых вариантах осуществления детектируемая группа, R^t, выбрана из метки, красителя, агента, образующего поперечные сшивки под действием света, цитотоксического соединения, лекарственного средства, аффинной метки, реактивного соединения, антитела или фрагмента антитела, биоматериала, наночастицы, спиновой метки, флюорофора, металл-содержащего соединения, радиоактивной группы, квантовой точки (точек), новой функциональной группы, группы, которая ковалентно или нековалентно взаимодействует с другими молекулами, фотосвязываемой группы, группы, возбуждаемой актиничным излучением, лиганда, фотоизомеризуемого соединения, биотина, аналога биотина (например, биотин сульфоксида), фрагмента, содержащего тяжелый атом, химически расщепляемой группы, фоторасщепляемой группы, редокс-активного агента, группы, меченой изотопом, биофизического зонда, фосфоресцентной группы, хемилюминесцентной группы, электронноплотной группы, магнитной группы, интеркалирующей группы, хромофора, агента, переносящего энергию, биологически активного вещества, детектируемой метки и любой комбинации вышеперечисленного.

[00273] В некоторых вариантах осуществления R^t представляет собой биотин или его аналог. В некоторых вариантах осуществления R^t представляет собой биотин. В некоторых других вариантах осуществления R^t представляет собой биотин сульфоксид.

[00274] В другом варианте осуществления R^t представляет собой флюорофор. В дальнейшем варианте осуществления флюорофор из красителей Alexa Fluor (Alexa Fluor 350, Alexa Fluor 488, Alexa Fluor 532, Alexa Fluor 546, Alexa Fluor 568, Alexa Fluor 594. Alexa Fluor 633, Alexa Fluor 660 и Alexa Fluor 680), AMCA, AMCA-S, красителей BODIPY (BODIPY FL, BODIPY R6G, BODIPY TMR, BODIPY TR, BODIPY 493/503, BODIPY 530/550, BODIPY 558/568, BODIPY 564/570, BODIPY 576/589, BODIPY 581/591, BODIPY 630/650, BODIPY 650/665), Карбоксиродамина 6G, крабокси-Х-родамина (ROX), Cascade Blue, Cascade Yellow, Кумарина 343, цианиновых красителей Cyanine (Су3, Cy5, Су3.5, Су5.5), Дазила, Дапоксила, Диалкиламинокумарина, 4',5'-дихлор-2',7'-диметокси-флюоресцеина, DM-NERF, Эозина, Эритрозина, Флюоресцеина, FAM, гидроксикумарина IRDyes (IRD40, IRD 700, IRD 800), JOE, Lissamine rhodamine B, Marina Blue, меюксикумарин, нафтофлюоресцеин, Oregon Green 488, Oregon Green 500, Oregon Green 514, Pacific Blue, PyMPO, Pyrene, Родамин В, Родамин 6G, Rhodamine Green, Rhodamine Red, Rhodol Green, 2',4',5',7'-тетра-бромсульфон-флюоресцеин, тетраметил-родамин (TMR), карбокситетраметилродамин С (TAMRA), Texas Red, Texas Red-X, 5(6)-Карбоксифлуоресцеин, 2,7-дихлорфлюоресцеин, N,N-бис(2,4,6-триметилфенил)-3,4:9,10-периленбис(дикарбоксимид, HPTS, Ethyl Eosin, DY-490XL MegaStokes, DY-485XL MegaStokes, Adirondack Green 520, ATTO 465, ATTO 488, ATTO 495, YOYO-l,5-FAM, BCECF, дихлорфлюоресцеин, Родамин 110, Родамин 123, YO-PRO-1, SYTOX Green, Sodium Green, SYBR Green I, Alexa Fluor 500, FITC, Fluo-3, Fluo-4, fluoro-emeratd, YoYo-1 ssDNA, YoYo-1 dsDNA, YoYo-1, SYTO RNASelect, Diversa Green-FP, Dragon Green, EvaGreen, Surf Green EX, Spectrum Green, NeuroTrace 500525, NBD-X, MitoTracker Green FM, LysoTracker Green DND-26, CBQCA, PA-GFP (пост-активационный), WEGFP (пост-активационный), FlASH-CCXXCC, Azami Green мономерный, Azami Green, зеленый флюоресцентный белок (GFP), EGFP (Campbel) Tsien 2003), EGFP (Patterson 200]). Kaede Green, 7-бензиламино-4-нитробелиз-2-окса-1,3-диазол, Bexl, Doxorubicin, Lumio Green, или SuperGlo GFP.

[00275] Как в общих чертах описано выше, предложенные соединения-зонды включают связывающую группу, -Т-, которая присоединяет необратимый ингибитор к детектируемой группе. В настоящем тексте термин «нить» или «связывающая группа» относится к любому бивалентному химическому спейсеру, включая, но не ограничиваясь перечисленными: ковалентная связь, полимер, водорастворимый полимер, возможно содержащий заместители алкил, возможно содержащий заместители гетероалкил, возможно содержащий заместители гетероциклоалкил, возможно содержащий заместители циклоалкил, возможно содержащий заместители гетероциклил, возможно содержащий заместители гетероциклоалкилалкил, возможно содержащий заместители гетероциклоалкилалкенил, возможно содержащий заместители арил, возможно содержащий заместители гетероарил, возможно содержащий заместители гетероциклоалкилалкенилалкил, возможно содержащая заместители амидная группа, эфирная группа, кетонная группа, сложноэфирная группа, возможно содержащая заместители карбаматная группа, возможно содержащая заместители гидразонная группа, возможно содержащая заместители гидразинная группа, возможно содержащая заместители оксимная группа, дисульфидная группа, возможно содержащая заместители иминная группа, возможно содержащая заместители сульфонамидная группа, сульфонная группа, сульфоксидная группа, тиоэфирная группа или любая комбинация перечисленного.

[00276] В некоторых вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, выбрана из ковалентной связи, полимера, водорастворимого полимера, возможно содержащего заместители ал кила, возможно содержащего заместители гетероалкила, возможно содержащего заместители гетероциклоалкила, возможно содержащего заместители циклоалкила, возможно содержащего заместители гетероциклоалкилалкила, возможно содержащего заместители гетероциклоалкилалкенила, возможно содержащего заместители арила, возможно содержащего заместители гетероарила, и возможно содержащего заместители гетероциклоалкилалкенилалкила. В некоторых вариантах осуществления связывающая группа представляет собой возможно замещенный гетероцикл. В других вариантах осуществления гетероцикл выбран из азиридина, оксирана, эписульфида, азетидина, оксетана, пирролина, тетрагидрофурана, тетрагидротиофена, пирролидина, пиразола, пиррола, имидазола, триазола, тетразола, оксазола, изоксазола, оксирена, тиазола, изотиазола, дитиолана, фурана, тиофена, пиперидина, тетрагидропирана, тиана, пиридина, пирана, тиапирана, пиразина, пиримидина, пиперазина, оксазина, тиазина, дитиана и диоксана. В дальнейших вариантах осуществления связывающая группа возможно содержит в качестве заместителей галоген, -CN, -ОН, -NO₂, алкил, S(O) и S(O)₂. В других вариантах осуществления водорастворимый полимер представляет собой ПЭГ группу.

[00277] В других вариантах осуществления связывающая группа обеспечивает достаточной пространственное разделение детектируемой группы и группы ингибитора протеинкиназы. В других вариантах осуществления связывающая группа стабильна. В еще одном варианте осуществления связывающая группа не оказывает существенного влияния на ответ детектируемой группы. В других вариантах осуществления связывающая группа обеспечивает химическую стабильность соединения-зонда. В других вариантах осуществления связывающая группа обеспечивает достаточную растворимость соединения-зонда.

[00278] В некоторых вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, такая как водорастворимый полимер одним концом присоединена к необратимому ингибитору согласно настоящему изобретению, а другим концом к детектируемой группе, R^t. В других вариантах осуществления водорастворимый полимер присоединен через функциональную группу или заместитель необратимого ингибитора согласно настоящему изобретению. В других вариантах осуществления водорастворимый полимер присоединен через функциональную группу или заместитель репортерной группы.

[00279] В некоторых вариантах осуществления примеры гидрофильных полимеров для использования в связывающей группе -Т- включают, но не ограничиваются перечисленными: полиалкиловые эфиры и их кэпированные по карбокси-концу аналоги (например, полиоксиэтиленгликоль, полиоксиэтилен/пропиленгликоль, а также их метокси- и этокси-кэпированные аналоги, полиоксиэтиленгликоль также известен как полиэтиленгликоль или ПЭГ); поливинилпирролидоны; поливинилалкиловые эфиры; полиоксазолины, полиалкилоксазолины и полигидроксиалкил оксазолины, полиакриламиды, полиалкилакриламиды и полигидроксиалкил акриламиды (например, полигидроксипропилметакриламид и их производные); полигидроксиалкилакрилаты, полисиаловые кислоты и их аналоги, гидрофильные пептидные последовательности, полисахариды и их производные, включая производные декстана, например,, карбоксиметилдекстран, декстрансульфаты, аминодекстран; целлюлозу и ее производные, например, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксиалкилцеллюлозы; хитин и его производные, хитозан, сукцинил хитозан, карбоксиметилхитин, карбоксиметилхитозан; гиалуроновую кислоту и ее производные; крахмалы; альгинаты; хондроитин сульфат; альбумин; пуллулан и карбоксиметилпуллулан; полиаминокислоты и их производные, например, полиглутаминовые кислоты, полилизины, полиаспарагиновые кислоты, полиаспартамида; сополимеры малеинового ангидрида, такие как: сополимер малеинового ангидрида и стирола, сополимер дивинилэтилового эфира и малеинового ангидрида; поливиниловые спирты; их сополимеры, их терполимеры, их смеси и производные перечисленных выше соединений. В других вариантах осуществления водорастворимый полимер имеет структурную форму, включающую, но не ограничивающуюся перечисленными: линейную, раздваивающуюся и разветвленную. В других вариантах осуществления многофункциональные производные полимера включают, но не ограничиваются перечисленными: линейные полимеры, имеющие два конца, каждый из которых связан с функциональной группой, причем группы могут быть одинаковыми или различными.

[00280] В некоторых вариантах осуществления водный полимер включает фрагмент поли(этиле)гликоль). В других вариантах осуществления молекулярная масса полимера лежит в широком диапазоне, включая, без ограничения, от приблизительно 100 Да до приблизительно 100,000 Да или больше. В других вариантах осуществления молекулярная масса полимера составляет в диапазоне от приблизительно 100 Да до приблизительно 100,000 Да, включая, без ограничения, приблизительно 100,000 Да, приблизительно 95,000 Да, приблизительно 90,000 Да, приблизительно 85,000 Да, приблизительно 80,000 Да, приблизительно 75,000 Да, приблизительно 70,000 Да, приблизительно 65,000 Да, приблизительно 60,000 Да, приблизительно 55,000 Да, приблизительно 50,000 Да, приблизительно 45,000 Да, приблизительно 40,000 Да, приблизительно 35,000 Да, 30,000 Да, приблизительно 25,000 Да, приблизительно 20,000 Да, приблизительно 15,000 Да, приблизительно 10,000 Да, приблизительно 9,000 Да, приблизительно 8,000 Да, приблизительно 7,000 Да, приблизительно 6,000 Да, приблизительно 5,000 Да, приблизительно 4,000 Да, приблизительно 3,000 Да, приблизительно 2,000 Да, приблизительно 1,000 Да, приблизительно 900 Да, приблизительно 800 Да, приблизительно 700 Да, приблизительно 600 Да, приблизительно 500 Да, приблизительно 400 Да, приблизительно 300 Да, приблизительно 200 Да и приблизительно 100 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса полимера составляет от приблизительно 100 Да до 50,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса полимера составляет от приблизительно 100 Да до приблизительно 40,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса полимера составляет приблизительно от 1,000 Да до 40,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса полимера составляет приблизительно от 5,000 Да до 40,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса полимера составляет приблизительно от 10,000 Да до 40,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекула полиэтиленгликоля представляет собой разветвленный полимер. В других вариантах осуществления молекулярная масса разветвленной цепи ПЭГ составляет от приблизительно 1,000 Да до приблизительно 100,000 Да, включая, без ограничения, приблизительно 100,000 Да, приблизительно 95,000 Да, приблизительно 90,000 Да, приблизительно 85,000 Да, приблизительно 80,000 Да, приблизительно 75,000 Да, приблизительно 70,000 Да, приблизительно 65,000 Да, приблизительно 60,000 Да, приблизительно 55,000 Да, приблизительно 50,000 Да, приблизительно 45,000 Да, приблизительно 40,000 Да, приблизительно 35,000 Да, приблизительно 30,000 Да, приблизительно 25,000 Да, приблизительно 20,000 Да, приблизительно 15,000 Да, приблизительно 10,000 Да, приблизительно 9,000 Да, приблизительно 8,000 Да, приблизительно 7,000 Да, приблизительно 6,000 Да, приблизительно 5,000 Да, приблизительно 4,000 Да, приблизительно 3,000 Да, приблизительно 2,000 Да, и приблизительно 1,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса разветвленной цепи ПЭГ составляет от приблизительно 1,000 Да до приблизительно 50,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса разветвленной цепи ПЭГ составляет от приблизительно 1,000 Да до приблизительно 40,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса разветвленной цепи ПЭГ составляет от приблизительно 5,000 Да до приблизительно 40,000 Да. В некоторых вариантах осуществления молекулярная масса разветвленной цепи ПЭГ составляет от приблизительно 5,000 Да до приблизительно 20,000 Да. Ниже приведен список существенных водорастворимых каркасов, который не является исчерпывающим и представляет собой лишь иллюстрацию, в некоторых вариантах осуществления для использования в способах и композициях согласно настоящему изобретению подходят материалы, обладающие с описанными выше свойствами.

[00281] Для среднего специалиста в данной области очевидно, что если -T-R^t присоединена к соединению формулы I-а или 1-b через реакционноспособную группу R¹, получаемая в результате связывающая группа содержит указанную реакционноспособную группу R¹. В настоящем описании фраза «содержит реакционноспособную группу» означает, что связывающая группа, образованная-R^1'-Т- формулы V-a или V-b либо содержит реакционноспособную группу в качестве заместителя, либо реакционноспособная группа входит в состав связывающей группы. Например, связывающая группа, образованная -R^1'-Т-, может содержать в качестве заместителя реакционноспособную группу -L-Y, причем каждая группа определена в настоящем описании. В альтернативном варианте связывающая группа, образованная -R^1'-Т- обладает необходимыми свойствами реакционноспособной группы, включенной в эту связывающую группу. Например, связывающая группа, образованная -R^1'-Т-, может включать один или ненасыщенных фрагментов и необязательных заместителей и/или гетероатомов, которые, в комбинации, образуют группу, способную к ковалентной модификации протеинкиназы согласно настоящему изобретению. Такая связывающая группа-R¹-T- представлена ниже.

[00282] В некоторых вариантах осуществления метиленовое звено связывающей группы -R^1'-Т- заменено на бивалентную группу -L-Y'- с образованием соединения формулы V-a-iii или V-b-iii:

где каждый из Кольца А, Кольца В, m, р, R^x, R^y, R^v, W¹, W², Т, L, Y' и R^t определен выше и описан в настоящем текста в классах и подклассах, и Y' представляет собой бивалентный вариант группы Y, определенной в классах и подклассах в настоящем тексте.

[00283] В некоторых вариантах осуществления метиленовое звено связывающей группы -R^1'-Т- заменено на группу -L(Y)- с получением соединения формулы V-a-iv или V-b-iv:

где каждый из Кольца А, Кольца В, m, p, R^x, R^y, R^v, W¹, W², Т, L, Y' и R^t определен выше и описан в настоящем тексте в классах и подклассах.

[00284] В некоторых вариантах осуществления связывающая группа содержит в качестве заместителя группу L-Y, в результате чего образуется соединение формулы V-a-v или V-b-v:

где каждый из Кольца А, Кольца В, m, р, R^x, R^y, R^v, W¹, W², Т, L, Y и R^t определен выше и описан в настоящем тексте в классах и подклассах.

[00285] В некоторых вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, имеет одну из следующих структур:

.

[00286] В некоторых вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, имеет следующую структуру:

.

[00287] В других вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, имеет следующую структуру:

.

[00288] В некоторых других вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, имеет следующую структуру е:

[00289] В других вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, имеет следующую структуру:

.

[00290] В некоторых вариантах осуществления связывающая группа, -Т-, имеет следующую структуру:

[00291] В некоторых вариантах осуществления -T-R^t имеет следующую структуру:

.

[00292] В других вариантах осуществления -T-R^t имеет следующую структуру:

.

[00293] В некоторых вариантах осуществления -T-R^t имеет следующую структуру:

.

[00294] В некоторых вариантах осуществления соединение-зонд формулы V-a, V-b, VI-а, VI-b, VII-a или VII-b является производной одного из соединений в Таблице 5.

[00295] В некоторых вариантах осуществления соединение-зонд имеет одну из следующих структур:

[00296] Очевидно, что многие реагенты-T-R^t доступны для приобретения. Например, множество биотинилирующих реагентов с различной длиной цепи можно приобрести, например, в Thermo Scientific. Такие реагенты включают NHS-PEG₄-Biotin и NHS-PEG₁₂-Biotin.

[00297] В некоторых вариантах осуществления структуры зондов, аналогичные приведенным в качестве примеров выше, получают с использованием клик-доступных групп-T-R^t, как описано в настоящем тексте.

[00298] В некоторых вариантах осуществления предложенные соединения-зонды ковалентно модифицируют фосфорилированную конформацию протеинкиназы. В одном аспекте фосфорилированная конформация протеинкиназы представляет собой либо активную, либо неактивную форму протеинкиназы. В некоторых вариантах осуществления фосфорилированная конформация протеинкиназы представляет собой активную форму указанной киназы. В некоторых вариантах осуществления зонд может проникать в клетки.

[00299] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает занятости протеинкиназы необратимым ингибитором (т.е. Соединением формулы I-а или I-b) в организме пациента, включающий обеспечение одной или больше тканей, типов клеток или их лизатов, полученных у пациента, которому ввели по меньшей мере одну дозу необратимого ингибитора, осуществление контакта указанной ткани, типа клеток или их лизата с соединением указанного необратимого ингибитора (т.е. Соединением формулы V-a, V-b, VI-a, VI-b, VII-a или VII-b), что приводит к ковалентной модификации по меньшей мере одной протеинкиназы в указанном лизате, и измерение количества указанной протеинкиназы ковалентно модифицированной указанным соединением-зондом, что позволяет определить занятость указанной протеинкиназы указанным соединением формулы I-а или I-b в сравнении с занятостью указанной протеинкиназы указанным соединением-зондом. В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно содержит этап подбора дозы соединения формулы I-а или I-b для повышения занятости протеинкиназы. В некоторых других вариантах осуществления указанный способ дополнительно включает этап подбора дозы соединения формулы I-a или I-b для снижения занятости протеинкиназы.

[00300] В настоящем описании термины «занятость» или «занимать» относятся к степени, до которой протеинкиназа модифицируется предложенными ковалентным ингибитором. Для среднего специалиста очевидно, что желательно вводить самую низкую дозу, обеспечивающую желаемый эффект протеинкиназы.

[00301] В некоторых вариантах осуществления модифицируемая протеинкиназа представляет собой ВТК. В других вариантах осуществления модифицируемая протеинкиназа представляет собой EGFR. В некоторых вариантах осуществления модифицируемая протеинкиназа представляет собой JAK. В некоторых других вариантах осуществления модифицируемая протеинкиназа представляет собой одну или более из ErbB1, ErbB2 или ErbB4. В других вариантах осуществления протеинкиназа представляет собой TEC, ITK или ВМХ.

[00302] В некоторых вариантах осуществления соединение-зонд представляет собой необратимый ингибитор, для которого определяют занятость.

[00303] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ оценки эффективности необратимого ингибитора согласно настоящему изобретению у млекопитающих, включающий введение необратимого ингибитора согласно настоящему изобретению млекопитающему, введение соединения-зонда согласно настоящему изобретению в такни или клетки, выделенные из указанного млекопитающего, или их лизат, измерение активности детектируемой группы соединения-зонда и сравнение активности детектируемой группы со стандартом.

[00304] В других вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ исследования фармакодинамики необратимого ингибитора согласно настоящему изобретению в организме млекопитающего, включающий введение необратимого ингибитора согласно настоящему изобретению млекопитающему, введение соединения-зонда, описанного здесь, в один или более типов клеток, тканей или из лизатов, выделенных из организма млекопитающего, и измерение активности соединения-зонда в разные моменты времени после введения ингибитора.

[00305] В других вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ in vitro мечения протеинкиназы, включающий осуществление контакта указанной протеинкиназы с описанным здесь соединением-зондом. В одном варианте осуществления этап приведения в контакт включает инкубирование протеинкиназы с соединением-зондом, описанным здесь.

[00306] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ настоящее изобретение обеспечивает способ in vitro мечения протеинкиназы, включающий осуществление одной или больше клеток или тканей, экспрессирующих протеинкиназу, или их лизатов, с описанным здесь соединением-зондом.

[00307] В некоторых других вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ, детектирования меченой протеинкиназы, включающий разделение белков, включающих протеинкиназу меченую зондом, описанным здесь, путем электрофореза и детектирование соединения-зонда по флюоресценции.

[00308] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ исследования фармакодинамики необратимого ингибитора согласно настоящему изобретению in vitro, включающий инкубацию необратимого ингибитора согласно настоящему изобретению с целевой протеинкиназой, добавление описанного здесь соединения-зонда к указанной протеинкиназе и определение количества мишени, модифицированной соединением-зондом.

[00309] В некоторых вариантах осуществления соединение-зонд детектируют путем связывания с авидином, стрептавидином или каптавидином.

[00310] В некоторых вариантах осуществления зонд детектируют методом Вестерн-блот. В других вариантах осуществления зонд детектируют методом твердофазного ИФА (ELISA). В некоторых вариантах осуществления зонд детектируют путем проточной цитометрии.

[00311] В других вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ зондирования кинома (полного комплемента киназ) необратимым ингибитором, включающий инкубирование одного или больше типов клеток или их лизатов биотинилированным соединением-зондом с получением белков, модифицированных фрагментом биотина, расщепление белков, связывание авидином или его аналогом и осуществление многомерного анализа ЖХ-МС-МС для идентификации протеинкиназ, модифицированных соединением-зондом и сайтов присоединения указанных киназ.

[00312] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ измерения синтеза белка в клетке, включающий инкубирование клетки с необратимым ингибитором белка-мишени, получение лизатов указанных клеток в определенные моменты времени и инкубацию указанных лизатов клеток с соединениями-зондами согласно настоящему изобретению, что позволяет измерить появление свободного белка на протяжении продолжительного периода времени.

[00313] В других вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает способ определения режима дозирования у млекопитающего для максимизации занятости целевой протеинкиназы включающий анализ одного или более типов клеток или лизатов клеток, выделенных из организма млекопитающего (полученные, например, из спленоцитов, периферических В-лимфоцитов, цельной крови, лимфатических узлов, интестициальной ткани и других тканей), полученных от нормального млекопитающего, которому введи необратимый ингибитор формулы I-a или I-b, причем указанный этап анализа включает осуществление контакта указанной одной или более тканей, типов клеток или их лизатов с соединением-зондом согласно настоящему изобретению и измерение количестве протеинкиназы, ковалентно модифицированной соединением-зондом.

ПРИМЕРЫ

[00314] Как описано ниже в разделе Примеры, в некоторых вариантах осуществления соединение получают в соответствии с приведенными ниже общими процедурами. Очевидно, что несмотря на то, что общие способы описывают синтез отдельных соединений, следуя описанным способами и другим известным методам специалист сможет реализовать все соединения, подклассы и виды каждого из соединений, описанных в настоящем тексте.

[00315] Номера соединений, используемые ниже в разделе Примеры, соответствуют номерам, приведенным в Таблице 5, выше.

ПРИМЕР 1

[00316] Получение N-(3-(5-метил-2-(фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-7

[00317] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-BuOH, 120°С, 30 минут, MB; В) NMP, 200°С, 10 минут, MB; С) NMP, 0°С - 30 минут, комн. т. - 30 минут.

[00318] Этап-1

[00319] Раствор 1 (2.0 г, 0.012 моль), 1,3-фениленедиамина (2.0 г, 0.018 ммоль), DIPEA (2.33 г, 0.018 моль) в n-BuOH (20 мл) облучали в микроволновой печи при 120°С в течение 30 минут. Реакционную смесь гасили водой (100 мл), экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, меш 60-120, EtOAc/CHCl₃ : 15/85) с получением 3 (1.3 г, 45%) в форме темно-коричневого твердого вещества.

[00320] Этап-2

[00321] Раствор 3 (1.0 г, 4.27 ммоль), 4 (1.5 г, 16.12 ммоль) в NMP (10.0 мл) облучали в микроволновой печи (200°С, 10 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенный экстракт этил ацетата промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Сырой остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, CHCl₃/МеОН : 98/2) с получением 5 (0,5 г, 40,3%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00322] Этап-3

[00323] К раствору 5 (200 мг, 0.68 ммоль) в NMP (2.0 мл) при температуре 0°С при помешивании добавляли акрилоил хлорид (248 мг, 0.2.74 ммоль), и помешивали реакционную смесь при температуре 0°С в течение 60 минут. Реакционную смесь затем перемешивали с гексаном в течение 1/2 часа, и затем гексан удаляли из реакционной смеси путем декантирования, а остаток гасили водой (10 мл). Водный раствор приводили к форме основания при помощи насыщенного раствора NaHCO₃ и затем экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 230-400, МеОН/CHCl₃ : 10/90) с выходом I-7 (110 мг, 46.4%) в форме твердого коричневого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ррт: 2.10 (s, 3H), 5.73 (dd, 1.88 & 10.42 Гц, 1Н), 6.24 (dd, J=1.88 & 17 Гц, 1H), 6.44 (dd, J=10.08 & 16.92 Гц, 1H), 6.78 (t, J=7.36 Гц, 1H), 7.06-7.11 (m, 2H), 7.26 (t, J=8.08 Гц, 1H), 7.38-7.40 (bm, 2H), 7.65 (d, J=8.52 Гц, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 10.09 (s, 1H); ЖХМС: m/е 346.8 (M+1).

ПРИМЕР 2

[00324] Приготовление N-(3-(4-(m-толиламино)пиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-1

[00325] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIEA, n-BuOH, 110°C, 30 минут, микроволн.; В) NMP, 200°С, 10 минут, микроволн.; С) акрилоил хлорид, NMP, 0°С - 30 минут, комн. т. - 30 минут.

[00326] Этап-1

[00327] Раствор 1 (0.5 г, 3.35 ммоль), m-толуидина (0.36 г, 3.35 ммоль), DIEA (0.65 г, 5.0 ммоль) в n-BuOH (2.0 мл) облучали в микроволновой печи при 110°С в течение 30 мин. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении, гасили водой (5 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (5 мл), солевым раствором (5 мл), сушили Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, меш 60-120, CHCl₃/МеОН: 99/1) с получением 3 (0,4 г, 54,2%) в форме желтого твердого вещества.

[00328] Этап-2

[00329] Раствор 3 (0,2 г, 0,91 ммоль), 4 (0,2 г, 1,8 ммоль) в NMP (2,0 мл) облучали в микроволновой печи (200°С, 10 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×15 мл). Объединенный экстракт CH₂Cl₂ промывали водой (5 мл), солевым раствором (5 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Сырой остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, CHCl₃/МеОН: 98/2) с получением 5 (0,14 г, 53%) в форме светло-желтого твердого вещества.)

[00330] Этап-3

[00331] К раствору 5 (0.075 г, 0.25 ммоль) в NMP (1.0 мл) при помешивании при температуре 0°С добавляли акрилоил хлорид (0.19 г, 2.0 ммоль) и помешивали реакционную смесь при температуре 0°С в течение 30 минут после чего помешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Беспримесную реакционную смесь затем очищали методом колоночной хроматографии (нейтральный Al₂O₃, CHCl₃/МеОН: 98/2) с получением -1 (0,04 г, 45%) в форме белого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.56 (s, 3Н), 5.71 (dd, J=2.0 & 10.08 Гц, 1Н), 6.20-6.25 (m, 2Н), 6.45 (dd, J=10.12 & 17.00 Гц, 1H), 6.78 (d, J=7.52 Гц, 1Н), 7.12-7.19 (m, 2Н), 7.31 (d, J=8.44 Гц, 1H), 7.46-7.53 (m, 3Н), 7.87 (s, 1Н), 7.99 (d, J=5.76 Гц, 1Н), 9.15 (s, 1Н), 9.24 (s, 1Н), 10.03 (s, 1Н); ЖХМС: m/е 346.4 (М+1).

ПРИМЕР 3

[00332] Приготовление N-(3-(5-(m-толиламино)пиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-2

[00333] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-BuOH, 110°С, 30 минут, MB; В) NMP, 200°С, 15 минут, MB; С) акрилоил хлорид, NMP, 0°С - 30 минут, комн. т. - 30 минут.

[00334] Этап-1

[00335] Раствор 1 (0.1 г, 0.613 ммоль), 2 (0.066 г, 0.613 ммоль), DIPEA (0.118 г, 0.919 ммоль) в n-BuOH (2.0 мл) облучали в микроволновой печи при 110°С в течение 90 минут. Реакционную смесь охлаждали, концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, смеси Метанол/хлороформа) с получением 3 (0.05 г, 34%) в форме беловатого твердого вещества.

[00336] Этап-2

[00337] Раствор 3 (0,05 г, 0,213 ммоль), 4 (0,046 г, 0,427 ммоль) в NMP (2,0 мл) облучали в микроволновой печи (200°С, 15 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с выпадением осадка. Сырой остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, CHCl₃/МеОН: 98/2) с получением 5 (0,03 г, 46%) в форме серого твердого вещества.

[00338] Этап-3

[00339] К раствору 5 (0.025 г, 0,082 ммоль) в NMP (0,5 мл) при помешивании при температуре 0°С добавляли акрилоил хлорид (0.073 г, 0,821 ммоль) и помешивали реакционную смесь при температуре 0°С в течение 30 минут после чего помешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Сырую реакционную смесь затем очищали методом колоночной хроматографии с оксидом алюминия (нейтральный Al₂O₃, смеси хлороформ/метанол) с получением I-2 (0.012 г, 41%) в форме бледно-коричневого твердого вещества: ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.10 (s, 3Н), 2.27 (s, 3Н), 5.72 (dd, J=2 & 10.04 Гц, 1Н), 6.22 (dd, J=1.96 & 16.92 Гц, 1Н), 6.45 (dd, J=10.08 & 16.92 Гц, 1Н), 6.83 (d, J=7.36 Гц, 1Н), 7.09 (t, J=8.06 Гц, 1Н), 7.17 (t, J=7.78 Гц, 1Н), 7.26 (d, J=7.80 Гц, 1Н), 7.47 (d, J=1.08 Гц, 1Н), 7.53 (s, 1Н), 7.58 (d, J=8.60 Гц, 1Н), 7.78 (s, 1Н), 7.88 (s, 1Н), 8.15 (s, 1Н), 9.01 (s, 1Н), 9.99 (s, 1Н); ЖХМС: m/e 360.1 (М+1).

ПРИМЕР 4

[00340] Приготовление N-(3-(5-фтор-4-(m-толиламино)пиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-2

[00341] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

А) n-бутанол, DIPEA, 110°С, 45 минут, MB; В) NMP, 200°С, 10 минут, MB; С) NMP, DMAP, 0°С, 30 минут.

[00342] Этап-1

[00343] К раствору 1 (0.5 г, 3 ммоль) в n-бутаноле (5.0 мл) добавляли 2 (0.64 г, 0.6 ммоль), DIPEA (0.116 г, 0.8 ммоль) и облучали реакционную смесь в микроволновой печи при температуре 110°С в течение 45 минут. Его охлаждали, тушили водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2×25 мл). Комбинированный экстракт EtOAc промывали водой (25 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 3 (0.45 г, 63%), который использовали на следующем этапе без дополнительной очистки.

[00344] Этап-2

[00345] Раствор 3 (0.45 г, 1.8 ммоль) и 4 (0.41 г, 3.7 ммоль) в NMP (4.5 мл) облучали в микроволновой печи при 200°С в течение 10 минут. Затем его охлаждали, разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (2×25 мл), солевым раствором (25 мл), сушили Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, Хлороформ/этил ацетат : 90/10) с получением 5 (0,23 г, 41%) в форме светло-желтого твердого вещества.

[00346] Этап-3

[00347] К раствору 5 (0.075 г, 0.24 ммоль) в NMP (1.5 мл) при помешивании при 0°С в атмосфере N2 добавляли DMAP (0.059 г, 0.48 ммоль) и акрилоил хлорид (0.064 г, 0.725 ммоль) и реакционную смесь держали при этой температуре в течение 30 минут. Затем ее гасили водой (7.5 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали 5% лимонной кислотой (10 мл), водой (2×10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Сырой остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (Al₂O₃, Хлороформ/метанол): 98/2) с получением I-3 (0,01 г, 11,3%) в форме беловатого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.27 (s, 3Н), 5.72 (d, J=9.84 Гц, 1Н), 6.22 (d, J=16.92 Гц, 1Н), 6.44 (dd, J=10.2 & 17.02 Гц, 1Н), 6.85 (d, J=7.12 Гц, 1Н), 7.12-7.19 (m, 2Н), 7.29 (d, J=7.68 Гц, 1Н), 7.43 (d, J=7.92 Гц, 1Н), 7.61-7.63 (m, 2Н), 7.82 (s, 1Н), 8.08 (s, 1Н), 9.23 (bs, 2Н), 10.03 (s, 1H); ЖХМС: m/e 364.2 (M+1).

ПРИМЕР 5

[00348] Приготовление (Е)-4-(диметиламино)-N-(3-(5-фтор-4-(m-толиламино)пиримидин-2-иламино)фенил)бут-2-енамида I-4

[00349] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) n-бутанол, DIPEA, 110°С, 45 минут, MB; B) NMP, 200°С, 10 минут, MB; С) оксалил хлорид, CH₃CN, ½ h at 0°С, 2 часа at 25°С, 5 минут при температуре 45°С; D) NMP, 0°С to 10°С, 30 минут.

[00350] Этап-1

[00351] Раствор 1 (0,5 г, 3,0 ммоль), 2 (0,32 г, 3,0 ммоль) в n-бутаноле (5,0 мл) облучали в микроволновой печи (110°С, 45 минут). Охлаждали, тушили водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2×25 мл). Объединенный экстракт EtOAc промывали водой (25 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 3 (0.45 г, 63%), который использовали на следующем этапе без дополнительной очистки.

[00352] Этап-2

[00353] Раствор 3 (0,45 г, 1,8 ммоль), 4 (0,41 г, 3,7 ммоль) в NMP (4,5 мл) облучали в микроволновой печи (200°С, 10 минут). Охлаждали, разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты этил ацетата промывали водой (2×25 мл), солевым раствором (25 мл), сушили Na₂SO₄) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, Хлороформ/этил ацетат : 90/10) с получением 5 (0,23 г, 41%) в форме светло-желтого твердого вещества.

[00354] Этап-3а

[00355] К раствору 6 (0.13 г, 0.80 ммоль) в CH₃CN (1.0 мл) при помешивании добавляли оксалил хлорид (0.122 г, 0.96 ммоль) при температуре 0°С. Реакционную смесь оставляли с перемешиванием при температуре 0°С в течение получаса, а затем при комнатной температуре в течение 2 часа. Окончательно реакционную смесь грели при 45°С в течение 5 минут, охлаждали и использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки.

[00356] Этап-3

[00357] К раствору 5 (0,05 г, 0,16 ммоль) в NMP (1.0 мл) при помешивании добавляли 7 при температуре 0°С. Реакционную смесь помешивали при температуре 0°C в течение 30 минут и при температуре 10°С в течение 30 минут. Гасили насыщенным раствором натрия бикарбоната (5 мл) и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×5 мл). Объединенный органический экстракт промывали водой (1 мл), солевым раствором (1 мл) и сушили над Na₂SO₄. Концентрировали при пониженном давлении, после чего очищали методом колоночной хроматографии (S1O2, 230-400, CHCl₃/МеОН, 95/5) с получением -4 (0.02 г, 29.4%) в форме белого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.21 (s, 6H), 2.28 (s, 3Н), 3.08 (bd, J=5.6 Гц, 2Н), 6.29 (d, J=15.60 Гц, 1Н), 6.67-6.74 (m, 1Н), 6.86 (d, J=7.20 Гц, 1H), 7.12-7.20 (m, 2H), 7.27 (d, J=8.00 Гц, 1H), 7.43 (d, J=8.00 Гц, 1H), 7.62-7.64 (m, 2H), 7.82 (s, 1H), 8.08 (d, J=3.6 Гц, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 9.96 (s, 1H); ЖХМС: m/e 421.2 (M+1).

ПРИМЕР 6

[00358] Приготовление N-(3-(5-метил-4-(фениламино)пиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-5

[00359] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DTPEA, n-BuOH, 110°C, 30 минут, MB; В) NMP, 200°C, 15 минут, MB; С) акрилоил хлорид, NMP, 0°С - 30 минут, комн. т. - 30 минут.

[00360] Этап-1

[00361] Раствор 1 (0.1 г, 0.613 ммоль), 2 (0. 114 г, 1.226 ммоль), DIPEA (0.118 г, 0.919 ммоль) в n-BuOH (2.0 мл) облучали в микроволновой печи при 110°С в течение 90 минут. Реакционную смесь охлаждали, концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, Метанол/хлороформ: 1/9) с получением 3 (0,08 г, 59%) в форме белого твердого вещества

[00362] Этап-2

[00363] Раствор 3 (0,08 г, 0,364 ммоль), 4 (0,059 г, 0,546 ммоль) в NMP (2.0 мл) облучали в микроволновой печи (200°С, 15 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты этил ацетата промывали водой (10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с выпадением осадка. Сырой остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, CHCl₃/МеОН: 98/2) с получением 5 (0,06 г, 60%) в форме светло-серого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.09 (s, 3Н), 4.74 (s, 2Н), 6.09-6.11 (m, 1Н), 6.77-6.85 (m, 2Н), 6.91 (t, J=1.72 Гц, 1Н), 7.02 (t, J=7.36 Гц, 1Н), 7.31 (t, J=7.52 Гц, 2Н), 7.75 (d, J=7.68 Гц, 2Н), 7.84 (s, 1Н), 8.18 (s, 1Н), 8.65 (s, 1H); ЖХМС: 293.2 (М+1).

[00364] Этап-3

[00365] К раствору 5 (60 мг, 0,205 ммоль) в NMP (2.0 мл) при температуре 0°С при помешивании добавляли акрилоил хлорид (0,148 г, 1.64 ммоль), и помешивали реакционную смесь при температуре 0°С в течение 30 минут. Беспримесную реакционную смесь пропускали через колонку с оксидом алюминия (нейтральный Al₂O₃ хлороформ/метанол, 99/1) с получением I-5 (0.013 г, 18.5%) в форме беловатого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.11 (s, 3Н), 5.72 (dd, J=1.92 & 10.04 Гц, 1Н), 6.22 (dd, J=1.92 & 16.92 Гц, 1Н), 6.45 (dd, J=9.32 & 16.92 Гц, 1Н), 7.00 (t, J=7.28 Гц, 1H), 7.09 (t, J=8.04 Гц, 1Н), 7.23-7.30 (m, 3Н), 7.43 (d, J=8.04 Гц, 1Н), 7.75-7.77 (m, 2Н), 7.83 (s, 1Н), 7.88 (s, 1Н), 8.22 (s, 1Н), 9.00 (s, 1Н), 9.99 (s, 1Н); ЖХМС: m/e 346 (М+1).

ПРИМЕР 7

[00366] Получение N-(4-метил-3-(5-метил-4-(m-толиламино)пиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-8

[00367] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-BuOH, 120°С, 60 минут, MB; A') (BOC)₂O, МеОН, -10°С, 4 часа; В) Pd(OAc)₂, BINAP, Cs₂CO₃, толуол, 110°С, 12 часов; С) ТФА, CH₂Cl₂, 0°С - 30 минут, комн. т. - 2 часа; D) акрилоил хлорид, NMP, 0°С - 30 минут, комн. т. - 30 минут.

[00368] Этап-1'

[00369] К раствору А (5 г, 0.04 ммоль) в МеОН (75 мл) при помешивании медленно добавляли (BOC)₂O (11.59 г, 0.050 ммоль) при температуре -10°С. Реакционную смесь помешивали при этой температуре в течение 4 часа, после чего концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок добавляли к EtOAc (300 мл). Его промывали водой (25 мл), солевым раствором (25 мл) и сушили над Na₂SO₄. Фильтровали, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением 4 (2.5 г, 27%) в форме беловатого твердого вещества.

[00370] Этап-1

[00371] Раствор 1 (0,5 г, 3,06 ммоль), 2 (0,39 г, 3,06 ммоль), DIPEA (0.59 г, 4.5 ммоль) в n-BuOH (5 мл) облучали в микроволновой печи (120°С, 30 минут). Реакционную смесь охлаждали, удаляли растворители при пониженном давлении, и тушили полученный осадок водой (5 мл). Его экстрагировали EtOAc (3×20 мл) и объединенный слой EtOAc промывали водой (5 мл), солевым раствором (5 мл) и сушили над Na₂SO₄. Фильтровали, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением осадка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, CHCl₃/МеОН : 9/1) с получением 3 (0,35 г, 49%) в форме беловатого твердого вещества

[00372] Этап-2

[00373] Раствор 3 (0.1 г, 0.43 ммоль), 4 (0.14 г, 0.64 ммоль), Pd(OAc)₂ (10 мг, 0.043 ммоль), BINAP (0.013 г, 0.021 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.2 г, 1.06 ммоль) в дегазированном толуоле (толуол продували N₂ в течение 15 минут) нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов в атмосфере N2. Реакционную смесь охлаждали и пропускали через короткую пластинку целлита®. Фильтрат разбавляли EtOAc (25 мл) промывали водой (5 мл), солевым раствором (5 мл) и сушили над Na₂SO₄. Фильтровали, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением осадка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, CHCl₃/MeOH : 9/1) с получением 5 (40 мг, 22%) в форме беловатого твердого вещества.

[00374] Этап-3

[00375] К раствору 5 (0.04 г, 0.095 ммоль) в сухом CH₂Cl₂ (2 мл) при температуре 0°С при помешивании добавляли CF₃COOH (0.2 мл, 5 объемов), затем реакционную смесь держали при этой температуре в течение 30 минут. Доводили до комнатной температуре и помешивали при комнатной температуре в течение 2 часа. Затем реакционную смесь гасили охлажденной льдом водой (2 мл), приводили к форме основания при помощи раствора натрия бикарбоната и экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенный экстракт EtOAc промывали водой (2 мл), солевым раствором (2 мл) и сушили над Na₂SO₄. Фильтровали, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением 6 (22 мг, 73%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00376] Этап-4

[00377] К раствору 6 (0,2 г, 0,63 ммоль) в NMP (4 мл) при помешивании добавляли акрилоил хлорид (0.12 г, 1.25 ммоль) при температуре 0°С. Реакционную смесь держали при этой температуре в течение 30 минут, а затем при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем ее гасили охлажденной льдом водой (2 мл) и экстрагировали (2×10 мл). Объединенный экстракт EtOAc промывали водой (2 мл), солевым раствором (2 мл) и сушили над Na₂SO₄. Фильтровали, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением осадка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 230-400, CHCl₃/МеОН : 9/1) с получением I-8 (10 мг, 4%) в форме белого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.07 (s, 3Н), 2.13 (s, 6Н), 5.70 (dd, J=1.92 & 10.08 Гц, 1Н), 6.20 (dd, J=1.96 & 16.88 Гц, 1Н), 6.41 (dd, J=10.16 & 16.96 Гц, 1Н), 6.69 (d, J=7.36 Гц, 1Н), 6.98 (t, J=7.76 Гц, 1Н), 7.11 (d, J=8.24 Гц, 1Н), 7.41 (q, J=9.92 Гц, 1Н), 7.49-7.51 (m, 2Н), 7.73 (s, 1H), 7.80 (s, 1Н), 7.97 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 10.00 (s, 1H); ЖХМС: m/e 374 (M+1).

ПРИМЕР 8

[00378] Получение N-(3-(4-(3-бромофениламино)-5-метилпиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-9

[00379] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-бутанол, 110°С, 1 час, MB; В) 1.5 N HCl, этанол, 90°С, 30 минут, MB; С) акрилоил хлорид, NMP, 0°С, 30 минут.

[00380] Этап-1

[00381] Раствор 1 (0,5 г, 3,06 ммоль), 2 (0,53 г, 3,06 ммоль), и DIPEA (0.80 мл, 4.06 ммоль) в n-бутаноле (5 мл) облучали в микроволновой печи (110°С, 1 час). Реакционную смесь охлаждали и концентрировали при пониженном давлении с получением осадка. Остаток добавляли к EtOAc (5 мл) и промывали раствором NaHCO₃ (2 мл), водой (2 мл) и солевым раствором (2 мл). Сушили над Na₂SO₄, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением сырого 3, которое затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением 3 (0.125 г, 13%) в форме коричневого твердого вещества.

[00382] Этап-2

[00383] К раствору 3 (0.15 г, 0.5 ммоль) в EtOH (3 мл) добавляли 4 (0.081 г, 0.75 ммоль) а затем 1.5 N HCl (0.055 г, 1.5 ммоль). Реакционную смесь облучали в микроволновой печи (90°С, 30 минут), охлаждали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток добавляли к EtOAc (5 мл) и промывали раствором NaHCO₃ (2 мл), водой (2 мл) и солевым раствором (2 мл). Сушили над Na₂SO₄ фильтровали, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением сырого 5, которое затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением 5 (0.06 г, 32%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00384] Этап-3

[00385] К раствору 5 (0,06 г, 0,16 ммоль) в NMP (1 мл) при помешивании добавляли акрилоил хлорид (0.117 г, 1,29 ммоль) при температуре 0°С. Реакционную смесь оставляли при перемешивании при этой температуре в течение 30 минут, после чего ее добавляли к дихлорметану (2 мл). Промывали раствором NaHCO₃ (1 мл), водой (1 мл) и солевым раствором (1 мл). Затем его сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением I-9 (0.016 г, 23%) в форме бледно-коричневого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.16 (s, 3Н), 5.75 (dd, J=1.72 & 10 Гц, 1H), 6.23 (dd, J=1.76 & 16.88, Гц, 1H), 6.45 (dd, J=10.08 & 16.92 Гц, 1H), 7.22-7.34 (m, 4H), 7.38 (d, J=8.00 Гц, 1H), 7.63 (d, J=8.08 Гц, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 10.26 (s, 1H), 10.34 (s, 1H); ЖХМС: m/е 426 (M+1).

ПРИМЕР 9

[00386] Получение 3-(4-(2-(циклопропилсульфонил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-5-метилпиримидин-2-иламино)бензолсульфонамида I-10

[00387] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A') DPPA, Бензиловый спирт, Et₃N, толуол, 110°С, 12 часов.; В') Pd(OH)₂, Аммония формат, EtOH, с обратным холодильником, 6 часов; A) DIPEA, n-BuOH, 120°С, 1 час, MB; В) 1.5 N HCl, EtOH, с обратным холодильником 12 часов.; С) Циклопропилсульфонил хлорид, DIPEA, ТГФ, комн. т., 12 часов.

[00388] Этапы 1-4 Процедура синтеза остова 7 описана в эксперименте для Соединения I-11 в данном описании.

[00389] Этап-5

[00390] К раствору 7 (0.05 г, 0.0121 ммоль) в ТГФ (4 мл) при температуре 0°С при помешивании добавляли DIPEA (0.023 г, 0.182 ммоль), а затем циклопропилсульфонил хлорид (0.031 г, 0.182 ммоль) в атмосфере N₂. Реакционную смесь оставляли до тех пор, пока она доходила до комнатной температуры, и выдерживали при этой температуре в течение 12 часов. Затем ее добавляли к EtOAc (10 мл), промывали водой (5 мл), солевым раствором (5 мл) и сушили над Na₂SO₄. Фильтровали, и затем концентрировали при пониженном давлении с получением осадка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, петролейный эфир/этил ацетат, 6/4) с получением I-10 (0.035 г, 56%) в форме желтого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 0.97-0.1.00 (m, 4Н), 2.12 (s, 3Н), 2.60-2.66 (m, 1Н), 2.90 (t, J=5.2 Гц, 2Н), 3.52 (t, J=6 Гц, 2Н), 4.42 (s, 2Н), 7.16 (d, J=8.4 Гц, 1Н), 7.27 (s, 2H), 7.31-7.35 (m, 2Н), 7.53 (s, 1Н), 7.59 (d, J=8.4 Гц, 1Н), 7.92 (s, 1H), 8.03-8.04 (m, 2Н), 8.45 (s, 1Н), 9.40 (s, 1Н); ЖХМС: m/e 515 (М+1).

ПРИМЕР 10

[00391] Получение 3-(4-(2-(2-хлороацетил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-5-метилпиримидин-2-иламино)бензолсульфонамида I-11

[00392] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A') DPPA, Бензиловый спирт, Et₃N, толуол, 110°С, 12 часов.; В') Pd(OH)₂, Аммония формат, EtOH, с обратным холодильником, 6 часов; A) DIPEA, n-BuOH, 120°С, 1 час, MB; В) 1.5 N HCl, EtOH, с обратным холодильником 12 часов.; С) Cl-CH₂-COCl, Et₃N, ТГФ, комн. т., 12 часов.

[00393] Этап-1

[00394] К раствору 1 (1.5 г, 5.4 ммоль) в толуоле (15 мл) добавляли при помешивании DPPA (2.17 г, 8.11 ммоль), Et₃N (1.05 мл, 8.11 ммоль) и бензиловый спирт (0.876 г, 8.11 ммоль) в атмосфере N₂. Реакционную смесь оставляли нагреваться с обратным холодильником в течение 12 часов, охлаждали и разбавляли этил ацетатом (100 мл). Его промывали водой (5 мл), солевым раствором (5 мл) и сушили над Na₂SO₄. Затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, и осадок очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением 2 (2.0 г, 97%) в форме белого твердого вещества.

[00395] Этап-2

[00396] К раствору 2 (2.2 г, 5.75 ммоль) в EtOH (25 мл) при помешивании добавляли формиат аммония (3.68 г, 57.5 ммоль) и нагревали реакционную смесь с обратным холодильником в течение 6 часов. Затем охлаждали, фильтровали через целитную пластину® и концентрировали фильтрат при пониженном давлении с получением 3 (1.3 г, 91%) в форме темно-коричневого масла, которое использовалось без дальнейшей очистки.

[00397] Этап-3

[00398] Раствор 3 (1.4 г, 5.56 ммоль), 4 (0.912 г, 5.56 ммоль) и DIPEA (1.077 г, 8.3 ммоль) в n-BuOH (15 мл) облучали в микроволновой печи при 120°С в течение 45 минут. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток добавляли к этил ацетату (20 мл) и промывали водой (5 мл) и солевым раствором (5 мл). Сушили над Na₂SO₄ после чего концентрировали при пониженном давлении с получением остатка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением 5 (1.1 г, 52%) в форме твердого вещества кремового цвета.

[00399] Этап-4

[00400] К раствору 5 (0.25 г, 0.66 ммоль) в этаноле (5 мл) при помешивании добавляли 6 (0.126 г, 0.73 ммоль) и каталитическое количество водного HCl, после чего реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов при 100°С. Ее охлаждали, полученное твердое вещество фильтровали и промывали диэтиловым эфиром и сушили под высоким вакуумом с получением 7 (0.24 г, 82%) в форме светло-желтого вещества.

[00401] Этап-5

[00402] К раствору 7 (0,2 г, 0,487 ммоль) в NMP (5 мл) при помешивании добавляли Et₃N (0.094 г, 0.731 ммоль). Раствор охлаждали до 0°С и добавляли хлороацетилхлорид (0.082 г, 0.731 ммоль). Реакционную смесь оставляли дойти до комнатной температуры и помешивать при комнатной температуре в течение 12 часов. Затем ее тушили охлажденной льдом водой (2 мл) и экстрагировали этил ацетатом (3×5 мл). Объединенный экстракт этил ацетата промывали солевым раствором (2 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением I-11 (0.038 г, 16%) в форме светло-желтого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.11 (s, 3Н), 2.77-2.89 (m, 2Н), 3.70-3.72 (m, 2Н), 4.49 (d, J=2.92 Гц, 2Н), 4.63 (d, J=23.56 Гц, 2Н), 7.15-7.17 (m, 1Н), 7.24 (s, 2Н), 7.30-7.32 (m, 2Н), 7.50-7.65 (m, 2Н), 7.91 (s, 1Н), 8.04-8.05 (m, 2Н), 8.27 (s, 1Н), 9.31 (s, 1Н). ЖХМС: m/e 486.8 (МН⁺).

ПРИМЕР 11

[00403] Получение N-(3-(5-метил-4-(4-феноксифениламино)пиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-23

[00404] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-бутанол, 100°С, 1 час, MB; В) конц. HCl, n-BuOH, 160°С, 20 минут, MB; С) Акрилоил хлорид 0°С, комн. т., 1 час.

[00405] Этап-1

[00406] Раствор 1 (0,2 г, 1,2 ммоль), 2 (0,12 г, 0,95 ммоль) и DIPEA (0,23 г, 1,78 ммоль) в n-BuOH (2 мл) облучали в микроволновой печи (100°С в течение 1 час). Затем реакционную смесь охлаждали, концентрировали при пониженном давлении и остаток добавляли в EtOAc (5 мл). Промывали раствором NaHCO₃ (2 мл), водой (2 мл) и солевым раствором (2 мл), после чего сушили над безводным Na₂SO₄. Концентрировали при повышенном давлении и очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением 3 (0.11 г, 28,9%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00407] Этап-2

[00408] К раствору 3 (0.11 г, 0.3 ммоль), 4 (0.114 г, 1.05 ммоль) в т-бутанол (1 мл) добавляли концентрированную HCl (1 каплю) и подвергали смесь облучению в микроволновой печи (165°С в течение 10 минут). Реакционную смесь охлаждали, концентрировали при пониженном давлении и остаток добавляли в EtOAc (5 мл). Промывали раствором NaHCO₃ (2 мл), водой (2 мл) и солевым раствором (2 мл). Сушили над Na₂SO₄ после чего концентрировали при пониженном давлении с получением остатка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120. хлороформ/метанол, 9/1) с получением 5 (0,08 г, 65%) в форме коричневого твердого вещества.

[00409] Этап-3

[00410] К раствору 5 (0,015 г, 0,03 ммоль) в NMP (1 мл) при помешивании добавляли акрилоил хлорид (0.005 г, 0,05 ммоль) при температуре 0°С. Реакционную смесь оставляли дойти до комнатной температуры и держать при этой температуре в течение) часа. Затем ее разбавляли дихлорметаном (2 мл) и промывали раствором NaHCO₃ (1 мл), водой (1 мл) и солевым раствором (1 мл). Сушили над Na₂SO₄, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением осадка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/метанол, 9/1) с получением I-23 (0.004 г, 23%) в форме коричневого твердого вещества. 400 МГц, MeOD: δ 2.14 (s, 3Н), 5.71 (d, J=11.20 Гц, 1Н), 6.30-6.44 (m, 2Н), 6.94-6.99 (m, 4Н), 7.07-7.15 (m, 2H), 7.22 (d, J=7.2 Гц, 1H), 7.34-7.36 (m, 3Н), 7.63 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.79 (s, 2H); ЖХМС m/е 437 (M+1).

ПРИМЕР 12

[00411] Получение N-(3-(5-метил-2-(3-сульфамоилфениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-33

[00412] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-BuOH, 120°С, 30 минут, MB; В) 1.5 N HCl, Этанол, 100°С, 12 часов; С) NMP, 0°С до комн. т., 1 час.

[00413] Этап-1

[00414] Раствор 1 (0,5 г, 3,06 ммоль), 1 (0,49 г, 4,59 ммоль), DIPEA (0.59 г, 4,59 ммоль) в n-бутаноле (8 мл) облучали в микроволновой печи (120°С, 30 минут). Охлаждали, тушили водой (5 мл) и экстрагировали этил ацетатом (3×20 мл). Объединенный слой этил ацетата промывали солевым раствором (5 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/этил ацетат, 9/1) с получением 1 (0.25 г, 34.77%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00415] Этап-2

[00416] К раствору 3 (0.1 г, 0.48 ммоль), в этаноле (2 мл) при помешивании добавляли 4 (0.070 г, 0.42 ммоль) и каталитическое количество 1.5 N HCl (3 капли), затем нагревали до 100°С, в течение 12 часов. Затем реакционную смесь охлаждали, твердую фазу отделяли, фильтровали и промывали эфиром 5 (0.1 g сырого), после чего использовали на следующем этапе без дополнительной очистки.

[00417] Этап-3

[00418] К раствору 5 (0.1 г, 0.27 ммоль) в NMP (2 мл) при помешивании добавляли акрилоил хлорид (0.037 г, 0.425 ммоль) при температуре 0°С, после чего помешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем реакционную смесь тушили водой (4 мл) и приводили к форме основания NaHCO₃, после чего экстрагировали этил ацетатом (5 мл), объединенный органический слой промывали солевым раствором (1 мл), сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали, затем очищали сырой продукт методом препаративной ЖХВД с получением I-33 (0.07 г, 6%) в форме беловатого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (MeOD) δ ppm: 2.17 (s, 3Н), 5.78 (dd, J=2.36 & 9.52 Гц, 1Н), 6.34-6.48 (m, 2H), 7.26-7.43 (m, 5H), 7.87 (s, 1H), 7.96-8.03 (m, 3Н); ЖХМС: m/e 425 (M+1).

ПРИМЕР 13

[00419] Получение N-(3-(метил(5-метил-2-(фениламино)пиримидин-4-ил)амино)фенил)акриламида I-34

[00420] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) Pd(OAC)₂, BINAP, Cs₂CO₃, Toluene, 100°С, 16 часов; В) NaH, CH₃I, ТГФ, 0°С - 30 минут, коми. т. - 16 часов.; С) Анилин, конц. HCl, Этанол, 90°С, 60 мин; D) H₂, Pd/C, Этанол, 16 часов; Е) акрилоил хлорид, NMP, 0°С, 1 час.

[00421] Этап-1

[00422] К раствору 2 (1.0 г, 6.0 ммоль), в толуоле (30.0 мл) при помешивании добавляли 1 (0.84 г, 6.0 ммоль), BINAP (0.186 г, 0.3 ммоль), Cs₂CO₃ (4.87 г, 15.0 ммоль). Реакционную смесь дегазировали, продувая N₂ в течение 15 минут. Затем к реакционной смеси добавляли Pd(OAc)₂ (0.134 г, 0.6 ммоль), и нагревали при 100°С в течение 16 часов в атмосфере N2. Затем ее охлаждали, разбавляли этил ацетатом (30 мл) и фильтровали через целит®. Фильтрат промывали водой (2×25 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, меш 60-120, этилацетат/гексан: 10/90) с получением твердого вещество, которое промывали эфиром с получением 3 (0.6 г, 37%) в форме светло-желтого твердого вещества.

[00423] Этап-2

[00424] К смеси NaH (0.1 г, 2.5 ммоль, 60% дисперсия в парафиновом масле) в сухом ТГФ (10.0 мл) при помешивании добавляли 3 (0.5 г, 1.89 ммоль) при температуре 0°С, и помешивали реакционную смесь при этой температуре в течение 30 минут. Добавляли CH₃I (0.305 г, 2.15 ммоль), после чего реакционную смесь разрешалось довести до комнатной температуры и помешивать при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (25 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с выпадением осадка. Сырой остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, CHCl₃/МеОН: 99/1) с получением 4 (0,12 г, 22,7%) в форме светло-желтого твердого вещества.

[00425] Этап-3

[00426] К раствору 4 (120 мг, 0.431 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли концентрированную HCl (0.044 г, 1.2 ммоль) и анилин (0.16 г, 1.72 ммоль) и грели реакционную смесь в запечатанной колбе при 90°С в течение 1 час. Реакционную смесь охлаждали, растворители удаляли методом концентрирования при пониженном давлении и полученный осадок разбавляли 10% NaHCO₃ (10.0 мл). Его экстрагировали EtOAc (3×15 мл) и объединенный экстракт EtOAc промывали водой (15 мл), солевым раствором (15 мл) и сушили над Na₂SO₄. Концентрировали при пониженном давлении с получением осадка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, CHCl₃/МеОН : 99/1) с получением 5 (0,11 г, 76%) в форме светло-желтого твердого вещества.

[00427] Этап-4

[00428] К раствору 5 (0.110 г, 0.328 ммоль), в этаноле (50 мл) добавляли 10% палладий на угле (0.022 г) и помешивали реакционную смесь в атмосфере Н2 (1.5 Кг) при комнатной температуре в течение 16 часов. Фильтровали через целит® и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, метанол/хлороформ: 1/99) с получением 6 (0,07 г, 69,9%) в форме бесцветной вязкой жидкости.

[00429] Этап-5

[00430] К раствору 6 (0.070 г, 0.23 ммоль) в NMP (1.5 мл) при помешивании при 0 С добавляли акрилоил хлорид (0.083 г, 0.916 ммоль) и реакционную смесь помешивали при 0°С в течение 1 часа. Затем ее гасили 10% раствором натрия бикарбоната (15 мл) после чего отфильтровывали твердую фазу, промывали холодной водой (5 мл), гексаном (5 мл). Твердое вещество сушили в течение 2 часа при пониженном давлении с получением I-34 (0.033 г, 40%) в форме бледно-желтого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: δ 1.47 (s, 3Н), 3.45 (s, 3Н), 5.74 (dd, J=Гц, 1H), 6.22 (dd, J=2.0 & 16.98 Гц, 1Н), 6.38 (dd, J=10 & 16.94 Гц, 1H), 6.85-6.91 (m, 2H), 7.21-7.25 (m, 2H), 7.32 (t, J=8.02 Гц, 1H), 7.43-7.47 (m, 2H), 7.77-7.79 (m, 2H), 7.90 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 10.18 (s, 1H); ЖХМС: m/e 360.8 (M+1).

ПРИМЕР 14

[00431] Получение N-(3-(5-метил-2-(3-(проп-2-инилокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил) акриламида I-35

[00432] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

А) К₂СО₃, CH₃CN, 65°С, 8 часов; В) порошок Fe, NH₄Cl, MeOH, H₂O, 80°С, 4 часа; С) 1,3-фенеилендиамин, DIPEA, n-BuOH, 120°С, 30 минут, MB; D) Конц. HCl, абсолютный этанол, 110°С, 2 часа; Е) NMP, 0°С, 1 час.

[00433] Этап-1

[00434] К раствору 1а (4 г, 0.0287 моль) и К₂СО₃ (5.6 г, 0.0574 моль) в CH₃CN (15 мл) при помешивании добавляли пропаргил бромид (4.1 г, 0.0345 моль) и полученную смесь разрешалось нагревать с обратным холодильником в течение 8 часов. Реакционную смесь затем охлаждали, тушили водой и экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенный экстракт EtOAc промывали водой (20 мл), солевым раствором (20 мл) и сушили над Na₂SO₄. Фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 2b в форме коричневатого твердого вещество, которое использовали без дальнейшей очистки.

[00435] Этап-2

[00436] К раствору 2b в смеси метанола (30 мл) и воды (30 мл) при помешивании последовательно добавляли, NH₄Cl (10.3 г, 0.194 моль) и железный порошок (6.8 г, 0.121 моль). Полученную смесь нагревали с обратным холодильником при 80°С в течение 4 часа. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли метанолом и фильтровали через пластину целлита®. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток добавляли в EtOAc. Затем промывали водой, солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением осадка. Осадок затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, колоночной хроматографии с гравитационным элюированием, и ожидаемый продукт извлекали из адсорбента CHCl₃/МеОН 96/4) с получением 3 (3,2 г, 91%) в форме коричневатого вещества.

[00437] Этап-3

[00438] Раствор 2, 4-дихлоро-5-метил пиримидина 1 (0.3 г, 0.0018 моль), 1,3-фенилен диамина (0.24 г, 0022 моль), DIPEA (0.35 г, 0.0027 моль) в n-BuOH (3 мл) подвергали облучению в микроволновой печи (120°С, 30 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (20 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120) с получением 2 (0.15 г, 35%) в форме коричневатого твердого вещества.

[00439] Этап-4

2 (0.15 г, 0.006 моль) и 3 (0.37 г, 0.0025 моль) помещали в нагнетательную трубку и в нее добавляли абс. EtOH (3 мл), а затем концентрированную HCl (0.04 г, 0.0012 моль). Трубку плотно закручивали и грели при 120°С в течение 2 часа. Затем реакционную смесь охлаждали, при пониженном давлении удаляли растворители, и полученный остаток добавляли к (10 мл). Промывали водой (4 мл), раствором NaHCO₃ (4 мл) и солевым раствором (5 мл). Сушили над Na₂SO₄, после чего концентрировали при пониженном давлении с получением осадка, который затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, колоночной хроматографии с гравитационным элюированием, элюировали ожидаемое вещество CHCl₃/МеОН: 94/6) с получением 4 (125 мг, 56%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00440] Этап-5

[00441] К раствору 4 (0,1 г, 0,002 ммоль) в NMP (8 мл) при помешивании добавляли акрилоил хлорид (0.1 г, 0.001 моль) по каплям при температуре 0°С. Реакционную смесь держали при этой температуре в течение 10 минут, после чего разрешалось помешивать при этой температуре в течение 1,5 часа. Затем ее гасили 10% раствором натрия бикарбоната и экстрагировали EtOAc (2×15 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, колоночной хроматографии с гравитационным элюированием, и ожидаемое соединение элюировали CHCl₃/МеОН 90/10) с получением I-35 (20 мг, 18%) в форме беловатого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.11 (s, 3Н), 3.51 (s, 1Н), 4.61 (s, 2Н), 5.74 (d, J=9.08 Гц, 1Н), 6.25 (d, J=15.84 Гц, 1Н), 6.45 (s, 2Н), 7.02 (s, 1Н), 7.27-7.45 (m, 5Н), 7.91 (d, J=8.84 Гц, 2Н), 8.36 (s, 1Н), 8.93 (s, 1Н), 10.09 (s, 1Н), ЖХМС: m/e 400 (М+1).

ПРИМЕР 15

[00442] Получение (Е)-4-(диметиламино)-N-(3-(5-метил-2-(фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)бут-2-енамида I-38

[00443] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIEA, n-BuOH, 120°С, 30 минут, MB; В) NMP, 200°С, 10 минут, MB; С)) оксалил хлорид, CH₃CN, 30 минут при температуре 0°С, 2 часа при температуре 25°С, 5 минут при температуре 45°С, D) NMP, 0°С, 1 час.

[00444] Этап-1

[00445] Раствор 1 (2,0 г, 12 ммоль), 2 (2,0 г, [8 ммоль), DIEA (2,33 г,)8 ммоль) в n-BuOH (20,0 мл) облучали в микроволновой печи при 120°С в течение 30 мин. Реакционную смесь затем гасили водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, хлороформ/этил ацетат, 15/85) с получением 3 (1,3 г, 45%) в форме темно-коричневого твердого вещества.

[00446] Этап-2

[00447] Раствор 3 (1.0 г, 4.27 ммоль), 4 (1.5 г, 16.12 ммоль) в NMP (10 мл) облучали в микроволновой печи (200°С, 10 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с выпадением осадка. Сырой остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, CHCl₃/МеОН: 98/2) с получением 5 (0,5 г, 40,3%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00448] Этап-2

[00449] К раствору 6' (70 мг, 0,42 ммоль) в CH₃CN (1.0 мл) при помешивании добавляли оксалил хлорид (80 мг, 0.62 ммоль) при температуре 0°С. Реакционную смесь оставляли с перемешиванием при температуре 0°С в течение получаса, а затем при комнатной температуре в течение 2 часа. Окончательно реакционную смесь грели при 45°С в течение 5 минут, охлаждали и использовали на следующем этапе без дальнейшей очистки.

[00450] Этап-3

[00451] К раствору 5 (75 мг, 0,12 ммоль) в NMP (1 мл) при помешивании добавляли 6 при температуре 0°С. Реакционную смесь помешивали при 0°С в течение 1 часа, гасили холодной водой (5 мД), приводили к форме основания Et₃N и экстрагировали CH₂Cl₂ (3×10 мл). Объединенный органический экстракт промывали водой (5 мл), солевым раствором (5 мл) и сушили над Na₂SO₄. Концентрировали при пониженном давлении, затем очищали над силикагелем (60-120) при помощи 5% раствора метанола в хлороформе с получением сырого соединения (20 мг) в форме коричневого смолистого твердого вещества, которое затем снова добавляли в дихлорметан и перемешивали с 10% раствором бикарбоната в течение 30 минут, отделяли слой дихлорметана, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением I-38 (8 мг, 17%) в форме коричневого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.15 (s, 3Н), 2.32 (s, 6Н), 3.21 (d, J=5.76 Гц, 2Н), 6.27 (d, J=15.36 Гц, 1Н), 6.84-6.93 (m, 2Н), 7.14 (t, J=7.52 Гц, 2Н), 7.27-7.33 (m, 2Н), 7.44 (dd, J=2.04 Гц & 5.08 Гц, 1Н), 7.53 (d, J=7.72 Гц, 2Н), 7.80 (s, 1Н), 8.00 (s, 1Н); ЖХМС: m/e 402.8 (М+1).

ПРИМЕР 16

[00452] Получение N-(4-(5-метил-2-(фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-39

[00453] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-BuOH, 110°C, 45 минут, MB; В) Конц. HCl, n-BuOH, 150°С, 10 минут, MB: С) Акрилоил хлорид, NMP, 0°С - 30 минут, комн. т. - 2 часа.

[00454] Этап-1

[00455] Раствор 1 (0,4 г, 2,4 ммоль), 2 (0,3 г, 2,6 ммоль), DIPEA (0,46 г, 3,6 ммоль) в n-BuOH (10 мл) облучали в микроволновой печи (110°С, 45 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (20 мл), солевым раствором (20 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, CHCl₃/MeOH: 99/1) с получением 3 (350 мг, 62%) в форме беловатого твердого вещества.

[00456] Этап-2

[00457] Раствор 3 (0,2 г, 0,8 ммоль), 4 (0,63 г, 6,8 ммоль) и концентрированной HCl (0,03 г, 0,8 ммоль) в n-BuOH (10 мл) облучали в микроволновой печи (150°С, 10 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (10 мл), приводили к форме основания раствором натрия бикарбоната и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (15 мл), солевым раствором (15 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Сырой остаток очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120, CHCl₃/МеОН: 97/3) с получением 5 (110 мг, 47%) в форме коричневого смолистого твердого вещества.

[00458] Этап-3

[00459] К раствору 5 (0,06 г, 0,2 ммоль) в NMP (2 мл) при помешивании добавляли акрилоил хлорид (0.03 г, 0.3 ммоль) при температуре 0°С. Оставляли для перемешивания при той же температуре в течение 20 минут, а затем при комнатной температуре в течение 2 часа. Реакционную смесь тушили водой, приводили к форме основания 10% раствором натрия бикарбоната и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенный слой EtOAc промывали водой (10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 60-120) и окончательно методом препаративной ЖХВД с выходой I-39 (10 мг, 16%) в форме беловатого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.10 (s, 3Н), 5.71-5.76 (m, 1Н), 6.25 (dd, J=2.04 & 16.96 Гц, 1Н), 6.45 (dd, J=10.08 & 16.92 Гц, 1Н), 6.84 (t, J=7.30 Гц, 1H), 7.14-7.18 (m, 2H), 7.62-7.68 (m, 6H), 7.86 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 10.11 (s, 1H), ЖХМС: m/e 346 (M+1).

ПРИМЕР 17

[00460] Получение N-(3-(5-метил-2-(фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)пропионамида I^R-7

[00461] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) DIPEA, n-BuOH, 120°С, 30 минут, MB; В) NMP, 200°С, 10 минут, MB; С) 6, NMP, 0°С, 60 минут.

[00462] Этап-1

[00463] Раствор 1 (2,0 г, 12 ммоль), 2 (2,0 г, 18 ммоль), DIEA (2,33 г, 18 ммоль) в n-BuOH (20,0 мл) облучали в микроволновой печи при 120 в течение 30 мин. Реакционную смесь затем гасили водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, меш 60-120, EtOAc/CHCl₃: 15/85) с получением 3 (1.3 г, 45%) в форме темно-коричневого твердого вещества.

[00464] Этап-2

[00465] Раствор 3 (1.0 г, 4.27 ммоль), 4 (1.5 г, 16.12 ммоль) в NMP (10 мл) облучали в микроволновой печи (200°С, 10 минут). Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (100 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с выпадением осадка. Сырой остаток затем очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, CHCl₃/МеОН: 98/2) с получением 5 (0,5 г, 40,3%) в форме светло-коричневого твердого вещества.

[00466] Этап-3

[00467] К раствору 5 (75 мг, 0.25 ммоль) в NMP (1.0 мл) при помешивании при температуре 0°C добавляли пропаноил хлорид (6) (72 мг, 0.75 ммоль) и помешивали реакционную смесь при температуре 0°C в течение 60 минут. Затем реакционную смесь гасили водой (5 мл), приводили к форме основания Et3N и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные экстракты EtOAc промывали водой (10 мл), солевым раствором (10 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток далее очищали методом колоночной хроматографии (SiO₂, 230-400, метанол/хлороформ: 2/98) с получением I^R-7 (0,025 г, 28,73%) в форме беловатого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 1.08 (t, J=7.6 Гц, 3Н), 2.11 (s, 3Н), 2.31 (q, J=7.6 Гц, 2Н), 6.81 (t, J=7.2 Гц, 1Н), 7.11 (t, J=8 Гц, 2Н), 7.21-7.25 (m, 1H), 7.31 (d, J=8.40 Гц, 1Н), 7.36 (d, J=8.00 Гц, 1Н), 7.66 (d, J=8.40 Гц, 2Н), 7.86 (s, 1Н), 7.89 (s, 1Н), 8.35 (s, 1Н), 8.93 (s, 1Н), 9.81 (s, 1Н); ЖХМС: m/е 348.3 (М+1).

ПРИМЕР 18

[00468] Получение N-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)акриламида I-56

[00469] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) акрилоил хлорид, Et₃N, ДМФ, комн. т., 12 часов

[00470] Этап-1

[00471] К раствору 1 (0.15 г, 0.54 ммоль) и Et₃N (0.11 г, 1.08 ммоль) в ДМФ (1 мл) при помешивании при температуре 0°С добавляли акрилоил хлорид (0.09 г, 1.08 ммоль), по каплям в атмосфере N₂. Реакционную смесь оставляли дойти до комнатной температуры и помешивать последующие 12 часов. Затем ее тушили охлажденной льдом водой (2 мл) и экстрагировали EtOAc (2×15 мл). Объединенный экстракт EtOAc промывали солевым раствором (2 мл), сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с выпадением сырого осадка. Осадок далее очищали методом препаративной ЖХВД с выходом 1-56 (0.060 г, 33%) в форме бледно-желтого твердого вещества. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ ppm: 2.19 (s, 3Н), 5.72 (dd, J=2 & 10.08 Гц, 1Н), 6.22 (dd, J=2 & 16.92 Гц, 1H), 6.45 (dd, J=10 & 17 Гц, 1Н), 7.16 (d, J=8.36 Гц, 1Н), 7.32 (dd, J=1.92 & 8.16 Гц, 1Н), 7.42 (d, J=5.12 Гц, 1Н), 7.50-7.53 (m, 1Н), 7.95 (d, J=1.68 Гц, 1Н), 8.45 (dd, J=6.16 & 8.16 Гц, 1Н), 8.49 (d, J=5.16 Гц, 1H), 8.68 (dd, J=1.56 & 4.76 Гц, 1Н), 8.95 (s, 1Н), 9.25 (d, J=1.56 Гц, 1Н), 10.08 (s, 1Н); ЖХМС: m/e 332.4 (М+1).

ПРИМЕР 19

[00472] Общая схема получения соединений, имеющих енон-содержащую реакционноспособную группу, например, 3-метил-1-(3-(5-метил-2-(фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)бут-2-ен-1-она I-47

[00473] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже. Специалисты в данной области техники понимают, что I-47 является примером соединения, имеющего енон-содержащие реакционноспособные группы, и что другие соединения, имеющие енон-содержащис реакционноспособные группы, могут быть синтезированы по существу тем же образом, с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

[00474] Соединения 1 и 2 сочетают в присутствии триэтиламина с получением 3. Соединение 3 обрабатывают аналином при повышенной температуре, с получением соединения 4. Омыление соединения 4 при помощи гидроксида калия дает кислотное соединение 5, которое сочетают с N-O-диметилгидроксиламином при помощи EDC с получением соединения 6. Обработка соединения 6 при низкой температуре даст образцовое соединение I-47.

ПРИМЕР 20

[00475] Получение N-(3-(5-фтор-2-(4-(2-метоксиэтокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-182

[00476] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

А) 2, DIPEA, ТГФ, с обратным холодильником; В) 4, t-амиловый спирт, НОАс, с обратным холодильником; С) ТФА, ДХМ; D) 7, DIPEA, ТГФ, -10°С.

[00477] Этап-1

[00478] 1 (800 мг, 4.8 ммоль), 2 (996 мг, 4.8 ммоль) и основание Хунига (948 мкл, 5.75 ммоль) растворяли в ТГФ (20 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения, разделяли между водой/солевым раствором (10 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения. Титрировали EtOAc и гептаном с получением после фильтрации белого твердого вещества, 1 г. ЖХ/МС (RT=2.03/(M+1)) 339.1.

[00479] Этап-2

[00480] 3 (800 мг, 2.37 ммоль) и 4 (576 мг, 2.84 ммоль) суспендировали в трет-амиловом спирте (14 мл) и уксусной кислоте (5 капли). Нагревали с обратным холодильником в течение 4х часов. Охлаждали, удаляли растворители роторным испарением. Темное масло разделяли между водой, солевым раствором и ТГФ (по 10 мл каждого), встряхивали и разделяли слои, после чего органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли методом роторного испарения с получением фиолетового твердого вещества, 0.55 г. ЖХ/МС (RT=2.997/(М-Н)) 470.2. Дополнительные 150 мг продукта без защитной группы (ВОС) кристаллизовали из водного слоя.

[00481] Этап-3

[00482] К раствор 6 (550 мг, 1.17 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли ТФА (2 мл). Помешивали в течение 30 минут, при комнатной температуре в течение 4 часа, удаляли растворитель методом роторного испарения и разделяли масли с холодным (0°С) насыщенным натрия бикарбонатом (10 мл) и EtOAc (10 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения с получением темного масла. Очищали методом флэш-хроматографии с 20%-100% градиента Гептан/EtOAc при помощи системы комбифлэш с получением 309 мг светло-розового твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2.78/(М+1)) 370.2.

[00483] Этап-4

[00484] Раствор 6 (309 мг, 0.84 ммоль) в ТГФ (10 мл) охлаждали в ванне вода/лед-MeOH (-10°С). К нему добавляли 7 (71 мкл, 0.88 ммоль), помешивали в течение 10 минут, затем добавляли основание Хунига (145 мкл, 0.88 ммоль), и помешивали в течение 10 минут. Разделяли между водой/солевым раствором (10 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Удаляли растворители методом роторного испарения и толкли с диэтиловым эфиром с получением после фильтрации 285 мг (80%) в форме беловатого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2.79/(М+Н)) 424.2.

ПРИМЕР 21

[00485] Получение N-(3-(2-(3-хлоро-4-(пиридин-2-илметокси)фениламино)-5-фторпиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-86

[00486] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 20 с использованием 3-хлоро-4-(пиридин-2-илметокси)анилина вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.87/(М+Н)) 491.1.

ПРИМЕР 22

[00487] Получение N-(3-(5-фтор-2-(4-(2-(2-оксипирролидин-1-ил)этокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-92

[00488] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 20, с использованием 1-(2-(4-аминофенокси)этил)пирролидин-2-она вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.718/(М+Н)) 477.1.

ПРИМЕР 23

[00489] Получение N-(3-(5-фтор-2-(4-(1-гидрокси-2-метилпропан-2-илокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-93

[00490] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 20, с использованием 2-(4-аминофенокси)-2-метилпропан-1-ола вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.724/(М+Н)) 438.1.

ПРИМЕР 24

[00491) Получение N-(3-(5-фтор-2-(6-изопропоксипиридин-3-иламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-172

[00492] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов t промежуточных соединений, описанных в Примере 20, с использованием 6 изопропоксипиридин-3-амина вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.878/(М+Н)) 409.2.

ПРИМЕР 25

[00493] Получение N-(3-(5-фтор-2-(2-оксоиндолин-5-иламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-181

[00494] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 20, с использованием 5-аминоиндолин-2-она вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.617/(М+Н)) 405.1.

ПРИМЕР 26

[00495] Получение N-(2-хлоро-5-(5-фтор-2-(4-(2-метоксиэтокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-108

[00496] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 20, с использованием трет-бутил 5-амино-2-хлорофенилкарбамата вместо 4 на этапе 1. ЖХ/МС (RT=2.852/(М+Н)) 458.1.

ПРИМЕР 27

[00497] Получение N-(2-хлоро-5-(5-фтор-2-(6-изопропоксипиридин-3-иламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-107

[00498] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 20, с использованием трет-бутил 5-амино-2-фторфенилкарбамата вместо 2 на этапе 1 и 6-изопропоксипиридин-3-амина вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.938/(М+Н)) 443.1.

ПРИМЕР 28

[00499] Получение N-(2-фтор-5-(5-фтор-2-(4-(2-метоксиэтокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-87

[00500] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 20, с использованием трет-бутил 5 амино-2-фторфенилкарбамата вместо 2 на этапе 1. ЖХ/МС (RT=2.797/(М+Н)) 442.0.

ПРИМЕР 29

[00501] Получение N-(3-(5-фтор-2-(4-((1-метилпиперидин-4-ил)метокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-90

[00502] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов промежуточных соединений, описанных ниже.

A) 2, DIPEA, ТГФ, с обратным холодильником; В) 4, Pd(OAc)₂, X-Phos, CsCO₃, диоксан, с обратным холодильником, 12 часов; С) ТФА, ДХМ; D) 7, DIPEA, ТГФ, -10°С.

[00503] Этап-1

[00504] 1 (800 мг, 4.8 ммоль), 2 (996 мг, 4.8 ммоль) и основание Хунига (948 мкл, 5.75 ммоль) растворяли в ТГФ (20 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения, разделяли между водой/солевым раствором (10 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения. Титрировали EtOAc и гептаном с получением после фильтрации белого твердого вещества, 1 г. ЖХ/МС (RT=2.03/(M+1)) 339.1.

[00505] Этап-2

[00506] 3 (205 мг, 0.61 ммоль) и 4 (150 мг, 0.73 ммоль) растворяли в диоксане (4 мл). Дегазировали раствор в течение 1 минуты. Добавляли палладия ацетат (20 мг, 5 моль%), X-Phos лиганд (35 мг, 10 моль%) и CsCO₃ (325 мг, 1.2 ммоль) в указанном порядке. Дегазировали суспензию в течение 1 минуты и нагревали с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 12 часов. После охлаждения удаляли растворитель методом роторного испарения. Темное масло разделяли между водой/солевым раствором и EtOAc (по 5 мл каждого), встряхивали, отфильтровывали осадок и разделяли слои фильтрата. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли методом роторного испарения с получением темного масла. Очищали методом флэш-хроматографии с использованием 0-30% градиента Гептан/EtOAc и получали светло-желтое масло. ЖХ/МС (RT=3,043/(М+1)) 523,2.

[00507] Этап-3

[00508] К раствору 5 (144 мг, 0,27 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФА (1 мл). Помешивали в течение 30 минут, при комнатной температуре в течение 12 часов, удаляли растворитель методом роторного испарения и разделяли масли с холодным (0°С) насыщенным натрия бикарбонатом (5 мл) и EtOAc (5 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения с получением светло-желтой пены. ЖХ/МС (RT=2,723/(М+1)) 423,1.

[00509] Этап-4

[00510] Раствор 6 (105 мг, 0,25 ммоль) в ТГФ (3 мл) охлаждали в ванне вода/лед-МеОН (-10°С). К нему добавляли 7 (21 мкл, 0,26 ммоль), помешивали в течение 10 минут, затем добавляли основание Хунига ((51 мкл, 0.26 ммоль), и помешивали в течение 5 минут. Разделяли между водой/солевым раствором (10 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли методом роторного испарения с положением светло-желтой пены. ЖХ/МС (RT=2,726/(М+Н)) 477.1.

ПРИМЕР 30

[00511] Получение N-(3-(5-фтор-2-(6-((2-метоксиэтил)(метил)амино)пиридин-3-иламино)пиримидин-4-иламино)фенил)акриламида I-77

[00512] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 29, с использованием N²-(2-метоксиэтил)-N²-метилпиридин-2,5-диамина вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.739/(М+Н)) 438.1.

ПРИМЕР 31

[00513] Получение 1-(6-(5-фтор-2-(6-метоксипиридин-3-иламино)пиримидин-4-иламино)-2Н-бензо[b][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)проп-2-эн-1-она I-194

[00514] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов промежуточных соединений, описанных ниже.

А) 2, DIPEA, ТГФ, с обратным холодильником; В) 4, НОАс, трет-амиловый спирт, с обратным холодильником, 12 часов; С) ТФА, ДХМ; D) 7, DIPEA, ДХМ, NMP, -10°С.

[00515] Этап-1

[00516] 1 (186 мг, 1.1 ммоль), 2 (280 мг, 1.1 ммоль) и основание Хунига 220 мкл, 1.3 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения, разделяли между водой/солевым раствором (6 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения с получением палевого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=3,008/(М+1)) 381,1.

[00517] Этап-2

[00518] 3 (215 мг, 0,56 ммоль) и 4 (83 мг, 0,66 ммоль) суспендировали в трет-амиловом спирте (6 мл) и уксусной кислоте (3 капли). Нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов. Охлаждали и удаляли растворитель методом роторного испарения. Темное масло разделяли между водой, солевым раствором и EtOAc (по 5 мл каждого), встряхивали и разделяли слои, после чего органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли методом роторного испарения с получением масла. Очищали методом флэш-хроматографии и использованием 30-70% градиента гептан/этил ацетат при помощи системы комбифлэш с получением палевого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,011/(М+1)) 469,2.

[00519] Этап-3

[00520] К раствору 5 (200 мг, 0,43 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФА (1 мл). Помешивали в течение 30 минут, при комнатной температуре в течение 12 часов, удаляли растворитель методом роторного испарения и разделяли масли с холодным (0°С) насыщенным натрия бикарбонатом (5 мл) и EtOAc (5 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения с получением розового твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,782/(М+1)) 369,1.

[00521] Этап-4

[00522] Раствор 6 (150 мг, 0,41 ммоль) в ДХМ (2 мл) и NMP (0.5 мл) охлаждали в ванне вода/лед-МеОН (-10°С). К нему добавляли 7 (34 мкл, 0,43 ммоль), помешивали в течение 10 минут, затем добавляли основание Хунига (70 мкл, 0,43 ммоль), и помешивали в течение 10 минут. Разделяли между водой/солевым раствором (5 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Непосредственно очищали методом флэш-хроматографии с использованием 20-80% градиента гептан/этил ацетат с получением розового твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,8/(М+Н)) 423,1.

ПРИМЕР 32

[00523] Получение 1-(6-(5-фтор-2-(4-(2-метоксиэтокси)фениламино)пиримидин-4-иламино)-2Н-бензо[b][1,4]оксазин-4(3Н)-ил)проп-2-эн-1-она I-141

[00524] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 31, с использованием 4-метоксиэтокси)анилина вместо 4 на этапе 2. ЖХ/МС (RT=2.845/(М+Н)) 466,2.

ПРИМЕР 33

[00525] Получение 1-(6-(5-фтор-2-(6-метоксипиридин-3-иламино)пиримидин-4-иламино)индолин-1-ил)проп-2-эн-1-она I-166

[00526] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 31, с использованием трет-бутил 6-аминоиндолин-1-карбоксилата вместо 2 на этапе 1. ЖХ/МС (RT=2.825/(М+Н)) 407,1.

ПРИМЕР 34

[00527] Получение 1-(5-(5-фтор-2-(6-метоксипиридин-3-иламино)пиримидин-4-иламино)изоиндолин-2-ил)проп-2-эн-1-она I-165

[00528] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 31, с использованием трет-бутил 5-аминоизоиндолин-1-карбоксилата вместо 2 на этапе 1. ЖХ/МС (RT=2.751/(М+Н)) 407,1.

ПРИМЕР 35

[00529] Получение 1-(6-(4-(3-хлорфениламино)-5-фторпиримидин-2-иламино)-2Н-бензо[b][1,41оксазин-4(3Н)-ил)проп-2-эн-1-она I-149

[00530] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

A) 2, DIPEA, ТГФ, с обратным холодильником; В) 4, НОАс, трет-амиловый спирт, с обратным холодильником, 12 часов; С) ТФА, ДХМ; D) 7, DIPEA, ТГФ, -10°С.

[00531] Этап-1

[00532] 1 (484 мг, 2,9 ммоль), 2 (305 мг, 2.9 ммоль) и основание Хунига (526 мкл, 3,5 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения, разделяли меду водой/солевым раствором (10 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения. Очищали методом флэш-хроматографии и использованием 0-30% градиента гептан/этил ацетат при помощи системы комбифлэш с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2.03/(М+1)) 339.1.

[00533] Этап-2

[00534] 3 (150 мг, 0,58 ммоль) и 4 (175 мг, 0,7 ммоль) суспендировали в трет-амиловом спирте (8 мл) и уксусной кислоте (3 капли). Нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов. Охлаждали, удаляли растворители роторным испарением. Темное масло разделяли между водой, солевым раствором и EtOAc (по 5 мл каждого), встряхивали и разделяли слои, после чего органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли методом роторного испарения с получением темного масла. Очищали методом флэш-хроматографии и использованием 0-25% градиента гептан/этил ацетат при помощи системы комбифлэш с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,997/(М+1)) 470,2.

[00535] Этап-3

[00536] К раствору 5 (180 мг, 0,38 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТФА (1 мл). Помешивали в течение 30 минут, при комнатной температуре в течение 4 часа, удаляли растворитель методом роторного испарения и разделяли масло между холодным (0°С) насыщенным натрия бикарбонатом (5 мл) и EtOAc (5 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения с получением светло-желтого твердого вещества. ЖХ/МС (RT -2,723/(М+1)) 423,1.

[00537] Этап-4

[00538] Раствор 6 (150 мг, 0,4 ммоль) в ТГФ (3 мл) охлаждали в ванне вода/лед-МеОН (-10°С). К нему добавляли 7 (34 мкл, 0.42 ммоль), помешивали в течение)0 минут, затем добавляли основание Хунига (70 мкл, 0.42 ммоль), и помешивали в течение 10 минут. Разделяли между водой/полевым раствором (5 мл), встряхивали и разделяли слои. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли методом роторного испарения с получением светло-желтого твердого вещества. Очищали методом флэш-хроматографии и использованием 10-50% градиента гептан/этил ацетат при помощи системы комбифлэш с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,945/(М+Н)) 426.

ПРИМЕР 36

[00539] Получение 5-(2-(4-акрилоил-3,4-дигидро-2Н-бензо[b][[,4]оксазин-6-иламино)-5-фторпиримидин-4-иламино)индолин-2-она I-130

[00540] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 35, с использованием 5-аминоиндолин-2-она вместо 2 на этапе 1. ЖХ/МС (RT=2.673/(М+Н)) 447.1.

ПРИМЕР 37

[00541] Получение 4-(3-акриламидофениламино)-2-(фениламино)пиримидин-5-карбоксиламида I-230

[00542] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных ниже.

А) 2, NEt₃, ДХМ, 0°С до комн. т.; В) 4, DIPEA, ТГФ, комн. т., 12 часов; С) 6, DIPEA, t-амиловый спирт, с обратным холодильником, 4 часа; D) ТФА, ДХМ, комн. т.; Е) 7, NEt₃, ТГФ, 0°С; F) ТФА, ТЮН, ДХМ, комн. т.

[00543] Этап-1

[00544] 1 (500 мг, 2.4 ммоль, полученный из 2,4-дигидроксипиримидин-5-карбоновой кислоты согласно J Med. Chem. 50: 591 (2007) и US 2007/0072851) растворяли в ДХМ (10 мл) и охлаждали а водяной/ледяной ванне (0°С). добавляли 2 (309 мкл, 2.4 ммоль) и помешивали смесь в течение 10 минут. Добавляли триэтиламин (365 мкл, 2.6 ммоль), после чего смесь оставляли для нагревания при комнатной температуре в течение 30 минут. Методом роторного испарения уменьшали объем растворителя и непосредственно очищали методом флэш-хроматографии с использованием градиента -30% гептан/этил ацетат при помощи системы комбифлэш с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,789/(M+1))312.

[00545] Этап-2

[00546] 3 (170 мг, 0,55 ммоль), 4 (113 мг, 0,55 ммоль) и основание Хунига (108 мкл, 0,65 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл). Помешивали в течение 12 часов. Разделяли между водой/солевым раствором, встряхивали и разделяли слои, после чего органическую фазу сушили над сульфатом натрия. Удаляли растворитель методом роторного испарения с получением после титрования с EtOAc белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=3,123/(М+1)) 484.

[00547] Этап-3

[00548] 5 (230 мг, 0,48 ммоль), 6 (280 мг, 1.1 ммоль) и основание Хунига 94 мкл, 0,57 ммоль) растворяли в t-амиловом спирте (6 мл). Нагревали с обратным холодильником, охлаждали и добавляли к твердой массе воду. Встряхивали, фильтровали и сушили с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=3,182/(М+1)) 541,2.

[00549] Этап-4

[00550] 7 (180 мг, 0,33 ммоль) суспендировали в ДХМ (10 мл) и обрабатывали ТФА (1 мл). Помешивали в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли ДХМ (40 мл) и промывали NaOH (1N, 25 мл). Встряхивали до образования осадка, фильтровали и сушили с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,934/(М+1)) 441,1.

[00551] Этап-5

[00552] Суспензию 8 (130 мг, 0,29 ммоль) в ТГФ (6 мл) охлаждали в ванне с водой/льдом-МеОН (0°С). К нему добавляли 9 (25 мкл (плюс дополнительные 5 мкл), 0.38 ммоль (всего)), затем добавляли триэтиламин (43 мкл (плюс дополнительные 11 мкл), 0.38 ммоль (всего)), и помешивали, суммарное время помешивания составляло 1 час. Добавляли воду, встряхивали, отфильтровывали и выбрасывали оставшийся осадок. Фильтрат сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли методом роторного испарения с получением желтого твердого вещества. Очищали методом флэш-хроматографии и использованием 0-25% градиента гептан/этил ацетат при помощи системы комбифлэш с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,964/(М+Н)) 495,1.

[00553] Этаи-6

[00554] К суспензии 1-231 (30 мг, 0.061 ммоль) в ДХМ (4 мл) добавляли ТФА (200 мкл) и трифлатную кислоту (68 мкл, 0.61 ммоль). Помешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Удаляли растворитель методом роторного испарения при пониженном давлении и разделяли между холодным (0°С) насыщенным натрия бикарбонатом (10 мл) и EtOAc (10 мл), встряхивали и разделяли слои. Сушили органический слой над сульфатом натрия и удаляли растворитель методом роторного испарения, титрировали с диэтиловым эфиром с получением белого твердого вещества. ЖХ/МС (RT=2,715/(М+Н)) 375,1.

ПРИМЕР 38

[00555] Получение 4-(3-акриламидофениламино)-N-фенил-2-(фениламино)пиримидин-5-карбоксиламида I-222

[00556] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 37, с использованием анилина вместо 2 на этапе 1, и пропуская этап 6. ЖХ/МС (RT=2.991/(М+Н)) 451.2.

ПРИМЕР 39

[00557] Получение 4-(3-акриламидофениламино)-N-циклопропил-2-(фениламино)пиримидин-5-карбоксиламида I-221

[00558] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 37, с использованием циклопропиламина вместо 2 на этапе 1, и пропуская этап 6. ЖХ/МС (RT=2.838/(М+Н)) 415.2.

ПРИМЕР 40

[00559] Получение 4-(3-акриламидофениламино)-2-(3-метоксифениламино)пиримидин-5-карбоксиламида I-210

[00560] Указанное в названии соединение получали с использованием схем, этапов и промежуточных соединений, описанных в Примере 37, с использованием 3-метоксиамина вместо 6 на этапе 3. ЖХ/МС (RT=2.743/(М+Н)) 405.1.

ПРИМЕР 41

[00561] Получение 4-(3-акриламидофениламино)-2-(6-метоксипиридин-3-иламино)пиримидин-5-карбоксиламида I-209

1. Соединение формулы I-b:

или его фармацевтически приемлемая соль, где:
Кольцо A представляет собой возможно содержащий заместители фенил;
Кольцо B представляет собой возможно содержащий заместители фенил;
R¹ представляет собой реакционноспособную группу -L-Y, выбранную из следующих (a), (b), (h), (m), (n) и (p) комбинаций -L- и -Y, причем R¹ присоединен к Кольцу A в положении, отличном от атома, соседнего с атомом, присоединенным к W¹:
(a) -L-Y представляет собой , или ; или
(b) L представляет собой бивалентную C_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь, и одно метиленовое звено в L заменено на -С(О)-, -NRC(O)-, -N(R)SO₂, -S(O)-, -SO₂- или -ОС(О)-, и одно дополнительное метиленовое звено в L возможно заменено на -N(R)-; и Y представляет собой водород, C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащую в качестве заместителей галоген или насыщенное 5-6-членное гетероциклическое кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота и кислорода; или
(h) L представляет собой бивалентную C_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну алкилиденильную двойную связь, и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -C(O)-, -NRC(O)-, -N(R)SO₂-, -S(O)-, -SO₂- или -OC(O)-; и Y представляет собой водород, C_1-6 алифатическую группу или 5-членное гетероарильное кольцо, содержащее 2 атома азота; или
(m) L представляет собой -С(О)- и Y представляет собой C_2-6алкенил; или
(n) L представляет собой -N(R)C(O)- и Y представляет собой C_2-6алкенил; или
(p) L представляет собой -CH₂NHC(O)- и Y представляет собой C_2-6алкенил;
R^y представляет собой -CN, -CF₃, C_1-4 алифатическую группу, C_1-4 галогеналифатическую группу, -OR, -C(O)R или -C(O)N(R)₂;
каждая группа R независимо представляет собой водород или группу, выбранную из: C_1-6 алифатической группы, возможно содержащей в качестве заместителя галоген, -(CH₂)_0-4R°, -(CH₂)_0-4OR°, -(CH₂)_0-4N(R°)₂, -(CH₂)_0-4N(R°)C(O)OR°, -(CH₂)_0-4C(O)R°, -(CH₂)_0-4S(O)₂R°, или 5-6-членного насыщенного или арильного кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота или кислорода, возможно замещенного группой =O, -(CH₂)_0-4R°, -(CH₂)_0-4N(R°)₂ или -(CH₂)_0-4OR°; фенила;
5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, возможно замещенного группой -(CH₂)_0-4R°, -(CH₂)_0-4OR° или =O; или
6-членного моноциклического гетероарильного кольца, содержащего 1 атом азота;
каждый R° независимо выбран из водорода, C_1-6 алифатической группы, 5-6-членного насыщенного кольца, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из азота или кислорода; фенила; причем каждый R° возможно содержит в качестве заместителя -(СН₂)_0-2ОН, $$-{\left(C{H}_2\right)}_{0-2}{R}^{•}$$ или =O, где $$R^{•}$$ выбран из C_1-4 алифатической группы; или
два независимых R° вместе с атомом (атомами), расположенным между ними, образуют 5-6-членное насыщенное или арильное моноциклическое кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, представляющих собой азот;
W¹ представляет собой -NR²-;
W² представляет собой -NR²-;
R² представляет собой водород, C_1-6 алифатическую группу или -C(O)R;
m и p независимо равны 0, 1, 2, 3 или 4; и в каждом случае R^x независимо выбран из -R, -OR, -O(CH₂)_qOR или галогена, где q=2; и
в каждом случае R^v независимо выбран из -R или галогена.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что:
L представляет собой -CH₂NHC(O)- и Y представляет собой C_2-6 алкенил.

3. Соединение по п.1, отличающееся тем, что:
L представляет собой бивалентную C_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну двойную связь, и одно метиленовое звено в L заменено на -C(O)-, -NRC(O)-, -N(R)SO₂-, -S(O)-, -SO₂- или -OC(O)-, и одно дополнительное метиленовое звено в L возможно заменено на -N(R)-; и
Y представляет собой водород или C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащую в качестве заместителей галоген.

4. Соединение по п.3, отличающееся тем, что L представляет собой -NRC(O)CH=CH-, -NRC(O)CH=CHCH₂N(CH₃)-, -CH₂NRC(O)CH=CH-, -NRSO₂CH=CH-, -NRSO₂CH=CHCH₂-, -NRC(O)C(=CH₂)CH₂- или -CH₂NRC(O)CH=CH-; причем R представляет собой H или возможно содержащую заместители C_1-6 алифатическую группу; и Y представляет собой водород или C_1-6 алифатическую группу, возможно содержащую в качестве заместителей галоген.

5. Соединение по п.4, отличающееся тем, что L представляет собой -NHC(O)CH=CH-, -NHC(O)CH=CHCH₂N(CH₃)-, -CH₂NHC(O)CH=CH-, -NHSO₂CH=CH-, -NHSO₂CH=CHCH₂-, -NHC(O)C(=CH₂)CH₂- или -CH₂NHC(O)CH=CH-.

6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что -L-Y представляет собой -NHC(O)CH=CH₂.

7. Соединение по п.1, отличающееся тем, что L представляет собой бивалентную C_2-8 линейную или разветвленную углеводородную цепь, причем L содержит по меньшей мере одну алкилиденильную двойную связь, и по меньшей мере одно метиленовое звено в L заменено на -C(O)-, -NRC(O)-, -N(R)SO₂-, -S(O)-, -SO₂- или -OC(O)-.

8. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R¹ выбран из:








.

9. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Кольцо A выбрано из:

или .

10. Соединение по п.9, отличающееся тем, что Кольцо A выбрано из:
и .

11. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Кольцо B выбрано из:













или .

12. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Кольцо B выбрано из:


и .

13. Соединение по п.6, отличающееся тем, что каждый R² представляет собой водород.

14. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R^x независимо выбран из низшего алкила, низшего алкокси, низшего алкоксиалкокси и галогена.

15. Соединение по п.14, отличающееся тем, что R^x независимо выбран из метила, метокси, метоксиэтокси и фтора.

16. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:


















или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.

17. Фармацевтическая композиция, способная ингибировать по меньшей мере одну из следующих киназ: ВТК, TEC, BMX, ITK, ErbB1, ErbB4 и/или JAK3, содержащая эффективное количество соединения по п.1 и фармацевтически приемлемый адъювант, носитель или среду.