Производные 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола, обладающие противораковой активностью

Авторы патента:

Бачурин Сергей Олегович (RU)

Серков Игорь Викторович (RU)

Безуглов Владимир Виленович (RU)

Акимов Михаил Геннадиевич (RU)

Фомина-Агеева Елена Владимировна (RU)

Прошин Алексей Николаевич (RU)

C07D285/08 - 1,2,4-тиадиазолы; гидрированные 1,2,4-тиадиазолы

A61P35/00 - Противоопухолевые средства

A61K31/433 - тиадиазолы

Владельцы патента RU 2536824:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физиологически активных веществ Российской академии наук (ИФАВ РАН) (RU)

Изобретение относится к применению в качестве цитостатических средств для борьбы с онкологическим процессом производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола общей формулы (I) в виде оснований или фармакологически приемлемых солей. В формуле (I) R¹, R² могут быть одинаковыми или различными и независимо означают водород, галоген, алкил, R³ означает алкил, аралкил, гетероаралкил, циклоалкил. 2 табл.

(I)

Изобретение относится к области синтеза физиологически активных соединений и может найти применение при изготовлении фармакологических препаратов для лечения онкологических заболеваний.

Злокачественные новообразования устойчиво занимают второе место в структуре заболеваемости и смертности человека. Значительные усилия и средства направляются во всем мире на разработку новых подходов к терапии новообразований и поиск эффективных лекарственных средств. Однако проблема создания адекватного фармакологического инструментария для борьбы с онкологическими заболеваниями далека от своего решения. Ежегодно выходящие на рынок препараты для терапии данного заболевания оказываются либо чересчур специфичными для какого-то одного типа рака, и только на определенной стадии, либо слишком токсичными для организма пациента в целом. При этом разработке высокоэффективных препаратов препятствует высокая гетерогенность раковых структур и обилие мутаций в тех частях клетки, которые могли бы быть потенциальными мишенями терапии.

Существует два принципиально различных подхода к поиску новых противораковых агентов: синтез соединений, направленных на определенную мишень в раковых клетках, способных подавить их рост, и поиск новых цитостатических и цитотоксических агентов среди библиотек органических соединений. При втором подходе механизм антиракового действия вещества чаще всего исследуется после доказательства его эффективности в клинических исследованиях. Учитывая гетерогенность раковых клеток, новые соединения должны быть мультифункциональными, что позволит воздействовать на различные мишени, которые могут быть по-разному доступны в различных раковых клетках.

Производные тиадиазолов обладают сильной ароматичностью циклической системы, что приводит к их высокой стабильности in vitro. У этих соединений, как правило, отсутствует токсичность для высших позвоночных, включая человека. Присоединение к тиадиазольному ядру различных функциональных групп, способных реагировать с различными рецепторами, позволяет получить физиологически активные соединения с превосходными фармакологическими свойствами. Эти вещества проявляют фунгицидную, противобактерицидную, инсектицидную, гербицидную, противовоспалительную, нейростимулирующую и антиконвульсивную активность [N. Siddiqui, P. Ahuja, W. Ahsan, S.N. Pandeya, M.S. Alam // «Thiadiazoles: Progress Report on Biological Activities» Journal of Chemical and Pharmaceutical Research 2009, 1(1): 19-30]. Некоторые производные 1,2,4-тиадиазола могут быть основой препаратов для борьбы с болезнью Альцгеймера, заболеваниями сердечно-сосудистой системы [Gupta A., Mishra P., Pandeya S.N. et al. // Eur. J. Med. Chem. 2009. V.44. P.1100-1105]. Эти соединения обладают способностью связываться с рядом G-белоксопряженных рецепторов (опиодных, дофаминовых, аденозиновых) и могут выступать как противовоспалительные агенты [A. Castro, Т. Castano, A. Encinas. W. Porcal, С. Gil. Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 1644].

Авторам настоящего изобретения удалось обнаружить новые, ранее неизвестные физиологически активные свойства для производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола, а именно - высокую противораковую активность.

Изобретение направлено на решение задачи расширения арсенала средств, которые могут быть использованы в качестве новых и эффективных лекарств для лечения онкологических заболеваний.

Поставленная задача решается применением производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола общей формулы:

, где

R¹, R² могут быть одинаковыми или различными и независимо означают водород, галоген, алкил;

R³ означает алкил, аралкил, гетероаралкил, циклоалкил;

в виде оснований или фармакологически приемлемых солей.

Термин "галоген" означает хлор, фтор, бром или йод.

Термин "алкил" означает незамещенную или замещенную алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 12 атомов углерода. Заместителями в алкильной группе могут быть галогены, гидрокси- и алкоксигруппы (например, метокси, этокси и аналогичные), циано, нитро, тригалогенметильные (например, трифторметил и аналогичные), необязательно замещенные аминогруппы (например, амино, диметиламино, ацетиламино, N-пиперидино, N-морфолино и аналогичные), ацильные группы (например, формил, ацетил, бензоил и аналогичные), карбоксамидные (например, N,N-диэтилкарбоксамидная и аналогичные), карбоксигруппы, карбалкоксигруппы и аналогичные.

Термин "аралкил" означает алкильную группу с концевым необязательно замещенным арильным заместителем.

Термин "гетероаралкил" означает гетероарил, к которому присоединена алкильная группа, охарактеризованная выше. Примеры подходящих заместителей включают необязательно замещенные этилиндол-3-ил, пропил-3-имидазол-1-ил.

Термин "циклоалкил" означает насыщенную необязательно замещенную циклическую группу с 3-8 кольцевыми атомами углерода, необязательно включающую гетероатомы N и О в количестве от 1 до 2 (например, циклопропил, циклогексил, пиперазинил, морфолинил).

Синтез указанных соединений описан ранее [Прошин А.Н., Бачурин С.О. Патент РФ №2449997, "5-Амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазолы", от 10.05.2012; Прошин А.Н., Серков И.В., Бачурин С.О. "Новые бинарные соединения на основе 1,2,4-тиадиазола" ДАН, 2012, 446, №1, с.48-50; Proshin A.N.; Serkov I.V.; Bachurm S.O., "5-Amino-[1,2,4]thiadiazole derivatives", WO 2012050484, Pub. 19.04.2012, EP 2628734, Pub 21.08.2013].

Способность изученных соединений оказывать цитотоксическое действие подтверждена на культурах раковых клеток крысиной глиомы С6 и человеческой остеосаркомы HOS. Во всех экспериментах указанные соединения проявляли умеренную или сильную цитостатическую активность и вызывали гибель раковых клеток в концентрациях от 2 до 100 мкМ.

Таким образом, применение производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4] тиадиазола решает задачу расширения номенклатуры веществ, обладающих способностью ингибировать раковые клетки, т.к. ранее противораковые свойства этих соединений не были известны.

Методика эксперимента

1. Культивирование клеток

Клетки глиомы С6 крысы (клеточный банк Российской коллекции клеточных культур. Институт цитологии РАН, СПб) культивировали при температуре 37°C в атмосфере 5% CO₂ в среде DMEM (ПанЭко, Россия), содержавшей 10% телячьей эмбриональной сыворотки (РАА Laboratories, США), 2 мМ глутамина, 25 мМ HEPES [6], 100 ед./мл пенициллина, 0.1 мг/мл стрептомицина и 0.25 мкг/мл амфотерицина В (ПанЭко, Россия).

Клетки человеческой остеосаркомы HOS (клеточный банк Российской коллекции клеточных культур. Институт цитологии РАН, СПб) культивировали при температуре 37°C в атмосфере 5% CO₂ в среде Игла MEM с солями Эрла (ПанЭко, Россия), содержавшей 10% телячьей эмбриональной сыворотки (РАА Laboratories, США), 2 мМ аланилглутамина, 1 мМ пирувата натрия, набор заменимых аминокислот для среды MEM (ПанЭко, Россия), 100 ед./мл пенициллина, 0.1 мг/мл стрептамицина и 0.25 мкг/мл амфотерицина В (ПанЭко, Россия).

Прикрепленные клетки снимали с помощью 0.25% раствора трипсина в 0.53 мМ ЭДТА с солями Хэнкса (ПанЭко, Россия). Подсчет клеток выполняли с помощью камеры Горяева.

2. Определение ингибирующей активности веществ

Для анализа цитотоксичности исследуемых веществ культуры клеток рассеивали в 96-луночные планшеты в количестве 1.25×104 клеток/см² и растили в течение трех дней до плотности 105 клеток/см² (половина максимальной плотности клеток). Серийные разведения испытуемых веществ в диапазоне 0.1-100 мкМ (финальная концентрация после добавления к клеткам) готовили в ДМСО и растворяли в среде культивирования, после чего добавляли к культуре клеток (три повтора для каждой концентрации) и инкубировали 18 часов. Время инкубации выбирали, исходя из критерия наибольших различий между веществами. Финальная концентрация ДМСО составила 0.5%. К контролю добавляли только ДМСО в финальной концентрации 0.5%. Отдельно был поставлен контроль без ДМСО (нет различий с контролем с 0.5% ДМСО). Для оценки жизнеспособности клеток под действием исследуемых веществ использовали МТТ-тест (оценка восстановления красителя МТТ митохондриями живых клеток) [Mosmann Т. (1983) J. Immunol. Methods, 65, 55-63.]. После удаления среды с исследуемыми веществами клетки инкубировали 1.5 ч с 0.5 мг/мл раствором МТТ (ПанЭко, Россия) в растворе Хэнкса (ПанЭко, Россия). После этого раствор удаляли, растворяли клетки в ДМСО и оценивали количество восстановленного красителя фотометрически при длинах волн 574 и 620 нм с помощью аппарата Эфос 9505 (МЗ Сапфир, Россия). Дополнительно перед проведением МТТ-теста состояние клеток оценивали микроскопически. Каждый эксперимент повторяли три раза. Кривые для вычисления LD₅₀ строили с помощью программы GraphPad Prism 5.0, в ней же проводили дисперсионный анализ данных с применением теста Тьюкея (Tukey). Достоверными считали отличия с p<0.05.

Ниже приведены результаты определения цитотоксической активности производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола и их солей на клетках глиомы С6 крысы (табл.1) и на клетках остеосаркомы человека HOS (табл.2), которые иллюстрируют, но не исчерпывают данное изобретение.

Таблица 1
Результаты определения цитотоксической активности производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола и их солей на клетках глиомы С6 крысы.
№	R¹	R²	R³	HCl	LD₅₀, мкМ
1	Cl	Cl		-	6±5
2	Cl	Cl		-	94±9
3	F	Cl		-	11±1
4	Br	H		-	20±2
5	Me	H		-	79±9
6	Me	Cl		-	15.9±0.3
7	F	Cl		-	9±11
8	Cl	Cl		-	6±5
9	Me	Cl		HCl	18±8
10	Cl	Cl		2HCl	10±4
11	H	Cl		HCl	21±4
12	H	Cl		-	14±4

13	Н	Cl		HCl	21±8
14	Cl	Cl		HCl	2.9±0.6
15	Cl	Cl	Me	-	15.4±0.3
16	CH(OH)Me	H		-	14±2
17	H	Cl		2HCl	10±4

Как видно из этой таблицы, большинство соединений проявляет активность при концентрациях от 2 до 20 мкМ.

Таблица 2
Цитотоксическая активность производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола и их солей на клетках остеосаркомы человека HOS (шифр соединений соответствует структурам в табл.1).
№	LD₅₀, мкМ
1	20±6
7	51±3
8	26.5±0.7
10	28±6
17	20±7

На данной линии клеток активность соединений находилась в пределах 13-50 мкМ.

Применение в качестве цитостатических средств для борьбы с онкологическим процессом производных 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола общей формулы:
,
где R¹, R² могут быть одинаковыми или различными и независимо означают водород, галоген, алкил;
R³ означает алкил, аралкил, гетероаралкил, циклоалкил;
в виде оснований или фармакологически приемлемых солей.

Настоящее изобретение относится к соединениям, представленным формулой (I), где Х1 и X2 независимо представляют собой СН или N; кольцо U представляет собой бензольное кольцо, пиразольное кольцо, 1,2,4-оксадиазольное кольцо, 1,2,4-тиадиазольное кольцо, изотиазольное кольцо, оксазольное кольцо, пиридиновое кольцо, тиазольное кольцо или тиофеновое кольцо; m представляет собой целое число, имеющее значение от 0 до 1; n представляет собой целое число, имеющее значение от 0 до 3; R1 представляет собой гидроксигруппу или C1-6 алкил; R2 представляет собой любой из (1)-(3): (1) атом галогена; (2) гидроксигруппу; (3) C1-6 алкил, или C1-6 алкокси, каждый из которых может независимо содержать любую группу, выбранную из группы заместителей α; группа заместителей α включает атом фтора и гидроксигруппу, или его фармацевтически приемлемая соль.

5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазолы // 2449997

Изобретение относится к производным 5-амино-3-(2-аминопропил)-[1,2,4]тиадиазола общей формулы где R1, R2, R 3 могут быть одинаковыми или различными и независимо означают водород, возможно замещенный алкил, возможно замещенный арил, возможно замещенный аралкил, гетероаралкил (где 5- или 6-членный N-, О- или S-гетероароматический цикл), циклоалкил, 2,2,6,6-тетраметил-пиперидин-4-ил, а также R1+R2 могут означать гетероцикл, выбранный из необязательно замещенных пирролидина, пиперидина, азепана, пиперазина, морфолина, где возможными заместителями могут быть гидроксил, цианогруппа, галогены, алкилы, низшие алкоксигруппы, низшие алкотиогруппы, тригалогенметильные, сульфамидные, необязательно замещенные аминогруппы (амино, диметиламино, диэтиламино), при условии, что когда R1=H, тогда R2 является отличным от водорода или метила.

5-амино-3-(2-нитроксипропил)-1,2,4-тиадиазолы // 2434856

Изобретение относится к производным 5-амино-3-(2-нитроксипропил)-1,2,4-тиадиазолов общей формулы , где R1, R2 могут быть одинаковыми или различными и независимо означают водород, замещенные или незамещенные арил, или гетероарил, или аралкил, алкил, циклоалкил, а также R1+R2 могут означать гетероцикл (не обязательно замещеные пиперазин и пиперидин).

Производные оксимов и их получение // 2420525

Гетероарилбензамидные производные для применения в качестве активаторов глюкокиназы (glk) в лечении диабета // 2403246

Гетероароматические производные мочевины и их применение в качестве активаторов глюкокиназы // 2386622

Изобретение относится к соединениям общей формулы (I) и к их фармацевтически приемлемым солям, оптическим изомерам или их смеси в качестве активаторов глюкокиназы. .

Ингибиторы gsk-3 // 2379300

Способ получения 3,5-диамино-1,2,4-тиадиазола // 2348623

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения 3,5-диамино-1,2,4-тиадиазола, используемого в синтезе лекарственных препаратов, макрогетероциклических соединений, биологически активных веществ и др.

Соединение малононитрила в качестве пестицида для борьбы с вредителями сельского хозяйства // 2347779

Производные гетероарилкарбамоилбензола // 2330030

Гетероарильные соединения и их применение // 2536584

Изобретение относится к соединению структурной формулы I-b, обладающему ингибирующей активностью в отношении ВТК, TEC, BMX, ITK, ErbB1, ErbB4 и/или JAK3 киназ. В формуле (I-b) кольцо A и кольцо B представляют собой фенил; Ry представляет собой -CN, -CF3, C1-4 алифатическую группу, C1-4галогеналифатическую группу, -OR, -C(O)R или -C(O)N(R)2; каждая группа R независимо представляет собой водород или группу, выбранную из C1-6алифатической группы, возможно содержащей в качестве заместителя галоген, -(CH2)0-4R°, -(CH2)0-4OR°, -(CH2)0-4N(R°)2, -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°, -(CH2)0-4C(O)R°, -(CH2)0-4S(O)2R°, или 5-6-членного насыщенного или арильного кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота или кислорода, возможно замещенного группой =O, -(CH2)0-4R°, -(CH2)0-4N(R°)2 или -(CH2)0-4OR°; фенила; 5-6-членного гетероциклического кольца, содержащего 1-2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, возможно замещенного группой -(CH2)0-4R°, -(CH2)0-4OR° или =O; или 6-членного моноциклического гетероарильного кольца, содержащего 1 атом азота; W1 и W2 представляют собой -NR2-; R2 представляет собой водород, C1-6алифатическую группу или -C(O)R; m и p независимо равны 0, 1, 2, 3 или 4; Rx независимо выбран из -R, -OR, -O(CH2)qOR или галогена, где q=2; Rv независимо выбран из -R или галогена; значения радикалов R1 и R° приведены в формуле изобретения.

Применение карбоксиметилцеллюлозы для контроля выдавливаемости и времени затвердения композиций, содержащих один или более керамических материалов // 2536415

Изобретение относится к набору, содержащему гемигидрат сульфата кальция, спрессованные частицы дигидрата сульфата кальция, дополнительно содержащие одно или более терапевтически, профилактически и/или диагностически активных веществ, и натрий-карбоксиметилцеллюлозу (Na-CMC) и водную среду, включая воду.

Композиция для лечения рака предстательной железы // 2536245

Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ лечения рака предстательной железы, включающий введение пациенту композиции, содержащей лиофилизат дегареликса или его фармацевтически приемлемой соли и эксципиента, растворенный в растворителе, в начальной дозе 200-300 мг дегареликса в концентрации 20-80 мг дегареликса на мл растворителя с последующей, через 14-56 суток после начальной дозы, поддерживающей дозой 320-550 мг дегареликса в концентрации 50-80 мг дегареликса на мл растворителя, возможно с одной или более чем одной последующей дополнительной поддерживающей дозой 320-550 мг дегареликса в концентрации 50-80 мг дегареликса на мл растворителя, вводимыми с интервалом от 56 суток до 112 суток между каждой поддерживающей дозой.

Угнетение опухолей с помощью плацентарного перфузата человека и выделенных из плаценты человека вспомогательных натуральных клеток-киллеров // 2536242

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению клеток плацентарного перфузата человека в получении лекарственного средства для подавления пролиферации опухолевых клеток у индивида.

Производные 6-аминохиназолина или 3-цианохинолина, способы их получения и их применение в качестве ингибитора рецепторных тирозинкиназ egfr или her-2 // 2536102

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I) или к его рацемату, энантиомеру, диастереоизомеру и их смеси, а также к их фармацевтически приемлемой соли, где A выбран из группы, состоящей из атома углерода или атома азота; когда A представляет собой атом углерода, R1 представляет собой C1-C6-алкоксил; R2 представляет собой циано; когда A представляет собой атом азота, R1 представляет собой атом водорода или C1-C6-алкоксил; где указанный C1-C6-алкоксил необязательно дополнительно замещен одной группой C1-C6-алкоксил; R2 отсутствует; R3 представляет собой радикал, имеющий приведенную ниже формулу: или ; где D представляет собой фенил, где фенил необязательно дополнительно замещен одним или двумя атомами галогена; T представляет собой -O(CH2)r-; L представляет собой пиридил; R4 и R5 каждый представляет собой атом водорода; В представляет собой атом углерода; R6 и R7 каждый независимо выбран из атома водорода или гидроксила; R8 представляет собой атом водорода; R9 представляет собой атом водорода или C1-C6-алкил; r равно 1 и n равно 2 или 3.

Биспецифические связывающие агенты с межвидовой специфичностью // 2535992

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложен полипептид, содержащий два связывающих фрагмента, представленных антителами, причем первый из них связывается с эпитопом СD3ε(эпсилон)-цепи человека и примата, не являющегося шимпанзе, в частности Callithrix jacchus, Saguinus oedipus и Saimirí sciureus, а второй - с EGFR, Her2/neu или IgE человека и/или примата, не являющегося шимпанзе, причем упомянутый эпитоп СD3ε включает аминокислотную последовательность Gln-Asp-Gly-Asn-Glu.

4-изопропил-7-метокси-2а1-метил-2,2а,2а1,3,5а,9b-гексагидрофлуорено[9,1-bc]фуран-8-ол, обладающий противоопухолевой активностью // 2535926

Изобретение относится к новому соединению, а именно 2,2a,2al,3,5a,9b-гексагидрофлуорено[9,1-bc]фуран-8-олу формулы 1 , который обладает противоопухолевой активностью. 2 ил., 5 табл., 1 пр. .

Фосфорсодержащие фторированные производные 1,4-нафтохинона, обладающие цитотоксической активностью по отношению к раковым клеткам человека в культуре // 2535676

Изобретение относится к новым фторированным производным 1,4-нафтохинона общей формулы (I) обладающим цитотоксической активностью по отношению к раковым клеткам, которые могут найти применение в медицине.

Способы получения и применения мультипотентных клеточных популяций // 2535365

Изобретение относится к области биотехнологии и клеточной технологии. Заявленное изобретение направлено на создание плюрипотентных, мультипотентных и/или самообновляющихся клеток, которые способны начать дифференцироваться в культуре в различные типы клеток и способны к дальнейшей дифференцировке in vivo.

Индуцирующие апоптоз средства для лечения злокачественной опухоли и иммунных и аутоиммунных заболеваний // 2535347

Изобретение относится к соединениям формулы (I), где А1 представляет собой N или С (А2); А2 представляет собой Н, F, Cl или CN; В1 представляет собой Н, OR1, SO2R1, NHR1, NHC(O)R1, F или Cl; D1 и Е1 представляют собой Н или Cl; Y1 представляет собой Н, CN, NO2, F, Cl, Br, CF3, R17, OR17, SO2R17 или C(O)NH2; или Y1 и В1, вместе с атомами, к которым они присоединены, представляют собой 5- или 6-членный гетероарен, имеющий 2-3 атома азота, где гетероареновые кольца являются незамещенными или замещенными (О); G1 представляет собой Н; Z1 представляет собой представляет собой неконденсированный фенилен, замещенный замещен OR41; R41 представляет собой 6-членный гетероарил, имеющий 1 атом N, где гетероарил конденсирован с R43A, R43A представляет собой 5-членный гетероарен, имеющий 1 атом N; Z2 представляет собой моноциклический 6-членный гетероциклоалкилен, имеющий 1-2 атома N и 0 двойных связей; Z1A и Z2A оба отсутствуют; L1 представляет собой -СН2-; Z3 представляет собой R38 или R40; R38 представляет собой неконденсированный фенил; R40 представляет собой циклоалкил, где циклоалкил представляет собой моноциклическую кольцевую систему, имеющую от 3 до 10 атомов С и 0 двойных связей, циклоалкенил, где циклоалкенил представляет собой моноциклическое 6-членное кольцо, имеющее 1 гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О и N, и 1 двойную связь, где циклоалкенил является неконденсированным или конденсирован с R40A; R40A представляет собой циклоалкан, где циклоалкан представляет собой моноциклическое кольцо, имеющее 3-10 атомов С и 0 двойных связей, или гетероциклоалкан, где гетероциклоалкан представляет собой моноциклическое 6-членное кольцо, имеющее 1 атом N и 0 двойных связей (остальные заместители являются такими, как определено в п.1 формулы изобретения).

Способ лечения больных с эпикондилитом // 2532302

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для лечения больных с эпикондилитом. Для этого пациенту осуществляют комплекс мероприятий, а именно ограничение двигательного режима пораженного сегмента, физиотерапию и фармакотерапию.