Способ размножения гречихи in vitro


 


Владельцы патента RU 2538167:

ГОСУДАРСТВЕННОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ПРИМОРСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК (ГНУ ПРИМОРСКИЙ НИИСХ РОССЕЛЬХОЗАКАДЕМИИ) (RU)

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения гречихи in vitro, включающий размножение гречихи из асептических проростков семян. Семена предварительно стерилизуют концентрированной серной кислотой и культивируют на среде Мурасиге и Скуга без фитогормонов. Субкультивируют, используя верхнюю часть побега проростка с пазушной почкой с получением микрорастений на питательной среде Мурасиге и Скуга с фитогормонами с содержанием сернокислой меди в количестве от 9,2 до 23,0 мг/л, которые делят на черенки, культивируют, субкультивируют и укореняют на этой среде. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность процесса размножения микрорастений гречихи в условиях in vitro за счет его упрощения, ускорения, снижения затрат и увеличения выхода пробирочных растений. 3 табл.

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции растений и сельскохозяйственной биотехнологии, и может быть использовано в селекции и семеноводстве растений, в частности для ускорения процесса размножения ценных форм, регенерантов и сортов гречихи, а также в исследованиях по генетике и физиологии растений.

Известен способ размножения гречихи in vitro, включающий вычленение эксплантов, их культивирование с получением первичной каллусной ткани, индукцию органогенеза и получение растений-регенерантов (см., например, авторское свидетельство СССР №1704715, МПК5 A01H 4/00, 1992 г.).

Недостатком этого способа размножения гречихи in vitro является:

- трудоемкость вычленения недозрелых зародышей;

- сложность отбора зародышей требуемого размера от 0,5 до 3,0 мм для культивирования;

- удлинение процесса размножения растений гречихи in vitro из-за наличия этапа получения первичной каллусной ткани;

Известен также способ размножения гречихи in vitro, в котором в качестве эксплантов используют узлы растений, а культивирование и субкультивирование осуществляют на одной и той же модифицированной питательной среде Гамборга В5, в которую дополнительно вносят 6-БАП в количестве 5-10 мг/л и 1-2 мг/л (см., например, авторское свидетельство СССР №1658928, МПК5 A01H 4/00, 1991 г.).

Недостатком данного способа размножения гречихи in vitro является:

- низкая эффективность получения стерильных растений, так как для стерилизации растительных тканей более сложно подобрать дезинфицирующие средства, чтобы сохранить ткани живыми и способными к регенерации, чем для семян;

- снижение коэффициента размножения после добавления в питательную среду фитогормона 6-БАП, вследствие появления аномальных форм побегов с нехарактерной морфологией, а также раннего цветения микрорастений гречихи.

Наиболее близким к заявляемому изобретению является способ размножения гречихи in vitro, включающий вычленение эксплантов в качестве которых используют участки недельных асептических проростков, их культивирование с получением первичной каллусной ткани, индукцию органогенеза и получение растений-регенерантов (см., например, патент на изобретение №2229219, МПК7 A01H 4/00, C12N 5/00, A01H 1/04, 2004 г.).

Недостатком известного прототипа является:

- увеличение времени на получение растений гречихи в процессе регенерации из каллуса, так как сначала надо индуцировать образование первичной каллусной ткани;

- снижение частоты регенерации побегов из каллуса по сравнению с прямым органогенезом;

- снижение выхода растений идентичных исходному генотипу при регенерации из каллусной ткани вследствие проявления сомаклональной изменчивости.

Цель изобретения - повысить эффективность процесса размножения микрорастений гречихи в условиях in vitro за счет его упрощения, ускорения, снижения затрат и увеличения выхода пробирочных растений.

Указанная цель достигается тем, что способ размножения гречихи in vitro, включающий размножение гречихи из асептических проростков семян, отличающийся тем, что семена предварительно стерилизуют концентрированной серной кислотой и культивируют на среде Мурасиге и Скуга без фитогормонов с получением асептических проростков, субкультивируют, используя верхнюю часть побега проростка с пазушной почкой с получением микрорастений на питательной среде Мурасиге и Скуга с фитогормонами с содержанием сернокислой меди в количестве от 9,2 до 23,0 мг/л, которые делят на черенки, культивируют, субкультивируют и укореняют на этой среде.

По сравнению с прототипом признаками изобретательского уровня предлагаемого способа размножения гречихи in vitro являются:

1 «…семена предварительно стерилизуют концентрированной серной кислотой и культивируют на среде Мурасиге и Скуга без фитогормонов с получением асептических проростков…», что позволяет:

- значительно упростить процедуру стерилизации семян из-за сокращения времени ее проведения, так как обработку концентрированной серной кислотой проводят однократно в течение 2 минут;

- значительно ускорить снятие плотной околоплодной оболочки и быстрее пассировать плоды на питательные среды за счет того, что после погружения семян гречихи в серную кислоту происходит частичное разрушение (размягчение) околоплодной оболочки;

- снизить затраты на приобретение дорогостоящих фитогормонов за счет получения асептических проростков из семян на среде Мурасиге и Скуга без фитогормонов, так как на этом этапе еще идет выбраковка части инфицированного материала.

2 «…субкультивируют, используя верхнюю часть побега проростка с пазушной почкой с получением микрорастений на питательной среде Мурасиге и Скуга с фитогормонами с содержанием сернокислой меди в количестве от 9,2 до 23,0 мг/л, которые делят на черенки, культивируют, субкультивируют и укореняют на этой среде», что позволяет:

- увеличить выход активно растущих микрорастений за счет использования верхней части побега с пазушной почкой;

- увеличить выход пробирочных растений гречихи за три пассажа в 1,9 раз;

- ускорить размножение ценных форм и сортов гречихи;

- максимально снизить появление микрорастений с аномальной морфологией, так как 6-БАП не используется, и получать идентичные исходному генотипу микрорастения с нормальной морфологией;

- повысить эффективность и упростить процесс микроразмножения при культивировании и субкультивировании черенков гречихи за счет применения питательной среды одного состава, которая обеспечивает одновременно рост микрорастений и их укоренение;

- снизить затраты на культивирование микрорастений в условиях in vitro за счет сокращения сроков размножения материала до необходимого объема, ускорить производство семян.

Признаки, указанные в отличительной части описания достижения цели доказывают, что заявляемый способ размножения гречихи in vitro обладает новизной. Совокупность признаков, приведенных в сравнении свойств заявляемого и известного решения, дает основание сделать вывод, что заявляемый способ имеет изобретательский уровень.

Предлагаемый способ размножения гречихи in vitro осуществляется следующим образом. Зрелые семена гречихи стерилизуют, погружая на две минуты в концентрированную серную кислоту. В таблице 1 представлены результаты эксперимента по эффективности стерилизации семян гречихи хлорсодержащим дезинфицирующим агентом раствором хлорамина Б в сравнении с предлагаемым способом стерилизации концентрированной серной кислотой. Результаты свидетельствуют о существенном повышении эффективности процесса стерилизации семян концентрированной серной кислотой, так как процент освобожденных от инфекции семян составил от 71,0 до 100.

Семена, прошедшие стерилизацию серной кислотой, трижды промывают в течение 5-10 минут стерильной дистиллированной водой, освобождают от перикарпия (плодовой оболочки) и пассируют на питательную среду Мурасиге и Скуга без фитогормонов, содержащую следующие

Таблица 1
Эффективность различных способов стерилизации семян гречихи
№ п/п Сорт, гибрид 70% раствором этанола и 10% раствором хлорамина Б концентрированной серной кислотой
1 2 1 2
1 Приморская 7 47 38,3 31 71,0
5 Приморская местная 31 13,0 30 100
6 Изумруд x Наташа 36 0 25 76,0
8 Приморская местная 31 13,0 30 100
Примечание:
- обработано семян, шт.; 2 - эффективность стерилизации, %.

компоненты (в мг/л): тиамин-НСl - 2,0; пиридоксин-НСl - 1,0; гидролизат казеина - 1000,0; сахароза - 20000; агар микробиологический - 6000 при pH от 5,6 до 6,0. Культивирование проводят в пробирках с ватно-марлевыми пробками до получения асептических проростков в контролируемых условиях: 16-часовой фотопериод, интенсивность освещения 4-5 тысяч люкс, температура 23±2°C.

При появлении из зоны семядольного узла асептического проростка растущего побега, отделяют его верхнюю часть (примерно длиной 10-20 мм) и помещают на питательную среду, включающую следующие компоненты (в мг/л):

Аммоний азотнокислый (NH4NO3) - 1650

Калий азотнокислый (KNO3) - 1900

Калий фосфорнокислый однозамещенный (KH2PO4) - 170

Магний сернокислый семиводный (MgSO4×7H2O) - 370

Кальций хлористый двухводный (CaCl2×2H2O) - 440

Железо сернокислое семиводное (FeSO4×7H2O) - 27,8

Трилон Б (Na2ЭДТА×2H2O) - 37,3

Борная кислота (H3BO3) - 6,2

Марганец сернокислый четырехводный (MnSO4×4H2O) - 22,3

Кобальт хлористый шестиводный (CoCl2×6H2O) - 0,025

Медь сернокислая пятиводная (CuSO4×5H2O) - от 9,2 до 23,0

Цинк сернокислый семиводный (ZnSO4×7H2O) - 8,6

Натрий молибденовокислый двухводный (NaMoO4×2H2O) - 0,25

Калий йодистый (KI) - 0,83

Тиамин-HCl - 2,0

Пиридоксин-HCl - 1,0

Гидролизат казеина - 1000,0

ИУК (индолил-3-уксусная кислота) - 0,5

ИМК (3-индолилмасляная кислота) - 0,2

Сахароза - 20000

Агар микробиологический - 6000

при pH от 5,6-6,0.

В таблице 2 приведены результаты испытания пяти вариантов питательных сред, среди которых среда Барсукова Е.Н. использована как наиболее близкий прототип (патент на изобретение №2229219, МПК7 A01H 4/00, C12N 5/00, A01H 1/04, 2004 г.).

Таблица 2
Коэффициент размножения микроклонов гречихи на питательных средах различного состава
Вариант среды Среднее количество микрорастений, шт. Выход растений за три пассажа, шт.
I пассаж* II пассаж III пассаж Среднее за три пассажа
Bohanec В., 6-БАП 1,0 мг/л, ИУК 0,5 мг/л 1,2 2,6 1,9 1,9 6,86
Суворова Г.Н., 6-БАП 2,25 мг/л, ИУК 0,2 мг/л 1,1 1,5 0,4 1,0 1,0
Барсукова Е.Н., ИУК 0,5 мг/л, ИМК 0,2 мг/л 2,0 2,8 2,8 2,5 15,63
БТМ1, ИУК 0,5 мг/л, ИМК 0,2 мг/л, 23,0 мг/л CuSO4×5H2O 2,6 3,3 3,4 3,1 29,79
БТМ2 ИУК 0,5 мг/л, ИМК 0,2 мг/л; 69,0 мг/л CuSO4×5H2O 1,1 1,3 0 0,8 0,51
Среднее по опыту 1,6 2,3 1,7 1,9 6,86
Примечание - * пассаж составляет 25-30 дней

Максимальное количество растений за три пассажа получено 29,79 штук при культивирования на среде БТМ1, содержащей наряду с фитогормонами ИУК 0,5 мг/л, ИМК 0,2 мг/л дополнительно 23,0 мг/л CuSO4×5H2O.

Оптимальное для микроразмножения гречихи в условиях in vitro содержание в питательной среде сернокислой меди установлено экспериментально и приведено в таблице 3.

Таблица 3
Коэффициент размножения микроклонов гречихи на питательных средах с различным содержанием сернокислой меди
№ п/п Вариант среды (содержание сернокислой меди, мг/л) Количество микрорастений, шт. Выход растений
за три пассажа, шт.
I пассаж* II пассаж III пассаж среднее за три пассажа
1 контроль 0,025 1,8±0,13 2,4±0,16 2,3±0,30 2,1±0,12 9,3
2 4,625 1,8±0,13 2,6±0,33 2,6±0,33 2,3±0,17 12,2
3 9,225 2,3±0,15 2,7±0,30 2,8±0,29 2,6±0,14 17,6
4 13,825 2,3±0,21 2,7±0,26 2,8±0,20 2,6±0,13 17,6
5 18,425 1,6±0,22 3,0±0,21 3,2±0,20 2,6±0,17 17,6
6 23,025 2,0±0,14 2,6±0,16 2,9±0,23 2,5±0,12 15,6
7 27,625 1,5±0,16 2,7±0,21 2,5±0,16 2,2±0,13 10,6
8 32,225 1,5±0,16 2,3±0,23 1,8±0,35 1,8±0,15 5,8
9 36,825 1,6±0,49 2,1±0,23 1,8±0,20 1,8±0,19 5,8
10 41,425 1,0±0,13 2,1±0,23 1,9±0,17 1,6±0,13 4,1
11 46,025 1,25±0,16 1,8±0,20 1,7±0,33 1,6±0,14 4,1
HCP05 0,4 5,4
Примечание: *пассаж составляет 25-30 дней

В качестве контроля использовали среду Барсукова Е.Н., ИУК 0,5 мг/л, ИМК 0,2 мг/л (патент на изобретение №2229219, МПК7 A01H 4/00, C12N 5/00, A01H 1/04, 2004 г.) со стандартным для минеральной основы по Мурасиге и Скугу содержанием меди сернокислой пятиводной - 0,025 мг/л. Добавление в питательную среду сернокислой меди в количестве от 9,2 до 23,0 мг/л статистически достоверно увеличило выход растений гречихи за три пассажа от 15,6 до 17,6 шт., что в 1,7-1,9 раза больше, чем на контрольной среде (табл.3).

Полученные микрорастения делят на черенки с пазушной почкой, культивируют, субкультивируют и укореняют на питательной среде одного состава, который приведен выше, с содержанием меди сернокислой пятиводной от 9,2 до 23,0 мг/л.

Условия культивирования асептических проростков, черенков и микрорастений аналогичны. Для получения семян укорененные растения гречихи из пробирок высаживают в почву.

Применение предлагаемого изобретения позволит повысить эффективность процесса размножения гречихи в условиях in vitro, значительно упростить и ускорить его, снизить затраты и существенно увеличить выход пробирочных растений.

Способ размножения гречихи in vitro, включающий размножение гречихи из асептических проростков семян, отличающийся тем, что семена предварительно стерилизуют концентрированной серной кислотой и культивируют на среде Мурасиге и Скуга без фитогормонов с получением асептических проростков, субкультивируют, используя верхнюю часть побега проростка с пазушной почкой с получением микрорастений на питательной среде Мурасиге и Скуга с фитогормонами с содержанием сернокислой меди в количестве от 9,2 до 23,0 мг/л, которые делят на черенки, культивируют, субкультивируют и укореняют на этой среде.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к селекции. Изобретение представляет собой способ повышения коэффициента размножения капусты белокочанной в условиях in vitro, включающий выращивание эксплантов, культирование их на питательной среде Мурасиге-Скуга, внесение в нее регуляторов роста тидиазурон в концентрации 1 мг/л в сочетании с индолил-3-уксусной кислотой - 0,5 мг/л, при использовании цветолож размером 0,2-0,3 мм, изолированных из бутонов длиной 0,5-0,7 мм, где цветоложе используют за 1-2 дня до распускания цветков и после выращивания их на питательных средах культивируют до образования почек в течение 14-21 суток.
Способ регенерации адвентивных микропобегов Hyssopus officinalis L. в условиях in vitro включает отделение листьевых дисков от микропобегов после 4-5 пассажа, полученных в культуре in vitro, дальнейшее культивирование их на модифицированной питательной среде Мурасиге и Скуга с половинной концентрацией макроэлементов и дополненной веществом цитокининового типа действия, а именно тидиазуроном, при этом культивирование проводят при пониженной интенсивности освещения.

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения растений лапчатки белой (Potentilla alba) методом культуры in vitro, включающий отделение вегетативных почек от корневища, стерилизацию, высаживание на питательные среды, микроразмножение побегов, укоренение побегов, адаптацию растений-регенерантов к нестерильным условиям.
(57) Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии. Листовые экспланты, вычлененные из тридцатидневных асептических растений исходных сортов, выращенных в сосудах 1 л, помещают в чашки Петри с жидкой средой определенного состава и прединкубируют, кокультивируют и культивируют на питательных средах определенного состава.
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения цимбидиума in vitro включающий введение стерильных эксплантов в культуру in vitro, микроразмножение путем отделения псевдобульб от экспланта и посадки на питательную среду Мурасиге-Скуга, укоренение псевдобульб в грунте, где после введения в культуру in vitro образовавшиеся псевдобульбы отделяют от экспланта и переносят на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга,содержащую 30 г/л сахарозы и раствор препарата эпибрассинолида в концентрации 0,001 мг/л, затем псевдобульбы, имеющие корнепобеги, отделяют от эксплантов, обрабатывают раствором индолилуксусной кислоты в концентрации 1,0 мг/л в течение 15 минут и укореняют в условия ex vitro в грунте с добавлением мха и древесной коры.
Изобретение относится к области сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ микроклонального размножения подвоев яблони, где на этапах введения в культуру и собственно микроразмножения в среду Мурасиге-Скуга в качестве стимулятора роста добавляется препарат фуролан в концентрации 0,004 мг/л.

Изобретение относится к области биотехнологии растений. Изобретение представляет собой способ хранения растений осины в условиях in vitro, включающий культивирование микропобегов осины на питательной среде WPM с добавлением сахарозы 10-20 г/л, агар-агара 9 г/л и витаминов MS 1 мл/л, сорбитола 5-10 г/л и маннитола 5-10 г/л, причем хранение растений осуществляют при температуре +4°С в режиме освещения 8 ч день/16 ч ночь с интенсивностью 2000 люкс.
Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к виноградарству. Способ включает микроразмножение пробирочных растений и высадку их на жидкую питательную среду с добавлением макроэлементов, витаминов и биопрепаратов.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения растений-регенерантов земляники in vitro, включающий в себя введение эксплантов в культуру, размножение и укоренение вновь образованных in vitro побегов, где в качестве эксплантов используют фрагменты цветоложа и цветоножки из цветов земляники, взятых в фазе бутонизации, которые промывают под проточной водой в течение 15-25 минут, стерилизуют 0,1% раствором сулемы 10 минут, затем трижды промывают стерильной дистиллированной водой, цветоложе освобождают от чашелистиков и лепестков, разрезают на фрагменты 5×5 мм и помещают срезом на питательную среду, цветоножку отделяют от цветка, отрезают фрагмент длиной 5 мм и также помещают на питательную среду.
Изобретение относится к области биотехнологии растений, в частности к микроклональному размножению in vitro. В способе культивируют каллусные культуры из стерильных эксплантов стеблевых сегментов, листьев, листовых черешков.

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения винограда in vitro, включающий микрочеренкование пробирочных растений, высадку их на питательную среду в присутствии ростовых веществ и культивирование, где высадку и культивирование осуществляют на твердой питательной среде Мурасиге и Скуга, содержащей в качестве росторегулирующего вещества препарат Мелафен в концентрации 10-7-10-11%. Заявляемый способ позволяет увеличить выход растений за счет эффективной приживаемости микрочеренков, хорошей регенерации, улучшения качественных показателей растений. 6 табл.
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения винограда in vitro с деконтаминацией от микоплазменной инфекции, включающий микрочеренкование пробирочных растений, высадку их на твердую питательную среду Мурасиге и Скуга без ростовых веществ и с уменьшенным количеством макроэлементов. При этом в состав питательной среды дополнительно вводится антибиотик гентамицин в два этапа: при первом субкультивировании гентамицин вводится в концентрациях 0,05-0,3 мл/л; при втором - в концентрациях 0,01-0,04 мл/л одновременно с введением препарата эмистим в разведении 10-6-10-12 мл/л. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность клонального микроразмножения растений винограда в культуре in vitro, повысить приживаемость и выход оздоровленных от микоплазм растений с улучшенным морфогенезом и качественными характеристиками. 7 табл.

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения копеечника чайного, где вызревшие простерилизованные семена копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.) высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга для введения в культуру ткани, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS, затем образовавшиеся конгломераты микропобегов делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л. Растения-регенеранты размножают, укореняют и адаптируют к нестерильным условиям. Изобретение позволяет повысить эффективность процесса, тиражируемости, адаптации в условиях гидропоники и получить стандартные саженцы копеечника чайного. 4 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области садоводства и может быть использовано для микроразмножения растений гвоздики in vitro. Изобретение представляет собой способ размножения гвоздики in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, дополненную сахарозой 30 г/л и регуляторами роста 1 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,2 мг/л нафтилуксусной кислоты, микроразмножение путем отделения побегов от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга и дальнейшее укоренение в грунте, отличающийся тем, что при микроразмножении экспланты укореняют на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга, дополненную Рибав-Экстра 0,01-0,1 мг/л, и укореняют в условиях ex vitro в грунте, состоящем из смеси дерновой земли - 50%, торфа низинного с перегноем - 30% и песка 20%. Изобретение позволяет упростить процесс микроразмножения. 1 табл.

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения подвоев яблони ММ 106, СК 2, СК 3, СК 4, СК 7, где на этапах введения в культуру в среду Мурасиге-Скуга добавляется в качестве санирующего агента антибиотик гризеофульвин 500 мг/л. Изобретение позволяет повысить выход оздоровленных подвоев яблони, полученных меристемным методом in vitro за счет снижения доли погибших от заражения грибной и дрожжевидной инфекцией эксплантов. 1 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения дигаплоидных растений ячменя из культивируемых микроспор in vitro, включающий: - выращивание растений-доноров при пониженной температуре воздуха 15-20°C, световом режиме: 16 ч день/8 ч ночь, влажности воздуха 60-70%, интенсивности освещения 10000-15000 люкс, с проведением фитосанитарной обработки, при этом выращивание растений-доноров осуществляют до стадии от открытия влагалища флагового листа, когда соцветие находится внутри флагового листа, - стрессовую обработку колосьев при 4°C, в пробирках с бедной средой, содержащей KCl - 1,5 г/л, MgSO4×7H2O - 0,25 г/л, CaCl2×2Н2О - 0,1 г/л, маннитол - 60 г/л, калий-фосфатный буфер - 1 мл/л, pH 7,0, в течение 7 дней для переключения из гаметофитного пути развития микроспоры на спорофитный путь, - выделение микроспор из колосков в стерильных условиях, - культивирование выделенных микроспор на модифицированной среде для индукции эмбриогенеза, включающей 6% мальтозу, 10 завязей на 1,5 мл культуры и регуляторы роста растений в количестве 1 мг/л 2,4-Д, 0,2 мг/л зеатина, причем добавление вышеуказанных компонентов осуществляется перед добавлением микроспор, - регенерацию растений из эмбриоидов путем культивирования на твердой питательной среде Мурашига и Скуга без добавления регуляторов роста растений, - обработку гаплоидных растений ячменя антимитотическим препаратом N-диацетил-N-(β,γ-эпоксипропил) аминоколхицином для удвоения хромосом и получения дигаплоидых растений. Изобретение позволяет получить дигаплоидные гомозиготные линии ячменя для селекции новых сортов и гибридов с улучшенными свойствами. 1 ил., 2 табл., 6 пр.
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения хризантемы, включающий микрочеренкование растительных побегов, стерилизацию растительных эксплантов с последующей их высадкой на безгормональную питательную среду Мурасига и Скуга, размножение микроклонов, укоренение вновь образованных in vitro побегов и адаптацию растений-регенерантов к почвенным условиям, где на этапе стерилизации растительных эксплантов используют обработку микрочеренков водным раствором анолита нейтрального катодно-обработанного в концентрации 0,03% в течение 10 мин, без последующего промывания стерильной дистиллированной водой, на этапе микроразмножения проводят обработку микрочеренков раствором католита в течение 3 мин, на этапе адаптации почвенный субстрат обрабатывают водным раствором анолита нейтрального катодно-обработанного в концентрации 0,03%, а микрорастения обрабатывают раствором католита в течение 10 мин. Предлагаемый способ позволяет повысить эффективность клонального микроразмножения растений хризантемы: увеличить выход стерильных и жизнеспособных эксплантов 90-100%, улучшить жизненные показатели растений-регенерантов (количество и длину корней в 1,3 раза, длину побегов в 1,5 раза), а также повысить приживаемость микрорастений к почвенным условиям. 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения пеперомии in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, микроразмножение путем отделения побегов от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга и дальнейшее укоренение в грунте, где при микроразмножении экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга, дополненную 10 г/л глюкозы и 0,1 мг/л Рибав-Экстра и культивируют в течение 4 недель, затем сформировавшиеся растения-регенераты с корнями замачивают в растворе 3 мг/л индолилуксусной кислоты в течение 15 минут и укореняют в условиях ex vitro в грунте, состоящем из смеси торфа и песка 1:1. Изобретение позволяет упростить способ микроразмножения за счет образования корневой системы у формирующихся in vitro побегов уже на этапе микроразмножения. 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и растениеводства. Изобретение представляет собой способ сохранения in vitro растений земляники (Fragaria L.), заключающийся в том, что растения помещают в пробирки на питательную среду Мурасиге-Скуга, модифицированную 6% сахарозы, 10-12 г/л агар-агара, 0,2 мг/л 6-бензиламинопурина, 0,1-0,5 мг/л паклобутразола, 6 мМ глюконата кальция, а на ее поверхность выкладывают гранулы альгината кальция с тиосульфатом серебра, закрывают пробирки и переносят их в условия при температуре от 1 до 10°С, 6-часовом световом дне и освещенности 0,5-0,8 клк. Заявленное изобретение обеспечивает долговременное сохранение in vitro коллекций растений земляники в состоянии ингибированного роста без смены питательной среды в течение двух и более и позволяет увеличить продолжительность хранения в жизнеспособном состоянии 65-69% растений земляники, а также 100% клонов этой культуры до двух и более лет и использовать его для научных и промышленных целей. 3 ил., 4 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии растений и лесному хозяйству. Изобретение представляет собой способ криоконсервации пазушных почек in vitro растений осины, заключающийся в изоляции пазушных почек, предварительном их обезвоживании в средах, содержащих осмолитики, переносе почек в криопробирки, криоконсервации криопробирок с почками в жидком азоте, оттаивании почек и посткриогенной регенерации из них растений, отличающийся тем, что на этапе обезвоживания перед быстрым замораживанием сначала почки помещают в раствор I, содержащий питательную среду и осмолитики (WPM с добавлением к сахарозе (0,2-0,5М) глицерола (1,7-2,5М)), затем почки переносят в раствор II, содержащий питательную среду и осмолитики (WPM, сахароза (0,2-0,5М), глицерол (2,5-3,5М), этиленгликоль (1-1,5М), диметилсульфоксид (1,5-2М)), с последующим переносом в жидкость для замораживания (WPM, содержащая сахарозу (0,2-0,5М), глицерол (3,5-4М), этиленгликоль (1,5-2,5М), диметилсульфоксид (1,5-2М)). Изобретение позволяет проводить прямую регенерацию из почек, обеспечивая генетическую сохранность in vitro культур ценных селекционных генотипов и генетически модифицированных клонов осины и выживаемость до 80% после криохранения в течение года. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.
Наверх