Способ оценки длительной гипергликемии

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2538715:

Данилова Ирина Георгиевна (RU)
Гетте Ирина Федоровна (RU)
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт иммунологии и физиологии Уральского отделения РАН (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине и клинической диагностике. Изобретение представляет способ оценки длительной гипергликемии, основанный на определении содержания глюкозы в плазме крови, отличающийся тем, что содержание глюкозы определяют дважды: сразу после взятия крови и через 24 часа после хранения плазмы крови над слоем форменных элементов, затем подсчитывают уменьшение содержания глюкозы в процентах от исходного уровня, по которому дают оценку длительной гипергликемии, причем хранение плазмы крови производят при t=4,0±0,5°C. Изобретение обеспечивает оптимизацию и снижение времени оценки длительной гипергликемии, повышение достоверности результата и возможность обследования максимального количества людей в минимальное время и выявление группы риска. 2 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения хронических осложнений сахарного диабета, формирующихся вследствие длительной гипергликемии и гликозилирования белков, а также коррекции этих изменений при разработке новых методов лечения. Изобретение также может быть использовано в клинической диагностике в качестве недорогого скринирующего метода исследования для выявления гипергликемии, продолжающейся в течение длительного периода времени.

Широкое распространение сахарного диабета, приобретающее характер эпидемии среди населения развитых стран, определяет необходимость своевременного выявления и лечения лиц, относящихся к группам риска, а также поиск новых методов коррекции вызванных заболеванием хронических осложнений [1, 4, 6]. Причинами длительной гипергликемии, кроме инсулинзависимого и инсулиннезависимого сахарного диабета, могут быть такие эндокринные нарушения, как гипертиреоз, повышенная функция коры надпочечников, феохромацитома, а также состояние хронического стресса, сопровождающееся выделением контринсулярных гормонов. Стресс, острый и хронический, рассматривают не только как фактор, отягощающий течение, но также являющийся в некоторых случаях причиной возникновения сахарного диабета [9]. Гормоны, участвующие в адаптации к стрессу (адреналин, глюкагон, глюкокортикоиды), являются контринсулярными и вызывают повышение уровня глюкозы в крови, что способствует усиленной секреции инсулина и, как следствие, инсулинорезистентности у некоторых лиц [1, 7, 9].

Основным и доступным способом оценки гипергликемии в настоящее время является определение содержания глюкозы в цельной крови или в плазме, сыворотке крови ферментативным глюкозоксидазным методом. Поскольку содержание глюкозы в крови, даже измеренное натощак, подвержено значительным изменениям в течение нескольких недель, для выявления гипергликемии, сохраняющейся на протяжении длительного времени, используют методы определения гликозилированного гемоглобина (HbA1c) и фруктозамина. Для установления инсулинорезистентности используют тест толерантности к глюкозе.

Гликозилирование белков происходит в результате неферментативной реакции свободных аминогрупп аминокислотных остатков и альдегидной группы глюкозы. На первой, обратимой стадии реакции образуется лабильный альдимин или нестабильное основание Шиффа. На второй, медленной и необратимой стадии происходит перегруппировка Амадори (изомеризация остатка глюкозы в остаток фруктозы) с образованием стабильного кетамина [4, 8]. Гемоглобин, содержащий кетамин, традиционно называют гликозилированным гемоглобином, а альбумин крови, соединенный с кетамином, принято называть фруктозамином.

В клинической диагностике по количеству HbA1c судят о средней концентрации глюкозы за последние два-три месяца, так как период полураспада гемоглобина составляет 60 дней, а количество фруктозамина свидетельствует о средней концентрации глюкозы за последние 2-3 недели, поскольку период полураспада альбумина - 40 дней [8].

Существует 6 способов определения продуктов гликозилирования, основанных на различных принципах анализа: высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), микроколоночные ионообменная и аффинная хроматография, электрофорез, спектрофотометрический и иммунохимический методы.

Для ВЭЖХ и электрофореза необходимо специальное, часто дорогостоящее оборудование, например для эффективного разделения фракций гемоглобина методом электрофореза требуются реактивы фирмы «Beckman» и хороший денситометр типа Apprise (США). Микроколоночные хроматографические методы в значительной степени зависят от температурных условий. Температура оказывает меньшее влияние на определение методом аффинной хроматографии, но определение вместе с подготовкой и промыванием колонок занимает 3 часа и позволяет исследовать одновременно не более 5 образцов крови. Спектрофотометрический и иммунохимический методы выполняются быстро, но спектрофотометрическое определение также зависит от температуры, а для иммунохимического анализа необходимы импортные реактивы фирмы «Bayer» и «Roche», биохимический анализатор и специальное и программное обеспечение [8]. Результат определения может быть заниженным в случае потери крови, анемии у пациента из-за меньшей продолжительности существования эритроцитов. Гемоглобин (в случае гемолиза), аскорбиновая кислота и церулоплазмин тормозят образование фруктозамина. Снижение результатов определения фруктозамина наблюдается при гипопротеинемии, протеинурии, потере альбумина. В этом случае необходимо дополнительно определять содержание общего белка и альбумина в плазме крови. У пациентов после удаления селезенки или с полицитемией могут обнаруживаться завышенные результаты. Кроме того, в ряде методов на точность анализа HbA1c оказывают влияние другие гликозилированные фракции гемоглобина, удаление которых не всегда предусмотрено. В эритроцитах крови человека кроме основных фракций гемоглобина (HbA - 93%) содержится незначительное количество других фракций, которые также могут подвергаться гликозилированию (HbA1a, HbA1b, HbA1c, HbA2, HbF). В норме у человека гликозилированный гемоглобин (HbA1) находится в пределах от 5 до 8% от общего гемоглобина, фракция гликозилированного гемоглобина - HbA1c составляет 4-6,5%.

Гликозилированный гемоглобин образуется неферментативным путем, когда глюкоза свободно проникает через мембрану эритроцита на протяжении всей жизни эритроцита. Глюкоза, присоединенная к белкам посредством прочной ковалентной связи, вызывает изменение их строения, функций и аутоиммунные реакции. Процесс гликозилирования белков обуславливает развитие микро- и макрососудистых осложнений у больных сахарным диабетом [1, 4]. Гликозилированию подвержены не только гемоглобин и белки плазмы крови, но также белки мембран форменных элементов крови, в том числе белки эритроцитарных мембран. Согласно проведенным ранее исследованиям при аллоксановом диабете увеличение количества гликозилированного гемоглобина, являющееся показателем гликозилирования других белков организма, сопровождается стабилизацией мембран эритроцитов, и эта стабилизация не зависит от содержания холестерина в эритроцитарной мембране [2, 3]. Следовательно, устойчивость мембраны эритроцитов может быть обусловлена ее гликозилированием и увеличением слоя гликокаликса на поверхности эритроцитов.

При утолщении гликокаликса проницаемость эритроцитарной мембраны становится недостаточной для глюкозы, являющейся единственным энергетическим субстратом для эритроцитов. Уменьшение поступления глюкозы в эритроциты напрямую не связано с выработкой инсулина, так как в мембране эритроцитов отсутствует рецептор, встраивающийся в мембраны клеток после взаимодействия инсулина с инсулиновым рецептором и активации цепочки посредников гормона. Однако гипоинсулинемия и инсулинорезистентность являются причиной нарушения активного транспорта глюкозы в клетки инсулинзависимых тканей, обладающих подобными рецепторами [4]. Глюкоза, оставшаяся невостребованной, а также образовавшаяся в результате глюконеогенеза, накапливается в крови и вступает в реакции гликозилирования.

Эритроциты здорового человека или животного in vitro быстро потребляют глюкозу из плазмы крови, поэтому определение глюкозы проводят в цельной крови или в сыворотке/плазме, отделенной от форменных элементов, непосредственно после взятия крови. Увеличение времени от забора крови до определения показателя приводит к получению заниженного результата. В то же время снижение проницаемости эритроцитарной мембраны должно способствовать меньшей скорости потребления эритроцитами глюкозы из плазмы крови.

Целью предлагаемого изобретения является снижение времени оценки длительной гипергликемии с повышением достоверности результата, также и возможность обследования максимального количества людей в минимальное время для выявления группы риска.

Технический результат достигается за счет оптимизации способа оценки и, как следствие, снижения трудо- и материальных затрат.

Для решения поставленной задачи предлагается способ оценки длительной гипергликемии, основанный на определении содержания глюкозы в плазме крови, отличающийся тем, что содержание глюкозы определяют дважды: сразу после взятия крови и через 24 часа после хранения плазмы крови над слоем форменных элементов, затем подсчитывают уменьшение содержания глюкозы в процентах от исходного уровня, по которому дают оценку длительной гипергликемии, причем хранение плазмы крови производят при t=4,0±0,5°C.

Материалы и методы

Эксперимент был проведен на 35 беспородных крысах обоего пола массой 180-250 г, которых содержали на обычном рационе вивария. Условия содержания и обращение с используемыми в эксперименте животными соответствовали Директиве Совета ЕС 2010/63/EU. Животных разделили на группы: 1 - интактные крысы, 2 - моделирование субкомпенсированного сахарного диабета 1 типа (введение аллоксана в количестве 17 мг/100 г массы), 3 - моделирование декомпенсированного аллоксанового диабета 1 типа (введение аллоксана в количестве 30 мг/100 г массы). Моделирование сахарного диабета проводили в соответствии с авторской методикой (заявка №2013125897). Через месяц после первого введения аллоксана развивался аллоксановый диабет, сопровождавшийся полидипсией, полиурией, повышением уровня глюкозы, гликозилированного гемоглобина и снижением инсулина в крови - основных показателей и критериев сахарного диабета 1 типа. Отклонение от нормы исследованных показателей было более выражено у животных в группе 3, чем в группе 2.

Содержание глюкозы определяли с использованием стандартного набора реактивов фирмы «Витал Диагностикс» (СПб). Определение проводили дважды: в плазме крови сразу после ее забора и в той же плазме, хранившейся над слоем форменных элементов при 4°C в течение 24 часов. В цельной крови определяли содержание гликозилированного гемоглобина методом аффинной гель-хроматографии по набору реактивов «Диабет-тест» фирмы ФОСФОСОРБ. Проницаемость эритроцитарных мембран (ПЭМ) определяли методом Колмакова В.Н., Радченко В.Г. [5]. Степень гемолиза выражали в % гемолизированных эритроцитов по отношению к эталону. Проницаемость мембран оценивали по гемолизу эритроцитов в смесях растворов мочевины и хлорида натрия с возрастающей концентрацией мочевины.

Оптическую плотность измеряли на спектрофотометре DU-800 фирмы «Beckman» (США). Статистический анализ материала проводили с помощью программ Statistica 6.0 (Stat. Soft.Inc.) и программы Microsoft Exel 2003. При проверке статистических гипотез использовался уровень значимости 5% (P<0,05).

Результаты наблюдений и выводы

Как видно из таблицы 1, у животных с моделью субкомпенсированной и компенсированной форм сахарного диабета содержание глюкозы прогрессивно возрастает по сравнению с показателем в группе интактных животных. Чем выше первоначально измеренный уровень глюкозы, тем меньше снижение этого показателя, выраженного в процентах от исходного количества, через 24 часа после первого измерения.

Таблица 1
Содержание глюкозы и HbA1c, % в крови опытных и интактных животных
Показатели	Группы
Интактные n=10	Аллоксановый диабет, субкомпенсированная форма n=15	Аллоксановый диабет, декомпенсированная форма n=10
Глюкоза, ммоль/л	Первое измерение	5,1±0,7	10,9±1,7	33,9±1,7
	*	* **
	Второе измерение	3,3±0,4	9,8±1,7	33,9±1,6
*	* **
Снижение содержания глюкозы, %	34,8±5,9	9,9±2,3	1,8±0,6
*	* **
HbA1c, %	2,9±0,1	5,0±0,3	9,1±0,4
*	* **
Примечание: * - различие с группой интактных животных достоверно при P<0,05; ** - различие с группой 2 достоверно при P<0,05.

У здоровых животных наблюдается значительное уменьшение показателя через сутки после первого измерения - на 30-40%, уровень глюкозы становится ниже нормы или приближается к нижней границе нормы. У животных с аллоксановым диабетом снижение содержания глюкозы за сутки незначительно: на 10% у крыс с субкомпенсированной формой диабета и почти не изменяется у животных с декомпенсированной формой. Содержание гликозилированного гемоглобина также увеличено в обеих опытных группах относительно контроля - интактных крыс.

При подсчете коэффициента парной линейной корреляции между снижением содержания глюкозы, выраженным в процентах от исходного уровня, и содержанием гликозилированного гемоглобина в эритроцитах получено значение -0,77, то есть наблюдается обратная корреляция: чем больше гликозилированного гемоглобина, тем меньше потребление эритроцитами глюкозы из плазмы крови.

Таблица 2
Проницаемость эритроцитарных мембран (ПЭМ) по мочевинному гемолизу при возрастающей концентрации мочевины (в % гемолизированных эритроцитов)
Объемное соотношение мочевина : хлорид натрия	Группы
Интактные n=10	Аллоксановый диабет, субкомпенсированная форма n=15	Аллоксановый диабет, декомпенсированная форма n=10
40:60	7,3±1,3	7,1±0,7	7,0±0,9
50:50	19,3±2,6	28,6±5,6	13,7±3,2
55:45	45,7±3,6	63,6±7,2	25,4±5,6
* **
60:35	91,4±1,6	86,7±2,7	67,3±7,3
* **
Примечание: * - различие с группой интактных животных достоверно при P<0,05; ** - различие с группой 2 достоверно при P<0,05.

В таблице 2 представлены данные измерения проницаемости эритроцитарных мембран у интактных и опытных животных. В группе крыс с субкомпенсированной формой сахарного диабета ПЭМ достоверно не отличается от показателя интактных животных, измеренного при всех четырех соотношениях растворов мочевины и хлорида натрия. В то же время у крыс с декомпенсированной формой патологии обнаруживается более выраженная устойчивость эритроцитов к гемолизу при повышенном содержании мочевины в гемолизирующем растворе. Возрастание устойчивости мембран эритроцитов или снижение их проницаемости может быть причиной уменьшения потребления эритроцитами глюкозы из плазмы крови при хранении цельной крови.

Таким образом, снижение содержания глюкозы в плазме крови, выраженное в процентах к первоначальному количеству, через 24 часа после забора крови может служить показателем для оценки длительной гипергликемии.

Предлагаемый способ насколько прост, настолько и эффективен, поэтому, а также в силу своей дешевизны и доступности может найти широкое применение в лечебных учреждениях: районных поликлиниках, небольших больницах и особенно в медучреждениях сельской местности.

ЛИТЕРАТУРА

1. Балаболкин М.И., Клебанова Е.М., Кремлинская В.М. Лечение сахарного диабета и его осложнений (руководство для врачей). - М.: Медицина. 2005 г. - 512 с.

2. Гетте И.Ф., Данилова И.Г., Кротов В.К. Зависимость резистентности эритроцитарных мембран от возраста крыс и развития аллоксанового сахарного диабета // Вестник Уральской медицинской академической науки. - №3(26). - 2009. - С.22-24.

3. Данилова И.Г., Медведева С.Ю., Абидов М.Т., Юшков Б.Г., Кисельникова Л.П., Гетте И.Ф., Госьков И.А., Чиши М.А. Особенности регенераторных процессов различных тканей в условиях модулирования макрофагальной активности // Институт стоматологии. 2005. 2. С.67-69.

4. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Патохимия. - СПб: ЭЛБИ-СПБ, 2007. - 768 с.

5. Колмаков В.Н., Радченко В.Г. Значение определения проницаемости эритроцитарных мембран (ПЭМ) в диагностике хронических заболеваний печени // Терапевтический архив. №5. 1982. С.59-62. Колмаков В.Н., Радченко В.Г. Значение определения проницаемости эритроцитарных мембран (ПЭМ) в диагностике хронических заболеваний печени // Терапевтический архив. №5. 1982. С.59-62.

6. Питер Дж. Уоткинс. Сахарный диабет. - М.: Издательство «Бином». 2006 г. - 135 с.

7. Титов В.Н. Лабораторные и инструментальные исследования в диагностике. Справочник. - М.: Издательство «ГЭОТАР-МЕД». 2004. 958 с.

8. Эммануэль В.Л., Карягина И.Ю., Эммануэль Ю.В. Сравнение методов определения гликозилированного гемоглобина // Лабораторная медицина. 2002. 5. С.99-104.

9. Surwit R., Schneider М., Feinglos М. Stress and Diabetes Mellitus // Diabetes Care 1992. vol.15. №.10. P.1413-1422

Способ оценки длительной гипергликемии, основанный на определении содержания глюкозы в плазме крови, отличающийся тем, что содержание глюкозы определяют дважды: сразу после взятия крови и через 24 часа после хранения плазмы крови над слоем форменных элементов, затем подсчитывают уменьшение содержания глюкозы в процентах от исходного уровня, по которому дают оценку длительной гипергликемии, причем хранение плазмы крови производят при t=4,0±0,5°C.

Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для экспресс-определения холестерина в иммунных комплексах (ХИК). Сущность изобретения состоит в том, что преципитат иммунных комплексов, содержащих множественно модифицированные липопротеины низкой плотности из сыворотки крови человека готовят путем обработки ее буфером, содержащим 10%-ый ПЭГ 3350, в соотношении 1:3, инкубируют в течение 10 мин при комнатной температуре.

Способ прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гтперплазии // 2538642

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гиперплазии.

Способ прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии у больных операбельным базальноподобным трипл-негативным раком молочной железы // 2538638

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности неоадъювантной химиотерапии (НАХТ) у больных операбельным базальноподобным трипл-негативным раком молочной железы.

Способ верификации смерти от фибрилляции желудочков при инфаркте миокарда. // 2538622

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии и судебно-медицинской экспертизе, и может быть использовано для верификации смерти больного от фибрилляции желудочков при инфаркте миокарда.

Способ прогнозирования результата стоматологической имплантации на этапе ее планирования // 2538087

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования возможных отрицательных последствий стоматологической имплантации. Исследуют костную ткань с помощью гистологического исследования костной крошки с места подготовки ложа для имплантата, выявляют морфологические изменения костной ткани в зоне предполагаемой стоматологической имплантации, исследуют диаметр гаверсовых каналов, толщину костных балок губчатого вещества, линию склеивания, реакцию пролиферации мезенхимальных клеток при отсутствии воспаления, наличие коллагеновых волокон, нарушение архитектоники губчатого слоя, интенсивность кровоснабжения кости, фиброз и гиалиноз сосудистой стенки, наличие или отсутствие реологических расстройств, наличие или отсутствие отложения остеоида, наличие или отсутствие воспалительных явлений.

Устройство и способ для отбора и сохранения биопроб в экстремальных условиях обитания // 2537174

Группа изобретений относится к отбору проб, в частности к способу и устройству получения образцов для исследования и взятия проб в жидком или текучем состоянии в условиях невесомости.

Микроспектральный способ оценки эффективности фармакотерапии в ранние сроки лечения клебсиеллеза птиц антибактериальными препаратами // 2537165

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для оценки эффективности фармакотерапии в первые 7 суток лечения клебсиеллеза птиц антибактериальными препаратами.

Способ прогнозирования развития кариеса у детей // 2537144

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии, и может быть использовано для прогнозирования развития у детей кариеса временных зубов с незаконченной минерализацией.

Способ определения способности клеток костного мозга к делению // 2537141

Изобретение относится к медицине, в частности клинической биохимии, цитологии, патоморфологии и может быть использовано для определения способности клеток костного мозга к делению.

Способ определения содержания метронидазола в биосубстратах // 2537036

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, и заключается в проведении хроматографического анализа образца биопробы. Для этого образец наносят на бумажный фильтр и на этот же фильтр наносят радиально стандартные калибровочные растворы метронидазола в интервале концентраций 10-100 мкл.

Способ анализа выноса с луговой травой биохимических веществ // 2538802

Изобретение относится к области агропромышленных технологий и может быть использовано для анализа выноса с луговой травой биохимических веществ. Для этого проводят учет колебаний урожайности в зависимости от структуры фитоценоза в виде травяного покрова. Проведение статистической обработки данных испытаний проб травы с пробных площадок на прирусловых, центральных и притеррасных поймах, а также на лугах с неравномерным и мозаичным размещением видов трав. Причем до закладки пробных площадок проводят рекогносцировку местности с выбранным для измерений травяным покровом, составляют карту-схему расположения компонент травяного покрова, после этого на каждой компоненте травяного покрова в виде делянки закладывают, по крайней мере, одну временную пробную площадку, по срезанной пробе травы взвешиванием определяют сырую и воздушно-сухую массу пробы. При этом дополнительно на высушенных пробах травы проводят испытания по биохимическому анализу для определения концентрации, по крайней мере, у трех химических питательных веществ в виде азота подвижного, оксидов калия и фосфора, затем суммированием концентраций этих трех веществ вычисляют общий суммарный вынос веществ из надземной части травы на всех пробных площадках. Изобретение позволяет определить продуктивность лугов. 8 з.п. ф-лы, 12 ил., 4 табл., 1 пр.

Способ оценки легочного кровотока // 2539718

Группа изобретений относится к медицине, а именно к пульмонологии, кардиологии, геронтологии и спортивной медицине, и может быть использована для оценки легочного кровотока путем исследования капиллярного кровотока легких и внутрилегочных вено-артериальных шунтов. Для этого измеряют ЧСС в мин, концентрацию гемоглобина (Hb г/л), общее потребление кислорода организмом (ПО2(ОБЩ) мл/мин), насыщение кислородом артериальной крови (SART % или в десятичных долях 1) и насыщение смешанной венозной крови в большом круге кровообращения (БК) (Sv% или в десятичных долях 1). Вычисляют МОК (л/мин) по измеренным значениям Hb, ПО2, SART, SV. Затем по определенным математическим формулам рассчитывают величину капиллярного кровотока легких и величины внутрилегочных вено-артериальных шунтов. Предложенные варианты способа позволяют точно определить вентилляционно-перфузионные отношения в легких, а также исключить сложные прямые инструментальные способы измерения капиллярного кровотока в легких. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 1 пр.

Патрон для автоматического обнаружения аналита в пробе телесной жидкости и содержащая его система // 2540424

Группа изобретений относится к области лабораторной диагностики. Устройство для автоматического обнаружения аналита в пробе телесной жидкости содержит матрицу адресуемых блоков анализа для проведения химической реакции, которая дает различимый сигнал, несущий информацию о наличии или отсутствии аналита; матрицу адресуемых блоков реагентов, в которой обращаются к индивидуальному адресуемому блоку реагента, соответствующему индивидуальному адресуемому блоку анализа, и в которой индивидуальный блок реагента выполнен с возможностью калибровки по опорному сигналу соответствующего индивидуального блока анализа до сборки матриц на устройстве, причем индивидуальный блок анализа содержит наконечник для количественного анализа, имеющий внутреннюю поверхность, содержащую реагенты, фиксированные на поверхности, для обнаружения аналита. Группа изобретений относится также к варианту указанного устройства, дополнительно содержащему блок отбора пробы, а также к системам, содержащим указанные устройства, способам анализа с использованием указанных устройств, способу сборки указанного устройства и способу отбора плазмы из пробы крови в указанных системах. Группа изобретений обеспечивает повышение гибкости и надежности системы, а также предотвращает перекрестное загрязнение блоков устройства. 10 н. и 55 з.п. ф-лы, 21 ил., 3 табл., 7 пр.

Способ оценки нарушения оксигенации гемоглобина при снижении микровязкости мембран эритроцитов периферической крови беременных на третьем триместре гестации и обострении цитомегаловирусной инфекции // 2540425

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки угрозы формирования гипоксии у беременных с обострением цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации. Сущность способа: в периферической крови определяют титр антител к цитомегаловирусу, микровязкость мембран эритроцитов путем эксимеризации липидного бислоя и белок-липидного слоя, количество дегенеративных форм эритроцитов, мишеневидных эритроцитов и эхиноцитов, содержание оксигемоглобина. При титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, выявлении снижения эксимеризации липидного бислоя до 0,59±0,006 FЭ/FМ, белок-липидного слоя до 0,70±0,004 FЭ/FМ, увеличении количества дегенеративных форм эритроцитов до 10,5±0,3%, эхиноцитов до 8,0±0,5%, мишеневидных эритроцтов до 11,5±0,9%, снижении содержания оксигемоглобина до 89,8±1,5% оценивают угрозу формирования гипоксии.

Способ прогнозирования мясной продуктивности цыплят-бройлеров // 2540435

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к птицеводству. Целью изобретения является разработка способа прогнозирования мясной продуктивности цыплят-бройлеров на основе определения соотношения между активностью белкового и липидного обмена веществ, определяющего скорость роста птицы и уровень мясной продуктивности. Предложенный способ позволяет прогнозировать уровень прироста массы тела бройлерных цыплят по биохимическим показателям крови. Указанная цель достигается путем расчета липопротеинового индекса (ЛПИ) в усл.ед. по формуле: Л П И = Н Э Ж К ⋅ C l ( Э Х С + Т Г + Ф Л ) ⋅ A l b ⋅ 100 , где ЭХС - концентрация этерифицированного холестерина, ммоль/л; ТГ - концентрация триглицеридов, ммоль/л; ФЛ - концентрация фосфолипидов, ммоль/л; Gl - концентрация глобулинов, ммоль/л; НЭЖК - концентрация неэтерифицированных, ммоль/л; Alb - концентрация альбуминов в сыворотке крови; 100 - нормализующий коэффициент. Установлено, что значение индекса ЛПИ зависит от активности белкового и липидного обменов и определяет уровень прироста массы тела цыплят-бройлеров. Изобретение можно использовать для своевременной корректировки рационов кормления, достижения эффективных приростов массы тела и повышения рентабельность птицефабрики. 1 табл., 1 пр.

Способ ранней диагностики хронического простатита с помощью выявления дисфункции регионарного микрососудистого эндотелия // 2540495

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики хронического простатита с помощью выявления дисфункции регионального микрососудистого эндотелия. Сущность изобретения состоит в том, что проводят ионофоретические пробы в ходе лазерной допплеровской флоуметрии, измеряют показатели резерва капиллярного кровотока при ионофорезе ацетилхолина и нитропруссида натрия на коже живота над лоном в точке проекции простаты, вычисляют коэффициент эндотелиальной функции (КЭФ) и при значении КЭФ ниже 1,0 диагностируют наличие хронического простатита. Использование заявленного способа позволяет упростить раннюю диагностику хронического простатита с помощью оценки функционального состояния регионарного микрососудистого эндотелия. 2 пр.

Способ прогнозирования неразвивающейся беременности // 2540499

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования неразвивающейся беременности. Сущность способа: супернатант аспирационной жидкости из полости матки или менструальных выделений в количестве 0,2 мл наносят на поверхность предметного стекла в форме капли, высушивают при комнатной температуре в течение суток, после чего полученные образцы (фации) микроскопируют. При наличии комплекса морфологических элементов, включающего токсические бляшки, языковые и дискообразные структуры, прогнозируют высокий риск развития неразвивающейся беременности. Предлагаемое изобретение направлено на упрощение и повышение чувствительности способа прогнозирования неразвивающейся беременности и дает возможность в короткие сроки на малом объеме биологического материала прогнозировать течение и исход беременности. 4 пр., 3 ил.

Способ идентификации синегнойной палочки pseudomonas aeruginosa // 2540501

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к молекулярной биологии, микробиологии и хирургии, и может быть использовано в диагностических целях для идентификации синегнойной палочки Pseudomonas aeruginosa в клиническом биоматериале. Способ идентификации синегнойной палочки Pseudomonas aeruginosa включает посев исследуемого материала на твердую питательную среду, инкубирование посева в аэробных условиях при 37°С в течение 16-18 часов. Полученную бактериальную массу в количестве одной бактериологической петли помещают в 300 мкл физиологического раствора и прогревают при 98-99°С в течение 20-30 минут, центрифугируют при 12000 об/мин в течение 30 секунд. В супернатант добавляют краситель для электрофоретической детекции в количестве 0,5 мкл и 20 мкл вносят в лунку размером 4×1 мм 1,2% агарозного геля на ТАЕ-буфере с 10 мкл 1% бромистого этидия. Параллельно в контрольную лунку вносят 3 мкл раствора стандартного ДНК-маркера 1 kb, содержащего фрагменты ДНК в диапазоне 250-10000 bp. Проводят горизонтальный электрофорез в течение 15-20 минут, и при выявлении на полученной электрофореграмме исследуемой бактериальной массы трех светящихся в ультрафиолетовом свете полос, одна из которых соответствует фрагментам стандартного ДНК-маркера размером 10000 bp, вторая соответствует фрагментам стандартного ДНК-маркера размером 6000-8000 bp и третьей полосы в конце трека в форме «метелки», соответствующей фрагментам стандартного ДНК-маркера размером менее 750 bp, идентифицируют Pseudomonas aeruginosa в исследуемой бактериальной массе. Способ позволяет быстро и полно идентифицировать пигментообразующие и беспигментные штаммы Pseudomonas aeruginosa в исследуемой бактерийной массе. 5 ил., 2 пр.

Способ раннего прогнозирования риска прогрессирования периферических витреохориоретинальных дистрофий на парном глазу после операции по поводу регматогенной отслойки сетчатки // 2540505

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для раннего прогнозирования риска прогрессирования периферических витреохориоретинальных дистрофий (ПВХРД) на парном глазу после операций по поводу регматогенной отслойки сетчатки (РОС). В субретинальной жидкости (СРЖ), полученной во время хирургического вмешательства на глазу с РОС, исследуют содержание IL18, если его уровень превышает 550 пкг/мл, то прогнозируют прогрессирование ПВХРД на парном глазу. Изобретение обеспечивает возможность проведения превентивного лечения на парном глазу при наличии риска прогрессирования ПВХРД до возникновения клинических проявлений прогрессирования ПВХРД у лиц с оперированной отслойкой сетчатки на другом глазу. 6 пр.