Способ диагностики нарушений клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида

Авторы патента:

ЗАЙЦЕВА Нина Владимировна (RU)

ТАРАНЕНКО Людмила Андреевна (RU)

ДОЛГИХ Олег Владимирович (RU)

МАЛЮТИНА Наталья Николаевна (RU)

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2539391:

Федеральное бюджетное учреждение науки "Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения" (ФБУН "ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения") (RU)

Изобретение относится к области медицины и иммунологии, и направлено на выявление неблагоприятного воздействия формальдегида на организм человека, а именно на клеточный иммунитет. Сущность способа: производят отбор пробы венозной крови у работников, устанавливают в ней концентрацию формальдегида, определяют количество лимфоцитов - основных параметров T-клеточного иммунитета, затем устанавливают критериальный показатель, по которому судят о нарушении клеточного иммунитета. В качестве основных параметров T-клеточного иммунитета определяют в процентах число активированных T-лимфоцитов CD3⁺CD95⁺ и также определяют в процентах число T-регуляторных лимфоцитов CD4⁺CD25⁺CD127^-, а в качестве критериального показателя используют интегральный показатель, равный отношению установленного процента числа CD3⁺CD95⁺ - лимфоцитов к проценту числа CD4⁺CD25⁺CD127^- - лимфоцитов. При значении этого интегрального показателя, равного и более 40, диагностируют нарушение клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида. Использование изобретения обеспечивает повышение информативности оценки влияния ксенобиотика - формальдегида, на нарушение клеточного иммунитета организма работников химических производств. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и иммунологии, и направлено на выявление интегрального критерия, позволяющего оценить степень (пороговое значение) неблагоприятного воздействия формальдегида на организм человека, а именно на клеточный иммунитет. В качестве интегрального показателя предлагается использовать один из параметров клеточного иммунитета, поскольку именно иммунная система является ведущей регуляторной и защитной системой организма, первой реагирующей на изменение общего гомеостаза.

В связи с широчайшим использованием химических технологий в различных производственных циклах и сферах человеческой деятельности пристальное внимание ученых и медиков привлекает проблема выявления пороговых критериев, позволяющих на ранних этапах оценить, что воздействие вредного химического вещества превышает компенсаторные возможности организма и наносит вред здоровью человека. Актуальность исследования неблагоприятного воздействия формальдегида обусловлена его широчайшим использованием в качестве сырья для производства пластмасс, красок, синтетических смол и клеев, изоляционных материалов, дубильных веществ, дезинфицирующих и лекарственных средств, текстильных вспомогательных веществ; а также в качестве протравителя в сельском хозяйстве. Исходным сырьем для получения формальдегида является метанол. Показано, что работники предприятий, использующих в технологическом цикле метанол и формальдегид, сенсибилизированы к этим ксенобиотикам, что подтверждается их обнаружением в биологических средах организма (кровь, моча). Помимо этого формальдегид является одним из приоритетных загрязняющих веществ в атмосферном воздухе на территориях интенсивного промышленного освоения и выявляется в биологических средах проживающего в этих районах населения. Все это подтверждает необходимость тщательного исследования неблагоприятных последствий воздействия формальдегида на организм человека.

Известно, что метанол и формальдегид оказывают политропное действие на организм человека: поражают нервную и сосудистую систему, обладают выраженным раздражающим действием на слизистые оболочки, поражают кожу, вызывают расстройства зрения и обладают кумулятивным эффектом, а также вызывает глубокие нарушения клеточного и гуморального иммунитета. Особенно ярко выражены эти изменения у лиц, имеющих длительный и постоянный контакт с промышленными ксенобиотиками (у работников химических производств), что усугубляет их неблагоприятное воздействие. Иммунная система, являясь основной защитной системой организма, в первую очередь реагирует на воздействие ксенобиотических факторов, поэтому целесообразно оценивать степень воздействия химических токсикантов, основываясь на изменениях со стороны иммунной системы.

Из уровня техники известен способ диагностики иммунодефицитного состояния (Патент РФ №2179316), согласно которому выполняют проведение оценки как процентного содержания Т-клеток в периферической крови относительно региональной нормы, так и иммунореактивности клеток в нагрузочном тесте розеткообразования in vitro с T-активином и определение показателя относительного содержания T-клеток (ПОТ) и показателя реактивности T-клеток (ПРТ). Техническим результатом известного способа является диагностика иммунодефицитных состояний, определение компенсированных и декомпенсированных форм.

Однако указанным известным способом невозможно достоверно и точно установить связь иммунитета населения с неблагоприятной экологической обстановкой среды проживания, т.к. этим способом устанавливается лишь факт ухудшения иммунного состояния человека без установления причины этого ухудшения. Поэтому последующие лечебные мероприятия могут оказаться безрезультатными, если не установить причину заболевания.

Также известен способ диагностики нарушения иммунного статуса у детей в условиях химической контаминации (Патент РФ №2494401), согласно которому производят отбор пробы крови у детей, проживающих в условиях химической контаминации. Затем выполняют клинико-лабораторные исследования крови на содержание вредных химических соединений. Далее у детей проводят ультразвуковое исследование селезенки для оценки ее эхо-структуры с использованием датчика частотой не менее 10 МГц. При наличии в ультразвуковом срезе селезенки гипоэхогенных однородных округлых включений размером 0,3-1,0 мм, расположенных на расстоянии 1,5-2 мм друг от друга, а также при одновременном превышении концентрации вредного химического соединения в крови по сравнению с его референтным значением диагностируют реактивные изменения специфического иммунитета у детей. Изобретение обеспечивает создание информативного, безопасного и точного способа ультразвуковой диагностики при одновременной простоте и доступности для широкого практического применения.

Однако указанный известный способ диагностики предназначен только для детей промышленного региона и не применим у взрослых, поскольку не учитываются условия химического производства. Также не проводится анализ клеточного иммунитета, а ультразвуковое исследование селезенки на периодическом медицинском осмотре всем работающим на химическом производстве не проводится в соответствии с приказом №302н от 12.04.2011 г. Поэтому использование данного способа диагностики не дает возможности оценить влияние химических веществ на состояние клеточного иммунитета в условиях контаминации химического производства.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению по технической сущности является способ оценки влияния экологической обстановки на состояние иммунного статуса населения (Патент РФ №2180116). При реализации известного способа устанавливают в пробе венозной крови содержание химического вещества, обусловленного экологической средой обитания населения, выделяют из пробы лимфоциты (мононуклеарные клетки) и добавляют к ним установленное химическое вещество в концентрации, соответствующей норме, полученную смесь инкубируют при температуре, соответствующей нормальной температуре организма человека, далее методом иммунологического анализа устанавливают в пробе количество лимфоцитов, содержащих дифференцировочные антигены, обусловленных воздействием химического вещества, и при снижении количества соответствующих кластеров лимфоцитов в пробе под воздействием химического вещества не менее чем в 1,5 раза по сравнению с контрольной пробой без введенного в нее дополнительно химического вещества, при одновременном обнаружении химического вещества в пробе крови в концентрации, превышающей норму, судят об ухудшении состояния иммунитета. Недостатком указанного известного способа является определение влияния экологической обстановки, а не условий химических производства. Также не учитывается превышение концентрации химического вещества выше фоновых концентраций в крови обследуемых. Это не дает возможность достоверно оценить состояние иммунной системы работников в условиях химического производства.

Технический результат, достигаемый предлагаемым изобретением, заключается в повышении информативности оценки влияния ксенобиотика - формальдегида, на нарушение клеточного иммунитета организма работников химических производств.

Указанный технический результат достигается предлагаемым способом диагностики нарушений клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида, включающим отбор пробы венозной крови у работников, установление в ней концентрации формальдегида, определение в ней количества лимфоцитов - основных параметров T-клеточного иммунитета, и установление критериального показателя, по которому судят о нарушении клеточного иммунитета, ОТЛИЧАЮЩИЙСЯ тем, что в качестве основных параметров T-клеточного иммунитета определяют в процентах число активированных T-лимфоцитов CD3⁺CD95⁺ и также определяют в процентах число T-регуляторных лимфоцитов CD4⁺CD25⁺CD127^-, а в качестве критериального показателя используют интегральный показатель, равный отношению установленного процента числа CD3⁺CD95⁺ - лимфоцитов к проценту числа CD4⁺CD25⁺CD127^- - лимфоцитов, и при значении этого интегрального показателя, равного и более 40, диагностируют нарушение клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида.

В предлагаемом способе в качестве информативного критерия оценки нарушений клеточного иммунитета под влиянием формальдегида используется интегральный показатель, который рассчитывается как отношение процента CD3 - позитивных лимфоцитов периферической крови, экспрессирующих молекулу CD95, к проценту T-регуляторных клеток. Значение этого показателя менее 40 свидетельствует о незначительном (допустимом) воздействии формальдегида, не требующем иммунокоррекции, тогда как повышение этого показателя у работников химических производств более 40 свидетельствует о превышающем адаптационные возможности иммунной системы воздействии формальдегида и о глубоких нарушениях клеточного иммунитета, требующих незамедлительной коррекции. Предлагаемый способ учитывает не только количественные (количество CD3 - лимфоцитов, T-регуляторных клеток), но и функциональные параметры T-клеточного звена иммунитета (экспрессия молекулы CD95 на T-лимфоцитах, отражающая активационный статус клетки и ее готовность вступить в апоптоз), а также предлагает удобный вариант "количественной" оценки степени воздействия формальдегида на клеточный иммунитет работников.

Указанный технический результат обеспечивается за счет следующего.

Благодаря использованию в качестве исследуемого материала пробы венозной крови, а также стандартных методик изучения иммунологических параметров обеспечивается простота, надежность и доступность исследований, а также получение результатов нужной информативности.

Для определения предлагаемого интегрального критерия используется отношение CD3 - позитивных лимфоцитов периферической крови, экспрессирующих молекулу CD95, к проценту T-регуляторных клеток, определяемых как количество CD4 - позитивных T-лимфоцитов периферической крови, высокоэкспрессирующих активационный маркер CD25, но негативных по экспрессии CD127. Определение CD3 - позитивных лимфоцитов периферической крови, экспрессирующих молекулу CD95 (CD3⁺CD95⁺, %) и количества T-регуляторных клеток (CD4⁺CD25⁺CD127^-, %) в периферической крови проводится методом иммунофлюоресценции с использованием коммерческих антител согласно методике производителя. Данные методы являются стандартными общепринятыми методами, позволяющими получить корректные высокоточные и информативные результаты.

Известно, что влияние химических токсикантов на организм человека приводит к угнетению, главным образом, клеточного звена иммунитета. Основными факторами, регулирующими степень активации/угнетения клеточных реакций, являются T-регуляторные клетки (Трег). T-регуляторные клетки позиционируются как истинные "супрессоры" иммунных реакций, угнетающие эффекторные Т-клетки. T-регуляторные клетки играют ведущую роль в контроле аутоиммунных реакций в формировании периферической толерантности при онкологических заболеваниях, беременности. Апоптоз также является ведущим механизмом регуляции степени активации клеток. Экспрессия CD95 (Fas/APO-1) - активационного маркера характеризует способность клетки вступать в апоптоз. Определение экспрессии CD95 на CD3-лимфоцитах (общая субпопуляция T-лимфоцитов) позволяет оценить общий потенциал готовности к апоптозу T-клеточного звена иммунитета.

Известно, что воздействие формальдегида приводит к угнетению субпопуляции T-регуляторных клеток (снижает их генерацию), что приводит к недостаточности контроля апоптоза эффекторных субпопуляций T-лимфоцитов и компенсаторно вызывает повышение экспрессии CD95 на поверхности CD3-лимфоцитов периферической крови. Поэтому для оценки степени негативного влияния формальдегида на клеточное звено иммунитета предлагается в заявляемом способе использовать отношение процента CD3⁺CD95⁺ к проценту T-регуляторных клеток (CD4⁺CD25⁺CD127^-) периферической крови.

Для определения диагностической значимости предлагаемого интегрального показателя проанализировано содержание T-регуляторных клеток и экспрессия CD95 на поверхности CD3-лимфоцитов периферической крови у работников химического производства, непосредственно контактировавших с метанолом и формальдегидом. Критерием включения в обследуемую группу был возраст от 46 до 48 лет и стаж работы на вредном производстве от 18 до 22 лет. У работников также было проанализировано содержание формальдегида и его предшественника метанола в сыворотке крови. Все данные подвергнуты статистической обработке с помощью программы «Statistika-6.0» и «StatPlus 2009 Professional 5.8.4». Данные представлены в виде средней статистической величины и стандартной ошибки (M±m). Достоверность определялась непараметрическими методами, при сравнении двух независимых выборок использовался критерий Манна-Уитни. При сравнении двух групп нулевая гипотеза отклонялась при значении альфа-ошибки менее 0,05.

Установлено, что у тех работников, у которых содержание формальдегида в сыворотке крови не превышало допустимой нормы (менее 0,006 мг/дм³) (это фоновая концентрация формальдегида), значение интегрального показателя не превышало 40. Тогда как у тех работников химического производства, у которых содержание формальдегида было выше допустимой нормы (более 0,006 мг/дм³) значение интегрального показателя было выше 40, что свидетельствует о глубоких нарушениях клеточного иммунитета.

Таким образом, установлено численное значение интегрального показателя, что позволяет количественно оценивать степень негативного воздействия формальдегида на клеточное звено иммунитета.

Предложенный интегральный показатель позволяет определить величину эффекта неблагоприятного воздействия формальдегида на клеточный иммунитет как на индивидуальном, так и на популяционном уровнях, а также позволяет на ранних этапах процесса дезадаптации принимать решения о коррекционных и профилактических мероприятиях по снижению экзогенной контаминации формальдегидом.

Исходя из вышеизложенного можно сделать вывод, что поставленный технический результат обеспечивается за счет совокупности операций предлагаемого способа, их последовательности и режимов его реализации.

Предлагаемый способ реализуется следующим образом.

1. Производят забор периферической венозной крови утром натощак в пробирку, содержащую гепарин.

2. Осуществляют выделение суспензии лейкоцитов из венозной гепаринизированной крови, используя буфера для лизиса эритроцитов (название, фирма, страна), согласно инструкции производителя.

3. Фенотипирование лимфоцитов проводится методом проточной цитометрии на цитометре FACSCalibur фирмы «Becton Dickinson» («BD», USA) с использованием программы CellQuest-PrO («BD», USA). Определяют субпопуляции CD3⁺CD95⁺-лимфоцитов, CD4⁺CD25⁺CD127^--лимфоцитов (T-регуляторные клетки) с использованием панелей меченых моноклональных антител (МКАТ) к мембранным CD-рецепторам («BD», USA). Для исследования кровь с этилендиаминтетраацетатом (ЭДТА) разводили в два раза раствором хлорида натрия (9 г/л, pH 7,2), наслаивали на 3 мл градиента плотности фиколла-урографина (концентрация фиколла составляла 9%, плотность градиента - 1,077 г/мл) и центрифугировали 30 мин при 1500 об/мин.

Образовавшееся в интерфазе «кольцо» мононуклеарных клеток отбирали пипеткой, полученную клеточную взвесь дважды отмывали раствором хлорида натрия (9 г/л, pH 7,2).

Полученную взвесь мононуклеаров ресуспендировали в рабочем растворе (объемное соотношение концентрированный буфер: дистиллированная вода как 1:9) фосфатно-солевого буфера (PBS) для окрашивания до концентрации 1×10⁶ клеток/мл. Причем в состав фосфатно-солевого буфера PBS входила смесь солей: хлорида натрия, гидроортофосфата натрия, дигидроортофосфата натрия и азида натрия, с pH 7,2.

4. Рассчитывали интегральный показатель как отношение процента CD3⁺CD95⁺-лимфоцитов к проценту CD4⁺CD25⁺CD127^--лимфоцитов.

5. У тех обследуемых работников, у кого значение интегрального показателя превышало 40, прогнозировали нарушение клеточного иммунитета за счет повышенной активности воздействия формальдегида на уровень T-регуляторных клеток. Используя эту информацию, в дальнейшем осуществляли в отношении этих работников элиминационные и корректирующие иммунитет программы.

Для доказательства адекватности выбранного значения интегрального показателя и характеристики степени влияния формальдегида на клеточный иммунитет было обследовано 52 работника химического производства. Из указанных работников 24 человека не имеют в пробах крови превышения фоновых уровней формальдегида, а 28 человек имеют превышение фоновых уровней формальдегида. У всех обследуемых была взята венозная кровь, исследование которой проводилось по вышеуказанной схеме. Данные, полученные в результате исследований, приведены в таблицах 1 и 2.

В таблице 1 приведены основные параметры T-клеточного иммунитета работников химического производства, уровень контаминации формальдегидом пробы крови которых не превышает фоновых концентраций. У этих работников рассчитаны значения интегрального показателя (отношение процента CD3⁺CD95⁺-лимфоцитов к проценту CD4⁺CD25⁺CD127^--лимфоцитов).

В таблице 2 приведены основные параметры T-клеточного иммунитета работников химического производства, уровень контаминации формальдегидом пробы крови которых превышает фоновые значения. Также рассчитаны значения вышеприведенного интегрального показателя.

Данные исследований показали, что во второй группе работников с превышением уровня контаминации формальдегидом процент как CD3⁺CD95⁺-лимфоцитов, так и CD4⁺D25⁺CD127^- - лимфоцитов достоверно отличались (p<0,05) от аналогичных показателей в группе работников (первая группа), имеющих уровень формальдегида в крови, не превышающий фоновые, что свидетельствует о глубоких нарушениях клеточного иммунитета под влиянием высоких концентраций формальдегида. Это подтверждается и высокими значениями интегрального показателя (более 40) у работников этой группы.

Для обоснования минимального порогового значения интегрального показателя (равного 40) по соотношению CD3⁺CD95⁺ %/CD4⁺CD25⁺CD127^- %, которое бы характеризовало нарушения клеточного иммунитета, исходили из следующего принципа.

Рассчитывали среднее арифметическое значение интегрального критерия по показателям первой группы (равное 32,43; таблица 1), к которому прибавляли среднее арифметическое отклонение, рассчитанное также по показателям у работников первой группы (равное 6,51 таблица 1), что в сумме составляет величину, близкую к 40 (принимая при этом во внимание математическую погрешность). Такой подход позволяет характеризовать границу влияния (нижнее пороговое значение) химического фактора, когда действие химического фактора переходит через границу компенсаторных возможностей организма, что приводит к нарушениям клеточного иммунитета у работников химического производства.

Таким образом, рекомендуемый к определению интегральный показатель (равный и более 40) позволяет диагностировать наличие, степень и направленность нарушений здоровья при экспозиции формальдегида по изменению самой чувствительной из систем - иммунной, и, в свою очередь, по изменению самых чувствительных показателей T-клеточного звена иммунитета.

Установленные значения интегрального показателя позволят не только определить степень выраженности интоксикации и нарушений клеточного иммунитета, но и вовремя провести лечебные и профилактические мероприятия как на индивидуальном (программа по детоксикации и иммуномодуляции), так и в целом на предприятии (мероприятия на источниках и реабилитационные мероприятия).

Для иллюстрации реализации предлагаемого способа приведены два примера по конкретным пациентам одного возраста и пола из группы работников с повышенным содержанием формальдегида в крови и работников с содержанием формальдегида в пределах фоновой концентрации.

Пример 1

Мужчина 46 лет, стаж работы на производстве 27 лет. Определяется уровень формальдегида в крови выше фоновых уровней - 0,008 мг/дм³. Иммунологические показатели крови имели следующие значения: CD3⁺-лимфоциты 65%, 2,08×10⁹/дм³; CD3⁺CD4⁺-лимфоциты 44%, 1,41×10⁹/дм³; CD3⁺CD8⁺-лимфоциты 19%, 0,61×10⁹/дм³; CD19⁺-лимфоциты 12%, 0,38×10⁹/дм³; CD16⁺56⁺ 11%, 0,35×10⁹/дм³, CD3⁺CD25⁺-лимфоциты 9%, 0,29×10⁹/дм³, CD3⁺CD95⁺-лимфоциты 39%, 1,02×10⁹/дм³, CD4⁺CD8⁺ 2,32; CD4⁺CD25⁺CD127 - 0,43%, 0,022×10⁹/дм³; Абсолютный фагоцитоз 2,07, фагоцитарное число 0,69, фагоцитарный индекс 1,53, IgG - 12, IgA - 2,01, IgM - 1,02. Значение интегрального показателя - 90,7 (т.е. выше 40). При анализе показателей иммунологического обследования выявлены нарушения клеточного иммунитета, обусловленные действием формальдегида, а именно, при снижении экспрессии маркера CD4⁺CD25⁺CD127^- повышаются риски развития аутоиммунных патологий и аллергических заболеваний.

Пример 2

Мужчина 50 лет, стаж работы на производстве 26 лет. Определяется уровень формальдегида в крови в пределах фоновых уровней - 0,004 мг/дм. Иммунологические показатели крови имели следующие значения: CD3⁺-лимфоциты 65%, 2,08×10⁹/дм³; CD3⁺CD4⁺-лимфоциты 43%, 1,23×10⁹/дм³; CD3⁺CD8⁺-лимфоциты 24%, 0,68×10⁹/дм³; CD19⁺-лимфоциты 7%, 0,2×10⁹/дм³; CD16⁺56⁺ 11%, 0,31×10⁹/дм³, CD3⁺CD25⁺-лимфоциты 13%, 0,37×10⁹/дм³, CD3⁺CD95⁺-лимфоциты 51%, 1,31×10⁹/дм³, CD4⁺CD8⁺ 1,79; CD4⁺CD25⁺CD127 - 2,69%, 0,187×10⁹/дм³; Абсолютный фагоцитоз 2,79, фагоцитарное число 0,68, фагоцитарный индекс 1,55, IgG - 13,11, IgA - 2,35, IgM - 1,1. Значение интегрального показателя - 18,96. При анализе данных иммунологического обследования нарушений клеточного иммунитета, обусловленных действием формальдегида, выявлено не было. Это доказывается тем, что уровень экспрессии маркеров CD3⁺CD95⁺ и CD4⁺CD25⁺CD127^- находятся в пределах нормы. А риски развития аутоиммунных и аллергических заболеваний от воздействия формальдегида минимизируются.

Таким образом, приведенные данные показывают, что при реализации предлагаемого способа обеспечивается его назначение и обеспечивается достоверность диагностики.

Способ диагностики нарушений клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида, включающий отбор пробы венозной крови у работников, установление в ней концентрации формальдегида, определение в ней количества лимфоцитов - основных параметров Т-клеточного иммунитета, и установление критериального показателя, по которому судят о нарушении клеточного иммунитета, отличающийся тем, что в качестве основных параметров Т-клеточного иммунитета определяют в процентах число активированных Т-лимфоцитов CD3⁺CD95⁺ и также определяют в процентах число Т-регуляторных лимфоцитов CD4⁺CD25⁺CD127^-, а в качестве критериального показателя используют интегральный показатель, равный отношению установленного процента числа CD3⁺CD95⁺-лимфоцитов к проценту числа CD4⁺CD25⁺CD127^--лимфоцитов, и при значении этого интегрального показателя, равного и более 40, диагностируют нарушение клеточного иммунитета у работников химических производств при воздействии формальдегида.

Похожие патенты:

Гуманизированное антитело // 2538709

Группа изобретений относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использована для лечения глазной болезни, ассоциированной со связанными с амилоидом-бета патологическими аномалиями/изменениями в тканях зрительной системы.

Способ диагностики снижения поствакцинального иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в условиях воздействия вредных химических факторов среды обитания // 2538676

Изобретение относится к области медицины, в частности к способу диагностики снижения поствакцинального иммунитета к коклюшу у детей, проживающих в условиях воздействия вредных химических факторов, таких как хром и марганец.

Прогнозирование и предупреждение преэклампсии // 2538661

Группа изобретений относится к медицине и касается способа оценки того, имеет ли беременная женщина повышенный риск развития преэклампсии, заключающегося в том, что с использованием моноклонального антитела, обладающего реактивностью в отношении Н2-релаксина, измеряют концентрацию Н2-релаксина в биологическом образце, полученном из организма беременной женщины до проявления симптома преэклампсии, где моноклональное антитело получено с помощью гибридомы, депонированной в Американской коллекции типовых культур под регистрационным номером РТА-8423; и определяют, что беременная женщина имеет повышенный риск развития преэклампсии, если концентрация Н2-релаксина меньше предельного значения нижнего квартиля концентрации, характерной для беременной женщины; способа оценки того, имеет ли беременная женщина преэклампсию; способа ослабления преэклампсии.

Способ прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гтперплазии // 2538642

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования риска развития плоскоклеточной метаплазии в респираторном эпителии бронхов с наличием изолированной базальноклеточной гиперплазии.

Способ прогнозирования исхода мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря после комбинированного лечения // 2538632

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способа прогнозирования исходов мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря. Способ включает проведение исследования активности 26S протеасом и содержания NF-кВ р65 и р50 в опухолевой ткани.

Электрохимический способ иммуноанализа для определения микроорганизмов // 2538153

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к определению содержания микроорганизмов в различных объектах и средах. Способ предусматривает конъюгацию бактерий с электрохимической меткой, в качестве которой используют Fe0, MgFe2O4 или Fe3O4, осуществляемую в водной среде при заданных параметрах.

Способ получения биотинилированного производного окисленного декстрана // 2537246

Изобретение относится к медицине, экспериментальной и клинической фармакологии. Суть способа: окисленный декстран растворяют в трис-ацетатном буферном растворе с рН 5,0-5,5, добавляют к полученному раствору гидразид биотина в соотношении к окисленному декстрану, равном 1:(20-25), после чего полученный раствор нагревают до 80-90°С и выдерживают в течение 30-60 минут.

Способ прогнозирования дискоординации родовой деятельности // 2537241

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству, предназначено для прогнозирования патологии в родах, в частности дискоординации родовой деятельности (дистоции шейки матки).

Способ оценки ингибирующего действия цитомегаловирусной инфекции на активность карбоангидразы в эритроцитах периферической крови беременных // 2537180

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы формирования гемической гипоксии у беременных при обострении цитомегаловирусной инфекции.

Способ оценки нарушения микровязкости мембран эритроцитов периферической крови беременных на третьем триместре гестации, при обострении цитомегаловирусной инфекции // 2537119

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для оценки устойчивости мембран эритроцитов периферической крови у беременных с цитомегаловирусной инфекцией на третьем триместре гестации.

Способ определения биологической активности эмбрионированных яиц trichuris // 2540145

Изобретение касается способа определения биологической активности эмбрионированных яиц Trichuris. Охарактеризованный способ включает осуществление по меньшей мере 3-х анализов, выбранных из: - оценки и/или подтверждения стадии эмбрионального развития яиц с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных маркерных последовательностей для определения количества копий геномной ДНК, - оценки метаболической активности эмбрионированных яиц с помощью биохимических и/или молекулярно-биологических методов, - оценки индуцибельности генной экспрессии в эмбрионированных яйцах, - оценки подвижности личинок Trichurs с помощью микроскопа в течение продолжительных периодов наблюдения после предварительной инкубации при повышенных температурах и/или - оценки коэффициента вылупляемости личинок Trichuris в организме лабораторного животного. Представленное изобретение может быть использовано при получении безопасных фармацевтических продуктов, терапевтически эффективных при применении у человека. 14 з.п. ф-лы, 10 ил., 11 табл., 6 пр.

Патрон для автоматического обнаружения аналита в пробе телесной жидкости и содержащая его система // 2540424

Группа изобретений относится к области лабораторной диагностики. Устройство для автоматического обнаружения аналита в пробе телесной жидкости содержит матрицу адресуемых блоков анализа для проведения химической реакции, которая дает различимый сигнал, несущий информацию о наличии или отсутствии аналита; матрицу адресуемых блоков реагентов, в которой обращаются к индивидуальному адресуемому блоку реагента, соответствующему индивидуальному адресуемому блоку анализа, и в которой индивидуальный блок реагента выполнен с возможностью калибровки по опорному сигналу соответствующего индивидуального блока анализа до сборки матриц на устройстве, причем индивидуальный блок анализа содержит наконечник для количественного анализа, имеющий внутреннюю поверхность, содержащую реагенты, фиксированные на поверхности, для обнаружения аналита. Группа изобретений относится также к варианту указанного устройства, дополнительно содержащему блок отбора пробы, а также к системам, содержащим указанные устройства, способам анализа с использованием указанных устройств, способу сборки указанного устройства и способу отбора плазмы из пробы крови в указанных системах. Группа изобретений обеспечивает повышение гибкости и надежности системы, а также предотвращает перекрестное загрязнение блоков устройства. 10 н. и 55 з.п. ф-лы, 21 ил., 3 табл., 7 пр.

Способ иммунологического прогнозирования осложнений q-инфаркта миокарда // 2540492

Изобретение относится к области медицины, а именно кардиологии, и может быть использовано для раннего иммунологического прогнозирования возникновения нарушений ритма в остром периоде Q-инфаркта миокарда. Для этого на 1-е сутки Q-инфаркта миокарда определяют содержание IgM и IgG к к вирусу простого герпеса (ВПГ1+2), α-интерферона и α-интерфероновых антител в сыворотке крови. При низких титрах диагностически значимого результата специфических иммуноглобулинов класса М к ВПГ1+2, превышающих диагностически значимый результат в 0,12-0,20 раза, и класса G к ВПГ1+2 - в 0,73-2,09 раза, превышении концентрации α-интерферона от 1,50 до 9,33 пг/мл и α-интерфероновых антител от 11,01 до 12,02 нг/мл прогнозируют благоприятное клиническое течение Q-инфаркта миокарда, не осложненное аритмиями сердца. При значениях специфических иммуноглобулинов к ВПГ1+2, превышающих диагностически значимый результат для класса М - в 0,86-1,75 раз, класса G в 2,71-2,96 раза, низкого уровня α-интерферона от 0,072 до 0,084 пг/мл и низкой концентрации α-интерфероновых антител от 0,025 до 0,031 нг/мл прогнозируют клиническое течение Q-инфаркта миокарда с развитием аритмий сердца. Использование данного способа позволяет прогнозировать осложнения Q-инфаркта миокарда с первых суток с ранним определением реактивации вирусной инфекции, что позволяет провести своевременную противовирусную терапию, улучшая результаты клинического течения и исхода заболевания. 5 пр., 1 табл.

Способ прогнозирования риска развития поздней отслойки сетчатки у детей с рубцовой ретинопатией недоношенных // 2540504

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования развития поздней отслойки сетчатки у детей с рубцовой ретинопатией недоношенных. В сыворотке крови больного определяют одновременно содержание трансформирующего фактора роста β1 (TGF β1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). При выявлении уровня TGF β1 менее 10000 пкг/мл и VEGF больше 500 пг/мл прогнозируют риск развития отслойки сетчатки. Способ является простым в исполнении и обеспечивает возможность выбора адекватной лечебной тактики. 1 ил., 5 пр.

Способ прогнозирования детского церебрального паралича у детей 1-го года жизни // 2540514

Изобретение относится к области медицины, педиатрии, детской неврологии и может быть использовано для прогнозирования детского церебрального паралича у детей 1-го года жизни. Сущность способа: в сыворотке крови новорожденных и детей первых 3 месяцев жизни определяют тип иммунного ответа по уровню иммуноцитокинов, исследуемых методом твердофазного иммуноферментного анализа: при уровне ИЛ-2 195,2 пг/мл и выше, ФНО-α 164,8 пг/мл и выше, ИНФ-γ 91,2 пг/мл и выше определяют поляризацию иммунного ответа по Th1-типу; при уровне ИЛ-4 78,4 пг/мл и выше и ИЛ-6 192,4 пг/мл и выше определяют поляризацию иммунного ответа по Th2-типу. Если поляризация иммунного ответа развивается по Th-1 типу иммунного ответа, то прогнозируют развитие детского церебрального паралича к 1-му году жизни ребенка, а если поляризация иммунного ответа развивается по Th-2 типу иммунного ответа, то развитие детского церебрального паралича не происходит. Изобретение обеспечивает возможность формирования групп риска по развитию тяжелых инвалидизирующих расстройств ЦНС, вплоть до формирования различных форм ДЦП у детей на 1-м году жизни. Способ обладает высокой точностью и объективностью. 1 табл., 2 пр.

Способ получения антигенного эритроцитарного диагностикума для обнаружения антител к антигенам возбудителей сапа и мелиоидоза // 2540902

Изобретение относится к способу получения антигенного эритроцитарного диагностикума для обнаружения антител к антигенам возбудителей сапа и мелиоидоза. Указанный способ включает стерилизацию культуры авирулентного штамма Burkholderia pseudomallei 107, суспендирование высушенной бактериальной массы в 0,15 М растворе NaCl, обработку полученной суспензии ультразвуком, центрифугирование взвеси разрушенных клеток с последующим отделением супернатанта и высаливание из него гликопротеиновой фракции, на основе которой получают диагностикум. Изобретение позволяет определять в реакции непрямой гемагглютинации специфические антитела в ранние сроки как сапной, так и мелиоидозной инфекций. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 3 пр.

Способ диагностики анемического синдрома у детей // 2540908

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии, к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики анемического синдрома в детском возрасте. Сущность способа: на гематологическом анализаторе определяют показатели гемограммы и индексы красной крови, такие как: гемоглобин (НВ) и средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах (МСНС), а в сыворотке крови определяют гепцидин, ИЛ-6, ферритин и трансферрин. Сравнивают полученные показатели с референсными интервалами и при значениях: гемоглобин ≤114 г/л, МСНС ≤302 г/л, ферритин ≥45 нг/мл; трансферрин ≤250 мг/дл; ИЛ-6≥11 пг/мл; гепцидин ≥120 нг/мл делают вывод об анемическом синдроме, развившемся на фоне воспалительных изменений в организме при остром или хроническом заболевании. Применение изобретения обеспечивает возможность адекватной оценки воспалительного ответа организма при хронических и острых воспалительных заболеваниях. 3 пр.

Способ оценки угрозы гибели эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на ранних этапах гестации, приводящей к снижению содержания кортизола в периферической крови // 2541176

Изобретение относится к области медицины, а именно к проблеме создания новых способов диагностики угрозы гибели эмбриона при цитомегаловирусной инфекции. Выполняют измерение у беременной в момент обострения заболевания в периферической крови титра антител IgG к цитомегаловирусу и уровня кортизола. Сущность способа: в периферической крови беременных на момент обострения цитомегаловирусной инфекции определяют титр антител IgG к цитомегаловирусу и уровень кортизола. При титре IgG 1:1600 к цитомегаловирусу и уровне кортизола 563,0±19,2 нмоль/л при исходном 1399,4±25,5 нмоль/л определяют наличие угрозы самопроизвольного выкидыша или замершей беременности. Применение изобретения обеспечивает определение угрозы гибели эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на ранних этапах гестации в зависимости от содержания кортизола в периферической крови.

Способ дооперационного прогнозирования осложненного течения раннего посттрансплантационного периода, проявляющегося дисфункцией трансплантата, после родственной трансплантации печени детям раннего возраста с врожденными заболеваниями гепатобилиарной системы // 2541803

Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для дооперационного прогноза осложненного течения раннего посттрансплантационного периода. Для этого перед трансплантацией печени в плазме крови измеряют концентрацию в нг/мл инсулиноподобного фактора роста-1 (ИФР-1) и соматотропного гормона (СТГ). Далее вычисляют индекс прогнозирования течения посттрансплантационного периода (К) по формуле: К=lg (ИФР-1/СТГ). При величине К, меньшей минус 1,7, прогнозируют осложненное течение раннего посттрансплантационного периода. Использование способа позволяет осуществить объективное прогнозирование у детей с врожденными заболеваниями гепатобилиарной системы течения раннего посттрансплантационного периода, проявляющегося дисфункцией трансплантата. 6 пр.

Способ выявления степени выраженности интоксикации парами металлической ртути // 2542379

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и неврологии, и может быть использовано для выявления степени выраженности интоксикации парами металлической ртути. Для этого в сыворотке крови определяют содержание интерлейкина 2, уровни аутоантител к белку S-100, аутоантител к β2-гликопротеину, аутоантител к MAG, специфичных относительно нервной ткани. Рассчитывают диагностические коэффициенты F1 и F2: F1=-14,12+20,89×A1+34,74×А2-0,004×А3+0,0004×А4; F2=-9,85+4,89×A1+10,08×А2+0,006×А3+0,011×А4, где -14,12 и -9,85 - константы, 20,89; 34,74; 0,011; 0,0004; 4,89; 10,08; 0,006; 0,004 - дискриминационные коэффициенты; A1, …4 - градации и числовые значения показателей проведенного обследования: A1 - содержание интерлейкина 2, пг/мл; A2 - уровень аутоантител к белку S-100, усл. ед; А3 - уровень аутоантител к β2-гликопротеину, усл. ед.; А4 - уровень аутоантител к MAG, BTU. При значении F1 больше F2 диагностируют органические изменения в нервной системе, характерные для 2 степени хронической ртутной интоксикации, при F1 меньше или равно F2 - делают заключение о наличии начальных проявлений интоксикации парами металлической ртути, что соответствует 1 степени интоксикации. Использование данного способа позволяет дифференцировать степень выраженности хронической ртутной интоксикации за счет использования комплекса иммунологических показателей, в том числе специфичных относительно нервной ткани аутоантител при хроническом воздействии паров металлической ртути. 2 пр., 1 табл.