Способ моделирования осевой близорукости

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в научной и клинической практике при разработке консервативных и оперативных методов лечения осевой близорукости. Для этого в эксперименте моделируют осевую близорукость у кроликов породы шиншилла. Моделирование проводят ежедневным введением во внутреннюю сонную артерию в течение 6 месяцев 0,3-0,6 мл раствора трансретиноевой кислоты в концентрации 0,04-0,07 мг на 1 мл физраствора. Введение осуществляют в течение 6 месяцев. Способ позволяет повысить точность воспроизведения патологического процесса, приблизить модель к течению естественной патологии. 2 ил., 2 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в научной и клинической практике при разработке консервативных и оперативных методов лечения близорукости.

Известен способ моделирования экспериментальной близорукости, при котором кроликам под конъюнктиву глаза в зону экватора в четырех сегментах вводят свежеприготовленный раствор папаина на физиологическом растворе при 37°C из расчета 0,005 мг на 1 мл раствора по 0,25 мл в каждый сегмент. Клиническими, гистологическими и электронно-микроскопическими исследованиями было доказано развитие миопической болезни у экспериментального животного (патент СССР №1573466, 1990 г.). Макроскопически на поверхности склеры в области конъюнктивальных сводов определялись зоны истончения склеры в виде типичных миопических стафилом с просвечивающейся через склеру сосудистой оболочкой. Клинически на глазном дне авторы отмечали развитие хориоидальной дистрофии с диспигментацией пигментного эпителия сетчатки, прогрессирующим хориоваскулосклерозом и формированием в зоне экватора белых дистрофических очагов. При биомикроскопии выявлено развитие дистрофических изменений в радужке. Определялось усиление клинической рефракции, увеличение переднезаднего размера глаза. При исследовании гемодинамики выявлено уменьшение кровенаполнения сосудистой оболочки глаза. При гистологическом и электронно-микроскопическом изучении склеры и хориоидеи выявлено истончение фиброзной и сосудистой оболочек со значительными нарушениями в структуре коллагеновых волокон и фибрилл, вплоть до их зернистого распада.

Однако способ имеет ряд недостатков: моделирование осуществляют введением препарата в четырех сегментах, что травматично для глаза, нативный ферментный препарат папаин быстро инактивируется системой ингибиторов организма, что требует его ежедневного введения, приводящего к увеличению риска развития токсико-аллергических реакций.

Известен способ моделирования экспериментальной близорукости, основанный на повышении внутриглазного давления на фоне снижения давления в сосудах глаза при сочетанном воздействии 3,0% раствора натрия хлорида и 1,0% раствора никотиновой кислоты в период роста организма кролика (Барковская Т.Н., 2001). Автором на глазах кроликов породы шиншилла данным способом воспроизведена близорукость до 2,0 дптр. Переднезадний размер глаза увеличился с 20,5 до 23,9 мм, а морфологически выявлены изменения в виде истончения всех слоев склеры с фрагментацией ее волокон и повышенным накоплением гликозаминогликанов.

Однако данный способ не воспроизводит естественные условия формирования данного заболевания.

Результаты экспериментальных исследований показали, что различные ткани глазного яблока (хориоидея, пигментный эпителий сетчатки) способны синтезировать ретиноевую кислоту и она участвует в регуляции роста глазного яблока. Концентрация ретиноевой кислоты в организме должна поддерживаться на строго определенном уровне. Избыток ретиноевых кислот способен ингибировать синтез склеральных протеогликанов. Торможение синтеза протеогликанов ослабляет склеру и создает структурную основу для возникновения миопии.

На сегодняшний день в фибробластах склеры человека обнаружено 6 типов рецепторов к ретиноевой кислоте (RAR alpha, RAR beta, RAR gamma, RXR alpha, RXR beta, and RXR gamma). В отсутствие избытка ретиноевых кислот рецепторы в фибробластах неактивны. При избытке - активируется ген рецептора RAR alpha, который рассматривается как потенциальный ген развития миопии.

В то же время трансретиноевая кислота - это естественный эндогенный метаболит витамина А, относящийся к классу ретиноидов и в норме присутствующий в плазме крови в концентрации 0,5-1,5 нг/мл. Под действием внутриклеточных изомераз трансретиноевая кислота метаболизируется в 13-цисретиноевую кислоту и окисляется в печени цитохромом Р450 до 4-оксиметаболитов.

С учетом изложенного очевидно, что изменение концентрации ретиноевой кислоты в организме можно использовать для создания модели миопии.

По нашему мнению, ближайшим аналогом предлагаемого нами способа является использование трансретиноевой кислоты для моделирования миопии, которая вводится морским свинкам в составе корма 3 раза в количестве 25 мг/кг вместе с 0,4 мл арахисового масла на 7,9 и 11 день от рождения (Sally A. McFadden, Marc H.C. Howlett, James R. Mertz, Retinoic acid signals the direction of ocular elongation in the guinea pig eye, Vision Research 44 (2004) 643-653).

Однако столь краткое введение трансретиноевой кислоты, а также использование метаболита с пищей не позволяет контролировать уровень метаболита в крови и, как следствие, в тканях глаза, повысить точность воспроизведения патологического процесса и приблизить модель к течению естественной патологии, которая представляет собой патологический процесс, растянутый во времени.

Задачей данного изобретения является усовершенствование вышеописанного метода моделирования осевой близорукости.

Задача решается за счет того, что в способе моделирования осевой близорукости лабораторным животным во внутреннюю сонную артерию в течение 6 месяцев ежедневно вводится 0,3-0,6 мл раствора трансретиноевой кислоты в концентрации 0,04-0,07 мг трансретиноевой кислоты на 1 мл физраствора.

Способ осуществляется следующим образом:

Для премедикации животному, в частности кролику породы шиншилла, вводится 2% раствор ксилозина гидрохлорида (рометар). Через 10-15 мин внутривенно в краевую вену уха вводится золетил - 50 в дозе 6,6 мг/кг массы тела.

После проведения общей анестезии во внутреннюю сонную артерию экспериментального животного устанавливается постоянный катетер Vasofix Certo 24G.

Правильное положение катетера контролируется проведением рентгенограммы черепа в боковой проекции после введения 0,5 мл рентгенконтрастного вещества Омнипак (Amersham Health, Cork, Ireland) в концентрации 300 мг/мл.

Через катетер в течение 6 месяцев ежедневно вводится 0,3-0,6 мл трансретиноевой кислоты в виде раствора с концентрацией 0,04-0,07 мг трансретиноевой кислоты на 1 мл физраствора.

Раствор для ежедневного введения трансретиноевой кислоты приготовляется в условиях приглушенного света. Порошок разводится в 100% этаноле, далее в полученный раствор добавляется NaCl 0,9% до конечной концентрации 0,04-0,07 мг/мл.

Предложенным способом было проведено моделирование осевой близорукости на 5 кроликах-самцах породы «шиншилла» с исходной массой тела 2,0-2,5 кг. Контрольную группу составили 5 животных, которым после установки катетера в левую внутреннюю сонную артерию трансретиноевая кислота не вводилась.

Предварительно у подопытных животных проводилось полное офтальмологическое обследование обоих глаз, включающее офтальмоскопию, биомикроскопию (щелевая лампа SL-30 фирмы «Opton», производство Германия), определение клинической рефракции (авторефрактометр «Mirae Optics Charops MRK-2000», производство Япония), определение переднезаднего размера глаза - эхобиометрия (офтальмобиометр «Ultrasonic Biometer Model 820»). Офтальмологический контроль по схеме проводили 1 раз в 3 месяца. Оценку результатов давали по результатам биомикроскопии, офтальмоскопии, авторефрактометрии, ЭХО-биометрии.

В результате исследований выявлено, что в контрольных глазах экспериментальных животных на всем сроке наблюдения сохранялась гиперметропическая рефракция. Ее величина в контрольных глазах животных на момент начала эксперимента составляла +4,05±0,17 и по истечении 6 месяцев уменьшилась до +3,62±0,48 (p<0,05). В опытных глазах отмечалось усиление рефракции с +3,92±0,4 до - 0,78±0,2 (p<0,05) (табл.1).

Переднезадняя ось глазного яблока в опытных глазах экспериментальных животных увеличилась с 16,00±1,59 до 18,84±1,47 (p<0,05), в то время как переднезадняя ось глазного яблока контрольных глаз животных достоверно не менялась (табл.2).

Разработанный нами метод позволил получить средний рефракционный эффект через 6 мес - 0,78±0,2 дптр.

Пример осуществления способа

Кролик обследован путем биомикроскопии, офтальмоскопии, патологии не обнаружено. Проводили общую анестезию животного и устанавливали во внутреннюю сонную артерию катетер Vasofix Certo 24G (рис.1). Правильное положение катетера контролировалось проведением рентгенограммы черепа в боковой проекции после введения 0,5 мл рентгенконтрастного вещества Омнипак (Amersham Health, Cork, Ireland) в концентрации 300 мг/мл (Рис.2).

Через установленный катетер в течение 6 месяцев ежедневно вводили 0,5 мл раствора трансретиноевой кислоты в концентрации 0,06 мг на 1 мл физраствора. Токсико-аллергические реакции у животного не были выявлены на протяжении всего времени моделирования.

При обследовании экспериментального животного через 6 мес наблюдалось увеличение переднезаднего размера глазного яблока до 18,5 мм и усиление клинической рефракции до -0,5 дптр.

Таким образом, результаты проведенных нами экспериментальных исследований показали, что способ, основанный на воздействии через системную гемодинамику, является наиболее эффективным при моделировании осевой близорукости. Введение через катетер, установленный во внутреннюю сонную артерию 0,3-0,6 мл раствора трансретиноевой кислоты в концентрации 0,04-0,07 мг на 1 мл физраствора, способствует возникновению осевой формы близорукости с клиническими признаками, характерными для этого процесса.

Способ прост в исполнении, не требует дорогостоящей аппаратуры и препаратов, может быть использован в научной и клинической практике при разработке консервативных и оперативных методов лечения близорукости.

Таким образом, предложенный способ моделирования осевой близорукости по сравнению с прототипом позволяет повысить точность воспроизведения патологического процесса, приблизить модель к течению естественной патологии.

Таблица 1
Клиническая рефракция глаз экспериментальных животных до и после введения транс-ретиноевой кислоты
Сроки наблюдений Клиническая рефракция глаз животных
опытные контрольные
исход +3,92±0,4 +3,99±0,32
6 мес -0,78±0,2* +3,46±0,36*
Примечание: *p<0,05 по сравнению рефракцией до эксперимента
Таблица 2
Переднезадний размер глаз опытных и контрольных животных до и после введения трансретиноевой кислоты
Сроки наблюдений Переднезадний размер глаза
опытные контрольные
исход 16,00±1,59 15,17±1,16
6 мес 18,84±1,47* 15,62±0,98
Примечание: *p<0,05 по сравнению с исходным ПЗР

Способ моделирования осевой близорукости, включающий введение кролику породы шиншилла во внутреннюю сонную артерию в течение 6 месяцев ежедневно 0,3-0,6 мл раствора трансретиноевой кислоты в концентрации 0,04-0,07 мг на 1 мл физраствора.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования панкреатопатии, вызванной нестероидным противовоспалительным препаратом (НПВП-панкреатопатии).
Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и остеологии и представляет собой способ коррекции микроциркуляции в костной ткани при экспериментальном остеопорозе и переломах на его фоне, включающий введение лабораторному животному комбинации фармакологических средств после моделирования остеопороза с помощью билатеральной овариэктомии и остеопоротических переломов бедренной кости у самок крыс линии Wistar, отличающийся тем, что в качестве таких средств используют комбинацию рекомбинантного эритропоэтина в субэритростимулирующей дозе 50 МЕ/кг, который вводят лабораторному животному один раз в неделю подкожно однократно в сутки, и розувастатина в дозе 0,86 мг/кг, который ежедневно внутрижелудочно вводят лабораторному животному однократно в сутки, на фоне моделирования остеопороза в течение восьми недель, а при переломах на фоне моделирования остеопороза - в течение двенадцати недель.

Изобретение относится к области медицины, а именно к нейрохирургии, сосудистой хирургии, эндоваскулярной хирургии, микрохирургии, и может быть использовано при проведении обучающих курсов и тренингов.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и офтальмологии, и может быть использовано для профилактики ишемических состояний сетчатки.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и офтальмологии, и может быть использовано для профилактики ишемических состояний сетчатки.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к исследованиям в области ортопедии, и касается моделирования дефект-псевдоартроза большеберцовой кости.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной морфологии, и касается изучения вопросов коррекции тестикулярной дисфункции, индуцированной адаптацией организма к низким температурам.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной морфологии, и касается изучения вопросов коррекции тестикулярной дисфункции, индуцированной адаптацией организма к низким температурам.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано при воспроизведении метастатического процесса в печени.
Изобретение относится к медицине, в частности к вопросу изучения антиадгезивной активности противохолерных иммуноглобулинов и усиления ее для совершенствования специфической профилактики холеры.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования хронического панкреатита. Способ включает создание гипертензии в билиопанкреатическом протоке. Повышенное давление создают путем сужения просвета билиопанкреатического протока в 1,5 раза. Сужение и стенозирование обеспечивают с помощью внешнего сдавления обернутым вокруг протока и фиксированным к нему лоскутом из вытянутого политетрафторэтилена (e-PTFE). Способ не требует ограничения двигательной активности лабораторных животных и использования сложного оборудования.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, нейрохирургии, и может быть использовано для профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита. Способ включает доступ к остистым отросткам позвоночника экспериментального животного - крысы линии Вистар. На выбранном уровне позвоночно-двигательного сегмента производят двухстороннее раздвигание параспинальных мышц, выполнение ламинэктомии, резецируют остистый отросток. Далее выпиливают позвоночную пластинку, включающую основание остистого отростка и позвоночную дугу с обеих сторон, создавая костный дефект. Резецируют видимую часть желтой связки и обнажают твердую мозговую оболочку. Затем на оболочку укладывают имплантат «Реперен», размещая его вверх и вниз по эпидуральному пространству и в боковые отделы позвоночного канала, погружая края имплантата под оставшиеся ткани желтой связки. После этого выполняют гемостаз раны и послойное ушивание. Способ позволяет предупредить рубцово-спаечные изменения в твердой мозговой оболочке за счет герметичного закрытия эпидурального пространства и предотвращения взаимодействия поврежденного участка желтой связки с твердой мозговой оболочкой. 6 ил., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к топографической анатомии, рентгенологии, колопроктологии и может быть использовано при рентгенологическом исследовании анатомии порто-кавальной системы прямой кишки человека. При проведении рентгенологического исследования венозного русла прямой кишки человека используют 76% раствора урографина. Осуществляют доступ к стволу нижней брыжеечной вены и подвздошным сосудистым пучкам с обеих сторон. Их катетеризируют и предварительно подготавливают путем промывания раствором 10% аммиака и воды дистиллированной. Для обнаружения нижней брыжеечной вены, перед ее препаровкой, используют метод визуализации системы воротной вены. В ее ствол вводят окрашенный в зеленый цвет водный раствор бриллиантового зеленого. Окончательным этапом является непосредственное рентгенконтрастное исследование при помощи стационарного рентгенаппарата 12П9 «Armobil-9». Выполняют 3 серии снимков. 1-ый контрольный - обзорная рентгенография в прямой проекции органов малого таза. 2-ой - обзорная рентгенография в прямой проекции органов малого таза с тугим наполнением заранее подготовленного русла воротной системы прямой кишки раствором рентгенконтрастного вещества урографин 76%. 3-ий - обзорная рентгенография в прямой проекции органов малого таза с тугим наполнением системы внутренних подвздошных вен с обеих сторон одновременно раствором рентгенконтрастного вещества урографин 76%. Способ обеспечивает оптимизацию рентгенологического исследования вен прямой кишки человека, хорошую визуализацию сосудистой системы, предоставляет сведения об особенностях органометрии сосудов, позволяет обнаружить порто-кавальные анастомозы за счет оптимальной подготовки сосудистой системы, использования в качестве контрастного вещества урографина 76% и разработанной схемы рентгенологического исследования. 3 ил., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается разработки вопросов коррекции острого повреждения легких в пульмонологии, неотложной терапии и реанимации. Способ заключается в том, что создают модель повреждения легких интратрахеальным введением крысам 0,03 мл ацетона. Через час после этого крысам вводят внутривенно однократно комбинированный раствор, содержащий 7,2% натрия хлорида и 6% гидроксиэтил-крахмала в дистиллированной воде, в объеме 4 мл/кг. Способ обеспечивает снижение летальности животных за счет уменьшения гипоксемии, площади инфильтративного поражения легких, предотвращения развития альвеолярного отека легочной ткани и степени ее геморрагического пропитывания. 2 ил., 2 табл.
Изобретение относится к экспериментальной медицине, патологической физиологии, гастроэнтерологии, хирургии. Способ моделирования острого панкреатита в эксперименте заключается в том, что лабораторному животному - нелинейной белой крысе - перорально в течение 21 дня вводят нестероидный противовоспалительный препарат Римадил Р в разовой дозе 40 мг/кг массы тела животного, один раз в день, за один час до кормления. Изобретение обеспечивает уменьшение инвазивности и травматичности способа моделирования острого панкреатита в эксперименте. 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, предназначено для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных и связанной с этим нарушением микроциркуляции в плаценте. Способ включает воспроизведение модели гестоза в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы - N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг. На фоне этого ежедневно в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности вводят внутрижелудочно через зонд никорандил в дозе 10 мг/кг 2 раза в сутки. Заявленный способ позволяет эффективно корректировать эндотелиальную дисфункцию, обладает более длительным противоишемическим действием, удобен и безопасен. 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к анестезиологии. Используют экспериментальную модель дурального мешка, включающую прозрачную трубку ПВХ диаметром 1,5 см и длиной 40 см, алюминиевую втулку, трупную твердую мозговую оболочку (ТМО), которую герметично фиксируют пластиковым хомутом к концу трубки ПВХ со стороны вставленной алюминиевой втулки, и стойку для капельницы. Трубку, наполненную физиологическим раствором до уровня 25 см, фиксируют в вертикальном положении с помощью лейкопластыря и деревянной направляющей. Осуществляют прокол твердой мозговой оболочки иглой снизу вверх, при этом теряемый после прокола физиологический раствор непрерывно доливают в верхний конец трубки для поддержания постоянного уровня 25 см. Степень повреждения ТМО определяют по количеству вытекающего из прокола физиологического раствора в единицу времени. Способ позволяет повысить достоверность оценки повреждения ТМО, что достигается за счет снижения потерь вытекающего раствора в процессе эксперимента. 3 ил., 1 табл., 1 пр.

Группа изобретений относится к медицине и вирусологии и касается разработки способов создания биологической модели цитомегаловирусной инфекции человека. Один из вариантов способа включает прививку (вживление) иммунодефицитным мышам nude имплантата, представляющего собой биодеградируемый матрикс. В качестве последнего используют коллагеновую губку, или матрикс на основе хитозана, или полилактидную матрицу. При этом матрикс включает пролиферирующие, высокочувствительные к вирусу, нормальные, жизнеспособные клетки человека, предварительно зараженные цитомегаловирусом человека. Другой вариант способа включает вживление мышам того же имплантата. Однако инфицирование осуществляют путем введения цитомегаловируса человека в предварительно вживленный мышам имплантат. Способы обеспечивают создание модели инфекции, пригодные для изучения ее патогенеза в условиях макроорганизма, а также для исследования in vivo противовирусного действия агентов, обладающих анти-ЦМВ активностью. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 пр.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и биологии. Осуществляют окклюзию магистральных сосудов, кровоснабжающих головной мозг. При этом доступ к левой общей сонной артерии осуществляют через вентральную поверхность шеи, а доступ к плечеголовному стволу и левой подключичной артерии осуществляют через первое межреберье справа и слева - в обход плевральной полости. Способ позволяет снизить посттравматические осложнения животных, что достигается за счет хирургического доступа к артериям в обход плевральной полости. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для профилактики интраоперационных кровотечений на фоне введения гепарина до операции. При проведении эксперимента кроликам-самцам за один час до оперативного вмешательства осуществляют внутривенное введение раствора, содержащего фибрин-мономер в концентрации 11 мг/мл и мочевину в концентрации 150 мг/мл. При этом доза фибрин-мономера составляет 0,25 мг/кг. Способ обладает высокой эффективностью, так как не только снижает объем кровопотери, но и не вызывает тяжелые гемодинамические нарушения и аллергические реакции. 2 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в научной и клинической практике при разработке консервативных и оперативных методов лечения осевой близорукости. Для этого в эксперименте моделируют осевую близорукость у кроликов породы шиншилла. Моделирование проводят ежедневным введением во внутреннюю сонную артерию в течение 6 месяцев 0,3-0,6 мл раствора трансретиноевой кислоты в концентрации 0,04-0,07 мг на 1 мл физраствора. Введение осуществляют в течение 6 месяцев. Способ позволяет повысить точность воспроизведения патологического процесса, приблизить модель к течению естественной патологии. 2 ил., 2 табл., 1 пр.

Наверх