Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита



Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита
Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита
Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита
Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита
Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита
Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита

 


Владельцы патента RU 2541828:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НЦРВХ" СО РАМН) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, нейрохирургии, и может быть использовано для профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита. Способ включает доступ к остистым отросткам позвоночника экспериментального животного - крысы линии Вистар. На выбранном уровне позвоночно-двигательного сегмента производят двухстороннее раздвигание параспинальных мышц, выполнение ламинэктомии, резецируют остистый отросток. Далее выпиливают позвоночную пластинку, включающую основание остистого отростка и позвоночную дугу с обеих сторон, создавая костный дефект. Резецируют видимую часть желтой связки и обнажают твердую мозговую оболочку. Затем на оболочку укладывают имплантат «Реперен», размещая его вверх и вниз по эпидуральному пространству и в боковые отделы позвоночного канала, погружая края имплантата под оставшиеся ткани желтой связки. После этого выполняют гемостаз раны и послойное ушивание. Способ позволяет предупредить рубцово-спаечные изменения в твердой мозговой оболочке за счет герметичного закрытия эпидурального пространства и предотвращения взаимодействия поврежденного участка желтой связки с твердой мозговой оболочкой. 6 ил., 2 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной хирургии, нейрохирургии, и может быть использовано для профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита.

Изучение нарушений, возникающих при ламинэктомии позвоночного канала, и развитие послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита у экспериментальных животных послужит основой для разработки способа профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита у человека.

Количество рецидивов болевого корешкового синдрома после удаления грыж межпозвонковых дисков на поясничном уровне достигает 35-38 процентов. Анализ этой тяжелой категории больных показал, что около 1/3 рецидивов связано с повторной секвестрацией межпозвонкового диска, а у остальных больных корешковые боли возникали за счет формирования грубого рубцово-спаечного процесса в зоне проведенной операции. Это привело к появлению новой междисциплинарной проблемы - так называемого «синдрома оперированного позвоночника».

В зависимости от периода применения методов профилактики рубцово-спаечного эпидурита выделяют дооперационный, интраоперационный и послеоперационный этапы профилактики. В нашей работе нас больше интересуют интраоперационные методы профилактики.

Известны два основных направления интраоперационной профилактики: медикаментозный и барьерный. Медикаментозный включает в себя введение в место оперативного вмешательства различных лекарств в виде гелей, растворов или суспензий с целью предотвращения или уменьшения развития рубцово-спаечных образований. И барьерный, который применяется издавна и включает в себя закрытие твердой мозговой оболочки дурального мешка, например, трансплантатом (лоскутом жира, фасцией, кусочком мышцы, амниотической мембраной) или имплантатом (Dura-Gen, Gortex, тахокомб), тем самым отграничивая рубцовую ткань от дурального мешка и его нейрососудистых структур.

Однако до сих пор вопросы расположения имплантатов и трансплантатов в полости позвоночного канала вызывают множество дискуссий и разногласий.

Известны различные способы моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита. Так известен способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита по Грзегорзу Брзезиски, 2008 г., где в качестве барьера используется пластинка «Тахокомб» [1]. Суть метода заключается в следующем: экспериментальному животному проводили срединный разрез на поясничном уровне, рассекали параспинальные мышцы и проводили ламинэктомию на уровне L4 и L5, обнажали твердую мозговую оболочку, которую затем укрывали пластинкой «Тахокомб».

К недостаткам известного способа следует отнести:

- не представлены особенности расположения и фиксации данного трансплантата относительно твердой мозговой оболочки;

- отсутствует анализ отдаленных результатов лечения, когда можно оценить, располагается ли имплантат на прежнем месте, не деформировался или не пророс рубцовой тканью;

- не показано состояние желтой связки.

Наиболее близким к предлагаемому способу является моделирование профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита по Татсуи, 2006 г., где применяется исскуственный имплантат «Dura-Gen» [2]. По известному способу экспериментальному животному, в данном случае кролику, проводили срединный разрез на поясничном уровне, рассекали параспинальные мышцы, проводили двухстороннюю гемиламинэктомию на уровне от L4 до L7 и обнажали твердую мозговую оболочку, которую покрывали имплантатом «Dura-Gen». Животных выводили из эксперимента на 18-22 неделе, выполняли им МРТ и морфологическое исследование области оперативного вмешательства.

Однако известный способ обладает существенными недостатками:

- формирование слишком большого дефекта на уровне от L4 до L7 позвоночника может привести к чрезмерной нестабильности в поясничном отделе позвоночника и вызвать различные неврологические нарушения от пареза до паралича;

- недостаточно раскрыты особенности размещения имплантата относительно твердой мозговой оболочки и эпидурального пространства;

- отсутствуют фиксация имплантата относительно желтой связки и анализ ее состояния в послеоперационном периоде, а именно отсутствие желтой связки или ее перестройка часто являются одной из причин формирования рубцово-спаечных процессов в твердой мозговой оболочке.

Исходя из анализа известных источников информации, раскрывающих особенности моделирования профилактики рубцово-спаечного эпидурита, а также устранения недостатков известных технологий, была поставлена задача: обеспечить более качественное и эффективное получение модели профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита за счет адекватного расположения имплантата под желтой связкой для более герметичного закрытия эпидурального пространства и предотвращения взаимодействия поврежденного участка желтой связки с твердой мозговой оболочкой, кроме того, оценить в динамике отдаленные сроки эксперимента.

Поставленную задачу решают следующим образом.

Моделирование профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита включает доступ к остистым отросткам позвоночника экспериментального животного крысы линии Вистар, где на выбранном уровне позвоночно-двигательного сегмента, производят двухстороннее раздвигание параспинальных мышц и выполняют ламинэктомию. Новым в предлагаемом способе моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита является то, что резецируют остистый отросток, производят выпиливание позвоночной пластинки, включающей основание остистого отростка и позвоночную дугу с обеих сторон, создавая костный дефект. Резецируют видимую часть желтой связки и обнажают твердую мозговую оболочку спинного мозга, на которую укладывают имплантат, например «Реперен», размещая его вверх и вниз по эпидуральному пространству и в боковые отделы позвоночного канала, погружая края имплантата под оставшиеся ткани желтой связки, после этого выполняют гемостаз раны и послойное ушивание.

Пояснение существенных отличительных признаков предлагаемого способа моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита

Резекция остистого отростка на выбранном уровне позвоночника, выпиливание позвоночной пластинки, включающей основание остистого отростка и позвоночную дугу с обеих сторон, и создание костного дефекта позволяет создавать достаточную зону для оперативного вмешательства без выраженной нестабильности в выбранном позвоночно-двигательном сегменте.

Резекция видимой части желтой связки и обнажение твердой мозговой оболочки, на которую укладывают имплантат, например «Реперен», размещая его вверх и вниз по эпидуральному пространству и в боковые отделы позвоночного канала, погружая края имплантата под оставшиеся ткани желтой связки, обеспечивает реконструкцию эпидурального пространства и предупреждение развития рубцово-спаечного эпидурита в послеоперационном периоде.

В ходе эксперимента было установлено, что на 15 сутки отсутствуют гистологические признаки развития послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита между твердой мозговой оболочкой спинного мозга и окружающими тканями на уровне оперативного вмешательства. Гистологические признаки послеоперационных рубцово-спаечных процессов у экспериментального животного над имплантатом «Реперен» подтвердили проходимость эпидурального пространства и отсутствие спаечных процессов над твердой мозговой оболочкой и корешками спинного мозга. Длительность сохранения модели профилактики - 30 суток и более.

Проведенные патентные исследования по подклассу G09B 23/28 и анализ научно-медицинской информации, отражающей существующий уровень способов моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита, не выявили идентичных технологий. Таким образом, предлагаемый способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита является новым.

Взаимосвязь и взаимодействие существенных приемов предлагаемого способа получения экспериментальной модели профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита обеспечивают достижение нового результата в решении поставленной задачи, а именно получить модель профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита у млекопитающих, наиболее приближенную к способу профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита у человека.

Техническим результатом предлагаемого способа является отсутствие послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита в полости позвоночного канала при выполнении ламинэктомии на выбранном уровне позвоночника.

Положительным достижением предлагаемого способа является:

- эффективность способа профилактики, доказанная к 15-м суткам экспериментального моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита;

- воспроизводимость модели профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита составляет 100%;

- отсутствие рубцово-спаечных процессов в полости позвоночного канала в зоне дефекта, благодаря отграничению имплантатом «Реперен» ТМО и корешков спинного мозга от окружающих тканей, сохранению данной модели до 30 суток;

- стандартизация технологии моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита была достигнута за счет использования разработанной методики укладки имплантата «Реперен» и других оперативных приемов способа;

- неврологические и тазовые нарушения отсутствовали, благодаря оптимально выбранному уровню оперативного вмешательства и исключения взаимодействия рубцовой ткани с нейрососудистыми структурами позвоночного канала, за счет отграничения имплантатом «Реперен».

Таким образом, предлагаемый способ моделирования имеет изобретательский уровень.

Предлагаемый способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита может широко применяться в экспериментальной медицине для изучения механизмов профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита и разработки новых способов лечения и профилактики этого заболевания у человека. Возможно его неоднократное воспроизведение в экспериментальной лаборатории и внедрение данного способа профилактики для человека.

Сущность предлагаемого способа моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита поясняется чертежами, на которых:

Фиг.1 - рентгеновский снимок экспериментального животного (крысы линии Вистар), 15 сутки после операции, на уровне позвоночника - L6-S1;

Фиг.1а - детальное изображение пояснично-крестцового отдела позвоночника в области оперативного вмешательства, увеличение сегмента L6-S1;

Фиг.2 - снимок магнитно-спиральной компьютерной томографии (МСКТ) экспериментального животного (крысы), 15 сутки после операции, на уровне L6-S1;

Фиг.3 - гистологический препарат, срез на уровне позвоночника L6-S1 экспериментального животного (крысы), контрольная группа, 15 сутки после операции (окраска гемотоксилин-эозин). На препарате: нервные волокна конского хвоста спаяны с твердой мозговой оболочкой; мышечное волокно медиального тракта параспинальных мышц заполняет просвет позвоночного канала;

Фиг.4 - гистологический препарат, срез на уровне позвоночника L6-S1 экспериментального животного (крысы), опытная группа, 15 сутки после операции (окраска гемотоксилин-эозин). На препарате отмечается наличие имплантата «Реперен», который отграничивает рубцовую ткань от твердой мозговой оболочки. Также отмечается наличие нервных волокон конского хвоста и кровеносный сосуд;

Фиг.5 - таблица 1, раскрывающая сравнительные показатели неврологических тестов контрольной группы и опытных групп №1 и №2.

Пояснение позиций, указанных в приложении к описанию заявки:

1. Просвет дурального мешка, сформированный твердой мозговой оболочкой.

2. Фрагменты желтой связки.

3. Созревающая грануляционная ткань.

4. Нервные волокна конского хвоста.

5. Мышечное волокно медиального тракта параспинальных мышц.

6. Эпидуральные зоны некроза.

7. Кровеносный сосуд.

8. Имплантат «Реперен».

Предлагаемый способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита осуществляют следующим образом.

Моделирование послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита проводят на крысах самцах породы Вистар, 3-месячного возраста с массой тела 250-300 г.

Оперативные вмешательства проводят в стерильных условиях под общим обезболиванием.

Этапы операции

В асептических условиях, под общей анестезией путем внутримышечной инъекции (атропин 0,1% 50 мг/кг, дроперидол 1,5 мг/кг, кетамин 35 мг/кг массы тела) подопытное животное (крысу) фиксируют на столике Сеченова в положении «лежа на животе». Операцию проводят при использовании операционной лупы с 3-кратным увеличением.

Кожу на уровне поясничного отдела позвоночника экспериментального животного выбривают и дезинфицируют 70% спиртом. Выполняют срединный разрез кожи над остистыми отростками от L5 до S1 позвоночника, затем вскрывают спинную фасцию и производят двухстороннее рассечение параспинальных мышц, раздвигают их ранорасширителем, обнажая остистые отростки на выбранном уровне позвоночника L5-L6-S1, которые резецируют. С помощью распатора зачищают позвоночную дугу L6 с обеих сторон, используя низкооборотистую дрель, оснащенную алмазным буром (1 мм в диаметре), производят выпиливание позвоночной пластинки, образуя костный дефект размером 5×5 мм. После резекции желтой связки обнажают твердую мозговую оболочку спинного мозга, площадь дефекта составляет 5×5 мм. На обнаженную поверхность твердой мозговой оболочки под оставшиеся фрагменты желтой связки укладывают имплантат, например, «Реперен», так чтобы его края уходили вверх и вниз по эпидуральному пространству на 2 мм и в боковые отделы позвоночного канала на 2 мм. Производят гемостаз раны и послойно ушивают (фасцию и подкожно-жировую клетчатку - кетгут 3.0, кожу - пролен 3.0).

Экспериментальное исследование выполнено в научном отделе экспериментальной хирургии с виварием НЦРВХ СО РАМН, при свободном доступе к пище и воде на рационе питания, соответствующем нормативам ГОСТа. При выполнении исследования выполнялись все биоэтические нормы работы с экспериментальными животными согласно приказа Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. N 755, а также «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденными Приказом МЗ СССР №742 от 13.11.1984 г.

Экспериментальное животное выводят из опыта на 15 и 30 сутки путем эвтаназии парами эфира. Вычленяют органокомплекс и производят анатомическую препаровку позвоночника, выделяя зону дефекта с окружающими тканями.

На 15 сутки отмечены достоверные гистологические признаки развития послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита в опытной группе №1, а именно: непроходимость эпидурального пространства, новообразованная соединительная ткань, контактирующая с твердой мозговой оболочкой.

В опытной группе №2 отмечались следующие гистологические признаки, такие как новообразованная соединительная ткань над имплантом «Реперен», свободное эпидуральное пространство, отсутствие сращений новообразованной соединительной ткани с нервно-сосудистыми структурами дурального мешка, явления рубцово-спаечного эпидурита отсутствуют.

Для оценки достигнутого результата проведены дополнительные исследования: неврологические тесты, рентгенологическое обследование, МСКТ и морфологическое обследование.

На 1, 15 и 30 сутки животным проводят неврологическое обследование.

Рентгенографию, МСКТ экспериментальным животным (крысы) во всех группах проводили на 15 сутки после операции.

Сущность предлагаемого способа моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита поясняется конкретным примером.

Пример 1

Экспериментальное животное весом 260 грамм, 3-месячного возраста (срок наблюдения 15 суток). В асептических условиях, под общей анестезией путем внутримышечной инъекции (атропин 0,1% 50 мг/кг, дроперидол 1,5 мг/кг, кетамин 35 мг/кг массы тела) подопытное животное (крысу) фиксируют на столике Сеченова в положении «лежа на животе». Операцию проводят при использовании операционной лупы с 3-кратным увеличением.

Кожу на уровне поясничного отдела позвоночника экспериментального животного выбривают и дезинфицируют 70% спиртом. Выполняют срединный разрез кожи над остистыми отростками от L5 до S1 позвоночника, затем вскрывают спинную фасцию и производят двухстороннее рассечение параспинальных мышц, раздвигают их ранорасширителем, обнажая остистые отростки L5-L6-S1, которые резецируют. С помощью распатора зачищают позвоночную дугу L6 с обеих сторон, используя низкооборотистую дрель, оснащенную алмазным буром (1 мм в диаметре), производят выпиливание позвоночной пластинки, образуя костный дефект размером 3×3 мм. После резекции желтой связки обнажают твердую мозговую оболочку спинного мозга, площадь дефекта составляет 3×3 мм. Производят гемостаз раны и послойно ушивают (фасцию и подкожно-жировую клетчатку - кетгут 3.0, кожу - пролен 3.0). Кожа обработана раствором бриллиантового зеленого.

После выполнения оперативного вмешательства за экспериментальным животным проводились наблюдение и необходимые исследования для оценки стадии развития послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита в течение 15 суток, затем экспериментальному животному (крысе) проводили эвтаназию парами эфира. Вычленяли органокомплекс и производили анатомическую препаровку позвоночника, выделяя зону дефекта с окружающими тканями. После морфологической подготовки препарата производили срезы на уровне позвоночника L6. На гистологических срезах видна полость позвоночного канала, заполненная новообразованной соединительной тканью, деформированный дуральный мешок, спаенный с новообразованной соединительной тканью, нервные волокна конского хвоста в полости дурального мешка, фрагменты перестраивающейся желтой связки, сосуды, непроходимое эпидуральное пространство, есть все признаки формирования рубцово-спаечного эпидурита.

Пример 2

В асептических условиях, под общей анестезией путем внутримышечной инъекции (атропин 0,1% 50 мг/кг, дроперидол 1,5 мг/кг, кетамин 35 мг/кг массы тела) подопытное животное (крысу) фиксируют на столике Сеченова в положении «лежа на животе». Операцию проводят при использовании операционной лупы с 3-кратным увеличением.

Кожу на уровне поясничного отдела позвоночника экспериментального животного выбривают и дезинфицируют 70% спиртом. Выполняют срединный разрез кожи над остистыми отростками от L4 до L6 позвоночника, затем вскрывают спинную фасцию и производят двухстороннее рассечение параспинальных мышц, раздвигают их ранорасширителем, обнажая остистые отростки L4- L5- L6, которые резецируют. С помощью распатора зачищают позвоночную дугу L6 с обеих сторон, используя низкооборотистую дрель, оснащенную алмазным буром (1 мм в диаметре), производят выпиливание позвоночной пластинки, образуя костный дефект размером 5×5 мм. После резекции желтой связки обнажают твердую мозговую оболочку спинного мозга, площадь дефекта составляет 5×5 мм. На обнаженную поверхность твердой мозговой оболочки под оставшиеся фрагменты желтой связки укладывают имплантат «Реперен» так, чтобы его края уходили вверх и вниз по эпидуральному пространству на 2 мм и в боковые отделы позвоночного канала на 2 мм. Производят гемостаз раны и послойно ушивают (фасцию и подкожно-жировую клетчатку - кетгут 3.0, кожу - пролен 3.0).

Вес крысы 270 г, возраст 3 месяца, срок эксперимента 15 суток. Животное содержали в условиях стандартного вивария на свободном доступе к пище и воде.

После 15 суток эксперимента животному (крысе) проводили эвтаназию парами эфира, после чего вычленяли поясничный отдел позвоночника и выполняли анатомическую препаровку и делали срезы на уровне позвоночника L6. На морфологических срезах видна полость позвоночного канала, просвет дурального мешка с нервными волокнами конского хвоста, фрагменты желтой связки, сосуды, мышечные волокна медиального тракта параспинальных мышц и область дефекта, дуральный мешок отграничен имплантатом «Реперен» от окружающей фиброзной соединительной ткани. Благодаря реконструкции эпидурального пространства сохраняется свободное эпидуральное пространство и нет спаечных сращений новообразованной соединительной ткани с нервно-сосудистыми структурами дурального мешка.

Для подтверждения достигнутого результата проведены дополнительные исследования нескольких групп экспериментальных животных. Всего в эксперименте участвовало 30 крыс-самцов породы Вистар, весом 250-300 г. Экспериментальные животные были поделены на три группы:

1) контрольная группа - 6 животных;

2) опытная группа №1 - 12 животных;

3) опытная группа №2 - 12 животных.

В опытных группах было запланировано два срока выведения экспериментальных животных из опыта - 15 и 30 сутки, в каждом периоде по 6 животных. Контрольная группа состояла из животных, которых включили с целью оценки неврологического состояния животных в норме. В опытной группе №1 воспроизводили модель ламинэктомии, а в опытной группе №2 осуществляли моделирование профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита по предложенному способу.

В результате проведенного эксперимента было установлено по результатам морфологических исследований следующее.

Выведение животных из опыта производили на 15 и 30 сутки путем декапитации под эфирным наркозом, выделяли позвоночный столб с окружающими параспинальными мышцами блоком от L1 до S1. Морфологический анализ включал визуализацию костных структур позвоночника, область, прилегающую к позвоночнику, твердую мозговую оболочку, расположение имплантата «Реперен», эпидуральное пространство и нервные корешки конского хвоста. Готовые гистологические образцы были визуализированы с использованием метода цифровой презентации микроскопических образцов. Виртуальные образцы были просмотрены с помощью программного обеспечения Windows Hp и Adobe Photoshop 7,0.

При изучении гистологических срезов на 15 сутки животных опытной группы №1 отмечено: наличие в просвете позвоночного канала свободно лежащих нервных волокон конского хвоста и правильная форма дурального мешка. Дефект позвоночного канала заполнен формирующейся соединительной тканью, по бокам ограничен фрагментами желтой связки. Имеются кровеносные сосуды и костные остатки позвоночной дуги (см. фиг.3). Это подтверждает наличие воспалительного процесса в полости позвоночного канала и развитие рубцово-спаечного эпидурита.

На 30 сутки в опытной группе №1 в просвете позвоночного канала четко визуализируются спаянные нервные волокна конского хвоста с твердой мозговой оболочкой. Отмечается деформация дурального мешка с грубыми спаечными процессами, эпидуральное пространство облитерировано. Дефект позвоночного канала заполнен большим количеством новообразованной соединительной ткани, который по бокам ограничен фрагментами желтой связки. Имеются кровеносные сосуды и костные остатки позвоночной дуги (см. фиг.4), что указывает на бурное развитие и сохранение явлений послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита.

Проверку неврологического состояния животных осуществляли с помощью метода «Открытое поле» (3), теста «на отдергивание лапы» (4) и адгезивного теста (5) на 1, 15 и 30 сутки после оперативного вмешательства (см. фиг.5, таблица 1).

Поведенческие реакции оценивали по методу «Открытое поле». Установка «Открытое поле» была изготовлена из белого пластика и представляла собой квадратную камеру шириной и длиной 1,0 м с высотой стенок 0,4 м. Дно камеры было расчерчено на 25 квадратов; в точках пересечения линий разметки были сделаны отверстия (норки) диаметром 3,5 см (9 норок). Тестирование животных по методу «Открытое поле» проводят в светлую фазу суточного цикла (с 10.00 до 12.00 часов), при освещении естественным светом, каждое животное изучалось в течение 5 минут.

Оценивали двигательную активность по следующим паттернам: локомоция, движение на месте, неподвижность (сидение).

Активность экспериментальных животных оценивали по реакции на «норку», стойку с упором и вертикальную стойку (вертикальная стойка на задних лапах).

Показатели тревожности оценивали по грумингу (все разновидности данной реакции, заключающиеся, главным образом, в вылизывании и почесывании), фризингу (замиранию).

Функцию тазовых органов оценивали по количеству актов дефекации и мочеиспускания за заданный промежуток времени.

Адгезивный тест. Для определения координационных односторонних неврологических повреждений использовался адгезивный тест. В данном тесте использовалась липкая лента, изготовленная из липкой бумаги (Байкал-Ролл, Россия). Липкую ленту размером 3,0×1,0 см оборачивали вокруг задней лапы в области голеностопного сустава, после чего животное помещали в клетку, и за ним проводили наблюдение в течение 30 секунд. Лента должна быть хорошо фиксирована, чтобы животное не могло самостоятельно снять ее до конца проведения опыта. Оценивалось время, которое крыса тратила на попытки удаления ленты, что отражает не только сохранность моторной функции, но и чувствительность.

С помощью теста на «отдергивание лапы» оценивали чувствительность задних конечностей крысы, поочередно начиная с правой нижней конечности. Животных фиксировали на столике Сеченова в положении «лежа на животе», затем расслабляли фиксацию правой нижней конечности, после чего производили укол в подушечку лапы стерильной инъекционной иглой от инсулинового шприца. Оценивали по трехбалльной системе: 0 баллов - нет реакции, 1 балл - отдергивает лапу, 2 балла - отдергивает лапу и поворачивает голову, пытаясь укусить за иглу (см. таблицу 1).

В первые, 15 и 30 сутки после операции при оценке неврологического состояния в опытной группе №2 с моделированием профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита показано, что у (92%) животных наблюдались лучшие показатели неврологического состояния в отличие от группы №1. Выраженных неврологических нарушений, проявляющихся в виде манежных движений по кругу, парезов и параличей конечностей не отмечалось (см. таблицу 1).

Интроскопические методы исследования

Все интроскопические исследования проводили на 15 сутки под внутривенным наркозом (атропин 0,1% - 50 мг/кг, дроперидол - 1,5 мг/кг, кетамин - 35 мг/кг массы тела). Рентгенографию проводили на рентгеновском диагностическом комплексе DIXION REDIKOM (Россия), снимки в боковой и прямой проекции. Магнитную томографию проводили на аппарате Siemens (Германия).

Рентгенологические исследования показали достоверно область оперативного вмешательства и признаки нестабильности позвоночно-двигательного сегмента на уровне L6-S1, что может указывать на изменение формы позвоночного канала в месте операции и служить одной из вероятных причин формирования послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита (см. фиг.1 и 1а).

МСКТ исследование показало область оперативного вмешательства, площадь дефекта и размеры позвоночного канала (см. фиг.2).

Таким образом, предлагаемый способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита позволяет получить в эксперименте путем реконструкции имплантатом «Реперен» эпидуральное пространство, благодаря чему рубцово-спаечные процессы не вовлекают в процесс твердую мозговую оболочку, а эпидуральное пространство остается проходимым на 15 и 30 сутки. Это может свидетельствовать о возможности использования этой модели профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита у человека.

Источники информации

1. G. Brzezickil, R. Jankowski «Evaluation of epidural scar formation in lumbar spine after TachoComb(application - an experimental study»; Neurologia i Neurochirurgia Polska 2008; 42, 3:223-230.

2. Tatsui CE, Martinez G, Li X, Pattany P, Levi AD. «Evaluation of DuraGen in preventing peridural fibrosis in rabbits». J Neurosurg Spine. 2006 Jan; 4(1):51-9.

3. Hall C.S. Emotional behavior in the rat. III. The relationship between emotionality and ambulatory activity // J. comp. physiol. Psychol. - 1936, V.22. - P.345-352.

4. Сердюк C.E., Гмиро B.E. Стимуляция вагусных афферентов желудка адреналином потенцирует кардиопульмональный рефлекс и анальгезию у наркотизированных крыс // Мед. акад. журн. - 2009 г. - Т9 - №3.

5. 3ухурова М.А. Эффективность защитного действия L-теанина и гипоксической гипоксии при ишемии головного мозга крыс: автореф. дис.… канд. мед. наук: 14.03.03. / М.А. Зухурова; кафедра патофизиологии ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. Акад. И.П. Павлова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» - Санкт-Петербург, 2011. - 23 с.

Способ моделирования профилактики послеоперационного рубцово-спаечного эпидурита, включающий доступ к остистым отросткам позвоночника экспериментального животного - крысы линии Вистар, при этом на выбранном уровне позвоночно-двигательного сегмента производят двухстороннее раздвигание параспинальных мышц, выполнение ламинэктомии, отличающийся тем, что резецируют остистый отросток, производят выпиливание позвоночной пластинки, включающей основание остистого отростка и позвоночную дугу с обеих сторон, создавая костный дефект, резецируют видимую часть желтой связки и обнажают твердую мозговую оболочку, на которую укладывают имплантат «Реперен», размещая его вверх и вниз по эпидуральному пространству и в боковые отделы позвоночного канала, погружая края имплантата под оставшиеся ткани желтой связки, после этого выполняют гемостаз раны и послойное ушивание.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования хронического панкреатита. Способ включает создание гипертензии в билиопанкреатическом протоке.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в научной и клинической практике при разработке консервативных и оперативных методов лечения осевой близорукости.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования панкреатопатии, вызванной нестероидным противовоспалительным препаратом (НПВП-панкреатопатии).
Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и остеологии и представляет собой способ коррекции микроциркуляции в костной ткани при экспериментальном остеопорозе и переломах на его фоне, включающий введение лабораторному животному комбинации фармакологических средств после моделирования остеопороза с помощью билатеральной овариэктомии и остеопоротических переломов бедренной кости у самок крыс линии Wistar, отличающийся тем, что в качестве таких средств используют комбинацию рекомбинантного эритропоэтина в субэритростимулирующей дозе 50 МЕ/кг, который вводят лабораторному животному один раз в неделю подкожно однократно в сутки, и розувастатина в дозе 0,86 мг/кг, который ежедневно внутрижелудочно вводят лабораторному животному однократно в сутки, на фоне моделирования остеопороза в течение восьми недель, а при переломах на фоне моделирования остеопороза - в течение двенадцати недель.

Изобретение относится к области медицины, а именно к нейрохирургии, сосудистой хирургии, эндоваскулярной хирургии, микрохирургии, и может быть использовано при проведении обучающих курсов и тренингов.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и офтальмологии, и может быть использовано для профилактики ишемических состояний сетчатки.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и офтальмологии, и может быть использовано для профилактики ишемических состояний сетчатки.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к исследованиям в области ортопедии, и касается моделирования дефект-псевдоартроза большеберцовой кости.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной морфологии, и касается изучения вопросов коррекции тестикулярной дисфункции, индуцированной адаптацией организма к низким температурам.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной морфологии, и касается изучения вопросов коррекции тестикулярной дисфункции, индуцированной адаптацией организма к низким температурам.

Изобретение относится к медицине, а именно к топографической анатомии, рентгенологии, колопроктологии и может быть использовано при рентгенологическом исследовании анатомии порто-кавальной системы прямой кишки человека. При проведении рентгенологического исследования венозного русла прямой кишки человека используют 76% раствора урографина. Осуществляют доступ к стволу нижней брыжеечной вены и подвздошным сосудистым пучкам с обеих сторон. Их катетеризируют и предварительно подготавливают путем промывания раствором 10% аммиака и воды дистиллированной. Для обнаружения нижней брыжеечной вены, перед ее препаровкой, используют метод визуализации системы воротной вены. В ее ствол вводят окрашенный в зеленый цвет водный раствор бриллиантового зеленого. Окончательным этапом является непосредственное рентгенконтрастное исследование при помощи стационарного рентгенаппарата 12П9 «Armobil-9». Выполняют 3 серии снимков. 1-ый контрольный - обзорная рентгенография в прямой проекции органов малого таза. 2-ой - обзорная рентгенография в прямой проекции органов малого таза с тугим наполнением заранее подготовленного русла воротной системы прямой кишки раствором рентгенконтрастного вещества урографин 76%. 3-ий - обзорная рентгенография в прямой проекции органов малого таза с тугим наполнением системы внутренних подвздошных вен с обеих сторон одновременно раствором рентгенконтрастного вещества урографин 76%. Способ обеспечивает оптимизацию рентгенологического исследования вен прямой кишки человека, хорошую визуализацию сосудистой системы, предоставляет сведения об особенностях органометрии сосудов, позволяет обнаружить порто-кавальные анастомозы за счет оптимальной подготовки сосудистой системы, использования в качестве контрастного вещества урографина 76% и разработанной схемы рентгенологического исследования. 3 ил., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается разработки вопросов коррекции острого повреждения легких в пульмонологии, неотложной терапии и реанимации. Способ заключается в том, что создают модель повреждения легких интратрахеальным введением крысам 0,03 мл ацетона. Через час после этого крысам вводят внутривенно однократно комбинированный раствор, содержащий 7,2% натрия хлорида и 6% гидроксиэтил-крахмала в дистиллированной воде, в объеме 4 мл/кг. Способ обеспечивает снижение летальности животных за счет уменьшения гипоксемии, площади инфильтративного поражения легких, предотвращения развития альвеолярного отека легочной ткани и степени ее геморрагического пропитывания. 2 ил., 2 табл.
Изобретение относится к экспериментальной медицине, патологической физиологии, гастроэнтерологии, хирургии. Способ моделирования острого панкреатита в эксперименте заключается в том, что лабораторному животному - нелинейной белой крысе - перорально в течение 21 дня вводят нестероидный противовоспалительный препарат Римадил Р в разовой дозе 40 мг/кг массы тела животного, один раз в день, за один час до кормления. Изобретение обеспечивает уменьшение инвазивности и травматичности способа моделирования острого панкреатита в эксперименте. 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, предназначено для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных и связанной с этим нарушением микроциркуляции в плаценте. Способ включает воспроизведение модели гестоза в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы - N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг. На фоне этого ежедневно в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности вводят внутрижелудочно через зонд никорандил в дозе 10 мг/кг 2 раза в сутки. Заявленный способ позволяет эффективно корректировать эндотелиальную дисфункцию, обладает более длительным противоишемическим действием, удобен и безопасен. 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к анестезиологии. Используют экспериментальную модель дурального мешка, включающую прозрачную трубку ПВХ диаметром 1,5 см и длиной 40 см, алюминиевую втулку, трупную твердую мозговую оболочку (ТМО), которую герметично фиксируют пластиковым хомутом к концу трубки ПВХ со стороны вставленной алюминиевой втулки, и стойку для капельницы. Трубку, наполненную физиологическим раствором до уровня 25 см, фиксируют в вертикальном положении с помощью лейкопластыря и деревянной направляющей. Осуществляют прокол твердой мозговой оболочки иглой снизу вверх, при этом теряемый после прокола физиологический раствор непрерывно доливают в верхний конец трубки для поддержания постоянного уровня 25 см. Степень повреждения ТМО определяют по количеству вытекающего из прокола физиологического раствора в единицу времени. Способ позволяет повысить достоверность оценки повреждения ТМО, что достигается за счет снижения потерь вытекающего раствора в процессе эксперимента. 3 ил., 1 табл., 1 пр.

Группа изобретений относится к медицине и вирусологии и касается разработки способов создания биологической модели цитомегаловирусной инфекции человека. Один из вариантов способа включает прививку (вживление) иммунодефицитным мышам nude имплантата, представляющего собой биодеградируемый матрикс. В качестве последнего используют коллагеновую губку, или матрикс на основе хитозана, или полилактидную матрицу. При этом матрикс включает пролиферирующие, высокочувствительные к вирусу, нормальные, жизнеспособные клетки человека, предварительно зараженные цитомегаловирусом человека. Другой вариант способа включает вживление мышам того же имплантата. Однако инфицирование осуществляют путем введения цитомегаловируса человека в предварительно вживленный мышам имплантат. Способы обеспечивают создание модели инфекции, пригодные для изучения ее патогенеза в условиях макроорганизма, а также для исследования in vivo противовирусного действия агентов, обладающих анти-ЦМВ активностью. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 пр.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и биологии. Осуществляют окклюзию магистральных сосудов, кровоснабжающих головной мозг. При этом доступ к левой общей сонной артерии осуществляют через вентральную поверхность шеи, а доступ к плечеголовному стволу и левой подключичной артерии осуществляют через первое межреберье справа и слева - в обход плевральной полости. Способ позволяет снизить посттравматические осложнения животных, что достигается за счет хирургического доступа к артериям в обход плевральной полости. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для профилактики интраоперационных кровотечений на фоне введения гепарина до операции. При проведении эксперимента кроликам-самцам за один час до оперативного вмешательства осуществляют внутривенное введение раствора, содержащего фибрин-мономер в концентрации 11 мг/мл и мочевину в концентрации 150 мг/мл. При этом доза фибрин-мономера составляет 0,25 мг/кг. Способ обладает высокой эффективностью, так как не только снижает объем кровопотери, но и не вызывает тяжелые гемодинамические нарушения и аллергические реакции. 2 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, патофизиологии и может быть использовано при изучении атеросклеротического процесса. Для этого проводят моделирование атеросклероза путем кормления исследуемых животных атерогенным рационом. В качестве атерогенного рациона в течение 12 месяцев у крыс используют питьевую воду, свеклу, морковь, картофель и зерно пшеницы из Присурского субрегиона Чувашской республики, неблагополучного в отношении распространенности атеросклероза, ишемической болезни сердца, смертности от острого инфаркта миокарда. Способ обеспечивает создание модели атеросклероза, максимально приближенной к естественным условиям среды проживания людей, что позволяет выявлять специфические механизмы патогенеза и разрабатывать эффективные мероприятия первичной профилактики заболевания. 4 табл., 8 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и гастроэнтерологии, и может быть использовано для энтеро- и панкреатопротективного воздействия нестероидными противовоспалительными препаратами при моделировании язвы желудка и/или панкреатита в эксперименте. Для этого перед моделированием проводят курсы введения кетанова, целебрекса или кетонала. Препараты вводят парентерально. В течение первых трех дней курса в дозе 2,5-3,1 мг/кг. Далее в течение трех дней препараты вводят в дозе 1,5-2,4 мг/кг. Затем в течение четырех дней в дозе 0,5-1,4 мг/кг с последующим повторением курса через 1,5-2 мес. При этом первые три дня повторного курса доза препарата составляет 0,7-2,0 мг/кг. Последующие три дня доза составляет 2,1-2,6 мг/кг. Заключительные четыре дня доза препарата составляет 2,7-3,1 мг/кг. Способ обеспечивает эффективное энтеро- и панкреатопротективное воздействие нестероидными противовоспалительными препаратами при моделировании язвы желудка и/или панкреатита в эксперименте при снижении токсичности воздействия. 3 пр.
Наверх