Способ ранней диагностики тяжелой формы герпесвирусной инфекции у новорожденных детей


 


Владельцы патента RU 2542467:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии, и может быть использовано для ранней диагностики тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей. Поставленная задача решается тем, что в крови новорожденных от матерей с персистирующей герпесвирусной инфекцией на 7-10 сутки определяют уровень CD16+CD25+ и IL-6. При значениях CD16+CD25+ 3,5% и ниже, а IL-6 32,6 пг/мл и выше диагностируют развитие тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей. Способ позволяет сократить время исследования и повысить точность индивидуального прогноза. Применение способа дает возможность ранней диагностики тяжелой формы внутриутробной инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей для своевременного назначения патогенетической терапии. 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к неонатологии, и может быть использовано для ранней диагностики тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа (ВПГ1,2) у новорожденных детей от матерей с персистирующей герпесвирусной инфекцией.

Инфекция, вызванная ВПГ 1,2 типа, является важнейшей медико-социальной проблемой современной перинатологии, что обусловлено тяжестью течения заболевания, высокой частотой поражения ЦНС и последующей инвалидизацией детей (Иванова В.В., Иванова М.В., Левина А.С. и соавт. Современные принципы диагностики и лечения перинатальных герпес-вирусных инфекций // Рос. вестник перинатологии и педиатрии. - 2008. - №1. - С.10-18; Абрамова И.В. Клинико-лабораторные критерии диагностики внутриутробных инфекций у новорожденных: автореф. дисс… канд. мед. наук. - Саратов, 2010. - 23 с.; Dye D.W., Simmons G.T. Fatal herpes virus type I infection in a newborn // Am. J. Forensic. Med. Pathol. - 2010. - Vol.31, №1. - P.89-91). При этом актуальность проблемы обусловлена и тем, что у детей, перенесших генерализованные формы врожденной герпесвирусной инфекции, очень часто развиваются серьезные нарушения здоровья, что приводит к снижению качества жизни в целом (Долгих Т.И., Дроздова С.Г., Кадцына Т.В., и соавт. Клинико-иммунологическая характеристика герпесвирусных инфекций у детей первого года жизни // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - Т.23, №3. - С.19-22.; Gleason Ch.A., Devaskar Sh.U. Avery's Diseases of the Newborn // Ninth Edition Chapter. - 2012. - N36. - P.445-467).

Учитывая, что реализация инфекционного процесса определяется патогенностью возбудителей инфекции и эффективностью защитных сил организма, особая роль отводится состоянию иммунной системы (Ожегов A.M., Тарасова Т.Ю., Петрова И.Н. Клинико-иммунологические особенности внутриклеточных внутриутробных инфекций у новорожденных с задержкой внутриутробного развития // Детская больница. - 2011. - №1(43). - С.31-36). Все вышеизложенное определяет необходимость разработки прогностических критериев тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей, что позволит снизить тяжесть течения врожденной инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа, у детей на основании ранней диагностики и своевременного назначения адекватной патогенетической терапии.

На сегодняшний день ранней диагностике и прогнозированию манифестации внутриутробной инфекции посвящено значительное количество работ.

Известен способ прогнозирования внутриутробной инфекции путем определения в пуповинной крови новорожденных β2-микроглобулина (Павлютенкова Ю.А., Пустотина О.А., Екимова Е.В. с соавт. Прогностическое значение определения концентрации β2-микроглобулина в сыворотке крови беременных группы высокого инфекционного риска // «Мать и дитя»: материалы VIII всероссийского форума. - Москва. - 2006. - С.191-192). Недостатком этого способа является невозможность осуществить прогнозирование развития или же отсутствия у новорожденного конкретной нозологической патологии, т.е. отсутствует специфичность способа.

Известен способ диагностики локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных путем исследования показателей содержания в сыворотке периферической крови интерлейкина 6 (IL-6) методом иммуноферментного анализа и иммуноглобулина М (Ig M), методом радиальной иммунодиффузии при инфекционно-воспалительной патологии выявлено снижение показателей IL-6 и повышение уровня Ig М (Пинаева А.Р. Состояние цитокиновой системы и клеточного иммунитета при инфекционно-воспалительных заболеваниях у новорожденных детей: Автореф. дис.… канд. мед. наук. - М., 2002. - 23 с.). Недостатками способа является то, что исследование IL-6 и Ig M выполняется для диагностики уже развившихся неонатальных инфекций, так как Ig М вырабатывается в результате первичного иммунного ответа, а IL-6 является регулятором острофазного воспалительного ответа.

Известен способ прогнозирования локальных форм инфекционно-воспалительной патологии у доношенных новорожденных путем определения содержания CD4+CD95+ лимфоцитов в периферической крови новорожденного на 5-7 день жизни и при его значении, равном 4,5% и более, прогнозируют возникновение инфекционно-воспалительных заболеваний в неонатальном периоде с точностью 90% (Патент №2225008. Способ прогнозирования неонатальной инфекционно-воспалительной патологии / Беликова М.Э., Чаша Т.В., Сотникова Н.Ю., Кулагина Т.Г., Троицкая Е.А., Куликова Н.Ю. // Изобретения. Полезные модели. - 2004. - №6, ч.3. - С.813). К недостаткам способа можно отнести то, что он не может быть использован для прогнозирования тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей.

Известен способ диагностики генерализованной герпетической инфекции у детей первых месяцев жизни путем выявления повышения уровней IgM, IgA в сыворотке крови (Н.А. Яценко. Клинико-иммунологические аспекты врожденной герпетической инфекции у детей первых месяцев жизни, 2000, дисс. канд. мед. наук). К недостаткам способа можно отнести то, что диагностическая ценность лабораторных методов, основанных на оценке гуморального иммунитета (специфические антитела IgG и IgM класса) является низкой, в связи с особенностями антителогенеза в период ранней неонатальной адаптации. Отсутствие специфических антител нередко не означает отсутствия инфекционного процесса, т.к. исследование могло проводиться в фазе формирования иммунного ответа.

Известен способ прогнозирования генерализованной формы герпес-вирусной инфекции у детей первых месяцев жизни, инфицированных герпес-вирусами, путем исследования крови, отличающийся тем, что в сыворотке периферической крови определяют уровень субпопуляции В-лимфоцитов с рецепторами СД20+СД40 и при выявлении повышения субпопуляции В-лимфоцитов с рецепторами СД20+СД40 выше 14,8% прогнозируют развитие генерализованной формы герпес-вирусной инфекции у детей первых месяцев жизни (Патент РФ№2341797, 20.12.2008). Недостатком способа является то, что он не позволяет проводить дифференциальный диагноз между внутриутробной инфекцией и инфицированием.

Известен способ диагностики внутриутробных инфекций путем исследования уровня ИФН-γ в сыворотке периферической крови новорожденных. (Рахманкулова З.Ж. Внутриутробные инфекции у новорожденных: клинико-иммунологические механизмы, критерии прогноза, лечение. Автореф. дис.… докт. мед. наук. - Ташкент, 2012. - 44 с.). Недостатком является то, что

1) способ предполагается использовать у новорожденных в позднем неонатальном периоде и он не используется у детей в раннем неонатальном периоде.

2) Отсутствуют данные о точности, чувствительности и специфичности способа.

3) Исследование ИФН-γ выполняется для диагностики уже развившихся неонатальных инфекций.

4) Невозможно осуществить раннюю диагностику развития у новорожденного конкретной нозологической патологии (тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа).

Данный способ выбран нами за прототип.

Недостатки прототипа устраняются в заявляемом способе.

Задачей изобретения является разработка высокочувствительного способа ранней диагностики тяжелой формы герпесвирусной инфекции у новорожденных детей.

Поставленная задача решается тем, что в крови новорожденных от матерей с персистирующей герпесвирусной инфекцией на 7-10 сутки определяют уровень CD16+CD25+, IL-6 и при значениях CD16+CD25+<3,5%, IL-6>32,6 пг/мл прогнозируют тяжелую форму внутриутробной инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей.

Технический результат - способ позволяет сократить время исследования и повысить точность индивидуального прогноза, упрощение способа, информативность.

Нами доказано, что данный способ обладает высокой точностью, чувствительностью и специфичностью.

В доступной литературе не выявлено использование определения уровня CD16+CD25+ и IL-6 в качестве скринингового маркера для ранней диагностики тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей.

NK-клетки являются одним из важнейших компонентов клеточного врожденного иммунитета, которые играют важную роль в устранении инфицированных вирусом клеток на ранней стадии инфекции, выполняют цитотоксические и цитокин-продуцирующие функции. Основным продуцентом активированных NK-клеток является интерферон-γ, который играет важную роль в развитии иммунного ответа Th1 типа и блокирует развитие Th2-типа иммунного ответа, подавляя синтез IL-4 и пролиферацию клеток Th2-фенотипа. Дефицит натуральных киллеров свидетельствует о низкой резистентности иммунной системы новорожденного к вирусной инфекции (Wilkinson G.W., Tomasec P., Stanton R.J., et al. Modulation of natural killer cells by human cytomegalovirus // J. Clin. Virol. - 2008. - N41. - P.206-212).

Важнейшая роль в развитии системного воспаления принадлежит медиаторам воспаления. Способность клеток моноцитарно-макрофагального ряда высвобождать провоспалительные молекулы является одним из патогенетических факторов в развитии локального и системного воспалительного ответа. IL-6, продуцируясь активированными макрофагами, Т-лимфоцитами, участвует в качестве кофактора при дифференцировке В-лимфоцитов, их созревании и преобразовании в плазматические клетки, секретирующие иммуноглобулины. Повышение уровня IL-6 может приводить к сдвигу дифференцировки Т-хелперов в направлении Th2, не обеспечивающих формирование эффективного противовирусного иммунного ответа (Diehl S., Rincón M. The two faces of IL-6 on Th1/Th2 differentiation // Mol Immunol. - 2002. - N39(9). - P.531-536).

В этой связи все вышеуказанное явилось основанием к исследованию уровня CD16+CD25+ и IL-6 в крови новорожденных для ранней диагностики тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа. Наши исследования позволили установить очень важные количественные величины CD16+CD25+ и IL-6, которые являются определяющими для отбора новорожденных в группу риска, а именно то, что при значениях CD16+CD25+ 3,5% и ниже и IL-6 32,6 пг/мл и выше, прогнозируют тяжелую форму инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей. CD16+CD25+ - это активированные NK-клетки, измерение их количества проводится методом проточной цитометрии в %. IL-6 определяется методом ИФА и измеряется в пг/мл.

Способ осуществляют следующим образом.

У новорожденных от матерей с персистирующей герпевирусной инфекцией на 7-10 сутки исследуют периферическую кровь, собранную в количестве 0,5 мл в пробирки с гепарином натрия. К 20 мкл моноклональных антител CD16 (FITC) и 20 мкл CD25 (PE), (Caltag, CIUA), добавляют 100 мкл гепаринизированной крови, перемешивают на шейкере (1000 об/мин) в течение 3 секунд и инкубируют при комнатной температуре 20 минут. Затем добавляют 500 мкл лизирующего раствора и инкубируют до полного лизиса эритроцитов. Далее дважды отмывают в 1 мл РВС (фосфатно-солевой буфер) при 1500 об/мин по 3 минуты. К осадку добавляют 1 мл РВС и ресуспендируют. Учет реакции проводят на проточном цитофлюориметре, ресуспендируют. Учет реакции проводят на проточном цитофлюориметре "Beckman Coulter XL" (США). Концентрацию IL-6 в сыворотке крови новорожденных определяли с помощью набора реагентов «Протеиновый контур» (г. Санкт-Петербург).

При выявлении в сыворотке крови новорожденных CD16+CD25+ 3,5% и ниже и IL-6 32,6 пг/мл и выше прогнозируют тяжелую форму инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа, что позволяет неонатологу своевременно назначить адекватную терапию.

Работоспособность заявляемого способа подтверждается следующими клиническими примерами.

Пример 1

Ребенок, Н-в., родился 28.06.10 г. (история болезни №9323) от женщины 30 лет, страдающей герпесом губ, с отягощенным акушерским анамнезом (первая беременность - мед. аборт, вторая беременность - искусственные роды, третья беременность - антенатальная гибель плода). Беременность протекала на фоне фетоплацентарной недостаточности, внутиутробной гипоксии плода, гестоза, угрозы прерывания, хронического пиелонефрита. Роды 3, в сроке 39 недель. Ребенок родился в тяжелом состоянии, с массой 4000 г, длиной 52 см, оценкой по шкале Апгар 5-7 баллов. Кожные покровы иктеричные, чистые. С первых суток у ребенка отмечались, геморрагические проявления в форме множественных петехий в области лица и туловища, кровоточивость из мест инъекций, гематурия, прогрессирующее увеличение печени и селезенки, темное окрашивание мочи, анемия (уровень эритроцитов - 2,3×1012, гемоглобин - 90 г/л., билирубин 300 мкмоль/л).

На 7 сутки ребенок из роддома переведен в отделение патологии новорожденных, при поступлении в сыворотке крови проведено исследование количества CD16+CD25+ составило 3,5%, IL-6 составило 32,6 пг/мл, т.е. по нашим данным ребенок угрожаем по развитию тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса. У ребенка нарастала иктеричность кожных покровов, появилось отделяемое из глаз, явления омфалита, отмечалась одышка смешанного характера, симптомы дыхательной недостаточности, крепитирующие хрипы в легких, повысилась температура до субфебрильных цифр, ребенок плохо прибавлял в массе, отмечались симптомы интоксикации в виде вялости, адинамии, срыгиваний, плохого аппетита, имела место неврологическая симптоматика в виде снижения рефлексов новорожденного, тремора конечностей, запрокидывания головы, болезненного плача.

Во время нахождения в стационаре ребенку был проведен общий анализ крови, в котором определялся лейкоцитоз, нейтрофилез, моноцитоз, тромбоцитопения. В анализе мочи - положительная реакция на желчные пигменты. При проведении биохимического анализа крови отмечалась гипербилирубинемия за счет прямой и непрямой фракции, повышенный уровень трансаминаз. УЗИ печени выявило увеличение ее размеров и изменения паренхимы. УЗИ почек выявило плотный и несколько дилатированный комплекс почек.

На ЭКГ определялась гипертрофия миокарда правого желудочка. При эхокардиоскопии - вторичный дефект межпредсердной перегородки, дефект межжелудочковой перегородки, аномальная хорда в полости левого желудочка, диастолическая дисфункция левого желудочка. Регургитация на митральном клапане.

Проведена консультация окулиста. Диагноз: дакриоцистит обоих глаз.

В анализе крови на стерильность, посевах отделяемого глаз, пупочной раны, носа рост микрофлоры не определялся. В отделяемом из зева выделен стрептококк. При ПЦР диагностике мочи обнаружена ДНК ВПГ, при ИФА-диагностике выявлено нарастание титров IgG антитела к ВПГ в динамике заболевания в течение 12 дней (с 68 у.е. до 186 у.е.). При НСГ-исследовании отмечалось повышение эхогенности мозгового вещества и перивентрикулярной области. Ребенку был поставлен диагноз: генерализованная герпетическая инфекция, внутриутробный гепатит, двусторонняя пневмония, гипоксически-ишемически-дисметаболическое поражение ЦНС, синдром угнетения, постгипоксическая кардиопатия, вторичный дефект межпредсердной и дефект межжелудочковой перегородки, дакриоцистит обоих глаз. Назначена противовирусная, антибактериальная, дезинтоксикационная терапия, интерферонотерапия, иммунотропная терапия. Таким образом, прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 2

Ребенок К-в. родился 30.03.11 г. (история болезни №7520) от женщины 27 лет. Беременность первая. Беременность протекала на фоне фетоплацентарной недостаточности. Во время беременности у женщины отмечалась герпетическая инфекция, проявляющаяся высыпаниями на губах, gerpes labialis. Роды I, в 38 недель. Ребенок родился в удовлетворительном состоянии, с массой 2850 г, длиной 51 см, вызванной вирусом простого герпеса.

С третьих суток у ребенка отмечалась желтуха, неврологическая симптоматика в виде беспокойства, тремора конечностей, гипертонус мышц. Ребенок переведен в отделение патологии новорожденных на 7 сутки жизни. При поступлении в отделение патологии новорожденных в сыворотке крови проведено исследование количества CD16+CD25+ составило 3,0%, IL-6 составило 38,9 пг/мл, т.е. по нашим данным ребенок угрожаем по развитию тяжелой формы инфекции.

Отмечались респираторно-аффективные пароксизмы. Состояние тяжелое, кожа иктеричная с цианотичным оттенком, пониженного состояния питания. В легких ослабленное дыхание. Тоны сердца приглушены, систолический шум на верхушке. Стул неустойчивый, в кале примесь слизи, зелени.

Во время нахождения в стационаре ребенку был проведен общий анализ крови, в котором определялся лимфоцитоз, моноцитоз. УЗИ печени выявило увеличение ее размеров и изменения паренхимы печени, спазм сфинктеров желчного пузыря. На ЭКГ определялась тахикардия и неполная блокада правой ножки пучка Гиса.

В анализе крови на стерильность, посевах отделяемого глаз, пупочной раны, носа рост микрофлоры не определялся. При ПЦР диагностике крови обнаружена ДНК ВПГ, при ИФА-диагностике выявлено нарастание титров IgG антитела к ВПГ в динамике заболевания в течение 10 дней (с 62 у.е. до 150 у.е.). При НСГ-исследовании отмечалось расширение межполушарной щели, нерезкая внутричерепная гипертензия. Ребенку был поставлен диагноз: генерализованная герпетическая инфекция, гипоксически-ишемическое поражение ЦНС, гипертензионный синдром, синдром пирамидной недостаточности, спастический тетрапарез, конъюгационная желтуха, гипотрофия I степени, дисбактериоз кишечника.

Назначена противовирусная, антибактериальная, дезинтоксикационная терапия, интерферонотерапия, иммунотропная терапия.

Таким образом, прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3

Ребенок З-в. родился 15.04.10 г. (история родов №2270) у женщины 30 лет с отягощенным акушерским анамнезом (1 беременность - роды, 2 - мед. аборт), беременность которой протекала на фоне, кольпита, эрозии шейки матки. При ДНК-диагностике обнаружена ВПГ. Роды 2, в срок. Ребенок родился в удовлетворительном состоянии массой 3450, длиной 50 см, с оценкой по шкале Апгар 8-9 баллов. Кожные покровы бледно-розовые, чистые. В возрасте 7 суток, при поступлении в отделение патологии новорожденных в сыворотке крови проведено исследование количества CD16+CD25+ составило 3,8%, IL-6 составило 28,5 пг/мл, т.е. по нашим данным период новорожденности должен протекать благоприятно.

При обследовании ребенка в возрасте 1 месяца выявлено, что ребенок здоров и на первом месяце жизни ничем не болел.

Достоверность предлагаемого способа подтверждена клинико-лабораторными исследованиями. По заявляемому способу было обследовано 40 новорожденных. У 21 из них (1 группа) количество CD16+CD25+ было 3,5% и ниже, a IL-6 32,6 пг/мл и выше, что свидетельствовало о риске развития тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа и было подтверждено в процессе дальнейшего клинико-лабораторного наблюдения.

У 19 новорожденных (II группа) показатели CD16+CD25+ были выше чем 3,5%, а IL-6 - ниже 32,6 пг/мл, что предполагало благоприятное течение неонатального периода.

В первой группе процент развития тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа составил 85,7%, в сравнении с 5,3% во 2-й группе.

Результаты статистического анализа в среде пакета прикладных программ STATISTIKA 6 позволили разработать прогностическое правило формирования групп риска среди новорожденных детей с использованием метода логистической регрессии (Ребров О.Ю. "Статистический анализ медицинских данных", Москва. - Медиа сфера. - 2003). Полученное правило обеспечивает высокую точность - (88,0%), чувствительность - (85,7%) и специфичность (85,0%) метода.

Таким образом, по уровню CD16+CD25+ и IL-6 в крови новорожденных возможно проводить раннюю диагностику тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа в периоде новорожденности.

Предложенный нами способ достаточно прост, позволяет провести раннюю диагностику тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей, на основании этого назначать противовирусную и иммуномодулирующую терапию не всем новорожденным из группы риска, а дифференцирование.

Способ апробирован в родильном доме и отделении патологии новорожденных РНИИАП.

Преимущество заявляемого метода состоит в том, что на основании высокочувствительных современных лабораторных маркеров производится ранняя диагностика тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа у новорожденных детей с целью раннего назначения патогенетической терапии. В клинической практике это позволит снизить процент инвалидизации за счет своевременного формирования новорожденных группы риска и начала адекватных лечебных мероприятий. Проведенные исследования свидетельствуют о том, что заявляемый способ обладает быстротой исполнения с использованием стандартных тест-систем, может быть рекомендован для широкого клинического применения в практическом здравоохранении.

Способ ранней диагностики тяжелой формы герпесвирусной инфекции у новорожденных детей, путем исследования крови ребенка, отличающийся тем, что в крови новорожденных от матерей с персистирующей герпесвирусной инфекцией на 7-10 сутки определяют уровень CD16+CD25+ и IL-6 и при значениях CD16+CD25+ 3,5% и ниже, a IL-6 32,6 пг/мл и выше диагностируют развитие тяжелой формы инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и неонатологии, и может быть использовано для прогнозирования перинатальных гипоксических поражений центральной нервной системы у новорожденных.
Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогнозирования развития язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у европеоидов Республики Хакасия.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике разных патологических состояний человека. Для этого проводится измерение характеристик клеток крови пациента по определению их адгезивности к стеклу.

Изобретение относится к области медицинской иммунологии и предназначено для определения функциональной активности фактора D комплемента человека по его действию на инфузории в бескальциевой среде, содержащей ионы магния.

Изобретение относится к медицинской иммунологии, а именно к способам определения функциональной активности комплемента в сыворотке крови организма при диагностике ряда заболеваний.

Изобретение относится к медицинской иммунологии, а именно к способу определения функциональной активности комплемента в сыворотке крови организма при диагностике ряда заболеваний.

Изобретение относится к области медицинской иммунологии и предназначено для определения интегральной функциональной активности компонента С1 комплемента человека по его действию на инфузории.

Изобретение относится к области медицинской иммунологии и предназначено для определения интегральной функциональной активности компонентов мембраноатакующего комплекса комплемента человека по его действию на инфузории.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и неврологии, и может быть использовано для выявления степени выраженности интоксикации парами металлической ртути.
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для дооперационного прогноза осложненного течения раннего посттрансплантационного периода.

Изобретение относится к электрохимическим методам анализа, а именно к иммуноанализу, в частности к определению содержания патогенных микроорганизмов в различных объектах и средах. Изобретение может быть использовано в микробиологии, медицине, экологии для мониторинга содержания микроорганизмов в природных объектах и дифференциальной диагностики инфекционных заболеваний. Электрохимический способ определения содержания грамотрицательных патогенных бактерий предполагает использование в качестве сигналообразующей метки электроактивных магнитных нанокомпозитных частиц, которые перед стадией конъюгирования получают путем создания на поверхности магнитных наночастиц переходных металлов или их соединений электроактивного полимерного покрытия. Концентрацию патогенных микроорганизмов определяют путем получения электрохимического отклика, регистрируемого напрямую в результате электропревращения электроактивного полимерного покрытия. Изобретение направлено на упрощение анализа, увеличение чувствительности, экспрессности, воспроизводимости, а также на расширение круга электрохимически активных меток. Использование полимерного покрытия позволяет добиться высокой чувствительности и воспроизводимости анализа. 7 ил. 6 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ печати биологических лигандов, представляющих собой олигосахариды, и/или полисахариды, и/или пептиды, и/или гликопептиды, и/или биотин. Предварительно на подложку наносят слой гидрофобной нелетучей жидкости, не смешивающейся с растворителем биологических лигандов и имеющей удельную массу меньше, чем удельная масса раствора биологических лигандов. Затем бесконтактным методом осуществляют печать биологических лигандов. В качестве гидрофобной нелетучей жидкости используют вазелин, минеральное масло или высшие предельные углеводороды или их смесь. Толщина слоя гидрофобной нелетучей жидкости предпочтительно составляет 50-200 мкм. Техническим результатом изобретения является повышение равномерности высыхания капель раствора биологических лигандов на подложке при одновременном обеспечении защиты биологических лигандов от преждевременного гидролиза и улучшении морфологии спотов. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и экологии, в частности к тест-системам для определения содержания микополисахаридов и их производных, имеющих в своем составе участки, аналогичные синтетическому линейному нона-β-(1→3)-D-глюкозиду в окружающей среде, в том числе в пыли помещений, и может быть использовано для оценки пирогенности объектов окружающей среды при проведении экологического мониторинга жилых и производственных помещений с целью количественного определения пирогенной нагрузки пыли окружающей среды при помощи ингибиторного иммуноферментного анализа на твердой фазе. Тест-система включает в себя планшет с иммобилизованным на внутренней поверхности лунок конъюгатом синтетического линейного нона-β-(1→3)-D-глюкозида с бычьим сывороточным альбумином, калибраторы, содержащие растворы синтетического линейного нона-β-(1→3)-D-глюкозида; лиофилизованную специфическую поликлональную кроличью антисыворотку; конъюгат антивидовых антител против IgG(H+L) кролика с пероксидазой из хрена; 25-кратный концентрат 0,1М фосфатно-солевого буферного раствора с 0,05% Tween-20 (ФСБ-Т) рН 7,2-7,4; раствор для разведения поликлональной антисыворотки; раствор для разведения конъюгата антивидовых антител против IgG(H+L) кролика с пероксидазой из хрена; хромоген; стоп-реагент. Изобретение является удобным и эффективным для исследований в области экологии. 2 табл., 6 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для выявления нарушений свертывающей системы крови у беременных во 2-3 триместре. Для этого предварительно методом двумерного ультразвукового исследования устанавливают пол плода. Затем в венозной крови беременной методом иммунотурбидиметрии определяют уровень D-димера. Если его уровень у беременных с плодами мужского пола 350 и выше нг/мл, а у беременных с плодами женского пола 520 нг/мл и выше, диагностируют нарушение свертывающей системе крови. Использование данного способа позволяет проводить диагностику скрыто протекающего внутрисосудистого фибринообразования, что дает возможность определить высокий риск развития тромбозов и дифференцировать подходы к назначению терапии у таких беременных. 6 пр.
Изобретение относится к персонализированной (персонифицированной) профилактической медицине и к адаптационной физиологии и может быть использовано для прогностической диагностики дезадаптационных расстройств. Сущность способа: определяют содержание иммуноглобулина А в слюне (IgAS, г/л), долю лимфоцитов в лейкоцитарной формуле крови (DL, %) и содержание церулоплазмина в крови (CP, г/л). Затем рассчитывают критериальные функции G1, G2, G3 и G4: G1=52,4069×IgAS+1,719×DL+13,6636×CP-37,8085, G2=53,2374×IgAS+0,9063×DL+31,2157×CP-29,0407, G3=8,9154×IgAS+1,3424×DL+16,4848×CP-18,1429, G4=19,8973×IgAS+2,1123×DL-6,8294×CP-29,8888. Если максимальное рассчитанное значение соответствует критериальной функции G1, то прогнозируют низкий риск дезадаптационных расстройств, G2 - прогнозируют умеренный риск дезадаптационных расстройств, G3 - прогнозируют высокий риск дезадаптационных расстройств, G4 - констатируют наличие дезадаптационных расстройств. Достигаемый технический результат заключается в обеспечении возможности прогностической диагностики дезадаптационных расстройств по показателям иммунного статуса человека. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике в стоматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики процессов повышенного ороговения эпителия у лиц в возрасте от 15 до 45 лет, проживающих в регионе с неблагоприятными факторами окружающей среды. Для клинического определения состояния слизистой оболочки полости исследуют не стимулированную ротовую жидкость или мазки. При этом определяют пять параметров: содержание дрожжеподобных грибов рода Candida в дрожжевой или мицелиальной форме (1), концентрацию секреторного иммуноглобулина A (SIgA) (2) и лизоцима (3), светосумму излучения (S) за 5 минут исследования методом хемилюминесценции (4), проводят люминесцентное исследование в лучах Вуда слизистой маргинальной части десны и вершин десневых сосочков, слизистой щек в области смыкания зубов, дорсальной поверхности языка в области нитевидных сосочков и морфологическое исследование многослойного плоского ороговевающего эпителия слизистой оболочки щек по линии смыкания зубов (5). Полученные результаты позволяют диагностировать отсутствие патогенной микрофлоры и патологии слизистой оболочки рта, кандидоносительство или хронический кандидоз полости рта в мицелиальной или дрожжевой форме по типу кератоза, гиперкератоза или лейкокератоза. Использование изобретения позволяет повысить точность дифференциальной диагностики кератотических процессов в виде белых проявлений. 10 ил., 5 пр.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа идентификации пациентов с инфарктом миокарда, имеющих повышенный риск развития патологического состояния сердца, включающего исследование, после инфаркта, образца биологической жидкости пациента на предмет уровней сосудистого эндотелиального фактора роста В (VEGFB), тромбоспондина-1 (THBS1) и плацентарного фактора роста (PGF). Также группа изобретений касается способа осуществления прогноза для пациента с инфарктом миокарда; системы для идентификации пациентов с инфарктом миокарда. Группа изобретений обеспечивает проведение надежной диагностики повышенного риска развития патологического состояния сердца у пациентов после инфаркта миокарда. 6 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 пр., 9 ил., 7 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии, и может быть использовано для прогнозирования замедленной консолидации переломов. Описано прогнозирование замедленной консолидации переломов, которое осуществляют на основании определения относительного содержания ростового фактора (TGFβ1), лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА), дезоксипиридинолина (ДПИД), регистрации показателя микроциркуляции (ПМ) конечностей пациента на 10-е сутки посттравматического периода и расчета коэффициента по предлагаемой формуле, на основании значения которого прогнозируют замедленную консолидацию переломов. Техническим результатом является повышение точности прогноза. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицинской иммунологии и предназначено для определения функциональной активности компонента С3 комплемента человека по его действию на инфузории. В измерительные ячейки прибора для автоматизированного подсчета числа живых инфузорий вносят суспензию клеток Tetrahymena pyriformis, реагент R3 и испытуемый образец с последующим определением числа живых клеток в каждую минуту. Совпадение динамики изменения числа живых клеток во времени для испытуемого образца и контрольного, представляющего пул 10 сывороток здоровых доноров, предполагает равенство активностей компонента С3 комплемента в этих образцах. Изобретение обеспечивает эффективный способ расчета активности комплемента, пригодный при диагностике ряда заболеваний. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 пр.
Группа изобретений относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, иммунохимии, и касается диагностики цитомегаловирусной инфекции методом иммунного блоттинга, который является референтным, наиболее высокочувствительным, высокоспецифичным, подтверждающим (или исключающим) диагноз при подозрении на инфицирование в случае получения положительных или сомнительных (неопределенных) результатов. Группа изобретений представляет собой способ получения тест-системы для диагностики цитомегаловирусной инфекции, включающий получение очищенного вирусного лизата, приготовление иммуносорбента, содержащего специфичные ЦМВ белки рр 150, рр 130, gp 75, рр 65, gp 55, pp52, p 38, pp 28, приготовление растворов для электрофореза, приготовление раствора для разведения сывороток, приготовление 5-кратного концентрата промывочного раствора, приготовление конъюгата, комплектацию тест-системы, а также тест-систему, полученную вышеуказанным способом. Использование натурального лизатного высокоочищенного антигена цитомегаловируса штамм «CMV AD 169» при получении иммуносорбента и наличие в нем полного спектра белков, специфичных ЦМВ (всего 8 белков), имеет следующие преимущества: значительно повышается чувствительность анализа, сокращается время постановки, отсутствует необходимость в предварительном разведении образцов и отсутствует первоначальный этап блокировки иммуносорбента, более удобная упаковка значительно сокращает время исследования. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 табл.
Наверх