Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения



Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения
Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения
Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения
Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения
Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения
Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения
Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения
Потенциал калебина а в качестве средства против ожирения

 


Владельцы патента RU 2543334:

МАДЖИД Мухаммед (US)

Изобретение относится к медицине и фармации и представляет собой способ ингибирования адипогенеза, который включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A. Изобретение обеспечивает расширение арсенала средств против ожирения. 6 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 пр., 3 табл., 7 ил.

 

[Параграф 001] Эта заявка является не предварительной заявкой, поданной на основе предварительной заявки 61/431157 от 10 января 2011 года.

Область техники

[Параграф 002] Настоящее изобретение в целом относится к лекарственным средствам для лечения ожирения. А именно, оно относится к потенциалу калебина A в качестве средства против ожирения.

Предшествующий уровень техники

[Параграф 003] Ожирение является наиболее распространенным нарушением обмена веществ в промышленно развитых странах, и оно становится все более серьезной проблемой в развивающихся странах. Ожирение рассматривают как глобальную эпидемию, а люди с избыточным весом и страдающие ожирением (индекс массы тела (ИМТ) от 25 и выше) входят в группу повышенного риска развития различных хронических физических отклонений и психологических проблем, таких как психические расстройства, нарушение питания и низкая самооценка. Ожирение связано с различными заболеваниями, такими как сердечно-сосудистые заболевания, сахарный диабет, остеоартрит, одышка, препятствующая сну, и рак. По мнению Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), ожирение является одной из 10 основных причин предотвратимой смерти во всем мире.

[Параграф 004] При ожирении происходит увеличение жировой ткани из-за появления новых жировых клеток (адипоцитов) в результате процесса адипогенеза и/или отложения возросшего количества цитоплазматических триглицеридов в каждой клетке. Жировая клетка по мере развития вырабатывает липидные капли, которые сливаются в одну большую массу. В конечном итоге, в результате усилившегося адипогенеза и скопления комков адипоцитов под кожей развивается целлюлит.

[Параграф 005] Результаты исследования адипогенеза позволяют надеяться, что воздействие на этот процесс в организме человека может привести к снижению тяжести ожирения и диабета. На молекулярном уровне были найдены некоторые маркеры, представляющие собой мишени для лечения ожирения, такие как лептин, адипонектин, фактор некроза опухоли-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α) и др.

[Параграф 006] Несмотря на то что известны лекарственные препараты для лечения этого расстройства, существует постоянная потребность в поиске безопасных природных подходов к контролю ожирения и связанных с ним социально-экономических последствий.

[Параграф 007] Известно, что калебин A (Calebin A) защищает нервные клетки от β-амилоидного инсульта (Park SY et al, J Nat Prod. 2002 Sep; 65(9): 1227-31), вызывает апоптоз и модулирует активность киназ семейства МАРК (митоген-активируемые протеинкиназы, mitogen-activated protein kinase) в клетках рака желудка человека, устойчивых к лекарственным препаратам (Li Y et al, Eur J Pharmacol. 2008 Sep 4; 591(1-3): 252-8). В работе Zeng Y et al. (Chem Pharm Bull (Tokyo) 2007 Jun; 55(6): 940-3) обсуждаются два новых производных калебина, 4″-(4′′′-гидроксифенил-3′′′-метокси)-2″-оксо-3″-бутенил-3-(4′-гидроксифенил)-пропеонат и 4″-(4′′′-гидроксифенил)-2″-оксо-3″-бутенил-3-(4′-гидроксифенил-3′-метокси)-пропеонат.

[Параграф 008] Настоящее изобретение раскрывает потенциал калебина A в отношении предотвращения накопления жира в ходе терминальной дифференцировки адипоцитов (жировые клетки) и применение этого препарата для лечения ожирения. Настоящее изобретение раскрывает потенциал калебина A в отношении возможности благоприятно модулировать биохимические маркеры, связанные с ожирением. Важные биомодуляторные свойства калебина A включают ингибирование синтеза лептина, усиление экспрессии адипонектина и подавление местного (адипоциты) и системного воспаления, вызванного провоспалительными цитокинами, такими как фактор некроза опухоли (TNF-α), интерлейкин-6 (interleukin-6, IL-6) и интерлейкин-1 (interleukin-1β, IL-1β).

[Параграф 009] Таким образом, главная задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы раскрыть потенциал калебина A в качестве средства против ожирения.

[Параграф 0010] Настоящее изобретение выполняет вышеупомянутую главную задачу и раскрывает дополнительные, связанные с ней преимущества.

Краткое описание изобретения

[Параграф 0011] Настоящее изобретение раскрывает потенциал калебина A в отношении ингибирования адипогенеза, и его применение для лечения ожирения. Настоящее изобретение раскрывает потенциал калебина A в отношении благоприятного модулирования биохимических маркеров, связанных с ожирением у млекопитающих. Важные биомодуляторные свойства калебина A включают ингибирование синтеза лептина, усиление экспрессии адипонектина и подавление местного (адипоциты) и системного воспаления, вызванного провоспалительными цитокинами, такими как фактор некроза опухоли (TNF-α), интерлейкин-6 (IL-6) и интерлейкин-1 (IL-1β).

[Параграф 0012] Другие характеристики и преимущества настоящего изобретения станут очевидными из последующего более подробного описания, дополненного сопутствующими фигурами, которые иллюстрируют путем примеров принципов настоящего изобретения.

Краткое описание фигур

[Параграф 0013] На Фиг.1 приведено графическое представление степени ингибирования адипогенеза, вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл, по результатам анализа методом окрашивания масляным красным O.

[Параграф 0014] На Фиг.2 приведено графическое представление степени ингибирования синтеза лептина адипоцитами человека, вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл. Значение P *: <0.01; **: <0.001.

[Параграф 0015] На Фиг.3 приведено графическое представление степени усиления экспрессии адипонектина адипоцитами человека, вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл. Значение P *: <0.01.

[Параграф 0016] На Фиг.4 и 5 приведено, соответственно, графическое представление степени ингибирования экспрессии TNF-α (значение P *: <0.01; **: <0,001) и экспрессии IL-6 (значение P *: <0,01) адипоцитами человека, вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл.

[Параграф 0017] На Фиг.6 приведено графическое представление влияния множественных доз калебина A на экспрессию TNF-α и IL-1β в сыворотке швейцарских мышей-альбиносов, получавших этот препарат. Количество животных = 6 на группу, P-значение: * <0.01; ** <0.001 тест Стьюдента.

[Параграф 0018] На Фиг.7 приведено графическое представление влияния множественных доз калебина A на экспрессию IL-1β в сыворотке швейцарских мышей-альбиносов, получавших этот препарат. Количество животных = 6 на группу, P-значение: * <0.01; ** <0.001 тест Стьюдента.

Подробное описание изобретения

[Параграф 019] Настоящее изобретение раскрывает потенциал калебина A в отношении предотвращения накопления жира в ходе терминальной дифференцировки адипоцитов (жировые клетки) и применение этого препарата для лечения ожирения. Настоящее изобретение раскрывает потенциал калебина A в отношении благоприятного модулирования биохимических маркеров, связанных с ожирением. Важные биомодуляторные свойства калебина A включают ингибирование синтеза лептина, усиление экспрессии адипонектина и подавление местного (адипоциты) и системного воспаления, вызванного провоспалительными цитокинами, такими как фактор некроза опухоли (TNF-α), интерлейкин-6 (IL-6) и интерлейкин-1 (IL-1β).

[Параграф 0020] В наиболее предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к способу ингибирования адипогенеза, который включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A. Другими словами, настоящее изобретение относится к способу предотвращения накопления жира в ходе терминальной дифференцировки адипоцитов млекопитающих (Фиг.1).

[Параграф 0021] В другом предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к способу ингибирования экспрессии лептина в адипоцитах, где указанный способ включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A (Фиг.2).

[Параграф 0022] В другом предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к способу усиления экспрессии адипонектина в адипоцитах, где указанный способ включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A (Фиг.3).

[Параграф 0023] В другом предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к способу ингибирования экспрессии провоспалительного цитокина TNF-α в адипоцитах, где указанный способ включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A (Фиг.4).

[Параграф 0024] В еще одном предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к способу подавления экспрессии провоспалительного цитокина интерлейкина-6 в адипоцитах, где указанный способ включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A (Фиг.5).

[Параграф 0025] В конкретном воплощении адипоциты, о которых идет речь выше, представляют собой адипоциты человека.

[Параграф 0026] В еще одном предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к способу снижения вызванной ожирением системной экспрессии провоспалительных цитокинов у млекопитающих, где вышеуказанный способ включает стадию введения эффективного количества калебина A пациенту, который в этом нуждается. Конкретные воплощения предполагают использование в качестве провоспалительных цитокинов, о которых идет речь в данном параграфе, фактора некроза опухоли α (TNF-α), интерлейкина-6 (IL-6) и интерлейкина-1β (IL-1β) (Фиг.6 и 7).

[Параграф 0027] В еще одном предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к способу контроля ожирения, где указанный способ включает стадию введения эффективного количества калебина A пациенту, которому необходим этот препарат.

[Параграф 0028] В еще одном предпочтительном воплощении пациент представляет собой млекопитающее.

[Параграф 0029] В еще одном предпочтительном воплощении пациент представляет собой человека.

[Параграф 0030] Потенциальное терапевтическое значение калебина A в качестве молекулы, имеющей активность против ожирения, может быть понятно из примеров, описанных ниже.

Пример I

Острая пероральная токсичность калебина A

[Параграф 0031] В таблице I приведен список параметров, которые измерялись для оценки острой пероральной токсичности калебина A.

[Параграф 0032] Результаты

Пероральное введение калебина A в количестве до 2000 мг/кг не вызывало смертность у мышей в течение двух недель наблюдения.

Таблица I
Параметры для оценки острой пероральной токсичности калебина A.
Общее поведение Частота дыхания = Нормальная
Агрессия = Отсутствует Диарея = Отсутствует
Страх = Отсутствует Кожные проявления
Пассивность = Отсутствует Шелушение = Отсутствует
Подвижность в целом = Нормальная Гиперемия = Отсутствует
Общая двигательная активность = Нормальная Цианоз = Отсутствует
Центральная нервная система Общие наблюдения
Возбуждение = Отсутствует Мышечная слабость = Отсутствует
Двигательная активность = Отсутствует Слюноотделение = Отсутствует
Тремор = Отсутствует Пилоэрекция = Отсутствует
Клонические судороги = Отсутствуют Диарея = Отсутствует
Тонические судороги = Отсутствуют Рефлексы
Дыхательная система Роговица = Нет эффекта
Частота дыхания = Нормальная Наружное ухо = Нет эффекта
Глубина дыхания = Нормальная Еда и вода (потребление и выделение)
Вегетативная нервная система Дефекация = Нормальная
Двигательная активность = Нормальная Мочеиспускание = Нормальное
Атаксия = Отсутствует

Пример II

Окрашивание раствором масляного красного O адипогенных культур и определение лептина, адипонектина, TNF-α и IL-6 методом иммуноферментного анализа (ИФА).

[Параграф 0033] Терминальная дифференцировка адипоцитов сопровождается накоплением большого количества липидов в больших цитоплазматических везикулах. Общепринятым аналитическим способом оценки адипоцитарной дифференцировки в культуре клеток является метод окрашивания масляным красным O (Oil-Red O, ORO). ORO является жирорастворимым ярко-красным красителем, который позволяет надежно определить адипоцитарную дифференцировку (адипогенез).

Принцип работы

[Параграф 0034] Масляный красный O (растворитель красный 27, Судан красный 5B, С.I. 26125, и C26H24N4O) является лизохромным (жирорастворимый краситель) диазокрасителем, который используется для окрашивания нейтральных триглицеридов и липидов на замороженных срезах и некоторых липопротеинов на парафиновых срезах. Он представляет собой порошок красного цвета с максимальным поглощением при 518 (359) нм. Масляный красный O является одним из представителей семейства судановых красителей. Аналогичные красители включают Судан III, Судан IV, и Судан черный B. Процедуру окрашивания необходимо выполнять на свежих образцах, поскольку фиксация спиртом удаляет липиды. Масляный красный O в большинстве случаев заменил Судан III и Судан IV, так как он позволяет получать более глубокий красный цвет, в результате чего окраску гораздо проще увидеть.

[Параграф 0035] Масляный красный O является жирорастворимым красителем. Жирорастворимые красители гораздо лучше растворяются в липидных веществах тканей/клеток, чем в обычных водно-спиртовых растворителях для красителей. Следовательно, этот краситель глубоко прокрашивает клетки.

Методика

[Параграф 0036] Клетки 3T3-L1 высеивают в количестве примерно 60×104 и культивируют в течение 48-72 часов до достижения 70-80% степени смыкания монослоя. Через 48 ч добавляют 200 мкл свежеприготовленной AIM (среда, индуцирующая адипогенез, adipogenesis induction medium). Через 72 ч в ячейки добавляют по 200 мкл АРМ (среда для прогрессирования адипогенеза, adipogenesis progression medium), и добавляют в лунки тестируемые соединения в различных концентрациях. Клетки инкубируют в течение 48 часов во влажной атмосфере (37°C), состоящей из 5% CO2 и 95% воздуха. Супернатант собирают и хранят для определения лептина, адипонектина, IL-6 и TNF-α методом ИФА. Клетки фиксируют, добавляя 100 мкл 10% формалина, после чего проводят окрашивание красителем ORO. Оптическую плотность (optical density, OD) измеряют при 492 нм в микропланшетном ридере. Результаты выражают в виде значений половины максимальной ингибирующей концентрации (IC50) с помощью программного обеспечения GraphPad Prism.

[Параграф 0037] Степень ингибирования адипогенеза рассчитывают следующим образом,

Где C означает поглощение красителя Масляного красного O в дифференцирующихся/недифференцированных клетках, и

T означает поглощение Масляного красного O в дифференцирующихся/недифференцированных клетках, обработанных тестируемым соединением. Определение лептина, адипонектина, IL-6 и TNF-α осуществляют в соответствии с руководством пользователя от R&D Systems.

[Параграф 0038] Ссылки

1. Wu Z, Xie Y, Morrison RF, Bucher NLR, Farmer SR 1998. PPAR γ induces the Insulin-dependent Glucose Transporter GLUT4 in the absence of C/EBP□ during the conversion of 3T3 fibroblasts into adipocytes. J Clin Invest. 101: 22-32.

2. A pre-adipose 3T3 cell variant highly sensitive to adipogenic factors & to human growth hormone. LA Salazar-Olivo, F Castro-Munozledo & W Kuri-Harcuch. Department of Cell Biology, Centro de Investigation y de Estudios Avanzados del I.P.N., Mexico D.F., Mexico. Journal of Cell Science, Vol 108, Issue 5 2101-2107.

3. A Nuclear Receptor Atlas: 3T3-L1 Adipogenesis. Mingui Fu, Tingwan Sun, Angie L. Bookout, Micheal Downes, Ruth T. Yu, Ronald M. Evans and David J. Mangelsdorf. Molecular Endocrinology 19(10): 2437-2450.

4. Aimee D, Kohn etal, JBC, Vol 271, No.49, pp-31372-31378.

Результаты

[Параграф 0039] На Фиг.1 приведено графическое представление степени ингибирования адипогенеза, вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл, равной, соответственно, 32,43%, 38,59% и 35,8%, исследованной методом окрашивания Масляным красным O.

[Параграф 0040] На Фиг.2 приведено графическое представление степени ингибирования синтеза лептина (34,92%, 41,04% и 39,48% соответственно) адипоцитами человека, вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл. Значение влияния калебина A на ингибирование синтеза лептина адипоцитами человека и корреляция с регуляцией ожирения вытекает из следующих фактов (Заметки о патофизиологии эндокринной системы Университета штата Колорадо, Notes on Pathophysiology of the Endocrine System, Colorado State University).

[Параграф 0041] Лептин является белковым гормоном, который экспрессируется преимущественно в адипоцитах. Он оказывает важное влияние на регуляцию массы тела, обмен веществ и репродуктивную функцию. Белок кодируется геном ожирения (ob), молекулярная масса белка составляет около 16 килоДальтон (кДа). При нормальных концентрациях лептина его биологическая функция заключается в основном в том, чтобы оказывать влияние на гипоталамические центры головного мозга, которые контролируют голод, аппетит, регуляцию температуры тела и энергетический метаболизм. Таким образом, лептин у человека, не страдающего ожирением, может вызвать потерю веса за счет двух важных механизмов: (i) ослабление голода и сокращение потребления продуктов питания, наиболее вероятно, путем ингибирования нейропептида Y, который регулирует пищевое поведение, и (ii) путем увеличения энергетических затрат за счет повышения температуры тела, потребления кислорода и потери массы жировой ткани. Тем не менее, избыточная секреция лептина в случае ожирения или в экспериментальных моделях индуцированного ожирения ведет к нарушению функций гипоталамических центров таким образом, что пациент, страдающий ожирением, не может достичь насыщения и, как правило, переходит в режим чрезмерного потребления пищи. Поэтому становится крайне важным добиться эффективного сокращения избыточного уровня лептина при ожирении, и калебин A является многообещающим препаратом в этом направлении, как показано на Фиг.2.

[Параграф 0042] На Фиг.3 приведено графическое представление степени ингибирования экспрессии адипонектина (27,12%, 34,06% и 32,8% соответственно) адипоцитами человека, вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл. Адипонектин является цитокином, который синтезируется почти исключительно адипоцитами и экспрессируется на довольно высоком уровне у худых и здоровых людей. С другой стороны, у людей, страдающих ожирением, снижен уровень адипонектина, при этом они подвержены ишемической болезни сердца (ИБС), сахарному диабету и гипертонии.

[Параграф 0043] Ссылки

1. Tamar. R. Aprahamian and Flora Sam, "Adiponectin in Cardiovascular Inflammation and Obesity, Int J Inflam. 2011; 2011: 376909;

2. Hotta K, Funahashi T, Arita Y, et al. Plasma Концентрацияs of a novel, adipose-specific protein, adiponectin, in type 2 diabetic patients. Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. 2000; 20(6): 1595-1599;

3. Iwashima Y, Katsuya T, Ishikawa K, et al. Hypoadiponectinemia is an independent risk factor for hypertension. Hypertension. 2004; 43(6): 1318-1323;

4. Kumada M, Kihara S, Sumitsuji S, et al. Association of hypoadiponectinemia with coronary artery disease in men. Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. 2003; 23(1): 85-89 and

5. Lindsay RS, Funahashi T, Hanson RL, et al. Adiponectin and development of type 2 diabetes in the Pima Indian population. The Lancet. 2002; 360(9326): 57-58.

[Параграф 0044] На Фиг.3 показано, что калебин A эффективно увеличивает уровень адипонектина в адипоцитах человека и тем самым является перспективным лекарственным средством для лечения ожирения.

[Параграф 0045] На фиг.4 и 5 представлена степень ингибирования TNF-α (36,03%, 40,81% и 45,47% соответственно) и IL-6 (21,31%, 32,37% и 31,7% соответственно), вызванного калебином A в концентрациях 0,5, 1,0 и 2,0 мкг/мл. В работе Bastard JP et al, "Recent Advances in the relationship between obesity, inflammation and insulin resistance", Eur Cytokine Netw. 2006 Mar; 17(1): 4-12 сообщается, что ожирение связано со слабым воспалением белой жировой ткани (WAT - white adipose tissue). Авторы также отмечают, что при ожирении для WAT характерна повышенная экспрессия провоспалительных молекул, таких как TNF-α и IL-6, которые оказывают воздействие не только на WAT, но также и на другие системы органов тела. На фиг.4 и 5 показано, что калебин A эффективно снижает экспрессию TNF-α и IL-6 в адипоцитах и может оказаться полезным для модулирования воздействия местного и системного воспаления при ожирении.

Пример III

Модуляция системного воспаления с помощью калебина A

[Параграф 0046] Авторы настоящего изобретения также приводят дополнительные доказательства, подтверждающие способность калебина A ингибировать внутриклеточный TNF и внеклеточный IL-1β в системе нейтрофилов мышей (таблица II, таблица III). Нейтрофилы выделяют с помощью метода разделения на градиенте плотности гистопака и тестируют на их способность синтезировать TNF-α in vitro после стимуляции липосахаридами (ЛПС). Клетки инкубировали в темноте с антителами против мышиного TNF-α, меченными фикоэритрином, затем промывали стерильным фосфатно-солевым буфером PBS (phosphate buffered saline) и ресуспендировали в PBS (pH 7.4), после чего клетки анализировали непосредственно в проточном цитометре (BDLSR; Becton Dickinson). Флюоресцентный триггер был установлен на параметр PE (FL1) изолированной популяции нейтрофилов (10000 событий). В этом исследовании в качестве стандартного ингибитора TNF-α использовали ролипрам (Rolipram) в концентрации 100 мкг/мл. Компенсацию флюоресценции, анализ данных и представление данных проводили с использованием программного обеспечения Cell Quest Pro (Becton Dickinson).

[Параграф 0047] Ссылки

1. Clara, В., R.С. Arancha, G.M. Andre′s, P. Atanasio, A. Julia, and O. Alberto. 2003. A new method for detecting TNF-α-secreting cells using direct immunofluorescence surface membrane stainings. J. Immuno. Methods 264: 77-87.

2. Khurshid A. Bhat, Bhahwal A. Shah, Kuldeep K. Gupta, Anjali Pandey, Sarang Bani, Subhash C. Taneja. Semi-synthetic analogs of pinitol as potential inhibitors of TNF-α cytokine expression in human neutrophils. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 19 2009, 1939-1943.

Таблица II
Серийный номер Образец Концентрация (мкг/мл) Экспрессия TNF-α Среднее ± стандартная ошибка % Активности
1 Контроль с ЛПС - 2,62±0,01 -
2 Калебин A 0,5 1,87±0,04* 28,62%↓
3 Калебин A 1,0 1,70±0,02** 35,11%↓
4 Калебин A 2,0 1,59±0,05** 39,31%↓
5 Ролипрам 100 0,73±0,09** 72,13%↓
%↓: указывает на снижение экспрессии TNF-α
Количество наблюдений = 3
P-значение: *<0.01; **<0.001 тест Стьюдента
Таблица III
Образцы Обработка Концентрация (пг/мл) % Активности
Контроль с ЛПС 51,80±2,18 -
Калебин A
0.5 мкг/мл 41,24±1,16* 20,38%↓
1.0 мкг/мл 39,26±2,52* 24,20%↓
2.0 мкг/мл 37,16±2,11** 28,26%↓
Ролипрам (стандарт) 100 мкг/мл 22,52±1,60** 56,52%↓
%↓: указывает на снижение экспрессии IL-1β
Количество наблюдений = 3
P-значение: *<0.01; **<0.001 тест Стьюдента

[Параграф 0048] Авторы настоящего изобретения также приводят данные по исследованию способности калебина A уменьшать экспрессию внеклеточного TNF-α, IL-1β [Фиг.6] и IL-6 [Фиг.7] в сыворотке мышей, которым вводили препарат (модели in vivo). Самцов швейцарских мышей-альбиносов в возрасте 6-8 недель содержали при 22±2°C при режиме освещенности свет/темнота 12/12 ч. Мышам перорально вводили тестируемые лекарственные препараты в определенных дозах (масса/объем) в течение 6 дней, с последующим внутривенным введением 1 мг/кг ЛПС в соответствии с методикой, описанной в работе Brieva A, Guerrero А, Alonso-Lebrero J L and Pivel JP. 2001. Inmunoferon, a glycoconjugate of natural origin, inhibits LPS-induced TNF-α production and inflammatory responses. International Immunopharmacology 1, 1979-1987. В каждой группе было по шесть мышей, при этом каждый эксперимент повторяли три раза. Количество TNF-α, IL-1β и IL-6 определяли с помощью коммерческих наборов ИФА (R&D Systems) в сыворотке мышей, которым вводили тестируемые препараты, через 90 мин после введения ЛПС. Ролипрам в количестве 30 мг/кг использовали в качестве стандартного лекарственного средства.

[Параграф 0049] На фиг.6 и 7 показано, что калебин A эффективно снижает уровни TNF-α, IL-1β и IL-6, что свидетельствует о том, что данное соединение является полезным агентом для модулирования эффектов местного и системного воспаления при ожирении.

[Параграф 0050] Следует отметить, что хотя настоящее изобретение описано в рамках предпочтительного воплощения, но специалистам в данной области техники очевидно, что объем настоящего изобретения не ограничивается только этим воплощением. Напротив, объем настоящего изобретения следует интерпретировать только в сочетании с прилагаемой формулой изобретения.

1. Способ ингибирования адипогенеза, который включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A.

2. Способ ингибирования экспрессии лептина в адипоцитах, который включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина А.

3. Способ ингибирования экспрессии адипонектина в адипоцитах, который включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A.

4. Способ ингибирования вызванного ожирением синтеза провоспалительных цитокинов в адипоцитах, который включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина А.

5. Способ по п.4, где провоспалительный цитокин представляет собой фактор некроза опухоли α (TNF-α).

6. Способ по п.4, где провоспалительный цитокин представляет собой интерлейкин-6 (IL-6).

7. Способ по любому из пп.1-4, где адипоциты представляют собой адипоциты человека.

8. Способ снижения вызванной ожирением системной экспрессии провоспалительных цитокинов, который включает стадию введения эффективного количества калебина A пациенту, который в этом нуждается.

9. Способ по п.8, где провоспалительный цитокин представляет собой фактор некроза опухоли α (TNF-α).

10. Способ по п.8, где провоспалительный цитокин представляет собой интерлейкин-6 (IL-6).

11. Способ по п.8, где провоспалительный цитокин представляет собой интерлейкин-1β (IL-1β).

12. Способ контроля ожирения, который включает стадию введения эффективного количества калебина A пациенту, который в этом нуждается.

13. Способ по п.8 или 12, где пациент представляет собой млекопитающее.

14. Способ по п.8 или 12, где пациент представляет собой человека.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области генной инженерии, конкретно к получению пептида GLP-1, модифицированного олигосахаридной цепью, и может быть использовано в медицине для лечения или профилактики заболеваний, ассоциированных с GLP-1.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и эндокринологии, и касается коррекции кризового течения гипертонической болезни и абдоминального ожирения. Для этого на фоне терапии ингибитором АПФ лизиноприлом дополнительно вводят моксогамму в дозе 200-400 мкг/сут и редуксин в дозе 18-30 мг/сут.

Изобретение относится к пептидным аналогам оксинтомодулина (ОХМ, глюкагон-37), которые были модифицированы для придания устойчивости к расщеплению и инактивации дипептидилпептидазой IV (DPP-IV) и для увеличения времени полужизни in vivo пептидного аналога наряду с предоставлением возможности пептидному аналогу действовать в виде двойного агониста GLP-1/глюкагонового рецептора (GCGR).

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к применению источника белков в составе питательной композиции. Количество белка составляет от 2,4 г до 2,8 г на 100 ккал потребляемой композиции.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению общей формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, соли кислоты или стереоизомеру, где Y: NRa и N+R1R2X-; Z: связь, -(CH2)p, -CHOH, -CH=CH-, -C≡C-, -CONH- и -CO-; Rb: C1-C8 алкил, C2-C8 алкенил, C6-C10 арил, -NR5R6, , и ; причем каждый алкил, алкенил и арил, представляющий собой Rb, возможно, содержит 1-3 заместителя, выбранных из C1-C4 алкила, C2-C4 алкенила, C3-C6 циклоалкила, C1-C4 алкокси, C6-C10 арила, 5-, 6- и 7-членного гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, галогена, -OH, -NH2, -CN и -NO2; Rc: галоген, C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, C3-C10 циклоалкил, C3-C8 циклоалкенил, C1-C4 алкокси, C6-C10 арил, 5-, 6-, 7- и 8-членный моноциклический гетероциклил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, 9- и 10-членный бициклический гетероциклил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы; и при этом C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил C2-C6 алкинил, C3-C10 циклоалкил, C3-C8 циклоалкенил, C6-C10арил, 5-, 6-, 7-, 8-членный моноциклический гетероциклил и 9- и 10-членный бициклический гетероциклил, представляющие собой Rc, возможно содержат 1-5 заместителей, выбранных из группы, состоящей из C1-C4 алкила, C1-C4 алкокси, C1-C4 галоалкила, C1-C4 галоалкокси, C3-C6 циклоалкила, C4-C8 циклоалкенила, галогена, -OH, -NH2, C6-C10 (A)(A′)(A″)(A′′′)арила, (A)(A′)(A″)(A′′′)гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, NR14R15, (CH2)pNR14R15, -CN, -NO2, оксо, -COOR14, SOR14, SO2R14, SO2NR14R15, NR15SO2R16, COR14, CONR14R15 и NR15COR16; при это каждый (A), (A′), (A″) и (A′′′) независимо отсутствует, или представляет собой C1-C4 алкил, и каждый гетероциклил (A)(A′)(A″)(A′′′)гетероциклила независимо выбран из группы, состоящей из 5-, 6-, 7- и 8-членного моноциклического гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, и 9- и 10-членного бициклического гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы; остальные радикалы имеют значения, указанные в п.1; и при условии, что, если Rc представляет собой гетероциклил, указанный гетероциклил связан непосредственно через атом углерода кольца гетероциклила.

Изобретение относится к композиции, включающей жир из веслоногого ракообразного, и к применению такой композиции для снижения накопления висцерального жира. Композиция из жира веслоногих ракообразных содержит 20-100 мас.% восковых эфиров, предпочтительно 40-85 мас.% восковых эфиров.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, где Alk представляет собой линейную C1-6 алкиленовую группу, разветвленную C1-6 алкиленовую группу или C1-6 алкиленовую группу, имеющую кольцевую структуру, где часть атомов углерода, составляющих кольцевую структуру, необязательно может быть замещена атомом кислорода, в кольце X, X1 представляет собой N или CRX1, X2 представляет собой N или CRX2, X3 представляет собой CRX3, X4 представляет собой N или CRX4, где RX1, RX2, RX3 и RX4 каждый независимо представляет собой атом водорода; линейную или разветвленную C1-6 алкильную группу; линейную или разветвленную C1-6 алкоксигруппу; или атом галогена, в кольце Y, Y1 представляет собой CRY1, Y2 представляет собой N или CRY2, Y3 представляет собой N или CRY3, Y4 представляет собой N или CRY4, RY1, RY2, RY3 и RY4 каждый независимо представляет собой атом водорода; линейную или разветвленную C1-6 алкильную группу, которая может быть замещена атомом (атомами) галогена; C3-7 алкильную группу, имеющую кольцевую структуру; линейную или разветвленную C1-6 алкоксигруппу; атом галогена или цианогруппу, в кольце Z, RZ представляет собой линейную или разветвленную C1-6 алкильную группу, которая может быть замещена атомом (атомами) галогена, или C3-7 алкильную группу, имеющую кольцевую структуру, которая может быть замещена атомом (атомами) галогена.

Изобретение относится к производным фенола формулы (1), где R1 представляет собой С1-С6 алкильную группу, С1-С6 алкинильную группу, С1-С6 галогеналкильную группу, С1-С6 алкилсульфанильную группу или атом галогена, R2 представляет собой циано группу или атом галогена, R3 представляет собой атом водорода, и Х представляет собой -S(=O)2.

Изобретение относится к соединениям формулы (I), где R1 представляет собой атом водорода или С1-С6-алкильную группу, замещенную одним или двумя заместителями, выбранными из С1-С6-алкокси-группы, гидроксильной группы, которые могут быть замещены С1-С6-алкилкарбонильной группой (замещенной одним или двумя заместителями γ), и 4-6-членной насыщенной моноциклической гетероциклической карбонильной группой, содержащей атом N; γ представляет собой гидроксильную группу, амино-группу, ди(С1-С6-алкил)амино-группу и карбамоильную группу; R2 представляет собой атом Н или С1-С6алкильную группу, которая может быть замещена гидроксильной группой; или R1 и R2 вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут быть объединены с образованием азетидино-группы, пирролидино-группы или морфолино-группы, которые могут быть замещены одной гидроксильной группой или гидрокси-С1-С6-алкильной группой; R3 и R4 представляют собой С1-С6-алкильную группу; R5 представляет собой атом галогена или С1-С6-алкильную группу; R6 представляет собой атом галогена; m и n представляют собой целое число от 0 до 1; V и W представляют собой СН; X, Y и Z каждый независимо друг от друга представляет собой СН или N.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложен слитый белок - антагонист Notch1, который состоит из Fc-области человека, слитой с EGF-подобным повтором 1-13 Notch1 или EGF-подобным повтором 1-24 Notch1.

Изобретение относится к сульфонамидным соединениям формулы (1) или к их фармацевтически приемлемым солям, в которой А представляет собой фенил, необязательно замещенный от 1 до 2 атомами галогена, C1-6 алкильной группой, трифторметильной группой, С1-6 алкоксигруппой или -SCH3 группой, тиофенил, необязательно замещенный C1-C6 алкильной группой или атомом галогена, пиридинил, необязательно замещенный атомом галогена, нафталенил или дигидроинденил; R1 представляет собой следующие формулы (Rla) или (Rlb): [в формулах (Rla) и (Rlb) Ar1 представляет собой следующие формулы (Arla), (Arlb) или (Ar1c): (каждый R5 и R6 независимо представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-6 алкильную группу, необязательно замещенную вплоть до трех атомов галогена, C1-6 низшую алкоксигруппу, необязательно замещенную вплоть до трех атомов галогена); Ar2 представляет собой следующие формулы (Ar2a), (Ar2b) или (Ar2c): (каждый R7 и R8 независимо представляет собой атом водорода, гидроксильную группу, атом галогена, C1-6 алкильную группу, необязательно замещенную вплоть до трех атомов галогена, или C1-6 низшую алкоксигруппу, необязательно замещенную вплоть до трех атомов галогена, аминогруппу, нитрогруппу, С2-6 ацильную группу, или R7 и R8 образуют вместе -СН2СН2О-; R9 представляет собой атом водорода или -J-COOR10; J представляет собой ковалентную связь, алкилен, содержащий от 1 до 5 атомов углерода, алкенилен, содержащий от 2 до 5 атомов углерода, или алкинилен, содержащий от 2 до 5 атомов углерода, где один атом углерода в упомянутых алкиленовых группах может быть заменен атомом кислорода, атомом серы, NR11, CONR11 или NR11CO в любом химически разрешенном положении; R11 представляет собой атом водорода; и R10 представляет собой атом водорода); и р равно 0 или 1]; R2 представляет собой C1-6 алкильную группу; каждый R3 и R4 независимо представляет собой C1-6 алкильную группу; * обозначает асимметрический атом углерода; и m равно целому числу от 1 до 3.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к биологически активному соединению, обладающему анальгетическим действием. .

Изобретение относится к применению сложноэфирных соединений бензойной кислоты, выбранных из группы, включающей 1-фенилвинил 4-метоксибензоат; 1-(4-метоксифенил)-винил 4-трет-бутилбензоат; 1-(4-трет-бутилфенил)-винил 4-метоксибензоат; 1-фенилвинил 4-трет-бутилбензоат; 4-бензоилокси-2-метоксибензолсульфоновая кислота; 3-диэтиламинофенил бензоат; 3-(1-пирролидинил)фенил бензоат и 3-метоксифенил салицилат, в качестве компонента для приготовления композиции для защиты организма человека или животного или материала от ультрафиолетового излучения, содержащей эффективное количество по меньшей мере одного из упомянутых соединений, в качестве компонента для приготовления композиции, характеризующейся прогрессивной защитой от УФ излучения, в зависимости от длительности солнечного воздействия и уровня солнечного излучения, в качестве компонента для приготовления композиции для личной гигиены, которая характеризуется прогрессивной защитой от УФ излучения, в зависимости от длительности солнечного воздействия и уровня солнечного излучения, в качестве компонента для приготовления промышленной композиции, характеризующейся прогрессивной защитой от УФ излучения, в зависимости от длительности солнечного воздействия и от уровня солнечного излучения, и в качестве компонента для приготовления композиции, которая при фотоперегруппировке показывает количество полученного УФ-В излучения.

Изобретение относится к соединению, представленному формулой (II-А), или к его фармацевтически приемлемой соли: [в которой символы имеют следующие значения: R 10-R12: одинаковые или различные, обозначают, каждый, галоген, низший алкил, галоген-низший алкил, -OR 0, -O-галоген-низший алкил или -CN, R13: R 0, галоген, галоген-низший алкил, -OR0, -O-галоген-низший алкил или -CN, кольцо В: бензольное кольцо или 5-6-членное гетероароматическое кольцо, содержащее 1-2 гетероатома, выбранных из О, S и N, R 14: R0, галоген или -OR0, R0 : одинаковые или различные, обозначают, каждый, Н или низший алкил, Y1: простая связь, низший алкилен, низший алкенилен или -O-низший алкилен-, и Z1: -CO2R 0 или -СO-NH-SO2-низший алкил].

Изобретение относится к новым соединениям - производным бензохинонов формулы (I): где каждый R1 и R2 представляет собой O-С(O)фенил; где фенил замещен 1 заместителем, выбранным из галоида, нитро, C1-С6алкила или С1-С6алкокси, и к их фармацевтически приемлемым солям.

Изобретение относится к лекарственным средствам, которые содержат фармакологически приемлемые жидкие кристаллы и их производные с общей структурной формулой: гдеХ представляет собой группу -CH=N-, a Y и Z - алкильную или алкоксильную группу, и принимаются в суточной дозе в количестве от 355 мкг до 10 грамм в день.
Изобретение относится к биотехнологии и фармацевтической промышленности и представляет собой композицию, обладающую антибактериальным, иммуностимулирующим, противоаллергическим и противовоспалительным действием, содержащую полезные для организма человека продукты жизнедеятельности бактерий в виде экзометаболитов и продуктов ферментолиза, отличающуюся тем, что она представляет собой среду культивирования молочнокислых бактерий, содержащую лаксаран в количестве 5-10 г/мл, казеицин, исрацидин или их смесь и лектины в количестве 0,05-2,5 моль/л, гистамин в количестве 0,8-2,0 ммоль/л и монокарбоновые жирные кислоты с неразветвленной цепью, а именно: уксусную кислоту, пропионовую кислоту, масляную кислоту и валериановую кислоту - в количестве 10-20 мг/мл.
Наверх