Способ получения восстановителей фертильности для стерильных цитоплазм сорго типов м35-1а и 9е

Изобретение относится к генетике и репродуктивной биологии растений. Изобретение представляет собой способ получения восстановителей мужской фертильности сорго, несущих гены-восстановители фертильности (Rf) для стерильных цитоплазм типов М35-1А и 9Е, включающий опыление ЦМС-линий пыльцой доноров генов Rf, выделение фертильных форм в потомстве гибрида, несущего гены Rf, оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, где выделение фертильных форм и оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями осуществляют путем устройства искусственных стабильных селективных фонов: («засушника»), используемого для выделения фертильных форм и оценки их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, и «влажника», устраиваемого для сравнительной оценки выделенных фертильных форм, причем селективные фоны устраивают в период формирования генеративной сферы у растений-доноров генов Rf, гибридов F1, их самоопыленного потомства и тест-кроссов на протяжении числа вегетации, достаточного для достижения практически приемлемой восстановительной способности восстановителя мужской фертильности в тест-кроссе. Изобретение позволяет отбирать формы (растения), несущие гены-восстановители мужской фертильности для ЦМС-индуцирующих цитоплазм сорго типов М35-1А, 9Е, генетически близких между собой. 1 ил., 6 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к генетике и репродуктивной биологии растений и может быть использовано в селекции и в теоретических исследованиях генетического контроля цитоплазматической мужской стерильности и развития мужской генеративной сферы.

Известен способ создания линий-восстановителей фертильности растений (Brown G.G., Formanova N., Dendy С. et al. Nuclear fertility restorer genes and methods of use in plants. US Patent 7,071,375 B2) на основе введения гена-восстановителя в растения с цитоплазматической мужской стерильностью (ЦМС) с помощью генетической трансформации. При этом в растения рапса с ЦМС типа Ogura посредством агробактериальной трансформации вводят генетическую конструкцию, несущую ген Rfo с известной нуклеотидной последовательностью, обусловливающий восстановление мужской фертильности в данном типе ЦМС.

Этот способ, однако, не применим для создания восстановителей фертильности для ЦМС типов М35-1А и 9Е сорго, поскольку гены-восстановители фертильности этих типов ЦМС на сегодняшний день не идентифицированы, и получение трансгенных растений сорго пока еще представляет серьезную проблему.

Известен также способ получения стерильных линий и линий-восстановителей фертильности для них (Williams М., Leemans J. Maintenance of male-sterile plants. US Patent 5,977,433 А), основанный на введении генетических конструкций, кодирующих, соответственно, фермент барназу (фермент, обладающий РНК-азной активностью) под тапетум-специфичным промотором и ее ингибитор, фермент барстар.

Этот способ, однако, также не может быть применен для сорго по причине отсутствия надежных высокоэффективных технологий получения трансгенных растений у этой культуры.

Известен также способ введения гена-восстановителя в растения с цитоплазматической мужской стерильностью (Sakai Т., Liu Н., Kurihara Н., Imamura J. Method for introducing a fertility restorer gene and for producing Fl hybrid of Brassica plants thereby. US Patent 5,644,066), позволяющий создавать линии-восстановители мужской фертильности, который основан на соматической гибридизации. При этом протопласты, выделенные из соматических клеток редиса (Raphanus sativus, Kosena radish), сливают с протопластами ЦМС-линии рапса (Brassica napus).

Этот способ, однако, не применим для создания линий-восстановителей сорго в связи с отсутствием методов регенерации растений из протопластов у этой культуры, а также в связи с отсутствием клонированных генов-восстановителей ЦМС типов М35-1А и 9Е.

Наиболее близким к предлагаемому является способ селекции восстановителей, изложенный в работе А.Н. Палиловой и В.П. Ралько (Палилова А.Н., Ралько В.П. Повышение восстановительной способности линий пшеницы под влиянием отбора // Сельскохозяйственная биология. 1983. №4. С. 29-31). Согласно этому способу, среди гибридных популяций пшеницы, созданных на стерильной цитоплазме Triticum timopheevi и несущих гены-восстановители для нее, проводят отбор самофертильных генотипов, которые в скрещиваниях с ЦМС-линиями на цитоплазме Triticum timopheevi способны давать гибриды F1 с частичным восстановлением фертильности.

Однако попытки использовать данный способ-прототип для селекции восстановителей фертильности для стерильных цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е не увенчались успехом: фертильные гибриды от скрещивания линий-доноров генов восстановителей фертильности (Rf) и стерильных линий и полученные от таких скрещиваний константные фертильные линии не обладали способностью к восстановлению фертильности гибридов F1 (тест-кроссов) с ЦМС-линиями (табл. 1), либо восстанавливали фертильность только у части гибридов F1, что свидетельствовало о неэффективности отбора восстановителей фертильности. Фертильность тест-кроссов варьировала в разные сезоны и зависела от уровня осадков в период развития мужской генеративной сферы (табл. 2; фиг.): доля фертильных растений резко падала в сухой сезон и возрастала в дождливый. Следовательно, прототип, основанный на биологическом способе получения линий-восстановителей фертильности, не позволяет создавать такие линии для стерильных цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е.

Таблица 1.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа получения восстановителей фертильности для стерильных цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение эффективности получения восстановителей мужской фертильности, необходимых для производства фертильных гибридов F1 сорго на основе стерильных цитоплазм типов М35-1А и 9Е, по сравнению с указанным прототипом в применении его к этим типам ЦМС сорго.

Поставленная задача достигается тем, что по предлагаемому способу получения восстановителей фертильности для стерильных цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е, включающему опыление ЦМС-линий пыльцой доноров генов Rf, выделение фертильных форм в потомстве гибридов, несущих гены Rf, оценку их восстановительной способности в анализирующих скрещиваниях (тест-кроссах) с ЦМС-линиями, для получения восстановителей стерильных цитоплазм типов М35-1А и 9Е осуществляют устройство стабильных искусственных селективных фонов: «засушника», используемого для выделения фертильных форм и оценки их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, и «влажника», устраиваемого и используемого для оценки выделенных фертильных форм, причем селективные фоны устраивают в период формирования генеративной сферы у растений-доноров генов Rf, гибридов F1, их самоопыленного потомства и тест-кроссов на протяжении числа вегетации, достаточного для достижения практически приемлемой восстановительной способности восстановителя мужской фертильности в тест-кроссе.

Так, согласно известным данным, для максимально возможной и практически приемлемой завязываемости семян на метелках растений с ЦМС достаточно иметь 50% фертильных растений в посеве. Например, при высеве на участке гибридизации растений ЦМС-линии и линии-восстановителя фертильности в соотношении 1:1 (6 рядов ЦМС-линии и 6 рядов восстановителя фертильности) наблюдается максимальная завязываемость семян на метелках ЦМС-линии (Шепель Н.А. Селекция и семеноводство гибридного сорго. - Ростов-на-Дону: Ростовский университет, 1985 - с. 256; см. Табл. 71). Следовательно, создаваемый восстановитель фертильности может быть пригодным для использования в случае, если в тест-кроссе будет присутствовать не менее 50% фертильных растений.

Доказательства соответствия предлагаемого способа критериям «промышленная применимость» и «новизна». Данный способ позволяет создавать не просто фертильные растения, как таковые, а линии со стабильно наследуемой восстановительной способностью. При этом следует подчеркнуть, что эти линии являются и гомозиготными по генам, контролирующим хозяйственно-ценные признаки. Такая гомозиготность у сорго достигается в результате самоопыления гибрида F1 в течение, как минимум, пяти поколений (House L.R. А Guide to Sorghum Breeding. Second Edition. ICRISAT. Patancheru, A.P. India. 1985. P. 38). В этой связи промышленная применимость восстановителя фертильности может быть оценена не ранее F5, в котором сочетается приемлемый уровень способности к восстановлению мужской фертильности с приемлемым уровнем гомозиготности по генам, контролирующим хозяйственно-ценные признаки.

В науке и технике не известна совокупность признаков, эквивалентная приведенной в формуле предлагаемого изобретения, необходимая и достаточная для решения поставленной задачи и достижения технического результата. В известном способе получения фертильных растений (Эльконин Л.А. и др. Наследуемая активация генов-восстановителей фертильности стерильной цитоплазмы сорго типа «9Е» условиями выращивания растений // Аграрный вестник Юго-Востока, 2009, №2, с. 4-8.) отсутствуют признаки проявления мужской фертильности в тест-кроссах отобранных в условиях «засушника» фертильных растений с ЦМС-линиями, а приведены лишь результаты тест-кроссов гибридов F1 (т.е. ВС1). Результаты этих тест-кроссов однозначно свидетельствуют об идентичности реакции на условия «засушника» гибридов F1 и ВС1, а именно существенное снижение уровня фертильности в условиях дефицита влагообеспеченности растений, что как раз и подтверждает необходимость последовательного отбора в течение нескольких поколений самоопыления фертильных гибридов в условиях «засушника». В этой связи этот аналог решает иную задачу: первичной активации генов-восстановителей фертильности, но не задачу получения линий-восстановителей фертильности, способных к восстановлению мужской фертильности ЦМС-линий, и гомозиготных по генам хозяйственно-ценных признаков, как это позволяет предлагаемый способ.

Предлагаемый способ получения восстановителей фертильности для стерильных цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е иллюстрируется одной фигурой. На фигуре отображены следующие показатели: 1 - доля фертильных форм в самоопыленных потомствах фертильных растений из гибридной популяции М35-1АЛСВВ-97; 2 - доля фертильных растений в тест-кроссах фертильных растений из этой популяции с ЦМС-линией [М35] Пищевое 614; 3 - сумма осадков в течение 3 недель до начала цветения.

Предлагаемый способ получения восстановителей фертильности для стерильных цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е осуществляют следующим образом. Метелки ЦМС-линии, несущей стерильную цитоплазму типа М35-1А или 9Е, опыляют пыльцой линии, несущей гены-восстановители фертильности (Rf). Семена гибридов F1 высевают в двух параллельных грядках одинакового размера. На одну из грядок на стадии появления у растений флагового листа устанавливают «засушник» - укрытие, изготовленное из прозрачного материала (к примеру, поликарбоната), препятствующее попаданию на нее атмосферных осадков, но не снижающее в значительной степени поток солнечного света и газообмен с окружающей средой. Другую грядку («влажник») на стадии появления у растений флагового листа подвергают дополнительному поливу, тем самым, используя ее в качестве контрольного участка для проверки эффективности отбора восстановителей фертильности. Среди гибридов F1 отбирают фертильные растения. Их потомство (гибриды F2) выращивают в следующем сезоне в «засушнике». С фертильных растений берут пыльцу и опыляют ею метелки растений ЦМС-линии с тем же типом цитоплазмы, т.е. производят тестерное скрещивание. На следующий сезон семена тест-кроссных гибридов и самоопыленное потомство их отцовских родителей (семьи F3) выращивают в «засушнике» и во «влажнике». По результатам оценки фертильности тест-кроссных семей отбирают гибриды F3, которые дали наибольший процент фертильных растений в тестерных скрещиваниях в условиях «засушника». Эти гибриды самоопыляют (для получения F4) и параллельно проводят их тестерные скрещивания с ЦМС-линией. На следующий сезон вновь в условиях «засушника» проводят оценку тест-кроссов и отбирают гибриды F4, давшие наибольший процент фертильных растений в тестерных скрещиваниях. Гибриды F4 самоопыляют для получения F5 и проводят контрольное тестерное скрещивание. В результате последующего самоопыления гибридов F5, несущих гены-восстановители фертильности (Rf) в гомозиготном состоянии, получают восстановители фертильности, которые оказываются эффективными как в засушливые, так и во влажные сезоны.

Таким образом, в предлагаемом способе получения восстановителей фертильности для стерильных цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е присутствуют как биологические приемы (скрещивания, отборы), так и технические приемы (устройство и использование специальных селективных фонов: «засушника» и «влажника»), которые в совокупности дают новый неочевидный эффект. Такая совокупность технико-биологических приемов является не очевидной для специалиста в данной технической области, не известна из уровня науки и техники, позволяет решить поставленную задачу по получению восстановителей ЦМС типов М35-1А и 9Е и достичь искомого технического результата в виде повышения эффективности получения восстановителей мужской фертильности, необходимых для производства фертильных гибридов F1 сорго на основе стерильных цитоплазм типов М35-1А и 9Е.

Примеры осуществления предлагаемого способа.

Пример 1. Для проверки эффективности предлагаемого способа на опытном участке были устроены две грядки, одна из которых служила «засушником», другая - «влажником». На грядку, служившую «засушником», в момент появления флагового листа у растений устанавливали раму с закрепленными на ней листами прозрачного поликарбоната. Такая конструкция препятствовала увлажнению почвы грядки дождевыми осадками в течение всего периода развития соцветий, цветения и завязывания семян, образуя «крышу» над грядкой. На период дождя «засушник» с боков закрывали полиэтиленовой пленкой, которую поднимали сразу по окончании дождя. Грядку, служившую «влажником», подвергали дополнительному поливу, начиная с появления флагового листа у растений (12-25 л/м2 2 раза в неделю), в течение всего периода развития соцветий, цветения и завязывания семян.

Пыльцой созданной нами ранее линии КВВ 45 - восстановителя фертильности ЦМС-индуцирующей цитоплазмы типа М35-1А - опыляли метелки ЦМС-линии [М35] Пищевое 614. Среди гибридов F1, выращенных в условиях «засушника», отобрали полностью фертильные растения, потомство которых (F2) также выращивали в условиях «засушника». Растения F2, характеризовавшиеся комплексом селекционно-ценных признаков и отобранные для дальнейшего самоопыления в качестве родоначальников новых линий-восстановителей, были проанализированы на способность к восстановлению фертильности в тестерном скрещивании с ЦМС-линией с цитоплазмой М35-1А([М35] Пищевое-614). Обнаружено, что доля фертильных растений в этих тестерных скрещиваниях составляла 64% при выращивании тест-кроссных гибридов в условиях «засушника» и 51% при выращивании тест-кроссных гибридов в условиях «влажника» (Табл. 3), что доказывает, что тестированные растения F2 несли гены-восстановители фертильности и могли тем самым служить основой для создания линии-восстановителя фертильности. При этом самоопыленное потомство отобранных растений (поколение F3) проявило высокий уровень фертильности как в условиях «засушника», так и «влажника».

Наряду с этим опытом, потомство тех же фертильных гибридов F1 одновременно выращивали в условиях «влажника». Фертильные растения из F2, выращенного в условиях «влажника», также были проанализированы на способность к восстановлению фертильности в тестерном скрещивании с ЦМС-линией с цитоплазмой М35-1А ([М35] Пищевое-614). Было обнаружено, что доля фертильных растений в этом тестерном скрещивании была значительно ниже, чем в тестерном скрещивании, в котором была использована пыльца фертильных растений F2, выращенных в условиях «засушника» (Табл. 3). Особенно значительная разница наблюдалась между тест-кроссами, полученными при использовании пыльцы гибридов F2 из «засушника» и «влажника» и выращенными в условиях «засушника». Эти данные убедительно доказывают необходимость выращивания растений-доноров генов-восстановителей фертильности стерильной цитоплазмы типа М35-1А (т.е. родоначальников новых линий-восстановителей этого типа цитоплазмы) в условиях «засушника».

Растения F3, выращенные в условиях «засушника», были вновь подвергнуты анализу на наличие у них способности к восстановлению мужской фертильности в тестерном скрещивании с ЦМС-линией М35-1А Пищевое-614. В тест-кроссе, выращенном в условиях «засушника», доля фертильных растений составляла 84.6% (Табл. 3).

В результате дальнейшего самоопыления в течение двух поколений была получена линия, выровненная по морфологическим признакам и по способности к восстановлению фертильности. Тест-кроссы этой линии с разными ЦМС-линиями на цитоплазме М35-1А показали, что данная линия является эффективным восстановителем мужской фертильности (доля фертильных растений среди гибридов F1 составляет 92-100%, см. Табл.4) и может использоваться для получения гибридов F1 с ЦМС-линиями на этой цитоплазме, что также подтверждает соответствие предлагаемого решения критерию «промышленная применимость».

Пример 2. Растения образца IS12603 - донора ЦМС-индуцирующей цитоплазмы, типа 9Е и несущего гены-восстановители этой цитоплазмы, выращивали в условиях «засушника». Пыльцой этих растений опыляли метелки ЦМС-линии [9Е] Пищевое 614 и гибриды от такого анализирующего скрещивания также выращивали в условиях «засушника», т.е. тем самым среди исходного образца-донора генов-восстановителей проводили отбор на способность к восстановлению фертильности в условиях засухи. Обнаружено, что доля растений, фертильность которых превышала 5%, в тест-кроссах, выращенных в условиях «засушника», была значимо выше при использовании пыльцы донорных растений, выращенных в условиях «засушника», чем донорных растений, выращенных в условиях «влажника» (Табл. 5). Этот факт также убедительно доказывает необходимость выращивания растений-доноров генов-восстановителей фертильности стерильной цитоплазмы типа 9Е в условиях «засушника», что является основой для создания линии-восстановителя мужской фертильности.

Таким образом, предлагаемый нами способ позволяет получать восстановители мужской фертильности для ЦМС-индуцирующих цитоплазм сорго типов М35-1А и 9Е и, в этой связи, может использоваться в селекции и семеноводстве для получения гетерозисных гибридов сорго. Существенное отличие данного способа от прототипа в приложении к сорго (Табл.1) заключается в использовании технических приемов - создания специальных селективных фонов: «засушника», в котором проводится отбор эффективных комбинаций генов-восстановителей фертильности, и «влажника», используемого для сравнительной оценки эффективности отбора. Именно использование этих технических приемов, которые позволяют оценивать стабильность функционирования генов-восстановителей в условиях засухи, в совокупности с использованием биологических приемов (скрещиваний и отборов) позволяет решить поставленную задачу создания восстановителей фертильности сорго для ЦМС типов М35-1А и 9Е.

По сравнению с прототипом доля фертильных растений в тест-кроссе по предлагаемому способу превышает 90%, тогда как при использовании прототипа в приложении к ЦМС типа М35-1А сорго - 11% (Табл. 6), что не позволяет применять прототип в промышленных целях для получения гибридов F1 сорго на основе стерильных линий с ЦМС типа М35-1 А.

Способ получения восстановителей мужской фертильности сорго, несущих гены-восстановители фертильности (Rf) для стерильных цитоплазм типов М35-1А и 9Е, включающий опыление ЦМС-линий пыльцой доноров генов Rf, выделение фертильных форм в потомстве гибрида, несущего гены Rf, оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, отличающийся тем, что выделение фертильных форм и оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями осуществляют путем устройства искусственных стабильных селективных фонов: («засушника»), используемого для выделения фертильных форм и оценки их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, и «влажника», устраиваемого для сравнительной оценки выделенных фертильных форм, причем селективные фоны устраивают в период формирования генеративной сферы у растений-доноров генов Rf, гибридов F1, их самоопыленного потомства и тест-кроссов на протяжении числа вегетации, достаточного для достижения практически приемлемой восстановительной способности восстановителя мужской фертильности в тест-кроссе.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к сельскому хозяйству и биотехнологии. Изобретение представляет собой способ экспресс-определения параметров симбиотического взаимодействия арбускулярной микоризы и растения.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к растению, обладающему повышенной устойчивостью к AHAS-ингибирующему гербициду, включающему, по крайней мере, одну Shiloh-8 IMI нуклеиновую кислоту, его части, растительной клетке и семени.
(57) Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии. Листовые экспланты, вычлененные из тридцатидневных асептических растений исходных сортов, выращенных в сосудах 1 л, помещают в чашки Петри с жидкой средой определенного состава и прединкубируют, кокультивируют и культивируют на питательных средах определенного состава.
Изобретение относится к области физиологии растений. Изобретение представляет собой способ оценки устойчивости растений к засолению почвы.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу создания трансгенных линий растений, продуцирующих белок с высоким уровнем экспрессии, включающему трансформацию растений экспрессирующим вектором, включающим плазмиду, содержащую ген, кодирующий β-глюкуронидазу, 35S промотор, nos терминатор транскрипции.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу молекулярно-генетической идентификации древесных видов растений, который включает выбор эффективных стабильных молекулярных маркеров, сбор материала, проведение молекулярно-генетического анализа с использованием ПЦР, анализ выявленных ISSR-маркеров и определение идентификационных (мономорфных и полиморфных), анализ полученных данных после секвенирования, составление молекулярно-генетической формулы, составление штрихкода, составление генетического паспорта.
Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии, в частности к способам получения трансгенных форм картофеля in vitro сорта Скороплодный, устойчивых к абиотическим и биотическим стрессам.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу оценки степени пленчатости зерна генотипа ячменя по сравнению со степенью пленчатости других генотипов ячменя одного года репродукции, включающий взятие навески сухого зерна каждого генотипа, помещение ее в жидкость, выдерживание навески зерна в этой жидкости в течение определенного времени, извлечение навески и повторное взвешивание.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой питательную среду для укоренения побегов яблони и груши in vitro. .

Изобретение относится к способу получения растений-регенерантов ириса мечевидного (I.ensata Thunb.) in vitro. .

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения лилий, содержащих в лепестках делфинидин. При этом способ включает введение в лилии гена флавоноид-3′,5′-гидроксилазы (F3′5′H) из колокольчиков, введение фрагмента гена флавоноид-3′-гидроксилазы (F3′H) из лилий, введение фрагмента гена дигидрофлавонол 4-редуктазы (DFR) из лилий, синтез делфинидина в результате деятельности введенного гена F3′5′H, с подавлением при этом экспрессии эндогенного гена F3′H, который участвует в синтезе цианидина в лепестках лилий, и получение лилий, которые содержат дельфинидин в лепестках. Изобретение позволяет эффективно получать лилии, содержащие в лепестках делфинидин. 4 з.п. ф-лы, 3 ил., 6 табл., 8 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу идентификации растения, способного восстанавливать фертильность при цитоплазматической мужской стерильности С-типа, содержащего функциональный ген-восстановитель для цитоплазматической мужской стерильности С-типа кукурузы, включающему выделение молекул нуклеиновой кислоты из растения и скрининг выделенных молекул нуклеиновых кислот с использованием ПЦР в отношении молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-197 и маркеров, обозначаемых как полиморфизмы ID №№1-106 в таблице 3. Изобретение также относится к способу восстановления фертильности в кукурузе, предусматривающему стадии скрещивания, маркер-ассоциированной селекции, а также размножения растения кукурузы. Изобретение позволяет эффективно восстанавливать фертильность в кукурузе. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 11 ил., 4 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к растению трансгенной сои, которое обладает резистентностью к арилоксиалканоатным и глуфосинатным гербицидам, его части и семени, а также к способу его получения. Также раскрыт способ уничтожения сорняков на участке произрастания по меньшей мере одного вышеуказанного растения. Изобретение позволяет эффективно бороться с сорняками с использованием арилоксиалканоатных и глуфосинатных гербицидов без повреждения целевого растения. 8 н. и 6 з.п. ф-лы, 6 ил., 27 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к cпособу получения генетически модифицированных древесных растений. При этом способ включает: получение и подготовку к инокуляции растительных эксплантов штамма Agrobacterium tumefaciens; получение и подготовку к инокуляции растительных эксплантов; инокуляцию эксплантов; кокультивацию эксплантов; отмывку эксплантов от агробактерий; помещение эксплантов на среду, содержащую селективные агенты и бактериостатические антибиотики; отбор полученных на селективной среде регенерантов. Указанный способ отличается тем, что подготовка растительных эксплантов к инокуляции, инокуляция эксплантов агробактериями и отмывка эксплантов от агробактерий проводятся в культуральной среде, содержащей все компоненты среды для кокультивации, селекции и регенерации, за исключением гелеобразующих веществ, регуляторов роста растений, бактериостатических антибиотиков и селективных агентов. Использование данного способа позволяет предотвратить осмотический стресс у трансформируемых клеток растений и повысить частоту генетической трансформации растений. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения безмаркерных трансгенных растений каланхоэ, экспрессирующих ген цекропина P1. Изобретение позволяет создавать биобезопасные лекарственные растения каланхоэ с высоким уровнем накопления целевого продукта и в сокращенные по времени сроки. 6 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к целому растению, имеющему увеличенный вес семени, размер семени и количество семян, и увеличенный урожай, путем введения определенных мутаций в указанные последовательности гена белка KRP, родственного белку-ингибитору киназы (KIP). Также раскрыто целое растение пшеницы, имеющее увеличенный вес семени, размер семени и количество семян, и увеличенный урожай, путем введения определенных мутаций в указанные последовательности гена белка KRP, родственного белку-ингибитору киназы (KIP). Раскрыт способ увеличения веса семени, размера семени и количества семян и урожая растения, путем введения определенных мутаций в указанные последовательности гена белка KRP, родственного белку-ингибитору киназы (KIP). Изобретение позволяет получать растения с увеличенным весом семени, размером семени и количеством семян, а также получать увеличенный урожай. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 15 ил., 42 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения безмаркерных трансгенных растений каланхоэ перистого, экспрессирующих ген цекропина Р1. Изобретение обеспечивает получение и тестирование безмаркерных растений каланхоэ с повышенными антибиотическими свойствами за короткий промежуток времени для использования в фармакологии и медицине. 8 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 12 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности конструкции для усиления транскрипции представляющей интерес нуклеотидной последовательности. Также раскрыты трансгенное растение кукурузы или Aspergillus nidulans, семя, клетка, ткань, плод, корень, побег, цветок, срез, содержащие указанную конструкцию. Раскрыты способы получения трансгенного растения с помощью указанной конструкции, способ снижения профиля жирных кислот. Изобретение позволяет получить трансгенное растение кукурузы или Aspergillus nidulans, обладающее усиленной транскрипцией представляющей интерес нуклеотидной последовательности по сравнению с диким типом. 17 н. и 15 з.п. ф-лы, 10 ил., 3 табл., 11 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к трансгенному растению сои, обладающему устойчивостью к глифосату и изоксафлютолу. Также раскрыты трансгенное семя указанного растения, молекула нуклеиновой кислоты, геномная ДНК сои, продукт из сои, набор, пара праймеров и пара специфичных зондов для идентификации одновременного присутствия генов устойчивости к указанным гербицидам. Раскрыты способ получения продукта из сои, способы борьбы с сорняками на поле, где растение сои устойчиво к глифосату и изоксафлютолу, способ защиты указанных растений сои, способ получения указанного растения сои, способы идентификации одновременного присутствия генов устойчивости к указанным гербицидам, способ скрининга семени на одновременное присутствие генов устойчивости к указанным гербицидам, способ обнаружения присутствия одновременно генов устойчивости к указанным гербицидам. Изобретение позволяет придать устойчивость растению сои к глифосату и изоксафлютолу. 21 н. и 11 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, вариантам коррекции S- и С-образных сколиозов у подростков 12-15 лет. Используют упражнения карате Киокусинкай, включающие последовательно выполняемые подготовительный, промежуточный и коррекционный комплексы в соответствии с формулой изобретения. При этом подготовительный и промежуточный комплексы являются разминочными и включают одинаковые упражнения для коррекции обоих видов сколиоза, укрепляющие мышечный корсет и разрабатывающие подвижность суставов. Причем подростки, не имеющие начальной физической подготовки, начинают выполнение упражнений с подготовительного комплекса, а подростки, имеющие начальную физическую подготовку, - с промежуточного комплекса. Коррекционный комплекс для коррекции S-образного сколиоза включает такие упражнения, как: удары руками; удары ногами; комбинированные упражнения из исходных положений: лежа на животе, лежа на спине, стоя. Коррекционный комплекс для коррекции C-образного сколиоза включает такие упражнения, как: удары руками; комбинированные упражнения их исходного положения лежа на животе. Варианты способа обеспечивают надежную, безопасную для здоровья детей и эффективную коррекцию С-образного и S-образного сколиоза. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 88 ил., 2 пр.

Изобретение относится к генетике и репродуктивной биологии растений. Изобретение представляет собой способ получения восстановителей мужской фертильности сорго, несущих гены-восстановители фертильности для стерильных цитоплазм типов М35-1А и 9Е, включающий опыление ЦМС-линий пыльцой доноров генов Rf, выделение фертильных форм в потомстве гибрида, несущего гены Rf, оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, где выделение фертильных форм и оценку их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями осуществляют путем устройства искусственных стабильных селективных фонов:, используемого для выделения фертильных форм и оценки их восстановительной способности в тест-кроссах с ЦМС-линиями, и «влажника», устраиваемого для сравнительной оценки выделенных фертильных форм, причем селективные фоны устраивают в период формирования генеративной сферы у растений-доноров генов Rf, гибридов F1, их самоопыленного потомства и тест-кроссов на протяжении числа вегетации, достаточного для достижения практически приемлемой восстановительной способности восстановителя мужской фертильности в тест-кроссе. Изобретение позволяет отбирать формы, несущие гены-восстановители мужской фертильности для ЦМС-индуцирующих цитоплазм сорго типов М35-1А, 9Е, генетически близких между собой. 1 ил., 6 табл., 2 пр.

Наверх