Вакцинный штамм вируса гриппа в/60/висконсин/2010/125


 


Владельцы патента RU 2545695:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины" Северо-Западного отделения Российской Академии медицинских наук (ФГБУ "НИИЭМ" СЗО РАМН) (RU)

Изобретение относится к медицинской вирусологии и касается вакцинного штамма вируса гриппа. Охарактеризованный штамм В/60/Висконсин/2010/125 - реассортант, полученный путем скрещивания эпидемического вируса В/Висконсин/1/2010 с холодоадаптированным температурочувствительным вирусом В/СССР/60/69 - донором аттенуации. Штамм В/60/Висконсин/2010/125 характеризуется температурочувствительностью и холодоадаптированностью. Реассортант унаследовал гены, кодирующие поверхностные антигены вируса гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA), от эпидемического вируса и остальные шесть генов, кодирующих внутренние негликозилированные белки, от донора аттенуации. Штамм депонирован в Государственной коллекции вирусов ФГБУ «Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И.Ивановского» Минздравсоцразвития России под №2723. Изобретение может быть использовано в практическом здравоохранении для профилактики заболеваемости гриппом среди взрослых и детей. 1 ил., 4 табл.

 

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в практическом здравоохранении для профилактики заболеваемости гриппом среди взрослых и детей с помощью живой гриппозной интраназальной вакцины из штамма вируса гриппа типа В, семейства Orthomyxoviridae, рода Influenzavirus В, В/60/Висконсин/2010/125.

В результате появления в циркуляции нового эпидемического штамма вируса гриппа, принадлежащего к антигенной линии Ямагата - В/Висконсин/1/2010, известный вакцинный штамм В/60/Брисбен/08/83 антигенной линии Виктория - прототип [Патент РФ №2422517, опубл. 27.06.2011. БИ №18] - утратил антигенную актуальность и вследствие этого не может вызвать защитную реакцию во время эпидемии, вызванной В/Висконсин/1 /2010-подобными штаммами вируса гриппа.

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение вакцинного штамма В/Висконсин/1/2010 для живой гриппозной вакцины на основе эпидемического вируса актуальной антигенной разновидности. Вакцина должна быть пригодна для взрослых и для детей, то есть соответствовать нормативным требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам Фармакопейной статьей ФСП Р№003224/01-050210 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения. Для его подготовки были использованы два родительских штамма вируса гриппа: эпидемический штамм вируса гриппа линии Ямагата - В/Висконсин/1/2010 и безвредный для человека холодоадаптированный донор аттенуации В/СССР/60/69.

Применяемые в настоящее время штаммы для живых гриппозных вакцин получают методом генетической реассортации (рекомбинации) эпидемически актуальных вирусов с холодоадаптированными штаммами - донорами аттенуации [Александрова Г.И. Применение метода генетической рекомбинации для получения вакцинных штаммов вируса гриппа. Вопр. вирусол. 1977. №4. С.387-395].

Донор аттенуации В/СССР/60/69 - холодоадаптированный (ca) и температурочувствительный (ts) штамм вируса гриппа, разрешенный для получения безвредных живых интраназальных вакцин для взрослых и детей [Александрова Г.И. Новое в эпидемиологии и профилактике вирусных инфекций. Л.,1968. С.66-83]. Донор аттенуации В/СССР/60/69 был получен из эпидемического вируса гриппа В/СССР/69 методом холодовой адаптации [Александрова Г.И., Климов А.И. Живая вакцина против гриппа. СПб.: Наука. 1994. 151 с.], в результате чего он стал безвредным для человека, т.е. приобрел способность бессимптомно размножаться в верхних дыхательных путях привитых лиц, вызывая выработку полноценного противовирусного иммунитета.

Цель реассортации - получить штамм с вакцинной формулой генома 6:2. Обычно гены, кодирующие поверхностные белки вируса гриппа гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA), наследуются от антигенно актуального циркулирующего эпидемического (пандемического) штамма, а шесть генов, кодирующих внутренние и неструктурные белки (РВ2, РВ1, PA, NP, M, NS) - от безвредного донора аттенуации.

Важным в создании каждого нового вакцинного штамма является, чтобы этот новый по составу двух генов (гемагглютинина и нейраминидазы) штамм приобрел свойства, присущие вакцинным штаммам для живой гриппозной вакцины. Для этого необходимо получить чистый клон с формулой генома 6:2 с сочетанием следующих полезных признаков: температурочувствительность и холодоустойчивость репродукции в развивающихся куриных эмбрионах и аттенуацию (безвредность) для лабораторных животных.

Получение вакцинного штамма. Вакцинный штамм В/60/Висконсин/2010/125 получен методом генетической реассортации эпидемического вируса В/Висконсин/1/2010 с донором аттенуации В/СССР/60/69 путем одновременного инфицирования развивающихся куриных эмбрионов (РКЭ) смесью родительских вирусов в эквивалентных инфекционных дозах, с последующей трехкратной селекцией клонов с заданными свойствами при пониженной до 25°С температуре инкубации в присутствии антисыворотки к донору аттенуации. Клоны дополнительно очищены пятикратным клонированием методом предельных разведений в присутствии антисыворотки к донору аттенуации при пониженной (25°С) и оптимальной (32°С) температурах инкубации. Чистые клоны проверены по фенотипическим характеристикам (ts- ca-фенотип) и по формуле генома на соответствие требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам.

Для анализа состава генома полученных реассортантов использовали следующие методы:

а) Реакцию торможения гемагглютинации (РТГА), позволяющую определить принадлежность поверхностного антигена - гемагглютинина (НА) одному из родительских вирусов, то есть установить специфичность вакцинного штамма [Методы определения показателей качества иммунобиологических препаратов для профилактики и диагностики гриппа. МУК 3.3.2.1758-03].

б) Микс-ПЦР анализ ДНК копий генов [Киселева И.В. с соавт. Анализ состава генома штаммов сезонной и пандемической живой гриппозной вакцины. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2011. №4. С.29-36], основанный на различиях в размерах соответствующих амплифицируемых фрагментов генов донора аттенуации или «дикого» вируса.

Для каждого фрагмента генома эпидемического штамма вируса гриппа В/Висконсин/1/2010 и донора аттенуации В/СССР/60/69 были подобраны пары праймеров, специфичных соответственно только для донора аттенуации или только для вируса «дикого» типа (табл.1).

Таким образом, «да-нет» результаты, регистрируемые в электрофорезе ПЦР-продуктов, позволяют четко установить принадлежность исследуемого гена и оценить степень чистоты вакцинного препарата.

Амплифицированные фрагменты ДНК визуализировали электрофорезом в 1.7%-ном агарозном геле, содержащем 0.5 мкг/мл этидиума бромида. Это позволило четко дифференцировать принадлежность генов исследуемого реассортантного штамма к эпидемическому вирусу гриппа В В/Висконсин/1/2010 или донору аттенуации В/СССР/60/69.

Антигенная характеристика вакцинного штамма. Гемагглютинин (НА) полученного авторами вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 в РТГА идентичен эпидемическому вирусу В/Висконсин/1/2010, антисывороткой к которому полностью нейтрализуется. Микс-ПЦР методом установлено, что вакцинный штамм В/60/Висконсин/2010/125 унаследовал нейраминидазу (NA) - от эпидемического вируса В/Висконсин/1/2010.

Таблица 1. Праймеры, использованные для анализа генома реассортантного вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125, полученного при скрещивании эпидемического вируса гриппа В/Висконсин/1/2010 с донором аттенуации В/СССР/60/69.

Ген Вирус Позиция нуклеотида3 Длина фрагмента Прямой праймер (F) Обратный праймер (R)
Последовательность праймера (5'→3') Длина праймера Последовательность праймера (5'→3') Длина праймера
РВ2 WT1 987-1910 923 AGACAAAGACAAAGATTTGGAC 22 CCTTAATTTTGGTGGTGAGAAACAA 25
B602 805-1030 225 TGATTGTAGCTTGTAGGAAAATAG 24 GATATTCTCTTTAGTTCAAGCCTC 24
РВ1 WT 1409-1830 421 ACGACTTTTACCGAACATGTAAAT 24 YAAGTTTCTCAAATTGTAAATGTTG 25
B60 525-1171 646 AGATATCATTGATTCATTGGACAAA 25 CTTCATTATATCTTTCTAATGGTATAT 27
PA WT 694-1106 412 GTYCTCATAGGRGAAGAAGATG 22 GGTTTTCTGTAAYTCGTTACTC 22
B60 1920-2237 317 AAAGCACTAAGAGTAATATTCACC 24 TACCAAATTGAGCGCTATGCTC 22
НА WT 194^84 290 CTYATTTTGCAAATCTCAAAGGAACAAR 28 TGTAGGGTCCTCCTGGTGCHT 21
B60 504-823 319 TTGCCCTAACGTTACCAATGGGAAA 25 CAACAACAATTCTGCCGCTTTGTTT 25
NP WT 995-1209 214 GAYCTAACCCTGCTTGCTCGT 21 AATTGYGATTTRTCYTTTGCATCA 24
B60 1164-1784 620 TTTCCATATTAAGAATGGGAGACA 24 AACGTACTGAAACAGTCACAGC 22
NA WT 470-841 371 GGGGGATACTACAATGGAACAAGAG 25 TTTTATTATTCGGCCCTCTCGAATC 25
B60 871-1109 238 TACTGAAGAATGCACATGCGGGTTC 25 CAAATCCTCCTTTGATGCCTCCAAG 25
M WT 486-1137 651 AGCATCACATTCACACAGGGCT 22 ACGGGGCTGCAACTTATTTGA 21
B60 920-374 546 AAGGCCACGAAAGCTCAGCAT 21 GTTTATTGTCTCTTTATTTGGATT 24
NS WT 764-1032 268 AACTCACTCTTCGAGCGTCTTA 22 CCTTCATTTCATACAATGTTTCTAAT 26
B60 369-804 435 CAACTAGCAACTGTCCAAACTG 22 GGCTTTGAATGTCCTTCATCAAA 23
1Эпидемический родительский вирус гриппа В/Висконсин/1/2010.
2Донор аттенуации В/СССР/60/69.
3Позиция нуклеотида представлена с 5'-конца «+» цепи РНК.

Формула генома. Формула генома 6:2 вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 подтверждена методом микс-ПЦР с помощью специфических праймеров, то есть вакцинный штамм В/60/Висконсин/2010/125 унаследовал шесть генов, кодирующих внутренние белки (РВ2, РВ1, PA, NP, М, NS), от донора аттенуации В/СССР/60/69, а гены, кодирующие поверхностные белки (НА, NA) - от эпидемического вируса В/Висконсин/1/2010. Доказательством получения вакцинного штамма с заданной формулой генома служат результаты микс-ПЦР, приведенные на фиг.1 и в таблице 2.

На фиг.1 в качестве примера представлен электрофорез в 1.7%-ном агарозном геле, содержащем 0.5 мкг/мл этидиума бромида, амплифицированных фрагментов гена, кодирующего нейраминидазу (NA). 1-я дорожка - маркер молекулярного веса; 2-я дорожка - NA эпидемического вируса гриппа В/Висконсин/1/2010 с праймерами, специфичными для донора аттенуации В/СССР/60/69; 3-я и 8-я дорожки - NA эпидемического вируса гриппа В/Висконсин/1/2010 с праймерами, специфичными для эпидемического вируса гриппа В/Висконсин/1/2010; 4-я дорожка - NA вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 с праймерами, специфичными для эпидемического вируса гриппа В/Висконсин/1/2010; 5-я и 7-я дорожки - NA донора аттенуации В/СССР/60/69 с праймерами, специфичными для донора аттенуации В/СССР/60/69; 6-я дорожка - NA донора аттенуации В/СССР/60/69 с праймерами, специфичными для эпидемического вируса гриппа В/Висконсин/1/2010.

Микс-ПЦР позволил четко установить принадлежность гена, кодирующего нейраминидазу исследуемого реассортантного вакцинного штамма, к эпидемическому вирусу гриппа В В/Висконсин/1/2010.

Результаты анализа всех генов вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 представлены в табл.2.

Таблица 2. Состав генома реассортантного вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125, полученного на основе эпидемического вируса В/Висконсин/1/2010 и донора аттенуации В/СССР/60/69
Ген Принадлежность гена одному из родительских вирусов
Донор аттенуации Эпидемический вирус Вакцинный штамм
РВ2 В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/СССР/60/69
РВ1 В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/СССР/60/69
РА В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/СССР/60/69
НА В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/Висконсин/1/2010
NP В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/СССР/60/69
NA В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/Висконсин/1/2010
М В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/СССР/60/69
NS В/СССР/60/69 В/Висконсин/1/2010 В/СССР/60/69

Оценку фенотипических свойств вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 проводили путем его параллельного титрования в РКЭ при разных температурах. Вакцинный штамм В/60/Висконсин/2010/125 в развивающихся куриных эмбрионах обладает выраженным температурочувствительным и холодоадаптированным фенотипом, идентичным фенотипу донора аттенуации В/СССР/60/69. Установлено, что вакцинный вирус является температурочувствительным (ts фенотип) - его инфекционная активность при температуре 38°С составила<1.7 log10 ЭИД50/мл, и холодоадаптированным (са фенотип) - инфекционная активность при пониженной до 26°С температуре инкубации составила 6.2 log10 ЭИД50/мл, что свидетельствует о его безвредности для человека, поскольку по этим показателям он идентичен донору аттенуации В/СССР/60/69. Фенотипические свойства вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 не изменились после его пятикратного пассирования при использовании больших заражающих доз, что свидетельствует о генетической стабильности препарата (табл.3).

Таблица 3. Фенотипические свойства вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 до и после его пассирования в развивающихся куриных эмбрионах
Вирус Титр, log10 ЭИД50/мл Фенотип
32°С 26°С 38°С
В/Висконсин/1/2010 (эпидемический вирус) 9.0 1.7 <1.7 ts, non-ca
В/СССР/60/69 (донор аттенуации) 8.9 6.4 <1.7 ts, СА
В/60/Висконсин/2010/125, до пассирования 8.7 6.2 <1.7 ts, СА
В/60/Висконсин/2010/125, 5-й пассаж в РКЭ 8.9 6.3 <1.7 ts, са

Оценку токсичности (безвредность для лабораторных животных) вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 проводили в соответствии с Руководством по доклиническому изучению новых фармакологических веществ [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией Р.У.Хабриева. - М., 2005. - 832 с.] путем внутрибрюшинного введения вирусного материала мышам. Для этого группе из 20 мышей (самцов и самок линии СВА весом 18-20 г.) вводили внутрибрюшинно 0,5 мл вируссодержащей аллантоисной жидкости с титром 8.0 lg ЭИД50/мл и оценивали патогенность вируса по проценту выживших мышей в течение 14 дней после введения вируса. Животным контрольной группы вводили плацебо - физиологический раствор. Вакцинный штамм В/60/Висконсин/2010/125 в эксперименте на мышах оказался полностью безвредным -100% мышей выжили в течение всего периода наблюдения. Отмечена прибавка в весе животных при их 100%-ной выживаемости (табл.4).

Таблица 4. Результаты изучения безвредности вакцинного штамма В/60/Висконсин/2010/125 после его внутрибрюшинного введения мышам
Пол Препарат Выжило к 14-му дню наблюдения Прибавка веса, гр.
Самцы Вакцинный штамм 10/10 1.4
Самки 10/10 1.5
Самцы Плацебо 10/10 1.5
Самки 10/10 1.3

В результате проведенных доклинических исследований установлено, что заявляемый вакцинный штамм живой гриппозной вакцины В/60/Висконсин/2010/125 характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму: антигенной специфичностью эпидемического вируса В/Висконсин/1/2010, структурой генома 6:2, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, генетической стабильностью, а также характерной для донора аттенуации температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека. Штамм аттенуирован и безвреден для мышей.

Морфология штамма полиморфная, типичная для вируса гриппа.

Все это отражено в прилагаемом ниже Паспорте штамма.

Таким образом, вакцинный штамм В/60/Висконсин/2010/125 по биологическим свойствам соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам Фармакопейной статьей ФСП Р№003224/01-050210 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения для взрослых и для детей и действующему Приказу Минздрава РФ от 07.08.1998 №156/79 «О подготовке новых вакцинных производственных и диагностических штаммов вируса гриппа и их внедрении в производство вакцин и диагностических препаратов».

Полученный штамм В/60/Висконсин/2010/125 депонирован 31.10.2011 в Государственную коллекцию вирусов ФГБУ «Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И.Ивановского» Минздравсоцразвития России (ФГБУ НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского Минздравсоцразвития России, Россия RU, 123098, город Москва, улица Гамалеи, 16) под №2723 и имеет характеристики, представленные в паспорте штамма.

ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММА

Инфекционная активность штамма В/60/Висконсин/2010/125 при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 32°С в течение 72 часов - 8.7 log10 ЭИД50/мл. Гемагглютинирующая активность - 1:128.

Штамм проявляет генетическую стабильность фенотипических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).

Полезным свойством вакцинного штамма вируса гриппа В/60/Висконсин/2010/125 является его пригодность для наработки живой гриппозной вакцины. Предлагаемый по изобретению вакцинный штамм вируса гриппа В/60/Висконсин/2010/125 может быть использован для профилактики гриппа как у взрослых, так и у детей с трехлетнего возраста.

ПАСПОРТ ШТАММА

1. Название штамма: В/60/Висконсин/2010/125

2. ИЭМ идентификационный №: BW/125/105/817

3. Серия: №1

4. Тип/подтип: линия Ямагата

5. Метод подготовки: классическая реассортация в куриных эмбрионах

6. Родительские вирусы

6.1. Эпидемический вирус: В/Висконсин/1/2010; CDC ID# 2010730255

6.2. Донор аттенуации: В/СССР/60/69

7. Число пассажей в процессе реассортации:

Е9 (скрещивание, три селективных пассажа и пять клонирований предельными разведениями)

8. Состав генома: Гены РВ2, РВ 1, PA, NP, М и NS - от донора аттенуации;гены НА и NA - от эпидемического вируса (формула генома 6:2)

9. Характеристика штамма до лиофилизации

9.1. Оптимальные условия репродукции: 32°С, 72 часа

9.2. Гемагглютинирующая активность: 1:128 с 1.0% куриными эритроцитами

9.3. Инфекционная активность при оптимальной температуре 32°С: 8.7 log10 ЭИД50/мл

9.4. Чувствительность к неспецифическим γ-ингибиторам сыворотки крови лошади и морской свинки: чувствителен

9.5. ts маркер (температурочувствительность репродукции; инфекционная активность при температуре 38°С):<1.7 lg ЭИД50/мл (ts фенотип)

9.6 са маркер (холодоустойчивость репродукции; инфекционная активность при температуре 26°С): 6.2 lg ЭИД50/мл (са фенотип).

10. Характеристика штамма после лиофилизации

10.1. Объем материала в ампуле: 0.5 мл

10.2. Инфекционная активность при оптимальной температуре 32°С: 7.7 log10 ЭИД50/мл

10.3. Гемагглютинирующая активность: 1:64 с 1.0% куриными эритроцитами

11. Антигенная специфичность

11.1. Гемагглютинин: идентичен вирусу В/Висконсин/1/2010 по данным РТГА

11.2. Нейраминидаза: идентична вирусу В/Висконсин/1 /2010 по данным микс-ПЦР

12. Токсикологические исследования in vivo (острая токсичность):

Не токсичен после внутрибрюшинного заражения мышей

13. Контроль стерильности:

Стерилен

14. Контроль на присутствие посторонних вирусов:

Посторонние вирусы отсутствуют

Вакцинный штамм вируса гриппа В/60/Висконсин/2010/125, задепонированный в Государственную коллекцию вирусов ФГБУ «Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И.Ивановского» Минздравсоцразвития России под №2723, предназначенный для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к вирусологии и касается штамма вируса осповакцины. Предложенный штамм выделен из гомогената тканей легких морских свинок, инфицированных 7-м пассажем вируса осповакцины.

Представлены наборы олигонуклеотидных зондов и праймеров, биологический микрочип и тест-система для идентификации и типирования вируса гриппа А и В. Охарактеризованная тест-система содержит: набор реагентов для выделения РНК вируса гриппа из биологического материала человека; набор реагентов для проведения ПЦР-амплификации, совмещенной с обратной транскрипцией, с образованием флуоресцентно-меченных фрагментов генома вируса гриппа, содержащий описанные олигонуклеотиды-праймеры; набор реагентов для проведения гибридизации фрагментов ДНК, полученных после проведения амплификации на биочипе, содержащем элементы с иммобилизованными описанными олигонуклеотидными зондами; и при необходимости, отрицательный и положительный контрольные образцы.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Описан реассортантный вирус гриппа.

Изобретение относится к медицинской вирусологии и биотехнологии. Штамм А/17/Виктория/2011/89 (H3N2) активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32°С.

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики гриппа С. Представленный способ включает выявление РНК вируса в мазках из носоглотки человека и животных путем проведения этапов обратной транскрипции и амплификации в одной пробирке методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени со специфичными зондом (5'-TGCTCCTGAAACCAGGACAG-3') и праймерами (5'-GAAATATTGATTGCTGAGACAGA-3', 5'-CCCTCCTGTTATTGCTGAAATTA-3').
Представленное изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается способа обнаружения микроорганизма вида Vibrio parahaemolyticus. Способ включает посев исследуемого штамма на газон культуры, нанесение капли диагностического препарата фага в центр чашки, выдерживание при температуре 37°С в течение 20-24 часов и подтверждение его принадлежности к микроорганизмам вида V.
Изобретение относится к области биотехнологии и касается олигонуклеотидных праймеров для идентификации вируса блютанга 6, 14 и 21 серотипов. Охарактеризованные праймеры комплементарны участкам вариабельного 2-го сегмента генома вируса блютанга нуклеотипа С (6, 14 и 21 серотипы) используются в ОТ-ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации для идентификации вируса блютанга 6, 14 и 21 серотипов и имеют следующий состав (5'-3'): Прямой: GRAYATGRTGGATATWCCG Обратный: GGCTGCACRTCCAYYGARTC Представленное изобретение позволяет определить генетическую группу нуклеотипа C вируса блютанга в образцах исследуемого биологического материала с помощью ОТ-ПЦР в короткие сроки.
Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано при производстве живой холодоадаптированной аттенуированной вакцины против гриппа. Холодоадаптированный штамм вируса гриппа В/Виктория/2/63/87 обладает уникальными мутациями в генах, кодирующих белки PB2, PB1, PA, NP, M1, NS1, и предназначен для получения холодоадаптированных реассортантных штаммов-кандидатов для получения живой гриппозной сезонной вакцины.
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии. От племенной нетели выделен штамм вируса блютанга 14 серотипа, депонированный в коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии под №3032.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Описан реассортантный вирус гриппа.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для производства различных инактивированных вакцин против гриппа. Для этого проводят заражение куриных эмбрионов, сбор вируссодержащей аллантоисной жидкости (ВАЖ), очистку ВАЖ методом микрофильтрации.

Изобретение относится к медицинской вирусологии и биотехнологии. Штамм А/17/Виктория/2011/89 (H3N2) активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32°С.

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики гриппа С. Представленный способ включает выявление РНК вируса в мазках из носоглотки человека и животных путем проведения этапов обратной транскрипции и амплификации в одной пробирке методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени со специфичными зондом (5'-TGCTCCTGAAACCAGGACAG-3') и праймерами (5'-GAAATATTGATTGCTGAGACAGA-3', 5'-CCCTCCTGTTATTGCTGAAATTA-3').

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины и касается вакцины против гриппа, вызываемого известными штаммами вирусов гриппа А и В, а также возможными реассортантами.
Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано при производстве живой холодоадаптированной аттенуированной вакцины против гриппа. Холодоадаптированный штамм вируса гриппа В/Виктория/2/63/87 обладает уникальными мутациями в генах, кодирующих белки PB2, PB1, PA, NP, M1, NS1, и предназначен для получения холодоадаптированных реассортантных штаммов-кандидатов для получения живой гриппозной сезонной вакцины.

Изобретение относится к области молекулярной биологии, вирусологии, генной инженерии, биотехнологии и ветеринарии. Предложена рекомбинантная вакцина, содержащая рекомбинантный вирус и фармацевтически приемлемые носитель, адъювант или эксципиент, где рекомбинантный вирус является инактивированным и содержится в вакцине в виде вирусного вектора, имеющего введенную экзогенную нуклеотидную последовательность, которая кодирует антиген заболевания, где инактивацию вируса проводят физическими или химическими методами, и вакцина является эффективной против, по меньшей мере, указанного заболевания, связанного с указанным антигеном.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантных векторов, используемых для производства противогриппозных вакцин. Охарактеризованы рекомбинантная псевдоаденовирусная частица на основе генома аденовируса человека 5 серотипа и способ ее использования.

Изобретение относится к области биотехнологии, вирусологии и медицины. Предложен реассортантный вирус гриппа для производства вакцин.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Представлены выделенные штаммы вируса гриппа, которые способны инфицировать собачьих и вызывать респираторное заболевание в собачьих.
Изобретение относится к медицинской вирусологии и касается штамма вируса гриппа. Вакцинный штамм А/17/Индиана/2011/72 (H3N2v) - реассортант, полученный путем скрещивания «дикого» вируса А/Индиана/10/2011 (H3N2v) с холодоадаптированным температурочувствительным вирусом А/Ленинград/13 4/17/57 (H2N2) - донором аттенуации. Штамм А/17/Индиана/2011/72 (H3N2v) депонирован в Государственную коллекцию вирусов ФГБУ «Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского» Минздрава России, под №2739, активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32°C, характеризуется температурочувствительностью и холодоадаптированностью и безвредностью для лабораторных животных. Реассортант унаследовал гены, кодирующие поверхностные антигены вируса гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA), от эпидемического родительского вируса и остальные шесть генов, кодирующих внутренние негликозилированные белки, от донора аттенуации. Представленное изобретение может быть использовано в практическом здравоохранении для профилактики заболеваемости гриппом среди взрослых и детей. 4 табл.
Наверх