Способ дифференциальной диагностики хориоидальной неоваскуляризации при влажной форме возрастной макулярной дегенерации по локальному иммунологическому профилю


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2545794:

Государственное бюджетное учреждение "УФИМСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЛЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЛАЗНЫХ БОЛЕЗНЕЙ Академии наук Республики Башкортостан" (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии. Изобретение представляет способ дифференциальной диагностики типов хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ) при влажной форме возрастной макулярной дистрофии, отличающийся тем, что производят забор влаги передней камеры глаза, определяют концентрацию фактора роста эндотелия сосудов, после чего оценивают результат по уровню данных показателей. При значении концентрации более 650 пг/мл диагностируют классическую ХНВ; при значении 300-400 пг/мл диагностируют смешанную ХНВ; менее 160 пг/мл диагностируют активную фиброваскулярную ХНВ. Изобретение обеспечивает повышение точности и упрощение способа дифференциальной диагностики типов хориоидальной неоваскуляризации при влажной форме возрастной макулярной дистрофии. 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии, и предназначено для дифференциальной диагностики различных типов хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ) при возрастной макулярной дегенерации (ВМД).

В последние годы ведутся исследования по изучению процессов образования ХНВ при возрастной макулярной дегенерации. Основной инициатор ангиогенеза данной патологии - фактор роста эндотелия сосудов (Vascular endothelial growth factor - VEGF). В нормальных условиях функциональная стабильность эндотелиальных клеток обеспечивается балансом между проангиогенными (в основном VEGF) и антиангиогенными (Pigment epithelium derived factor - PEDF) факторами (Machalinska A., 2012). При этом на процессы неоваскуляризации эти факторы действуют противоположно. Нарушение гомеостаза визуализируется при активации процессов образования ХНВ. Так, при влажной форме ВМД определяется активация индукции VEGF на фоне депрессии активности PEDF. В основе формирования неоваскуляризации лежат несколько ключевых звеньев патогенеза: реакция воспаления, дисбаланс иммунной системы, формирование промежуточных активных форм кислорода.

Наиболее часто встречаемые формы хориоидальной неоваскуляризации:

- Классическая ХНВ, располагающаяся над пигментным листком;

- Смешанная ХНВ, локализующаяся в средней части пигментного слоя;

- Активная фиброваскулярная ХНВ, включающая процессы фиброзирования.

Дифференциальная диагностика данных форм представляет большую клиническую значимость для выбора адекватного хирургического лечения заболевания. Основными методами дифференциальной диагностики являются оптическая когерентная томография, определяющая область ХНВ как гиперрефлективное образование, офтальмоскопия. Клинической сложностью проведения диагностических мероприятий является то, что по данным оптической когерентной томографии не всегда удается точно определить вид неоваскуляризации, что может привести к ошибочной постановке диагноза. При проведении офтальмоскопии субъективное восприятие картины глазного дна препятствует правильной оценке состояния сетчатки.

Наиболее близким аналогом изобретения является способ дифференциальной диагностики ХНВ при ВМД, заключающийся в том, что больным проводят оптическую когерентную томографию. По уровню залегания мембраны определяют форму ХНВ [Klein R., Peto Т., Bird А., Vannewkirk M.R. The epidemiology of age-related macular degeneration // Am. J. Ophthalmol. - 2004. - Vol.137. -P. 486-95]. Недостатком данного способа является низкая информативность, что определяет использование дополнительных методик: флуоресцентная ангиография, микропериметрия.

При рассмотрении вопросов развития ХНВ при ВМД и перехода одной формы в другую важным моментом является разработка дифференциальных критериев оценки неоваскуляризации на основе изменения концентрации основного инициатора ангиогенеза - VEGF на локальном уровне. Основной платформой для решения данного вопроса является влага передней камеры глаза, максимально точно отражающая гомеостаз глазного яблока.

Задачей изобретения является разработка способа дифференциальной диагностики различных типов хориоидальной неоваскуляризации при возрастной макулярной дегенерации по локальному иммунологическому профилю влаги передней камеры глаза.

Техническим результатом изобретения является повышение точности и упрощение способа.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе дифференциальной диагностики типов хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ) при влажной форме возрастной макулярной дистрофии согласно изобретению производят забор влаги передней камеры глаза, в которой определяют концентрацию фактора роста эндотелия сосудов, при ее значении более 650 пг/мл диагностируют классическую ХНВ; при значении 300-400 пг/мл диагностируют смешанную ХНВ; менее 160 пг/мл - активную фиброваскулярную ХНВ.

Предлагаемый способ дифференциальной диагностики ХНВ при ВМД осуществляют следующим образом. У пациентов с хориоидальной неоваскуляризацией на фоне ХНВ с помощью шприца с иглой менее 25G из передней камеры глаза забирают влагу до 0,2 мл. Определяют содержание VEGF во влаге передней камеры глаза больных методом твердофазного иммуноферментного анализа «Сэндвич» вариантом с использованием тест-систем «ВектортБест» (г.Новосибирск).

В микропланшет с иммобилизованными антителами вносят по 100 мкл стандартов VEGF, в остальные - по 100 мкл исследуемых образцов влаги передней камеры глаза. Планшет инкубируют 2 часа при +18 - +25°C при непрерывном встряхивании, затем 5 раз промывают буфером. Проводят полную аспирацию оставшейся жидкости. В каждую ячейку микропланшета вносят по 100 мкл конъюгата. Планшет инкубируют в течение 60 мин при +18 - +25°C при непрерывном встряхивании. Жидкость из ячеек удаляют и 5 раз промывают буфером. Планшет сушат путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой. Во все лунки планшета вносят по 100 мкл раствора субстрата с красителем. Микропланшет инкубируют в течение 25 минут при комнатной температуре в защищенном от прямых лучей месте на шейкере. Наблюдается развитие голубой окраски. Реакцию останавливают добавлением 100 мкл стоп-реагента в каждую лунку. Общее время постановки исследования 4,5 часа.

Учет результатов проводят с использованием автоматического фотометра «Multiscan» при длине волны 450 нм. Результаты выражают в пг/мл.

Нами проведено исследование влаги передней камеры глаза у 18 больных с ХНВ на фоне ВМД. Предварительный диагноз был поставлен по данным офтальмоскопии и оптической когерентной томографии. Пациенты были подобраны следующим образом:

- С классической ХНВ - 6 пациентов (6 глаз);

- Со смешанной ХНВ - 6 пациентов (6 глаз);

- С активной фиброваскулярной ХНВ - 6 пациентов (6 глаз).

У пациентов с хориоидальной неоваскуляризацией на фоне ХНВ во всех группах с помощью шприца с иглой менее 25G из передней камеры глаза забирали влагу до 0,2 мл. Определяли содержание VEGF во влаге передней камеры глаза больных методом твердофазного иммуноферментного анализа «Сэндвич» вариантом с использованием тест-систем «Вектор-Бест» (г.Новосибирск). В микропланшет с иммобилизованными антителами вносили по 100 мкл стандартов VEGF, в остальные - по 100 мкл исследуемых образцов влаги передней камеры глаза. Планшет инкубировали 2 часа при +18 - +25°C при непрерывном встряхивании, затем 5 раз промывали буфером. Проводили полную аспирацию оставшейся жидкости. В каждую ячейку микропланшета вносили по 100 мкл конъюгата. Планшет инкубировали в течение 60 мин при +18 - +25°C при непрерывном встряхивании. Жидкость из ячеек удаляли и 5 раз промывали буфером. Планшет сушили путем постукивания по поверхности лабораторного стола, покрытого фильтровальной бумагой. Во все лунки планшета вносили по 100 мкл раствора субстрата с красителем. Микропланшет инкубировали в течение 25 минут при комнатной температуре в защищенном от прямых лучей месте на шейкере. Наблюдали развитие голубой окраски. Реакцию останавливали добавлением 100 мкл стоп-реагента в каждую лунку.

Учет результатов проводили с использованием автоматического фотометра «Multiscan» при длине волны 450 нм.

У пациентов с классической ХНВ уровень VEGF во влаге передней камеры глаза соответствовал 722,1±48,4 пг/мл, концентрация фактора роста эндотелия сосудов всегда была более 650 пг/мл. У пациентов со смешанной ХНВ концентрация фактора роста эндотелия сосудов была в пределах 300-400 пг/мл, средняя концентрация - 353,3±20,8 пг/мл. У пациентов с активной фиброваскулярной ХНВ уровень VEGF был менее 160 пг/мл, средняя концентрация соответствовала 120,2±24,1 пг/мл.

Преимуществом предлагаемого способа дифференциальной диагностики ВМД с формированием ХНВ является однократное определение содержания VEGF во влаге передней камеры глаза, что позволяет контролировать переход одной формы неоваскуляризации в другую более точно, чем офтальмологические методики исследования, такие как офтальмоскопия и оптическая когерентная томография.

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Больной Ибрагимов В.И., 73 года. По данным офтальмоскопии и оптической когерентной томографии установлен диагноз: Возрастная макулярная дегенерация сетчатки, влажная форма с образованием классической неоваскулярной мембраны. Проведено исследование влаги передней камеры глаза. Установлено: концентрация VEGF - 693,7 пг/мл. Концентрация ростового фактора подтверждает данный диагноз.

Пример 2. Больной Ишмуратов Л.Л., 68 лет. По данным офтальмоскопии и оптической когерентной томографии установлен диагноз: Возрастная макулярная дегенерация сетчатки, влажная форма с образованием активной фиброваскулярной мембраны. Установлено: концентрация VEGF - 102,4 пг/мл. Концентрация ростового фактора подтверждает данный диагноз.

Пример 3. Больная Муртазина К.И., 71 год. По данным офтальмоскопии и оптической когерентной томографии установлен диагноз: Возрастная макулярная дегенерация сетчатки, влажная форма с образованием смешанной неоваскулярной мембраны. Установлено: концентрация VEGF - 321,7 пг/мл. Концентрация ростового фактора подтверждает данный диагноз.

Таким образом, предлагаемый способ делает достоверной дифференциальную диагностику различных типов ХНВ при ВМД по данным концентрации VEGF во влаге передней камеры глаза без привлечения дополнительной дорогостоящей аппаратуры, такой как оптический когерентный томограф, флуоресцентная ангиография.

Способ дифференциальной диагностики типов хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ) при влажной форме возрастной макулярной дистрофии, отличающийся тем, что производят забор влаги передней камеры глаза, в которой определяют концентрацию фактора роста эндотелия сосудов, при ее значении более 650 пг/мл диагностируют классическую ХНВ; при значении 300-400 пг/мл диагностируют смешанную ХНВ; менее 160 пг/мл - активную фиброваскулярную ХНВ.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к иммунологическим методам анализа и может быть использовано для массового скрининга инфекций TORCH-группы у новорожденных, беременных женщин и женщин, планирующих беременность.
Группа изобретений относится к медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, иммунохимии, и касается диагностики цитомегаловирусной инфекции методом иммунного блоттинга, который является референтным, наиболее высокочувствительным, высокоспецифичным, подтверждающим (или исключающим) диагноз при подозрении на инфицирование в случае получения положительных или сомнительных (неопределенных) результатов.

Изобретение относится к области медицинской иммунологии и предназначено для определения функциональной активности компонента С3 комплемента человека по его действию на инфузории.

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии, и может быть использовано для прогнозирования замедленной консолидации переломов. Описано прогнозирование замедленной консолидации переломов, которое осуществляют на основании определения относительного содержания ростового фактора (TGFβ1), лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА), дезоксипиридинолина (ДПИД), регистрации показателя микроциркуляции (ПМ) конечностей пациента на 10-е сутки посттравматического периода и расчета коэффициента по предлагаемой формуле, на основании значения которого прогнозируют замедленную консолидацию переломов.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа идентификации пациентов с инфарктом миокарда, имеющих повышенный риск развития патологического состояния сердца, включающего исследование, после инфаркта, образца биологической жидкости пациента на предмет уровней сосудистого эндотелиального фактора роста В (VEGFB), тромбоспондина-1 (THBS1) и плацентарного фактора роста (PGF).

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике в стоматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики процессов повышенного ороговения эпителия у лиц в возрасте от 15 до 45 лет, проживающих в регионе с неблагоприятными факторами окружающей среды.
Изобретение относится к персонализированной (персонифицированной) профилактической медицине и к адаптационной физиологии и может быть использовано для прогностической диагностики дезадаптационных расстройств.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для выявления нарушений свертывающей системы крови у беременных во 2-3 триместре.
Изобретение относится к области биотехнологии и экологии, в частности к тест-системам для определения содержания микополисахаридов и их производных, имеющих в своем составе участки, аналогичные синтетическому линейному нона-β-(1→3)-D-глюкозиду в окружающей среде, в том числе в пыли помещений, и может быть использовано для оценки пирогенности объектов окружающей среды при проведении экологического мониторинга жилых и производственных помещений с целью количественного определения пирогенной нагрузки пыли окружающей среды при помощи ингибиторного иммуноферментного анализа на твердой фазе.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ печати биологических лигандов, представляющих собой олигосахариды, и/или полисахариды, и/или пептиды, и/или гликопептиды, и/или биотин.

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии, и может быть использовано для прогнозирования замедленной консолидации переломов. Описано прогнозирование замедленной консолидации переломов, которое осуществляют на основании определения относительного содержания ростового фактора (TGFβ1), лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА), дезоксипиридинолина (ДПИД), регистрации показателя микроциркуляции (ПМ) конечностей пациента на 10-е сутки посттравматического периода и расчета коэффициента по предлагаемой формуле, на основании значения которого прогнозируют замедленную консолидацию переломов.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа идентификации пациентов с инфарктом миокарда, имеющих повышенный риск развития патологического состояния сердца, включающего исследование, после инфаркта, образца биологической жидкости пациента на предмет уровней сосудистого эндотелиального фактора роста В (VEGFB), тромбоспондина-1 (THBS1) и плацентарного фактора роста (PGF).
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для оценки риска развития хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) у пациентов с хроническим бронхитом.
Изобретение относится к медицине, в частности к инфектологии, и может быть использовано для прогнозирования состояния тонуса артериальных и венозных сосудов мозга у больных гриппом.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и касается прогнозирования ранней постинфарктной стенокардии (РПИС) у пациентов с острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST в госпитальном периоде.

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано в клинической практике для оценки эффективности антибактериальной терапии у больных с бактериальной инфекцией, в том числе с бактериальным сепсисом.
Изобретение относится к области сельского хозяйства и предназначено для диагностики дисбаланса Cu, Mo и W у сельскохозяйственных копытных животных. Способ включает подготовку проб биоиндикаторов, определение в них содержания микроэлементов и оценку полученных результатов.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунотерапии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения у пациента с раком. Для этого пациенту вводят иммуногенную композицию, которая содержит рекомбинантный вирусный вектор, экспрессирующий in vivo весь или часть MUC-1 антигена.

Изобретение относится к области медицины и описывает способ оценки нарушения импрегнации зародыша в слизистую оболочку матки на первых неделях беременности при обострении цитомегаловирусной инфекции, характеризующейся тем, что определяют титр антител к цитомегаловирусу, гистохимическим методом определяют активность 5β-прегнен-3,20-дион-дегидрогеназы, а также определяют содержание прогестерона, и при титре антител к цитомегаловирусу 1:1600, подавлении активности 5β-прегнен-3,20-дион-дегидрогеназы до 47,6±0,25 усл.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения степени тяжести симфизиопатии у беременных во II и III триместрах. Сущность способа состоит в том, что у беременных во II и III триместрах определяют диастаз лонного сочленения с помощью УЗИ, определяют в сыворотке крови магний общий в ммоль/л, суточную экскрецию кальция с мочой в ммоль/сутки, а также выявляют жалобы на боли в области лонного сочленения и пояснично-крестцовом отделе позвоночника, парестезии, судорожные подергивания и сведения икроножных мышц, болезненности при пальпации лонного и/или крестцово-подвздошного сочленения и при определенных значениях указанных параметров определяют легкую, среднюю и тяжелую степени симфизиопатии.

Группа изобретений относится к инструментам для контроля качества и безопасности в ходе производства нейротоксинов. В частности, группа изобретений относится к способу определения количества частично процессированного и/или непроцессированного нейротоксин А полипептида (BoNT/A) в растворе, содержащем процессированный и частично процессированный и/или непроцессированный BoNT/A, где указанный способ содержит стадию контактирования образца указанного раствора с захватывающим антителом, которое специфически связывается с частично процессированным и непроцессированным BoNT/A в условиях, допускающих связывание указанного антитела с указанным частично процессированным и непроцессированным BoNT/A, в результате чего формируется комплекс, и стадию определения количества образованного комплекса, где количество комплекса является показателем количества частичного процессированного и/или непроцессированного BoNT/A в указанном растворе. Кроме того, группа изобретений предполагает устройство и набор для осуществления указанного способа. Группа изобретений позволяет быстро и качественно определить содержание частично процессированного и/или непроцессированного нейротоксин А полипептида (BoNT/A). 3 н. и 11 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.
Наверх