Способ прогнозирования высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у работников химического комплекса, занятых во вредных условиях труда


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2545911:

Федеральное бюджетное учреждение науки "УФИМСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНЫ ТРУДА И ЭКОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА" (RU)

Изобретение относится к медицине и описывает способ прогнозирования высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у работников химического комплекса, занятых во вредных условиях труда, включающий определение в сыворотке крови общего антиоксидантного статуса, при этом дополнительно в сыворотке крови определяют количественное содержание продуктов перекисного окисления липидов и при одновременном увеличении количественного содержания перекисей в липидах более 4,31 мкмоль/л и снижении общего антиоксидантного статуса менее 1,3 ммоль/л прогнозируют высокий риск развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний. Использование изобретения упрощает и сокращает время исследования, снижает трудоемкость и материальные затраты. 3 табл., 5 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к медицине труда, гигиене труда, и может быть использовано для определения высокого риска развития производственно обусловленных заболеваний у работников химического комплекса, занятых во вредных условиях труда.

Химический комплекс является базовым сектором мировой экономики. По прогнозам экспертов, предполагаемый ежегодный темп роста мировой химической промышленности будет составлять 2,7%, и к 2030 г. объем потребляемой химической продукции будет составлять более 4 млрд долларов [Бархатова Е.И. Тенденции развития химического сектора мировой экономики. / Е.И. Бархатова / Известия Иркутской государственной экономической академии. 2011. №3. С.111-114].

В настоящее время российские предприятия производят около 1,1% мирового объема химической продукции [Андреев В.Г. Химическая и биологическая безопасность как часть национальной безопасности России / В.Г. Андреев, В.В. Бараненко // Научно-аналитический журнал Обозреватель. - Observer 2012. Т.270. - №7. - С.23-36].

Мощности российских производителей в настоящее время не в полной мере покрывают потребности населения в продукции химической отрасли. В связи с этим в Российской Федерации планируется строительство новых заводов химической отрасли, что предполагает увеличения занятости значительного числа трудоспособного населения.

Вместе с тем, гигиеническая оценка условий труда, проводимая в ряде химических производств, установила, что условия труда работников основных профессий (аппаратчиков, слесарей-ремонтников, электромонтеров) соответствуют вредному классу [Першин А.Н. Гигиеническая характеристика физических факторов рабочей среды на химических производствах в климатических условиях западной Сибири / А.Н. Першин // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. 2006. №3. С.63-66; Першин А.Н. Гигиеническая оценка условий труда и состояние здоровья работников химических производств западной Сибири в зависимости от типов технологических процессов и структуры профессий / А.Н. Першин, Т.Е. Помыткина // Медицина в Кузбассе. 2010. №4. С.37-42; Оценка и управление профессиональными рисками нарушения здоровья работающих в производствах органического синтеза: автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук: специальность 14.00.50 - медицина труда / Зотова Татьяна Маратовна; [НИИ медицины труда РАМН. - Москва: 2008. - 24 с.: ил.; 21 с.]

В ряде исследований показано, что у работников химических производств наблюдается увеличение распространенности высокого риска развития производственных и производственно обусловленных заболеваний, таких как заболевания нервной системы, сердечно-сосудистой системы, заболеваний желудочно-кишечного тракта [Мещакова Н.М. Динамика нарушений здоровья у работников современных химических производств / Н.М. Мещакова, М.П. Дьякович, С.Ф. Шаяхметов, Е.В. Сорокина // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. 2012. №2 - 2. С.87-91], в связи с чем необходима разработка новых способов диагностики высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у работников химического комплекса, занятых во вредных условиях труда.

Известен способ оценки профессионального риска для здоровья работающих, заключающийся в проведении периодического медицинского осмотра работников [Сборник Профессиональный риск для здоровья работников. Руководство / Под ред. Н.Ф. Измерова, Э.И. Денисова. - М.: Тровант, 2003. - С.71-89]. Однако проведение периодического медицинского осмотра, порядок которого установлен в данном сборнике, не предусматривает определения продуктов перекисного окисления и общего антиоксидантного статуса у работников. Кроме того, данный способ достаточно трудоемок, требует больших энерго- и материальных затрат.

Известен способ диагностики высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у работников, включающий при прохождении предварительного и периодического медицинского осмотра проведение биохимических исследований с определением активности АЛТ, ACT, ГГТ, ЩФ, содержания билирубина [Приказ МЗ и СР РФ от 12 апреля 2011 г. N 302н «Об утверждении перечней вредных и (или) опасных производственных факторов и работ, при выполнении которых проводятся обязательные предварительные и периодические медицинские осмотры (обследования), и порядка проведения обязательных предварительных и периодических медицинских осмотров (обследований) работников, занятых на тяжелых работах и на работах с вредными и (или) опасными условиями труда»]. Однако проведение данного способа не предусматривает определения продуктов перекисного окисления и общего антиоксидантного статуса у работников. Кроме того, данный способ достаточно трудоемок и сложен, требует больших энерго- и материальных затрат.

Прототипом изобретения является способ определения степени зависимости болезни от работы, заключающийся в том, что проводят гигиеническую оценку условий труда, затем комплексную оценку состояния здоровья работающих, включая клинико-функциональные методы исследования, эпидемиологические и медико-статические исследования, далее рассчитывают количественную оценку относительного риска и этиологической доли как меры производственной обусловленности для основных изученных показателей нарушений здоровья. При значениях относительного риска до 1, 4 и этиологической доле менее 33% оценивают как общие заболевания, при относительном риске от 1,5 до 5 и этиологической доле, равной 33-80%, оценивают как производственно-обусловленные заболевания, при относительном риске выше 5 и этиологической - доле 81-100% - как профессиональные заболевания [патент РФ №2189589, 2002 г.].

Недостатком данного способа является его сложность и трудоемкость, а также то, что данный способ выполняется по результатам ретроспективного анализа с учетом полученных показателей заболеваемости и распространенности производственно обусловленных и профессиональных заболеваний.

Задачей данного изобретения является разработка способа, позволяющего определить высокий риск развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у работников химического комплекса, занятых во вредных условиях труда.

Технический результат при использовании изобретения - упрощение и сокращение времени проведения исследования, снижение трудоемкости и материальных затрат.

Предлагаемый способ прогнозирования высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у работников химического комплекса, занятых во вредных условиях труда, осуществляется следующим образом. В сыворотке крови определяют количественное содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и общий антиоксидантный статус (АОС). При одновременном увеличении количественного содержания перекисей в липидах более 4,31 мкмоль/л и снижении общего антиоксидантного статуса менее 1,3 ммоль/л у работников химического комплекса диагностируют высокий риск развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний.

Преимущество предложенного способа в том, что данное изобретение предусматривает определение высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у определенного работника с учетом индивидуального состояния его организма с целью донозологической диагностики производственно обусловленных и профессиональных заболеваний на стадии преморбидных изменений.

Определение перекисей в липидах сыворотки крови

Для оценки интенсивности процессов перекисного окисления в нашей работе определялось количественное содержание продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови. Кровь из вены отбирают в пробирку. По истечении 20 минут кровь центрифугируют при 1500 оборотов в минуту в течение 15 мин при +4°C для отделения сыворотки крови, которую сразу подвергают анализу.

Реактивы и их приготовление. 1. Серная кислота, 0,1 N. 2. Фосфорновольфрамовая кислота (ФВК), 10%. 3. Тиобарбитуровая кислота (ТБК) - 0,67%. Готовят перед применением при нагревании и смешивают с ледяной уксусной кислотой (1:1). 4. Н-бутанол (хч).

1. К 0,25 мл сыворотки крови добавляют 5 мл 0,1 N серной кислоты, 0,5 мл 10% раствора ФВК, перемешивают, выдерживают 5 минут при комнатной температуре, потом центрифугируют при 1500 оборотах в минуту в течение 5 минут. Одновременно с опытными образцами ставят холостую пробу (без сыворотки крови), все остальные этапы проводят параллельно с опытными образцами.

2. Супернатант сливают, к осадку приливают 4 мл дистиллированной воды, добавляют 1,0 мл раствора тиобарбитуровой кислоты, перемешивают и инкубируют на водяной бане в течение 60 мин при 95°C.

3. По истечении времени пробы охлаждают, к пробе добавляют 4 мл н-бутанола и экстрагируют в течение 1 мин на вортексе. Для разделения слоев пробы центрифугируют в течение 5 мин в пробирках с пробками при 1500 оборотах в минуту.

4. Сразу после центрифугирования отбирают 3 мл супернатанта и измеряют оптическую плотность опытной пробы против холостой пробы при двух длинах волн 535 и 570 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерение проводят не позднее 1,5 часов после центрифугирования.

5. Расчет содержания продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови проводят по формуле

С=(D535-D570/0.156)×16,

где

С - содержание продуктов перекисного окисления липидов в опытной пробе, мкмоль/л;

D535 - оптическая плотность опытной пробы при 535 нм;

D570 - оптическая плотность опытной пробы при 570 нм;

0.156 - коэффициент молярной экстинкции комплекса малоновый диальдегид - ТБК в л/мкмоль/см;

16 - коэффициент разведения сыворотки.

Референтные значения 1,43-4,31 мкмоль/л.

Определение общего антиоксидантного статуса.

С целью определения общего антиоксидантного статуса в работе используют набор для определения общего антиоксидантного статуса Randox Laboratories LTD, Ardmore, Diamond Road, Crumlin, Co. Antrim, United Kingdom ВТ 29 4 QY

Кровь из вены в количестве 3 мл отбирают в пробирку. Пробирку центрифугируют при 2000 об/мин в течение 15 минут, получают сыворотку крови, которую подвергают анализу.

Описание метода

2,2амино-ди-(3-этилбензтиазолин сульфонат) ингибирует с пероксидазой (метгемоглобином) и H2O2 с образованием катиона радикала ABTS, который имеет голубое окрашивание и определяется при длине волны 600 нм.

Приготовление реактивов:

1. Приготавливают реактивы. 1) R2: 10 мл буфера R1 растворяют в R2 (стабилен 48 часов).

2) R3: 1 мл субстрата R3+1,5 мл буфера R1 (стабилен 24 часа)

3) раствор стандарта готовый в каждом наборе.

Проведение реакции

Берут 20 мкл сыворотки крови, растворяют в 1 мл R2, хорошо перемешивают и измеряют А1 при λ=600 нм. Сразу добавляют 200 мкл R3, перемешивают и одновременно включают таймер, инкубацию проводят при 37°. Определяют оптическую плотность точно через 3 минуты при λ=600 нм (А2). Для каждой серии проводят пробу, стандарт (готовый в наборе), бланк (дистиллированная вода).

Расчет активности общего антиоксидантного статуса.

а) рассчитывают ΔА=А2-А1 для пробы

ΔА=А2-А1 для стандарта

ΔА=А2-А1 для бланка (дистиллированная вода).

б) определяют фактор для расчета значений общего антиоксидантного статуса

Фактор = конц. стандарта/(ΔА бланка - ΔА стандарт)

в) Определяют общий антиоксидантный статус:

Ммоль/л = Фактор × (ΔА Бланка - ΔА Пробы)

Референтные значения: 1,3-1,77 ммоль/л

При увеличении количественного содержания перекисей в липидах сыворотки крови (ПОЛ более 4,31 мкмоль/л) и снижении общего антиоксидантного статуса (АОС менее 1,3 ммоль/л) у работников химического комплекса прогнозируют высокий риск развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний.

По результатам проведенных санитарно-гигиенических исследований на предприятиях химического комплекса авторами установлено, что на указанных предприятиях имеет место наличие комплекса вредных производственных факторов рабочей среды и трудового процесса (химический фактор, физический фактор (воздействие шума, физических нагрузок, микроклимата и др.), тяжесть и напряженность трудового процесса. Условия труда работников основной профессии по уровню вредных производственных факторов рабочей среды и трудового процесса соответствовали вредному классу условий труда 3 (класс 3.1-3.3). Условия труда работников вспомогательной профессии соответствовали допустимому классу условий труда (класс 2) (согласно Руководству Р 2.2.2006-05 «Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда»).

В связи с этим авторами были сравнены биохимические показатели работников указанных групп.

По результатам проведенных биохимических исследований установлено, что у работников основной профессии, занятых на производстве химического комплекса, в сыворотке крови в отличие от работников вспомогательной профессии почти в 3 раза чаще наблюдается изменение показателей содержания продуктов ПОЛ (p<0,01) и АОС (p<0,001) (таблица 1). Для достижения цели исследования авторами были изучены показатели ПОЛ и АОС у работников основной профессии в динамике: как до, так и после диагностирования у работника производственно обусловленного и профессионального заболевания.

По результатам проведенных биохимических исследований установлено, что у работников основной профессии до возникновения производственно обусловленного и профессионального заболевания наблюдается увеличение ПОЛ и снижение АОС (таблица 2). Необходимо отметить, что у группы работников основной профессии, у которых в последующем было выявлено производственно обусловленное и профессиональное заболевание, на момент проведения биохимических исследований (до возникновения производственно обусловленных и профессиональных заболеваний) в 100% случаев было отмечено одновременное увеличение продуктов ПОЛ и снижение АОС. Т.е. возникновению производственно обусловленных и профессиональных заболеваний предшествовало одновременное увеличение продуктов ПОЛ и снижение АОС (таблица 3).

У работников, у которых производственно обусловленных и профессиональных заболеваний выявлено не было, не наблюдалось одновременного увеличения продуктов ПОЛ и снижения АОС как на момент проведения биохимических исследований, так и в последующем.

Предлагаемый способ иллюстрирован следующим клиническим материалом:

Пример №1. Работник А., занятый в условиях химического комплекса, стаж работы - 4 года.

Содержание продуктов ПОЛ = 5,52 мкмоль/л, АОС = 1,19 ммоль/л.

Имеет место высокий риск развития производственно обусловленных заболеваний, необходимо проведение лечебно-профилактических мероприятий.

Пример №2. Работник Б., занятый в условиях химического комплекса, стаж работы - 3 месяца.

Содержание продуктов ПОЛ = 6,42 мкмоль/л, АОС = 1,9 ммоль/л.

Высокий риск развития производственно обусловленных заболеваний не выявлен.

Пример №3. Работник В., занятый в условиях химического комплекса, стаж работы - 1 год.

Содержание продуктов ПОЛ = 4,21 мкмоль/л, АОС = 1,1 ммоль/л.

Высокий риск развития производственно обусловленных заболеваний не выявлен.

Пример №4. Работник Г., занятый в условиях химического комплекса, стаж работы - 3 года.

Содержание продуктов ПОЛ = 1,3 мкмоль/л, АОС = 1,9 ммоль/л.

Высокий риск развития производственно обусловленных заболеваний не выявлен.

Пример №5. Работник Д., занятый в условиях химического комплекса, стаж работы - 3 года.

Содержание продуктов ПОЛ = 1,1 мкмоль/л, АОС = 1,5 ммоль/л.

Высокий риск развития производственно обусловленных заболеваний не выявлен.

Таблица 1
Биохимические показатели у работников химического комплекса до возникновения производственно обусловленного или профессионального заболевания
Показатели Параметры Группы работников
основной профессии (n=50) вспомогательной профессии (n=50)
ПОЛ, мкмоль/л М±m 4,44±0,02*** 2,58±0,4
Р±m 44,0±7,1** 16,0±5,2
АОС, ммоль/л М±m 1,1±0,08*** 1,6±0,09
Р±m 50,0±7,1*** 18,0±5,5
Наличие производственно обусловленного или профессионального заболевания Нет нет
Примечание: ПОЛ - перекисное окисление липидов, АОС - общий антиоксидантный статус, М - математическое ожидание, m - стандартная ошибка средней, Р - частота отклонения показателей на 100 работающих, *** - достоверность различий между группами (p<0,001), ** - достоверность различий между группами (p<0,01)
Таблица 2
Биохимические показатели у работников основной профессии химического комплекса
Показатели Параметры Работники с установленным производственно обусловленным или профессиональным заболеванием (n=15) Работники без установленного производственно обусловленного или профессионального заболевания (n=35)
ПОЛ, мкмоль/л М±m 5,85±0,002*** 4,33±0,09
Р±m 100,0±0,0 48,6±8,6
АОС, ммоль/л М±m 1,3±0,10 1,3±0,07
Р±m 100,0±0,0 51,4±8,6
Примечание: ПОЛ - перекисное окисление липидов, АОС - общий антиоксидантный статус, М - математическое ожидание, m - стандартная ошибка средней, Р - частота отклонения показателей на 100 работающих, *** - достоверность различий между группами (p<0,001)
Таблица 3
Определение высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний
Высокий риск развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний Повышение продуктов ПОЛ Снижение АОС
Есть + +
Нет - -
+ -
- +

Способ прогнозирования высокого риска развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний у работников химического комплекса, занятых во вредных условиях труда, включающий определение в сыворотке крови общего антиоксидантного статуса, отличающийся тем, что дополнительно в сыворотке крови определяют количественное содержание продуктов перекисного окисления липидов и при одновременном увеличении количественного содержания перекисей в липидах более 4,31 мкмоль/л и снижении общего антиоксидантного статуса менее 1,3 ммоль/л прогнозируют высокий риск развития производственно обусловленных и профессиональных заболеваний.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для лечения вторичной митохондриальной дисфункции у детей с патологией мочевой системы.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики апоптоза лимфоцитов. Для этого клетки выделяют, инкубируют 48 часов при температуре 37°С и с 5% содержанием СО2, с добавлением индуктора апоптоза дексаметазона в концентрации 10-4 моль/мл.

Группа изобретений относится к инструментам для контроля качества и безопасности в ходе производства нейротоксинов. В частности, группа изобретений относится к способу определения количества частично процессированного и/или непроцессированного нейротоксин А полипептида (BoNT/A) в растворе, содержащем процессированный и частично процессированный и/или непроцессированный BoNT/A, где указанный способ содержит стадию контактирования образца указанного раствора с захватывающим антителом, которое специфически связывается с частично процессированным и непроцессированным BoNT/A в условиях, допускающих связывание указанного антитела с указанным частично процессированным и непроцессированным BoNT/A, в результате чего формируется комплекс, и стадию определения количества образованного комплекса, где количество комплекса является показателем количества частичного процессированного и/или непроцессированного BoNT/A в указанном растворе.
Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии. Изобретение представляет способ дифференциальной диагностики типов хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ) при влажной форме возрастной макулярной дистрофии, отличающийся тем, что производят забор влаги передней камеры глаза, определяют концентрацию фактора роста эндотелия сосудов, после чего оценивают результат по уровню данных показателей.

Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии, и может быть использовано для прогнозирования замедленной консолидации переломов. Описано прогнозирование замедленной консолидации переломов, которое осуществляют на основании определения относительного содержания ростового фактора (TGFβ1), лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА), дезоксипиридинолина (ДПИД), регистрации показателя микроциркуляции (ПМ) конечностей пациента на 10-е сутки посттравматического периода и расчета коэффициента по предлагаемой формуле, на основании значения которого прогнозируют замедленную консолидацию переломов.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа идентификации пациентов с инфарктом миокарда, имеющих повышенный риск развития патологического состояния сердца, включающего исследование, после инфаркта, образца биологической жидкости пациента на предмет уровней сосудистого эндотелиального фактора роста В (VEGFB), тромбоспондина-1 (THBS1) и плацентарного фактора роста (PGF).
Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для оценки риска развития хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) у пациентов с хроническим бронхитом.
Изобретение относится к медицине, в частности к инфектологии, и может быть использовано для прогнозирования состояния тонуса артериальных и венозных сосудов мозга у больных гриппом.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии и касается прогнозирования ранней постинфарктной стенокардии (РПИС) у пациентов с острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST в госпитальном периоде.

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано в клинической практике для оценки эффективности антибактериальной терапии у больных с бактериальной инфекцией, в том числе с бактериальным сепсисом.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики стеатоза печени и стеатогепатита путем биохимического исследования, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют фосфолипазу A2, оксид азота и эндотоксин и при значении фосфолипазы A2 199,7-252,5 нг/мл, оксида азота 93-94,6 мкмоль/л и эндотоксина 2,2-2,6 ЕЭ/мл диагностируют стеатоз печени, а при значении фосфолипазы A2 412,5-576,5 нг/мл, оксида азота 137,5-168,5 мкмоль/л и эндотоксина 3,32-4,18 ЕЭ/мл диагностируют стеатогепатит. Изобретение обеспечивает повышение точности дифференциальной диагностики и снижение травматичности анализа. 4 пр.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования у пациента с влажной возрастной дегенерацией желтого пятна (AMD) повышенной вероятности эффекта от лечения высокоаффинным антителом против VEGF, в частности ранибизумабом. Предложен набор, содержащий первый олигонуклеотид и дополнительные олигонуклеотиды, специфичные для аллелей полиморфизма гена матриксной металлопротеазы 25 (ММР25), соответствующего rs1064875. Если соответствующий генотип содержит АА или AG, у пациента прогнозируют повышенную вероятность эффекта от указанного лечения. Предложенная группа изобретений обеспечивает эффективные средства и методы для прогнозирования у пациента с влажной AMD повышенной вероятности получения эффекта от лечения высокоаффинным антителом против VEGF. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской диагностике в области онкологии, и описывает способ прогнозирования развития метастазов у больных меланомой кожи. Способ включает исследование ткани удаленной во время операции опухоли, определение уровней маркеров VEGF C и VEGF A, расчет величины их соотношения и при увеличении этого показателя относительно значений в интактной коже, полученной при оперативном лечении неонкологических больных, в 5 и более раз прогнозируют метастазы в лимфатические узлы, тогда как при снижении этого соотношения в 10 и более раз прогнозируют гематогенное метастазирование. Способ характеризуется доступностью, относительной простотой и практичностью оценки факторов роста сосудов и позволяет прогнозировать риск наличия скрытой метастатической фазы заболевания, проводить объективный контроль за развитием злокачественного процесса, в частности меланомы кожи, предполагать развитие метастазов до их клинического проявления и включать больных в группу риска для интенсивного наблюдения, своевременно принимать меры для назначения адъювантного лечения. Изобретение может быть использовано в повседневной клинической практике учреждений здравоохранения, НИИ и онкологических диспансеров. 2 пр.

Изобретение относится к медицине и токсикологической химии, а именно к способам определения 3-метоксигидроксибензола в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций, химико-токсикологических, экспертно-криминалистических и ветеринарных лабораторий. Способ осуществляется следующим образом: биологический материал, содержащий 3-метоксигидроксибензол, неоднократно (трижды) по 45 минут обрабатывают алкилацетатом, в качестве которого используется метилацетат, отдельные извлечения объединяют, растворитель из объединенного алкилацетатного извлечения испаряют, остаток неоднократно обрабатывают ацетоном, ацетоновые извлечения объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 18-22°C, затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в эфире, полученный раствор разбавляют гексаном в соотношении 1:1 по объему, экстрагируют буферным раствором с pH 12-13, водно-щелочное извлечение отделяют, подкисляют до pH 2-3, насыщают сульфатом натрия, экстрагируют диэтиловым эфиром, эфирное извлечение отделяют, обезвоживают, упаривают в токе воздуха при 18-22°C, а затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в смеси растворителей гексан-диоксан-пропанол-2, взятых в соотношении 20:5:1 по объему, хроматографируют в макроколонке силикагеля L 40/100 мкм с использованием подвижной фазы гексан-диоксан-пропанол-2 в соотношении 20:5:1 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют в токе воздуха при температуре 18-22°C, затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в дихлорметане и проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом с применением капиллярной колонки длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой (5%-фенил)-метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,6 мл/мин, и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70° до 290°C со скоростью 20°C в минуту, температура инжектора составляет 250°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току и вычисляют количество 3-метоксигидроксибензола исходя из площади хроматографического пика, полученного регистрацией сигнала по характеристическому молекулярному иону 124 m/Z. Способ обеспечивает повышение чувствительности. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к биологии и токсикологической химии и может быть использовано в практике химико-токсикологических, экспертно-криминалистических и клинических лабораторий. Способ осуществляется следующим образом: биологический материал, содержащий новокаин, измельчают, трижды обрабатывают ацетоном, содержащим 0,2-0,4% воды, жидкое извлечение отделяют, ацетон из жидкого извлечения упаривают вместе с водой в токе воздуха при температуре 18-22°C до полного удаления растворителя, остаток, полученный в результате упаривания, неоднократно обрабатывают ацетоном, содержащим 0,2-0,4% воды, ацетоновые извлечения отделяют, объединяют, растворитель из объединенного извлечения испаряют, остаток растворяют в диэтиловом эфире, полученный раствор разбавляют гексаном в соотношении 1:1 по объему, экстрагируют буферным раствором с pH 1-2, кисло-водный экстракт отделяют, нейтрализуют 10% раствором аммиака, подщелачивают аммонийным буферным раствором до pH 9,0-9,5, образующийся водно-щелочной раствор насыщают сульфатом аммония, экстрагируют двукратно порциями органического экстрагента, в качестве которого используют 30% раствор камфоры в метилацетате, при соотношении водной и органической фаз 1:1 по объему, органические экстракты отделяют, объединяют, растворитель из объединенного экстракта испаряют в токе воздуха при температуре 18-22°C до сухого остатка, остаток растворяют в смеси дихлорметана и этанола, взятых в объемном отношении 1:1, полученный раствор вносят в колонку силикагеля КСС №3 80/120 мкм, хроматографируют, используя двухкомпонентную подвижную фазу дихлорметан-этанол в соотношении 1:1 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют, остаток растворяют в метаноле и проводят определение методом газожидкостной хроматографии в сочетании с масс-спектрометрическим детектированием в капиллярной колонке DB-5 MS EVIDEX длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой, представляющей собой 5%-фенил-95%-метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,6 мл/мин и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 80°С, данная температура выдерживается в течение 1 минуты, в дальнейшем температура повышается от 80°C до 200°C со скоростью 40°C в минуту, затем от 200°C до 300°C со скоростью 12,5°C в минуту, конечная температура колонки выдерживается в течение 16 минут, температура инжектора составляет 200°C, температура квадруполя 150°C, температура интерфейса детектора 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току и вычисляют количество новокаина по площади хроматографического пика. Достигается повышение чувствительности определения. 2 пр., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, в частности к способам лабораторной диагностики токсического действия никеля, и описывает способ диагностики окислительного стресса у детского населения в условиях внешнесредового воздействия никеля, при этом осуществляют определение содержания никеля в пробе крови и определение лабораторных показателей: в сыворотке крови - содержание гидроперекиси липидов, а в моче - содержание 8-гидрокси-2-деоксигуанозина, далее проводят корреляционный анализ между указанными лабораторными показателями и уровнем никеля в крови, и при одновременном установлении достоверных зависимостей: повышенное содержание в крови ребенка никеля более 0,083 мг/дм3 и повышенное, по сравнению с референтным уровнем, содержание гидроперекиси липидов в сыворотке крови и повышенное, по сравнению с референтным уровнем, содержание 8-гидрокси-2-деоксигуанозина в моче, диагностируют наличие окислительного стресса в организме на уровне ДНК клетки и мембраны клетки. Изобретение обеспечивает высокую точность диагностики окислительного стресса населения на ранней стадии в условиях внешнесредового воздействия никеля, за счет комплексного использования при интерпретации результатов наряду с лабораторными показателями, характеризующими окислительное повреждение ДНК и мембраны клетки, также показателей содержания химического контаминанта - никеля в крови. 2 табл., 2 ил., 1 пр.

Изобретение относится к медицинским токсикологическим исследованиям, в частности к санитарной токсикологии, и может быть использовано для количественного определения пентахлорфенола в крови. Для осуществления предлагаемого способа количественного определения пентахлорфенола в крови методом газохроматографического анализа производят отбор пробы крови, подкисляют ее до pH 2-3 водным раствором щавелевой кислоты, проводят экстракцию толуолом в течение 5 мин, полученный экстракт центрифугируют в течение 60 мин при 7000 об/мин, далее к полученному экстракту добавляют сульфат натрия для удаления воды и проводят ацетилирование в течение 3 часов введением трифторуксусного ангидрида при непрерывном перемешивании в среде пиридина. Пробу крови, толуол, трифторуксусный ангидрид и пиридин берут в объемном соотношении 5:2,5:0,2:0,1 соответственно. Способ обеспечивает упрощение стадии пробоподготовки при одновременном повышении чувствительности определения пентахлорфенола. 2 з.п. ф-лы, 4 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к способу диагностики когнитивных нарушений у детей при воздействии марганца техногенного происхождения. Сущность способа: по результатам клинической диагностики и нейропсихологического тестирования устанавливают у ребенка наличие когнитивных нарушений. Затем в крови ребенка определяют содержание марганца и при превышении его содержания более референтного уровня определяют уровни: гидроперекиси липидов в сыворотке крови, малонового диальдегида МДА в плазме крови и содержание 8-гидрокси-2-деоксигуанозина 8-OHdG в моче; глутатионпероксидазы ГлПО, Cu/Zn-супероксиддисмутазы Cu/Zn-СОД, уровень антиоксидантной активности ОАС сыворотки кров; глутамата и γ-аминомасляной кислоты в сыворотке крови; содержание гормонов гипофизарно-надпочечниковой оси: уровень адренокортикотропного гормона АКТГ, кортизола и серотонина в сыворотке крови, циклического аденозинмонофосфата цАМФ и циклического гуанозинмонофосфата цГМФ. При повышенном содержании марганца в крови более 0,029 мкг/см3 с не менее чем 50% указанных клинико-лабораторных показателей при их следующей характеристике: повышенные по сравнению с возрастными физиологическими нормами уровни гидроперекиси липидов, МДА, 8-OHdG, глутамата, АКТГ, кортизола, цГМФ, пониженные по сравнению с возрастными физиологическими нормами уровни ГлПО, Cu/Zn-СОД, ОАС, γ-аминомасляной кислоты и цАМФ диагностируют наличие когнитивных нарушений у ребенка, ассоциированных с воздействием марганца. Применение изобретения обеспечивает высокую точность диагностики. 1 з.п. ф-лы, 1 пр.

Изобретение относится к медицинским токсикологическим исследованиям, в частности к санитарной токсикологии, и может быть использовано для количественного определения бенз(а)пирена в крови, для оценки риска здоровью человека и разработки мероприятий по обеспечению химической безопасности. Способ осуществляется следующим образом. Каждую пробу крови анализируют дважды. Свежеотобранную пробу крови центрифугируют со скоростью 2000 об/мин в течение 5 мин. Разделяют на фракции плазмы и форменных элементов. Проводят твердофазную экстракцию плазмы путем последовательного пропускания под вакуумом через картридж с сорбентом Oasis HLB 3 сс 100%-ного ацетонитрила, дистиллированной воды, плазмы, дистиллированной воды, 50%-ного водного раствора ацетонитрила. Затем картридж с сорбентом высушивают под вакуумом и пропускают через сорбент 100%-ный метиленхлорид. Аликвотную часть полученного экстракта хроматографируют. Для получения экстракта форменных элементов проводят дисперсионную твердофазную экстракцию: добавляют к ним 100%-ный ацетонитрил, интенсивно встряхивают. Добавляют набор солей QuECHeRS для экстракции, встряхивают интенсивно, центрифугируют 10 минут со скоростью 2000 об/мин, при этом образуется 3 слоя, верхний слой переносят в другую пробирку, в которой содержится набор солей QuECHeRS для очистки, центрифугируют со скоростью 2000 об/мин, отбирают верхний слой. Экстракт плазмы и форменных элементов анализируют на жидкостном хроматографе Agilent серии 1200 с флуориметрическим детектором на колонке Zorbax длиной 50 мм и внутренним диаметром 4,6 мм с сорбентом Eclipse РАН C18 при температуре колонки 27°C, при использовании в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрила и воды со скоростью потока 1,5 см3/мин и оптимизации элюирования в градиентном режиме (1 мин подача подвижной фазы 60 об.% ацетонитрила и 40 об.% воды, увеличение ацетонитрила с 60 об.% до 68 об.% в течение 3 мин, увеличение ацетонитрила с 68 об.% до 70 об.% в течение 0,5 мин, увеличение ацетонитрила с 70 об.% до 90 об.% в течение 1,5 мин, увеличение ацетонитрила с 90 об.% до 100 об.% в течение 4,5 мин, подача 100%-ного ацетонитрила в течение 1,5 мин, затем снижение ацетонитрила до 60 об.% и подача 60%-ного ацетонитрила в течение 4 мин до уравновешивания колонки). При этом длина волны возбуждения флуориметрического детектора составляла 265 нм и длина волны эмиссии 412 нм. По градуировочному графику отдельно определяют содержание бенз(а)пирена в плазме и форменных элементах, а результаты суммируют. Изобретение обеспечивает высокую чувствительность способа при одновременном обеспечении селективности и его доступности для серийных анализов. 2 з.п. ф-лы, 6 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к способу диагностики токсигенных штаммов Clostridium difficile. Сущность способа состоит в том, что пробу кала пациента выдерживают в абсолютном 96% спирте 30-60 мин при соотношении спирта и кала 1:1, центрифугируют 15-20 минут, далее обрабатывают пробу кала 1% раствором дезоксихолата натрия при соотношении 1:1 30-60 минут, центрифугируют, удаляют надосадочную жидкость, затем проводят первичный посев осадка на среде с добавлением 1% лактозы и 0,5-1,0 мМ арабинозы, инкубируют в анаэростате в течение 24-48 ч, выросшие колонии наносят на стандартные диски, пропитанные хромогенным субстратом - орто-нитрофенил-β-D-галактозидазой. При появлении ярко-желтой окраски диска диагностируют токсигенные штаммы Clostridium difficile. Использование заявленного способа позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью, простотой и доступностью диагностировать токсигенные штаммы Clostridium difficile. 3 пр.
Наверх