Вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак

Авторы патента:

A61P31/12 - противовирусные средства

A61K39/295 - поливалентные вирусные антигены (коровьей оспы или оспы A61K 39/285); смеси вирусных и бактериальных антигенов

Владельцы патента RU 2546247:

Автономная некоммерческая организация "Научно-исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных" (АНО "НИИ ДПБ") (RU)

Изобретение относится к области вирусологии, биотехнологии и ветеринарии. Предложена вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак, содержащая активное вещество и целевые добавки, отличающаяся тем, что в качестве активного вещества она содержит в 1 дозе вакцины смесь суспензии аттенуированного штамма вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, семейства Paramyxoviridae, рода Morbillivirus с титром не менее 10^3,5 ТЦД₅₀; суспензии аттенуированного штамма аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311, семейства Adenoviridae, рода Mastadenovirus с титром не менее 10^3,0 ТЦД₅₀; суспензии аттенуированного штамма парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, семейства Parvoviridae, рода Parvovirus с титром не менее 10^3,0 ГАЕ; суспензии аттенуированного штамма коронавируса собак ГКВ №2314, семейства Coronaviridae, рода Coronavirus с титром не менее 10^3,0 ТЦД₅₀; инактивированной суспензии штамма вируса бешенства Ера - СВ-М20, семейства Rhabdoviridae, рода Lyssavirus в количестве 1 ME, инактивированных суспензий лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola, взятых в смеси в равном соотношении с конечной концентрацией каждого штамма не менее 3×10⁸ инактивированных микробных клеток в 1 дозе вакцины. Изобретение характеризуется более высокой антигенной и иммуногенной активностью, безопасностью, способностью создавать колостральный иммунитет высокой напряженности, высокой стабильностью при хранении, высокой специфичностью по отношению к разным подтипам и основным антигенным вариантам эпизоотических штаммов возбудителей, циркулирующих во внешней среде на территории России и стран СНГ. Вакцина экологически безопасна, т.к. не вызывает диссеминации патогенных агентов. 3 з.п. ф-лы, 13 табл., 8 пр.

Изобретение относится к области вирусологии, биотехнологии и ветеринарии, и касается создания новых вакцин, которые могут быть использованы для специфической профилактики инфекционных болезней собак.Чума, инфекционный гепатит, инфекционный ларинготрахеит, парвовирусный и коронавирусный энтериты, лептоспироз и бешенство являются наиболее распространенными и опасными инфекционными болезнями собак. Данные заболевания встречаются повсеместно у собак разных пород и возрастов. Чума и парвовирусный энтерит являются высококонтагиозными заболеваниями, смертность от которых для щенков может достигать 100%. Инфекционный гепатит и инфекционный ларинготрахеит, вызываемые соответственно аденовирусами 1-го и 2-го типов, поражают собак любого возраста и могут вызывать тяжелые поражения печени и респираторного тракта, приводящие к гибели животного. Коронавирусный энтерит наиболее опасен для щенков в первые месяцы жизни. Бешенство и лептоспироз являются зооантропонозами и представляют серьезную опасность не только для собак, но и для их хозяев. К настоящему времени известно несколько комбинированных вакцин различной валентности против данных инфекций, однако их применение не всегда сопровождается положительным эффектом, т.к. в их составе использованы, в основном, инактивированные штаммы вирусов, которые по иммуногенности значительно уступают живым аттенуированным штаммам. Кроме того, инактивированные вакцины, в отличие от живых, не способны стимулировать клеточный иммунитет, играющий важную роль при защите животных от инфекции. Также на иммуногенность вакцин, используемых для специфической профилактики инфекционных болезней собак, большое влияние имеет система культивирования вирусных штаммов (особенно для парвовируса собак). Использование гетерологич-ных культур, например, культур клеток кошки для получения парвовируса собак, значительно снижает иммуногенность вакцинного парвовируса. Известна вакцина против чумы, инфекционного гепатита и парвовирусного энтерита плотоядных, содержащая лиофилизированную смесь суспензии вакцинного штамма "ВНИИВВмМ-88" чумы плотоядных с титром инфекционной активности 3,5-4,5 lg ТПД 50/см³, суспензии вакцинного штамма "Корнелл-2" инфекционного гепатита собак с титром инфекционной активности 5,5-6,5 lg ТПД 50/см³, суспензии вакцинного штамма "А" панлейкопении кошек с титром инфекционной активности 3,5-4,5 lg ИД 50/см³ и гемагглютинирующей активности 1:32-1:512 и среду высушивания на основе лактозы, сахарозы, сорбита и желатина (патент RU №2154496, А61K 39/295, опубл. 20.08.2000). Недостатком известной ассоциированной вакцины является ограниченность спектра действия, так как она направлена против узкой группы возбудителей заболеваний и не обеспечивает иммунологическую защиту собак от инфекционного ларинготрахеита, коронавирусного энтерита, бешенства и лептоспироза. Кроме того, входящий в ее состав вакцинный штамм "А" панлейкопении кошек обладает недостаточной иммуногенностью и не обеспечивает нужную степень защиты собак против вирулентных штаммов вируса парвовирусного энтерита собак. Известна вакцина "Тетравак" для профилактики чумы, инфекционного гепатита, аденовирусных инфекций и парвовирусного энтерита у собак, включающая инактивированную суспензию штамма Mammaliadenovirus Adenovirus canis-2 "Ада" с титром инфекционной активности 10^4,5-10^5,0 ТЦД₅₀/см³, инактивированную суспензию штамма Virus panleucopenia felline "Ганнибал" с титром инфекционной активности 10^4,0-10^5,0 ИД₅₀/см³ и с активностью в РГА 1°C 64-256 ГАЕ/см³, суспензию штамма Distem₅₀/0,5 см³ гидроокись алюминия, 25%-ный раствор желатозы, 50%-ный раствор сорбита, воду дистиллированную и раствор Хенкса (патент RU №2030917, А61K 39/295, опубл. 20.03.1995). Однако вакцина "Тетравак" не обеспечивает иммунологическую защиту собак от бешенства, коронавирусного энтерита и лептоспироза ввиду отсутствия в вакцине соответствующих антигенов. Кроме того, известная вакцина является недостаточно эффективной, поскольку входящие в ее состав инактивированные штаммы аденовируса собак 2-го типа и вируса панлейкопении кошек не обеспечивают формирование клеточного иммунитета. Известна вакцина "Гексаканивак" для специфической профилактики чумы плотоядных, инфекционного гепатита, аденовироза, парвовирусного энтерита и лептоспироза собак, содержащая культуральную вирусную суспензию штамма Distemper canine "ЭПМ" с титром инфекционной активности 10³-10⁴ ТЦД₅₀/_0,5 см³, инактивированную культуральную вирусную суспензию штамма Mammaliadenovirus Adenovirus canis 2 "Ада" с титром инфекционной активности 10^4,5-10⁵ ТЦД₅₀/см³, инактивированную культуральную вирусную суспензию штамма Virus panleucopenia Felline "Ганнибал" с титром инфекционной активности 10⁴-10⁵ ИД₅₀/см³ и активностью в РГА 1:64-1:256 ГАЕ/см³, лептоспиры серогруппы Canicola штамм ВГНКИ-3 и серогруппы Icterohaemorrhagiae штамм ВГНКИ-2 в равном соотношении при концентрации 300-500 млн. клеток/0,2 см³, адъювант - гидроокись алюминия и белок сыворотки крови, стабилизатор - растворы желатозы и сорбита (патент RU №2045960, А61К 39/295, опубл. 20.10.1995).Известна также ассоциированная вакцина "Биовак" против чумы плотоядных, парвовирусного энтерита, инфекционного гепатита, аденовироза и лептоспироза собак, содержащая в одной прививочной дозе (2 мл) лиофилизированную вируссодержащую жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором в титре не менее 2.2 lg ТЦД₅₀, суспензию адсорбированной инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" в титре не менее 6 log₂ ГАЕ (до инактивации), инактивированную вирусную суспензию штамма Mammaliadenovirus Adenovirus canis - 2 "Ада" в титре не менее 4 lg ТЦД₅₀ и смешанную суспензию лептоспир серогрупп Canicola-3 и Icterohaemorrhagiae ВГНКИ-2, взятых в равном соотношении микробных клеток, при общей концентрации 200-400 млн. м. кл. Сухой компонент вакцины - лиофилизированную вируссодержащую жидкость штамма вируса чумы плотоядных, смешивают с остальными жидкими компонентами вакцины непосредственно перед использованием (патент RU №2150296, А61K 39/295, опубл. 10.06.2000). Недостатком вакцин "Гексаканивак" и "Биовак" является использование инактивированных вирулентных штаммов аденовируса собак и парвовируса собак, которые значительно уступают живым аттенуированным штаммам этих вирусов по иммуногенности. Кроме того, применение для культивирования парвовируса собак культур клеток кошки значительно снижает иммуногенность вакцинного штамма парвовируса, т.к. при пассировании в гетерологичной культуре клеток происходят серьезные изменения антигенной структуры вирионов, что ведет к отличиям в антигенной структуре вакцинного вируса и изолятов, циркулирующих в природе. Существенным недостатком данных вакцин является также то, что они не создают иммунитета против короновирусного энтерита и бешенства собак, что требует дополнительного применения моновакцин. В патенте RU 2400248 описаны комбинированные поливалентные вакцины против патогенов собак, содержащие в одном из вариантов ослабленный штамм Snyder Hill вируса чумы собак (CD), ослабленный штамм Manhattan аденовируса собак 2 типа (CAV-2), ослабленный штамм вируса NL-CPI-5 парагриппа собак (CPI), ослабленный штамм NL-35-D парвовируса собак (CPV), где указанные вирус CD, CAV-2, вирус CPI и CPV находятся в диапазоне от 10² до 10⁹ TCID₅₀ (инфекционной дозы с 50%-ным цитопатическим эффектом в тканевой культуре) на дозу, инактивированный препарат штамма NL-18 коронавируса собак (CCV) из цельных или частичных клеток, где указанный CCV присутствует в количестве по меньшей мере примерно 100 относительных единиц на дозу, препарат клеток лептоспир из сероваров Leptospira bratislava, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira icterohaemorrhagiae и Leptospira pomona и носитель. Данная вакцинная композиция является наиболее близким аналогом (патент RU 2400248, A61К 39/295, опубл. 27.09.2010). Известная комбинированная поливалентная вакцина содержит живые аттенуированные вирусы аденовируса и парвовируса собак, однако ближайший аналог характеризуется недостаточной противоэпизоотической эффективностью, обусловленной тем, что используемые для изготовления поливалентной вакцины штаммы обладают антигенными и иммунобиологическими отличиями по сравнению с аналогичными характеристиками эпизоотических возбудителей, циркулирующих на территории России и стран СНГ. В связи с этим задачей изобретения является создание безопасной и высокоиммуногенной вакцины против основных инфекционных болезней собак, содержащей сбалансированные в антигенном и иммуногенном отношении вирусные и лептоспирозные антигены, обеспечивающих формирование устойчивого иммунитета по отношению к вирусу чумы, аденовирусам, парво- и коронавирусам собак, вирусу бешенства и лептоспирам. Еще одной задачей является получение новых производственных штаммов вируса чумы плотоядных, аденовирусов собак, парво- и коронавирусов собак и вируса бешенства, обладающих высокой антигенной и иммуногенной активностью, стабильно сохраняющих свои свойства и пригодных для создания комбинированных вакцин различной валентности. Технический результат изобретения заключается в расширении арсенала комбинированных вакцин против основных инфекционных болезней собак, в повышении стабильности, антигенной и иммуногенной активности вакцины, а так же в усилении напряженности иммунитета у привитых животных за счет получения вирионов с полным спектром антигенов и обеспечения возможности стимулирования клеточного иммунитета. Технический результат изобретения достигается путем использования в составе вакцины новых производственных штаммов вирусов чумы собак, аденовирусов собак, парво- и коронавирусов собак, вируса бешенства и известных штаммов лептоспир с высокой антигенной и иммуногенной активностью, и образования синергетической композиции поливалентной вакцины при объединении новых производственных штаммов вирусов с известными вакцинными штаммами лептоспир. Сущность изобретения заключается в следующем: предлагаемая комбинированная вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак, содержащая активное вещество и целевые добавки, отличается тем, что в качестве активного вещества она содержит в 1 дозе вакцины смесь суспензии аттенуированного штамма вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, семейства Paramyxoviridae, рода Morbillivirus с титром не менее 10^3,5 ТЦД₅₀; суспензии аттенуированного штамма аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311, семейства Adenoviridae, рода Mastadenovirus с титром не менее 10^3,0 ТЦД₅₀; суспензии аттенуированного штамма парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, семейства Parvoviridae, рода Parvo virus с титром не менее 10^3,0 ГАЕ; суспензии аттенуированного штамма коронавируса собак ГКВ №2314, семейства Coronaviridae, рода Coronavirus с титром не менее 10^3,0 ТЦД₅₀; инактивированной суспензии штамма вируса бешенства Ера - СВ-М20, семейства Rhabdoviridae, рода Lyssavirus в количестве 1 ME; инактивированных суспензий лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola, взятых в смеси в равном соотношении с конечной концентрацией каждого штамма не менее 3×10⁸ инактивированных микробных клеток в 1 дозе вакцины. Входящие в состав комбинированной вакцины штамм вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, штамм аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311, штамм парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, штамм коронавируса собак ГКВ №2314, штамм вируса бешенства ЭРА СВ-20М являются новыми производственными штаммами и впервые используются в составе вакцинных препаратов. Термин «производственный штамм» означает вакцинный штамм, изученный по своим биологическим свойствам, стабильный при хранении и пересевах, безвредный после инактивирования или аттенуирования для животного, хорошо адаптированный к системе культивирования, обладающий высокой антигенной и иммуногенной активностью, как для чувствительной лабораторной модели, так и для естественно восприимчивых животных, а также характеризующийся широким антигенным спектром, доминирующим над эпизоотическими штаммами возбудителя. Термин «эффективное количество» означает количество активного вещества, которое при введении собакам и/или щенкам обеспечивает индукцию специфического иммунного ответа достаточного уровня в организме животных с последующим предупреждением от заболеваний и симптомов заболеваний, подлежащих профилактике. Производственный штамм вируса чумы плотоядных ГКВ №2313 депонирован в Государственной коллекции вирусов Института вирусологии РАМН, имеет регистрационный номер депонента ГКВ №2313 и характеризуется следующими признаками и свойствами.

Источник происхождения:Источником получения нового производственного штамма вируса чумы плотоядных является вирусный штамм №37 (авторское название), выделенный в 1988 г. из тканей селезенки павшего щенка, который адаптирован к перевиваемой культуре клеток почки африканской зеленой мартышки (Vero). Морфологические свойства: Штамм вируса чумы плотоядных ГКВ №2313 относится к семейству Paramyxoviridae, роду Morbillivirus. При электронном микроскопическом исследовании методом негативного контрастирования вируссодержащего культурального материала обнаружены вирионы, характерные для вируса чумы плотоядных: плеоморфные частицы размером 100-300 нм и состоящие из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки. Антигенные свойства: Штамм вируса чумы плотоядных ГКВ №2313 проявляет высокую антигенную и иммуногенную активность и обладает широким антигенным спектром. Сведения о антигенной и протективной активности штамма ГКВ №2313 представлены в табл.1 и 2. Сыворотки животных, иммунизированных другими штаммами вируса чумы плотоядных, подавляют цитопатическую активность штамма ГКВ №2313 (табл.1). Однократно введение штамма ГКВ №2313 вируса чумы плотоядных в дозе 10³ ТЦД₅₀ тхорзофреткам, защищает их при контрольном заражении 100 ЛД₅₀ штамма S. hill (табл.2)

Табл.1
Перекрестная антигенная активность штамма вируса чумы плотоядных ГКВ №2313
Референс-сыворотки к штаммам ВЧП	Титр вируснейтрализующих антител в сыворотке (log2)
Титр референс-сывороток	в РН со штаммом ГКВ №2313 ВЧП
ГКВ №2313	-	9
Onderstepoort	8	9
Rockborn	7	7
S. hill	8	7
ЭПМ	9	8

Табл.2.Результаты контрольного заражения тхорзофреток, вакцинированных штаммом вируса чумы плотоядных ГКВ №2313
№ груп	Кол-во жи	Вакцинация	Контрольное	Результаты контрольного
пы	вотных		заражение	заражения
1	8	ГКВ №2313	S. hill	Животные клинически
		10³ ТЦД₅₀	100ЛД₅₀	здоровы
				Характерные клинические признаки чумы собак (ринит, конъюнктивит, отказ от корма), гибель на 4-6 сутки после заражения

		Контроль, невакцинирован	S. hill 100ЛД₅₀
2	8	Контроль, невакцинирован	S. hill 100ЛД₅₀

Биотехнологические характеристики: Штамм вируса чумы плотоядных ГКВ №2313 хорошо размножается в перевиваемой культуре клеток почки африканской зеленой мартышки (Vero) и накапливается в титре 6,5-7,0 lg ТЦД₅₀/см³. Рекомендуемый способ хранения:

В лиофилизированном состоянии при температуре не выше минус 600°С.

Периодичность освежения:

Один раз в три года в перевиваемой культуре клеток почки африканской зеленой мартышки (Vero).

Дополнительные сведения о штамме:

Штамм вируса чумы плотоядных ГКВ №2313 свободен от посторонней микрофлоры.

Реактогенность - штамм вируса чумы плотоядных ГКВ №2313 реактогенными свойствами не обладает.

Стабильность сохраняет исходные биологические свойства при последовательных пассажах в культуре клеток Vero в течение 10 пассажей (срок наблюдения).

Патогенность - аттенуированный.

Контагиозность - отсутствует.

Онкогенность - отсутствует.

Производственный штамм аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311 депонирован в Государственной коллекции вирусов Института вирусологии РАМН, имеет регистрационный номер депонента ГКВ №2311 и характеризуется следующими признаками и свойствами.

Источник происхождения:

Источником получения нового производственного штамма аденовируса собак 2-го типа является вирусный штамм №46 (авторское название), выделенный в 1989 г. из ткани легких павшего щенка, который адаптирован к перевиваемой культуре клеток почки собаки (МДСК).

Морфологические свойства:

Штамм аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311 относится к семейству Adenoviridae, роду Mastadenovirus. При электронном микроскопическом исследовании методом негативного контрастирования вируссодержащего культурального материала обнаружены вирионы, характерные для аденовируса собак: частицы в форме икосаэдра размером 70-100 нм и состоящие из 252 субъединиц (капсомеров), из вершин которых отходят булавовидные отростки диаметром 2 нм и длиной 20-50 нм.

Антигенные свойства:

Штамм аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311 обладает высокой перекрестной антигенной и иммуногенной активностью по отношению к другим штаммам и полевым изолятам аденовирусов собак 1-го и 2-го типов. Введение животным штамма ГКВ №2311 ведет к формированию гуморального иммунного ответа к различным штаммам и полевым изолятам аденовирусов собак 1-го и 2-го типов (табл.3).

Табл.3
Перекрестная антигенная активность штамма аденовируса собак ГКВ№2311
Штамм/изолят аденовируса для РН	Средний геометрический титр вируснейтрализующих антител в сыворотке крови щенков, иммунизированных штаммом ГКВ №2311 аденовируса (Iog2)
ГКВ№2311	8,2
ВГНКИ	7,8
Ада	8,4
Изолят №344	9
Изолят№1129	7,2

Биотехнологические характеристики: Штамм ГКВ №2311 хорошо размножается в первичных и перевиваемых культурах клеток почки собаки. В указанных культурах клеток вирус накапливается в титре 5,5-6,5 lg ТЦД₅₀/см³.

Рекомендуемый способ хранения:

В лиофилизированном состоянии при температуре не выше минус 600°С.

Периодичность освежения:

Один раз в три года в перевиваемой культуре клеток почки собаки (МДСК).

Дополнительные сведения о штамме:

Штамм аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311 свободен от посторонней микрофлоры.

Реактогенность - штамм аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311 реактогенными свойствами не обладает.

Стабильность - сохраняет исходные биологические свойства при последовательных пассажах в культуре клеток МДСК в течение 10 пассажей (срок наблюдения).

Патогенность - аттенуированный.

Контагиозность - отсутствует.

Онкогенность - отсутствует.Производственный штамм парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312 депонирован в Государственной коллекции вирусов Института вирусологии РАМН, имеет регистрационный номер депонента ГКВ №2312 и характеризуется следующими признаками и свойствами.

Источник происхождения:

Источником получения нового производственного штамма парвовируса собак 2-го типа является вирусный штамм №23 (авторское название), выделенный в 1988 г. из фекалий больных собак с диарейным синдромом, который адаптирован к перевиваемой культуре клеток почки собаки (МДСК). Вирус размножается в эпителиальных клетках тонкого отдела кишечника и на уровне 60-85 пассажа не вызывает заболевания у 8-14 недельных щенков при пероральном, подкожном и внутримышечном введении.

Морфологические свойства:

Штамм парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312 относится к семейству Parvoviridae, роду Parvovirus. При электронном микроскопическом исследовании методом негативного контрастирования вируссодержащего культурального материала обнаружены вирионы, характерные для парвовируса собак: безоболочечные частицы икосаэдрической симметрии размером 20-25 нм.

Антигенные свойства:

Штамм парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312 обладает высокой перекрестной антигенной и иммуногенной активностью по отношению к другим штаммам и полевым изолятам парвовирусов собак 2-го типа. Введение животным штамма ГКВ №2312 ведет к формированию гуморального иммунного ответа к различным штаммам и полевым изолятам парвовируса собак (табл.4).

Табл. 4
Перекрестная антигенная активность штамма парвовируса собак ГКВ№2312
Штамм/изолят парвовируса для РТГА	Средний геометрический титр антигемагглютининов в сыворотке крови щенков, иммунизированных штаммом ГКВ №2312 (log₂)
ГКВ №2312	9,5
Изолят №1367	9,5
Изолят №1446	11,1
Изолят №1490	10,6

Биотехнологические характеристики:

Штамм ГКВ №2312 хорошо размножается в первичных и перевиваемых культурах клеток почки собаки. В указанных культурах клеток вирус накапливается в титре 105-4∗10⁵ ГАЕ/см³.

Рекомендуемый способ хранения:

В лиофилизированном состоянии при температуре не выше минус 600°C.

Периодичность освежения:

Один раз в пять лет в перевиваемой культуре клеток почки собаки (МДСК).

Дополнительные сведения о штамме:

Штамм ГКВ №2312 свободен от посторонней микрофлоры.

Реактогенность - штамм ГКВ №2312 реактогенными свойствами не обладает.

Патогенность - аттенуированный.

Контагиозность - отсутствует.

Онкогенность - отсутствует.

Производственный штамм коронавируса собак ГКВ №2314 депонирован в Государственной коллекции вирусов Института вирусологии РАМН, имеет регистрационный номер депонента ГКВ №2314 и характеризуется следующими признаками и свойствами.

Источник происхождения:

Источником получения нового производственного штамма коронавируса собак является вирусный штамм №49 (авторское название), выделенный в 1989 г. из фекалий щенков с диарейным синдромом, который адаптирован к перевиваемой культуре клеток почки собаки (МДСК).

Морфологические свойства:

Штамм ГКВ №2314 относится к семейству Coronaviridae, роду Coronavirus. При электронном микроскопическом исследовании методом негативного контрастирования вируссодержащего культурального материала обнаружены вирионы, характерные для коронавируса собак: частицы размером 80-100 нм, состоящие из нуклеокапсида спиральной симметрии и липопротеидной оболочки, с характерными булавовидными выступами длиной около 20 нм.

Антигенные свойства:

Штамм ГКВ №2314 обладает высокой перекрестной антигенной и иммуногенной активностью по отношению к другим штаммам и полевым изолятам коронавирусов собак.

Введение животным штамма ГКВ №2314 ведет к формированию гуморального иммунного ответа к различным полевым изолятам коронавирусов собак (табл.5).

Табл.5
Перекрестная антигенная активность штамма ГКВ №2314 корона-вируса собак
Штамм/изолят коронавируса для РН	Средний геометрический титр вируснейтрализующих анти тел в сыворотке крови щенков, иммунизированных мом ГКВ №2311 аденовируса (log2)
ГКВ №2314	6,25
Изолят №344	5,75
Изолят №1129	5,5
Изолят №344	6,75

Биотехнологические характеристики:

Штамм ГКВ №2314 хорошо размножается в первичных и перевиваемых культурах клеток почки собаки. В указанных культурах клеток вирус накапливается в титре 5,5-6,0 lg ТЦД₅₀/см³.

Рекомендуемый способ хранения:

В лиофилизированном состоянии при температуре не выше минус 600С.

Периодичность освежения:

Один раз в три года в перевиваемой культуре клеток почки собаки (МДСК).

Дополнительные сведения о штамме:

Штамм ГКВ №2314 свободен от посторонней микрофлоры.

Реактогенность - штамм ГКВ №2314 реактогенными свойствами не обладает.

Патогенность - аттенуированный.

Контагиозность - отсутствует.

Онкогенность - отсутствует.

Производственный штамм вируса бешенства Ера - СВ-20М депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов Государственного научно-исследовательского Института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов - Центре качества ветеринарных препаратов и кормов (ФГУ-ВГНКИ) и характеризуется следующими признаками и свойствами.

Источник происхождения.

Штамм Ера - СВ-М20 происходит из штамма ЕРА (Abelse M, 1964) и получен путем его адаптации к клеткам ВНК-21 и выделения из популяции штамма ЕРА высокоиммуногенного и репродуктивного биологического варианта вируса.Штамм Ера - СВ-М20 относится к семейству Rhabdoviridae, роду Lyssavirus.

При электронном микроскопическом исследовании методом негативного контрастирования вируссодержащего культурального материала обнаружены вирионы пулеобразной формы длиной 170-380 нм и диаметром 65-70 нм, состоящие из спирально-кольцевого цилиндрического нуклеокапсида и оболочки, характерные для вируса бешенства.

Биологические свойства: Штамм Ера - СВ-М20 интенсивно размножается в культуре ВНК-21, патогенен при внутримозговом и периферическом методах заражения для лабораторных животных: мышей, сирийских хомячков и морских свинок. Титр штамма при внутримозговом заражении мышей массой 7-8 г составляет 8-9,0 lg LD₅₀/мл

Антигенные свойства:

Штамм Ера - СВ-М20 обладает высокой антигенной и иммуногенной активностью для лабораторных животных, собак, песцов.

Рекомендуемый способ хранения:

В лиофилизированном состоянии при температуре не выше минус 600°C.

Периодичность освежения:

Один раз в десять лет в клеточной системе ВНК-21, клетках почки свиньи.

Дополнительные сведения о штамме:

Штамм Ера - СВ-М20 свободен от посторонней микрофлоры, не контаминирован чужеродными вирусами.

Реактогенность - штамм Ера - СВ-М20 реактогенными свойствами не обладает.

Стабильность - сохраняет исходные биологические свойства при последовательных пассажах в культуре клеток ВНК-21 в течение 10 пассажей (срок наблюдения). Патогенность - патогенен при интрацеребральном заражении белых мышей, слабо патогенен при периферических методах заражения белых крыс и морских свинок и непатогенен при периферических методах заражения кроликов, песцов, кошек.

Контагиозность - отсутствует.

Онкогенность - отсутствует.

Используемые для изготовления лептоспирозного компонента вакцин производственные штаммы Leptospira interrogans серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola известны и используются при изготовлении поливалентной вакцины ВГНКИ против лептоспироза животных, вакцины против лептоспироза собак концентрированной. Однако нами было установлено, что при объединении известных штаммов лептоспир с новыми производственными штаммами вирусов в предлагаемой по изобретению комбинации, наблюдается образование синергетической композиции, проявляемой в увеличении напряженности и длительности иммунитета к вирусному и лептоспирозному компонентам вакцины.

В составе предлагаемой вакцины инактивированные суспензии клеток бактерий Leptospira interrogans серогруппы Icterohaemorrhagiae (штамм ВГНКИ-2) и серогруппы Canicola (штамм ВГНКИ-3) содержатся в равных соотношениях с конечной концентрацией не менее 300 млн микробных клеток в 1 дозе вакцины.

Инактивацию вируса бешенства и лептоспир осуществляют любым известным способом, например, путем добавления формалина или димера этиленимина (ДЭИ).

В составе предлагаемой вакцины суспензии штаммов вирусов и лептоспир могут содержаться в различных комбинациях, что будет определять инфекции, для профилактики которых используется данный препарат. При этом суспензии могут содержаться в любых сочетаниях по объему, однако при этом должно соблюдаться условие, описанное ниже.

В составе 1 дозы вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак должно содержаться не менее:

вирус чумы плотоядных	10^3,5 ТЦД₅₀
аденовирус собак 2-го типа	10^3,0 ТЦД₅₀
парвовирус собак	10³ _, ⁰ ГАЕ
коронавирус собак	10^3,0 ТЦД₅₀
вирус бешенства	1 ME
лептоспиры серогрупп
Icterohaemorrhagiae и Canicola	3×10⁸ микробных клеток

Согласно изобретению, комбинированная вакцина также содержит одну или более приемлемую в ветеринарии целевую добавку.

Термин "целевая добавка" означает любые приемлемые в ветеринарии фармацевтические компоненты, которые традиционно используются для обеспечения сохранности антигенов в процессе технологической переработки, приготовления конечной рецептурной формы или последующего хранения и тому подобное.

В качестве целевой добавки вакцина может содержать растворитель, адъювант, солюбилизирующий агент, разбавитель, консервант, стабилизатор, антибактериальное и противогрибковое средства, изотонический агент, агент, задерживающий всасывание, и тому подобное. Разбавители могут включать дистиллированную воду, физиологический раствор, солевой раствор, декстрозу, этанол, глицерин и тому подобное. Изотонические агенты могут включать, наряду с другими, хлорид натрия, декстрозу, маннит, сорбит и лактозу. Стабилизаторы включают альбумин, сахарозу, желатозу, обезжиренное молоко и т.д.

Адъюванты включают вещества, неспецифически усиливающие иммунный ответ к антигенам и могут быть минерального происхождения - гидратокиси алюминия, фосфат алюминия, алюминиево-калиевые квасцы; растительного происхождения - сапонин (Квил-А); адъюванты на основе минеральных и неминеральных масел; синтетический адъювант - мурамилдипептид и др.

В качестве целевой добавки предлагаемая вакцина преимущественно содержит адъювант, например, гидрат окиси алюминия.

При необходимости в качестве целевой добавки предлагаемая вакцина может содержать консервант мертиолят натрия в количестве 1:20000.

Хотя специалист в данной области может легко определить количество и концентрацию адъювантов и добавок, которые можно использовать в контексте настоящего изобретения, настоящее изобретение относится к композициям, включающим предпочтительно от 10 до 20 об.% адьюванта.

В предпочтительном варианте вакцина содержит 6%-ный гель гидрата окиси алюминия в количестве 10 об.%, что соответствует 6 г гидрата окиси алюминия в 1 л вакцины.

Нижеследующие примеры рецептур являются чисто иллюстративными и не ограничивают рамки настоящего изобретения.

Вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак представлена двумя компонентами:

- сухим (лиофилизированным), содержащим смесь суспензий аттенуированных штаммов вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, аденовируса собак второго типа ГКВ №2311, парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312 и коронавируса собак ГКВ №2314;

- жидким, содержащим инактивированные суспензии лептоспир двух серогрупп, инактивированную суспензию штамма вируса бешенства Ера - СВ-М20 и гидроокись алюминия в качестве адъюванта.

Сухой компонент вакцины смешивают с жидким компонентом вакцины непосредственно перед использованием.

Лиофилизированный компонент представляет собой сухую однородную мелкопористую массу желто-розового цвета. Жидкий компонент представляет собой однородную суспензию розового цвета с осадком на дне флакона, который при встряхивании разбивается в гомогенную взвесь.

Жидкий компонент предлагаемой вакцины является растворителем сухого лиофилизированного компонента вакцины.

Перед применением сухой лиофилизированный компонент вакцины растворяют в жидком компоненте, встряхивают до получения однородной взвеси. При применении исключают выпадения компонентов вакцины в осадок. При наличии незначительного неразбивающегося осадка вакцину 3-5 раз пипетируют во флаконе с помощью шприца до получения равномерной гомогенной взвеси.

Вакцина стабильна и сохраняет исходную активность при температуре 2-8°C не менее 18 месяцев (срок наблюдения). Вакцинации подлежат только клинически здоровые щенки и взрослые собаки. Щенкам вакцину вводят в 8-10-недельном возрасте и повторно через 21-28 дней. Ревакцинацию щенков проводят в возрасте 10-12 мес. Взрослых собак вакцинируют один раз в год.

Вакцину с соблюдением правил асептики и антисептики вводят внутримышечно в область бедра в дозе 2,0 см³ сразу же после растворения. Собак мелких и декоративных пород прививают в дозе 1 см³, для чего сухой компонент растворяют в 1 см³ жидкого.

Вакцина апробирована на щенках и взрослых собаках частных владельцев и в собаководческих хозяйствах. Эта апробация подтверждает безвредность препарата и его эффективность, проявляемую в усилении иммунизирующей активности компонентов вакцины. Вакцинация повышает иммунитет у матерей и защищает потомство в период эмбрионального развития и в постнатальный период. При этом индуцируемый иммунный ответ характеризовался высокой специфичностью по отношению к разным подтипам и основным антигенным вариантам эпизоотических штаммов возбудителей, циркулирующих во внешней среде.

У привитых собак вакцина вызывает формирование иммунитета к чуме, аденовирусным инфекциям, парвовирусному, коронавирусному энтеритам, лептоспирозу и бешенству через 2-3 недели после иммунизации, который сохраняется у молодняка 6-8 мес, у взрослых - 12-15 мес.(время наблюдения).

Вакцина по изобретению отличается более высокой антигенной и иммуногенной активностью, способностью создавать колостральный иммунитет высокой напряженности, высокой стабильностью при хранении.

Изобретение иллюстрируется, но не ограничивается следующими примерами.

Пример 1. Получение вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак.

Вакцину готовят из новых производственных штаммов вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, аденовируса собак второго типа ГКВ №2311, парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, коронавируса собак ГКВ №2314, вируса бешенства Ера - СВ-М20, и известных производственных штаммов лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola.

Технологический процесс состоит из следующих основных стадий:

- стадии раздельного получения вирусных суспензий из штаммов вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, аденовируса собак второго типа ГКВ №2311, парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, коронавируса собак ГКВ №2314 и вируса бешенства Ера - СВ-М20;

- определения инфекционной активности каждой вирусной суспензии;

- стадия раздельного получения бактериальных культур лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola и подсчет числа микробных клеток в единице объема, инактивация, концентрирование путем ультрафильтрации; инактивации вируссодержащей культуральной жидкости штамма Ера - СВ-М20 вируса бешенства;

- объединения полученных суспензий вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, аденовируса собак второго типа ГКВ №2311, парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, коронавируса собак ГКВ №2314, добавления стабилизатора, смешивания всех компонентов вакцины с последующей расфасовкой и лиофилизацией; объединения полученных инактивированных суспензии вируса бешенства и бактериальных концентрированных культур лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola, добавления адъюванта с последующей расфасовкой готового продукта.

Стадия получения вирусных суспензий, согласно изобретению, основывается на системе посевных материалов (seed lot system), при которой последовательные серии продукции получают из главного посевного материала (master seed lot) при определенном количестве пересевов (пассажей). В текущем производстве рабочий посевной материал (working seed lot) готовится из главного посевного материала. Готовый продукт производят из рабочего посевного материала, при этом число пересевов из главного посевного материала не должно превышать значения, установленного при клинических испытаниях вакцин, исходя из требований безопасности и эффективности.

Процесс получения системы посевных материалов каждого штамма вируса включает несколько этапов:

- приготовление культуры клеток;

- проведение пассажей вируса;

- получение вирусной суспензии;

- промежуточный контроль штамма вируса;

- лиофилизация, замораживание или инактивирование штамма вируса;

- контроль штамма вируса.

Для культивирования штамма вируса чумы плотоядных ГКВ №2313 используют культуру клеток Vero, штаммов аденовируса собак второго типа ГКВ №2311, парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, коронавируса собак ГКВ №2314 - культуру клеток МДСК, а вируса бешенства Ера - СВ-М20 - культуру клеток ВНС.

Культуры лептоспир Leptospira interrogans серогруппы Canicola (штамм ВГНКИ-3) серогруппы Icterohaemorrhagiae (штамм ВГНКИ-2) выращивают раздельно на жидкой сывороточной питательной среде в течение 7-10 дней до накопления каждого штамма лептоспир не менее 70 млн микробных клеток в 1 см³.

Далее полученные культуры объединят в соотношениях 1:1, добавляют формалин до концентрации 0,15%. Полученную смесь инактивированных суспензий клеток концентрируют ультрафильтрацией до получения бакмассы с содержанием 2 млрд микробных клеток в 1 см³ и более.

Накопление в культуре клеток вирусов чумы плотоядных ГКВ №2313, аденовируса собак второго типа ГКВ №2311 и коронавируса собак ГКВ №2314 оценивают по цитопатическому эффекту. Титр вирусов вычисляют по методу Рида и Менча и выражают в lg ТЦД₅₀/см³.

Накопление парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312 оценивают по гемагглютинирующей активности с использованием эритроцитов свиньи и выражают в ГАЕ/см³.

Накопление в культуре клеток ВНК-21 вируса бешенства штамма СВ-20М оценивают объемным методом Национального института здравоохранения США по его иммуногенной активности для мышей по сравнению с эталонным штаммом вируса бешенства и выражают в ME.

Накопление лепоспир определяют в счетной камере Петрова-Хауссера. При достижении титра вируса чумы плотоядных значений 10^6,5-10^7,0 ТЦД₅₀/см³, аденовируса собак второго типа - 10^5,5-10^6,5 ТЦД₅₀/см³, парвовируса собак 2-го типа - 10⁵-4∗10⁵ ГАЕ/см³, коронавируса собак - 10^5,5-10^6,0 ТЦД₅₀/см³, а вируса бешенства - 2 ME, полученный вируссодержащий материал каждого штамма очищают от балластных примесей центрифугированием или любым другим известным методом.

Объединение полученных суспензий вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, аденовируса собак второго типа ГКВ №2311, парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, коронавируса собак ГКВ №2314 производят таким образом, чтобы после добавления стабилизатора и лиофилизации в 1 см³вакцины содержалось не менее:

вирус чумы плотоядных	10^3,5 ТЦД50
аденовирус собак 2-го типа	10^3,0 ТЦД₅₀
парвовирус собак	10^3,0 ГАЕ
коронавирус собак	10^3,0 ТЦД₅₀.

В результате получают сухой (лиофилизированный) компонент вакцины

Объединение полученных инактивированных суспензий вируса бешенства и бактериальных культур лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola производят таким образом, чтобы после добавления адъюванта в 2 см³ (1 доза) вакцины содержалось не менее:

вирус бешенства	1 ME
лептоспиры	3х10 микробных клеток.

В результате получают жидкий компонент вакцины.

Сухой компонент вакцины смешивают с жидким компонентом вакцины непосредственно перед использованием.

Пример 2. Оценка антигенной активности вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак на экспериментальных моделях.

Для определения антигенной активности комбинированной вакцины по изобретению в качестве экспериментальной модели используют щенков песцов (собак) в возрасте 8-10 недель.

В опыте используют клинически здоровых щенков песцов обоих полов, возрастом 8-10 недель в количестве 60-ти голов. Щенков разбивают на 2 группы - опытную (50 голов) и контрольную (10 голов).

Животным опытной группы вакцину вводят двукратно внутримышечно в дозе 2 см³ с интервалом 21 день. Контрольных щенков не вакцинируют. До вакцинации и после каждой вакцинации у животных берут пробы сыворотки крови.

Парные сыворотки крови, взятые у животных до и после вакцинации, исследуют в РН на наличие антител к вирусу чумы, аденовирусу и коронавирусу собак, в РТГА на наличие антител к парвовирусу собак, в РМА на наличие антител к лептоспирам и на наличие антирабических антител методом FAVN. Результаты эксперимента представлены в табл.6.

Табл.6
Результаты изучения антигенной активности комбинированной вакцины на щенках песцов
Титры антител к антигенам	Средние геометрические титры антител
Титры антител к антигенам	До введения	На 21 день после 1-й вакцинации	На 21 день после 2-й вакцинации
контроль	опытные	контроль	опытные	контроль	опытные
Вирус чумы собак	0	0	0	7,8 log2	0	9,4 log2
Парвовирус собак	5,2 log2	4,4 log2	6,2 log2	8,3 log2	4,2 log2	10 log2
Аденовирус собак	0	0	0	7,9 log2	0	8,2 log2
Коронавирус собак	0	0	0	2,8 log2	0	5,5 log2
L.Canicola	0	0	0	1:200	0	1:800
L. Icterohaemorrha-giae	0	0	0	1:200	0	1:1600
Вирус бешенства	0	0	0	1,18 IU/мл	0	7,45 IU/мл

Данные табл.6 свидетельствуют, что у всех вакцинированных животных на 21 день после второй вакцинации отмечено более чем четырехкратное увеличение титра антител ко всем антигенам, входящим в состав вакцины. Уровень антирабических антител значительно превышает необходимый (0,5 IU/мл). У контрольных животных сероконверсии в отношении исследуемых антигенов отмечено не было.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о высокой антигенной и иммуногенной активности комбинированной вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак.

Пример 3. Определение антигенной активности вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак в отношении всех компонентов и иммуногенной активности против вируса чумы собак.

В эксперименте используют клинически здоровых тхорзофреток обоих полов, возрастом 10-16 недель в количестве 20-ти голов. Животных разбивают на 2 группы - опытную (16 голов) и контрольную (4 головы).

Животным опытной группы вакцину вводят однократно внутримышечно в дозе 2 см³. Контрольных тхорзофреток не вакцинируют. До вакцинации и на 21-й день после вакцинации у животных берут пробы сыворотки крови.

На 21-й день после вакцинации животных заражают штаммом S. hill вируса чумы собак. Вирус вводят внутримышечно в дозе 100 ЛД₅₀.

Учет результатов проводят в течение 14 дней после контрольного заражения. Парные сыворотки крови, взятые у животных до и после вакцинации, исследуют в РН на наличие антител к вирусу чумы, аденовирусу и коронавирусу собак, в РТГА на наличие антител к парвовирусу собак, в РМА на наличие антител к лептоспирам и на наличие антирабических антител методом FAVN. Результаты эксперимента представлены в табл.7.

В результате исследования установлено, что у всех вакцинированных животных на 21 день после вакцинации отмечено более чем четырехкратное увеличение титра антител ко всем антигенам, входящим в состав вакцины. Клинические обследования животных, проводимые в течение двух недель после контрольного заражения, показали, что все вакцинированные животные оказались устойчивыми к заражению их вирулентным штаммом вируса чумы собак. При этом все контрольные животные (не вакцинированные) пали с характерной клинической картиной чумы плотоядных.

Табл.7
Результаты изучения антигенной и иммуногенной активности комбинированной вакцины на тхорзофретках
Титры антител к антигенам	Средние геометрические титры антител
Титры антител к антигенам	До введения	На 21 день после вакцинации
контроль	опытные	контроль	опытные
Вирус чума собак	0	0	0	5,75 log2
Парвовирус собак	2,75 log2	2,25 log2	2,25 log2	7,25 log2
Аденовирус собак	0	0	0	5,251og2
Коронавирус собак	0	0	0	3,5 log2
L.Canicola	0	0	0	1:400
L.Icterohaemorrhagi ае	0	0	0	1:200
Вирус бешенства	0	0	0	1,5 IU/мл
Результаты контрольного заражения			Характерные клинические признаки чумы собак (ринит, конъюнктивит, отказ от корма), гибель на 4-6 сутки после заражения	Животные клинически здоровы

Проведенные испытания показали, что комбинированная вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак обладает выраженной антигенной и иммуногенной активностью.

Пример 4. Определение безвредности вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак.

В эксперименте используют клинически здоровых щенков собак возрастом 8-12 недель (20 голов) и кроликов массой 3,0-3,5 кг (20 голов).

Вакцину вводят подкожно в область лопатки в дозе 5,0 см³ однократно.

Учет результатов безвредности проводят в течение 21-го дня после введения препарата с учетом клинического состояния животных.

Клинические обследования животных в течение 21-го дня после инъекции показали, что введение вакцины не вызывает у животных отклонений в состоянии здоровья и побочных эффектов. Все животные сохраняли нормальные поведенческие реакции, не наблюдалось снижения аппетита и появления угнетенности.

Результаты проведенных исследований свидетельствуют о безвредности комбинированной вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак.

Пример 5. Клинические испытания вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак.

Двадцать служебных собак в возрасте от 1 до 6 лет вакцинируют однократно. До вакцинации и через три недели после прививки у собак берут кровь. Сыворотки крови животных исследуют в реакции нейтрализации (РН) на наличие антител к вирусу чумы, аденовирусам и коронавирусу собак, в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) на наличие антител к парвовирусу собак. Превентивную активность сыворотки в отношении лептоспир исследуют на сирийских хомячках. Наличие в сыворотках антирабических антител проверяют методом иммунофлуоресценции (FAVN). Полученные результаты приведены в табл.8.

Данные табл.8 свидетельствуют, что вакцинированные собаки показали высокий уровень антител к вирусу чумы, аденовирусам и коронавирусу - после однократного введения вакцины, в реакции нейтрализации (РН) отмечался не менее чем двукратный их прирост у всех животных. Также у всех собак было отмечено значительное увеличение титров антигемагглютининов к парвовирусу собак

После вакцинации у привитых собак титр антирабических антител должен составлять не менее 0,5 МU/мл. До вакцинации необходимого титра антирабических антител не было у 25% животных, а у 15% он равнялся 0,5 МU/мл. На 21 день после введения вакцины уровень антирабических антител, превышающий 0,5 МU/мл, был отмечен у 100% собак.

Табл.8

Результаты исследования парных проб сыворотки крови вакцинированных собак

Кличка собаки

Титр антител до и после вакцинации

Превентивная активность к Lept. (% защиты)

CDV (в РН)

CAV (в РН)

CPV (в РТГА)

CCV (в РН

RV (IU\мл)

ДО

после

ДО

после

ДО

после

до

после

ДО

после

до

после

н.о. «Рекс»

1:16

1:128

1:16

1:256

1:512

1:2048

1:2

1:64

1,15

1,51

н.о. «Мухтар»

1:32

1:128

1:256

1:2048

1:8

1:128

4,56

7,92

н.о. «Один»

1:32

1:128

1:32

1:128

1:256

1:4096

1:8

1:128

0,5

4,56

н.о. «Кора»

1:16

1:256

1:16

1:256

1:1024

1:4096

1:4

1:32

0,29

1,15

н.о. «Чинзано»

1:64

1:512

1:32

1:256

1:512

1:4096

1:16

1:32

1,14

1,61

н.о. «Глеб»

1:32

1:256

1:16

1:2048

1:1024

1:2048

1:2

1:128

0,50

1,66

н.о. «Глаша»

1:32

1:128

1:16

1:128

1:512

1:2048

1:8

1:64

0,10

6,01

нем. овч. «Арника»

1:64

1:128

<1:64

1:128

1:256

1:4096

1:8

1:32

6,01

7,92

Лабрадор «Рой»

1:16

1:32

1:256

1:1024

1:2048

1:4

:16

1,99

4,46

нем. овч. «Ирма»

1:128

1:256

1:512

1:128

1:2048

1:4

:16

7,92

100

нем. овч. «Рада»

1:8

1:32

1:128

1:32

1:256

:128

0,22

4,56

нем. овч. «Шера»

1:32

1:128

1:16

1:64

1:256

>!:4096

1:8

:32

7,92

нем. овч. «Монстр»

1:4

1:128

1:8

1:256

1:1024

>1:4096

1:4

:64

0,22

4,56

лабрадор «3еро»

1:16

1:64

1:128

1:256

1:2048

1:4

:32

0,84

1,46

Лабрадор «Зигфри,

1:64

1:128

1:32

1:128

1:512

>1:4096

1:2

1:16

6,01

7,92

нем. овч. «Айка»

1:8

1:64

1:32

1:256

1:4096

1:2

1:128

6,01

7,92

нем. овч. «Ника»

1:4

1:512

1:128

:>4096

1:512

>1:4096

1:8

1:64

4,56

6,02

100

нем. овч. «Академк

1:8

1:128

:128

1:512

1:2048

1:8

1:64

1,01

3,74

нем. овч. «Индус»

1:2

1:128

1:32

1:128

1:4096

1:4

1:32

0,17

1,32

нем. овч. «Арни»

1:32

1:64

1:128

1:1024

1:2048

1:16

0,50

1,51

Средняя превентивная активность сыворотки крови собак, вакцинированных комбинированной вакциной против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак, в отношении лептоспир составила 80%.

Пример 6. Клинические испытания комбинированной вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак.

Были провакцинированы 327 собак в возрасте от 6 недель до 5 лет. Щенков и ранее не вакцинированных взрослых собак вакцинировали двукратно с интервалом 21 день; ранее вакцинированных взрослых собак - однократно.

До вакцинации и через три недели после прививки у собак берут кровь. Сыворотку крови исследуют в реакции нейтрализации (РН) на наличие антител к вирусу чумы, аденовирусам и коронавирусу собак, в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) на наличие антител к парвовирусу собак. Превентивную активность сыворотки в отношении лептоспир исследуют на золотистых хомячках. Наличие в сыворотках антирабических антител проверяют методом иммунофлуоресценции (FAVN).

Так же наблюдают за состоянием животных после прививки и наличием общих и местных реакций (угнетенность, повышение температуры тела, болезненность и припухлость на месте инъекции и др.).

Вакцинацию считают эффективной, если через 3 недели у собак отмечается не менее, чем двукратный прирост антител к вирусу чумы, аденовирусам, парвовирусу и коронавирусу собак; титр антирабических антител не ниже 0,5 МЕ/см³, а превентивная активность сыворотки к лептоспирам - не ниже 40%.

Результаты клинических испытаний представлены в табл.9, которые свидетельствуют, что вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак была эффективна в более чем 99% случаях, а незначительные осложнения наблюдались лишь у 3 вакцинированных животных (0,9%).

Табл.9
Результаты клинических испытаний комбинированной вакцины
Возраст животных	Кол-во животных	Эффективность (%)	Осложнения
8-16 недель	240	98,9	В одном случае припухлость на месте введения
В двух случаях кратковременное повышение температуры и вялость
Старше года	87	99,4	Не отмечено
Всего:	327	99,2	0,9%

Пример 7. Испытание безопасности вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак для внешней среды.

В опыте используют клинически здоровых щенков обоих полов, возрастом 8-10 недель в количестве 10-ти голов. Щенков разбивают на 2 группы - опытную (5 голов) и контрольную (5 голов).

Животным опытной группы вакцину вводят внутримышечно в дозе 2 см³. Контрольных щенков не вакцинируют. Контрольных и опытных животных содержат совместно для выявления возможности горизонтальной передачи вирусных и бактериальных компонентов вакцины от вакцинированных животных к контрольным. До вакцинации и в последующие 7 дней у всех животных берут кровь, мазки из глаз, носа, глотки, мочу, фекалии, где наличие вакцинных вирусов проверяют методом ПЦР.

Наличие лептоспир в моче вакцинированных и контактных щенков проверяют путем темнопольной микроскопии и тест-системой ПЦР.

Парные сыворотки крови, взятые у контрольных животных, исследуют в РН на наличие антител к вирусу чумы, аденовирусу и коронавирусу собак, в РТГА на наличие антител к парвовирусу собак, в РМА на наличие антител к лептоспирам и на наличие антирабических антител методом FAVN. Результаты эксперимента представлены в табл.10.

Табл.10
Результаты выявления вирусных и бактериальных компонентов комбинированной вакцины у вакцинированных щенков
Исследуемый материал	Время выделения (дни после вакцинации)
ВЧП	аденовирус	парвовирус	коронавирус	лептоспиры
Глазные смывы	3	3	-	-	-
Назальные смывы	3	3	-	-	-
Глоточные смывы	4	3	-	-	-
Фекалии	-	-	5	3	-
Кровь	2	-	-	-	-
Моча	-	-	-	-	-

Результаты исследований показывают, что у всех вакцинированных щенков время выделения во внешнюю среду вакцинного вируса чумы плотоядных не превышает 4-х дней, аденовируса и коронавируса - 3 дней, парвовируса - 5 дней. Выделения животными во внешнюю среду лептоспир отмечено не было. Наличие передачи компонентов вакцины контактным (контрольным) животным выявлено не было. Кроме того, у контактных щенков не отмечалась сероконверсия к компонентам вакцины.

Пример 8. Исследование стабильности вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак во время хранения.

В опыте используют по 3 серии комбинированной вакцины против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак, хранившиеся 0 (свежеприготовленные), 6, 9, 12 и 18 месяцев со дня изготовления.

Антигенную активность каждой вакцины определяют путем однократного введения 4 щенкам песцов 10-12 недельного возраста в дозе по 2,0 см³. До вакцинации и через 21 день после введения вакцины сыворотку крови проверяют на наличие специфических антител к вирусам чумы, аденовирусу и коронавирусу собак, в РТГА на наличие антител к парвовирусу собак.

Антигенную активность лептоспирозного компонента исследуют на 5 кроликах массой 3-3,5 кг, для чего вакцину разводят 20% гидроксалом в 5 раз, т.е. на 2 см³ вакцины добавляют 8 см³ 20%-ного гидрата окиси алюминия и вводят каждому кролику с соблюдением правил асептики в ушную вену однократно в дозе 1,0 см³. Через 25 сут после введения вакцины у кроликов берут кровь и полученную сыворотку исследуют в РМА со штаммами лептоспир, входящими в состав вакцины.

Иммуногенность антирабического компонента вакцин определяют объемным методом Национального института здравоохранения США на белых мышах.

Результаты исследования стабильности вакцины во время хранения представлены в табл.11, 12 и 13, которые показывают, что у всех вакцинированных животных на 21 день после вакцинации отмечено более чем четырехкратное увеличение титра антител к вирусным антигенам, входящим в состав вакцины.

Уровень антител у кроликов к лептоспирам составил не ниже 1:400. Иммуногенная активность исследованных серий вакцин не ниже 1,0, что соответствует одной международной единице - 1,0 МЕ/мл, т.е. иммуногенная активность вакцин данных серии не ниже иммуногенности эталонного образца.

Таким образом, проведенные эксперименты свидетельствуют о том, что предлагаемая вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак имеет определяющее преимущество перед другими известными вакцинами по спектру специфической защиты и эффективности действия для восприимчивой группы животных, длительности напряженного иммунитета, безвредности для щенков и взрослых собак, по стабильности сохранения биологических свойств, в т.ч. антигенной и иммуногенной активности на протяжении 18 месяцев (срок наблюдения). Вакцина экологически безопасна, т.к. вызывает незначительную по времени диссеминацию живых вирусных компонентов во внешнюю среду, при невозможности их горизонтальной передачи другим животным и не вызывает диссеминации патогенных агентов.

Табл.11 Антигенная активность комбинированной вакцины на различных сроках хранения
Срок хранения вакцины (мес.)	№серии	Средние геометрические титры антител (log2)
Срок хранения вакцины (мес.)	№серии	До введения	После введения
CDV	CAV	CPV	CCV	CDV	CAV	CPV	CCV
Свежеприготовленная (<1 мес.)	1	0	-	3,25	-	6,25	-	8,25	-
Свежеприготовленная (<1 мес.)	2	0	0	3,5	-	6,0	-	8,0	-
3	0	0	3,75	-	6,75	-	7,75	-
6	1	0	0	3,75	0	5,75	6,0	7,75	3,75
6	2	0	0	3,5	0	5,5	6,75	8,5	3,75
3	0	0	3,25	0	6,0	5,75	8,0	3,5
9	1	0	0	3,75	0	6,0	6,0	7,0	3,25
9	2	0	0	4,0	0	5,5	6,0	7,5	3,75
3	0	0	3,25	0	5,75	6,0	7,75	3,25
12	1	0	0	3,75	0	5,25	5,25	8,25	3,5
12	2	0	0	3,75	0	5,75	5,75	8,75	4,0
3	0	0	3,5	0	5,75	5,25	7,75	3,25
18	1	0	0	3,75	0	6,0	5,25	8,0	3,75
18	2	0	0	3,25	0	5,5	6,0	7,5	3,75
3	0	0	3,75	0	5,5	5,75	8,5	3,5

Табл.12.Антигенная активность лептоспирозного компонента комбинированной вакцины на различных сроках хранения
Срок хранения вакцины (мес)	№ серии	Титр антител
Срок хранения вакцины (мес)	№ серии	До введения	После введения
L.can.	L. ict.	L.can.	L. ict.
Свежеприготовленная(<1 мес)	1	0	0	1:800	1:1600
Свежеприготовленная(<1 мес)	2	0	0	1:800	1:800
3	0	0	1:400	1:400
6	1	0	0	1:800	1:1600
6	2	0	0	1:400	1:1600
-53	0	0	1:1600	1:800
9	1	0	0	1:400	1:400
9	2	0	0	1:800	1	:1600
3	0	0	1:400	1	:1600
12	1	0	0	1:800	1	:1600
12	2	0	0	1:800		:800
3	0	0	1:400		:400
18	1	0	0	1:800		:800
18	2	0	0	1:800		:800
3	0	0	1:400		:400

Табл.13. Иммуногенная активность антирабического компонента комбинированной вакцины на различных сроках хранения
Срок хранения вакцины (мес)	№серии	Индекс иммуногенности вакцины
Свежеприготовленная (<1 мес)	1	1,5
Свежеприготовленная (<1 мес)	2	1,7
3	2,0
6	1	1,5
6	2	1,0
3	1,7
9	1	2,0
9	2	1,5
3	1,0
12	1	1,5
12	2	1,0
3	1,5
18	1	1,0
18	2	1,7
3	1,0

1. Вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак, содержащая активное вещество и целевые добавки, отличающаяся тем, что в качестве активного вещества она содержит в 1 дозе вакцины смесь суспензии аттенуированного штамма вируса чумы плотоядных ГКВ №2313, семейства Paramyxoviridae, рода Morbillivirus с титром не менее 10^3,5 ТЦД₅₀; суспензии аттенуированного штамма аденовируса собак 2-го типа ГКВ №2311, семейства Adenoviridae, рода Mastadenovirus с титром не менее 10^3,0 ТЦД₅₀; суспензии аттенуированного штамма парвовируса собак 2-го типа ГКВ №2312, семейства Parvoviridae, рода Parvovirus с титром не менее 10^3,0 ГАЕ; суспензии аттенуированного штамма коронавируса собак ГКВ №2314, семейства Coronaviridae, рода Coronavirus с титром не менее 10^3,0 ТЦД₅₀; инактивированной суспензии штамма вируса бешенства Ера - СВ-М20, семейства Rhabdoviridae, рода Lyssavirus в количестве 1 ME, инактивированных суспензий лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae и Canicola, взятых в смеси в равном соотношении с конечной концентрацией каждого штамма не менее 3×10⁸ инактивированных микробных клеток в 1 дозе вакцины.

2. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что в качестве инактивированной суспензии лептоспир серогруппы Icterohaemorrhagiae она содержит инактивированную суспензию клеток бактерий Leptospira interrogans штамма ВГНКИ-2, а инактивированной суспензии лептоспир серогруппы Canicola - инактивированную суспензию клеток бактерий Leptospira interrogans штамма ВГНКИ-3.

3. Вакцина по п.1, отличающаяся тем, что в качестве целевой добавки она содержит адьювант.

4. Вакцина по п.3, отличающаяся тем, что в качестве адьюванта она содержит гидроокись алюминия.

Изобретение относится к фармацевтической композиции в твердой лекарственной форме, обладающей вирусотропной и иммуногенной активностью. Указанная композиция включает в качестве субстанции активного начала глутарилгистамин в количестве 18,0 - 75,0 мас.%, а в качестве вспомогательных веществ - целлюлозу микрокристаллическую в количестве 18,0 - 71,0 мас.%, кроскармеллозу натрия в количестве 0,25 - 1,0 мас.%, кремния диоксид коллоидный в количестве 0,5 - 2,0 мас.%, кальция стеарат в количестве 0,5 - 2,0 мас.% и лактозы моногидрат.

Лекарственное средство в форме геля для лечения проявлений герпетической инфекции у больных с ожогами и отморожениями. // 2544163

Изобретение относится к медицине, а именно к созданию лекарственного средства в форме геля для лечения проявлений герпетической инфекции у больных с ожогами или отморожениями.

Ингибиторы вируса гепатита с // 2544010

Изобретение относится к соединению формулы (1-I): где: D и Z каждый независимо отсутствует или представляет собой возможно замещенную линейную алифатическую группу, содержащую от нуля до восьми атомов углерода, где «алифатическая» относится к алкильной, алкенильной или алкинильной группе, а «возможно замещенная» относится к замещению путем независимой замены одного, двух, трех или более атомов водорода заместителями, выбранными из -F, -Cl, -Br, -I, -ОН, -NO2, -N3, -CN, -NH2, -NH-С1-С12-алкила, -NH-С2-С8-алкенила, -NH-C2-C8-алкинила, -NH-С3-С12-циклоалкила, -диалкиламино, -О-С1-С12-алкила, -NHC(O)-C1-C12-алкила, -NHC(O)-С2-С8-алкенила, -NHC(O)-С2-С8-алкинила, -NHC(O)-С3-С12-циклоалкила; А и Е каждый независимо отсутствует или представляет собой циклическую группу, при этом указанная циклическая группа независимо выбрана из группы, состоящей из арила или гетероарила, каждый из которых является возможно замещенным; причем «арил» относится к фенилу, нафтилу, тетрагидронафтилу, инданилу или иденилу; причем «гетероарил» относится к пиридинилу, пиразинилу, пиримидинилу, пирролилу, пиразолилу, имидазолилу, тиазолилу, оксазолилу, изоксазолилу, тиадиазолилу, оксадиазолилу, тиофенилу, фуранилу, хинолинилу, изохинолинилу, бензимидазолилу, бензоксазолилу или хиноксалинилу; причем «возможно замещенный» относится к замещению путем независимой замены одного, двух, трех или более атомов водорода заместителями, выбранными из -F, -Cl, -Br, -I, -ОН, -NO2, -N3, -CN, -NH2, -NH-C1-C12-алкила, -NH-С2-С8-алкенила, -NH-С2-С8-алкинила, -NH-С3-С12-циклоалкила, -диалкиламино, -О-С1-С12-алкила, -NHC(O)-C1-C12-алкила, -NHC(O)-С2-С8-алкенила, -NHC(O)-C2-C8-алкинила, -NHC(O)-C3-C12-циклоалкила; Т отсутствует или представляет собой возможно замещенную алифатическую группу, содержащую от 1 до 24 атомов углерода; причем «алифатическая» относится к алкильной, алкенильной или алкинильной группе; причем «возможно замещенная» относится к замещению путем независимой замены одного, двух, трех или более атомов водорода заместителями, выбранными из -F, -Cl, -Br, -I, -ОН, -NO2, -N3, -CN, -NH2, -NH-С1-С12-алкила, -NH-С2-С8-алкенила, -NH-C2-C8-алкинила, -NH-С3-С12-циклоалкила, -диалкиламино, -O-С1-С12-алкила, -NHC(O)-С1-С12-алкила, -NHC(O)-С2-С8-алкенила, -NHC(O)-C2-C8-алкинила, -NHC(O)-С3-С12-циклоалкила; где от одного до четырех из A, D, Е, Т и Z отсутствуют; кольцо В выбрано из имидазолила, пиразолила, 1,3,4-триазолила, и 1,3,4-оксадиазолила, и кольцо В связано с J через атом С и связано с одним из Z, Е, Т, А и D через атом С; R1 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, циано, возможно замещенного С1-С4алкила, -O-R11, -NRaRb, -C(O)R11, -CO2R11 и -C(O)NRaRb; R11 в каждом случае независимо представляет собой водород или возможно замещенный C1-С8алкил; Ra и Rb в каждом случае каждый независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, C1-С8алкила и С2-С8алкенила; u независимо равен 1, 2 или 3; Q и J представляют собой R6 выбран из группы, состоящей из -C(O)-R12, -C(O)-C(O)-R12, -S(O)2-R12, и -C(S)-R12; R12 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из -O-R11, -NRaRb, и -R13; и причем R13 в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из: водорода, C1-С8алкила, С2-С8алкенила, С2-С8алкинила, С3-С8циклоалкила и С3-С8циклоалкенила, каждый из которых является возможно замещенным, причем «возможно замещенный» относится к замещению путем независимой замены одного, двух, трех или более водородных атомов заместителями, выбранными из -F, -Cl, -Br, -I, -ОН, -NO2, -N3, -CN, -NH2, -NH-С1-С12-алкила, -NH-С2-С8-алкенила, -NH-С2-С8-алкинила, -NH-C3-C12-циклоалкила, -диалкиламино, -О-С1-С12-алкила, -NHC(O)-С1-С12-алкила, -NHC(O)-C2-C8-алкенила, -NHC(O)-С2-С8-алкинила, -NHC(O)-С3-С12-циклоалкила., которые ингибируют РНК-содержащий вирус, в частности вирус гепатита С (ВГС).

Производные урацила или тимина для лечения гепатита с // 2543620

Изобретение относится к соединениям структурной формулы (I), которые обладают свойствами ингибитора HCV полимеразы. В формуле (I) выбрана из группы, состоящей из одинарной углерод-углеродной связи и двойной углерод-углеродной связи; R1 и R3 выбраны из водорода и метила; R2 представляет собой водород; R5 выбран из группы, состоящей из водорода, гидрокси, C1-C6алкила, C2-C6алкенила, C2-C6алкинила, C1-C6алкокси, C2-C6алкенилокси, C3-C6алкинилокси и гало; L представляет собой связь и R6 представляет собой конденсированный 2-кольцевой карбоциклил, где каждый такой заместитель необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из RE, RF, RG, RH, RI, RJ и RK; или L выбран из группы, состоящей из связи, С≡C, C(O)N(RC), N(RD)C(O), C1-C2-алкилена, С(H)2O, ОС(H)2, циклопропил-1,2-ена, C(H)2N(RL), N(RM)C(H)2, C(O)СН2 и СН2С(O), и R6 выбран из группы, состоящей из C5-C6-карбоциклила и 5-6-членного гетероциклила, где каждый такой заместитель необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из RE, RF, RG, RH, RI, RJ, RK, RL и RM; значения заместителей R4, RE, RF, RG, RH, RI, RJ, RK, RL и RM приведены в формуле изобретения.

Лечебно-профилактическое средство против вируса натуральной оспы и способы его получения и применения // 2543338

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и касается лечебно-профилактического средства на основе химического соединения 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновой кислоты (НИОХ-14) в дозе от 4 до 60 мг/кг массы тела, обладающего активностью против вируса натуральной оспы, а также способа его получения и применения против вируса натуральной оспы для профилактики и лечения млекопитающих, включающий его пероральное введение 1 раз в сутки в диапазоне доз от 4 до 60 мг/кг массы тела млекопитающего.

Средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами и способ его применения // 2542490

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой средство для купирования нежелательных поствакцинальных реакций и осложнений при первичном оспопрививании оспенными вакцинами, характеризующееся тем, что содержит 7-[N′-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновую кислоту, а также способ применения такого средства в дозах 3,3-50 мг/кг массы тела один раз в сутки в день вакцинации и в течение двух суток после вакцинации, не снижающий иммуногенности вакцин.

Противовирусное средство // 2542488

Группа изобретений относится к противовирусному средству и предназначено для инактивации широкого круга вирусов. Противовирусное средство содержит в качестве активного ингредиента частицы по меньшей мере одного вида йодида, образованного йодом и элементом, находящимся в 4-6 периодах, 8-10 или 12-15 групп периодической таблицы, Cu или Au.

N-фенил-диоксо-гидропиримидины, используемые в качестве ингибитора вируса гепатита с (hcv) // 2542099

Изобретение относится к соединениям структурной формулы I, их фармацевтически приемлемым солям и кристаллическим формам, которые обладают свойствами ингибитора HCV полимеразы.

Лиофилизированная композиция для индукции иммунного ответа на флавивирус, композиция и способ для ее получения // 2541784

Представленные изобретения относятся к лиофилизированной композиции для индукции иммунного ответа на флавивирус, композиции для получения указанной лиофилизированной композиции и способу получения лиофилизированной композиции.

Способ лечения цитомегаловирусной инфекции // 2540474

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть применено в качестве способа лечения гормонозависимой/гормонорезистентной формы язвенного колита, осложненного оппортунистическими инфекциями.

Способ получения конъюгата капсульного полисахарида haemophilus influenzae тип b (hib) c антигенами для создания иммунобиологических препаратов // 2542393

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа получения конъюгата капсульного полисахарида Haemophilus influenzae тип b (Hib) с антигенами. Представленный способ включает получение смеси столбнячного и дифтерийного анатоксинов, адсорбированных на геле гидроокиси или фосфата алюминия, которую используют в качестве антигена.

Способ иммунопрофилактики массовых вирусных болезней телят // 2535006

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии. Способ иммунопрофилактики массовых вирусных болезней телят заключается в следующем: клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста иммунизируют трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции иммунизируют инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, а перед пассивной (с применением гипериммунной сыворотки) и перед активной (с применением вакцины «Комбовак») иммунизациями однократно в течение 15 дней применяют внутрь комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного.

Способ вакцинопрофилактики респираторных болезней телят // 2532320

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии. Способ вакцинопрофилактики респираторных болезней телят включает иммунизацию клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 в титре не ниже 1:1280, к вирусу инфекционного ринотрахеита в титре 1:256, к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых в титре 1:1024, к респираторно-синцитиальному вирусу в титре 1:128, к ротавирусу и коронавирусу в титре 1:128, в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции вакцинируют двукратным введением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней согласно наставлению.

Поливалентная вакцина против гриппа на основе гибридного белка // 2531235

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины и касается вакцины против гриппа, вызываемого известными штаммами вирусов гриппа А и В, а также возможными реассортантами.

Способ лечения радиационного, химического и/или биологического поражения организма и способ получения глобулинов для лечения радиационного, химического и/или биологического поражения организма // 2524612

Группа изобретений относится к ветеринарии и медицине, в частности к получению и использованию биопрепаратов для иммунотерапии экопатологий. Группа изобретений включает получение белкового антигена из смеси анатоксинов из трех энтеропатогенных вирулентных штаммов возбудителя эшерихиоза телят E.

Композиция антибактериальная, штамм бактериофага escherichia coli, используемый для получения такой композиции. // 2518303

Изобретение относится к области пищевой промышленности, биотехнологии и касается композиции антибактериальной и штамма бактериофага Escherichia coli, используемого для получения такой композиции.

Вакцина ассоциированная против аденовирусной, герпесвирусной инфекцией, парагриппа-3 и вирусной диареи-болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота инактивированная эмульсионная // 2517733

Представленная вакцина содержит концентрированные антигенные материалы из штамма «Adeno III WBR-1-ДЕП» 3-го серотипа I подгруппы, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток почек эмбриона коровы, из штамма «Adeno IV Weybridge СТ2-ДЕП» 4-го серотипа II подгруппы, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток почки теленка Taurus-1, из штамма «ТКА-ВИЭВ-В2-ДЕП» герпесвируса типа I, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток почек эмбриона коровы, из штамма «SF-4-ДЕП» вируса парагриппа-3, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток легких эмбриона коровы и из штамма «ВК-1-ДЕП» вируса вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток почек эмбриона коровы.

Способ профилактики инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота // 2517119

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для профилактики инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота. Способ профилактики инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота включает вакцинацию вакциной ассоциированной против инфекционного конъюнктиво-кератита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа I, при этом за 29-31 день до вакцинации животным вводят подкожно в область верхней трети шеи в дозе 0,045-0,055 мл/кг живой массы иммуностимулирующий препарат «Кероконвитин», полученный на основе цитотоксической сыворотки из крови лошадей-доноров путем гипериммунизации их антигеном, приготовленным из тканей глаз - конъюнктивы и роговицы крупного рогатого скота, переболевшего инфекционным конъюнктиво-кератитом.

Вакцина ассоциированная против вирусной диареи, ротавирусной и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная // 2515058

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается вакцины против вирусной диареи, ротавирусной и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота.

Вакцина ассоциированная против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная // 2504400

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии. Вакцина содержит активное вещество и целевую добавку.

Композиции для лечения и предупреждения комплекса респираторных заболеваний собак // 2553222

Группа изобретений относится к области ветеринарии и биотехнологии. Иммуногенные композиции, которые содержат вирус собачьего гриппа и собачий респираторный коронавирус, а также они могут дополнительно содержать Bordetella bronchiseptica, пертактин, вирус собачьего парагриппа и собачий аденовирус серотипа 2 являются эффективными для лечения или предупреждения комплекса инфекционных респираторных заболеваний собак. При использовании иммуногенных композиций не наблюдается иммунологически негативное взаимодействие между различными вирусными и бактериальными антигенами. 4 н. и 16 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл., 5 пр.