Способ диагностики рака молочной железы



Способ диагностики рака молочной железы
Способ диагностики рака молочной железы
Способ диагностики рака молочной железы

 


Владельцы патента RU 2547583:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и предназначено для определения субтипа рака молочной железы. Определяют уровень экспрессии RIL (PDLIM4) в образце опухолевой ткани пациента с помощью технологии секвенирования следующего поколения NGS или методами Нозерн-гибридизации и ПЦР в реальном времени. При снижении экспрессии RIL (PDLIM4) более чем в два раза в сравнении с его уровнем в нормальных тканях диагностируют субтип злокачественных новообразований молочной железы. Изобретение обеспечивает эффективный способ диагностики субтипа рака молочной железы - опухолей, характеризующихся неполной эпителиально-мезенхимальной транзицией и относительно малоинвазивных. 2 ил., 1 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к области онкологии, и касается нового онкомаркера.

Рак молочной железы занимает первое место среди всех злокачественных заболеваний у женщин. По современным данным, частота развития рака молочной железы в России за последние 15 лет увеличилась более чем в 2 раза. Известно, что заболеваемость женщин, проживающих в крупных городах и индустриальных районах, выше, чем женщин сельской местности. Рак молочной железы встречается также у мужчин. Многие даже не подозревают о возможности развития у них такого заболевания, что ведет к несвоевременному обращению к врачам, поздней диагностике и началу лечения и, как следствие, к низким терапевтическим результатам.

Терапия заболевания в настоящее время основана на комбинации ранней диагностики и одного или нескольких способов лечения, таких как хирургия, лучевая терапия, химиотерапия и гормональная терапия. Курс лечения в конкретном случае рака молочной железы, как правило, выбирают на основе ряда прогностических параметров, включая анализ специфичных опухолевых маркеров.

Диагностических онкомаркеров известно очень много. Большинство из них успешно применяется в диагностике. Основным применением тестов на определение опухолевых маркеров является мониторинг течения заболевания и эффективности хирургического лечения и/или радио-, химио- и гормонотерапии. Показано, что динамика уровня опухолевого маркера отражает изменение состояния пациента. К тому же иногда удается дифференцировать доброкачественные и злокачественные заболевания по скорости повышения уровня маркера, которая при доброкачественных заболеваниях крайне низка. Ряд тестов может также использоваться в качестве диагностических при скрининговых обследованиях.

Таким образом, определение уровня онкомаркеров представляется целесообразным в следующих случаях:

1. Мониторинг течения заболевания.

2. Мониторинг терапии. Возможность обнаружения рецидива и/или метастазов за 6 мес. и более до начала клинических проявлений, что важно для определения тактики дальнейшего лечения.

3. Идентификация резидуальных опухолей. Отсутствие или незначительное снижение концентрации опухолевого маркера после хирургического вмешательства свидетельствует о неполном удалении опухоли либо о наличии множественных опухолей.

4. Прогнозирование развития некоторых опухолей.

5. Раннее выявление онкозаболеваний у пациентов группы высокого риска. Онкомаркеры могут как продуцироваться самой опухолью, так и вырабатываться организмом в ответ на развитие опухоли. Биомаркеры, используемые для прогнозирования и диагностики опухоли, могут иметь разную природу и происхождение. В современной медицине выделяют следующие категории: генетические, эпигенетические, биомаркеры белковой природы, гликаны (все моно- и полисахариды) и визуальные маркеры.

В настоящее время активно развивается область применения генетических и белковых биомаркеров как наиболее достоверных и простых в измерении.

Наиболее распространенные диагностические тест-системы построены на анализе биомаркеров в физиологических жидкостях, крови и мочи, однако, хорошим материалом для получения красноречивых результатов исследований является также биопсийный материал.

В науке и медицине онкомаркеры в основном используют с тремя основными целями:

1. Диагностической - для диагностики рака на ранних стадиях.

2. Прогностической - для прогноза степени агрессивности опухоли, ее характеристики и оценки рисков и шансов на выздоровление.

3. Предсказательной - для предсказания поведения опухоли в ответ на разные типы лечения. Является необходимой как при выборе вида терапии, так и при подборе конкретных лекарственных препаратов.

Оценка рисков.

Оценка онкомаркеров, ассоциированных с генетическими мутациями и эпигенетическими перестройками, имеет смысл при индивидуальном подходе для определения у пациентов предрасположенности к развитию того или иного вида рака. Известно, что мутации в определенных генах могут способствовать развитию рака и при обнаружении оных у пациентов делается вывод о повышенной предрасположенности к соответствующему типу рака.

Так, например, мутации в генах KRAS, р53, EGFR, erB2 характерны для рака кишечника, желудка, печени и поджелудочной железы; мутации в генах BRCA1 and BRCA2 - для рака молочной железы и яичников; аномальное метилирование в онкосупрессорных генах р16, CDKN2B и pl4ARF для рака мозга, гиперметилирование MYOD1, CDH1 и CDH13 для рака шейки матки, а р16, р14 и RB1 - для рака ротовой полости.

Диагностика.

Использование онкомаркеров оказывается весьма ценным при непосредственном установлении диагноза, в частности определении принадлежности опухоли к первичной или метастазам за счет сравнения хромосомных нарушений, обнаруженных в первичных и повторных опухолях. Если нарушения совпадают, то вторичная опухоль является метастазом первичной, а если различаются - то независимо возникшим новообразованием.

Прогноз и предсказание терапии. Еще одно применение онкомаркеры находят в прогнозировании болезни после того, как рак был диагностирован. Основываясь на присутствии или повышенной экспрессии некоторых биомаркеров, например, можно определить степень агрессивности рака и его потенциальный ответ на терапию. В качестве примера таких прогностических биомаркеров можно привести ингибитор металлопептидазы 1 (TIMP1) - маркер, ассоциированный с более агрессивными типами миеломы; а повышенный уровень эстрогенового (ER) или прогестеронового (PR) рецепторов характерен для пациентов с лучшей выживаемостью при раке молочной железы; гиперэкспрессия гена HER2 при раке молочной железы говорит о хорошем потенциальном ответе на терапию препаратом трастузумабом; а, например, опухоль с мутацией в 11 экзоне протоонкогена c-KIT с высокой вероятностью будет восприимчива к терапии иматинибом.

Фармадинамика и фармакинетика.

Онкомаркеры также используют для подбора наиболее оптимального режима лечения для каждого конкретного пациента. Из-за различия в эффективности метаболических процессов разные люди по-разному могут реагировать на определенные препараты, которые, накапливаясь в организме, могут представлять для некоторых большую опасность. Все эти показатели обязательно учитываются при расчете дозировок лекарственных препаратов при терапии. Так, например, пациенты с мутацией в гене ТРМТ не способны метаболизировать большие количества препарата меркаптопурина, используемого при терапии лейкемии, поэтому лечение этим препаратом назначается им с учетом особенностей организма.

Мониторинг эффективности терапии. Еще одно применение биомаркеры нашли в мониторинге эффективности примененной противораковой терапии во времени. Например, белок SlOO-beta при положительном ответе на терапию значительно сокращается в количестве в ряде меланом и его регулярная количественная оценка позволяет оценить эффективность примененного лечения.

Рецидивы.

Показатели некоторых онкомаркеров позволяют также сделать предсказание о вероятности рецидивов заболевания. Поиск препаратов для терапии рака.

Онкомаркеры оказываются весьма полезными не только в диагностике заболеваний, но и для поиска новых препаратов для химиотерапии, выступая в качестве мишеней при скрининге библиотек химических соединений.

Из уровня техники известен патент RU 2473555, опубл. 2013-01-27, который раскрывает способ оценки клинического прогноза для индивида, страдающего раком молочной железы, основанный на измерении экспрессии генов в образце рака молочной железы в следующих дескрипторных группах: (1) ERBB2, STAED3, GRB7, THRAP4, PPARBP; (2) ESR1, GATA3, ХВР1, TFF3, ACADSB; (3) KRT5, KRT17, TRIM29, GABRP; (4) KRT18, KRT8, PPP2CA, KRT8L2; (5) PLAU, COL5A2, FAP, THY1; (6) STAT1, UBE2L6, TAP1, LAP3 и (7) SEACAM5, SEACAM6, SEACAM7. При этом сверхэкспрессия большинства генов в дескрипторной группе по сравнению с образцом нормальной ткани молочной железы указывает на то, что образец ткани является положительным для данной группы, а отсутствие сверхэкспрессии большинства генов в дескрипторной группе по сравнению с образцом нормальной ткани молочной железы указывает на то, что образец ткани является отрицательным для данной группы.

Известна заявка ЕА 200971079 А1, касающаяся определенных генетических вариантов на Chr5pl2 и Chrl0q26 в качестве вариантов предрасположенности к раку молочной железы. Описываются способы управления течением заболевания, включающие диагностирование повышенной и/или пониженной предрасположенности к раку молочной железы, способы прогнозирования ответа на лечение и способы определения прогноза с применением таких вариантов.

Заявка US 20110251082 касается использования 2-мерного дифференциального геля (2D-ПГЛП) и масс-спектрального метода для идентификации биомаркеров рака молочной железы в трансформированных клетках молочной железы. Определены многочисленные предполагаемые маркеры для различных стадий рака молочной железы. Оценивалась экспрессия различных белков, в том числе PdLIM1. Однако был сделан вывод о потенциальной важности как маркера парвабумина и противоположном эффекте PdLIM1. Не представлено сведений о PdLIM4.

Заявка WO 2009124251 касается способа диагностики метастатического потенциала опухолей, в том числе клеток рака груди. В данном подходе предлагается измерение в клетках пациентов уровней пяти и более маркеров, выбранных из группы генов типизации TGF [Beta]:

Хотя среди используемых генов ген PDLIM4 упомянут, не раскрыто его использование как единственного маркера рака груди вне комбинаций с другими генами.

На данный момент не существует тестов на онкомаркеры, обладающих 100% чувствительностью и специфичностью. Это обстоятельство серьезно ограничивает их использование в первичной диагностике онкологических заболеваний, поэтому для достижения достоверного результата приходится комбинировать показатели нескольких маркеров. Постепенное накопление знаний относительно механизмов малигнизации ткани и нарушений, потенциально лежащих в основе опухолеобразования, приводит к тому, что в рамках существующих, известных, типов опухолей выделяют подгруппы, обладающие различными типичными профилями генетических нарушений и для которых возможно разработать высокоспецифичные терапевтические подходы. Таким образом, разработка новых биомаркеров опухолей способствует более точной и детальной классификации и, как следствие, дает возможность применять более эффективные терапевтические подходы.

Задача изобретения - разработка способа диагностики рака молочной железы и его применение для выявления отдельного подтипа злокачественных новообразований.

Задача решается за счет способа диагностики рака молочной железы с использованием биомаркера, основанного на эпигенетической супрессии гена PDLIM4/RIL, который может быть использован для диагностики и лечения рака молочной железы, оценки агрессивности заболевания и подбора способа терапии опухоли.

Предложен способ диагностики субтипа рака молочной железы, основанный на определении уровня экспрессии PDLIM4/RIL в опухолевой ткани с помощью технологии секвенирования следующего поколения NGS (next-generation sequencing) или методами Нозерн-гибридизации и ПЦР в реальном времени. Снижение экспрессии PDLIM4/RIL в образце пациента более чем в два раза в сравнении с его уровнем в нормальных тканях свидетельствует о злокачественном процессе (раке молочной железы по RIL-негативному типу) и неблагоприятном прогнозе.

Ген PDLIM4/RIL был впервые картирован на участке длинного плеча хромосомы 5 (5q31), часто делетирующей при ряде злокачественных заболеваний человека. Помимо делеций, ген PDLIM4/RIL часто подвергается эпигенетической супрессии, в результате которой его экспрессия подавляется. В таких случаях отмечается меньшая степень морфологической трансформации и пониженная частота активации тирозиновых киназ.

Технический результат, достигаемый при использовании изобретения - быстрая диагностика подтипа рака молочной железы путем измерения уровня транскриптов гена RIL будет способствовать адекватному выбору терапии. Предлагаемый подход позволит поставить правильный диагноз на ранних доклинических и клинических стадиях развития, в случаях малосимптомного, атипичного течения заболевания, уточнить характер новообразований молочной железы, в более короткие сроки определить тактику лечения. В связи со значительным разнообразием течения заболевания у пациентов медицина будущего будет больше ориентироваться на персонифицированные подходы к терапии. В этом смысле изобретение является актуальным, поскольку направлено на выявление распространенного подтипа рака молочной железы, требующего персонифицированного подхода к лечению. Также, определение детального механизма малигнизации опухолей этого подтипа открывает перспективы к созданию высокоизбирательных эффективных химиотерапевтических препаратов, направленных на ключевые компоненты нарушенных сигнальных путей.

Нами впервые была замечена корреляция супрессии гена PDLIM4/RIL с морфологией и биохимическими свойствами опухолевых клеток и установлена роль опухолевого супрессора в злокачественной трансформации клеток молочной железы. Результаты наших исследований указывают на то, что в рамках группы аденокарцином молочной железы, характеризующихся тройным негативным фенотипом, можно выделить крупную подгруппу опухолей, в которых в основе опухолевой трансформации лежит эпигенетическая супрессия PDLIM4/RIL. Подавление PDLIM4/RIL ведет к увеличению функциональной активности фосфатазы PTP-BL, которая, в свою очередь, дефосфорилирует и переводит в функционально-активную форму рецептор-неассоциированную тирозиновую киназу c-Src, ответственную за активизацию пролиферации, подавление про-апоптотических сигналов, увеличение клеточной подвижности. Возможность осуществления изобретения может быть продемонстрирована следующими примерами.

Пример 1. Определение роли PDLIM4/RIL в злокачественной трансформации.

Проведен анализ экспрессии его мРНК в образцах злокачественных новообразований из разных органов по сравнению с окружающей нормальной тканью методом Нозерн-гибридизации с Cancer Profiling Array I (BD Clontech) (241 пара образцов «опухоль/норма» из 8 тканей человека). Было обнаружено, что уровень экспрессии PDLIM4/RIL был подавлен в 2 и более раз в 43% (23 из 53) образцов злокачественных опухолей молочной железы (рис. 1). Для независимого подтверждения этих данных был проанализирован уровень PDLIM4/RIL в панели из 8 линий клеток карцином молочной железы человека. В четырех случаях из 8 экспрессия PDLIM4/RIL оказалась ниже уровня детекции, в остальных 4 клеточных линиях уровень PDLIM4/RIL был сравним с контролем (рис. 2а, б).

Сопоставление статуса PDLIM4/RIL с морфологией клеток позволило показать, что высокий уровень экспрессии PDLIM4/RIL коррелирует с повышенной агрессивностью культур рака молочной железы MDA-MB-231, -435S, -436 и ВТ-474 (рис. 2в). Клетки этих линий характеризуются звездчатой или веретенообразной формой, слабой степенью адгезии и распластанности, высокой скоростью роста и видимым отсутствием межклеточных контактов. Малоагрессивные клеточные линии MCF-7, ВТ-20, T-47D и MDA-MB-468 с недетектируемым уровнем PDLIM4/RIL, наоборот, сохраняют эпителиальную морфологию и межклеточные контакты. Анализ экспрессии эпителиального маркера Е-кадгерина подтвердил эффекты, наблюдаемые на уровне клеточной морфологии. Клетки линий MDA-MB-231, -435S, -436 и ВТ-474 не экспрессируют Е-кадгерин (методами иммуноблоттинга и ОТ-ПЦР) и не имеют межклеточных контактов, т.е. подверглись эпителиально-мезенхимной трансформации, которая является необходимым условием высокой степени агрессивности эпителиальных опухолей. Линии MCF-7, ВТ-20, T-47D и MDA-MB-468, наоборот, сохраняли высокие уровни Е-кадгерина, межклеточные контакты и эпителиальный фенотип (рис. 2).

Тем не менее, ни эктопическая экспрессия PDLIM4/RIL в малоагрессивных культурах клеток рака молочной железы, ни подавление его экспрессии в высокоагрессивных линиях с помощью коротких интерферирующих РНК не привела к реверсии фенотипов или изменению статуса Е-кадгерина. Из этого следует, что обратная корреляция между экспрессией этих двух белков - следствие их корегуляции одним сигнальным каскадом.

Известно, что экспрессия Е-кадгерина регулируется на уровне транскрипции тремя белками-репрессорами Snail, Slug и Twist, которые в свою очередь являются компонентами TGFβ/R-, NFkB-, ERK- или β-катенин- зависимых сигнальных путей. Была выявлена корреляция экспрессии PDLIM4/RIL и транскрипционного репрессора Slug, обратно коррелировавшие с уровнем мРНК Е-кадгерина (рис. 2а), причем эти события не зависели ни от NFkB, ни от ERK, ни от β-катенинового каскадов. При иммуноблот-анализе в тотальных белковых экстрактах малоагрессивных клеточных линий рака молочной железы была детектирована процессированная форма TGFβ1, выполняющего в нормальных условиях функцию сигнала к дифференцировке. Связывание трансформирующего фактора β со своим рецептором приводит к фосфорилированию, гетеродимеризации и транспорту в ядро белка Smad2, транскрипционного фактора, ответственного за активацию генов-мишеней сигнального каскада TGFβ. Выявление фосфорилированной формы Smad2 подтвердило факт активации TGFβ в этих клетках (рис. 2б). При этом тотальные количества Smad2 во всех исследованных клетках были сравнимыми.

Экспрессия PDLIM4/RIL подавляется в злокачественных новообразованиях молочной железы и опухолевых клеточных линиях того же происхождения, что сопровождается активацией сигнального каскада, инициируемого TGFβ1, и сохраненной экспрессией эпителиального маркера Е-кадгерина. Известно, что сверхэкспрессия близкородственного белка Mystique увеличивает зависимость клеток от субстрата. PDLIM4/RIL показывает аналогичный эффект, а его выключение способствует независимости клеток от прикрепления и более эффективному метастазированию. При снятии проблемы зависимости от адгезии с помощью какого-либо другого механизма может происходить отбор клеток с повышенной экспрессией PDLIM4/RIL, что будет способствовать усилению их миграции и пролиферации, повышая агрессивность опухоли.

Таким образом, нами показано, что низкий уровень экспрессии гена PDLIM4/RIL может служить эффективным диагностическим маркером для выявления отдельного подтипа злокачественных новообразований молочной железы - опухолей, характеризующихся неполной эпителиально-мезенхимальной транзицией и относительно малоинвазивных.

Рис.1. Экспрессия мРНК PDLIM4/RIL в человеческих опухолях различного происхождения по сравнению с нормальными тканями. Нозерн-анализ образцов тотальной РНК, представленных на микропанели Cancer Profiling Array I (BD Clontech), с помощью PDLIM4/RIL-специфического зонда. Все значения нормализованы по мРНК GAPDH. а - вид ауторадиограммы микропанели (О - образец тотальной РНК из опухоли; Н - из окружающей морфологически нормальной ткани от того же пациента); б - доля пар «норма : опухоль», в которых экспрессия мРНК PDLIM4/RIL в опухоли подавлена в 2 и более раз (Н/О>2), не изменена (0.5<Н/О<2) или повышена в 2 и более раз (Н/О<0.5). Пунктиром выделена область ауторадиограммы блота (а) и столбчатой диаграммы (б), соответствующие парам «норма : опухоль» из молочной железы.

Рис.2. Экспрессия PDLIM4/PIL и особенности морфологии и сигнальных каскадов линий клеток рака молочной железы человека. а - экспрессия мРНК PDLIM4/RIL, Е-кадгерина и Slug по данным ОТ-ПЦР; б - вестерн-блот анализ экспрессии белков PDLIM4/RIL, Е-кадгерина, трансформирующего фактора роста бета (TGFβ) и активированного Smad2; в - морфология клеток использованных культур опухолей молочной железы и первичного эпителия. Световая микроскопия. Черной рамкой обозначены культуры клеток с высокой экспрессией PDLIM4/RIL, серым пунктиром - линии, где экспрессия PDLIM4/RIL недетектируема.

Способ диагностики субтипа рака молочной железы, характеризующийся тем, что определяют уровень экспрессии RIL (PDLIM4) в образце опухолевой ткани пациента с помощью технологии секвенирования следующего поколения NGS или методами Нозерн-гибридизации и ПЦР в реальном времени и при снижении экспрессии RIL (PDLIM4) более чем в два раза в сравнении с его уровнем в нормальных тканях диагностируют субтип злокачественных новообразований молочной железы - опухолей, характеризующихся неполной эпителиально-мезенхимальной транзицией и относительно малоинвазивных.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области медицины, фармацевтики и биохимии и касается маркера метастазов злокачественности меланомной опухоли, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины, в частности онкологии и молекулярной биологии. Предложены способ и набор праймеров и зонда с последовательностями SEQ ID NO: 1, 2 и 3 для осуществления полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для диагностики светлоклеточной почечноклеточной карциномы (СПК).

Предложенная группа изобретений относится к области медицины, в частности онкологии и молекулярной биологии. Предложены способ и набор праймеров и зонда с последовательностями SEQ ID NO: 1, 2 и 3 для осуществления полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для диагностики светлоклеточной почечноклеточной карциномы (СПК).

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунотерапии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения у пациента с раком. Для этого пациенту вводят иммуногенную композицию, которая содержит рекомбинантный вирусный вектор, экспрессирующий in vivo весь или часть MUC-1 антигена.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки языка по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости.

Изобретение касается диагностического реагента для диагностики рака поджелудочной железы и/или панкреатита, включающего α1→6 специфический лектин, который отличается сильным сродством и высокой специфичностью к фукозе.

Группа изобретений основана на применении рецептора хемокина CCR4 в качестве маркера для идентификации и/или стадирования рака. Информацию диагностического характера получают путем измерения уровней CCR4, экспрессируемого эпителиальными опухолевыми клетками в образце солидной или негематологической опухоли пациента.

Изобретение относится к способу индуцирования противоопухолевого иммунитета приведением в контакт антиген-представляющей клетки с иммунологически активным фрагментом, выбранным из группы, состоящей из: (i) иммунологически активного фрагмента полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой ТОМ34, представляющего собой декапептид, обладающий способностью индуцировать цитотоксические Т-клетки, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7; (ii) иммунологически активного фрагмента полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой ТОМ34, представляющего собой пептид, обладающий способностью индуцировать цитотоксические Т-клетки, где пептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7, в которой 1 или 2 аминокислоты замещены или добавлены; (iii) иммунологически активного фрагмента (ii), где вторая аминокислота с N-конца аминокислотной последовательности SEQ ID NO:7 представляет собой фенилаланин, тирозин, метионин или триптофан; и (iv) иммунологически активного фрагмента (ii), где С-концевая аминокислота аминокислотной последовательности SEQ ID NO:7 представляет собой фенилаланин, лейцин, изолейцин, триптофан или метионин, или с полинуклеотидом, кодирующим указанный фрагмент, или с вектором, содержащим этот полинуклеотид.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен L-фукоза α1→6-специфичный лектин, экстрагируемый из базидиального гриба или сумчатого гриба, характеризующийся пиковым значением молекулярной массы около 4500 m/z, определяемым при масс-спектрометрическом анализе MALDI-TOF.

Изобретение относится к диагностическим методам в медицине и может быть использовано в онкологии при адъювантной терапии опухолей, а также при длительном наблюдении за пациентами после оперативного удаления опухолей.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к способу выявления пациентов, с развивающимся лейкозом и/или лимфомой и/или страдающего лейкозом и/или лимфомой, с риском развития побочных эффектов при введении биспецифичного антитела CD19×CD3. Для этого перед лечением у пациентов определяют соотношение В:Т клеток, при этом соотношение 1:9 или ниже указывает на риск возникновения возможных побочных эффектов у указанного пациента. Далее режим дозирования введения биспецифичного антитела CD19×CD3 предусматривает: (a) введение первой дозы биспецифичного антитела CD19×CD3 в течение первого промежутка времени; и затем (b) введение второй дозы указанного антитела в течение второго промежутка времени; при этом указанная вторая доза превышает указанную первую дозу. Использование данного способа позволяет при лечении пациентов с лейкозом и/или лимфомой облегчить течение или предотвратить возникновение побочного эффекта, обусловленного введением указанного биспецифичного антитела. 33 з.п. ф-лы, 2 табл., 9 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для определения доброкачественных и злокачественных новообразований щитовидной железы (ЩЖ) человека. Осуществляют взятие образца ткани опухоли ЩЖ и прилежащей неизмененной ткани железы в качестве контроля, выделение микроРНК из образцов, проведение реакции обратной транскрипции, измерение уровня экспрессии микроРНК-21, -221, -222, -155, -205 методом ПЦР в реальном времени с последующим сравнительным анализом изменения уровня экспрессии микроРНК в норме и при опухолевых образованиях ЩЖ и составлением заключения о наличии и типе новообразования. В случае изменения уровня экспрессии вышеуказанных микроРНК не более чем в 4 раза как в сторону повышения, так и в сторону понижения экспрессии по отношению к контрольному образцу, делают заключение о доброкачественном новообразовании. В случае изменения уровня экспрессии микроРНК более чем в 4 раза делают заключение о злокачественном новообразовании. Изобретение обеспечивает эффективное определение доброкачественных и злокачественных новообразований ЩЖ человека, что способствует выбору тактики последующей терапии. 5 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения ответа субъекта, у которого диагностирован рак молочной железы, на антиэстрогенную терапию. Сущность способа определения ответа субъекта, у которого диагностирован рак молочной железы, на антиэстрогенную терапию состоит в том, что определяют ЦОК-индекс эндокринной терапии (ЦОК-ИЭТ). При значении ЦОК-ИЭТ от 0-3 определяют благоприятный ответ на антиэстрогенную терапию, при значении 4-6 - умеренный ответ, а при значении 7-14 - слабый ответ. Использование заявленного способа позволяет эффективно определить ответ субъекта на антиэстрогенную терапию. 9 з.п. ф-лы, 7 табл., 8 ил., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения раннего рака молочной железы (РМЖ), включающего выполнение радикальной мастэктомии. Для этого до проведения хирургического вмешательства и на первые сутки после хирургического вмешательства забирают кровь в объеме 8-10 мл для выявления опухолевых клеток. При выявлении циркулирующих опухолевых клеток в крови на первые сутки после операции при исходном нулевом уровне в план лечения включают курс полихимиотерапии по схеме FAC в раннем послеоперационном периоде. Изобретение позволяет оценить степень распространенности опухолевого процесса при «раннем» РМЖ и определить план дальнейшего лечения. 1 пр.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины, молекулярной биологии и биотехнологии. Предложен способ определения чувствительности клеток рака легкого к цисплатину, включающий определение уровня экспрессии генов MLH1, ERCC1, DDB2, AKR1B1, FTL в зависимости от IC50 цисплатина для известных клеточных линий, построение градуировочной прямой зависимости IC50 цисплатина для этих клеточных линий от полученного уровня экспрессии указанных генов и гибридизацию на микрочипе. Предложен также набор олигонуклеотидных зондов, представленных SEQ ID NO: 9-13. Предложенная группа изобретений обеспечивает эффективные средства и методы для определения чувствительности клеток рака легкого к цисплатину. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, в частности онкологии, и предназначено для прогнозирования гематогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы. Способ прогнозирования осуществляют следующим образом: определяют молекулярно-генетический тип рака молочной железы с помощью иммуногистохимического исследования препаратов ткани первичной опухоли, учитывают размер первичной опухоли, определяют наличие лимфогенных метастазов, проводят морфологическое исследование строения первичной опухоли путем подсчета количества разных типов структур в инфильтративном компоненте опухоли и оценивают выраженность гиалиноза стромы опухоли. Значение вероятности развития гематогенных метастазов определяют по формуле. При P≥50% определяют высокий риск развития гематогенных метастазов. При P<50% определяют низкий риск. Предлагаемый способ позволяет с большей точностью и информативностью прогнозировать вероятность развития гематогенных метастазов при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы и оптимизировать тактику ведения таких больных. 2 табл., 2 пр.

Настоящее изобретение предоставляет способ предсказания ответа трижды негативного рака молочной железы на терапию противоопухолевым средством. Способ включает: (a) лизирование опухолевых клеток, взятых от трижды негативной опухоли молочной железы, для получения клеточного экстракта; (b) определение уровня экспрессии VEGFR2 в клеточном экстракте; и (c) сравнение уровня экспрессии VEGFR2 в клеточном экстракте, полученном на стадии (b), с эталонным уровнем экспрессии VEGFR2. Наличие низкого уровня экспрессии VEGFR2 предсказывает ответ на терапию противоопухолевым средством, где противоопухолевое средство представляет собой комбинацию бевацизумаба (Авастин®), карбоплатина и паклитакселя. 15 з.п. ф-лы, 14 ил., 7 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к исследованию органокомплекса после проведения гастро-/панкретодуоденальной или дистальной резекции по поводу протоковой аденокарциномы поджелудочной железы. Для этого предложен способ микроскопического исследования опухоли, предусматривающий исследование не менее 95% опухолевой массы. При этом выявляют саркомоподобный анапластический компонент, клетки которого экспрессируют витемин. По наличию или отсутствию этого компонента судят о продолжительности жизни больного. Предложен также комплексный способ морфологического исследования органокомплекса, который предусматривает такие последовательные этапы: а) расположение органокомплекса согласно анатомическому строению с маркировкой всех поверхностей поджелудочной железы; б) определение проходимости протоков; в) срез краев хирургической резекции; г) макроскопическое исследование органокомплекса и забор опухоли; д) указанное выше микроскопическое исследование опухоли и е) иммуногистохимическое исследование для фенотипирования опухоли с помощью проведения реакции с антителами к муцинам 1, 2, 5АС типов. Для прогнозирования продолжительности жизни больного сопоставляют результаты макро-, микроскопического и иммуногистохимического исследования. Изобретения позволяют детализировать, систематизировать, стандартизировать методику проведения исследования операционного материала, а также повысить информативность полученных результатов, в т.ч. для прогнозирования продолжительности жизни больного. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 1 табл., 10 ил.

Настоящее изобретение относится к набору для применения в in vitro прогностическом способе для определения или предсказания in vivo терапевтического ответа в пораженных клетках или тканях на лечение заболевания, имеющего этиологию, связанную с избыточной пролиферацией клеток, с использованием сердечного гликозида. Описанный набор используют для определения отношения изоформ α-субъединиц Na,K-ATФазы в пораженных клетках или тканях. Указанный набор может быть использован для предсказания чувствительности рака или опухоли у индивидуума на терапевтическое лечение сердечным гликозидом. Указанный набор может быть применен в способе лечения заболевания или расстройства, имеющего этиологию, связанную с избыточной пролиферацией клеток, с использованием композиции, содержащей сердечный гликозид. 49 з.п. ф-лы, 7 ил., 8 табл., 27 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для анализа того, будет ли пациент отвечать терапевтически на способ лечения рака, включающий введение иммуногенной композиции. Для этого получают образец крови от пациента и измеряют уровни sICAM-1 в указанном образце крови. При этом низкие уровни sICAM-1, приблизительно меньше 300 нг/мл, свидетельствуют о том, что пациент будет развивать профилактический или терапевтический ответ на иммуногенную композицию. Иммуногенная композиция содержит по крайней мере один рекомбинантный вектор, экспрессирующий in vivo всю или часть по крайней мере одной гетерологичной нуклеотидной последовательности. Также предложен набор для анализа того, что пациент будет отвечать на введение иммуногенной композиции. Группа изобретений обеспечивает отбор по низким начальным уровням sICAM-1 пациентов, страдающих от рака, для которых будет эффективна терапия, включающая введение иммуногенной композиции, в частности вакцины. 2 н. и 17 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 пр.
Наверх