Нейротропное средство, обладающее противогипоксической, нейропротекторной, антиамнестической и вестибулопротекторной активностью


 


Владельцы патента RU 2547728:

Яснецов Виктор Владимирович (RU)
Скачилова София Яковлевна (RU)
Шилова Елена Владимировна (RU)
Яснецов Владимир Викторович (RU)
Мотин Владимир Георгиевич (RU)

Изобретение относится к 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноату, который может быть использован в качестве нейротропного средства с противогипоксической, нейропротекторной, антиамнестической и вестибулопротекторной активностью. 8 табл., 7 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к созданию нейротропного средства, обладающего противогипоксической, нейропротекторной, антиамнестической и вестибулопротекторной активностью, в частности, для лечения острых и хронических нарушений мозгового кровообращения, в том числе ишемического инсульта, и других заболеваний головного мозга, сопровождающихся снижением когнитивных функций и нейродегенерацией, в том числе при старении.

Актуальная проблема современной медицины - поиск и разработка новых нейротропных средств, способных эффективно защищать мозг. Это определяется как высокой летальностью при ишемическом инсульте, так и тем, что применяемые при нем лекарственные препараты разных фармакологических групп обычно не являются средствами патогенетической терапии, малоэффективны и имеют серьезные побочные эффекты [6, 7, 14].

Ближайший аналог заявляемого средства (как по химическому строению, так и по фармакологическим свойствам) - отечественный лекарственный препарат мексидол (этилметилгидроксипиридина сукцинат: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат), который является производным 3-гидроксипиридина и обладает нейротропной, нейропротекторной и антиоксидантной активностью, из-за чего его широко используют в неврологии при острой и хронической недостаточности мозгового кровообращения и связанных с ней заболеваниях, в том числе при инсульте и его последствиях [2-6, 14, 15]. Однако в клинике препарат не всегда эффективен - положительный эффект наблюдался лишь у 63% больных, преобладая у пациентов с дисциркуляторной энцефалопатией атеросклеротического генеза [12]. Более того, мексидол имеет недостаточную противогипоксическую и ноотропную активность.

В связи с этим необходимо изыскание в ряду производных 3-гидроксипиридина новых веществ, имеющих широкий спектр фармакологического действия и способных более эффективно, чем мексидол, действовать, в частности, на моделях инсульта, острой гипоксии и амнезии в эксперименте.

Поэтому задачей настоящего изобретения является создание нового нейротропного средства, обладающего противогипоксической, нейропротекторной, антиамнестической и вестибулопротекторной активностью.

Поставленная цель достигается применением в качестве нового нейротропного средства 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) в эффективных количествах, имеющего выраженное нейропротекторное действие в сочетании с противогипоксической, антиамнестической и вестибулопротекторной активностью.

Изобретение иллюстрируется следующими ниже примерами. При этом примеры 3-7 иллюстрируют эффективность ГАА в качестве противогипоксического, нейропротекторного, антиамнестического и вестибулопротекторного средства, а также его способность влиять на синаптическую передачу в системе коллатерали Шаффера - пирамидные нейроны поля СА1 гиппокампа крыс в сравнении с ближайшим аналогом, мексидолом.

Синтез нового соединения осуществляли путем взаимодействия эквимолярных количеств 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина и N-ацетил-аминоэтановой кислоты. N-ацетил-аминоэтановую кислоту получали известными методами путем взаимодействия аминоэтановой кислоты с ацетилхлоридом или ангидридом уксусной кислоты.

Пример 1. В трехгорлую колбу, снабженную мешалкой, термометром и холодильником, загружают 15 мл воды, затем при перемешивании постепенно добавляют 1,17 г (0,01 М) N-ацетил-аминоэтановой кислоты и 1,37 г (0,01 М) 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина. Реакционную массу нагревают до 75-85°C и выдерживают при этой температуре в течение 30 минут. Раствор фильтруют, затем отгоняют воду, после охлаждения к остатку приливают 15-20 мл ацетона, перемешивают при температуре 35-40°C и кристаллизуют. Получают 2,27 г белого кристаллического порошка с Тпл 99-103°C, растворим в воде.

Найдено, %: C 56,61; H 7,18; N 11,01 C12H18N2O4

Вычислено, %: C 56,69; H 7,10; N 11,06

ИК-спектр (v, см-1): 3270 (NH); 2560 (N+); 1610 (C=C аром); 1565 (NHCO).

Пример 2. Аналогично примеру 1 загружают 20 мл изопропилового спирта, реакционную массу выдерживают в течение 40 минут. Полученный раствор фильтруют и кристаллизуют при 10-15°C. Получают 2,19 г белого кристаллического порошка с Тпл 100-102°C, растворим в воде.

Найдено, %: C 56,67; H 7,17; N 11,02 C12H18N2O4

Вычислено, %: C 56,69; H 7,10; N 11,06

ИК-спектр (v, см-1): 3270 (NH); 2560 (N+); 1610 (C=C аром); 1565 (NHCO).

При выполнении экспериментальной части работы (опыты на животных - примеры 3-7) в соответствии с Российскими национальными правилами исследований (Приказ Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 23 августа 2010 г. №708н «Об утверждении Правил лабораторной практики» и др.) и международными требованиями в основном были использованы модели и методы, рекомендованные для проведения подобных исследований, утвержденные Министерством здравоохранения РФ и соответствующие рекомендациям ВОЗ, касающимся правил надлежащей лабораторной практики (GLP - "Good Laboratory Practice") [11]. Животных получали из Центрального питомника лабораторных животных РАМП («Столбовая», Московская область). Содержание животных соответствовало правилам GLP и осуществлялось в соответствии с нормативным документом «Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию вивариев», утвержденным Главным государственным санитарным врачом 06.04.1973 г. №1045-73, и приказом МЗ СР РФ №708н от 23.08.2010 г.

Пример 3. Противогипоксическое действие 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) на разных моделях острой гипоксии у мышей (табл.1-3)

Исследования выполнены на белых нелинейных мышах-самцах массой 20-25 г по методикам, описанным в «Методических рекомендациях по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств» [8] и «Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств» [11].

Острую нормобарическую гипоксическую гипоксию с гиперкапнией воспроизводили путем помещения мышей (поодиночке) в гермокамеру. Острую гемическую гипоксию воспроизводили путем подкожного (п/к) введения мышам метгемоглобинообразователя натрия нитрита в дозе 300 мг/кг. Острую гистотоксическую гипоксию моделировали путем п/к введения мышам натрия нитропруссида в дозе 20 мг/кг. Регистрировали продолжительность жизни животных. Исследуемое вещество и препарат сравнения мексидол вводили однократно внутрибрюшинно (в/б) за 60 минут до опыта. Животным контрольных групп вводили в/б изотонический раствор натрия хлорида (NaCl) в том же объеме.

На модели острой нормобарической гипоксической гипоксии с гиперкапнией (в гермокамере) ГАА в дозах 25, 50 и 100 мг/кг значимо увеличивал продолжительность жизни животных на 13% (p<0,02), 27% и 37% (p<0,01) соответственно (табл.1).

Препарат сравнения мексидол в дозах 25 и 50 мг/кг достоверно не влиял, а в дозе 100 мг/кг значимо (p<0,01) увеличивал данный показатель на 29%.

По выраженности противогипоксического действия ГАА в дозах 25 и 50 мг/кг превосходил мексидол в аналогичных дозах в 1,1 и 1,2 раза (p<0,05) соответственно. Необходимо отметить, что ГАА в дозе 50 мг/кг действовал примерно так же, как мексидол в дозе 100 мг/кг.

На модели острой гемической гипоксии ГАА в дозах 25 и 50 мг/кг существенно не влиял на продолжительность жизни мышей, а в дозе 100 мг/кг значимо (p<0,02) увеличивал ее на 29% (табл.2).

Препарат сравнения мексидол в дозах 25, 50 и 100 мг/кг достоверно не влиял на продолжительность жизни животных при острой гемической гипоксии.

По выраженности противогипоксического действия ГАА в дозе 100 мг/кг значимо (p<0,05) превосходили мексидол в аналогичной дозе в 1,2 раза.

На модели острой гистотоксической гипоксии ГАА в дозах 25 и 50 мг/кг существенно не влиял на продолжительность жизни мышей, а в дозе 100 мг/кг значимо (p<0,02) увеличивал ее на 20% (табл.3).

Препарат сравнения мексидол в дозах 25, 50 и 100 мг/кг достоверно не влиял на продолжительность жизни животных при острой гистотоксической гипоксии.

По выраженности противогипоксического действия ГАА в дозе 100 мг/кг значимо (p<0,05) превосходил мексидол в аналогичной дозе в 1,2 раза.

Итак, ГАА обладает противогипоксическими свойствами на всех изученных моделях острой гипоксии. При этом по выраженности противогипоксического действия данное соединение превосходит препарат сравнения мексидол.

Пример 4. Нейропротекторное действие 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) (табл.4)

Исследовали нейропротекторное действие ГАА и препарата сравнения мексидола у белых нелинейных крыс-самцов (массой 220-270 г) с экспериментальной ишемией головного мозга (модель ишемического инсульта). В качестве препарата сравнения был выбран мексидол, широко используемый сегодня в неврологии при лечении ишемического инсульта [2-6, 13]. Ишемию головного мозга у крыс воспроизводили путем одномоментной перевязки (под общей анестезией диэтиловым эфиром) обеих общих сонных артерий. У ложнооперированных животных (контрольная группа №1) операция была ограничена этапом доступа к общим сонным артериям. В контрольной группе №2 крысы получали только изотонический раствор NaCl. В подопытных группах животным вводили в/б ГАА и мексидол 1 раз в сутки (сут) в течение 7 сут; в первые сутки - через 1 час (ч) после операции. Животных после операции наблюдали в течение 2 недель с учетом выживаемости крыс. Неврологический дефицит у животных определяли (слепым методом) по шкале McGraw et al. [22] (в баллах) каждый час в течение 24 ч, а затем 1 раз в сутки. Тяжесть состояния определяли по сумме соответствующих баллов. У ложнооперированных животных неврологический дефицит отсутствовал.

Результаты исследования нейропротекторного действия веществ представлены в табл.4. Из нее видно, что у крыс контрольной группы №2 неврологический дефицит был наиболее выражен (8,9±0,1 балла) через 2 и 3 сут после двусторонней перевязки общих сонных артерий; при этом в контроле погибло 42% (13 крыс из 31) животных.

ГАА в дозе 100 мг/кг/сут значимо (p<0,05) уменьшал летальность крыс до 3%, а также неврологический дефицит в 1,8-1,9 раза в разные сроки наблюдения.

Препарат сравнения мексидол в дозе 100 мг/кг/сут значимо (p<0,05) уменьшал летальность крыс до 18%. Сходные достоверные изменения происходили под влиянием мексидола и с неврологическим дефицитом - он уменьшался в 1,6-1,7 раза (p<0,05).

ГАА значимо (p<0,05) превосходил мексидол как по влиянию на летальность (на 15%), так и по влиянию на выраженность неврологического дефицита на протяжении всего срока наблюдения (в 1,1-1,2 раза).

Таким образом, ГАА обладает выраженными нейропротекторными свойствами на модели ишемического инсульта у крыс, причем по влиянию на летальность и выраженность неврологического дефицита на протяжении всего срока наблюдения ГАА значимо превосходил мексидол.

Пример 5. Антиамнестическое действие 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) на различных моделях амнезии у мышей (табл.5-7)

Исследования выполнены на белых нелинейных мышах-самцах массой 20-24 г. Влияние ГАА и препарата сравнения мексидола на процессы обучения и памяти у животных исследовали, используя условную реакцию пассивного избегания (УРПИ) электрокожного раздражения [1]. Выработку УРПИ у мышей производили на основе электрокожного подкрепления по методу Cumin et al. (1982) [19] с учетом рекомендаций Mondadori et al. (1990) [23]. Мышей подвергали воздействию электросудорожного шока (ЭСШ) (50 Гц, 50 мА, 0,3 с, транспиннеально) сразу после обучения УРПИ [11]. У животных контрольной группы вызывали псевдоЭСШ. Для воспроизведения модели скополаминовой амнезии м-холиноблокатор вводили мышам в/б в дозе 1 мг/кг сразу после обучения УРПИ [11]. Острую нормобарическую гипоксическую гипоксию с гиперкапнией воспроизводили путем помещения мышей (поодиночке) в гермокамеру. Исследуемое соединение и препарат сравнения мексидол вводили однократно в/б за 60 минут до обучения мышей. Животные контрольных групп получали (в/б) в том же объеме изотонический раствор NaCl. Сохранность УРПИ проверяли через 24 часа после амнезирующего воздействия.

На модели амнезии, вызванной электросудорожным шоком, было обнаружено, что у мышей ГАА в дозах 25 и 50 мг/кг значимо (p<0,001) уменьшал выраженность амнезии УРПИ в 2,6 и 2,9 раза соответственно, а в 100 мг/кг полностью предупреждал ее развитие (табл.5).

Препарат сравнения мексидол в дозе 25 мг/кг существенно не влиял на выраженность амнезии УРПИ, в дозе 50 мг/кг - значимо (p<0,01) ее уменьшал в 2,3 раза, а в дозе 100 мг/кг - почти полностью предупреждал ее развитие.

По выраженности антиамнестического действия ГАА в дозе 25 мг/кг значимо (p<0,05) превосходит мексидол в аналогичной дозе в 2 раза.

На модели скополаминовой амнезии было обнаружено, что у мышей ГАА в дозах 25 и 50 мг/кг значимо (p<0,01) уменьшал выраженность амнезии УРПИ в 2,8 и 3,4 раза соответственно, а в 100 мг/кг полностью предупреждал ее развитие (табл.6).

Препарат сравнения мексидол в дозе 25 мг/кг существенно не влиял на выраженность амнезии УРПИ, в дозе 50 мг/кг - значимо (p<0,05) ее уменьшал в 2,2 раза, а в дозе 100 мг/кг - полностью предупреждал ее развитие.

На модели амнезии, вызванной острой нормобарической гипоксической гипоксией с гиперкапнией (в гермокамере), было обнаружено, что у мышей ГАА в дозе 25 мг/кг значимо (p<0,01) уменьшал выраженность амнезии УРПИ в 3 раза, а в дозах 50 и 100 мг/кг - полностью предупреждал ее развитие (табл.7).

Препарат сравнения мексидол в дозе 25 мг/кг существенно не влиял на выраженность амнезии УРПИ, в дозе 50 мг/кг - значимо (p<0,05) ее уменьшал в 2,7 раза, а в дозе 100 мг/кг - почти полностью предупреждал ее развитие.

По выраженности антиамнестического действия ГАА в дозе 25 мг/кг значимо (p<0,05) превосходит мексидол в аналогичной дозе в 2,8 раза.

Итак, ГАА обладает выраженными антиамнестическими свойствами на различных моделях амнезии у мышей (вызванной ЭСШ, скополомином и острой нормобарической гипоксической гипоксией с гиперкапнией), при этом в отличие от мексидола он эффективен на всех использованных моделях амнезии уже в дозе 25 мг/кг.

Пример 6. Вестибулопротекторное действие 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) (табл.8)

Исследования выполнены на белых нелинейных крысах-самцах массой 190-210 г.

Моделирование болезни движения (БД) у крыс производили в течение 90 минут на модифицированной установке НАСА США [18], позволяющей вращать животных в двух перпендикулярных плоскостях с частотой 0,33 Гц. Выраженность БД у крыс оценивали по количеству потребляемой ими пищи за 2 ч после вращения [17].

Кроме мексидола, в качестве препарата сравнения также использовали блокатор гистаминовых H1-рецепторов прометазин (дипразин, Россия; также блокирует α-адрено-, м-холино- и дофаминовые рецепторы). Это обусловлено тем, что в настоящее время его широко используют в авиакосмической и морской медицине [16, 20, 21].

ГАА в дозе 100 мг/кг значимо (p<0,001) повышал потребление пищи по отношению к контролю в 2 раза (табл.8).

Препараты сравнения прометазин (50 мг/кг) и мексидол (100 мг/кг) также значимо (p<0,001) повышали потребление пищи по отношению к контролю в 1,6 и 1,8 раза соответственно.

По выраженности вестибулопротекторного действия ГАА значимо (p<0,05) превосходил прометазин и мексидол в 1,2 и 1,1 раза соответственно.

Таким образом, ГАА обладает выраженными вестибулопротекторными свойствами, превосходя при этом препараты сравнения прометазин и мексидол.

Пример 7. Электрофизиологическое исследование действия 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) на переживающих срезах гиппокампа крыс

В настоящее время в качестве объекта нейрофармакологических исследований in vitro для расшифровки механизма действия веществ, влияющих на центральную нервную систему, часто используют переживающие поперечные срезы гиппокампа [центральная структура лимбической системы, участвующая в процессах памяти и обучения и др.], сохраняющие нормально функционирующие внутренние системы связей, на которые в эксперименте можно локально воздействовать различным образом [9, 10, 24].

Для расшифровки действия ГАА в сравнении с мексидолом проводили электрофизиологические исследования на переживающих поперечных срезах гиппокампа 23 белых нелинейных крыс-самцов массой 180-200 г [9]. Суммарную электрическую активность регистрировали в пирамидном слое поля СА1 с помощью одноканальных стеклянных микроэлектродов, заполненных 0,15 М раствором NaCl. Орто- и антидромную электрическую стимуляцию осуществляли посредством платиновых биполярных электродов (прямоугольные импульсы длительностью 0,1 мс, амплитудой 3-8 В, одиночные или парные), которые помещали в области колатералей Шаффера и альвеуса соответственно. Регистрировали одиночные или парные орто- и антидромные популяционные ответы.

ГАА в концентрации 5 мМ (n=11) подавлял ортодромные популяционные ответы на 98±3% (p<0,001), несколько превосходя (в 1,1 раза, p<0,05) в этом отношении мексидол в концентрации 5 мМ (90±2%, n=11, p<0,001). После отмывания ГАА (до 1 ч) популяционные ответы полностью восстанавливались. На фоне действия специфического неконкурентного антагониста NMDA-рецепторного комплекса МК-801 (n=9) депрессирующий эффект соединения практически полностью ослаблялся на 94±3% (p<0,001), а мексидола (n=8) - на 75±4% (p<0,01). Значит, МК-801 более выражено (в 1,3 раза, p<0,05) ослабляет угнетающее действие ГАА, чем мексидола. Следовательно, ГАА угнетает синаптическую передачу в системе коллатерали Шаффера - пирамиды поля СА1 гиппокампа крыс, а МК-801 практически полностью ослабляет это депрессирующее действие.

Таким образом, ГАА угнетает ортодромные популяционные ответы в области СА1 гиппокампа крыс, несколько превосходя в этом отношении мексидол, причем в этот эффект ГАА вовлечен NMDA-рецепторный комплекс.

Значит, ГАА, как и мексидол, способен влиять на синаптическую передачу в системе коллатерали Шаффера - пирамидные нейроны поля СА1 гиппокампа крыс.

На основании данных, представленных выше в примерах 4 и 7, свидетельствующих о наличии у ГАА нейропротекторной активности и способности влиять на синаптическую передачу, можно отнести ГАА к нейротропным средствам.

Итак, ГАА обладает противогипоксическими свойствами на всех изученных моделях острой гипоксии (острой нормобарической гипоксической гипоксии с гиперкапнией, гемической и гистотоксической). При этом по выраженности противогипоксического действия данное соединение превосходит препарат сравнения мексидол.

ГАА также обладает выраженными нейропротекторными свойствами на модели ишемического инсульта у крыс, причем по влиянию на летальность и выраженность неврологического дефицита на протяжении всего срока наблюдения ГАА значимо превосходит мексидол.

На различных моделях амнезии у мышей (вызванной ЭСШ, скополомином и острой нормобарической гипоксической гипоксией с гиперкапнией) ГАА обладает выраженными антиамнестическими свойствами, при этом в отличие от мексидола он эффективен на всех использованных моделях амнезии уже в дозе 25 мг/кг.

Кроме того, ГАА обладает выраженными вестибулопротекторными свойствами, превосходя при этом препараты сравнения прометазин и мексидол.

На переживающих срезах гиппокампа крыс ГАА, как и мексидол, способен влиять на синаптическую передачу в системе коллатерали Шаффера - пирамидные нейроны поля СА1. При этом ГАА оказывает более выраженное действие, чем мексидол. Показано, что в этот эффект ГАА вовлечен NMDA-рецепторный комплекс.

Таким образом, на различных экспериментальных моделях ГАА превосходит ближайший аналог заявляемого средства мексидол.

Литература

1. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон П.Д. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: пер. с англ. / Под. ред. Батуева А.С. - М., Высш. шк., 1991. - 399 с.

2. Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение. - М., 2004. - 21 с.

3. Воронина Т.А. Мексидол: спектр фармакологических эффектов // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2012. - №12. - С.86-90.

4. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. - М.: Медицина, 2001. - 328 с.

5. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Механизмы повреждающего действия острой церебральной ишемии и нейропротективная терапия // Проблемы гипоксии: молекулярные, физиологические и медицинские аспекты / Ред. Л.Д. Лукьянова, И.Б. Ушаков. - М.; Воронеж: Изд-во «Истоки», 2004. - С.420-438.

6. Инсульт: диагностика, лечение, профилактика / Под редакцией З.И. Суслиной, М.А. Пирадова - М. «МЕДпресс-информ», 2008. - 288 с.

7. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 16-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: «Новая Волна», 2012. - 1216 с.

8. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств / Под редакцией Л.Д. Лукьяновой. - М., 1990. - 18 с.

9. Мотин В.Г., Яснецов В.В., Ковалев С.М., Крылова И.Н. Влияние ноотропов на электрическую активность в поле СА1 гиппокампа крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2000. - Т.130, №9. - С.252-254.

10. Петров В.И., Пиотровский Л.Б., Григорьев И.А. Возбуждающие аминокислоты (нейрохимия, фармакология и терапевтический потенциал ВАКергических средств). - Волгоград, 1997. - 167 с.

11. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

12. Суслина З.А., Смирнова И.Н., Танашян М.М. и др. Клиническая эффективность мексидола и влияние его на реологические свойства крови и гемоперфузию головного мозга при хронических формах цереброваскулярных заболеваний. - М., 2002. - 19 с.

13. Суслина З.А., Танашян М.М., Домашенко М.А. Антитромботическая терапия ишемических нарушений мозгового кровообращения с позиций доказательной медицины. 2-е изд. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2009. - 224 с.

14. Федеральное руководство по использованию лекарственных средств (формулярная система). Выпуск XIV / Под редакцией А.Г. Чучалина, В.В. Яснецова. - М.: «Эхо», 2013. - 996 с.

15. Федин А.И., Румянцева С.А., Миронова О.П., Евсеев В.П. Применение антиоксиданта мексидола у больных с острыми нарушениями мозгового кровообращения. Методические рекомендации. - М., 2002. - 16 с.

16. Шашков B.C., Яснецов В.В., Шашков А.В. и др. Фармакологическая профилактика вестибуло-вегетативного синдрома (болезнь движения) в модельных исследованиях // Авиакосмическая и экологическая медицина. - 2000. - Т.34, №4. - С.9-13.

17. Яснецов В.В., Киселева Н.М. О вестибулопротекторной активности специфического антагониста N-метил-D-аспартата (NMDA) // Авиакосмическая и экологическая медицина. - 1994. - Т.28, №5. - С.66-67.

18. Crampton G.H., Lucot J.B. A stimulator for laboratory studies of motion sickness in cats // Aviat. Space Environ. Med. - 1985. - Vol.56, №5. - P.462-465.

19. Cumin R., Bandle E.F., Gamzu E., Haefely W.E. Effect of the novel compound antiracetam (Ro 13-5057) upon impared learning and memory in rodents // Psychopharmacol. - 1982. - Vol.78. - P.104-111.

20. Estrada A., LeDuc P.A., Curry I.P. et al. Airsickness prevention in helicopter passengers // Aviat. Space Environ. Med. - 2007. - Vol.78, №4. - P.408-413.

21. Haware R.V., Chaudhari P.D., Parakh S.R., Bauer-Brandl A. Development of a melting tablet containing promethazine HCl against motion sickness // AAPS PharmSciTech. - 2008. - Vol.9, №3. - P.1006-1015.

22. McGraw C.P., Pashayan A.G., Wendel O.T. Cerebral infarction in the Mongolian gerbil exacerbated by phenoxybenzaminetreatment // Stroke. - 1976 - Vol.7, №5. - P.485-488.

23. Mondadori С., Bhatnagar A., Borkovski J., Häusler A. Involvement of a steroidal component in the mechanism of action of piracetam-like nootropics // Brain Res. - 1990. - Vol.506 - P.101-108.

24. Sobrado М., Roda J.M., Lopez M.G. et al. Galantamine and memantine produce different degrees of neuroprotection in rat hippocampal slices subjected to oxygen-glucose deprivation // Neurosci Lett. - 2004. - Vol.365, №2. - P.132-136.

Таблица 1
Влияние 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препарата сравнения мексидола на продолжительность жизни мышей в гермокамере (М±m)
Вещество (доза, мг/кг) Число мышей Продолжительность жизни, минуты
Изотонический раствор NaCl (контроль) 14 24,6±0,8
ГАА (25) 14 27,9±1,0**#
ГАА (50) 14 31,3±2,1***#
ГАА (100) 14 33,8±3,1***
Мексидол (25) 12 25,1±0,8
Мексидол (50) 12 26,2±0,9
Мексидол (100) 16 31,7±2,0***
Примечание. Различия статистически значимы по сравнению с контролем: ** - p<0,02, *** - p<0,01;
# - p<0,05 - значимость различий ГАА с мексидолом в аналогичных дозах (критерий Стьюдента)
Таблица 2
Влияние 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препарата сравнения мексидола на продолжительность жизни мышей при острой гемической гипоксии (М±m)
Вещество (доза, мг/кг) Число мышей Продолжительность жизни, минуты
Изотонический раствор NaCl (контроль) 14 20,3±1,1
ГАА (25) 14 23,2±1,6
ГАА (50) 14 24,1±1,8
ГАА (100) 14 26,2±1,9**α
Мексидол (25) 12 20,8±1,0
Мексидол (50) 12 21,2±1,1
Мексидол (100) 12 21,9±1,2
Примечание. Различия статистически значимы по сравнению с контролем: ** - p<0,02 (критерий Стьюдента);
α - p<0,05 - значимость различий ГАА в дозе 100 мг/кг с мексидолом в аналогичной дозе (критерий Уилкоксона-Манна-Уитни)
Таблица 3
Влияние 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препарата сравнения мексидола на продолжительность жизни мышей при острой гистотоксической гипоксии (М±m)
Вещество (доза, мг/кг) Число мышей Продолжительность жизни, минуты
Изотонический раствор NaCl (контроль) 12 16,5±0,7
ГАА (25) 12 18,6±0,9
ГАА (50) 12 19,3±1,2
ГАА (100) 12 19,8±1,1**α
Мексидол (25) 12 16,3±0,7
Мексидол (50) 12 16,9±0,7
Мексидол (100) 12 17,1±0,8
Примечание. Различия статистически значимы по сравнению с контролем: ** - p<0,02 (критерий Стьюдента);
α - p<0,05 - значимость различий ГАА в дозе 100 мг/кг с мексидолом в аналогичной дозе (критерий Уилкоксона-Манна-Уитни)
Таблица 4
Изменение неврологического дефицита (в баллах, М±m) у крыс после двусторонней перевязки общих сонных артерий под влиянием 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препарата сравнения мексидола
Вещество (доза, мг/кг/сут) Срок после операции (часы/ч/, сутки/сут/
12 ч 24 ч 2 сут 3 сут 4 сут 5 сут 6 сут 7 сут 10 сут 14 сут
Изотонический раствор NaCl (контроль) /n=18, погибло 13 из 31/ 8,5±0,1 8,8±0,1 8,9±0,1 8,9±0,1 8,8±0,1 8,8±0,1 8,7±0,1 8,7±0,1 8,6±0,1 8,5±0,1
ГАА (100) /n=32, погибла 1 из 33/ 4,6±0,1*§ 4,9±0,1*§ 5,0±0,1*§ 4,9±0,1*§ 4,8±0,1*§ 4,7±0,1*§ 4,6±0,1*§ 4,5±0,1*§ 4,5±0,1*§ 4,4±0,1*§
Мексидол (100) /n=27, погибло 6 из 33/ 4,9±0,1* 5,3±0,1* 5,4±0,1* 5,4±0,1* 5,3±0,1* 5,3±0,1* 5,2±0,1* 5,2±0,1* 5,1±0,1* 5,0±0,1*
Примечание. * - p<0,05 - значимость различий по сравнению с контролем;
§ - p<0,05 - значимость различий ГАА по сравнению с мексидолом (критерий Стьюдента)
Таблица 5
Влияние 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препарата сравнения мексидола на амнезию у мышей, вызванную электросудорожным шоком (ЭСШ)
Условия опытов и вещество (доза, мг/кг) Общее число мышей Количество мышей, обучившихся УРПИ (%) Количество мышей с амнезией УРПИ через 24 ч после ЭСШ (%)
Изотонический раствор NaCl + псевдоЭСШ (контроль 1) 36 33 (92) 6 (18)
Изотонический раствор NaCl + ЭСШ (контроль 2) 33 30 (91) 25 (83)ooo
ГАА (25) + ЭСШ 20 19 (95) 6 (32)***#
ГАА (50) + ЭСШ 15 14 (93) 4 (29)***
ГАА (100) + ЭСШ 20 19 (95) 3 (16)***
Мексидол (25) + ЭСШ 31 28 (90) 18 (64)ooo
Мексидол (50) + ЭСШ 12 11 (92) 4 (36)**
Мексидол (100) + ЭСШ 21 20 (95) 4 (20)***
Примечание. Различия статистически значимы по сравнению с контролем 1 и контролем 2 соответственно (точный метод Фишера): oo или ** - p<0,01, ooo или *** - p<0,001; # - p<0,05 - значимость различий ГАА в дозе 25 мг/кг с мексидолом в аналогичной дозе
Таблица 6
Влияние 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препарата сравнения мексидола на амнезию у мышей, вызванную скополамином
Условия опытов и вещество (доза, мг/кг) Общее число мышей Количество мышей, обучившихся УРПИ (%) Количество мышей с амнезией УРПИ через 24 ч после введения скополамина (%)
Изотонический раствор NaCl + изотонический раствор NaCl (контроль 1) 32 29 (91) 5 (17)
Изотонический раствор NaCl + скополамин (контроль 2) 40 36 (90) 26 (72)ooo
ГАА (25) + скополамин 20 19 (95) 5 (26)**
ГАА (50) + скополамин 15 14 (93) 3 (21)**
ГАА (100) + скополамин 15 14 (93) 2 (14)***
Мексидол (25) + скополамин 13 12 (92) 7 (58)o
Мексидол (50) + скополамин 13 12 (92) 4 (33)*
Мексидол (100) + скополамин 21 19(90) 3 (16)***
Примечание. Различия статистически значимы по сравнению с контролем 1 и контролем 2 соответственно (точный метод Фишера): o или * - p<0,05, oo или ** - p<0,01, ooo или *** - p<0,001
Таблица 7
Влияние 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препарата сравнения мексидола на амнезию у мышей, вызванную острой нормобарической гипоксической гипоксией с гиперкапнией
Условия опытов и вещество (доза, мг/кг) Общее число мышей Количество мышей, обучившихся УРПИ (%) Количество мышей с амнезией УРПИ через 24 ч после амнезирующего воздействия (%)
Изотонический раствор NaCl + ложная гипоксия (контроль 1) 37 34 (92) 6 (18)
Изотонический раствор NaCl + гипоксия (контроль 2) 35 32 (91) 20 (63)ooo
ГАА (25) + гипоксия 20 19 (95) 4(21)**#
ГАА (50) + гипоксия 14 13 (93) 2 (15)**
ГАА (100) + гипоксия 15 14 (93) 2 (14)**
Мексидол (25) + гипоксия 21 19 (90) 11 (58)oo
Мексидол (50) + гипоксия 14 13 (93) 3 (23)*
Мексидол (100) + гипоксия 17 16 (94) 3(19)**
Примечание. Различия статистически значимы по сравнению с контролем 1 и контролем 2 соответственно (точный метод Фишера): o или * - p<0,05, oo или ** - p<0,01, ooo или *** - p<0,001; # - p<0,05 - значимость различий ГАА в дозе 25 мг/кг с мексидолом в аналогичной дозе
Таблица 8
Вестибулопротекторное действие 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата (ГАА) и препаратов сравнения (прометазин и мексидол), которое оценивали по потреблению пищи крысами (М±m)
Вещество (доза, мг/кг) Число крыс Потребление пищи (в % по отношению к фону) после вращения
Изотонический раствор NaCl (контроль) 14 48±3
ГАА (100) 12 96±4***
Препараты сравнения
Прометазин (50) 10 78±4***
Мексидол(100) 12 87±3***
Примечание. Потребление пищи до вращения (фон) принято за 100%; различия статистически значимы по сравнению с контролем: *** - p<0,001; # - p<0,05 - значимость изменений по сравнению с группой животных, получавших прометазин (критерий Стьюдента);
α - p<0,05 - значимость изменений по сравнению с группой животных, получавших мексидол (критерий Уилкоксона-Манна-Уитни)

Применение химического соединения 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния N-ацетил-аминоэтаноата в качестве нейротропного средства с противогипоксической, нейропротекторной, антиамнестической и вестибулопротекторной активностью.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новому веществу - дихлорацетату 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина формулы I: его стабильной кристаллической форме и способу ее получения.

Изобретение относится к новому улучшенному способу получения ониевых тетрафторборатов путем введения в реакцию ониевого галогенида с триалкилоксоний тетрафторборатом, триалкилсульфоний тетрафторборатом или трифенилкарбоний тетрафторборатом, отличающемуся тем, что галогенид соответствует формуле (1) где X представляет собой N, Р, Hal представляет собой Сl, Вr или I и R в каждом случае, независимо один от другого, представляет собой линейный алкил, который имеет 1-8 С атомов, или галогенид соответствует формуле (2) где Hal представляет собой Вr или I и R1-R7 каждый, независимо один от другого, представляет собой линейный алкил, который имеет 1-8 С атомов, или галогенид соответствует формуле (3) где Hal представляет собой Сl, Вr или I и R1-R6 каждый, независимо один от другого, представляет собой линейный алкил, который имеет 1-8 С атомов, или галогенид соответствует формуле (4) где Hal представляет собой Сl, Вr или I и HetN+ представляет собой гетероциклический катион, выбранный из группы, которая включает где заместители R1' -R4' каждый, независимо один от другого, представляют собой водород, CN, линейный или разветвлённый алкил, который имеет 1-8 С атомов, диалкиламино, содержащий алкильные группы, которые имеют 1-4 С атома, но который не прикреплён к гетероатому гетероцикла.

Изобретение относится к химии биологически активных соединений, конкретно к производным 4,6-диметил-2-(n-R-фенил)-2/3-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-с]пиридин-3-онов (соединения 1а-б): а также к эфирам 2,6-диметил-4(n-R-фенилгидразино) никотиновой кислоты (соединения II), служащим промежуточными соединениями в синтезе соединений I При изучении фармакологической активности обеих групп соединений было установлено, что они обладают антидепрессантным и анксиолитическим действием.

Изобретение относится к новым химическим соединениям, а именно к бис-четвертичным солям пиридина формулы где A-(CH2)m, m = 0-8, (СН2ОСН2)n, n = 0-2, R - низший алкил, где Y= NH, O, которые могут найти применение в качестве антивуалента-стабилизатора (АВС) галогенсеребряных фотографических эмульсий, сенсибилизированных карбоцианиновыми красителями, а также к способам сенсибилизации галогенсеребряных эмульсий с их применением.

Изобретение относится к новым химическим соединениям, конкретно к бисчетвертичным солям пиридина-2 общей формулы I SAS где А (СН2)n, n 2-5; СН2(СН2ОСH2)mCH2, m 1,2; X бром, йод, перхлорат, тозилат, метансульфонат; R алкил С1-С4, которые могут быть использованы в качестве активаторов спектральной сенсибилизации орто- и панхроматических бромйодсеребряных эмульсий.

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению солей К-(п-тирфенш1)фенилпиридиния или ПИКОЛИНИЯ общей формулы. .
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии и фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мыщцы. Для этого лабораторным животным на вторые сутки эксперимента моделируют ишемию мышц голени оперативным удалением участка магистральных сосудов, включающего бедренную, подколенную, переднюю и заднюю большеберцовые артерии.
Изобретение относится к области медицины, в частности к фармацевтической промышленности, и описывает твердую лекарственную форму гиполипидемического действия, содержащую розувастатин или его фармацевтически приемлемую соль в количестве от 3 до 15%, технологические добавки и фармацевтически приемлемый наполнитель, включающий целлюлозу микрокристаллическую, лактозы моногидрат, поливинилпирролидон и кроскармеллозу натрия.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Непосредственно после установления диагноза инфаркт миокарда больному назначают прием кардиоцитопротектора триметазидина модифицированного высвобождения - триметазидина MB по 35 мг 2 раза в сутки, на фоне приема которого проводят ступенчатое расширение двигательной активности: при Ia ступени активности - повороты на бок; Iб ступени активности - присаживания на 5-10 мин 2-3 раза в сутки; IIa ступени активности - присаживания на 20 мин, принятие пищи сидя, пересаживания на стул; IIб ступени активности - ходьба по палате; IIIa ступени активности - выход в коридор, пребывание сидя без ограничений; IIIб ступени активности - ходьба по коридору без ограничений, подъем на 1 этаж лестницы; IVa ступени активности - выход пациента на прогулку; IVб ступени активности - прогулка на дистанцию 1,0-1,5 км.

Изобретение относится к новым соединениям формулы I, в которой R1 и R2 являются одинаковыми или разными и выбраны из алкильной или алкенильной углеводородной цепи, значения группы R3, которая отщепляется липазой, определены в формуле изобретения.

Изобретение относится к медицине, а именно к лечению ишемии нижних конечностей. Для этого осуществляют введение взвеси мононуклеарных аутологичных клеток костного мозга через микрокатетер непосредственно в зону ишемии сразу после выполнения ангиопластики стено-окклюзионного поражения периферических артерий.
Изобретение относится к медицине, фармакологии и биологии. Предложено применение комплекса трис-(2-гидроксиэтил)амина с бис-(2-метилфенокси-ацетатом)цинка[цинкатрана или цитримина] формулы: (HOCH2CH2)3N·Zn(OOCCH2OC6H4CH3-2)2 в качестве ингибитора кислой фосфолипазы Al.

Изобретения относятся к фармацевтической композиции с антиишемической и антиоксидантной активностью в виде таблеток или капсул и способу ее получения. Композиция содержит 4-((3-оксо-3-этоксипропаноил)амино)бензойную кислоту в количестве от 40 до 80 мас.%, аминосодержащее соединение и фармацевтически приемлемые наполнители.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к цикличным пептидам из TNF, и может быть использовано в медицине. Цикличный пептид, состоящий из последовательности CGQRETPEGAEAKPWYC, используют для получения лекарственного средства для профилактики или лечения сосудистых осложнений у пациентов с диабетом, в том числе в составе фармацевтической композиции.
Изобретение относится к медицине, а именно к средству для снижения содержания холестерина и триглицеридов в плазме крови. Заявленное средство содержит нанокомпозит, представляющий собой углеродсодержащие наночастицы с нанесенными на них органическими алкильными функциональными группами, представляющими собой радикалы -С4Н9, -С6Н11, -С8Н15, -С10Н21, -С16Н33, -С18Н35.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к препарату для лечения воспалительного состояния, связанного с ишемией. Фармацевтический препарат для лечения внутреннего воспалительного состояния, связанного с ишемией, содержащий: a) физиологический раствор, включающий, по меньшей мере, 105 на мл мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) или их популяцию, или b) супернатант раствора a), где раствор a) получают путем культивирования PBMC или их популяции в физиологическом растворе, свободном от PBMC-пролиферирующих и PBMC-активирующих веществ, причем РВМС или их популяцию культивируют в условиях, вызывающих стресс перед или в течение культивирования.

Изобретение относится к новым карбоксамидным соединениям формулы, приведенной ниже, их таутомерам и фармацевтически приемлемым солям, где значения R1, R2, R3a, R3b, R4, Q, Y, A и X приведены в пункте 1 формулы.

Изобретение относится к новому веществу - дихлорацетату 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина формулы I: его стабильной кристаллической форме и способу ее получения.
Наверх