Способ прогнозирования антиаритмической эффективности высококонцентрированного препарата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот при лечении больных с желудочковыми нарушениями ритма сердца и постинфарктным кардиосклерозом

Авторы патента:

G01N33/573 - ферментов или изоферментов

Владельцы патента RU 2549983:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИМПС" СО РАМН) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и описывает способ прогнозирования антиаритмической эффективности высококонцентрированного препарата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот при лечении больных с желудочковыми нарушениями ритма сердца и постинфарктным кардиосклерозом путем исследования ферментов лимфоцитов периферической крови пациента до начала терапии, при этом до начала терапии определяют активности ферментов: НАДФ-зависимой декарбоксилирующей малатдегидрогеназы (НАДФМДГ) и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), после чего рассчитывают коэффициент липидно-углеводного обмена (КЛУО), представляющий собой отношение активности НАДФМДГ к активности Г6ФДГ, то есть КЛУО=НАДФМДГ/Г6ФДГ, и при значении КЛУО, равном или больше 5,56, прогнозируют антиаритмическую эффективность препарата, а при значении КЛУО меньше 5,56 - отсутствие антиаритмической эффективности препарата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот. Способ позволяет определить антиаритмическую эффективность высококонцентрированного препарата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот до начала терапии и может быть рекомендован для применения в клинической практике. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано при лечении больных с желудочковыми нарушениями ритма сердца (ЖНРС) и постинфарктным кардиосклерозом (ПИКС).

По данным Министерства здравоохранения одной из ведущих причин смертности в России остается ишемическая болезнь сердца. В течение первого года после острого инфаркта миокарда умирает 6-10% пациентов. Половина всех сердечных смертельных случаев вызвана внезапной сердечной смертью, наиболее частой причиной которой являются желудочковые нарушения ритма [4, 11, 19]. В настоящее время известно, что механизмы возникновения нарушений сердечного ритма неоднородны. Множество работ и исследований посвящено изучению роли иммуновоспалительных реакций в патогенезе атеросклероза и ишемической болезни сердца. Доказано, что различные формы лейкоцитов играют ключевую роль в иммунологических нарушениях при атеросклерозе и ишемических повреждениях миокарда [11, 16, 18]. Выявлена значимая взаимосвязь между электрической нестабильностью миокарда и процессами перекисного окисления липидов мембран [10].

Существующий ограниченный выбор антиаритмической терапии диктует необходимость поиска новых терапевтических подходов. С этой точки зрения большой интерес представляет изучение возможностей применения при аритмиях омега-3 полиненасыщенных жирных кислот (омега-3 ПНЖК).

Известны исследования по изучению влияния препаратов ω-3 ПНЖК на прогноз у пациентов после острого инфаркта миокарда (ОИМ), а также на воспалительные процессы в организме. Произведена оценка влияния ω-3 ПНЖК на динамику предикторов внезапной смерти (желудочковые аритмии, длительность и вариабельность интервала QT, поздние потенциалы желудочков, микровольтная альтернация зубца T и турбулентность ритма сердца) у больных Q-инфарктом миокарда с желудочковыми нарушениями ритма [8].

Известны результаты исследований, показывающие положительное влияние гамма-3 ПНЖК на течение и прогноз внезапной сердечной смерти больных с инфарктом миокарда в течение первого года. На основе комплексной оценки данных холтеровского мониторирования ЭКГ (с оценкой вариабельности ритма сердца), сигнал-усредненной ЭКГ и эхокардиографии продемонстрировано достоверное уменьшение риска внезапной сердечной смерти (улучшение показателей вариабельности ритма сердца), замедление вторичного ремоделирования [6]. В исследовании Нурбаева Т.А. с соавт.[9] показано положительное влияние на динамику снижения C-реактивного белка (СРБ) высоких доз (4 грамма в сутки) гамма-3 ПНЖК в первые семь суток терапии у пациентов с ОИМ и сопутствующим сахарным диабетом.

Однако в приведенных выше исследованиях не предложен алгоритм прогнозирования антиаритмического эффекта ω-3 ПНЖК.

Известны способы прогнозирования эффективности поддерживающей антиаритмической терапии при пароксизмальной форме мерцания предсердий по длительности фильтрованного зубца P электрокардиограммы высокого разрешения [13], а также с помощью метода чрезпищеводного электрофизиологического исследования и анализа вариабельности ритма сердца с использованием вегетативных проб [3]. Однако известные способы не предназначены для пациентов с желудочковыми аритмиями.

Известны способы прогнозирования эффективности антиаритмической терапии у больных после острого инфаркта миокарда (ОИМ) с помощью исследования различных маркеров воспаления (СРБ, интерлейкины) [5, 14], однако в данных способах не учитывались особенности, характерные для пациентов с ЖНРС.

За прототип принят способ оценки эффективности антиаритмического действия омега-3 ПНЖК у пациентов с инфарктом миокарда, заключающийся в определении содержания маркеров апоптоза CD95⁺ - лимфоцитов в крови у пациентов с инфарктом миокарда через 2 месяца после начала терапии омега-3 ПНЖК [2]. При содержании CD95⁺ - лимфоцитов ниже 15% антиаритмическое действие ω-3 ПНЖК у пациентов с инфарктом миокарда оценивают как эффективное. Способ предусматривает определение эффективности антиаритмического действия ω-3 ПНЖК после проведения двухмесячной терапии и не обеспечивает прогноз эффективности до начала терапии.

Задачей изобретения является разработка информативного способа прогнозирования эффективности омега-3 полиненасыщенных жирных кислот до начала терапии больных с ЖНРС и ПИКС.

Поставленная задача решается тем, что до начала лечения у больных с желудочковыми нарушениями ритма сердца и постинфарктным кардиосклерозом в лимфоцитах периферической крови определяют активности ферментов - НАДФ-зависимой декарбоксилирующей малатдегидрогеназы (НАДФМДГ) и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ). Затем вычисляют коэффициент липидно-углеводного обмена (КЛУО), представляющий собой отношение активности НАДФМДГ к активности Г6ФДГ, т.е.

КЛУО=НАДФМДГ/Г6ФДГ.

При значении КЛУО, равном или больше 5,56, прогнозируют антиаритмическую эффективность препарата, а при значении КЛУО меньше 5,56 - отсутствие антиаритмической эффективности препарата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот при лечении больных ЖНРС и ПИКС.

Значение 5,56 получено опытным путем, на основании сопоставления значений рассчитываемого КЛУО и данных последующего наблюдения за клиническим состоянием больных ЖНРС и ПИКС после проведенной антиаритмической терапии препаратами омега-3 ПНЖК. Значение КЛУО ниже 5,56 свидетельствует об относительном снижении оттока субстратов на реакции липидного анаболизма и повышении интенсивности реакций пентозофосфатного цикла.

Известно, что у больных ЖНРС и ПИКС внутриклеточные метаболические процессы отражают состояние обменных и регуляторных процессов организма в целом, в том числе и регуляцию сердечного ритма. Таким образом, представляется возможным использовать активность ферментов лимфоцитов периферической крови в качестве показателя нарушений внутриклеточного обмена веществ при ЖНРС и ПИКС.

Лимфоциты, реализующие основные функции клеточного звена иммунной системы, являются главными клетками в системе иммунологического надзора и принимают активное участие как в иммуновоспалительных процессах, так и в инициации и поддержке регенеративных процессов за счет синтеза широкого спектра цитокинов [15]. В то же время установлено, что функциональная активность лимфоцитов в значительной степени определяется уровнем их метаболических процессов [7]. При этом широкий спектр пластических и анаболических реакций в клетке протекает с участием НАДФН. К числу показателей, наиболее объективно отражающих основные параметры внутриклеточного метаболизма, можно отнести дегидрогеназы.

Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (КФ 1.1.1.49) осуществляет дегидрирование глюкозо-6-фосфата с восстановлением кофермента НАДФ. Образовавшийся в ходе данной реакции 6-фосфоглюконо-δ-лактон является нестабильным и гидролизуется либо спонтанно, либо с помощью фермента 6-фосфоглюконолактоназы с образованием 6-фосфоглюконата [1]. Г6ФДГ катализирует инициализирующую и ключевую реакцию пентозофосфатного цикла, который является конкурентом гликолиза за субстрат (глюкоза-6-фосфат). В норме доля пентозофосфатного цикла в количественном превращении глюкозы обычно невелика и варьирует в зависимости от функционального состояния клеток.

Малик-фермент (НАДФ-зависимая декарбоксилирующая малатдегидрогеназа: НАДФМДГ, КФ 1.1.1.40) осуществляет шунтирование медленных реакций цикла трикарбоновых кислот [1]. При этом фермент является ключевым в системе липидного анаболизма, так как синтезированный НАДФН используется для обеспечения широкого спектра реакций в синтезе внутриклеточных липидов.

Способ выполняется следующим образом.

У больных с ЖНРС и ПИКС перед проведением медикаментозного лечения высококонцентрированным препаратом омега-3 ПНЖК забирают венозную кровь в количестве 2 мл. Выделяют лимфоциты. Центрифугируют на градиенте плотности фиколл-верографина по стандартной методике А. Boyum (1968) [17]. Подсчитывают количество выделенных лимфоцитов, например, в камере Горяева. При контроле морфологического состава лейкоцитарных взвесей определяют чистоту выхода лимфоцитов, которая составляет не менее 97%. 1 млн выделенных клеток используют для определения активностей Г6ФДГ и НАДФМДГ в лимфоцитах одним из известных способов, например, биолюминесцентным [12]. Для этого в 150 мкл инкубационной смеси, содержащей соответствующий субстрат и кофермент, вносят 50 мкл суспензии разрушенных лимфоцитов. Конкретные значения концентраций субстратов и коферментов, а также pH среды для определяемых ферментов представлены в таблице 1.

Таблица 1
Фермент	Субстрат, мМ	Кофактор, мМ	PH буфера
Г6ФДГ	Глюкоза-6-фосфат - 1,5	НАДФ - 0,025	9,8
НАДФМДГ	Малат - 7,5	НАДФ - 0,375	9,8
Примечание: среду с рН 9,8 готовят на Трис-HCl буфере (ICN Biomedicals Inc., США).

После инкубации исследуемых проб при 37°C в течение 30 минут к 200 мкл инкубационной смеси добавляют 50 мкл флавинмононуклеотида (ФМН) в концентрации 1,5×10^-5 М, 50 мкл 0,0005% миристинового альдегида и 10 мкл ферментативной системы НАДН: ФМНоксидоредуктаза-люцифераза (все реактивы биолюминесцентной системы разводят в 0,1 М K⁺, Na⁺-фосфатном буфере с pH 7,0). После смешивания биолюминесцентных реактивов и инкубационной пробы с помощью биохемилюминометра, например марки “БЛМ-3606М”, измеряют свечение. Учитывая, что в клетках имеется определенное количество субстратов для течения различных метаболических реакций, в том числе и катализируемых исследуемыми ферментами, определяют показатели, условно названные “субстратный фон ферментов”. Определение производят в тех же условиях, что и для вышеперечисленных дегидрогеназ, но в инкубационную смесь вместо соответствующего субстрата вносят буфер. В результате измерения свечения на биолюминометре получают относительные значения активности исследуемых ферментов. Чтобы получить абсолютные значения активности ферментов строят графики зависимости интенсивности биолюминесценции от концентрации НАДФН (калибровочный график). Для этого 200 мкл стандартного раствора НАДФН в диапазоне 10^-9-10^-4 М в Трис-HCl-буфере pH 9,8 вносят в кюветы биолюминометра, содержащие ФМН, миристиновый альдегид и НАДФН: ФМНоксидоредуктазу-люциферазу в концентрациях, указанных выше, после чего производят измерение интенсивности биолюминесценции. Активность ферментов рассчитывают по формуле:

A=Δ[C]×V/T

где:

A - активность дегидрогеназы, E на 1×10⁴ лимфоцитов (1E=1 мкмоль/мин [1]);

Δ[C] - разница концентраций НАДФН в пробах “фермент” и “фон фермента”, мкмоль;

V - объем пробы, мл;

Т - время инкубации, мин.

Затем рассчитывают КЛУО по формуле:

КЛУО=НАДФМДГ/Г6ФДГ.

При значении КЛУО, равном или выше 5,56, прогнозируют антиаритмическую эффективность препарата омега-3 ПНЖК при лечении больных ЖНРС и ПИКС. При значении КЛУО ниже 5,56 прогнозируют отсутствие антиаритмической эффективности препарата омега-3 ПНЖК при лечении данной категории больных.

Данный способ апробирован на 30 больных ЖНРС и ПИКС, проходивших лечение и наблюдение на базе клинического отделения соматической патологии и прогнозирования здоровья ФГБУ «НИИ медицинских проблем Севера» СО РАМН. Результаты обследования представлены в табл.2.

Таблица 2
Особенности распределения величины КЛОУ у больных ЖНРС и ПИКС при лечении высококонцентрированным препаратом ω-3 полиненасыщенных жирных кислот
КЛОУ	Отсутствие антиаритмической	Наличие антиаритмической

	эффективности n=21	эффективности n=9
Медиана	1,11	10,69
Минимальное значение	0,01	5,56
Максимальное значение	5,68	98,55

Активности НАДФМДГ и Г6ФДГ определяли с помощью биолюминесцентного метода. По результатам обследования установлено, что из 30 больных ЖНРС и ПИКС, проходивших лечение высококонцентрированным препаратом со-3 ПНЖК у 9 (30%) больных получена положительная динамика. У этих больных величина КЛОУ составила 5,56-98,55. У 21 (70%) больного установлено отсутствие антиаритмической активности высококонцентрированного препарата ω-3 ПНЖК. У этих больных величина КЛОУ составила 0,0-5,68. У одного больного прогноз не совпал. Величина КЛОУ была выше 5,56, но антиаритмической эффективности препарата не получено. Таким образом, отмечено совпадение прогноза в 96,7%.

Примеры реализации предлагаемого способа.

Пример 1. Пациент Е. 69 лет, история болезни №1531/446. Находился на стационарном лечении в кардиологическом отделении клиники «ФГБУ НИИ медицинских проблем Севера» СО РАМН, а затем под наблюдением в течение 6 месяцев с 31.03.08 с диагнозом: ИБС, стабильная стенокардия напряжения 3 функционального класса. Постинфарктный кардиосклероз. Сердечная недостаточность IIА степени (по NYHA II функциональный класс). Нарушение ритма сердца по типу желудочковой экстрасистолии. При поступлении проведено 24-часовое холтеровское мониторирование ЭКГ, по результатам которого зарегистрирована ЖЭ: 1000 за сутки, в 27-х эпизодах парная.

До проведения антиаритмической терапии больной был обследован по заявленному способу. По результатам обследования активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови: НАДФМДГ - 4,548; Г6ФДГ - 0,426. Величина КЛОУ составила 10,69 (больше 5,56), что дает основание прогнозировать антиаритмический эффект ω-3 ПНЖК.

Пациенту дополнительно (к стандартной медикаментозной терапии ИБС) был назначен Омакор (ω-3 ПНЖК) в дозе 1 грамм в сутки сроком на 6 месяцев. Повторное обследование пациента, проведенное через 6 месяцев, подтвердило положительный прогноз антиаритмического воздействия препарата. Было проведено контрольное 24-часовое холтеровское мониторирование ЭКГ, зарегистрирована ЖЭ: 84 за сутки, парные экстрасистолы отсутствуют (полный антиаритмический эффект).

Пример 2. Пациентка Ф. 63 лет, история болезни №1084/254. Находилась на стационарном лечении в кардиологическом отделении клиники «ФГБУ НИИ медицинских проблем Севера» СО РАМН, а затем под наблюдением в течение 6 месяцев с 4.03.08 с диагнозом: ИБС, стабильная стенокардия напряжения 3 функционального класса. Постинфарктный кардиосклероз. Сердечная недостаточность IIA степени (по NYHA II функциональный класс). Нарушение ритма сердца по типу желудочковой экстрасистолии. При поступлении проведено 24-часовое холтеровское мониторирование ЭКГ, по результатам которого зарегистрирована желудочковая экстрасистолия (ЖЭ): 627 за сутки, в 4-х эпизодах парная, в 1 эпизоде групповая, 1 кратковременный пароксизм желудочковой тахикардии - 10 комплексов подряд, длительностью 4 сек.

До проведения антиаритмической терапии больная была обследована по заявленному способу. По результатам обследования активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови: НАДФМДГ - 0,007 мкЕ, Г6ФДГ - 0,011 мкЕ. Величина КЛОУ составила 0,647 (меньше 5,56), что дает основание прогнозировать отсутствие полного антиаритмического эффекта ω-3 ПНЖК.

Пациентке дополнительно (к стандартной медикаментозной терапии ИБС) был назначен Омакор (ω-3 ПНЖК) в дозе 1 грамм в сутки сроком на 6 месяцев. Повторное обследование пациентки, проведенное через 6 месяцев, подтвердило отрицательный прогноз антиаритмического воздействия препарата. Было проведено контрольное 24-часовое холтеровское мониторирование ЭКГ. Зарегистрирована ЖЭ: 15 за сутки, в 2-х эпизодах парная (отсутствует полный антиаритмический эффект - нет снижения парных ЖЭ на 90%).

Технический результат от реализации предлагаемого способа:

- возможность прогнозирования антиаритмического эффекта высококонцентрированного препарата ω-3 ПНЖК у пациентов с ЖНРС и ПИКС до начала приема препарата;

- инвазивное вмешательство ограничено однократным забором из вены малого объема крови (2 мл);

- возможность своевременной профилактики желудочковых нарушений ритма у постинфарктных больных.

Таким образом, способ информативен, отвечает современным требованиям к методам лабораторной диагностики, позволяет своевременно определить антиаритмическую эффективность высококонцентрированного препарата ω-3 полиненасыщенных жирных кислот у пациентов с ЖНРС и ПИКС до начала приема препарата.

Источники информации

1. Биохимия / Под ред. Е.С. Северина. - М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 784 с.

2. Гайковая Л.Б., Богданова В.Г., Бурбелло А.Т., Болдуева С.А., Иванова М.И. Способ оценки эффективности антиаритмического действия омега-3 полиненасыщенных жирных кислот у пациентов с инфарктом миокарда // Заявка на изобретение №201100602/15 от 11.01.2011. Опубл. 10.08.2012. Бюл. №22.

3. Гизатулина Т.П., Бельмесева А.А., Дубровская Э.Н., Рычков А.Ю., Харац В.Е. Прогнозирование антиаритмического эффекта β-блокаторов при пароксизмальной форме фибрилляции предсердий // Вестник аритмологии. - 2004. - №35, Приложение. - С.18-19.

4. Дощицин В.Л. Внезапная аритмическая смерть и угрожающие аритмии // Российский кардиологический журнал. - 1999. - №1. - С.46-51.

5. Каретникова В.Н., Груздева О.В., Барбараш О.Л. Роль маркеров воспаления в оценке прогноза у больных инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST в сочетании с нарушениями углеводного обмена // Кардиология. - 2012. - №8. - С.20-26.

6. Коржаков И.И. Оценка влияния омега-3 полиненасыщенных жирных кислот на течение инфаркта миокарда // Врач-аспирант. - 2012. - Т. 50, №1.2. - С.248-252.

7. Куртасова Л.М., Хват Н.С., Савченко А.А. Особенности энзиматического статуса и функциональной активности иммунокомпетентных клеток периферической крови у больных раком почки // Вестник РАМН. - 2010. - №5. - С.29-33.

8. Логачева И.В., Баранцева Н.Г., Винокурова Е.С. Влияние омега-3 полиненасыщенных жирных кислот на динамику предикторов внезапной сердечной смерти у больных Q-инфарктом миокарда // Кардиология. - 2012. - №12. - С.17-23.

9. Нурбаев Т.А., Пирназаров М.М., Никишин А.Г. Ранняя противовоспалительная эффективность высоких доз омега-3-полиненасыщенных жирных кислот у больных острым инфарктом миокарда с сахарным диабетом 2 типа // Врач-аспирант. - 2012. - Т. 53, №4.1. - С.134-141.

10. Радзевич А.Э., Инчина В.И., Столярова В.В., Коняхин А.Ю. Коррекция электрической нестабильности миокарда препаратами с антиоксидантной активностью // Российский кардиологический журнал. -2004 - №1. С.54-59.

11. Савельева И.В., Бакалов С.А., Голицин С.П. Стратификация больных с желудочковыми аритмиями по группам риска внезапной смерти // Кардиология. - 1997. - №8. - С.82-96.

12. Савченко А.А., Сунцова Л.Н. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови человека биолюминесцентным методом // Лабораторное дело.-1989. - №11. - С.23-25.

13. Сыркин А.Л., Иванов Г.Г., Аксельрод А.С., Буланова Н.А., Попов В.В. Прогнозирование эффективности поддерживающей антиаритмической терапии при пароксизмальной форме фибрилляции предсердий // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2010. - Т.3, №4. - С.84-87.

14.Хлопина И.А., Шацова Е.Н., Добродеева Л.К. Характеристика иммунного ответа у больных ишемической болезнью сердца в отдаленные сроки после коронарного шунтирования // Экология человека. - 2006. - №12. - С.14-17.

15. Ярилин А.А. Иммунология. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 752 с.

16. Alber H.F., Frick М., Suessenbacher A. et al. Effect of atorvastatin on circulating proinflammatory T-lymphocyte subsets and soluble CD40 ligand in patients with stable coronary artery disease - a randomized, placebo-controlled study // Am. Heart J. - 2006. - Vol. 151, №1. - P.139.

17. Boyum A. Isolation of lymphocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1968. - Vol.21 (Suppl.97). - P.77-80.

18. Papa A., Emdin M., Passino C. et al. Predictive value of elevated neutrophil-lymphocyte ratio on cardiac mortality in patients with stable coronary artery disease // Clin. Chim. Acta. - 2008. - Vol.395, №1-2. - P.27-31.

19. Myerburg R.J., Hendel R.C. Expanding risk-profiling strategies for prediction and prevention of sudden cardiac death // Journal of the American College of Cardiology. - 2010. - Vol.56, №3. - P.215-216.

Способ прогнозирования антиаритмической эффективности высококонцентрированного препарата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот при лечении больных с желудочковыми нарушениями ритма сердца и постинфарктным кардиосклерозом путем исследования ферментов лимфоцитов периферической крови пациента до начала терапии, отличающийся тем, что до начала терапии определяют активности ферментов: НАДФ-зависимой декарбоксилирующей малатдегидрогеназы (НАДФМДГ) и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), после чего рассчитывают коэффициент липидно-углеводного обмена (КЛУО), представляющий собой отношение активности НАДФМДГ к активности Г6ФДГ, то есть КЛУО=НАДФМДГ/Г6ФДГ, и при значении КЛУО, равном или больше 5,56, прогнозируют антиаритмическую эффективность препарата, а при значении КЛУО меньше 5,56 - отсутствие антиаритмической эффективности препарата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному моноклональному анти-LOXL2 антителу или его антиген-связывающему фрагменту, а также к конъюгатам, их содержащим.

Диагностика индуцируемых глютеном аутоиммунных заболеваний // 2548730

Группа изобретений относится к медицине, а именно диагностике глютен-чувствительной энтеропатии у генетически предрасположенных пациентов, и может быть использована для уточнения диагноза аутоиммунного заболевания.

Способ и набор для иммуноферментного определения функциональной активности компонента с3 комплемента человека по способности связываться с пептидогликаном // 2535159

Группа изобретений относится к медицинской иммунологии, а именно к способам определения функциональной активности компонентов комплемента в сыворотке крови человека при диагностике ряда заболеваний и в биологических препаратах.

Способ идентификации модуляторов катехол о-метилтрансферазы // 2535125

Изобретение относится к медицине и описывает способ идентификации модуляторов активности фермента катехол-O-метилтрансферазы (СОМТ), включающий а) получение 4-нитрокатехола, ковалентно связанного с Alexa Fluor® 488, б) приведение в контакт молекулы из этапа а) с ферментом катехол-O-метилтрансферазой (COMT), S-аденозилметионином (SAM) и соединением-кандидатом и в) измерение показателей флуоресценции смеси из этапа б), в котором измененные показатели флуоресценции в присутствии соединения-кандидата по сравнению с контролем являются признаком наличия модулятора фермента катехол-O-метилтрансферазы (COMT).

Способ дифференциальной диагностики стадий хронизации вирусного гепатита с у подростков // 2528911

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, инфектологии и гепатологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики стадий хронизации вирусного гепатита С у подростков.

Способ прогнозирования неблагоприятного исхода гипертрофической кардиомиопатии // 2527768

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования неблагоприятного исхода гипертрофической кардиомиопатии. Методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) в крови пациента определяют величины тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 (TIMP 1) и терминального фрагмента мозгового натрийуретического пептида (NT pro BNP).

Способ диагностики онкологических заболеваний и иммуноферментный набор для его осуществления // 2522231

Группа изобретений относится к области медицинской диагностики, иммунологии и онкологии, в частности к новым онкомаркерам и способам диагностики онкологических заболеваний.

Высокочувствительный способ определения иммуноглобулин-протеиназной активности с использованием полимерных матриц // 2519071

Изобретение относится к области биохимии и предназначено для определения IgG-протеиназной активности. В лунках полистиролового планшета сорбируют полимерные матрицы небелковой природы - ДНК, хитин, затем в лунки добавляют специфические к этой матрице IgG и раствор, содержащий протеолитические ферменты.

Способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроогранизмов к антибиотикам на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический дигуанозинмонофосфат // 2518249

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроорганизмов к антибиотикам и факта присутствия бактериальных биопленок на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический дигуанозинмонофосфат, с пороговой чувствительностью 50 пг/мл, включающий: 1) выделение фосфодиэстеразы-мишени из лизированных бактериальных клеток; 2) связывание фосфодиэстеразы биотинилированными антителами, специфичными к некаталитическим доменам фосфодиэстеразы; 3) аффинную очистку комплексов, сформированных фосфодиэстеразой-мишенью и биотинилированным антителом при помощи парамагнитных частиц, содержащих нейтравидин или его аналоги, связывающие биотин; 4) взаимодействие комплексов фосфодиэстераза/биотинилированное антитело, иммобилизованных на парамагнитных частицах, с комплексами, содержащими с-di-GMP в форме G-квадруплексов с интеркалированным красителем, сопровождающееся падением интенсивности флуоресценции по мере разрушения комплексов интеркалирующего красителя c-di-GMP; 5) измерение падения флуоресценции при гидролизе c-di-GMP и разрушении комплекса c-di-GMP с интеркалирующим красителем с последующим количественным определением активности фосфодиэстеразы на основании калибровочных кривых, построенных с использованием известных количеств рекомбинантного фермента фосфодиэстеразы, идентичного исследуемой мишени; 6) выявление повышенного уровня фосфодиэстеразной активности, обнаруживаемого тестируемыми антибиотикоустойчивыми бактериальными штаммами, способными к формированию биопленок, по сравнению с уровнем фосфодиэстеразной активности, обнаруживаемым для контрольных штаммов бактерий того же вида, не обладающих антибиотикоустойчивостью и способностью к формированию биопленок.

Способы созревания фолликулов яичника in vitro // 2492866

Группа изобретений относится к медицине, фармакологии, к способам и композициям ингибиторов фосфатазы PTEN для созревания овариальных фолликулов и ооцитов in vitro. Использование ингибиторов фосфатазы PTEN, таких как комплексы оксованадата и пероксованадата: биспероксо (бипиридин) оксованадат, биспероксо (1,10-фенантролин) оксованадат, биспероксо (пиколинато) оксованадат, биспероксо (5-гидроксипиридин-2-карбоксил) оксованадат, ди-(пиколинат) оксованадат, ди-(3-гидроксипиколинат) оксованадат, биспероксо (фенилбигуанид) оксованадат, ди-(фенилбигуанид) оксованадат и биспероксо (изохинолинкарбоновой кислоты) оксованадат, обеспечивает созревание и/или активацию in vitro ооцитов и фолликулов, таких как примордиальные, промежуточные и первичные фолликулы.

Способ прогноза прогрессирования желудочковой экстрасистолии у больных постинфарктным кардиосклерозом // 2554808

Изобретение относится к медицине и описывает способ прогноза прогрессирования желудочковой экстрасистолии у больных постинфарктным кардиосклерозом (ПИКС) путем обследования пациентов, при этом у пациентов в период до года после перенесенного ОИМ, с умеренной частотой желудочковой экстрасистолии, на фоне стандартной терапии, включающей β-адреноблокатор, в лимфоцитах периферической крови определяют активности ферментов: НАДФ-зависимой декарбоксилирующей малатдегидрогеназы (НАДФМДГ), НАДФ-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ), глутатионредуктазы (ГР) и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФН-ГДГ), после чего рассчитывают коэффициент внутриклеточного НАДФН-обмена (КВНО), представляющий собой отношение суммы активности НАДФМДГ и НАДФГДГ к сумме активности ГР и НАДФН-ГДГ, т.е. КВНО=(НАДФМДГ+НАДФГДГ)/(ГР+НАДФН-ГДГ), и при значении КВНО выше 0,0028 прогнозируют прогрессирование желудочковой экстрасистолии в течение двух лет после ОИМ, а при значении КВНО, равном или ниже 0,0028, - сохранение умеренной частоты желудочковой экстрасистолии в течение двух лет после ОИМ. Способ позволяет своевременно определить прогрессирование желудочковой экстрасистолии у больных ПИКС в период до двух лет после перенесенного острого инфаркта миокарда и может быть рекомендован для применения в клинической практике. 2 табл., 2 пр.

Способ и набор для иммуноферментного определения функциональной активности компонента с3 комплемента человека по способности связываться с лизоцимом // 2571289

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложен способ для иммуноферментного определения функциональной активности компонента С3 комплемента человека. В лунках микропанели сорбируют лизоцим, вносят анализируемую пробу, содержащую компонент С3 комплемента человека с неизвестной активностью, проводят инкубацию в присутствии ЭДТА, после осушения планшета и отмывки в лунки вносят конъюгат фермента с антителами против компонента С3 человека и субстрат этого фермента. Расчет активности компонента С3 проводят по количеству образовавшегося продукта ферментативной реакции. Предложен набор, содержащий плоскодонную микропанель с сорбированным препаратом лизоцима, ЭДТА, конъюгат фермента с антителами к компоненту С3 комплемента человека, субстратный буфер и донорскую сыворотку крови с известной активностью С3 в качестве стандарта. Предложенная группа изобретений позволяет определять функциональную активность компонента С3 комплемента человека без необходимости активации всей системы комплемента и обладает хорошей воспроизводимостью результатов. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.

Композиции и способы характеризации миопатии // 2574932

Группа изобретений относится к области иммунологии и медицины и касается способа выявления аутоиммунного ответа против белка 3-гидрокси-3-метилглутарил-коэнзим А-редуктазы, способа диагностики миопатии, а также способа определения целесообразности продолжения терапии статинами у субъекта, включающих выявление аутоантитела, распознающего указанный белок. Предложен также набор для диагностики миопатии. Группа изобретений обеспечивает возможность определить и выявить аутоантитела у субъекта с мышечной болью и слабостью, при этом выявляется необходимость прекращения терапии статинами и необходимость начала иммуносупрессивной терапии. 8 н. и 24 з.п. ф-лы, 8 ил., 5 табл., 11 пр.

Биомаркерный анализ для детектирования или измерения ингибирования активности tor-киназы // 2587040

Группа изобретений раскрывает способы детектирования и/или ингибирования активности TOR-киназы у пациентов, включающие измерение с помощью проточной цитометрии количества фосфорилированного 4ЕВР1 в биологическом образце пациента перед и после введения ингибитора TOR-киназы, где ингибитор TOR-киназы представляет собой 7-(6-(2-гидроксипропан-2-ил)пиридин-3-ил)-1-(транс-4-метоксициклогексил)-3,4-дигидропиразино[2,3-b]пиразин-2(1Н)-он, или 1-этил-7-(2-метил-6-(4Н-1,2,4-триазол-3-ил)пиридин-3-ил)-3,4-дигидропиразино[2,3-b]пиразин-2(1Н)-он, или его фармацевтически приемлемую соль, стереоизомер или таутомер, а также набор для использования при проточной цитометрии для детектирования или измерения ингибирования активности TOR-киназы у пациента. Группа изобретений эффективна в измерении и/или детектировании ингибирования активности TOR-киназы. 5 н.п. ф-лы, 6 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ дифференциальной диагностики лимфомы ходжкина и лимфаденита у подростков // 2599100

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может применяться для проведения дифференциальной диагностики лимфомы Ходжкина и лимфаденита у подростков. Способ дифференциальной диагностики заключается в исследовании активности фермента тимидинкиназы 1 в сыворотке крови пациентов с аденопатией неясной этиологии, и при ее значении в пределах 10,6-14,8 Е/л диагностируют лимфаденит, а при значении в пределах 39,6-45 Е/л диагностируют лимфому Ходжкина. Использование способа позволяет улучшить результаты дифференциальной диагностики, индивидуализировать тактику лечения. 1 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования рецидивов рака тела матки на основании уровня экспрессии генов pten и cyp1b1 // 2605302

Изобретение относится к молекулярной биологии. Способ включает: экстракцию препаратов суммарной РНК, получение комплементарной ДНК с помощью реакции обратной транскрипции на РНК-матрице и последующую амплификацию в режиме реального времени с использованием высокоспецифичных праймеров для генов PTEN, CYP1B1 и АСТВ (референтный локус), а также расчет коэффициента относительной экспрессии генов PTEN и CYP1B1 (КPTEN и КCYP1B1) методом RT-PCR. Способ обладает высокой чувствительностью и специфичностью, его осуществление возможно с операционным биопсийным материалом; способ занимает менее 10 часов. Способ легко воспроизводим в условиях стационара онкологического профиля и позволяет осуществить ранний прогноз вероятности рецидива рак тела матки. 2 табл.

Способ поддержания жизнеспособности популяций животных или растений на урбанизированных территориях // 2620079

Изобретение относится к области популяционной генетики и предназначено для поддержания жизнеспособности популяций животных или растений на урбанизированных территориях. На исследуемой урбанизированной территории определяют доли полиморфных локусов, частоты аллелей и численность популяций видов животных и растений. Определяют коэффициент жизнеспособности (Кж) по формуле. Если Кж≥0,9, то популяция в оздоровлении не нуждается. Если 0,9>Кж>0,5, то популяция нуждается в оздоровлении. Если Кж≤0,5, то популяция нуждается в срочном оздоровлении. При получении Кж<0,9 осуществляют внесение генетического материала из эталонной популяции. Изобретение обеспечивает жизнеспособность популяций животных или растений на урбанизированных территориях путем определения Кж и внесения генетического материала из эталонной популяции. 3 з.п. ф-лы, 1 ил., 10 табл., 5 пр.

Способ прогнозирования необходимости лазерной коагуляции при ретинопатии недоношенных // 2630614

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования необходимости проведения лазерной коагуляции при ретинопатии недоношенных. Для прогнозирования необходимости лазерной коагуляции при ретинопатии недоношенных осуществляют определение массы тела новорожденного, индекс трансаминаз, представляющий собой отношение уровня аспартатаминотрансферазы к уровню аланинаминотрасферазы (АСТ/АЛТ), и количество белка быстрой фазы. При массе тела новорожденного менее 1364 грамм, индексе трансаминаз выше 0,52 и количестве белка быстрой фазы выше 9,9 мг/л прогнозируют необходимость применения лазерной коагуляции. Использование изобретения позволяет своевременно провести лазерную коагуляцию аваскулярных зон сетчатки, обеспечивая тем самым дальнейшее развитие глаза, стабилизацию зрительных функций и повышение качества жизни недоношенных детей. 1 табл., 3 пр.

Способ дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы // 2646800

Изобретение используется в патологической анатомии, эндокринологии, хирургии. Способ дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы заключается в том, что проводят гистоэнзиматическое исследование фермента тиреопероксидазы (ТПО) в щитовидной железе и по активности ТПО диагностируют диффузный токсический зоб, многоузелковый токсический зоб, фолликулярную аденому в состоянии эутиреоза, аденокарциному. Целью изобретения является обеспечение достоверности полученных результатов при проведении дифференциальной диагностики заболеваний щитовидной железы. 4 пр., 2 ил.