Способ лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств и лекарственное средство для лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств

Группа изобретений относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств. Для этого вводят лекарственное средство, содержащее активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека I типа. Это обеспечивает эффективное снижение веса и коррекцию метаболических нарушений при отсутствии побочных эффектов. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 7 табл., 4 пр.

 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для повышения эффективности лечения ожирения, преимущественно экзогенно-конституционального, и в том числе в сочетании с нарушениями липидного обмена, включая метаболический синдром.

Согласно данным Международной рабочей группы по проблеме ожирения (International Obesity Task Force), более 300 млн. человек на нашей планете страдают ожирением, а еще 800 млн. человек имеют избыточную массу тела. При сохранении таких высоких темпов роста заболеваемости к 2025 г. ожидается двукратное увеличение числа страдающих ожирением.

Избыточный вес и ожирение являются одной из наиболее распространенных проблем в развитых странах и повышают риск развития заболеваний сердечно-сосудистой системы, дислипидемии, сахарного диабета 2 типа, онкологических заболеваний.

Среди современных препаратов, используемых для снижения массы тела, можно выделить три основные группы - препараты периферического и центрального действия усиливающие «сжигание» калорий, препараты, снижающие поступления жиров в организм, и препараты центрального действия (регуляторы аппетита) (Padwal R.S., Majumdar S.R., Drug treatments for obesity: orlistat, sibutramine, and rimonabant. Lancet 2007; 366 (9555):71-7). Препараты всех групп имеют множественные побочные эффекты, в связи с чем их применение в повседневной практике крайне ограничено. Таким образом, разработка и внедрение новых безопасных и эффективных препаратов для снижения массы тела являются весьма актуальными.

Из уровня техники известна композиция для лечения ожирения и резистентности к инсулину при регуляции уровня глюкозы в крови, содержащая соединение, выделенное из натурального источника и очищенное, выбираемое из группы, включающей антоцианин, антоцианидин и их смеси (RU 2359689 С2, A61K 36/45, 10.09.2008). Однако при использовании данной композиции возникает сложностью подбора дозы.

Также известно использование лекарственного препарата на основе антител к липазе для лечения ожирения у млекопитающих (WO/1999/002187, A61K 38/00, 21.01.1999). Однако данный препарат может вызывать выраженные побочные эффекты и вследствие этого применяется в незначительном числе случаев.

Из уровня техники известно лекарственное средство для перорального лечения ожирения, сахарного диабета и других заболеваний, сопровождающихся нарушением толерантности к глюкозе, содержащее антитела к бета-субъединице рецептора инсулина в активированной форме (WO 2007/149010 A1, A61K 39/395, 27.12.2007). Однако данное лекарственное средство эффективно только у части больных, имеющих инсулинорезистентность.

Изобретение направлено на создание эффективного способа лечения ожирения и связанных с ним метаболических расстройств без побочных эффектов и соответствующего лекарственного средства центрального и периферического действия на основе антител к известному каннабиноидному рецептору человека (Ken Mackie. Cannabinoid receptors as therapeutic targets. The Annual Review of Pharmacology and Toxicology, 2006. 46:101-122).

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе лечения ожирения и/или излишнего веса и сопутствующих метаболических расстройств путем введения в организм лекарственного средства, согласно изобретению, лекарственное средство содержит активированную - потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в виде активированного - потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

Возможно использование активированной - потенцированной формы антител к цельной молекуле каннабиноидного рецептора I типа человека или полипептидному фрагменту с последовательностью, выбираемой, например, из следующей группы:

QRGTQKSIII;

EKLQSVCSDIFPHIDETYL;

IQRGTQKSIIIHTSEDGKVQVTRPDQARM;

KAHSHAVRMIQRGTQKSIIIHTSEDGKVQVTRPDQARMDIRLAKT;

MSVSTDTSAEAL;

TEFYNKSLSSFKENEENIQCGENFMDIECFMVLNPS;

AQPLDNSMGDSDCLHKHAN;

GTQKSIIIHTSEDG;

MTAGDNPQLVPADQVNITEFYNKSLSSFKENEENIQCGENFMDIECFMVLN;

VVAFCLMWTIAIVI;

EFYNKSLSSFKENEENIQCGENFMDIECFMVLNPSQQLAIAVLSLTL;

NEENIQCGE;

GSPFQEKMTAGDNPQLVPADQVNITEFYNKSL;

AYKRIVTRPKAVVAFCLMWTIAIVIAVLPLLGWN.

При этом активированную - потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору I типа человека используют в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030 и 100200 раз.

Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что лекарственное средство для лечения ожирения, согласно изобретению, содержит активированную - потенцированную форму антител к цельной молекуле или полипептидному фрагменту каннабиноидного рецептора человека в виде активированного - потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

При этом водный или водно-спиртовой раствор активированной - потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека получен путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричного раствора аффинно очищенных антител к каннабиноидному рецептору I типа человека с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.

Предпочтительно лекарственное средство содержит активированную - потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору I типа человека в сверхмалой дозе, приготовленной из матричного раствора, сверхразведенного в 10012, в 10030 в 100200, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30 и С200.

Кроме того, лекарственное средство может быть выполнено в твердой лекарственной форме и содержать эффективное количество нейтрального носителя, насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной - потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, и фармацевтически приемлемые добавки.

При этом фармацевтически приемлемые добавки могут включать лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

Заявленный технический результат обусловлен тем, что известные каннабиноидные рецепторы 1 типа и эндоканнабиноиды представляют собой единую систему в гипоталамусе, которая, воздействуя на специфические участки мезолимбической области головного мозга, влияет на чувство насыщения и регулирует аппетит и, как результат, потребление пищи. При этом предложенное лекарственное средство на основе активированной - потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору человека (т.е. формы антител к каннабиноидному рецептору человека, приготовленной по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия - вертикального встряхивания, которая обладает активностью в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения ожирения), обеспечивает получение неожиданного терапевтического эффекта, который заключается в нормализации углеводного и липидного обмена, приводящей к снижению массы тела без побочных явлений, что подтверждено экспериментально на адекватных (валидных) моделях.

Кроме того, полученное в соответствии с изобретением техническое решение расширяет арсенал лекарственных средств центрального действия, предназначенных для эффективного лечения ожирения и/или излишнего веса без побочных эффектов. В том числе и в составе комплексной терапии.

Лекарственное средство приготовляют, преимущественно, следующим образом.

Для приготовления гомеопатически активированной - потенцированной формы действующего вещества - антител к каннабиноидному рецептору человека используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г. Фримеля, М., «Медицина», 1987, с. 9-33; или, например, в статье Laffly Е., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol. 14. - N 1-2. P. 33-55.

Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.

Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемым в соответствии с изобретением веществом - антигеном: каннабиноидным рецептором I типа человека. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифическую антисыворотку с высоким содержанием антител, которую и используют для получения активированной - потенцированной формы. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.

Для иммунизации кроликов можно использовать в качестве иммуногена (антигена) адъювант и цельную молекулу каннабиноидного рецептора I типа человека следующей последовательности:

MKSILDGLAD TTFRTITTDL LYVGSNDIQY EDIKGDMASK

LGYFPQKFPL TSFRGSPFQE KMTAGDNPQL VPADQVNITE

FYNKSLSSFK ENEENIQCGE NFMDIECFMV LNPSQQLAIA

VLSLTLGTFT VLENLLVLCV ILHSRSLRCR PSYHFIGSLA

VADLLGSVIF VYSFIDFHVF HRKDSRNVFL FKLGGVTASF

TASVGSLFLT AIDRYISIHR PLAYKRIVTR PKAVVAFCLM

WTIAIVIAVL PLLGWNCEKL QSVCSDIFPH IDETYLMFWI

GVTSVLLLFI VYAYMYILWK AHSHAVRMIQ RGTQKSIIIH

TSEDGKVQVT RPDQARMDIR LAKTLVLILV VLIICWGPLL

AIMVYDVFGK MNKLIKTVFA FCSMLCLLNS TVNPIIYALR

SKDLRHAFRS MFPSCEGTAQ PLDNSMGDSD CLHKHANNAA

SVHRAAESCI KSTVKIAKVT MSVSTDTSAE AL

или, преимущественно, полипептидный фрагмент каннабиноидного рецептора I типа человека с последовательностью, выбираемой, например, из следующей группы:

QRGTQKSIII;

EKLQSVCSDIFPHIDETYL;

IQRGTQKSIIIHTSEDGKVQVTRPDQARM;

KAHSHAVRMIQRGTQKSIIIHTSEDGKVQVTRPDQARMDIRLAKT;

MSVSTDTSAEAL;

TEFYNKSLSSFKENEENIQCGENFMDIECFMVLNPS;

AQPLDNSMGDSDCLHKHAN;

GTQKSIIIHTSEDG;

MTAGDNPQLVPADQVNITEFYNKSLSSFKENEENIQCGENFMDIECFMVLN;

VVAFCLMWTIAIVI;

EFYNKSLSSFKENEENIQCGENFMDIECFMVLNPSQQLAIAVLSLTL;

NEENIQCGE;

GSPFQEKMTAGDNPQLVPADQVNITEFYNKSL;

AYKRIVTRPKAVVAFCLMWTIAIVIAVLPLLGWN

Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенных инъекций для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°C) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000 g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученную антисыворотку, которая должна быть желтого цвета, хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -70°C. Для выделения из антисыворотки антител к каннабиноидному рецептору I типа человека производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:

1. 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl добавляют 6,26 г Na2SO4, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°C;

2. выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;

3. после удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;

4. фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.

Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, который находится на нерастворимом матриксе с последующим элюированием концентрированными растворами соли.

Полученный, таким образом, буферный раствор поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷2,5 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной - потенцированной формы.

Активированную - потенцированную форму действующего вещества - антител к каннабиноидному рецептору I типа человека в сверхмалой дозе готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения) или в 99 частях (для сотенного разведения С) или в 999 частях (для тысячного разведения М) нейтрального водного или водно-спиртового растворителя с многократным вертикальным встряхиванием - потенцированием (или "динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В. Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с. 14-29).

Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к каннабиноидному рецептору I типа человека с концентрацией 2,5 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают - потенцируют полученное 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-е сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-й части исходного матричного раствора антител к каннабиноидному рецептору I типа человека с концентрацией 2,5 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, полученный сверхразведением исходного матричного раствора в 10012 раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведении С30 и С200.

При использовании в качестве биологически активного жидкого компонента смеси различных гомеопатических, преимущественно сотенных, разведений, действующего вещества каждый компонент состава (например, С12, С30, С200) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения С11, С29, С199) и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную - потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору I типа человека в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200.

Возможно использование действующего вещества в виде смеси других различных гомеопатических разведений, например, десятичных и/или сотенных (D20, С30, С100 или С12, С30, С50 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.

При потенцировании вместо встряхивания в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять внешнее воздействие ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.

Заявленное лекарственное средство может быть использовано в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя - лактозы, насыщенного путем пропитывания до насыщения водным или водно-спиртовым раствором активированной - потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие, преимущественно, лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат. Твердую лекарственную форму приготовляют таблетированием из таблеточной массы, которая содержит 8÷10 масс. частей гранул лактозы, орошенных в псевдоожиженном-кипящем слое водным или водно-спиртовым раствором активированной - потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, 2÷7 масс. частей увлажненной 70% спиртом лактозы, пропитанных до насыщения водным или водно-спиртовым раствором активированной - потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие 75÷95 масс. частей чистой лактозы, 8÷15 масс. частей микрокристаллической целлюлозы и 0,8÷1,2 масс. частей стеарата магния. Масса таблетки может составлять 150÷500 мг. Предпочтительно использовать таблетки массой 250÷300 мг, которые включают 3,0÷6,0 мг/табл активированной - потенцированной формы водно-спиртовых разведений субстанции - действующего вещества поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР).

Предпочтительно для эффективного лечения ожирения или излишнего веса рекомендуется применять заявленное лекарственное средство по 1-2 таблетке (держать во рту до полного растворения) 2-4 раза в день.

Для проведения экспериментальных исследований были использованы поликлональные антитела, приготовленные по заказу специализированной фармацевтической фирмой.

Пример 1.

Для лечения ожирения неоднократно проводились попытки использовать психоактивные вещества (антидепрессанты, ноотропы, различные эндорфины, энкефалины, эндоканнабиноиды), воздействующие на систему позитивного эмоционального подкрепления и, прежде всего, функциональную активность «центров удовольствия» в латеральном гипоталамусе. Однако из-за выраженных побочных действий, развития привыкания (пристрастия) эффективное и одновременно безопасное лекарственное средство центрального действия до сих пор не создано.

Заявленное лекарственное средство по направленности действия - рецептор каннабиноидный 1 типа - является центральным, но в связи использованием особой технологии потенцирования оказывает воздействие на рецептор, приводящее к его сенситизации и вследствие этого - повышению чувствительности к эндогенным каннабиноидам.

Данный эффект подтверждается следующим экспериментом: проведено изучение влияния препарата на основе активированной - потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР) на функциональное состояние каннабиноидного рецептора 1 типа (in vitro) в 2 режимах: в режиме агониста и в режиме антагониста.

Режим агониста:

Перед внесением в лунки микропланшета (96-луночный планшет, объем лунки 250 μl) клетки суспендировали в буфере HBSS (Invitrogen), содержащем 20 мМ HEPES (рН=7.4). Клетки преинкубировали в течение 10 минут при комнатной температуре вместе с добавлением 20 мкл препарата СМД анти-КР. После преинкубации в лунки добавляли активатор аденилатциклазы NKH477. Клетки инкубировали в течение 10 минут 37°С и лизировали. В лунки вносили флуоресцентный акцептор (цАМФ, меченный D2) и флуоресцентный донор (антитела к цАМФ, меченные криптатом европия).

В качестве базального контроля вместо препарата СМД анти-КР суспензию клеток преинкубировали в присутствии HBSS буфера (20 мкл). В качестве стимулированного контроля вместо СМД анти-КР суспензию клеток преинкубировали в присутствии референсного агониста СР 55940 (20 мкл).

Функциональную активность (по концентрации цАМФ) оценивали методом гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF). Интенсивность флуоресценции в базальном контроле принимается за фоновую и ее значение вычитается из интенсивностей флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) и контроле (СР 55940):

Измеренный специфический ответ клетки на введение СМД анти-КР вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Измеренный специфический ответ клетки на введение референсного агониста (СР 55940) вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в контроле (СР 55940) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Результаты выражаются в процентах от специфического ответа клетки на введение референсного агониста в стимулированном контроле:

% ответа референсного агониста = ((измеренный специфический ответ/специфический ответ в контроле на введение референсного агониста)×100%).

Режим антагониста:

Перед внесением в лунки микропланшета (96-луночный планшет, объем лунки 250 µl) клетки суспендировали в буфере HBSS (Invitrogen), содержащем 20 мМ HEPES (рН=7.4). Клетки преинкубировали в течение 5 минут при комнатной температуре вместе с добавлением 20 мкл препарата СМД анти-КР. После добавления в лунки референсного агониста СР 55940 клетки инкубировали 10 минут при комнатной температуре. Далее в лунки добавляли активатор аденилатциклазы NKH477. Клетки инкубировали в течение 10 минут 37°С и лизировали. В лунки вносили флуоресцентный акцептор (цАМФ, меченный D2) и флуоресцентный донор (антитела к цАМФ, меченные криптатом европия).

В качестве базального контроля вместо СМД анти-КР суспензию клеток преинкубировали в присутствии референсного антагониста AM 281 (20 мкл). В лунки с базальным контролем не добавляли референсный агонист СР 55940. В качестве стимулированного контроля суспензию клеток преинкубировали в присутствии HBSS буфера, содержащего 20 мМ HEPES (рН=7.4), и референсного агониста СР 55940 (20 мкл).

Функциональную активность (по концентрации цАМФ) оценивали методом гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF). Интенсивность флуоресценции в базальном контроле принимается за фоновую и ее значение вычитается из интенсивностей флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) и контроле (СР 55940):

Измеренный специфический ответ клетки на введение СМД анти-КР вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Измеренный специфический ответ клетки на введение референсного агониста (СР 55940) вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в контроле (СР 55940) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Результаты выражаются в процентах ингибирования специфического ответа клетки на введение референсного агониста (СР 55940) в контроле:

% ингибирования ответа референсного агониста = 100% - ((измеренный специфический ответ/специфический ответ в контроле на введение референсного агониста)×100%)

В результате исследований показано (см. таблицу 1), что СМД анти-КР изменяет функциональную активность каннабиноидного рецептора 1 типа, оцененную по концентрации внутриклеточной цАМФ.

Образец (сверхмалые дозы антител к каннабиноидному рецептору I типа (смесь гомеопатических разведений С12+С30+С200)) проявляет свойства агониста каннабиноидному рецептору I типа, выраженность модифицирующего эффекта которого составляет 21% от эффекта стандартного агониста СР55940 (эффект стандартного агониста принимается за 100%).

Таблица 1
Рецептор Препарат Содержание СМД анти-КР в лунке (% по объему) (общий объем всех соединений в лунке равен 200 мкл) Режим агониста Режим агониста Пояснения к результатам
% ответа на СМД анти-КР Стандартный агонист % ингибирования ответа агониста Стандартный антагонист
СВ1-Рецептор каннабиноидный 1 типа СМД анти-КР 10% 21 СР 55940 0 АМ 281 СМД анти-КР обладают эффектом агониста, выраженность которого составляет 21% от эффекта стандартного агониста (принимается за 100%)

Пример 2.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства был использован водный раствор активированной - потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР).

В исследовании использованы 40 мышей-самцов линии С57В1 (вес на начало исследования 13,5-15,5 г). 10 мышей получали обычный стандартный корм (стандартная диета), 30 мышей - стандартный корм с высококалорийными добавками (высококалорийная диета) и одновременно либо дистиллированную воду (контроль, 0,4 мл/кг), либо сибутрамин1 (1Меридиа 10 мг капсулы, Abbott GMBH, Германия) (10 мг/кг), либо СМД анти-КР (0,4 мл/кг). Все препараты вводили внутрижелудочно 1 раз в день в течение 5 месяцев. До начала введения препаратов (исходно), а также каждую неделю после начала их введения измеряли потребление мышами корма. Потребление корма оценивали как среднее количество пищи (г), потребленного мышью за 1 и 2 месяца исследования, и как среднее количестве корма на 10 г массы тела мыши.

Мыши в группе низкокалорийной диеты потребляли в среднем за весь период наблюдения на 15% меньше корма, чем мыши на высококалорийной диете (табл.2). И сибутрамин и СМД анти-КР снижали потребление корма, причем эффект сибутрамина был выражен несколько выше: препарат снижал потребление корма в неделю на 19,3% (р<0,05), в то время как СМД анти-КР - только на 9,3% относительно контроля (р>0,05). На Таблице 2 представлены результаты влияния СМД анти-КР и сибутрамина на потребление пищи мышами С57В1 (средние значения за 5 месяцев наблюдения), М±m.

Таблица 2
Препарат Потребление корма (г/мышь) в день Потребление корма (г на 10 г массы тела) в день
Стандартная диета 2,95±1,42 1,35±0,05
Высококалорийная диета + дистиллированная вода 3,41±1,64# 1,54±0,05#
Высококалорийная диета + сибутрамин 2,75±1,36** 1,28±0,05**
Высококалорийная диета + диетра 3,10±2,02 1,44±0,08
Примечание: ** - отличия от контроля достоверны, р<0,01;
# - отличия от стандартной диеты достоверны, р<0,05

Однако при анализе динамики потребления корма были выявлены следующие особенности. На двадцатой неделе эксперимента мыши на высокожировой диете, получавшие СМД анти-КР, потребляли больше корма по сравнению с первой неделей эксперимента, что показано на Таблице 3.

Таблица 3
Влияние СМД анти-КР и сибутрамина на прирост массы тела мышей С57В1 и потребление пищи на 10 г веса за последнюю 20-ю неделю эксперимента.
Примечание: ** - отличия от контроля достоверны, р<0,01; *** - р<0,001

При этом у мышей, получавших СМД анти-КР, по-прежнему наблюдалось снижение прироста массы тела на 51,2% относительно контроля. Сибутрамин на последней двадцатой неделе эксперимента также снижал прирост массы тела на 51,5% по сравнению с контрольной группой.

Пример 3.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства был использован водный раствор активированной - потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР).

В исследовании использованы 33 мышей-самцов линии С57В1 (вес на начало исследования 13,09±0,738 г). Мыши получали модифицированную диету с высоким (45%) содержанием жира и одновременно либо дистиллированную воду (контроль, 0,2 мл/кг), либо сибутрамин (10 мг/кг), либо антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, смесь сотенных гомеопатических разведений С12+С30+С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР) (0,2 мл/кг). Все препараты СМД анти-КР вводили внутрижелудочно 1 раз в день в течение 2 месяцев. До начала введения препаратов (исходно), а также каждую неделю после начала их введения измеряли вес мышей на электронных весах Philips Cucina HR 239016 (Венгрия). Прирост массы тела мышей оценивали в % от исходного.

Начиная с 6 недели введения, СМД анти-КР снижала прирост массы тела мышей, содержащихся на высокожировой диете. В таблице 3 представлена средняя еженедельная масса (г) мышей С57В16, получавших высокожировую диету и СМД анти-КР (0,2 мл/мышь) или сибутрамин 10 мг/кг) (М±m). На Таблице 4 показан прирост массы тела мышей.

Таблица 4
Группа Масса тела (г), недели исследования
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Дистил. вода 12,18±0,501 15,27±0,982 15,27±0,488 16,00±0,972 18,18±0,569 17,27±0,557 20,18±0,501 20,55±0,608 21,45±0,857
Δ к исходному 25,4 25,4 31,3 49,3 41,8 65,7 68,7 76,1
Сибутрамин 13,82±1,094 13,45±0,474 16,73±0,407* 19,82±0,501** 20,18±0,784 20,91±0,563** 22,36±0,927 23,64±1,343 22,91±1,091
Δ к исходному -2,6 21,1 43,4 46,1 51,3 61,8 71,1 65,8
СМД анти-КР 13,27±0,619 16,18±0,182 17,45±0,282** 19,64±0,453** 20,18+0,423* 20,18+0,423** 19,82±0,501 21,64±0,364 22,00±0,467
Δ к исходному 21,9 31,4 47,9 52,1 52,1 49,43 63,0 65,8
Примечание: * - р<0,05 по отношению к группе контроля; ** - р<0,001 по отношению к группе контроля

Таким образом, препарат СМД анти-КР снижает пророст массы тела мышей на высокожировой диете, снижая потребление ими пищи и не уступает по эффективности известному широко используемому для снижения массы тела препарату сибутрамину.

Пример 4.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (6 мг/табл.) активированной - потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР).

В исследование принимали участие 80 добровольцев (20 мужчин и 60 женщин) в возрасте от 20 до 69 лет (средний возраст составил 40,2±1,26 года), 68,7% из которых страдали избыточной массой тела или ожирением (I-III степени), которые принимали по 1-й таблетке 2 раза в день. В Таблице 5 представлены демографические и антропометрические показатели пациентов, включенных в исследование. В анализ безопасности были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=80). В течение всего периода наблюдения за пациентами отмечалась хорошая переносимость препарата. Нежелательные явления отсутствовали. Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было. При оценке влияния СМД анти-КР на изменение массы тела испытуемых выявлено, что использование препарата привело к снижению массы тела 56 (70%) пациентов. У 24 (30%) пациентов вес оставался неизменным, или незначительно увеличивался, однако следует отметить, что среди указанных пациентов 14 (17,5%) исходно имели нормальную массу тела (ИМТ<25 кг/м2).

Таблица 5
Показатель Значение
Возраст, лет М±m 40,2±1,26
Рост, см М±m 167,1±0,89
Вес, кг М±m 80,3±1,85
Пол мужчины 20 человек (25%)
женщины 60 человек (75%)
ИМТ, кг/м2 М±m 28,7±0,6
ИМТ, кг/м2 менее 25 25 человек (31,3%) Нормальная масса тела
25-29,99 28 человек (35%) Избыточная масса тела (предожирение)
30-34,99 20 человек (25%) Ожирение I степени
35-39,99 5 человек (6,2%) Ожирение II степени
40 и более 2 человек (2,5%) Ожирение III степени

В динамике наблюдения у пациентов, ответивших на терапию, отмечалось статистически достоверное снижение массы тела (р<0,001), которое уже через 15 дней приема СМД анти-КР составило 1,1 кг (1,3%), а через 1 месяц достигло 1,9 кг (2,2%) от исходного значения, что показано в Таблице 6.

Таблица 6
Примечание: *** - Р от исх <0,001

Также в указанной группе пациентов уже через 1 неделю после начала приема СМД анти-КР отмечалось статистически значимое (р<0,001) уменьшение окружности талии и окружности бедер, которое к окончанию терапии достигло 2,3% и 2,7% соответственно. В Таблице 7 представлена динамика изменения окружности талии и окружности бедер.

Таблица 7
День 1 (исх) День 7 День 14 День 15 День 16 День 22 День 29 День 30
окружность талии, см
М±m, см 96,3±1,97 95,2±2,07** 93,7±1,82*** 94,2±1,96*** 95,1±2,16*** 94,5±2,16*** 94,3±2,10*** 94,1±2,07***
Δ от исх, % -1,1% -2,7% -2,2% -1,2% -1,9% -2,1% -2,3%
окружность бедер, см
М±m, см 110,8±1,52 110,8±1,66*** 109,3±1,37** 109,9±1,50*** 108,7±1,60*** 108,3±1,56*** 108,1±1,58*** 107,8±1,69***
Δ от исх, % 0,0% -1,4% -0,8% -1,9% -2,3% -2,4% -2,7%
Примечание: ** - Р от исх <0,01; *** - Р от исх <0,001

При оценке выраженности чувства голода пациентов по Визуальной аналоговой шкале (ВАШ) исходно показано, что наибольшая интенсивность чувства голода отмечалось у пациентов в вечернее время. По окончании 1 месяца приема СМД анти-КР уровень голода в вечерние часы снизился достоверно (р<0,001) с 49,4±3,75 до 42,0±4,32 баллов. В утреннее и дневное время также отмечалась тенденция к снижению выраженности чувства голода (с 20,5±3,23 до 13,6±1,78 баллов в утренние часы, с 44,7±3,45 до 27,3±3,72 баллов в дневные часы), которая, однако, не достигла статистически значимых значений к окончанию терапии, что возможно связано с недостаточным числом пациентов и умеренными исходными значениями показателей.

Таким образом, в проведенном клиническом исследовании СМД анти-КР подтверждена высокая переносимость препарата, нежелательные явления при приеме препарата отсутствовали.

1. Способ лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств путем введения в организм лекарственного средства, характеризующийся тем, что лекарственное средство содержит активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что используют активированную-потенцированную форму антител к цельной молекуле или полипептидному фрагменту каннабиноидного рецептора I типа человека.

3. Лекарственное средство для лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств по п.1, характеризующееся тем, что содержит активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека I типа в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.

4. Лекарственное средство по п.3, характеризующееся тем, что водный или водно-спиртовой раствор активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека получен путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричного раствора аффинно очищенных антител к каннабиноидному рецептору I типа человека с концентрацией 0,5-5,0 мг/мл.

5. Лекарственное средство по п.3, характеризующееся тем, что выполнено в твердой лекарственной форме и содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, и фармацевтически приемлемые добавки.

6. Лекарственное средство по п.5, характеризующееся тем, что фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к соединениям 2-пиридона, представленным общей формулой [1], где А представляет собой бензольное кольцо или пиридиновое кольцо, Х представляет собой структуру, представленную общей формулой [3], V представляет собой одинарную связь или низший алкилен, W представляет собой одинарную связь, эфирную связь или низший алкилен, который может включать эфирную связь, или их таутомерам или стереоизомерам, их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают превосходной активирующей активностью в отношении GK и могут применяться в качестве лекарственных препаратов.
Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и кардиологии, и касается лечения абдоминального ожирения при метаболическом синдроме. Для этого используют диетотерапию в сочетании с метформином.

Группа изобретений относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемым солям формулы (I), где X представляет собой О, S; Υ представляет собой О, S; R1 независимо представляет собой Н, алкил; G1 представляет собой этил; G2 и G3 каждый независимо выбраны из Н, алкила, трифторметила, галогена, нитро, амидо, циано и тетразолила.

Изобретение относится к медицине и фармации и представляет собой способ ингибирования адипогенеза, который включает стадию, в ходе которой адипоциты приводят в контакт с эффективным количеством калебина A.

Изобретение относится к области генной инженерии, конкретно к получению пептида GLP-1, модифицированного олигосахаридной цепью, и может быть использовано в медицине для лечения или профилактики заболеваний, ассоциированных с GLP-1.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и эндокринологии, и касается коррекции кризового течения гипертонической болезни и абдоминального ожирения. Для этого на фоне терапии ингибитором АПФ лизиноприлом дополнительно вводят моксогамму в дозе 200-400 мкг/сут и редуксин в дозе 18-30 мг/сут.

Изобретение относится к пептидным аналогам оксинтомодулина (ОХМ, глюкагон-37), которые были модифицированы для придания устойчивости к расщеплению и инактивации дипептидилпептидазой IV (DPP-IV) и для увеличения времени полужизни in vivo пептидного аналога наряду с предоставлением возможности пептидному аналогу действовать в виде двойного агониста GLP-1/глюкагонового рецептора (GCGR).

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к применению источника белков в составе питательной композиции. Количество белка составляет от 2,4 г до 2,8 г на 100 ккал потребляемой композиции.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению общей формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, соли кислоты или стереоизомеру, где Y: NRa и N+R1R2X-; Z: связь, -(CH2)p, -CHOH, -CH=CH-, -C≡C-, -CONH- и -CO-; Rb: C1-C8 алкил, C2-C8 алкенил, C6-C10 арил, -NR5R6, , и ; причем каждый алкил, алкенил и арил, представляющий собой Rb, возможно, содержит 1-3 заместителя, выбранных из C1-C4 алкила, C2-C4 алкенила, C3-C6 циклоалкила, C1-C4 алкокси, C6-C10 арила, 5-, 6- и 7-членного гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, галогена, -OH, -NH2, -CN и -NO2; Rc: галоген, C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, C3-C10 циклоалкил, C3-C8 циклоалкенил, C1-C4 алкокси, C6-C10 арил, 5-, 6-, 7- и 8-членный моноциклический гетероциклил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, 9- и 10-членный бициклический гетероциклил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы; и при этом C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил C2-C6 алкинил, C3-C10 циклоалкил, C3-C8 циклоалкенил, C6-C10арил, 5-, 6-, 7-, 8-членный моноциклический гетероциклил и 9- и 10-членный бициклический гетероциклил, представляющие собой Rc, возможно содержат 1-5 заместителей, выбранных из группы, состоящей из C1-C4 алкила, C1-C4 алкокси, C1-C4 галоалкила, C1-C4 галоалкокси, C3-C6 циклоалкила, C4-C8 циклоалкенила, галогена, -OH, -NH2, C6-C10 (A)(A′)(A″)(A′′′)арила, (A)(A′)(A″)(A′′′)гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, NR14R15, (CH2)pNR14R15, -CN, -NO2, оксо, -COOR14, SOR14, SO2R14, SO2NR14R15, NR15SO2R16, COR14, CONR14R15 и NR15COR16; при это каждый (A), (A′), (A″) и (A′′′) независимо отсутствует, или представляет собой C1-C4 алкил, и каждый гетероциклил (A)(A′)(A″)(A′′′)гетероциклила независимо выбран из группы, состоящей из 5-, 6-, 7- и 8-членного моноциклического гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы, и 9- и 10-членного бициклического гетероциклила, содержащего 1-3 гетероатома, выбранные из азота, кислорода и серы; остальные радикалы имеют значения, указанные в п.1; и при условии, что, если Rc представляет собой гетероциклил, указанный гетероциклил связан непосредственно через атом углерода кольца гетероциклила.

Изобретение относится к композиции, включающей жир из веслоногого ракообразного, и к применению такой композиции для снижения накопления висцерального жира. Композиция из жира веслоногих ракообразных содержит 20-100 мас.% восковых эфиров, предпочтительно 40-85 мас.% восковых эфиров.
Предложенное изобретение относится к области иммунологии. Раскрыты варианты антитело человека или антиген-связывающий фрагмент антитела человека, которые специфическим образом связывают и ингибируют человеческую пропротеинконвертазу субтилизин/кексин тип 9 («hPCSK9»).
Изобретение относится к области биохимии, в частности к моноклональным антителам, связывающимся с с-Met, способных ингибировать как лиганд-зависимую, так и лиганд-независимую активацию с-Меt.
Предложенное изобретение относится к области иммунологии. Описаны варианты антител или антигенсвязывающих фрагментов, связывающиеся с человеческим 4-1ВВ.

Изобретение относится к области иммунологии. Рассмотрено применение пептида с аминокислотной последовательностью GLAGGSAQSQRAPDRVL для отбора СεmX-специфических антител и антигенсвязывающих фрагментов таких антител.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено полностью человеческое моноклональное антитело, которое связывает инсулиноподобный фактор роста-II (IGF-II) и имеет перекрестную реактивность к IGF-I, а также его антигенсвязывающий фрагмент.

Изобретение относится к области иммунологии. Предложено выделенное антитело к белку ICOS человека с повышенной эффекторной функцией.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному моноклональному анти-LOXL2 антителу или его антиген-связывающему фрагменту, а также к конъюгатам, их содержащим.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой антитела против фактора роста нервов (ФРН). Настоящее изобретение также раскрывает фармацевтическую композицию для облегчения боли, ассоциированной с заболеванием или состоянием, при котором развитие или сохранение боли опосредовано ФРН, содержащую указанные антитела, а также набор для лечения связанного с ФРН заболевания, такого как, например, остеоартрит, нуклеиновые кислоты, кодирующие тяжелую или легкую цепь антитела, вектор экспрессии, клетку-хозяина для получения указанных антител, способ экспрессии указанных антител против ФРН, а также применение указанных антител в способе лечения боли и для получения лекарственного средства для лечения боли, ассоциированной с заболеванием или состоянием, при котором развитие или сохранение боли опосредовано ФРН.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено антитело, способное связываться с амплифицированным рецептором эпидермального фактора роста (EGFR) и с усеченным вариантом EGFR - de2-7 EGFR, и охарактеризованное последовательностями вариабельных доменов.

Предложенное изобретение относится к области иммунологии. Раскрыты варианты димерного соединения для образования мультимера, способного к воспроизведению эффекторной функции агрегированного IgG с идентичными мономерами.

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Раскрыт способ промотирования регенеративных процессов в культуре ткани или культуре клеток. Способ предусматривает введение антитела, которое связывается с конечным продуктом гликирования клетки. Также описано применение такого антитела для производства лекарственного средства. Изобретение может быть использовано в медицине. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств. Для этого вводят лекарственное средство, содержащее активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека I типа. Это обеспечивает эффективное снижение веса и коррекцию метаболических нарушений при отсутствии побочных эффектов. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 7 табл., 4 пр.

Наверх