Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии



Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии
Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии
Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии

 


Владельцы патента RU 2552299:

государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жирового поражения печени у больных с синдромом дислипидемии, заключающийся в том, что у больного в сыворотке крови определяют активность фермента антиоксидантной системы глутатионредуктазы (ГЛР), которую оценивают спектрофотометрическим методом, и при значении ГЛР менее или равно 14,6 мкмоль/л/мин диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации ГЛР более 14,6 мкмоль/л/мин - хронический вирусный гепатит. Изобретение обеспечивает снижение травматичности, повышение доступности и простоты исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности. 4 пр., 1 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике во внутренних болезнях, может быть использовано для дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени у больных с синдромом дислипидемии.

Известный лабораторный способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени заключается в прижизненном морфологическом исследовании биоптатов печени (Ghany М., Doo Е. Assessment of liver fibrosis: palpate, poke or pulse? Hepatology, 2005. V.42 (4). P.759-761; The role of liver biopsy in chronic hepatitis C. Saadeh S., Cammell G., Corey W.D. et al. Hepatology, 2001. V.33. P.196-200; Nainon O., Xiq G., Vanghan G. Diagnosis of hepatitis a virus infection: a molecular approach. Clin. Microbiol. Rev., 2006. V.19 (1). P.63-79); Roussele M.C. Sources of variability in histological scoring of chronic viral hepatitis. Hepatology, 2005. V.41 (2). P.257-264; Павлов Ч.С., Ивашкин B.T. Биопсия печени: методология и практика сегодня. Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол., 2006, Т.16, №4. С.65-78; Павлов Ч.С., Золоторевский В.Б., Ивашкин В.Т. Современные методы ранней диагностики фиброза печени. Клиническая медицина, 2005., Т. 83, №12. С.58-60; Ивашкин В.Т., Шульпекова Ю.О. Неалкогольный стеатогепатит. Русский медицинский журнал, 2000. Т.2. С.41-45; Подымова С.Д. Жировой гепатоз, неалкогольный стеатогепатит. Клинико-морфологические особенности. Прогноз. Лечение. Русский медицинский журнал, 2005, №2. С.61-66).

Недостатки способа диагностики: несмотря на высокую информативность, метод пункционной биопсии печени является трудоемким, достаточно травматичным, имеется техническая сложность получения материала и значительная вероятность развития тяжелых осложнений.

Технический результат: снижение травматичности, повышение доступности и простоты исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности.

Способ дифференциальной диагностики заключается в следующем: у больных в сыворотке крови спектрофотометрически определяют активность фермента антиоксидантной системы глутатионредуктазы (ГЛР) методом Manso и Wrob-Leveski на спектрофотометре КФК-3-«ЗОМЗ» (Россия, г. Сергиев-Посад) с целью оценки наличия и степени окислительного стресса (Медицинские лабораторные технологии. Руководство по клинической лабораторной диагностики. Том. 1. Под ред. А.И. Карпищенко. Изд-во Гэотар Медицина, 2012, 472 с.).

У пациентов с синдромом дислипидемии при значении ГЛР менее или равно 14,6 мкмоль/л/мин диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации ГЛР более 14,6 мкмоль/л/мин - хронический вирусный гепатит.

Способ забора крови для определения активности ГЛР осуществляют следующим образом: кровь из локтевой вены в количестве 5 мл забирают в вакуумную пробирку с активатором свертывания и центрифугируют для получения сыворотки 10 мин при 1500 об/мин.

Принцип метода определения активности ГЛР основан на том, что фермент катализирует следующую реакцию:

Количество используемого в реакции НАДФН пропорционально активности фермента.

При определении активности ГЛР сыворотка предварительно инкубируется в фосфатном буфере при pH 7,0 с НАДФН и реакция инициируется окисленным глутатионом. Потребление кофермента измеряют, регистрируя падение поглощения при длине волны 340 нм. Реактивы:

1. 0,1 М калий-фосфатный буфер с 1 мМ ЭДТА, pH - 7,0 (производитель ООО «Биотех», г. Пермь). Приготовление реактива: 13,6 г. дигидрофосфата калия (KH2PO4) и 292 мг сухой навески ЭДТА растворяют в 500 мл дистиллированной воды. 0,1 М раствор KOH доводят и разбавляют дистиллированной водой до 1 л.

2. 20 мМ окисленный глутатион (12,24 мг/мл окисленного глутатиона на 1 мл дистиллированной воды) (производитель «AppliChem», Германия).

3. 3,2 мМ НАДФН (1,49 мг/мл НАДФН на 1 мл дистиллированной воды) (производитель «AppliChem», Германия).

Ход определения. Для исследования активности ГЛР 0,05 мл сыворотки крови в соответствии 1:10 вносят в кювету с длиной оптического пути 10 мм, содержащую 1,8 мл 0,1 М калий-фосфатного буфера, pH - 7,0 с 1 мМ ЭДТА, 0,1 мл 20 мМ окисленного глутатиона. Производят кинетическое определение оптической плотности при длине волны - 340 нм против воды. Затем для инициации реакции добавляют 0,1 мл 3,2 мМ раствора НАДФН и в течение 3-х минут проводят кинетическое определение оптической плотности при длине волны - 340 нм.

Расчет активности ГЛР производят по следующей формуле:

Е - активность фермента, мкмоль/(мкмоль/л/мин);

А - разность экстинции пробы до и после инкубации;

Vpc - объем реакционной смеси - 2,05 мл;

Vпр - объем пробы - 0,05 мл;

l - длина оптического пути - 1 см;

Е - молярный коэффициент светопоглощения НАДФН при длине волны 340 нм, равный 6,22*10 3 м -1*см -1;

t - время инкубации 3 минуты.

При значении ГЛР менее или равно 14,6 мкмоль/л/мин диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации ГЛР более 14,6 мкмоль/л/мин - хронический вирусный гепатит.

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Больная К. 36 лет, рост 158 см, вес 81 кг, индекс массы тела 32. Синдром дислипидемии. Жалобы на слабость и снижение аппетита. Объективно - печень +1,5 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 54 Ед/л, ACT - 25 Ед/л, общий билирубин - 17,7 мкмоль. По данным УЗИ - умеренные диффузные изменения в печени. Показатели липидного обмена в сыворотке крови: триглицериды (ТГ) - 1,71 ммоль/л, общий холестерин (ОХ) - 6,88 ммоль/л, липопротеиды высокой плотности (ЛПВП) - 1,09 ммоль/л, липопротеиды низкой плотности (ЛПНП) - 3,95 ммоль/л. Уровень ГЛР в сыворотке крови 47,2 мкмоль/л/мин. Диагноз хронического вирусного гепатита подтвержден.

Пример 2. Больной К. 39 лет, рост 176 см, вес 90 кг, индекс массы тела 29. Синдром дислипидемии. Жалобы на слабость, снижение аппетита, тошноту и тяжесть в правом подреберье. Объективно - печень +2,0 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 56 Ед/л, ACT - 31 Ед/л, общий билирубин - 8,7 мкмоль/л. По данным УЗИ - диффузные изменения в печени. Показатели липидного обмена в сыворотке крови: ТГ - 1,9 ммоль/л, ОХ - 5,52 ммоль/л, ЛПВП - 1,17 ммоль/л, ЛПНП - 3,06 ммоль/л. Уровень ГЛР в сыворотке крови 26 мкмоль/л/мин. Диагноз хронического вирусного гепатита подтвержден.

Пример 3. Больной М. 37 лет, рост 185 см, вес 112 кг, индекс массы тела 33. Синдром дислипидемии. Жалобы на тупые боли в верхних отделах живота, явления диспепсии и слабость. Объективно - печень +1,5 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 77 Ед/л, ACT - 50 Ед/л, общий билирубин - 9,05 мкмоль/л. По данным УЗИ - диффузные изменения печени. Параметры липидного обмена сыворотки крови: ТГ - 1,71 ммоль/л, ОХ - 6,18 ммоль/л, ЛПВП - 1,2 ммоль/л, ЛПНП - 4,32 ммоль/л. Уровень ГЛР в сыворотке крови 3,2 мкмоль/л/мин. Диагноз жировой болезни печени подтвержден.

Пример 4. Больная С. 54 лет, рост 165 см, вес 86 кг, индекс массы тела 32. Синдром дислипидемии. Жалобы на снижение аппетита и тяжесть в правом подреберье. Объективно - печень +1,0 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 71 Ед/л, ACT - 55 Ед/л, общий билирубин - 12,2 мкмоль/л. По данным УЗИ - диффузные изменения печени. Показатели липидного спектра в сыворотке крови: ТГ - 2,87 ммоль/л, ОХ - 7,04 ммоль/л, ЛПВП - 1,34 ммоль/л, ЛПНП - 4,88 ммоль/л. Уровень ГЛР в сыворотке крови 7,3 мкмоль/л/мин. Диагноз жировой болезни печени подтвержден.

Данные статистики определения активности фермента ГЛР в сыворотке крови больных хроническим вирусным гепатитом (ХВГ) и жировой болезнью печени (ЖБП) с синдромом дислипидемии в сравнении с группой практически здоровых лиц представлены в таблице.

Операционные характеристики лабораторного теста определения активности ГЛР в сыворотке крови больных с синдромом дислипидемии и поражением печени с целью дифференциации хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени по степени окислительного стресса: диагностическая чувствительность (ДЧ) составила 100%, диагностическая специфичность (ДС) - 100%, диагностическая эффективность - 100%. Точка разделения для больных хроническим вирусным гепатитом и жировой болезнью печени с синдромом дислипидемии по активности ГЛР при построении кумулятивных кривых зарегистрирована на уровне 14,6 мкмоль/л/мин. Соответственно при уровне ГЛР менее или равно 14,6 мкмоль/л/мин больных с синдромом дислипидемии диагностируют жировую болезнь печени, при уровне ГЛР более 14,6 мкмоль/л/мин - хронический вирусный гепатит.

Положительный эффект от использования предлагаемого способа дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жировой болезни печени по активности антиоксидантного фермента ГЛР с целью оценки степени окислительного стресса заключается в его простоте, доступности, нетравматичности, отсутствии осложнений, информативности, чувствительности и специфичности.

Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и жирового поражения печени у больных с синдромом дислипидемии, заключающийся в том, что у больного в сыворотке крови определяют активность фермента антиоксидантной системы глутатионредуктазы (ГЛР), которую оценивают спектрофотометрическим методом, и при значении ГЛР менее или равно 14,6 мкмоль/л/мин диагностируют жировую болезнь печени, при концентрации ГЛР более 14,6 мкмоль/л/мин - хронический вирусный гепатит.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии. С помощью спектроскопа комбинированного рассеяния проводят серию регистрации спектров области новообразования и здоровой кожи.
Изобретение относится к медицине, а именно к детской офтальмологии, и описывает способ диагностики миопии у детей дошкольного возраста, заключающийся в том, что в слезной жидкости ребенка определяют активность фермента γ-глутамилтранспептидазы и при ее значении свыше 11 Е/л диагностируют заболевание.

Изобретение относится к области медицинской биохимии и представляет собой способ определения концентрации катионов цинка в сыворотке крови с одновременным определением соотношения катионов цинка и катионов меди, включающий использование в качестве основного реагента раствор дитизона в четыреххлористом углероде, инкубацию при комнатной температуре в щелочной среде, удаление органической фазы и колориметрию коллоидных растворов пробы сыворотки крови и стандартного раствора при 535 нм, расчет концентрации катионов цинка, колориметрию коллоидных растворов пробы сыворотки крови и стандартного раствора при при 435 нм и расчет молярного соотношения катионов цинка и меди.

Изобретение относится к биологии, токсикологической и аналитической химии, а именно к способам определения O-(2,3-дигидро-2,2-диметил-7-бензофуранил)-N-метилкарбамата в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций, химико-токсикологических, экспертно-криминалистических и ветеринарных лабораторий.
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой, который осуществляется путем определения в крови пациентов показателей эндотоксикоза: лейкоцитов, молекул средней массы, креатинина, мочевины и скорости оседания эритроцитов; прогноз осуществляют с помощью дискриминантного уравнения: D=6,900×лейкоциты(×10^9/л)+2,640×скорость оседания эритроцитов (мм/ч)+17,819×молекулы средней массы (ед.
Изобретение относится к области медицины и может найти применение для оценки действия цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ) на деформабельность эритроцитов в период гестации.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа диагностики нарушения почек у собак, включающего стадию измерения уровня экспрессии группы биомаркеров в биологическом образце от собаки, где биомаркеры представляют собой кластерин (CLU), секретируемый связанный с frizzle белок-2 (SFRP2); матрилин-2 (Matn2); лумикан (LUM); декорин (DCN); альфа 1 (III) цепи коллаген, вариант 12 (COL3A1); ретинол-связывающий белок 4 (rbp4); ММР-9; трансферрин (TF); Аро-С-1 (АроС1); и ингибин-бета A (INHBA).

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, и может использоваться для прогнозирования восстановления слуховой функции у больных с острой сенсоневральной тугоухостью (ОСНТ).

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано в клинической практике для оценки эффективности антибактериальной терапии у больных с бактериальной инфекцией, в том числе с бактериальным сепсисом.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для защиты лимфоцитов от апоптоза. Для этого в инкубационную среду, содержащую лимфоциты, вводят 1,4-дитиоэритритол и аскорбиновую кислоту в конечной концентрации 3,0 ммоль и 0,1 ммоль соответственно.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и предназначено для определения тяжести течения бронхиальной астмы. Сущность способа заключается в исследовании сыворотки крови методом краевой дегидратации в поляризованном свете.

Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения рака желудка. Предварительно определяют уровни онкомаркеров СЕА, СА 19-9, СА 72-4, М2-ПК, индекс пролиферации Ki-67, выполняют совмещенную позитронно-эмиссионную и компьютерную томографию (ПЭТ/КТ).

Изобретение относится к области медицины. Изобретение представляет способ прогнозирования риска развития изолированной миомы матки, включающий забор и исследование периферической венозной крови, отличающийся тем, что из периферической венозной крови выделяют ДНК, проводят типирование генетических полиморфизмов генов интерлейкинов и анализ сочетаний полиморфизмов гена интерлейкина-1 (-889 ТТ IL-1) и интерлейкина-5 (-703 С IL-5), прогнозируют высокий риск развития изолированной миомы матки в случае выявления сочетания аллеля -889 ТТ IL-1 и аллеля -703 С IL-5 у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья России.
Изобретение относится к ветеринарии и медицине, в частности к способу окраски мазков крови для микроскопического определения структурной организации и фаз активности клеток, и может быть использовано в цитофизиологии, цитопатологии и цитогенетике, а также рекомендовано к применению при проведении гематологических исследований при определении функционального состояния клеток крови.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, кардиологии, патофизиологии, биохимии, фармакологии. Для индивидуальной оценки принадлежности пациентов к хронической сердечной недостаточности (ХСН) определяют: возраст, рост, вес, индекс Кетле, константу Брока, АД сист., АД диаст., триглицериды, общий холестерин, холестерин липопротеидов высокой плотности, холестерин липопротеидов низкой плотности, отношение холестерина липопротеидов низкой плотности к общему холестерину, холестерин липопротеидов очень низкой плотности, отношение холестерина липопротеидов высокой плотности к холестерину липопротеидов низкой плотности, сумму значений холестерина очень низкой плотности и отношения холестерина липопротеидов высокой плотности к холестерину липопротеидов низкой плотности, коэффициент атерогенности, аланинаминотрансферазу, аспартатаминотрансферазу, отношение аспартатаминотрансферазы к аламинаминотрансферазе, лактатдегидрогеназу, глюкозу, α-амилазу, общий белок, альбумин, мочевую кислоту, мочевину, креатинин, креатининкиназу, щелочную фосфатазу, билирубин общий, билирубин прямой, АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов, коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов, количество тромбоцитов, средний объем тромбоцита, количество эритроцитов, средний объем эритроцита, коэффициент распределения эритроцитов по объему, гематокрит, гемоглобин, среднее содержание гемоглобина в эритроците, среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците, количество лейкоцитов, процент сегментоядерных нейтрофилов, процент эозинофилов, процент базофилов, процент лимфоцитов, процент моноцитов и константу смещения.

Изобретение относится к области микробиологии, в частности к методам определения чувствительности штаммов Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) к антибиотикам.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследования, и может быть использовано для диагностики причины аномального маточного кровотечения.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для прогнозирования развития критической печеночной недостаточности и наступления летального исхода у больных с декомпенсацией цирроза печени алкогольной и смешанной этиологии.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики свинцовой нефропатии у экспериментальных животных при хроническом отравлении. Проводят лабораторные исследования.

Изобретение относится к медицине, а именно клинической лабораторной диагностике, микробиологическим методам исследования, и может быть использовано для стандартизации преаналитического этапа метода клиновидной дегидратации/кристаллографии для исследования смешанной слюны.
Изобретение относится к практической медицине, в частности к клинико-лабораторной диагностике и экспериментальной медицине. Изобретение представляет способ прогнозирования тромбоэмболических осложнений при хирургическом лечении больных с онкологическими заболеваниями легких, характеризующийся тем, что при осуществлении хирургического вмешательства на легких до лигирования сосудов поврежденного легкого выполняют доступ к его приводящему и отводящему сосудам с последующим забором пробы крови из каждого сосуда и проводят взятие пробы венозной крови из периферической вены, после хирургического вмешательства определяют количественное значение содержания свободного гепарина в каждой пробе, после чего рассчитывают показатель К, равный среднеарифметическому значению содержания свободного гепарина в приводящем сосуде поврежденного легкого и венозной крови из периферической вены, затем сравнивают рассчитанный показатель К с количественным значением содержания свободного гепарина в отводящем сосуде легкого Р и при К<Р на 25% и менее прогнозируют высокий риск возникновения тромбоэмболических осложнений в послеоперационный период, при К<Р на более чем 25% прогнозируют низкий риск возникновения тромбоэмболических осложнений в послеоперационный период. Изобретение обеспечивает повышение точности и объективности результатов, полученных в ранний послеоперационный период. 2 пр.
Наверх