Способ прогнозирования риска развития злокачественных новообразований

Изобретение относится к медицине, а именно онкологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития и раннего выявления злокачественных новообразований. Для этого в периферической крови человека определяют абсолютное содержание естественных киллеров (CD16+ лимфоцитов) и концентрацию растворимого рецептора апоптоза (sAPO-1). При содержании CD16+ более 0,5×109 кл/л и концентрации sAPO-1 более 4000 пг/мл прогнозируют риск развития злокачественных новообразований. Использование данного способа позволяет выявлять злокачественные новообразования на ранних стадиях развития с использованием иммунологических методов. 4 пр.

 

Изобретение относится к онкологии, иммунологии, лабораторной диагностике и может быть применено для прогнозирования и раннего выявления лиц с риском развития злокачественных новообразований, что необходимо для обеспечения своевременного адекватного лечения и благоприятного прогноза течения заболевания.

Одной из основных причин смертности в промышленно развитых странах являются злокачественные новообразования. При этом, согласно данным Международного агентства по изучению рака, к 2020 г. прогнозируется повышение заболеваемости злокачественными опухолями до 15 млн и возрастание смертности до 9 млн человек в год [Parkin D.M., Pisani P., Ferlay J. Global cancer statistics CA Cancer // J. Clin. - 1999. - Vol.49. - P. 33-64]. В связи с социальной значимостью проблемы онкологических заболеваний, правительством Российской Федерации в рамках приоритетного национального проекта «Здоровье» в 2009 году начата реализация мероприятий, направленных на совершенствование оказания медицинской помощи больным со злокачественными новообразованиями. Одной из приоритетных задач является выявление заболеваемости на ранних стадиях. Известно, что положительный результат лечения может достигать 90-95% при выявлении онкологических заболеваний на первой или второй стадии заболевания. Несвоевременная диагностика онкологических заболеваний связана с трудностью диагностики заболевания на ранней стадии.

Несмотря на то, что в последние десятилетия были предложены многочисленные методы диагностики онкологических заболеваний, все они характеризовались теми или иными недостатками: либо низкой чувствительностью и предсказательной ценностью, либо высокой стоимостью исследования и невозможностью использования в качестве скрининговых методов диагностики. Учитывая невысокую доступность специализированных лабораторных и инструментальных методов исследования, возникает вопрос, каким образом практический врач может оценить риск развития злокачественного новообразования у конкретного больного, который является чрезвычайно актуальным.

Имеющееся диагностическое исследование на выявление опухолеспецифических онкомаркеров (CA125, CA19-9, SCCA, TPS, РЭА и др.) - это возможность дифференциальной диагностики определенной опухоли в комбинации с другими диагностическими методами. Как известно, антитела к конкретному антигену выявляют в сыворотке больных раком не очень часто (около 10% случаев), с диагностической целью используют определение антител к одному из нескольких опухолеассоциированных антигенов, которые появляются примерно у половины больных [Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология._- 1996. - №6 - С.10-23]. До сих пор не охарактеризован ни один опухолевый маркер, обладающий 100% специфичностью по отношению к какому-либо органу (исключением можно считать ПСА).

Отправной точкой для разработки предлагаемого способа прогнозирования риска развития злокачественных новообразований послужила общепринятая в настоящее время концепция, согласно которой нарушение равновесия между процессами пролиферации и апоптоза является главной причиной формирования опухоли.

Литературные данные свидетельствуют о том, что нарушение регуляции апоптоза характерно как для доброкачественных, так и злокачественных новообразований [Anderson T.J. Pathological studies of apoptosis in the normal breast // Endocr. Relat. Cancer. - 1999. - Vol.6. - №1. - P. 9-12; Talieri M., Diamandis E.P., Katsaros N., et al. Expression of BCL2L12, a new member of apoptosis-related genes, in breast tumors // Thromb. Haemost. - 2003. - Vol.89. - №6. - P. 1081-1088.]. Сравнение уровня спонтанного апоптоза при различных заболеваниях показывает увеличение его в ряду фиброаденома - фиброзно-кистозная мастопатия - рак молочной железы. Однако достоверные отличия обнаружены только с группой рака молочной железы [Боженко В.К., Гали-Оглы Г.А., Кудинова Е.А., Мельникова Н.В. Оценка уровня спонтанного апоптоза при доброкачественных и злокачественных новообразованиях молочной железы http://vestnik.mcrr.ru/vestnik/v4/papers/bozhen_v4.htm].

Большое внимание в литературе уделяется изучению особенностей и выявление различных маркеров апоптоза при злокачественных новообразованиях [Gonzalez-Campora R., Galera Ruiz M.R., Vazquez Ramirez F., et al. Apoptosis in breast carcinoma // Pathol. Res. Pract. - 2000. - Vol.196. -№3. - P. 167-174.; Антонеева И.И., Петров С.Б. Маркеры апоптоза и пролиферации опухолевых клеток в динамике прогрессирования рака яичника / Онкология. - 2008. - Т. 10. - №2. - С.234-237]. Так, исследование роли индекса апоптоза как предиктора прогноза пациентов с первичным раком молочной железы не выявил прямой взаимосвязи исследуемого показателя прогноза с заболеванием. Однако зарегистрирована ассоциация развития рака молочной железы с ингибиторами апоптоза, получены свидетельства, что патологический процесс может включать ингибиторы клеточного цикла физиологически [Schöndorf Т., Göhring U.-J., Becker М., et al. High Apoptotic Index Correlates to p21 and p27 Expression Indicating a Favorable Outcome of Primary Breast Cancer Patients, but Lacking Prognostic Significance in Multivariate Analysis // Pathobiology. - 2004. - №4. - Vol.71. - P. 217-222].

Получены данные, что в процессе прогрессирования рака яичников, в первичном опухолевом узле имеет место гиперэкспрессия ингибитора апоптоза Bcl-2, обеспечивающее более агрессивное течение заболевания [Антонеева И.И., Петров С.Б. Маркеры апоптоза и пролиферации опухолевых клеток в динамике прогрессирования рака яичника / Онкология. - 2008. - Т. 10. - №2. - С.234-237]. Изучены механизмы, благодаря которым Bcl-2 реализует свою антиапоптотическую функцию при онкологических процессах [Mitselou A., Ioachim Е., Kitsou Е., et al. Immunohistochemica study of apoptosis - related bcl-2 protein and its correlation with proliferation indices (Ki-67, PCNA), tumor suppression genes (p53, pRb), the oncogene c-erb-B2, sex steroid hormone receptor and other clinico-pathological features, in normal, hyperplastic and neoplastic endometrium // In vivo. - 2003. - Vol.17. - P. 469-478.]. Однако данные относительно уровня экспрессии белка Bcl-2 и возможностей использования его в качестве прогностического фактора у больных с солидными опухолями достаточно противоречивы [Zhang G.J., Kimijima I., Abe R., et al. Apoptotic index correlates to bcl-2 and p53 protein expression, histological grade and prognosis in invasive breast cancers. // Anticancer Res. - 1998. - Vol.18. - P. 1989-1998; Абраменко И.В., Фильченков A.A. Оценка параметров апоптоза в диагностике онкологических заболеваний, их прогнозе и оптимизации схем терапии // Вопр. онкол. - 2003. - №49. - С.21-30; Мильчаков Д.Е. Клинико-морфологическая характеристика серозного рака яичников у женщин (на примере Кировской обл.): Автореф. дис … канд. мед. наук. - Санкт-Петербург. - 2007. - 19 с.].

Интенсивно изучается биологическая роль растворимого рецептора Fas - sAPO-1, большинство исследований сосредоточено на малигнизации клеток при лейкемии и солидных новообразовниях [Knipping Е., Debatin К.М., Stricker К., et al. Identification of soluble APO-1 in supernatants of human B- and T-cell lines and increased serum levels in B- and T-cell leukemias // Blood. -1995. - Vol.85. - P. 1562-1569; Wong W.W., Dimitroulakos J., Minden M.D., et al. HMG-CoA reductase inhibitors and the malignant cell: the statin family of drugs as triggers of tumor-specific apoptosis // Leukemia. - 2002. - Vol.16. - P. 508-519]. Предполагают, что растворимые формы ингибируют апоптоз, блокируя связывание мембранной формы Fas с Fas-L, за счет взаимодействия в кровотоке [Serrao K.L., Fortenberry J.D., Owens M.L., et al. Neutrophils induce apoptosis of lung epithelial cells via release of soluble Fas ligand // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. - 2001. - Vol.280. - P. 298-305]. Имеются данные, что sAPO-1 может защищать клетки от Fas - лиганд-индуцированного апоптоза [Chen J., Zhou Т., Liu С.et al. Protection from Fas-mediated apoptosis by a soluble form of the Fas molecule // Science. - 1994. - Vol.263. - P. 1759-1762]. Следовательно, секреция sAPO-1 может дать возможность опухолевым клеткам ускользнуть от иммунного надзора и, таким образом, вовлечена в процесс развития опухоли.

Попытка использования количественного значения sAPO-1 в прогностических целях была предпринята в исследованиях, проведенных Касимовой А.К. и Тулеутовым А.Е. [Касимова А.К. Растворимый Fas - антиген у больных новообразованиями яичников и его клиническое значение: Автореф. дис. … канд. мед. наук. - Астана. - 2008. - 24 с.]. Было показано, что безрецидивная выживаемость больных раком яичников зависела от исходного (до лечения) уровня растворимого Fas рецептора (sAPO-1/Fas) и достоверно ниже в группе больных с повышенным (более 200 пг/мл) содержанием в сыворотке крови sAPO-1. Однако динамика количественных изменений растворимого рецептора изучалась только у больных женщин с новообразованиями яичников, кроме того, указанные значения sAPO-1 не могут расцениваться как «повышенная продукция» в связи с тем, что референсные значения данного показателя, согласно рекомендации фирмы-производителя «Bender MedSystems» (Австрия) составляют 1334-2411 пг/мл, что согласуется и с другими исследованиями [Choi J.W. Reference intervals of serum APO-1 (Fas/CD95) concentration in healthy adults // An. Clin. Lab. Science. - 2006. - Vol.36. - P. 103-104].

Данных о дозозависимых эффектах sAPO-1, взаимосвязи уровня концентрации растворимого рецептора Fas/APO-1 с риском развития злокачественных новообразований на доклиническом этапе в литературе мы не обнаружили.

При исследовании научно-технической патентной информации идентичная совокупность существенных признаков, заявленная в изобретении, также не была выявлена. Известен способ прогнозирования развития профессиональных злокачественных новообразований кожи у работников производства стекловолокна [Патент РФ №2454668, опубл. 27.06.2012], при котором из периферической венозной крови обследуемых лиц выделяют ДНК лимфоцитов и осуществляют анализ генного полиморфизма с помощью полимеразной цепной реакции. Указанный аналог изобретения требует длительной и трудоемкой пробоподготовки, включающей ночную инкубацию в термостате, фенол-хлороформную экстракцию и амплификацию ДНК, шестичасовой рестрикционный анализ с последующей оценкой на приборе. Способ, основанный на молекулярно-генетической диагностике, является дорогостоящим, проведение которого возможно только в специализированных лабораториях.

Известен способ оценки и прогнозирования факторов риска злокачественных новообразований гортани [Патент РФ №2246894, опубл. 27.02.2005], включающий медико-генетическое обследование пациента и дополнительное исследование многочисленных факторов, в том числе: возраст, длительность курения, стаж работы с профвредностями, регулярность употребления алкоголя, бытовые вредности, экологические факторы, срок проживания в загрязненном районе. Данные показатели оцениваются в баллах, затем вычисляют коэффициент прогнозирования по разработанной формуле. Недостатком представленного аналога изобретения является его трудоемкость, временная и экономическая затратность при прогнозировании факторов риска только злокачественных новообразований гортани. Способ требует проведения объемных диагностических процедур, параметры полученных данных нуждаются в соответствующих измерениях и стандартизованной оценке, что ограничивает применение способа в практической медицине.

Целью заявленного изобретения является прогнозирование риска развития и раннее выявление злокачественных новообразований в организме человека в условиях широкой сети учреждений практического здравоохранения. Поставленная цель достигается тем, что в периферической крови человека определяют абсолютное содержание естественных киллеров CD16+ лимфоцитов и концентрацию растворимого рецептора апоптоза (sAPO-1). При содержании CD16+ клеток более 0,5×109 кл/л и концентрации sAPO-1 более 4000 пг/мл прогнозируют риск развития злокачественных новообразований. Технический результат предлагаемого способа заключается в том, что посредством дифференцированной оценки количественных значений двух показателей: естественных киллеров CD16+ лимфоцитов и растворимого рецептора апоптоза sAPO-1 в крови человека прогнозируют риск развития злокачественных новообразований.

По данным исследований в модельных системах и косвенных свидетельств, полученных из опыта иммунотерапии опухолей человека, ключевую роль в иммунном повреждении опухолевых клеток играют цитотоксические лимфоциты - естественные киллеры (NK-клетки) и цитотоксические Т-лимфоциты. Основная функция естественных киллеров (NK-клетка, экспрессирующая молекулы CD16) - цитолиз клеток, несущих признаки трансформации, инфицирования или клеточного стресса, при отсутствии на них собственных молекул MHC-I и секреция цитокинов (в первую очередь IFNγ). Они используют классический перфорин-гранзимовый механизм контактного цитолиза, а также Fas-зависимую индукцию апоптоза опухолевых клеток [Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология. - 1996. - Т. 6. - С.10-23].

Таким образом, эффект защитной реакции, реализуемый естественными киллерами (CD16+), а также уровень содержания в периферической крови человека ингибитора апоптоза растворимого рецептора sAPO-1 позволяют оценить эффективность работы противоопухолевого иммунитета организма и способность опухолевыми клетками избегать действия эффекторных факторов иммунитета, что дает возможность использовать количественные значения данных биомаркеров в качестве прогноза риска развития злокачественных новообразований.

Преимуществом предлагаемого изобретения является одновременная оценка параметров, определяющих с одной стороны - активность противоопухолевой защиты организма, реализуемую естественными киллерами (CD16+), с другой стороны - защита опухолевых клеток от апоптоза путем его ингибирования (sAPO-1).

Существенные признаки, характеризующие изобретение, проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники и не являющиеся очевидными для специалиста. Способ позволяет сократить время и упростить методику прогнозирования, так как позволяет использовать материалы, реактивы и методы исследования, широко применяемые в стандартной клинико-лабораторной практике. Предлагаемый способ диагностики расширяет контингент обследуемых с целью раннего выявления лиц с риском развития злокачественных новообразований, что необходимо для обеспечения своевременного адекватного лечения и благоприятного прогноза заболевания.

Способ осуществляется следующим образом. Кровь для исследования берется из локтевой вены в объеме 1 мл в 9-10 часов утра, натощак. Методом микроскопирования изучается содержание лимфоцитов в мазках крови, окрашенных по методу Романовскому-Гимзе. Фенотип лимфоцитов (CD16+) определяется непрямой иммунопероксидазной реакцией с использованием моноклональных антител (НПЦ «МедБиоСпектр», г. Москва). Количественное определение растворимого рецептора Fas - sAPO-1 в сыворотке крови проводится методом «конкурентного» иммуноферментного анализа (ИФА) в микропланшетном формате с использованием реактивов фирмы «Bender MedSystems» (Австрия).

Исследование проводилось на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Evolis» фирмы «Bio-Rad» (Германия-США). Заявленным способом в апреле 2008 года были обследованы 230 человек, родившихся и постоянно проживающих в г. Архангельске от 28 до 90 лет (средний возраст 58,3 лет). В декабре 2013 года проведен ретроспективный анализ анамнеза жизни исследуемых людей за данный период. Диагноз установлен в Архангельском областном клиническом онкологическом диспансере, обследование проводили с соблюдением основных норм биомедицинской этики. Статистический анализ был выполнен с использованием пакета прикладных программ «SPSS for Windows» (версия 11.5; США). Тип исследования ретроспективный, выборки случайные, одномоментные. Генеральная совокупность - жители севера Европейской территории России. Распределение содержания сывороточного sAPO-1 отличалось от нормального, поэтому представлено в виде медианы, 25- и 75- перцентилей. Достоверность различий между группами оценивали с помощью параметрического t-критерия Стьюдента для независимых выборок и непараметрического критерия Уилкоксона. Статистическая достоверность присваивалась при значении p<0,05.

Наши исследования показали влияние количества естественных киллеров (CD16+ лимфоцитов) и концентрации растворимого рецептора апоптоза sAPO-1/Fas на развитие злокачественных новообразований у исследуемых людей за период наблюдения 5 лет и 8 месяцев (p<0,05). Установлено, что общее абсолютное содержание естественных киллеров CD16+ значительно выше у обследуемых, у которых в последующем было диагностировано злокачественное новообразование по сравнению с группой лиц без онкологических заболеваний: 0,78±0,03 против 0,34±0,05×109 кл/л (p<0,05), соответственно. При этом повышение количества естественных киллеров (CD16+) сопровождалось увеличением числа цитотоксических лимфоцитов (CD8+) и было ассоциировано с повышением уровня антител ds-DNA (r=0,46; p<0,05) на фоне активизации Fas-опосредованного апоптоза (p<0,05). Естественные киллеры, как известно, обеспечивают первую, еще неспецифическую цитотоксичность в отношении генетически чужеродных клеток или клеток, содержащих чужеродную информацию. Продуцируемый естественными киллерами интерферон гамма (IFNγ) подавляет пролиферацию опухолевых клеток, способствует развитию апоптоза опухолевых клеток, индуцируя экспрессию каспазы 1, а также Fas-рецептора на опухолевых клетках и Fas-лиганда на цитотоксических Т-лимфоцитах [Опферман Т., Корсмэер С. Роль апоптоза в период становления иммунной системы и при развертывании иммунного ответа // Аллергология и иммунология. - 2006. - Т. 7. - №4. - С.464-470].

Наши исследования показали, что содержание растворимого рецептора sAPO-1 в сыворотке крови людей, у которых за период наблюдения диагностировано злокачественное новообразование, значительно выше (44705,80 (9464,525-253649,4) пг/мл), чем у людей, наблюдаемых за тот же период без онкологической патологии (1257,8 (626,30-2015) пг/мл; p<0,05). Повышение sAPO-1 выше 4000 пг/мл ассоциировалось с достоверным увеличением абсолютного числа моноцитов (0,54±0,04 против 0,31±0,09×109 кл/л, p<0,05). Участие моноцитов/макрофагов в противоопухолевом иммунитете связано с секрецией интерферонов, а также с TNF-α, которые активируют клетки-продуценты и усиливают цитотоксическую функцию естественных и специализированных киллеров. Моноциты, инфильтрируя опухоль, способствуют ее разрушению, спонтанному рассасыванию [Войтенков Б.О., Окулов В.Б. Основные характеристики макрофага как клетки эффектора // Вопр. онкологии. - 1995. - №3. - С.59-64; Луговская С.А. Структура и функции моноцитов и макрофагов // Клин. лаб. диагностика. - 1997. - №9. - С.10-15; Secchiero Р., Gonelli A., Mirandola P. et al. Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand induces monocytic maturation of leukemic and normal myeloid precursors through a caspase-dependent pathway // Blood. - 2002. - V. 100. - P. 2421-2429]. Показано, что повышение концентрации sAPO-1 выше 4000 пг/мл ассоциировано с увеличением относительного числа лимфоцитов с маркером активации иммунной системы через IL-2 (CD25+)-(23,7±1,32×109 кл/л против 19,85±0,83×109 кл/л, p<0,01), что свидетельствует о взаимосвязи гиперсекреции растворимого рецептора с пролиферативной реакцией.

Установленная в процессе исследования взаимосвязь повышения количества естественных киллеров (CD16+) и гиперсекрецией сывороточного sAPO-1 с развитием злокачественных новообразований, логическая обоснованность данных взаимосвязей, позволяют оценить активность противоопухолевой защиты организма и способность опухолевыми клетками избегать действия эффекторных факторов иммунитета путем ингибирования апоптоза, что дает возможность использовать количественные значения данных биомаркеров в качестве прогноза риска развития злокачественных новообразований. В результате были получены следующие характеристики: чувствительность - 75%, специфичность - 84,3%. Предлагаемый нами способ имеет предсказательную ценностью для прогнозирования риска развития и раннего выявления злокачественных новообразований в организме человека, достоверное и доступное для проведения в стандартной клинической практике.

Примеры, иллюстрирующие изобретение

Пример 1. Больная С., 54 года. При лабораторном обследовании периферической венозной крови в апреле 2008 г.: абсолютное содержание CD16+ лимфоцитов 0,37×109/л; концентрация sAPO-1 составила 694,7 пг/мл. По данным исследования риска развития злокачественного новообразования нет. За период наблюдения с апреля 2008 года по декабрь 2013 года новообразований выявлено не было. Прогноз верен.

Пример 2. Больная В., 32 года. При лабораторном обследовании периферической венозной крови в апреле 2008 г.: абсолютное содержание CD16+ 0,64×109/л; концентрация sAPO-1 составила 4648,8 пг/мл. Сделано заключение о риске развития злокачественного новообразования. Диагноз: Рак яичников, Т-2 ст, Mts 0-1. Заболевание диагностировано в сентябре 2008 года. Прогноз верен.

Пример 3. Больная Н., 72 года. При лабораторном обследовании периферической венозной крови в апреле 2008 г.: абсолютное содержание CD16+ 0,81×109/л; концентрация sAPO-1 составила 312647,9 пг/мл. Сделано заключение о риске развития злокачественного новообразования. Диагноз: Рак молочной железы, Т-3 ст, Mts 2 (в региональные лимфоузлы). Заболевание диагностировано в январе 2009 года. Прогноз верен.

Пример 4. Больной Б., 65 лет. При лабораторном обследовании периферической венозной крови в апреле 2008 г.: абсолютное содержание CD16+ 0,72×109/л; концентрация sAPO-1 составила 76653,8 пг/мл. Сделано заключение о риске развития злокачественного новообразования. Диагноз: Рак прямой кишки, Т-3 ст, Mts 3-4, диагностирован в 2010 году. Больной умер в 2011 году. Прогноз верен.

Способ прогнозирования риска развития злокачественных новообразований, отличающийся тем, что в периферической венозной крови человека определяют абсолютное содержание естественных киллеров (CD16+ лимфоцитов) и концентрацию растворимого рецептора апоптоза (sAPO-1); при содержании CD16+ более 0,5×109 кл/л и sAPO-1 более 4000 пг/мл прогнозируют риск развития злокачественных новообразований.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования риска невынашивания беременности. Способ состоит в выделении ДНК из лейкоцитов периферической крови пациентки и проведении генотипирования.
Изобретение относится к медицине, в частности к гигиене труда, профпатологии и аллергологии. Определяют анамнестические данные, клинические признаки, стаж работы в условиях аллергоопасных производственных факторов, «симптом элиминации», наличие симптомов заболевания непосредственно в период работы и ухудшения состояния после возвращения во вредные условия, концентрацию общего IgE в сыворотке крови.

Данное изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложена гибридомная клеточная линия FP12H3-C2, депонированная под номером DSM ACC2750, продуцирующая антитело против бета-амилоида.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, репродуктологии, и может быть использовано для оптимизации программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) с учетом молекулярно-генетических характеристик гамет при селективном переносе эмбрионов (ПЭ).

Изобретение относится к биологи и медицине, а именно к иммуноанализу, в частности к электрохимическим способам определения содержания вирусов/антигенов вирусов кори.
Изобретение относится к области медицины, в частности к терапии, кардиологии, и касается способа прогнозирования риска развития критического стеноза в коронарных артериях у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС).

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и описывает способ определения функциональной активности фактора B комплемента человека по его действию на клетки-мишени в бескальциевой среде, содержащей ионы магния, в присутствии реагента RB, являющегося сывороткой крови человека, избирательно лишенной активности фактора B, причем в качестве клеток-мишеней выбраны инфузории Tetrahymena pyriformis, суспензию которых вместе с испытуемым образцом, содержащим определяемый фактор B, и реагентом RB вносят в измерительные ячейки прибора для автоматизированного подсчета числа живых инфузорий с последующим определением числа живых клеток в каждую минуту, при этом совпадение динамики изменения числа живых клеток во времени для испытуемого образца и контрольного, представляющего пул 10 сывороток здоровых доноров, предполагает равенство активностей фактора B комплемента в этих образцах.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для снижения заболеваемости респираторными инфекциями детей младшего школьного возраста.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования внутрибольничного инфицирования ребенка возбудителями кишечных инфекций.

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии производства иммунопероксидазных конъюгатов, используемых для выявления антигенов возбудителей инфекционных болезней в твердофазном иммуноферментном анализе.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и отоларингологии, и касается способа прогнозирования затяжного течения острого ринофарингита при реактивации хронической цитомегаловирусной инфекции у женщин во втором триместре беременности. Сущность способа: определяют титр антител IgM к цитомегаловирусу (ЦМВ) и титры антител IgG к ЦМВ в парных сыворотках крови в баллах (1 балл - титр антител IgM к ЦМВ 1:200 и титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:400 при индексе авидности IgG к ЦМВ более 65% в парных сыворотках крови; 2 балла - титр антител IgM к ЦМВ 1:400 и титры антител IgG к ЦМВ 1:400-1:800 при индексе авидности IgG к ЦМВ более 65% в парных сыворотках крови; 3 балла - титр антител IgM к ЦМВ 1:400 и титры антител IgG к ЦМВ 1:200-1:800 при индексе авидности IgG к ЦМВ более 65% в парных сыворотках крови) (А), концентрацию интерферона-γ (пг/мл) в сыворотке крови в период разгара заболевания (В). Затем с помощью дискриминантного уравнения, включающего определяемые показатели, прогнозируют затяжное течение острого ринофарингита D. При D меньше граничного значения дискриминантной функции прогнозируют отсутствие затяжного течения острого ринофарингита у женщин при реактивации хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности. При D равной или больше граничного значения прогнозируют развитие затяжного течения острого ринофарингита у женщин при реактивации хронической цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности. Изобретение обеспечивает прогнозирование затяжного течения острого ринофарингита при реактивации хронической цитомегаловирусной инфекции у женщин во втором триместре беременности. Вероятность правильного прогноза составляет 81,1%. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть использовано при оценке риска возникновения побочных эффектов на фоне применения гормональной контрацепции - этинилэстрадиол+дроспиренон. Способ заключается в том, что перед назначением контрацепции определяют полиморфный локус rs936306 гена CYP19A1. При наличии генотипа G/A диагностируют транзиторные нарушения в первые 6-6,5 месяцев приема контрацепции, а при наличии генотипа А/А диагностируют побочные эффекты, начиная с 7 месяца применения контрацептивов. Способ изобретения позволяет снизить развитие побочных эффектов от гормональной контрацепции, прогнозирования переносимости и безопасности гормональных контрацептивов и возможного влияния на функцию печени, систему гемостаза и липидный спектр крови. 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктивной иммунологии и гинекологии, и может быть использовано для диагностики иммунологической формы бесплодия у пар с бесплодием неуточненного генеза. Для этого у женщин с первичным и вторичным бесплодием неуточненного генеза оценивают относительное количество CD4+CD25+CD127- Т-клеток, которые определяют однократно в периимплантационном периоде в эндометриальной ткани. При содержании этих клеток менее 7,5% диагностируют иммунологическое бесплодие. Использование данного способа позволяет рассматривать дефицит CD4+CD25+CD127- Т-клеток как маркер иммунологической формы бесплодия как у женщин с привычным невынашиванием, так и с первичным бесплодием. 2 з.п. ф-лы, 3 пр.
Изобретение относится медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частоты развития инфекционных заболеваний у ребенка на первом году жизни. Для этого определяют иммунологические показатели в пуповинной крови и венозной крови на 4-5 сутки жизни. Рассчитывают коэффициент резистентности (Крез), рассчитываемый по формуле Крез=4,95258-0,0143955×(ФП)+0,0962295×(ФЧ)-0,00903362×(IgG)-0,257936×(IgA)-0,324514×(IgM)+0,430186×(CD45+CD3+)-1,66224×(CD45+CD4+CD3+)+l,49266×(CD45+CD8+CD3+)+0,815254×(CD4+CD8+)+0,522212×(HLA-DR+)-23,1991×(CD3+HLA-DR+)+0,974106×(CD3+CD25+)+0,832493×(CD3+CD4+CD25+)-3,52478×(CD16+CD56+CD3-)+7,67325×(CD16+CD56-CD3-)+11,082×(CD16+CD56+CD3+)+0,305366×(CD19+)+0,0691703×(CD5+)+0,0610707×(CD3+), где ФП - фагоцитарный показатель, ФЧ - фагоцитарное число, IgG, М, А - иммуноглобулины соответствующих классов, CD - маркеры дифференцировки лимфоцитов. При значении Крез, составляющем 1,78 и выше при вычислении по величинам показателей, полученных из пуповинной крови, и ниже, чем 5,72 при вычислении по величинам показателей, полученных из венозной крови на 4-5 сутки жизни, ожидается высокая степень резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни. Использование данного способа позволяет прогнозировать частоту развития инфекционных заболеваний у ребенка на первом году жизни и предпринять превентивные меры для снижения риска высокой заболеваемости. 2 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики высокодифференцированного рака у больных с узловыми формами заболеваний щитовидной железы. Для этого проводят тонкоигольную аспирационную биопсию узловых образований щитовидной железы под контролем ультразвукового исследования. При этом пункционную иглу с содержащимся в ней аспиратам промывают двукратно 1 мл изотонического раствора натрия хлорида, затем центрифугируют, отбирают супернатант и методом иммуноферментного анализа определяют тиреоглобулин. Причем если содержание тиреоглобулина меньше 272,5 нг/мл - предполагают отсутствие высокодифференцированного рака щитовидной железы, в интервале 272,5-355,5 нг/мл - риск высокодифференцированного рака щитовидной железы, выше 355,5 нг/мл предполагают высокодифференцированный рак щитовидной железы. Изобретение обеспечивает дооперационную дифференциальную диагностику высокодифференцированного рака у больных с узловыми формами заболеваний щитовидной железы, а также обеспечивает возможность дальнейшего выбора адекватного метода лечения. 3 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложены варианты гуманизированного анти-CD79b антитела, каждый из которых характеризуется наличием легкой и тяжелой цепи и набором 6 CDR с установленной аминокислотной последовательностью и по меньшей мере одним свободным цистеиновым аминокислотным остатком, выбранным из А118С (по Европейской нумерации) в тяжелой цепи и V205C (по нумерации Кэбат) в легкой цепи. Рассмотрены: варианты соединения-конъюгата антитела с лекарственным средством, где антитело связано с лекарственным средством через свободный цистеин; фармацевтический состав для лечения рака на основе антитела; способы детекции CD79b или раковых клеток, а также способ ингибирования клеточной пролиферации, использующие соединение-конъюгат. Описан способ получения соединения-конъюгата. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии раковых заболеваний, ассоциированных с CD79b, в том числе при лечении гемопоэтических опухолей у млекопитающих. 8 н. и 62 з.п. ф-лы, 20 табл., 9 пр., 51 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу дифференциальной диагностики генерализованной формы внутриутробной моно- и микст-цитомегаловирусной инфекции у новорожденных. Сущность способа состоит в том, что у новорожденных с генерализованной формой внутриутробной моно-цитомегаловирусной инфекции или микст-цитомегаловирусной инфекции в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата определяют концентрацию серомукоида. При концентрации серомукоида 0,110-0,140 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития генерализованной формы внутриутробной моно-цитомегаловирусной инфекции. При концентрации серомукоида 0,141-0,171 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию генерализованной формы внутриутробной микст-цитомегаловирусной инфекции, обусловленной сочетанием вируса цитомегалии и простого герпеса 1 типа. Использование заявленного способа позволяет эффективно осуществить дифференциальную диагностику генерализованной формы внутриутробной моно- и микст-цитомегаловирусной инфекции у новорожденных. 1 табл., 3 пр.

Изобретение касается способа диагностики ревматоидного артрита, способа определения лечебного эффекта терапевтического агента для лечения ревматоидного артрита и набора для осуществления способов. Способы характеризуются тем, что включают стадию измерения количества талина в плазме или сыворотке субъекта-животного. Это измерение проводят, например, иммунологическим способом с использованием антитела, связывающегося с талином. Если количество талина больше относительно его среднего значения у контрольного субъекта без ревматоидного артрита у субъекта диагностируют ревматоидный артрит. В случае снижения количества талина после введения терапевтического агента по сравнению с количеством талина до введения устанавливают лечебный эффект. Набор по настоящему изобретению содержит твердофазный носитель, к которому присоединено антитело, связывающееся с талином. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 пр., 3 ил.
Изобретение относится к области медицины, в частности к ревматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики ревматоидного артрита (РА) с остеоартрозом (OA). Для этого проводят забор синовиальной жидкости пациента и определение содержания хемокинов CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10 и CXCL11/ITAC в супернатанте. Диагноз ревматоидного артрита устанавливают, если содержание хотя бы одного из хемокинов превышает пороговое значение, причем пороговые значения для хемокинов составляют соответственно 2625,8 пг/мл для CXCL9/MIG, 3108,2 пг/мл для CXCL9/MIG и 32,4 пг/мл для CXCL11/ITAC. При значениях содержания ниже пороговых для трех хемокинов одновременно констатируют отсутствие ревматоидного артрита и возможное наличие остеоартроза. Использование данного способа позволяет дифференцировать ревматоидный артрит с остеоартрозом путем определения специфичных маркеров в синовиальной жидкости, полученной непосредственно в месте локализации процесса. 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа диагностики нейродегенеративного заболевания у индивидуума, включающего стадии (i) определения одного или нескольких параметров, выбранных из группы, состоящей из 3ab40 или величины вычисленного параметра, выбранного из группы, состоящей из 2ab40+3ab40, 2ab40+3ab40+2ab42+3ab42 и 1ab40+2ab40+1ab42+2ab42; (ii) сравнения величины параметра с эталонной величиной, соответствующей величине указанного параметра в эталонном образце; и (iii) диагностики нейродегенеративного заболевания, в случае, если наблюдается увеличение величины параметра по сравнению с эталонной величиной. Группа изобретений также касается способа детектирования стадии, предшествующей нейродегенеративному заболеванию; способа дифференциации нейродегенеративного заболевания от стадии, предшествующей указанному нейродегенеративному заболеванию. Группа изобретений обеспечивает высокую чувствительность и специфичность способов детектирования. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 12 пр., 14 ил., 12 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно онкологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития и раннего выявления злокачественных новообразований. Для этого в периферической крови человека определяют абсолютное содержание естественных киллеров и концентрацию растворимого рецептора апоптоза. При содержании CD16+ более 0,5×109 клл и концентрации sAPO-1 более 4000 пгмл прогнозируют риск развития злокачественных новообразований. Использование данного способа позволяет выявлять злокачественные новообразования на ранних стадиях развития с использованием иммунологических методов. 4 пр.

Наверх