Питательная среда для селективного накопления энтеробактерий, сухая (бульон мосселя), варианты
Владельцы патента RU 2553224:
Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) (RU)
Группа изобретений относится к биотехнологии. Варианты питательной среды для селективного накопления энтеробактерий содержат панкреатический гидролизат рыбной муки, либо пептон мясной, либо панкреатический гидролизат рыбной муки и пептон мясной (в соотношении 1:1), желчь очищенную модифицированную (ЖОМ), натрий хлористый, глюкозу, калий фосфорнокислый однозамещенный и бриллиантовый зеленый в заданном соотношении. Изобретения позволяют повысить эффективность накопления энтеробактерий, селективные свойства среды и упростить способ получения питательной среды. 3 н.п. ф-лы, 3 табл., 9 пр.
Изобретение относится к санитарной и клинической микробиологии и может быть использовано для селективного накопления энтеробактерий из воды, пищевых продуктов, клинического материала и т.д.
Ведущие зарубежные фирмы: Merck «Микробиология», 2004-2005 стр.202; HiMedia (HiMedia Laboratories Pvt. Limited (Индия), 1993, стр.80; и ООО «ГЕМ» «Среды бактериологические». Каталог 2009-2010, стр.48, выпускают накопительный бульон для энтеробактерий по Мосселю на основе панкреатического гидролизата желатина или пептона мясного. Компонентное содержание в г/л представлено в табл.1.
Для бактериологического контроля в соответствии с Государственной Фармакопеей Российской Федерации, XII издание, регламентирующей перечень питательных сред для селективного обогащения энтеробактерий, предусмотрен бульон Мосселя (Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel) ОФС 42-0067-07.
Селективное накопление всех видов энтеробактерий в бульоне Мосселя обусловлено тем, что высокая концентрация бычьей желчи в совокупности с бриллиантовым зеленым подавляет рост сопутствующей микрофлоры, а глюкоза способствует росту энтеробактерий. Натриево-калийные фосфаты обеспечивают большую буферную емкость в среде, что защищает культуру от губительного действия образующейся кислоты.
До настоящего времени в России в связи с отсутствием отечественной коммерческой сухой питательной среды для селективного обогащения энтеробактерий в практике клинической и санитарной микробиологии используется бульон Мосселя лабораторного приготовления, а для контроля микробиологической чистоты лекарственных сред - среда №3 (среда обогащения для бактерий семейства Enterobacteriaceae).
Недостатками бульона Мосселя лабораторного изготовления в соответствии с рецептурой, представленной в ГФ, XII издание, и среды №3 являются:
- сложность приготовления;
- использование в качестве элективного фактора неочищенной желчи крупного рогатого скота - вещества химически неопределенного состава, затрудняющего получение объективных результатов;
- отсутствие отечественных сухих препаратов - пептона и желчи, обладающих высокой степенью прозрачности в растворах;
- необходимость фильтрации в случае использования основных компонентов среды отечественного производства, как дополнительный этап в процессе приготовления;
- слабая ингибирующая способность в отношении сопутствующих грамположительных микробов ассоциантов при обеспечении роста энтеробактерий;
- увеличение себестоимости среды в случае необходимости использования импортных препаратов.
Наиболее близким к предлагаемому бульону Мосселя является коммерческий бульон Мосселя (Merck), который состоит из следующих компонентов, г/л:
| Пептон мясной | 10,0 |
| Глюкоза моногидрат | 5,5 |
| Желчь бычья | 20,0 |
| Натрий фосфорнокислый | |
| двузамещенный | 8,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 2,0 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,015 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Недостатком коммерческой среды (Merck) является:
- недостаточная эффективность при росте и селективном накоплении ряда энтеробактерий;
- недостаточно выраженные ингибирующие свойства в отношении микробов-ассоциантов;
- ограниченная доступность.
Задачей изобретения является создание отечественной сухой питательной среды для селективного накопления энтеробактерий, обладающей большей эффективностью, с более высокими селективными свойствами, обеспечивающей доступность и получение объективных результатов бактериологического контроля.
Поставленная задача решается тем, что предлагается питательная среда для селективного накопления энтеробактерий, сухая, содержащая белковую основу, глюкозу, калий фосфорнокислый однозамещенный и бриллиантовый зеленый, причем в качестве белковой основы она содержит панкреатический гидролизат рыбной муки, либо пептон мясной, либо панкреатический гидролизат рыбной муки и пептон мясной (в соотношении 1:1), желчь очищенную модифицированную (ЖОМ) и натрий хлористый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:
Вариант первый:
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой | 8,0-12,0 |
| Глюкоза | 4,0-6,0 |
| Натрий хлористый | 2,0-2,8 |
| Желчь очищенная модифицированная | 30,0-34,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,4-0,6 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,01-0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Вариант второй:
| Пептон мясной | 8,0-12,0 |
| Глюкоза | 4,0-6,0 |
| Натрий хлористый | 2,0-2,8 |
| Желчь очищенная модифицированная | 30,0-34,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,4-0,6 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,01-0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Вариант третий:
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой и пептон мясной | 8,0-12,0 |
| Глюкоза | 4,0-6,0 |
| Натрий хлористый | 2,0-2,8 |
| Желчь очищенная модифицированная | 30,0-34,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,4-0,6 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,01-0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Технический результат достигается за счет предварительной подготовки сырой желчи. С этой целью нативную желчь КРС кипятят и фильтруют через фильтровальную ткань (бельтинг) в изоэлектрических точках, при каждом значении pH, с целью осаждения белков и высокомолекулярных пептидов. Заключительный этап подготовки желчи состоит из адсорбции примесей активным углем, внесения расчетного количества двузамещенного фосфата натрия в пересчете на содержание сухих веществ, кипячения и фильтрации. Это позволяет исключить дополнительное внесение фосфата натрия в состав среды, обеспечивая высокую буферную емкость готовой среды и ее прозрачность. Сбалансированность компонентного состава среды, включая панкреатический гидролизат рыбной муки (ПГРМ), в качестве белковой питательной основы, обеспечивает хорошие ростовые и селективные свойства бульона Мосселя.
Способ получения бульона Мосселя предусматривает смешивание сухих компонентов, г/л:
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой, либо пептон | |
| мясной, либо панкреатический | |
| гидролизат рыбной муки | |
| сухой и пептон мясной | 8,0-12,0 |
| Глюкоза | 4,0-6,0 |
| Натрий хлористый | 2,0-2,8 |
| Желчь очищенная модифицированная | 30,0-34,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,4-0,6 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,01-0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Панкреатический гидролизат рыбной муки или пептон мясной обеспечивают ростовые потребности микроорганизмов в азотистом питании. Предварительная подготовка желчи КРС позволяет получить сухую желчь очищенную модифицированную (ЖОМ), обеспечивающую высокую буферную емкость и прозрачность готовой питательной среды, ингибирующие свойства в отношении нежелательной сопутствующей бактериальной флоры и селективное накопление энтеробактерий, не угнетаемое в результате образования кислых продуктов жизнедеятельности.
Отличием предлагаемой среды от прототипа является возможность использования наряду с пептоном мясным панкреатического гидролизата рыбной муки в качестве белковой основы. Технология подготовки сырой желчи с использованием натрия фосфорнокислого двузамещенного исключает дополнительное внесение его в среду. Количественное соотношение компонентов питательной среды, ее pH, обеспечивают среде сохранение хороших ростовых свойств, эффективность накопления энтеробактерий и ингибирующий эффект в отношении сопутствующей микрофлоры. Готовая среда сохраняет стерильность не менее 10 суток
Для достижения технического результата на стадии производства желчи очищенной модифицированной (ЖОМ) желчь после осаждения белков в изоэлектрических точках, адсорбции примесей активным углем с внесением двузамещенного фосфата натрия из расчета 12,0 г на каждые 20,0 г желчи, в пересчете на сухое вещество, сушат на сушильной установке в виброкипящем слое А1-ФМУ.
Пример 1. Для приготовления среды по первому варианту берут навески следующих ингредиентов, г/л:
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой | 8,0 |
| Глюкоза | 4,0 |
| Натрий хлористый | 2,0 |
| Желчь очищенная модифицированная | 30,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,4 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,01 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Навески размешивают в 1 л дистиллированной воды, разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют автоклавированием при температуре 121°C в течение 5 мин.
Предлагаемая среда, прозрачная, зеленого цвета, обеспечивает рост и накопление следующих тест-штаммов семейства Enterobacteriaceae при посеве по 0,5 мл микробной взвеси из разведения 10-7:
E. coli 25922
E. coli O55:K59 3912/41
S. flexneri 1a 8516
S. typhimurium 79
K. pneumonia 418
K. pneumonia 3534/51
Предлагаемая среда в значительной степени ингибирует рост грамположительных микроорганизмов, в частности S. aureus Wood-46, из разведения 10-1.
Используемые для контроля среды тест-штаммы микроорганизмов получены из отдела коллекционных культур ФБУН ГНЦ ПМБ.
Готовят стандартную взвесь культуры каждого тест-штамма, соответствующую 10 единицам по стандартному образцу мутности ОСО 42-28-85 П, с использованием стерильного 0,9% раствора натрия хлористого. Полученные взвеси культур десятикратными разведениями (4,5 мл 0,9% раствора натрия хлорида с 0,5 мл микробной взвеси) доводят до разведения 10-7 (для S. aureus Wood-46 - до разведения 10-1) и используют для контроля среды.
Для определения ростовых свойств засев производят по 0,5 мл микробной взвеси каждого из тест-штаммов из разведения 10-7 в 5,0 мл бульона Мосселя, т.е. 10 м.к./мл среды. Посевы инкубировали при температуре (37±1)°C в течение 20-24 ч. Результаты биологического контроля лабораторных образцов бульона Мосселя на наборе тест-штаммов представлены в таблице 2.
Пример 2. Среду готовят в соответствии с примером 1.
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой | 10,0 |
| Глюкоза | 5,0 |
| Натрий хлористый | 2,4 |
| Желчь очищенная модифицированная | 32,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,5 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,015 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Результаты биологического контроля представлены в таблице 2 и аналогичны результатам проверки по примеру 1.
Пример 3. Среду готовят в соответствии с примером 1.
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой | 12,0 |
| Глюкоза | 6,0 |
| Натрий хлористый | 2,8 |
| Желчь очищенная модифицированная | 34,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,6 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Результаты биологического контроля представлены в таблице 2 и аналогичны результатам проверки по примеру 1.
Пример 4. Для приготовления бульона Мосселя в соответствии со вторым вариантом берут навески следующих ингредиентов, г/л:
| Пептон мясной | 8,0 |
| Глюкоза | 4,0 |
| Натрий хлористый | 2,0 |
| Желчь очищенная модифицированная | 30,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,4 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,01 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Навески размешивают в 1 л дистиллированной воды, разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют автоклавированием при температуре 121°C в течение 5 мин.
Результаты биологического контроля представлены в таблице 3 и аналогичны результатам проверки примеров 1, 2, 3 по варианту 1.
Пример 5. Среду готовят в соответствии с примером 4.
| Пептон мясной | 12,0 |
| Глюкоза | 6,0 |
| Натрий хлористый | 2,8 |
| Желчь очищенная модифицированная | 34,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,6 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Результаты биологического контроля представлены в таблице 3 и аналогичны результатам проверки примеров 1, 2, 3 по варианту 1.
Пример 6. Для приготовления бульона Мосселя в соответствии с третьим вариантом берут навески следующих ингредиентов, г/л:
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой и пептон | |
| мясной | 8,0 |
| Глюкоза | 4,0 |
| Натрий хлористый | 2,0 |
| Желчь очищенная модифицированная | 30,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,4 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,01 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Навески размешивают в 1 л дистиллированной воды, разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют автоклавированием при температуре 121°C в течение 5 мин.
Результаты биологического контроля бульона Мосселя в соответствии с вариантом 3 представлены в таблице 3 и аналогичны результатам проверки по примерам 1, 2, 3.
Пример 7. Среду готовят в соответствии с примером 6.
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой и пептон | |
| мясной | 12,0 |
| Глюкоза | 6,0 |
| Натрий хлористый | 2,8 |
| Желчь очищенная модифицированная | 34,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,6 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Результаты биологического контроля представлены в таблице 3 и аналогичны результатам проверки по примерам 1, 2, 3.
Пример 8. Среду готовят в соответствии с примером 1.
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой | 6,0 |
| Глюкоза | 3,0 |
| Натрий хлористый | 1,6 |
| Желчь очищенная модифицированная | 28,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,3 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,005 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Результаты биологического контроля представлены в таблице 2.
Оценка качества предлагаемой среды для селективного накопления энтеробактерий с нарушением количественного соотношения ингредиентов:
Пример 9. Среду готовят в соответствии с примером 1.
| Панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой | 14,0 |
| Глюкоза | 7,0 |
| Натрий хлористый | 3,2 |
| Желчь очищенная модифицированная | 36,0 |
| Калий фосфорнокислый | |
| однозамещенный | 0,7 |
| Бриллиантовый зеленый | 0,025 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
Результаты биологического контроля представлены в таблице 2. Нарушение количественного соотношения ингредиентов среды в примерах 8, 9 ведет к ухудшению ростовых, ингибирующих свойств и, как следствие, снижению коэффициента эффективности накопления энтеробактерий.
Из таблиц сравнительных характеристик биологического контроля (табл.2, 3) видно, что предлагаемая питательная среда в соответствии с примерами 1-7 обладает хорошими ростовыми свойствами, эффективна в накоплении энтеробактерий и подавляет рост стафилококка.
Визуальный учет результатов накопления энтеробактерий по окончании срока инкубации посевов показал идентичные результаты в испытуемых и контрольной средах.
Изменение количественного соотношения компонентов среды ведет к нарушению биологических показателей качества предложенной среды.
Так, в случае приготовления среды в соответствии с примерами 8, 9 наблюдается снижение эффективности накопления энтеробактерий и ингибирующего эффекта среды в отношении S. aureus Wood-46.
Для получения данных по показателю эффективности бульона Мосселя засеянные пробирки каждого тест-штамма, содержащие около 10 м.к./мл - (нулевой посев) инкубировали при температуре (37±1)°C в течение 3 ч. Для определения посевной дозы 0,1 мл микробной взвеси каждого тест-штамма из разведения 10-7 высевали на чашки Петри с ГРМ агаром. После инкубации посевов в накопительной среде содержимое пробирок перемешивали и производили аналогичный высев на ГРМ агар.
Через 18-20 часов инкубации посевов на ГРМ агаре при температуре (37±1)°C производили подсчет сформировавшихся колоний. Показатель эффективности рассчитывали по приросту числа колоний после инкубации культуры в накопительной среде к числу колоний при нулевом посеве.
Сравнительная характеристика эффективности бульона Мосселя по варианту 1 представлена в таблице 3. Результаты эффективности накопления энтеробактерий бульона Мосселя, приготовленного в соответствии вариантами 2, и аналогичны и сопоставимы с результатами, полученными при испытании бульона Мосселя, вариант 1.
Таким образом, разработана отечественная конкурентоспособная сухая питательная среда для селективного обогащения энтеробактерий, имеющая ряд преимуществ:
эффективность накопления энтеробактерий в 1,5-2,0 раза выше, чем в коммерческой среде;
коэффициент ингибиции в отношении стафилококка более чем в 100 раз превышает показатель коммерческого накопительного бульона;
питательная среда проста в приготовлении;
разработана технология осветления желчи в изоэлектрических точках с использованием активного угля и двузамещенного фосфата натрия, исключающая дальнейшее внесение его в питательную среду, обеспечивающая прозрачность готового препарата;
исключена необходимость использования безводного натрия фосфорнокислого двузамещенного при изготовлении сухого препарата;
возможность использования панкреатического гидролизата рыбной муки наряду с пептоном мясным при сохранении ростовых и селективных свойств;
| Таблица 1 | |||||
| Накопительный бульон для энтеробактерий по Мосселю | |||||
| № п/п | Наименование компонентов | Накопительный бульон для энтеробактерий по Мосселю (Бульон Мосселя) Merck | ЭО бульон Мосселя ЕЕ Broth, Mossel HiMedia | Энтеробактериальный бульон обогащения по Мосселю ООО «ГЕМ» | Бульон Мосселя для обогащения энтеробактрий (Enterobacteria Erichment Broth-Mossel ОФС 42-0067-07) |
| 1 | Панкреатический гидролизат желатина | - | - | 10,0 | 10,0 |
| 2 | Пептон мясной | 10,0 | 10,0 | - | - |
| 3 | Глюкоза моногидрат | 5,5 | 5,0 | 5,0 | 5,0 |
| 4 | Желчь бычья | 20,0 | 20,0 | 20,0 | 20,0 |
| 5 | Натрий фосфорнокислый двузамещенный | 8,0 | 6,45 | 7,0 | 8,0 |
| 6 | Калий фосфорнокислый однозамещенный | 2,0 | 2,0 | 3,0 | 2,0 |
| 7 | Бриллиантовый зеленый | 0,015 | 0,0135 | 0,015 | 0,015 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 | 7,2±0,2 | 7,2±0,2 | 7,2±0,2 |
| Таблица 2 | ||||||||
| Сравнительная характеристика биологического контроля бульона Мосселя на основе панкреатического гидролизата рыбной муки, г/л | ||||||||
| № п/п | Наименование тест-штамма | Разведение | Вариант 1 | Вариант 1 | Вариант 1 | Вариант 1 | Вариант 1 | Накопительный бульон для энтеробактерий по Мосселю (Бульон Мосселя) Merck |
| Пример 1 | Пример 2 | Пример 3 | Пример 8 | Пример 9 | ||||
| 1 | E. coli 25922 | 10-7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ |
| 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 2 | E. coli 055:K59 | 10-7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ осадок |
| 3912/41 | 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | |
| 3 | S. flexneri la 8516 | 10-7 | ++ | ++ | ++ | + | + | ++ |
| 10-6 | ++ | ++ | ++ | ++ | + | +++ | ||
| 4 | S. typhimurium 79 | 10-7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ |
| 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | ++ | +++ | ||
| 5 | K. pneumonia | 10-7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ |
| 418 | 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | ++ | +++ газ | |
| 6 | S. aureus-Wood-46 | 10-1 | Нет диффузного помутнения среды | Нет диффузного помутнения среды | Нет диффузного помутнения среды | + слабое диффузное помутнение среды | Нет диффузного помутнения среды | Нет диффузного помутнения среды |
| *+++ - отличный рост с диффузным помутнением среды; ++ - хороший рост с диффузным помутнением среды; |
| Таблица 3 | |||||||
| Сравнительная характеристика биологического контроля бульона Мосселя на основе мясного пептона и смеси ПГРМ с мясным пептоном в соотношении 1:1, г/л | |||||||
| № п/п | Наименование тест-штамма | Разведение | Вариант 2 | Вариант 2 | Вариант 3 | Вариант 3 | Накопительный бульон для энтеробактерий по Мосселю (Бульон Мосселя) Merck |
| Пример 4 | Пример 5 | Пример 6 | Пример 7 | ||||
| 1 | E. coli 25922 | 10-7 | +++ | +++ | +++ | ++ | +++ |
| 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 2 | E. coli 055:K59 | 10-7 | +++ | +++ | +++ | ++ | +++осадок |
| 3912/41 | 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | |
| 3 | S. flexneri la 8516 | 10-7 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 4 | S. typhimurium 79 | 10-7 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 5 | K. pneumonia | 10-7 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 418 | 10-6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++газ | |
| 6 | S. aureus-Wood-46 | 10-1 | Нет диффузного помутнения среды | Нет диффузного помутнения среды | Нет диффузного помутнения среды | Нет диффузного помутнения среды | Нет диффузного помутнения среды |
| *+++ - отличный рост с диффузным помутнением среды; ++ - хороший рост с диффузным помутнением среды; |
1. Питательная среда для селективного накопления энтеробактерий, сухая (Бульон Мосселя), содержащая белковую основу, глюкозу, калий фосфорнокислый однозамещенный и бриллиантовый зеленый, отличающаяся тем, что в качестве белковой основы содержит панкреатический гидролизат рыбной муки, дополнительно содержит желчь очищенную модифицированную (ЖОМ) и натрий хлористый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:
| панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки, сухой | 8,0-12,0 |
| глюкоза | 4,0-6,0 |
| натрий хлористый | 2,0-2,8 |
| желчь очищенная модифицированная | 30,0-34,0 |
| калий фосфорнокислый однозамещенный | 0,4-0,6 |
| бриллиантовый зеленый | 0,01-0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
2. Питательная среда для селективного накопления энтеробактерий, сухая (Бульон Мосселя), содержащая пептон мясной, глюкозу, калий фосфорнокислый однозамещенный и бриллиантовый зеленый, отличающаяся тем, что она содержит желчь очищенную модифицированную (ЖОМ) и натрий хлористый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:
| пептон мясной | 8,0-12,0 |
| глюкоза | 4,0-6,0 |
| натрий хлористый | 2,0-2,8 |
| желчь очищенная модифицированная | 30,0-34,0 |
| калий фосфорнокислый однозамещенный | 0,4-0,6 |
| бриллиантовый зеленый | 0,01-0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
3. Питательная среда для селективного накопления энтеробактерий, сухая (Бульон Мосселя), содержащая белковую основу, глюкозу, калий фосфорнокислый однозамещенный и бриллиантовый зеленый, отличающаяся тем, что в качестве белковой основы содержит панкреатический гидролизат рыбной муки и пептон мясной в соотношении 1:1, дополнительно содержит желчь очищенную модифицированную (ЖОМ) и натрий хлористый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:
| панкреатический гидролизат | |
| рыбной муки сухой и пептон мясной | 8,0-12,0 |
| глюкоза | 4,0-6,0 |
| натрий хлористый | 2,0-2,8 |
| желчь очищенная модифицированная | 30,0-34,0 |
| калий фосфорнокислый однозамещенный | 0,4-0,6 |
| бриллиантовый зеленый | 0,01-0,02 |
| pH готовый среды | 7,2±0,2 |
