Способ диагностики иммунологической формы бесплодия

Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктивной иммунологии и гинекологии, и может быть использовано для диагностики иммунологической формы бесплодия у пар с бесплодием неуточненного генеза. Для этого у женщин с первичным и вторичным бесплодием неуточненного генеза оценивают относительное количество CD4+CD25+CD127- Т-клеток, которые определяют однократно в периимплантационном периоде в эндометриальной ткани. При содержании этих клеток менее 7,5% диагностируют иммунологическое бесплодие. Использование данного способа позволяет рассматривать дефицит CD4+CD25+CD127- Т-клеток как маркер иммунологической формы бесплодия как у женщин с привычным невынашиванием, так и с первичным бесплодием. 2 з.п. ф-лы, 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктивной иммунологии и акушерству и гинекологии, и может быть использовано для диагностики иммунологической формы бесплодия у пар с бесплодием неуточненного генеза.

При отсутствии анатомических дефектов репродуктивной системы женщины, мужского фактора, гормональных нарушений, гинекологических заболеваний причины бесплодия связывают с иммунными дисфункциями. Иммунные нарушения могут проявляться присутствием у женщины различных антител, направленных против антигенных детерминант собственных тканей (антифосфолипидные и антинуклеарные антитела, антитела к половым гормонам, хорионическому гонадотропину человека) или сперматозоидов, что может оказывать неблагоприятное влияние на имплантацию эмбриона и вынашивание беременности [1]. Кроме того, причина бесплодия может быть обусловлена снижением продукции протективных блокирующих факторов, предохраняющих эмбрион от иммунной атаки матери [2]. Следствием данных дисфункций может быть нарушение имплантации эмбриона при хороших эмбриологических показателях, что остается неразрешимой задачей при экстракорпоральном оплодотворении. Поиск параметров, отражающих иммунные нарушения, активно ведется во всем мире, однако найти универсальные биомаркеры, ассоциированные с бесплодием иммунного генеза, до сих пор не удается.

В последние годы особое внимание уделяется популяции регуляторных Т-клеток (Т-рег) с супрессорной активностью, которые принимают непосредственное участие в индукции толерантности при беременности [3]. Регуляторные Т-клетки составляют гетерогенную популяцию и включают клетки с различными фенотипами, которые различаются по функциям. Значение Т-рег для имплантации и развития беременности было показано в экспериментальных работах, где перенос Т-рег бесплодным самкам сопровождался вынашиванием беременности [4]. Снижение доли регуляторных Т-клеток продемонстрировано у женщин с привычным невынашиванием [5].

Для диагностики иммунных нарушений при бесплодии предложены различные способы. Так, в качестве биомаркера иммунных нарушений предложена диагностика гена, кодирующего ассоциированный с бесплодием протеин (FKBPL) [6]. Предполагается, что эффект FKBPL обусловлен подавлением экспрессии рецепторов к эстрогену.

Предложен также способ определения в крови у женщин концентрации фактора EBAF (endometrial bleeding associated factor) - цитокина семейства TGFβ. Повышенная продукция EBAF ингибирует продукцию пролактина (PRL) и протеина, связывающего инсулиновый ростовой фактор (IGFBP-1), которые принимают непосредственное участие в децидуализации и имплантации эмбриона [7]. Недостатком данных методов диагностики является невысокая частота встречаемости нарушений исследуемых параметров у женщин с бесплодием, которая составляет 5-7%.

Известен способ диагностики иммунных нарушений при бесплодии по ингибированию пролиферативного ответа лимфоцитов женщины на стимуляцию фитогемагглютинином (ФГА) в присутствии аутологичной сыворотки в течение 72 часов. Оценка пролиферативной активности лимфоцитов в культуре регистрируется по синтезу ДНК с использованием радиоактивно меченого H3-тимидина [8].

Недостатками способа являются длительность инкубации клеток в стерильных условиях, наличие специального оборудования и персонала для работы в радиоизотопной лаборатории, отсутствие диагностических критериев.

В качестве модификации этого метода описан «Способ оценки определения блокирующего эффекта аутологичной сыворотки женщины» [9]. Метод основан на способности сывороток крови фертильных женщин ингибировать пролиферацию лимфоцитов, стимулированных фитогемагглютинином (ФГА). Из крови женщин выделяют лимфоциты методом центрифугирования в градиенте плотности. Для определения супрессорной активности лимфоциты женщины инкубируют в течение 72 часов в разных культуральных условиях - в среде с добавлением ФГА, в среде с добавлением ФГА и пулированной АВ-сыворотки доноров, в среде с добавлением ФГА и аутологичной сыворотки и в среде без добавок. Интенсивность пролиферации клеток оценивают методом проточной цитофлуориметрии с использованием прямых меченых FITC антител к CD69. Далее оценивают флуоресценцию в каждой из проб и определяют супрессорный эффект по предложенной формуле.

Недостатками данного способа являются необходимость 3-дневного культивирования клеток, требующая проведения исследований в стерильных условиях и специального оборудования, наличие высокопрофессионального персонала, а также отсутствие пороговых значений, определяющих оптимальные показатели специфичности и чувствительности. Кроме того, данный тест выявляет супрессорную активность безотносительно специфичности к аллоантигенам плода, что может уменьшать его значимость для диагностики иммунологического бесплодия.

Наиболее близким прототипом заявленного способа являются работы L. Arruvito с соавторами, основанные на оценке содержания циркулирующих регуляторных Т-клеток [10]. Согласно данному подходу в фолликулярную и лютеиновую фазы менструального цикла из периферической крови женщин методом центрифугирования в градиенте плотности выделяют лимфоциты. Методом проточной цитометрии оценивают содержание трех субпопуляций клеток - CD4+CD25+, CD4+CD25high, CD4+FoxP3+ клеток. У фертильных женщин содержание циркулирующих Т-клеток максимально нарастает в периовуляторный период. У женщин с привычным невынашиванием содержание CD4+CD25+, CD4+CD25high, CD4+FoxP3+ Т-клеток нарастает в меньшей степени и достоверно отличается от количества соответствующих Т-клеток у фертильных женщин.

Недостатками способа являются необходимость как минимум 2-кратного обследование женщин, определение 3-х субпопуляций лимфоцитов, отсутствие пороговых значений, определяющих оптимальные показатели специфичности и чувствительности и ограниченная область применения метода - только у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе.

Предлагаемое изобретение решает задачу: создание метода диагностики иммунологической формы бесплодия, основанного на упрощенном (по сравнению с прототипом) способе оценки регуляторных Т-клеток, обладающего высокой чувствительностью и специфичностью, с расширенной сферой применения: как в случаях с привычным невынашиванием, так и при первичном бесплодии неуточненного генеза.

Поставленная задача решается следующим образом. Проводят однократное обследование в периимплантационный период как женщин с привычным невынашиванием, так и с первичным бесплодием. В качестве диагностического маркера исследуется только одна субпопуляция клеток CD4+CD25+CD127- Т-клеток. Эту популяцию оценивают в эндометриальной ткани, в которой содержание регуляторных Т-клеток характеризуется более высокой диагностической точностью, чем в периферической крови, методом проточной цитометрии. Диагностическим критерием является снижение относительного количества CD4+CD25+CD127- Т-клеток ниже порогового значения: при содержании этих клеток <7,5% диагностируется иммунологическое бесплодие.

Технический результат предложенного способа состоит в следующем.

- Определены пороговые значения популяции Т-клеток, определяющие оптимальные показатели специфичности и чувствительности. Разработанный способ позволяет диагностировать бесплодие со специфичностью 77% и чувствительностью 85%. Полученные данные позволяют рассматривать дефицит CD4+CD25+CD127- Т-клеток как маркер иммунологической формы бесплодия.

- Способ упрощен в исполнении: проводится однократное обследование женщин в периимплантационный период и исследуется только одна субпопуляция клеток CD4+CD25+CD127.

- Расширена сфера применения диагностического метода: обследование проводится в периимплантационный период как женщин с привычным невынашиванием, так и с первичным бесплодием.

Способ осуществляется следующим образом

У женщин с бесплодием неясного генеза в периимплантационный период (19-24 день цикла забирают биоптат эндометриальной ткани, который получают путем аспирации с помощью внутриматочного зонда «Пайпель». Биоптат эндометриальной ткани помещают в холодный физиологический раствор, затем механически измельчают, фильтруют через стальное сито, промывают в физиологическом растворе и собирают клеточную суспензию. Далее 50 мкл клеточной суспензии ресуспендируют в растворе «А» (5% желатиноля, 0,1% азида натрия, 0,02% ЭДТА, 10% сыворотки доноров АВ (IY) группы в фосфат-забуференном физиологическом растворе - ЗФР). Затем к суспензии клеток добавляют 20 мкл коктейля моноклональных антител (CD4CD25CD127, Becton Dickinson, США) и инкубируют 20 минут при комнатной температуре. После этого клетки однократно отмывают в растворе «А». Подготовленные таким образом клетки исследуют на проточном цитометре с применением программы Cell Quest (Dickinson, США).

Заявленный способ разработан на основании обследования 13 фертильных женщин, имеющих детей, и 13 женщин с бесплодием неясного генеза в период с сентября 2011 г. по июнь 2013 г. На момент исследования у женщин не была выявлена причина бесплодия (регулярный овуляторный менструальный цикл, проходимость маточных труб, фертильная сперма партнера, отсутствие анатомических дефектов репродуктивных органов, отсутствие гинекологических и эндокринных заболеваний). Возраст фертильных женщин составил 29,5±2,9; женщин с бесплодием 30,2±1,3. Факт овуляции оценивался с помощью динамической фолликулометрии.

Сравнение содержания CD4+CD25+CD127- клеток в эндометриальной ткани у женщин показало, что при бесплодии число Т-клеток достоверно ниже, чем у фертильных женщин (5,2±1,3 vs 12,7±1,5; p<0,05). Для определения диагностической значимости CD4+CD25+CD127- клеток, которые оцениваются в эндометриальной ткани, был проведен ROC анализ. Построение характеристических кривых (receiver-operator curve, ROC) выявило высокую информативность данного прогностического маркера. Площадь под кривой (AUG) теста относительного содержания CD4+CD25+CD127- Т-клеток в эндометриальной ткани составила 0,93 (p=0,0002). В этом случае относительное содержание CD4+CD25+CD127- клеток менее 7,5% позволяло диагностировать иммунологическое бесплодие со специфичностью 77% и чувствительностью 85%.

Пример №1. Пациентка М., 31 г. Соматические заболевания отсутствуют. Регулярный менструальный цикл, 28 дней. Беременность - 1. В 2007 г. - самопроизвольные роды живым доношенным плодом. Девочка, 3200 г, 51 см. В дальнейшем предохранение барьерным методом. На момент обследования (16.11.11 г.) по данным фолликулометрии - овуляторный цикл, забор крови на 19 день цикла, содержание CD4+CD25+CD127- клеток в эндометрии - 16%, в периферической крови - 11%.

Пример №2. Пациентка Г. Регулярный менструальный цикл, 31 день. Бесплодие в течение 4 лет. Кариотипирование супругов хромосомной патологии не выявило. HLA-типирование 3-х локусов (HLA-DR и HLA-DQA, B) сходства по антигенам гистосовместимости не выявило. На момент обращения гинекологических, эндокринных заболеваний не выявлено. 2008 г. - лапароскопия, без особенностей, маточные трубы проходимы. Уровень продукции репродуктивных гормонов в пределах нормы. Антитела к кардиолипину, антиовариальные антитела, антиспермальные антитела в пределах референсных значений. Антифосфолипидный синдром исключен. У мужа по данным спермограммы - нормозооспермия. На момент обследования (14.01.2012 г.) - овуляторный цикл по данным фолликулометрии, забор крови на 21 день цикла, содержание CD4+CD25+CD127- клеток в эндометрии - 3%, в периферической крови - 6%.

Пример №3. Пациентка К. Регулярный менструальный цикл, 32 дня. Бесплодие в течение 3 лет. Кариотипирование супругов хромосомной патологии не выявило. HLA-типирование 3-х локусов (HLA-DR и HLA-DQA, B) сходства по антигенам гистосовместимости не выявило. На момент обращения гинекологических, эндокринных заболеваний не выявлено. 2009 г. - гистеросальпингография, без особенностей, маточные трубы проходимы. Уровень продукции репродуктивных гормонов в пределах нормы. Антитела к кардиолипину, антитела к тиреоглобулину, тиреопероксидазе, антиспермальные антитела в пределах референсных значений. Антифосфолипидный синдром исключен. У мужа по данным спермограммы - нормозооспермия. На момент обследования (8.10.2012 г.) - овуляторный цикл по данным фолликулометрии, забор крови на 22 день цикла, содержание CD4+CD25+CD127- клеток в эндометрии - 3%, периферической крови - 5,3%.

Таким образом, исследования показали значимое возрастание CD4+CD25+CD127- клеток в эндометрии у фертильных женщин в периовуляторную фазу цикла и отсутствие таких изменений у женщин с бесплодием. Полученные данные позволяют рассматривать дефицит CD4+CD25+CD127- клеток в эндометрии как универсальный биомаркер, ассоциированный с бесплодием иммунного генеза, применимый для различных форм женского бесплодия, как первичного, так и вторичного. Высокая чувствительность и специфичность метода, а также его упрощенность в выполнении могут позволить ему найти применение в гинекологической практике для диагностики иммунологической формы бесплодия у пар с бесплодием неуточненного генеза.

Список литературы

1. Shetty S, Ghosh К. Anti-phospholipid antibodies and other immunological causes of recurrent foetal loss--a review of literature of various therapeutic protocols. Am J Reprod Immunol. - 2009. - Vol.62. - P.19-24.

2. Pandey M.K., Agrawal S. Induction of MLR-Bf and protection of fetal loss: a current double blind randomized trial of paternal lymphocyte immunization for women with recurrent spontaneous abortion. International Immunopharm. - 2004. - Vol.4. - P.289-298.

3. Mei S., Tan J., Chen H., Chen Y., Zhang J. Changes of CD4+CD25high regulatory T cells and FOXP3 expression in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertil.Steril.2010; 94(6):2244-7.

4. Yin Y., Han X., Shi Q., Zhao Y., He Y. Adoptive transfer of CD4+CD25+ regulatory T cells for prevention and treatment of spontaneous abortion. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2012; 161(2):177-81.

5. Winger E.E., Reed J.L. Foxp3+CD25+ low circulating CD4+T - regulatory cell levels predict miscarriage risk in newly pregnant women with a history of failure. Am. J. Reprod. Immunol. 2011;66(4):320-8.

6. WO 2009077158 (A1) - Use of FKBPL gene to identify a cause of infertility (патент).

7. WO 9955902 (A1) - Diagnostic markers of human female infertility (патент).

8. Шмагель К.В., Черешнев В.А. «Иммунитет беременной женщины». - М.: Медкнига, 2003, стр.225.

9. Патент РФ №.2396566. Способ оценки определения блокирующего эффекта аутологичной сыворотки женщины. Сухих Г.И., Ванько Л.В., Сидельникова В.М. и др. №2009116174/15; заявл. 29.04.2009; опубл. 10.08.2010.

10. Arruvito L., Sanz М., Banham А.Н., Fainboim L. Expansion of CD4+CD25+ and FOXP3+ regulatory T cells during the follicular phase of the menstrual cycle: implications for human reproduction. J. Immunol. 2007; 178:2572-8.

1. Способ диагностики иммунологической формы бесплодия, включающий оценку регуляторных Т-клеток методом проточной цитометрии, отличающийся тем, что у женщин с первичным и вторичным бесплодием неуточненного генеза оценивают относительное количество CD4+CD25+CD127- Т-клеток, которые определяют однократно в периимплантационном периоде в эндометриальной ткани, и при содержании этих клеток менее 7,5% диагностируют иммунологическое бесплодие.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что клетки для исследования получают добавлением к подготовленным определенным образом клеткам биоптата эндометриальной ткани коктейля моноклональных антител CD4CD25CD127, инкубированием и однократным отмыванием в растворе «А», содержащем 5% желатиноля, 0,1% азида натрия, 0,02% ЭДТА, 10% сыворотки доноров АВ (IY) группы в фосфат-забуференном физиологическом растворе - ЗФР.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что на момент обследования определяют овуляторный цикл с помощью динамической фолликулометрии.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть использовано при оценке риска возникновения побочных эффектов на фоне применения гормональной контрацепции - этинилэстрадиол+дроспиренон.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и отоларингологии, и касается способа прогнозирования затяжного течения острого ринофарингита при реактивации хронической цитомегаловирусной инфекции у женщин во втором триместре беременности.
Изобретение относится к медицине, а именно онкологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития и раннего выявления злокачественных новообразований.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования риска невынашивания беременности. Способ состоит в выделении ДНК из лейкоцитов периферической крови пациентки и проведении генотипирования.
Изобретение относится к медицине, в частности к гигиене труда, профпатологии и аллергологии. Определяют анамнестические данные, клинические признаки, стаж работы в условиях аллергоопасных производственных факторов, «симптом элиминации», наличие симптомов заболевания непосредственно в период работы и ухудшения состояния после возвращения во вредные условия, концентрацию общего IgE в сыворотке крови.

Данное изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложена гибридомная клеточная линия FP12H3-C2, депонированная под номером DSM ACC2750, продуцирующая антитело против бета-амилоида.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, репродуктологии, и может быть использовано для оптимизации программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) с учетом молекулярно-генетических характеристик гамет при селективном переносе эмбрионов (ПЭ).

Изобретение относится к биологи и медицине, а именно к иммуноанализу, в частности к электрохимическим способам определения содержания вирусов/антигенов вирусов кори.
Изобретение относится к области медицины, в частности к терапии, кардиологии, и касается способа прогнозирования риска развития критического стеноза в коронарных артериях у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС).

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и описывает способ определения функциональной активности фактора B комплемента человека по его действию на клетки-мишени в бескальциевой среде, содержащей ионы магния, в присутствии реагента RB, являющегося сывороткой крови человека, избирательно лишенной активности фактора B, причем в качестве клеток-мишеней выбраны инфузории Tetrahymena pyriformis, суспензию которых вместе с испытуемым образцом, содержащим определяемый фактор B, и реагентом RB вносят в измерительные ячейки прибора для автоматизированного подсчета числа живых инфузорий с последующим определением числа живых клеток в каждую минуту, при этом совпадение динамики изменения числа живых клеток во времени для испытуемого образца и контрольного, представляющего пул 10 сывороток здоровых доноров, предполагает равенство активностей фактора B комплемента в этих образцах.
Изобретение относится медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частоты развития инфекционных заболеваний у ребенка на первом году жизни. Для этого определяют иммунологические показатели в пуповинной крови и венозной крови на 4-5 сутки жизни. Рассчитывают коэффициент резистентности (Крез), рассчитываемый по формуле Крез=4,95258-0,0143955×(ФП)+0,0962295×(ФЧ)-0,00903362×(IgG)-0,257936×(IgA)-0,324514×(IgM)+0,430186×(CD45+CD3+)-1,66224×(CD45+CD4+CD3+)+l,49266×(CD45+CD8+CD3+)+0,815254×(CD4+CD8+)+0,522212×(HLA-DR+)-23,1991×(CD3+HLA-DR+)+0,974106×(CD3+CD25+)+0,832493×(CD3+CD4+CD25+)-3,52478×(CD16+CD56+CD3-)+7,67325×(CD16+CD56-CD3-)+11,082×(CD16+CD56+CD3+)+0,305366×(CD19+)+0,0691703×(CD5+)+0,0610707×(CD3+), где ФП - фагоцитарный показатель, ФЧ - фагоцитарное число, IgG, М, А - иммуноглобулины соответствующих классов, CD - маркеры дифференцировки лимфоцитов. При значении Крез, составляющем 1,78 и выше при вычислении по величинам показателей, полученных из пуповинной крови, и ниже, чем 5,72 при вычислении по величинам показателей, полученных из венозной крови на 4-5 сутки жизни, ожидается высокая степень резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни. Использование данного способа позволяет прогнозировать частоту развития инфекционных заболеваний у ребенка на первом году жизни и предпринять превентивные меры для снижения риска высокой заболеваемости. 2 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики высокодифференцированного рака у больных с узловыми формами заболеваний щитовидной железы. Для этого проводят тонкоигольную аспирационную биопсию узловых образований щитовидной железы под контролем ультразвукового исследования. При этом пункционную иглу с содержащимся в ней аспиратам промывают двукратно 1 мл изотонического раствора натрия хлорида, затем центрифугируют, отбирают супернатант и методом иммуноферментного анализа определяют тиреоглобулин. Причем если содержание тиреоглобулина меньше 272,5 нг/мл - предполагают отсутствие высокодифференцированного рака щитовидной железы, в интервале 272,5-355,5 нг/мл - риск высокодифференцированного рака щитовидной железы, выше 355,5 нг/мл предполагают высокодифференцированный рак щитовидной железы. Изобретение обеспечивает дооперационную дифференциальную диагностику высокодифференцированного рака у больных с узловыми формами заболеваний щитовидной железы, а также обеспечивает возможность дальнейшего выбора адекватного метода лечения. 3 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложены варианты гуманизированного анти-CD79b антитела, каждый из которых характеризуется наличием легкой и тяжелой цепи и набором 6 CDR с установленной аминокислотной последовательностью и по меньшей мере одним свободным цистеиновым аминокислотным остатком, выбранным из А118С (по Европейской нумерации) в тяжелой цепи и V205C (по нумерации Кэбат) в легкой цепи. Рассмотрены: варианты соединения-конъюгата антитела с лекарственным средством, где антитело связано с лекарственным средством через свободный цистеин; фармацевтический состав для лечения рака на основе антитела; способы детекции CD79b или раковых клеток, а также способ ингибирования клеточной пролиферации, использующие соединение-конъюгат. Описан способ получения соединения-конъюгата. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии раковых заболеваний, ассоциированных с CD79b, в том числе при лечении гемопоэтических опухолей у млекопитающих. 8 н. и 62 з.п. ф-лы, 20 табл., 9 пр., 51 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу дифференциальной диагностики генерализованной формы внутриутробной моно- и микст-цитомегаловирусной инфекции у новорожденных. Сущность способа состоит в том, что у новорожденных с генерализованной формой внутриутробной моно-цитомегаловирусной инфекции или микст-цитомегаловирусной инфекции в надосадочной части биологической жидкости носоглоточного аспирата определяют концентрацию серомукоида. При концентрации серомукоида 0,110-0,140 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию развития генерализованной формы внутриутробной моно-цитомегаловирусной инфекции. При концентрации серомукоида 0,141-0,171 единиц оптической плотности диагностируют раннюю стадию генерализованной формы внутриутробной микст-цитомегаловирусной инфекции, обусловленной сочетанием вируса цитомегалии и простого герпеса 1 типа. Использование заявленного способа позволяет эффективно осуществить дифференциальную диагностику генерализованной формы внутриутробной моно- и микст-цитомегаловирусной инфекции у новорожденных. 1 табл., 3 пр.

Изобретение касается способа диагностики ревматоидного артрита, способа определения лечебного эффекта терапевтического агента для лечения ревматоидного артрита и набора для осуществления способов. Способы характеризуются тем, что включают стадию измерения количества талина в плазме или сыворотке субъекта-животного. Это измерение проводят, например, иммунологическим способом с использованием антитела, связывающегося с талином. Если количество талина больше относительно его среднего значения у контрольного субъекта без ревматоидного артрита у субъекта диагностируют ревматоидный артрит. В случае снижения количества талина после введения терапевтического агента по сравнению с количеством талина до введения устанавливают лечебный эффект. Набор по настоящему изобретению содержит твердофазный носитель, к которому присоединено антитело, связывающееся с талином. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 пр., 3 ил.
Изобретение относится к области медицины, в частности к ревматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики ревматоидного артрита (РА) с остеоартрозом (OA). Для этого проводят забор синовиальной жидкости пациента и определение содержания хемокинов CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10 и CXCL11/ITAC в супернатанте. Диагноз ревматоидного артрита устанавливают, если содержание хотя бы одного из хемокинов превышает пороговое значение, причем пороговые значения для хемокинов составляют соответственно 2625,8 пг/мл для CXCL9/MIG, 3108,2 пг/мл для CXCL9/MIG и 32,4 пг/мл для CXCL11/ITAC. При значениях содержания ниже пороговых для трех хемокинов одновременно констатируют отсутствие ревматоидного артрита и возможное наличие остеоартроза. Использование данного способа позволяет дифференцировать ревматоидный артрит с остеоартрозом путем определения специфичных маркеров в синовиальной жидкости, полученной непосредственно в месте локализации процесса. 2 пр.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа диагностики нейродегенеративного заболевания у индивидуума, включающего стадии (i) определения одного или нескольких параметров, выбранных из группы, состоящей из 3ab40 или величины вычисленного параметра, выбранного из группы, состоящей из 2ab40+3ab40, 2ab40+3ab40+2ab42+3ab42 и 1ab40+2ab40+1ab42+2ab42; (ii) сравнения величины параметра с эталонной величиной, соответствующей величине указанного параметра в эталонном образце; и (iii) диагностики нейродегенеративного заболевания, в случае, если наблюдается увеличение величины параметра по сравнению с эталонной величиной. Группа изобретений также касается способа детектирования стадии, предшествующей нейродегенеративному заболеванию; способа дифференциации нейродегенеративного заболевания от стадии, предшествующей указанному нейродегенеративному заболеванию. Группа изобретений обеспечивает высокую чувствительность и специфичность способов детектирования. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 12 пр., 14 ил., 12 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования формирования окклюзионной постгеморрагической гидроцефалии у недоношенных детей с экстремально низкой массой тела при рождении. Недоношенному ребенку на основании иммуноферментного исследования сыворотки пуповинной и периферической крови определяют концентрацию нейронспецифической енолазы (NSE), концентрацию мозгового нейротрофического фактора (BDNF), концентрацию васкулоэндотелиального фактора (VEGF) в пуповинной крови и концентрацию васкулоэндотелиального фактора (VEGF) в периферической крови на 7-е сутки жизни, вычисляют прогностический индекс (PI) по формуле: PI=-0,007×X1+0,006×X2-0,05×Х3+0,0004×Х4-3,9, где X1 - содержание VEGF в пуповинной крови при рождении (нг/мл); Х2 - содержание VEGF в периферической крови на 7 сутки жизни (нг/мл); Х3 - содержание NSE в пуповинной крови (мкг/л); Х4 - содержание BDNF в пуповинной крови (нг/мл); Const=-3,9. При PI более 0 делают заключение об отсутствии риска формирования окклюзионной постгеморрагической гидроцефалии, а при PI менее 0 прогнозируют высокий риск развития данной патологии. Изобретение позволяет повысить эффективность прогноза формирования окклюзионной постгеморрагической гидроцефалии у недоношенных детей с экстремально низкой массой тела при рождении до 73%. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно, к офтальмологии и предназначено для лечения фармакологической формы синдрома «сухого глаза» (Ф-ССГ). Для лечения Ф-ССГ выявляют анамнез, определяют снижение относительно нормы объема слезопродукции и повышение показателя ксероза глазной поверхности. Переводят пациента на бесконсервантные антиглаукомные гипотензивные препараты. Назначают бесконсервантные слезозаместители. Проводят мультицитокиновое исследование слезной жидкости. При условии увеличения концентраций провоспалительных - интерлейкин-6, интерлейкин-8, интерлейкин-12, Th-1 - интерлейкин-2, интерферон-гамма, и Th-2 - интерлейкин-4, цитокинов не менее чем на 30% относительно возрастной нормы пациента, выявляют хроническое иммунное воспаление глазной поверхности. Проводят транспальпебральный фонофорез с Блефарогелем-1 и фонофорез с 1% гидрокортизоновой мазью на субмастоидальную область с обеих сторон, ежедневно курсом по 8-10 процедур. Использование способа обеспечивает оптимальные условия для диагностики и обоснованной дифференцированной терапии Ф-ССГ, что дает возможность своевременно назначить патогенетически обоснованную терапию и повысить эффективность лечебного воздействия. 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к иммунологии и представляет собой способ определения нейтрализующей активности антител к иммуноглобулину Е, который заключается в связывании исследуемых антител с IgE человека в растворе с последующим инкубированием данного раствора с периферической кровью человека, индукцией дегрануляции клеток и последующим определением доли клеток с высоким уровнем экспрессии поверхностного маркера CD63 (CD63high) в популяции базофилов с фенотипом CD123+HLA-DR-. Изобретение позволяет существенно сократить сроки анализа и снизить его трудоемкость. 2 ил., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктивной иммунологии и гинекологии, и может быть использовано для диагностики иммунологической формы бесплодия у пар с бесплодием неуточненного генеза. Для этого у женщин с первичным и вторичным бесплодием неуточненного генеза оценивают относительное количество CD4+CD25+CD127- Т-клеток, которые определяют однократно в периимплантационном периоде в эндометриальной ткани. При содержании этих клеток менее 7,5 диагностируют иммунологическое бесплодие. Использование данного способа позволяет рассматривать дефицит CD4+CD25+CD127- Т-клеток как маркер иммунологической формы бесплодия как у женщин с привычным невынашиванием, так и с первичным бесплодием. 2 з.п. ф-лы, 3 пр.

Наверх