Способ качественной и количественной морфологической диагностики наличия патологического влияния железодекстрана на состояние печени поросят


 


Владельцы патента RU 2555773:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ) (RU)

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для диагностики наличия патологического влияния железодекстрана на печень поросят. Сущность способа заключается в проведении морфологического системного пошагового анализа гистологических срезов печени с описанием ее гистологической структуры, измерением среднего количества двуядерных гепатоцитов, апоптозных телец и клеток мононуклеарно-макрофагальной системы. При выявлении комплекса патогномоничных морфологических изменений, включающего наличие кровенаполнения синусных капилляров, отека пространства Диссе, набухания эндотелия сосудов, зернистой дистрофии гепатоцитов, увеличения среднего количества клеток мононуклеарно-макрофагальной системы, в том числе гемосидерофагов, в 2 раза и более, а также увеличения количества двуядерных гепатоцитов и апоптозных телец в 2 раза и более, считают влияние железодекстрана на состояние печени поросят патологическим. Изобретение обеспечивает повышение точности посмертной диагностики наличия патологического влияния железодекстрана на печень поросят. 1 табл.

 

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к патоморфологической практике, и может быть использовано для морфологической диагностики побочных эффектов железодекстрановых препаратов.

В настоящее время для лечения и профилактики железодефицитной анемии применяются препараты железа для энтерального и парентерального (внутримышечного и внутривенного) введения [2, 5]. Профилактическое применение наиболее распространенных железодекстрановых препаратов осуществляется в основном путем внутримышечных инъекций. Вместе с тем известно, что железо, являясь металлом с переменной валентностью, в ряде биохимических реакций приводит к образованию активных форм кислорода, которые оказывают разрушающее действие на биологические структуры [1, 3].

Из уровня техники известен способ диагностики токсического поражения печени, заключающийся в ультразвуковом исследовании брюшной полости (Клиническое руководство по ультразвуковой диагностике. Под ред. В.В. Митькова. 1Т. М., ВИДАР, 1996 г., стр.39). Недостатками этого способа являются необходимость наличия соответствующего оборудования для ультразвуковой диагностики и условий для проведения исследования; сложность интерпретации полученных результатов; идентичность картины токсического поражения печени с другими хроническими заболеваниями печени.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ ранней диагностики токсических поражений печени, состоящий в исследовании сыворотки крови (заявка №2005112395 от 25.04.2005, опубл. 10.11.2006. Бюл. №31). Недостатками этого способа являются сложность осуществления способа; необходимость использования дорогостоящего оборудования и реактивов; диагностическая неточность в связи с изменениями вышеуказанных показателей и при других патологиях печени.

В предлагаемом нами способе диагностики используются наиболее объективные гистологические и морфометрические методы исследования, позволяющие наиболее точно определить характерные признаки влияния железодекстрана на печень.

Повышение точности диагностики заключается в выделении наиболее информативных морфологических критериев, имеющих определяющее значение при выявлении патологического влияния на печень поросят железодекстрана, применяемого для лечения и профилактики анемий. В заявленном способе учитывается влияние железа на интенсификацию процесса перекисного окисления липидов, приводящую к повреждению структур печени, а также реакцию клеток мононуклеарно-макрофагальной системы, сопровождаемую увеличением их количества.

Задачей изобретения является создание способа качественной и количественной морфологической диагностики наличия патологического влияния железодекстрана на состояние печени поросят.

Целью изобретения является создание объективной качественной и количественной морфологической диагностики наличия патологического влияния железодекстрана на состояние печени у поросят после применения его в качестве профилактического лекарственного средства для предотвращения развития алиментарной железодефицитной анемии.

Техническим результатом заявленного изобретения является повышение точности посмертной диагностики наличия патологического влияния железодекстрана на печень поросят.

Указанный технический результат достигается путем системного пошагового комплексного качественного и количественного морфологического анализа состояния печени при изучении морфологии органа по гистологическим срезам окрашенных гематоксилином и эозином, включающего изучение и описание гистологических структур, а также подсчет среднего количества клеток мононуклеарно-макрофагальной системы, в том числе гемосидерофагов, двуядерных гепатоцитов (BH - binuclear hepatocytes) и апоптозных телец (AB - apoptotic bodies).

Для изучения наличия патологического влияния железодекстрана на печень поросят были проведены исследования на клинически здоровых поросятах крупной белой породы, обоего пола в период от рождения до достижения ими 14-дневного возраста. Животные для проведения экспериментов подбирались в группы по принципу аналогов с учетом пола, возраста, породы и массы тела. На всем протяжении опыта животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания. В соответствии с задачами проводимого исследования животные были разделены на контрольную и опытную группы. Опытной группе животных однократно на 4 день жизни внутримышечно вводили железодекстран в дозе 2 мл на поросенка.

Убой животных проводили по достижении поросятами 14-дневного возраста. Материалом для гистологических исследований служили образцы печени, из которых изготавливали гистологические срезы по общепринятым методикам с последующим их окрашиванием для обзорных целей гематоксилином и эозином.

Далее проводится морфологический системный последовательный анализ гистологических срезов печени с описанием гистологической структуры печени, а также измерением среднего количества двуядерных гепатоцитов, апоптозных телец и клеток мононуклеарно-макрофагальной системы.

Измерения проводятся с помощью светового микроскопа в 30 последовательных полях зрения при общем увеличении 100х. Для удобства подсчета количества клеток необходимо воспользоваться окулярной стереометрической сеткой, вмонтированной в окуляр микроскопа. А все полученные цифровые данные обработать методами математической статистики, принятой в биологии и медицине с определением вероятности различия между двумя средними по таблице Стьюдента.

Результаты морфологических исследований показывают, что в печени альтеративные процессы после введения железодекстрана, прежде всего, характеризуются повреждением эндотелия крупных и мелких сосудов, что проявляется набуханием эндотелиальных клеток и расширением межклеточных щелей. В результате повреждения сосудов происходит нарушение их проницаемости, из-за чего в органах наблюдается незначительное увеличение межклеточной жидкости в периваскулярной ткани (пространство Диссе), которое не сопровождается выходом тяжелых фракций белков и форменных элементов крови из просвета сосудов. В меньшей степени альтеративные процессы затрагивают гепатоциты, в которых развивается зернистая дистрофия.

Наблюдается (табл.1) увеличение среднего количества двуядерных гепатоцитов в два и более раза (BH×2), свидетельствующее об усилении компенсаторных процессов, протекающих в печени. Одновременно в два и более раза достоверно увеличивается и среднее количество апоптозных телец (AB×2), инициированных перекисным повреждением клеток [4]. Также происходит усиление функции мононуклеарно-макрофагальной системы органа, что проявляется возрастанием в два и более раза средней численности гемосидерофагов (KC×2) и изменением их морфологии в виде набухания и увеличения количества цитоплазматических отростков. При этом в цитоплазме гемосидерофагов выявляются многочисленные зерна гемосидерина.

Таблица 1
Морфометрические показатели печени поросят контрольной и опытной групп
Морфометрический показатель Группа
контрольная опытная
1 2 3
Среднее количество:
двуядерных гепатоцитов 2,3±1,0 5,0±1,0*
апоптозных телец 0,7±0,8 1,5±1,1*
гемосидерофагов 9,3±3,4 25,4±6,3*
Примечание: * p≤0,01.

Таким образом, точность диагностики патологического влияния железодекстрана на орган определяется по совокупности патоморфологических признаков, включающих наличие кровенаполнения синусных капилляров, отека пространства Диссе, набухания эндотелия сосудов, увеличения среднего количества клеток мононуклеарно-макрофагальной системы, в том числе гемосидерофагов (KC×2), а также увеличения количества двуядерных гепатоцитов (BH×2) и апоптозных телец (AB×2).

Эти сведения имеют значение при комплексной оценке новых и уже известных лекарственных средств на основе железодекстрана, предназначенных для лечения и профилактики железодефицитной анемии поросят.

Литература:

1. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский Образовательный Журнал. 2000. Т 6, №12. - С.13-19.

2. Гуревичев П.А., Дельцов А.А., Уразаев Д.Н. Железодекстрановые препараты в ветеринарии. // Материалы первого съезда ветеринарных фармакологов России. - Материалы съезда. - Воронеж, 2007. - 699 с.

3. Зенков Н.К. Окислительный стресс. Биохимические и патофизиологические аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Лапкин, Е.Б. Меньщикова. - М.: Наука / Интерпериодика, 2001. - 343 с.

4. Лю Б.Н. Кислородно-перекисная концепция апоптоза и возможные варианты его механизма // Успехи соврем. биол. 2001. 121 (5). 488-501.

5. Уразаев Д.Н., Дельцов А.А., Парасюк Л.П., Уразаева Р.Д. Биологическая роль железа. Применение железосодержащих препаратов в ветеринарной медицине: монография. - М.: Колос, 2010. - 104 с.

Способ качественной и количественной морфологической диагностики патологического влияния железодекстрана на состояние печени поросят после его введения поросятам, заключающийся в проведении морфологического системного последовательного анализа гистологических срезов печени с описанием гистологической структуры печени, а также измерением среднего количества двуядерных гепатоцитов, апоптозных телец и клеток мононуклеарно-макрофагальной системы с помощью светового микроскопа в 30 последовательных полях зрения при общем увеличении 100х, и при выявлении комплекса патогномоничных морфологических изменений, включающего наличие кровенаполнения синусных капилляров, отека пространства Диссе, набухания эндотелия сосудов, зернистой дистрофии гепатоцитов, увеличения среднего количества клеток мононуклеарно-макрофагальной системы, в том числе гемосидерофагов, в 2 раза и более (KC×2), а также увеличения количества двуядерных гепатоцитов (BH×2) и апоптозных телец в 2 раза и более (AB×2), считают влияние железодекстрана на состояние печени поросят патологическим.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования тимомегалии в трехмесячном возрасте у доношенных новорожденных с внутриутробным гриппом В, осложненным плацентитом.

Изобретение относится к областям животноводства, экологии и ветеринарии, предлагается для использования в качестве прижизненного неинвазивного теста оценки степени содержания меди в мышечной ткани рыб.
Изобретение относится к медицине, в именно к гематологии, и может быть использовано для морфометрической оценки прогноза течения апластической анемии после спленэктомии.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и касается выбора тактики лечения пациентов с олигоменореей и ожирением. Для этого у девочек-подростков с установленным диагнозом «олигоменорея» и «ожирение» утром натощак определяют концентрацию адипонектина и лептина в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа.

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки контроля рН желудочного содержимого у пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии. Проводят динамическую оценку рН желудочного содержимого с использованием назогастрального зонда, определяют суммарную рН желудочного содержимого и эффективность антисекреторных препаратов в течение суток, а при необходимости - более длительное время, с интервалом 3 ч.

Изобретение относится к портативному анализатору для исследования пробы биологической жидкости на предмет значимой с медицинской точки зрения составляющей и может быть использовано в медицине.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству. Изобретение представляет способ прогнозирования плацентарной недостаточности во 2 триместре беременности путем иммунно-ферментного исследования сыворотки крови беременных, отличающийся тем, что предварительно известным методом УЗИ определяют пол плода, затем в венозной крови беременных определяют уровни ангиогенных факторов и цитокинов и если установлено повышение уровня ИЛ-12 более 3,2 пг/мл, ЭФР более 310 пг/мл, снижение уровня ФРП менее 40,0 пг/мл у беременных, вынашивающих плоды мужского пола, и повышение ЭТ-1 более 0,42 пг/мл, ИЛ-1β более 17,6 пг/мл, ФНО-α более 6,5 пг/мл у беременных, вынашивающих плоды женского пола, то прогнозируют у данных беременных развитие плацентарной недостаточности.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования, и может быть использовано для дифференциальной диагностики простой и быстрорастущей миомы матки.

Изобретение относится к области медицины. Изобретение представляет способ оценки степени локальной холодовой травмы в раннем реактивном периоде, включающий выделение лимфоцитов периферической крови, оценку выраженности повреждения плазматической мембраны лимфоцитов в состоянии блеббинга с помощью фазово-контрастной микроскопии из расчета на 100 клеток, вычисление индекса блеббинга лимфоцитов - ИБЛ по формуле: , полученный показатель ИБЛ умножают на уровень аспартатаминотрансферазы - ACT, измеренный в ммоль/ч*л, и получают коэффициент степени отморожения - КСО, при значениях КСО с 3,96 до 7,7 усл.

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, в частности к биохимии, гигиене, стоматологии, медицинской экологии, может быть использовано для выявления степени адаптации к производственным условиям при взаимодействии с вредными и опасными факторами.

Изобретение относится к области спортивной медицины, а именно к методам лабораторной диагностики уровня физической нагрузки на организм спортсмена. Для этого определяют содержание кальция и белка в ротовой жидкости до и после физической нагрузки, а также через день после физической нагрузки. Критерием полноценного восстановления организма спортсмена-волейболиста считают восстановление содержания ионов кальция и белка в ротовой жидкости после физической нагрузки к первоначальным значениям, оценивая при этом временной интервал, необходимый для этого процесса. Изобретение позволяет проводить определение резервных возможностей организма и его адаптированности спортсменов-волейболистов к физической нагрузке. 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к иммунологии и представляет собой способ оценки состояния мукозального иммунитета слизистых открытых полостей при прогнозировании течения инфекционно-воспалительных процессов, отличающееся тем, что при установленном патогенетическом факторе проводят регистрацию степеней нарушения микробиоценоза конкретного биотопа с использованием комплекса методов оценки уровней факторов колонизационной резистентности, а именно нормальной микрофлоры, условно-патогенной микрофлоры, иммуноглобулинов - G, М, А, секреторного иммуноглобулина А и sc компонента; и в зависимости от степени нарушения микробиоценоза оценивают состояние мукозального иммунитета и прогнозируют благоприятный исход с эрадикацией возбудителя или хронизацию с персистированием возбудителя. Также изобретение относится к способу коррекции инфекционно-воспалительных процессов с подключением иммуномодулятора - Кипферон®. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования течения заболевания, а также расширение арсенала способов коррекции инфекционно-воспалительных процессов. 2 н.п. ф-лы, 3 пр., 6 табл., 1 ил.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования ответа на противовирусную терапию при хроническом гепатите C. На 12-й неделе лечения определяют уровень интерферона в плазмоцитоидных дендритных клетках крови. При его приросте у взрослых и детей в 20 раз и более по сравнению с исходным уровнем, определяемым перед началом терапии, или в 2,6×102 раз у взрослых, а у детей в 1,2×102 по сравнению с нормальными показателями прогнозируют стабильный положительный ответ на противовирусную терапию. Способ позволяет повысить точность прогнозирования для выбора оптимальной тактики лечения у каждого пациента. 4 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к неонатологии, и может быть использовано для раннего прогнозирования кистозной перивентрикулярной лейкомаляции (ПВЛ) у новорожденных с очень низкой (ОН) и экстремально низкой массой тела (ЭНМТ). Сущность способа: у новорожденных с ОН и ЭНМТ на 3-7 сутки жизни оценивают данные перинатального анамнеза, а именно наличие хориоамнионита и характер околоплодных вод, оценку новорожденного по шкале Апгар на 5-й минуте, отсутствие продленной ИВЛ, тяжесть респираторного дистресс-синдрома, наличие пневмонии, сепсиса, судорожного синдрома, анемии, лабораторных признаков системной воспалительной реакции, усредненные показатели углекислого газа, анионного бикарбоната и дефицита оснований в капиллярной крови, уровни интерлейкина-6 и рецепторного антагониста интерлейкина-1 в сыворотке венозной крови. При этом каждому показателю устанавливается прогностический коэффициент (ПК). После чего определяют сумму ПК и принимают решение о прогнозе в пользу кистозной ПВЛ, если сумма ПК не менее (+)9,5, и отсутствии прогноза развития кистозной ПВЛ, если сумма ПК равна или меньше (-)9,5. Изобретение обеспечивает раннее, в первые 7 суток жизни, прогнозирование кистозной перивентрикулярной лейкомаляции (ПВЛ) у наиболее подверженной данному осложнению категории пациентов - детей с ОН и ЭНМТ при рождении. 6 табл., 5 пр.

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для мониторинга состояния пациента. Способ предоставления сигнала предупреждения о меняющемся во времени физиологическом параметре включает мониторинг контролируемого параметра пациента, сравнение контролируемого параметра с начальным пороговым критерием, временное изменение начального порогового критерия на пороговый критерий ухудшенного состояния после проведения терапии, а затем, после определенного периода времени, на пороговый критерий после введения. Во время отведенного периода времени проводят сравнение контролируемого параметра с пороговым критерием ухудшенного состояния, а после отведенного периода времени - с пороговым критерием после введения. В ответ на нарушение контролируемым параметром одного или более из начального порогового критерия, порогового критерия ухудшенного состояния и порогового критерия после введения инициируют сигнал тревоги. Группа изобретений относится также к машиночитаемому носителю с программным обеспечением для осуществления способа и к системе предупреждения пользователя об изменении контролируемого параметра. Группа изобретений обеспечивает повышение точности и скорости оценки состояния пациента с учетом проводимой терапии. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 6 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска раннего развития микрососудистых осложнений у детей с сахарным диабетом 1 типа. Сущность способа состоит в том, что определяют длительность заболевания в годах, возраст больного в годах, содержание десквамированных эндотелиальных клеток, уровень холестерина липопротеидов высокой плотности, общего холестерина, триглицеридов, коэффициент атерогенности, уровень гликированного гемоглобина, среднесуточный уровень гликемии, проводят линейный регрессионный анализ и рассчитывают коэффициент риска раннего развития микрососудистых осложнений у детей с сахарным диабетом 1 типа (P) по формуле. При значении коэффициента ≥1 прогнозируют высокий риск развития микрососудистых осложнений заболевания в течение года, а при значении коэффициента < 1 прогнозируют низкий риск развития микрососудистых осложнений заболевания в течение года. Использование заявленного способа позволяет повысить точность прогнозирования микрососудистых осложнений у детей с сахарным диабетом 1 типа. 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и может быть использовано для дооперационного определения объема операции у больных диффузным токсическим зобом. Для этого у больных до операции натощак забирают 1 мл венозной крови при температуре в помещении 20-24°C в вакуумную систему (пробирку) без антикоагулянта. Доставляют в лабораторию для иммуноферментного анализа в течение 2-х часов в герметичном контейнере с температурой 2-8°C и определяют уровень антител к рецепторам ТТГ. При уровне антител больше или равно 1,5 Ед/л больному выполняют тиреоидэктомию, при уровне антител меньше 1,5 Ед/л больному выполняют субтотальную резекцию щитовидной железы по стандартным методикам. Изобретение позволяет снизить вероятность рецидива тиреотоксикоза у пациентов после субтотальной резекции щитовидной железы. 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно акушерству и может быть использовано для прогнозирования веса новорожденного у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России. Для этого у пациентки выделяют ДНК из периферической венозной крови и проводят анализ полиморфизмов генов VII фактора коагуляции 10976G/A FVII. У женщин, рожающих не в первый раз, вес тела новорожденного при рождении на сроке 37 и более недель беременности определяют по уравнению: y=6123,431-25,579x1+0,267x2+205,739x3, где y - прогнозируемый вес новорожденного, x1 - рост женщины в сантиметрах; x2 - вес ребенка в предыдущих родах в граммах, x3 - генетический вариант локуса 10976G/A FVII, при этом x3=1 для генотипа 10976 GG FVII, x3=2 для генотипов 10976 GA и 10976 AA FVII. У первородящих женщин вес тела новорожденного при рождении на сроке 37 и более недель беременности определяют по уравнению: y=6278,037-21,739x1+232,170x2, где x1 - рост женщины в сантиметрах; x2 - генетический вариант локуса 10976G/A FVII, при этом x2=1 для генотипа 10976 GG FVII, x2=2 для генотипов 10976 GA и 10976 AA FVII. Изобретение позволяет улучшить профилактику и лечение осложнений беременности. 2 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для использования при экспериментальных паразитологических исследованиях в лабораторных условиях. Способ включает отбор только живых, половозрелых самок Trichuris vulpis из толстой, слепой кишок спонтанно зараженных трихоцефалами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии диких или/и домашних хищных в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия (solutio Natrii chlorati isotonica) и экспозицией пробирок с самками Trichuris vulpis при t=37,5°C - 39°C в течение 5 часов в условиях термостата. Заявленный способ позволяет отобрать в большом количестве оплодотворенные яйца Т. vulpis, не загрязненные частицами непереваренного корма, частицами разрушенных тканей половых органов самок Т. vulpis и секундарной бактериальной микрофлорой. 2 пр.

Изобретение относится к высокочувствительному способу определения количества глицирризина, глицирретиновой кислоты и их фармакологически приемлемых солей, присутствующих в плазме крови человека. Высокочувствительный способ определения количества глицирризина, глицирретиновой кислоты и их фармакологически приемлемых солей характеризуется тем, что смесь плазмы крови человека с метанолом или раствором аммиачной воды с определенной концентрацией вводят в твердую фазу, обладающую обращенно-фазовой распределительной функцией и функцией анионного обмена, затем промывают твердую фазу очищающей жидкостью, представляющей собой однокомпонентную жидкость или жидкую смесь, по меньшей мере, двух компонентов, выбранных из группы, включающей воду, щелочь, спирт и ацетонитрил. Далее проводят элюирование из твердой фазы кислым спиртом, выбранным из муравьиной кислоты-метанола или муравьиной кислоты-этанола, после чего проводят стадию количественного определения глицирризина, глицирретиновой кислоты и их фармакологически приемлемых солей методом ЖХ-МС или ЖХ-МС/МС. Высокочувствительный способ позволяет обнаружить и количественно определить глицирризин, глицирретиновую кислоту и их фармакологически приемлемые соли в плазме крови человека. 4 ил., 17 табл., 7 пр.
Наверх