Способ биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов



Способ биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов
Способ биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов
Способ биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов
Способ биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов

 


Владельцы патента RU 2557535:

ВОЙСКОВАЯ ЧАСТЬ 41598 (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к токсикологии, и касается способа биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов и может быть использовано в чрезвычайных ситуациях (аварии на объектах по уничтожению химического оружия) для отождествления опасных для человека ядов. Заявляемый способ предусматривает определение ингибирующего влияния раствора высокотоксичного антихолинэстеразного яда на активность холинэстеразы, в качестве которой используют ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека, в присутствии и в отсутствие субстрата, в качестве которого используют ацетилтиохолинйодид. Ингибирующее влияние раствора высокотоксичного антихолинэстеразного яда на активность ацетилхолинэстеразы эритроцитов крови человека определяют сначала в присутствии субстрата, а затем в отсутствие его. Анализируемую пробу предварительно разводят в 10 или 100 раз для получения ингибирующего эффекта на ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека в присутствии и в отсутствие субстрата в пределах 25-75%. Затем рассчитывают величину защитного эффекта ацетилтиохолинйодида и сравнивают полученное расчетное значение с табличными значениями, определенными экспериментально заранее для каждого конкретного высокотоксичного антихолинэстеразного яда. При совпадении расчетных значений с табличными делают заключение о наличии в анализируемой пробе соответствующего высокотоксичного антихолинэстеразного яда. 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к токсикологии, касается способа биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов - О-изопропил-метил-фтор-фосфонат, О-пинаколил-метил-фтор-фосфонат, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфонат, O-изобутил-S-диэтил-аминоэтил, который может быть использован в чрезвычайных ситуациях (аварии на объектах по уничтожению химического оружия) для отождествления указанных опасных для человека ядов.

В настоящее время антихолинэстеразные яды находят широкое применение в медицине, сельском хозяйстве и других областях народного хозяйства. Некоторые из этих химических соединений относятся к первому классу опасности [1], представляют чрезвычайную угрозу жизни и здоровью людей при попадании в окружающую среду и подлежат уничтожению в рамках реализации «Конвенции о запрещении разработки, производства, накопления и применения химического оружия и о его уничтожении» от 13.01.1993 г. К числу таких соединений относятся О-изопропил-метил-фтор-фосфонат, О-пинаколил-метил-фтор-фосфонат, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфонат и O-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфонат Возможность идентификации этих опасных высокотоксичных ядов имеет важное практическое значение.

Одним из наиболее чувствительных методов обнаружения антихолинэстеразных ядов является биохимический метод, основанный на использовании холинэстераз. Классическая схема определения антихолинэстеразной активности, используемая в большинстве технических средств, предложена Олдриджем [2] и заключается в предварительном контакте фермента с антихолинэстеразным ядом и последующем измерении каталитической активности холинэстеразы. Его главным недостатком является относительно низкая специфичность. В известном смысле это парадоксально, поскольку принято считать, что чем выше чувствительность метода, тем больше и его специфичность [3, 4].

Дело в том, что высокая чувствительность в случае биохимического метода с использованием холинэстераз, достигающая величин 1·10-7 мг/мл (то есть 1·10-8 %), свидетельствует об очень высокой аналитической избирательности. Но даже в очень чистом растворителе с содержанием основного вещества не менее 99,9% на уровне концентраций 1·10-8 % в качестве примесей присутствует большое количество различных химических соединений [5]. Следовательно, специфичность взаимодействия, например, фермента ацетилхолинэстеразы с ингибиторами указанного фермента очень высока, если из этого набора различных соединений фермент реагирует именно с анализируемым веществом. Поэтому низкая специфичность биохимического метода объясняется не столько аналитическими возможностями используемого фермента, сколько тем, что эти возможности не используются в полной мере.

Аналитический сигнал, получаемый при реализации классического метода выявления антихолинэстеразных ядов и выражаемый в виде степени угнетения или величины остаточной каталитической активности (в % от значения исходной активности или абсолютных величинах активности), является функцией свободного, не связанного с ядом фермента и не несет практически никакой информации о химической природе анализируемого яда. Это объясняется тем, что одна и та же степень угнетения каталитической активности холинэстеразы может быть получена как при контакте фермента с каким-либо антихолинэстеразным пестицидом в концентрации 1·10-5 М или даже с неорганическими соединениями в концентрации 1·10-1 М, так и с высокотоксичными антихолинэстеразными ядами при концентрации 1·10-9 М.

Для увеличения специфичности биохимического метода анализа антихолинэстеразных ядов с использованием холинэстераз предложены его различные варианты, отличающиеся как использованием холинэстераз различного биологического происхождения, так и применением некоторых химических соединений (эффекторов), изменяющих сродство холинэстераз к антихолинэстеразному яду [6].

В качестве эффектора используют, например, хлорид бария. Так, был предложен способ идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов при их воздействии на бутирилхолинэстеразу на фоне присутствия хлорида бария и при его отсутствии [7]. Последующее определение отношения констант ингибирования, то есть выявление эффекта присутствия хлорида бария, позволяло судить о наличии в пробе отдельных высокотоксичных антихолинэстеразных ядов.

Известен способ идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов, предусматривающий использование в качестве тест-ферментов ацетилхолинзстеразу эритроцитов крови человека и пропионилхолинэстеразу зрительных ганглиев кальмара [8]. Сущность способа заключается в определении ингибирующего эффекта анализируемого раствора, подозрительного на содержание антихолинэстеразного яда, на две холинэстеразы различного биологического происхождения с последующим расчетом отношения констант ингибирования и сравнении полученного результата с табличными значениями, определенными заранее для всех актуальных высокотоксичных антихолинэстеразных ядов.

Существенным недостатком перечисленных способов-аналогов является то, что ни один из них не позволяет идентифицировать все рассматриваемые опасные антихолинэстеразные яды.

Известен способ идентификации антихолинэстеразных ядов, предусматривающий использование четырех холинэстераз различного биологического происхождения - ацетилхолинэстеразы эритроцитов крови человека, бутирилхолинэстеразы сыворотки крови лошади, ацетилхолинэстеразы тлей (злаковой и свекловичной) и холинэстеразы мух, позволяющий идентифицировать актуальные высокотоксичные антихолинэстеразные яды [9]. Данный способ биохимической идентификации антихолинэстеразных ядов наиболее близок по достигаемому техническому результату к заявляемому способу и принят в качестве способа-прототипа.

Недостатки способа-прототипа:

- относительно низкая чувствительность вследствие пониженного сродства ацетилхолинэстеразы тлей и холинэстеразы мух высокотоксичным антихолинэстеразным ядам;

- отсутствие коммерческой доступности ацетилхолинэстеразы тлей и холинэстеразы мух;

- сложность работы с ферментами насекомых.

Целью изобретения является разработка способа биохимической идентификации высоко-токсичных антихолинэстеразных ядов, подлежащих уничтожению в соответствии с Конвенцией, а именно О-изопропил-метил-фтор-фосфоната, О-пинаколил-метил-фтор-фосфоната, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, O-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, простого в проведении и эффективного при отождествлении указанных опасных для человека высокотоксичных антихолинэстеразных ядов.

Идентифицирующей характеристикой взаимодействия конкретного высокотоксичного антихолинэстеразного яда с холинэтеразой является бимолекулярная константа скорости взаимодействия ингибитора с ферментом, для расчета которой необходимо знать концентрацию яда. Однако при анализе проб, подозрительных на заражение высокотоксичными антихолинэстеразными ядами, концентрация веществ, в них содержащихся, не известна.

Известно, что бимолекулярная константа скорости реакции взаимодействия фермента с ингибитором в отсутствие (k2) и присутствии субстрата (k2S) рассчитывается по формуле [9]:

где: Аост - остаточная активность фермента после контакта с ингибитором, %;

t - время контакта с ингибитором, мин;

С - концентрация ингибитора, М/л.

При необходимости расчета соотношения k2/k2S (то есть определения защитного эффекта субстрата) при работе с одним и тем же исходным раствором сначала находят разведение пробы, при котором ингибирующий эффект на фермент в присутствии субстрата составляет 25-75%.

Затем после разведения пробы в 10 или 100 раз определяют ингибирующий эффект в отсутствие субстрата. В этой связи для расчета величины отношения констант k2/k2S, то есть для расчета величины защитного эффекта (Р) субстрата, необходимо учитывать только разведение, а знать концентрацию при этом не нужно. Величина отношения констант k2/k2S зависит от химической природы ингибитора и может быть использована для идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов.

В связи с изложенным, цель изобретения достигается путем расчета защитного эффекта субстрата ацетилтиохолинйодида на ингибирование ацетилхолинэстеразы эритроцитов крови человека растворами высокотоксичного антихолинэстеразного яда, различающимися по содержанию яда в 10 или 100 раз. Полученное расчетное значение величины защитного эффекта субстрата сравнивают с табличными значениями, полученными заранее для каждого конкретного антихолинэстеразного яда, и при совпадении расчетных значений с табличными делают заключение о том, какой именно яд содержится в пробе.

Пример 1. Порядок реализации заявляемого способа биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов, подлежащих уничтожению согласно Конвенции.

При реализации заявляемого способа к 1,0 мл водного раствора фермента ацетилхолинэстеразы эритроцитов крови человека добавляют 1,0 мл 0,1 М фосфатного буфера (pH 7,5), 0,5 мл водного раствора субстрата ацетилтиохолинйодида в концентрации 5,78 мг/мл, 0,5 мл воды и 1,0 мл анализируемого раствора, содержащего высокотоксичное антихолинэстеразное соединение, а именно О-изопропил-метил-фтор-фосфонат, О-пинаколил-метил-фтор-фосфонат, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфонат или О-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфонат. Инкубируют в течение 3 мин при температуре 37°C, а затем добавляют 0,5 мл воды и 0,5 мл водного раствора реактива Эллмана в концентрации 2·10-2 М и сразу измеряют оптическую плотность (D1) против раствора сравнения, отличающегося тем, что вместо 1,0 мл раствора фермента используют 1,0 мл воды. В контрольной пробе вместо анализируемого раствора используют воду. Затем анализируемую пробу разбавляют (в 10 или 100 раз в зависимости от свойств яда) и определяют величину ингибирующего эффекта в отсутствие субстрата. С этой целью к 1,0 мл водного раствора фермента добавляют 1,0 мл дистиллированной воды, 1,0 мл 0,1 М фосфатного буфера (pH 7,5) и 1,0 мл исследуемого раствора, разбавленного в 10 или 100 раз. Инкубируют в течение 3 мин при температуре 37°C, а затем добавляют 0,5 мл раствора Эллмана, 0,5 мл раствора субстрата и через 3 мин измеряют оптическую плотность.

Величину защитного эффекта (Р) рассчитывают по формуле:

где: A1ост и А2ост - остаточная активность фермента, определяемая при инкубации фермента с анализируемой пробой в отсутствие и в присутствии субстрата, соответственно, % от исходного значения;

t1 и t2 - время контакта фермента с ингибитором при определении A1ост и А2ост, соответственно, мин;

K1 и K2 - коэффициенты, учитывающие разбавление пробы при определении A1ост и А2ост, соответственно.

Степень угнетения фермента при определении остаточной активности в отсутствие и в присутствии субстрата должна быть в пределах 25-75%.

Величины Аост рассчитывают по формуле:

где: D - оптическая плотность контрольной пробы;

D1 - оптическая плотность опытной пробы.

Измерения оптической плотности контрольной и опытной проб проводят с использованием спектрофотометра при длине волны 412 нм.

Полученное расчетное значение величины защитного эффекта субстрата (Р) сравнивают с табличными значениями, определенными для O-изопропил-метил-фтор-фосфоната, О-пинаколил-метил-фтор-фосфоната, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, О-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, и при совпадении показаний делают заключение о наличии соответствующего ингибитора.

Пример 2. Идентификация высокотоксичных антихолинэстеразных ядов, подлежащих уничтожению в соответствии с Конвенцией, с использованием заявляемого способа.

В ходе эксперимента с использованием заявляемого способа проводили идентификацию опасных высокотоксичных антихолинэстеразных ядов, а именно О-изопропил-метил-фтор-фосфоната, О-пинаколил-метил-фтор-фосфоната, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, О-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, для чего заранее экспериментально установили значения величин защитного эффекта (Р) субстрата, приведенные в таблице.

При идентификации О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната предварительно находили разведение пробы, подозреваемой на содержание указанного высокотоксичного антихолинэстеразного яда, оказывающее ингибирующий эффект на ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека в присутствии и в отсутствие субстрата в пределах 25-75%. В ходе эксперимента получено значение 70% угнетения, то есть A1ост составляет 30%. Затем пробу необходимо было разбавить в 100 раз и получено значение эффекта угнетения в отсутствие субстрата, равное 45%, то есть А2ост составляет 55%. Время угнетения составило 3 мин.

Расчет величины защитного эффекта (Р) производили с использованием формулы (2):

Полученный результат, согласно данных таблицы, свидетельствует о присутствии в пробе высокотоксичного антихолинэстеразного яда - O-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната.

При идентификации О-изопропил-метил-фтор-фосфоната предварительно находили разведение пробы, подозреваемой на содержание данного высокотоксичного антихолинэстеразного яда, оказывающее ингибирующий эффект на ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека в присутствии и в отсутствие субстрата в пределах 25-75%. В ходе эксперимента получено значение 70% угнетения, то есть A1ост составляет 30%. Затем пробу необходимо было разбавить в 10 раз и получено значение эффекта угнетения в отсутствие субстрата, равное 40%, то есть А2ост составляет 60%. Время угнетения составило 3 мин.

Расчет величины защитного эффекта (Р) производили с использованием формулы (2):

Полученный результат, согласно данным таблицы, свидетельствует о присутствии в пробе высокотоксичного антихолинэстеразного яда - О-изопропил-метил-фтор-фосфоната.

Таким образом, экспериментально доказана возможность идентификации с использованием заявляемого способа опасных высокотоксичных фосфорорганических ядов, подлежащих уничтожению согласно Конвенции:

- О-изопропил-метил-фтор-фосфонат;

- О-пинаколил-метил-фтор-фосфонат;

- О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфонат;

- О-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфонат.

Заявляемое изобретение удовлетворяет критерию «новизна», так как впервые для идентификации опасных высокотоксичных антихолинэстеразных ядов предложено использовать способ, предусматривающий определение величины защитного эффекта ацетилтиохолинйодида на фермент ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека при взаимодействии ингибитора с ферментом.

Заявляемое изобретение удовлетворяет критерию «изобретательский уровень», так как в известных и доступных источниках информации, содержащих описания биохимических способов идентификации антихолинэстеразных соединении, нет сведений, указывающих на возможность и целесообразность определения для этой цели защитного эффекта субстрата (ацетилтиохолинйодида) на фермент (ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека).

Соответствие заявляемого изобретения критерию «пригодность для применения» подтверждается результатами приведенных примеров, показавшими, что предлагаемый способ при простоте его проведения и доступности используемых реактивов и оборудования позволяет идентифицировать широко известные антихолинэстеразные яды, представляющие при попадании в окружающую среду чрезвычайную угрозу жизни и здоровью людей. Заявляемый способ может найти применение в чрезвычайных ситуациях (аварии на объектах по уничтожению химического оружия) для отождествления опасных для человека ядов.

Способ биохимической идентификации высокотоксичных антихолинэстеразных ядов, а именно О-изопропил-метил-фтор-фосфоната, О-пинаколил-метил-фтор-фосфоната, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, О-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, посредством определения ингибирующего влияния раствора высокотоксичного антихолинэстеразного яда на активность холинэстеразы, отличающийся тем, что в качестве холинэстеразы используют ацетилхолинэстеразу эритроцитов крови человека и определяют ингибирующее влияние растворов высокотоксичного антихолинэстеразного яда, различающихся по содержанию яда в 10 или 100 раз, на активность ацетилхолинэстеразы эритроцитов крови человека сначала в присутствии субстрата, в качестве которого используют ацетилтиохолинйодид, а затем в отсутствие его, причем величину защитного эффекта ацетилтиохолинйодида Р рассчитывают по формуле:

где: A1ост и А2ост - остаточная активность фермента, определяемая при инкубации фермента с анализируемой пробой в отсутствие и в присутствии субстрата, соответственно, % от исходного значения;
t1 и t2 - время контакта фермента с ингибитором при определении A1ост и А2ост, соответственно, мин;
K1 и K2 - коэффициенты, учитывающие разбавление пробы при определении A1ост и А2ост, соответственно,
величины Аост рассчитывают по формуле:

где: D - оптическая плотность контрольной пробы;
D1 - оптическая плотность опытной пробы,
измерения оптической плотности контрольной и опытной проб проводят с использованием спектрофотометра при длине волны 412 нм, затем полученное расчетное значение величины защитного эффекта ацетилтиохолинйодида Р сравнивают с табличными значениями, определенными экспериментально заранее для О-изопропил-метил-фтор-фосфоната, О-пинаколил-метил-фтор-фосфоната, О-этил-S-диизопропил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, O-изобутил-S-диэтил-аминоэтил-метил-тио-фосфоната, и при совпадении показаний делают заключение о наличии соответствующего опасного высокотоксичного антихолинэстеразного яда.



 

Похожие патенты:
Способ относится к области медицины и может быть использовано для лабораторной диагностики угрозы прерывания беременности. Способ осуществляют путем биохимического исследования крови с дальнейшим определением диагностического индекса по формуле: D=X1×K1+X2×K2+X3×K3+X4×K4+const, где значения X соответствуют биохимическим параметрам: X1 - концентрация церулоплазмина, г/л; Х2 - концентрация креатинина, мкмоль/л; Х3 - концентрация общего белка, г/л; Х4 - концентрация альбумина, г/л; K1, K2, K3; K4 - коэффициенты: K1=10,4, K2=-0,04, K3=-0,10, K4=0,26, const=-6,84.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа диагностики нейродегенеративного заболевания у индивидуума, включающего стадии (i) определения одного или нескольких параметров, выбранных из группы, состоящей из 3ab40 или величины вычисленного параметра, выбранного из группы, состоящей из 2ab40+3ab40, 2ab40+3ab40+2ab42+3ab42 и 1ab40+2ab40+1ab42+2ab42; (ii) сравнения величины параметра с эталонной величиной, соответствующей величине указанного параметра в эталонном образце; и (iii) диагностики нейродегенеративного заболевания, в случае, если наблюдается увеличение величины параметра по сравнению с эталонной величиной.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования развития приобретенной близорукости у школьников. Сущность способа состоит в том, что измеряют концентрации гемоглобина крови у школьников 6-8 лет и определяют дефицит гемоглобина по разности между оптимальным значением концентрации гемоглобина для данного возраста и фактической концентрацией гемоглобина у ребенка.

Изобретение касается способа диагностики ревматоидного артрита, способа определения лечебного эффекта терапевтического агента для лечения ревматоидного артрита и набора для осуществления способов.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования вероятности снижения скорости клубочковой фильтрации (СКФ) через 3 месяца наблюдения после аортокоронарного шунтирования без искусственного кровообращения (АКШ без ИК).
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для ранней диагностики тромбоэмболии легочной артерии. Способ ранней диагностики тромбоэмболии легочной артерии заключается в том, что при наличии у пациента клинических признаков, указывающих на вероятность ТЭЛА, определяют уровень D-димера фибрина в сыворотке крови; при содержании D-димера фибрина менее 0,5 мг/л подозрение на ТЭЛА отвергают, а при содержании D-димера фибрина в сыворотке крови 0,5 мг/л и выше дополнительно определяют с помощью иммуноферментного анализа уровень интерлейкина-8 в сыворотке крови, и при его концентрации 21,3 пг/мл и выше диагностируют тромбоэмболию легочной артерии.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению олигопептидных соединений, содержащих мотив, взаимодействующий с ядерным антигеном пролиферирующих клеток (PCNA), и может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения наличия ботулинического нейротоксина типа А (BoNT/A). На парамагнитных частицах, несущих иммобилизованный белок G бактерий семейства Streptococcus, с блокированными раствором Денхардт-ДНК адсорбируют белок BoNT/A при помощи специфических высокоаффинных поликлональных антител.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования развития тяжелого сепсиса. Сущность способа состоит в том, что в 1-е сутки после острого отравления веществами наркотического действия определяют содержание в сыворотке крови прокальцитонина, интерлейкина-6 и интерлейкина-8.

Изобретение относится к области молекулярной генетики, геносистематики и фармакогнозии и предназначено для выявления видовой принадлежности вереска обыкновенного (Calluna vulgaris (L.) Hull.).
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики окклюзирующих поражений сосудов у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями. У пациента определяют возраст, уровень общего гомоцистеина в крови, наличие мутаций полиморфизма С677Т в гене метилентетрагидрофолат редуктазы, Лейденовской мутации G1691A в гене фактора V, мутаций полиморфизма 675 4G/5G в гене ингибитора активатора плазминогена I типа, затем рассчитывают значение дискриминантной функции по формуле. При значении D>0 диагностируют наличие окклюзирующих поражений сосудов, при D<0 - отсутствие. Изобретение обеспечивает эффективный способ диагностики окклюзирующих поражений сосудов у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями. 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике бесплодия женщин. Для этого проводят определение цитотоксичности сыворотки женщин к мужским лимфоцитам, включая их совместное культивирование с контрольной мужской и исследуемой женской сывороткой в лунках 96-луночного планшета в присутствии питательной среды RPMI 1640 в СО2-инкубаторе. Через сутки в камере Горяева подсчитывают количество лимфоцитов в лунке с мужской сывороткой (контроль) и женской (опыт). Далее определяют цитотоксический индекс (ЦИ), который представляет собой частное от деления количества клеток в опыте на количество клеток в контроле. Нормальный показатель ЦИ составляет примерно 0,7 и ниже. Изобретение позволяет проводить исследование реакции гуморальных фактором иммунной системы женского организма на мужские антигены и оценить степень риска невынашивания беременности, ранних выкидышей и неразвивающейся беременности. 1 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики биполярного аффективного расстройства. Сущность способа состоит в том, что выявляют достоверные различия в спектре распределения белков сыворотки крови без белков альбумина, иммуноглобулина G, иммуноглобулина А, антитрипсина, трансферина и гаплоглобина у больных эндогенным психозом. При выявлении у больного эндогенным психозом на электрофоретическом геле белковых пятен в областях с молекулярной массой 200, 84, 75, 49, 40 кДа, диагностируют биполярное аффективное расстройство. Использование заявленного способа позволяет увеличить точность постановки диагноза, и при этом он прост в осуществлении. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения риска развития рака тела матки у женщин с гиперпластическими процессами эндометрия. Осуществляют выделение ДНК из периферической венозной крови, проводят генотипирование гена APOE, выявляют полиморфные аллели APOE*2, APOE*3, APOE*4 и при наличии генотипов, содержащих аллели APOE*2 прогнозируют высокий риск рака эндометрия. Изобретение обеспечивает высокоспецифичный критерий для оценки прогноза риска развития гиперпролиферативных заболеваний эндометрия, в том числе эндометриоидной аденокарциномы у женщин с гиперпластическими процессами эндометрия. 2 ил., 10 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области медицины. Предложен способ прогнозирования остеопенического синдрома в послеродовом периоде, включающий исследование генетического полиморфизма Fok-I гена VDR и прогнозирование остеопенического синдрома при выявлении генотипов Ff или ff. При выявлении генотипа FF полиморфизма Fok-I гена VDR дополнительно исследуют полиморфизмы ApaI, BsmI и TaqI гена VDR. При выявлении по меньшей мере, одного из генотипов AA, Aa ApaI, BB, Bb BsmI и Tt, tt TaqI VDR прогнозируют развитие остеопенического синдрома в послеродовом периоде. Предлагаемый способ позволяет прогнозировать развитие остеопенического синдрома в послеродовом периоде еще до наступления беременности или на любом сроке беременности. 10 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и предназначено для прогнозирования эффективности антиэстрогенной терапии тамоксифеном. У пациенток с люминальным типом рака молочной железы проводят иммуногистохимическое исследование ткани опухоли, определяют характер распределения экспрессии рецепторов эстрогенов альфа в ткани опухоли. Оценивают наличие полиморфизма rs2228480 G/A в 8 экзоне гена рецепторов эстрогенов альфа (ERα) методом ПЦР в реальном времени. Оценивают состояние регионарных лимфатических узлов. Степень злокачественности опухоли, эффективность антиэстрогенной терапии тамоксифеном рассчитывают по формуле. При Р>0,5 прогнозируют высокую эффективность антиэстрогенной терапии тамоксифеном. При Р<0,5 прогнозируют низкую эффективность проводимой терапии с большой вероятностью прогрессирования. Изобретение позволяет с высокой долей вероятности прогнозировать эффективность лечения и тем самым индивидуализировать подход к выбору вида эндокринотерапии у пациенток с люминальным типом рака молочной железы. 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для детекции гриба Microsporum canis. Осуществляют выделение тотальной нативной ДНК из образца кожи и волос, проводят полимеразную цепную реакцию и амплификацию фрагмента гена 5.8S рРНК Microsporum canis с использованием специфических праймеров. При электрофоретическом обнаружении продукта амплификации размером 182 п.н. определяют наличие возбудителя. Изобретение обеспечивает специфическую детекцию Microsporum canis в клиническом материале и может быть использовано для диагностики микроспории. 2 пр.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к набору для детекции спор, происходящих из микобактерий в образце. Набор содержит антитело, которое специфически связывает относящийся к спорам пептид из микобактерий, где относящийся к спорам пептид из микобактерий выбран из группы, состоящей из CotA, CotD, CotT, SpoVK, CotSA, YrbC, SpoVE, Soj, SpoIIIE и SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 22, 24 и 26, где указанное антитело получают иммунизацией человека или организма, не являющегося человеком, указанным относящимся к спорам пептидом. Набор дополнительно содержит молекулу, специфически связывающую комплекс между указанным антителом и указанным относящимся к спорам пептидом из микобактерий. Использование заявленного набора позволяет эффективно осуществить детекцию спор микобактерий в образцах из окружающей среды. 1 з.п. ф-лы, 7 табл., 10 ил., 1 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу выявления присутствия двух или более представляющих интерес белков с известными аминокислотными последовательностями в образце растительного происхождения (варианты) и способу сохранения генотипа сорта трансгенного растения. Способы включают расщепление всех белков из образца растительного происхождения специфичной по последовательности протеазой с получением пептидов. Разделяют пептиды в один прием в приборе для жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Ионизируют пептиды в приборе для ЖХ-МС. Проводят одновременное получение масс-спектральных данных для пептидов в приборе для ЖХ-МС. Сравнивают указанные одновременные масс-спектральные данные для пептидов с ожидаемыми масс-спектральными данными от представляющих интерес белков с известными аминокислотными последовательностями. Осуществляют определение присутствия или отсутствия представляющих интерес белков. Предложенное изобретение позволяет с высокой эффективностью выявления присутствия двух или более представляющих интерес белков растительного происхождения. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 10 ил., 3 табл., 7 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования рецептивности эндометрия в циклах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Сущность способа состоит в том, что определяют оптическую плотность экспрессии лейкемия ингибирующего фактора (LIF) в поверхностном и железистом эпителии эндометрия в период окна имплантации в цикле, предшествующем проведению экстракорпорального оплодотворения, и дополнительно определяют содержание сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) в цервикальной слизи в день трансвагинальной пункции фолликулов, систолодиастолическое отношение (S/D) и индекс резистентности (IR) спиральных артерий в день введения триггера овуляции, а затем рассчитывают значение регрессионной функции (Z) по формуле. При значении Z>0 прогнозируют, что эндометрий рецептивен, а при Z<0 - эндометрий не рецептивен. Использование заявленного способа позволяет прогнозировать рецептивность эндометрия и наступление беременности в результате цикла ЭКО с высокой степенью точности. 2 пр.
Наверх