Способ прогнозирования риска развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы у женщин

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Владельцы патента RU 2557954:

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития сочетания пролиферативных заболеваний репродуктивной системы у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России. Для этого выделяют ДНК из периферической венозной крови. Проводят анализ комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов цитокинов гена регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/А RANTES), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 A/T MIP 1β), фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), интерлейкин-1 (-511 C/T IL-1B), моноцитарного хемоаттарактанта протеина -1 (C/G MCP-1), интерлейкина-4 (-590 С/T IL-4). Прогнозируют повышенный риск развития сочетания миомы матки с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия при выявлении сочетания аллелей -403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4 или сочетания аллелей -403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B. Использование данного способа позволяет выявить группу больных с риском развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы, что позволяет назначить адекватную терапию для профилактики дальнейшего прогрессирования заболевания. 3 ил., 2 пр.

Способ прогнозирования риска развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы у женщин

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано в гинекологии для прогнозирования риска развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы, включающих сочетания миомы матки с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия.

Несмотря на многолетнюю историю изучения проблемы пролиферативных заболеваний и доброкачественных опухолей матки в последние десятилетия во всем мире отмечается рост частоты встречаемости миомы матки, эндометриоза и гиперпластических процессов эндометрия, причем многие авторы отмечают высокую частоту (до 85%) сочетания этих болезней. Об этом свидетельствуют схожий преморбидный фон, идентичные клинические проявления, а также некоторые клинико-патогенетические особенности миомы, эндометриоза и гиперпластических процессов эндометрия. При сочетании пролиферативных заболеваний нарушаются многие функции репродуктивной системы, являясь частой причиной как первичного, так и вторичного бесплодия, выраженного болевого синдрома, нарушения функции соседних органов, анемии как следствие кровотечения, осложнения беременности, родов и послеродового периода, что в совокупности приводит к временной, а нередко и длительной потери трудоспособности. Несмотря на значительное количество работ, посвященных изучению преморбидного фона, патогенеза, диагностике и лечению изолированных форм пролиферативных заболеваний матки, актуальным является изучение сочетания миомы матки с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия, так как многие вопросы остаются неуточненными, трактовка полученных результатов неоднозначной и тактика ведения больных противоречивой. До настоящего времени нет четких критериев, позволяющих прогнозировать повышенный риск развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы [Адамян Л.В. Эндометриозы. /Л.В Адамян., В.И. Кулаков., E.H. Андреева /Руководство для врачей. М.: Медицина. - 2006. - 416 с.].

Пролиферативные заболевания матки относятся к мультифакториальным заболеваниям, которые развиваются в результате комплексного действия генов, гормонов, факторов роста, цитокинов при воздействии неблагоприятных факторов окружающей среды [Аксенович, Т. И. Картирование генов, детерминирующих распространенные болезни человека /Т. И. Аксенович //Медицинская генетика. - 2006. - Т. 5, №2. - С. 11-15.]. В настоящее время во всем мире идет активное молекулярно-генетическое исследование пролиферативных заболеваний матки с использованием различных методов.

Цитокины являются посредниками межклеточных взаимодействий, регулируют кроветворение, иммунный ответ, клеточный цикл, участвуют во многих физиологических и патологических процессах. Цитокины редко, если вообще действуют в одиночку. Как правило, наблюдаемый конечный эффект является результатом комплексного действия цитокинов, иногда обладающих антагонистическими свойствами. В последние годы большое внимание уделяется роли цитокинов в патогенезе пролиферативных процессов матки. К цитокинам относят хемокины, интерлейкины, факторы некроза опухоли.

Нарушение продукции цитокинов, как их гипо- и гиперпродукция, а также нарушение процесса их рецепции способны приводить к различным заболеваниям. Развивающийся при заболеваниях цитокиновый дисбаланс, в свою очередь, способен выступать фактором, отягощающим их течение [Uterine cavity matrix metalloproteinases and cytokines in patients with leiomyoma, adenomyosis or endometrial polyp /Inagaki N., Ung L., Otani T., Ikeo T. //Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2003. Vol.111, №2. P. 197-203.].

Известен метод для диагностики и прогнозирования онкологических заболеваний, основанный на изучении соматических мутаций в гене многофункционального опухолевого супрессора (MTS) в случае неоплазий человека. Патент США №2164419, 27.03.2001. «Ген MTS, Мутации данного гена и способы диагностики злокачественных опухолей с использованием последовательности гена MTS» (Мириад Дженетикс, инк. (US) и др). Изобретение относится к мутациям гена MTS в зародышевой линии и использованию данных мутаций для диагностики предрасположенности к таким формам рака, как меланома, окулярная меланома, лейкоз, астроцитома, глиобластома, лимфома, глиома, лимфома Ходжкина, множественная миелома, саркома, миосаркома, хлоангиосаркома, чешуеклеточная карцинома, хронический лимфоидный лимфолейкоз, а также опухоли поджелудочной железы, яичников, матки, семенников, почек, желудка, ободочной и прямой кишки. Изобретение также имеет отношение к терапии тех неоплазий человека, при которых произошла мутация в гене MTS, включая генотерапию, заменяющую белковую терапию и использование миметиков. Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств диагностики и терапии опухолей.

Недостаток метода заключается в сложности анализа, его длительности и дороговизне.

За прототип выбран патент РФ №2466390 по заявке №2011105301/15, 20.08.2012, «Способ прогнозирования развития рака тела матки при патологических процессах эндометрия у женщин репродуктивного возраста» (Сидорова И.С. Унанян А.Л. (RU), Власов Р.С. (RU) и др.), где предложен способ прогнозирования развития рака тела матки, включающий определение клинических признаков и проведения метил-чувствительной полимеразной цепной реакции (МЧ-ПЦР) генов MLH1, RASSF1, GSTP1, р16, RAR-b, CDX1, и расчет коэффициента вероятности развития рака тела матки. При величине р больше 0,6 прогнозируют высокую вероятность развития рака тела матки, при р, равном 0,3-0,59, - умеренную вероятность развития рака, при р ниже 0,29 - низкую вероятность развития рака.

Недостаток прототипа заключается в том, что он повышает точность прогнозирования развития рака тела матки при уже имеющихся патологических процессах эндометрия у женщин репродуктивного возраста и не дает возможность спрогнозировать склонность пациенток к сочетанию пролиферативных заболеваний репродуктивной системы.

Задачей настоящего исследования является расширение арсенала способов диагностики, а именно создание способа прогнозирования пролиферативных заболеваний репродуктивной системы по сочетаниям генетических полиморфизмов: -403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4 и -403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B.

Технический результат использования изобретения - получение критериев оценки риска развития сочетания пролиферативных заболеваний репродуктивной системы у женщин русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья России.

В соответствии с поставленной задачей был разработан способ прогнозирования сочетания пролиферативных заболеваний репродуктивной системы, включающий:

- выделение ДНК из периферической венозной крови;

- типирование генетических полиморфизмов гена регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/А RANTES), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 A/T MIP 1β), фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), интерлейкин-1 (-511 C/T IL-1B), моноцитарного хемоаттарактанта протеина -1 (C/G MCP-1), интерлейкина-4 (-590 С/T IL-4);

- анализ сочетаний полиморфизмов гена регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 А RANTES), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 A MIP 1β), фактора стромальных клеток (-801 G SDF1), интерлейкин-1 (-511 C IL-1B), моноцитарного хемоаттарактанта протеина -1 (G MCP-1), интерлейкина-4 (-590 С IL-4);

- прогнозирование повышенного риска развития сочетания пролиферативных заболеваний репродуктивной системы таких как миома матки с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия в случае выявления сочетаний -403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4 или сочетаний -403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B.

Новизна и изобретательский уровень заключается в том, что из уровня техники не известна возможность прогноза развития пролиферативных заболеваний по наличию сочетаний аллеля -403 А гена регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (полиморфизм -403 А RANTES), аллеля+1931 A гена макрофагального воспалительного протеина -1β (полиморфизм+1931 A MIP 1β), аллеля -801 G гена фактора стромальных клеток (полиморфизм -801 G SDF1), аллеля -511 C гена интерлейкин-1 (полиморфизм -511 C IL-1B), аллеля G гена моноцитарного хемоаттарактанта протеина -1 (полиморфизм G MCP-1), аллеля 590 C гена интерлейкина-4 (полиморфизм С IL-4).

Изобретение характеризуется следующими графическими материалами:

Фиг. 1. Дискриминация аллелей по локусу -590 C/T IL-4, где - гомозиготы по аллелю -590С, - гомозиготы по аллелю -590 Т, - гетерозиготы -590 СТ, - отрицательный контроль.

Фиг.2. Дискриминация аллелей по локусу -801G/A SDF-1, где - гомозиготы по аллелю -801 A, - гомозиготы по аллелю -801 AG, - гетерозиготы -801 G, - отрицательный контроль.

Фиг. 3. Электрофоретическое разделение продуктов рестрикции гена IL-1 В -511, где 1, 9 - гомозиготы -511ТТ; 2, 3, 5, 7, 8- гетерозиготы -511СТ, 4, 6,- гомозиготы -511СС.

Способ осуществляют следующим образом

ДНК выделяют из образцов периферической венозной крови пациентки методом фенольно-хлороформной экстракции в 2 этапа. На первом этапе к 4 мл крови добавляют 25 мл лизирующего буфера, содержащего 320 мМ сахарозы, 1% тритон Х-100, 5 мМ MgCl₂, 10 мМ трис-HCl (pH=7,6). Полученную смесь перемешивают и центрифугируют при 4ºС, 4000 об/мин в течение 20 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют 4 мл раствора, содержащего 25 мМ ЭДТА (рН=8,0) и 75 мМ NaCl, ресуспензируют. Затем прибавляют 0,4 мл 10% SDS, 35 мкл протеиназы К (10 мг/мл) и инкубируют образец при 37ºС в течение 16 часов.

На втором этапе из полученного лизата последовательно проводят экстракцию ДНК равными объемами фенола, фенол-хлороформа (1:1) и хлороформа с центрифугированием при 4000 об/мин в течение 10 минут. После каждого центрифугирования производят отбор водной фазы. ДНК осаждают из раствора двумя объемами охлажденного 96% этанола. Сформированную ДНК растворяют в бидистиллированной, деионизованной воде и хранят при -200С.

Выделенную ДНК затем подвергают полимеразной цепной реакции с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров.

Молекулярно-генетический анализ проводят методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК на амплификаторах IQ5 (BioRad) и ТП4-ПЦР-01-«ТЕРЦИК».

На амплификаторе IQ5 (Bio-Rad) проводят анализ полиморфизмов генов +1931 А/Т MIP-1, C/G МСP-1, -801 G/A SDF-1, -403 G/A RANTES, -590 C/T IL-4 методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров и специфических зондов с последующим анализом полиморфизма методом дискриминации аллелей. Реакционная смесь объемом 25 мкл включает: 6,7 мМ трис-НСl (рН=8,8), 2,5 мМ MgCl₂, 0,1 мкг геномной ДНК, по 10 пМ каждого праймера, по 5 пкмоль каждого зонда, по 200 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы. После денатурации выполняют 40 циклов амплификации по схеме: отжиг праймеров и денатурация.

На амплификаторе ТП4-ПЦР-01-«ТЕРЦИК» проводят анализ полиморфизма гена -511 С/Т IL-1B методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров. Реакцию проводят в 12,5 мкл общего объема смеси, содержащей 33,5 мМ трис-НСl (рН=8,8), 1,25 мМ MgCl₂, 0,5 мкг геномной ДНК, по 5 пМ каждого праймера, по 100 мкМ dATP, dGTP, dCTP, dTTP и 1 единицу активной Taq-полимеразы. После денатурации выполняют 32 цикла амплификации по схеме: денатурация, отжиг праймеров и элонгация. Затем пробы выдерживают 5 мин при 72°С и охлаждают. Продукты амплификации анализируют в 2%-ном агарозном геле, окрашенным бромистым этидием, в течение 30 минут при 160V. В качестве электрофорезного буфера используют 1×TAE (трис-ацетатный буфер). Затем пробы идентифицируют в проходящем УФ-свете.

Генотипирование осуществляют методом дискриминации аллелей с использованием Tag Man зондов. При проведении ПЦР в амплификаторе с флюоресцентной детекцией (амплификатор IQ5) генотипирование осуществляют методом Tag Man зондов по данным величин ОЕФ (относительная единица флуоресценции) каждого зонда.

Две полосы, вертикальная и горизонтальная, делят график на четыре секции: одна для каждого гомозиготного состояния, одна для гетерозиготного состояния и секция без реакции. Присвоение генотипов неизвестным образцам определяется вычерчиванием ОЕФ для одного флуорофора на оси x относительно ОЕФ для другого флуорофора на оси y на диаграмме дискриминации аллелей.

• Если значения ОЕФ неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и правее вертикальной полосы, генотип гетерозиготен (GA).

• Если значения ОЕФ неизвестного образца находятся выше горизонтальной полосы и левее вертикальной полосы, генотип гомозиготен по аллелю 2 (RFU аллелю 2 отложены по оси y).

• Если значения ОЕФ неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и правее вертикальной, генотип гомозиготен по аллелю 1 (RFU аллеля 1 отложены по оси x).

• Если значения ОЕФ неизвестного образца находятся ниже горизонтальной полосы и левее вертикальной, определение генотипа невозможно (в данном случае неопределенный образец - отрицательный контроль)

Генотипирование ДНК-маркеров по локусу -511 С/T IL-1В производят методом анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ) продуктов ПЦР-амплификации специфических участков генома (фиг.3) с использованием соответствующих ферментов рестрикции производства фирмы «Сибэнзим» (Новосибирск).

После инкубации рестрикционной смеси в течение 16 часов при температуре 37°С проводят разделение фрагментов ДНК с помощью горизонтального электрофореза на электрофоретических ячейках производства фирмы «Хеликон» (Россия). В зависимости от размера разделяемых фрагментов ДНК используют агарозный гель 2-3% концентрации, приготовленный на основе ТВЕ-буфера, окрашенный раствором бромистого этидия (0,01%). Визуализацию фореграмм осуществляют в темном боксе с трансиллюминатором фирмы UVP (Швеция).

Проводят контроль качества генотипирования с использованием положительных контрольных образцов ДНК с разными генотипами и отрицательного контрольного образца, в котором вместо ДНК к реакционной смеси добавляют воду.

Формирование базы данных и статистические расчеты осуществляют с использованием программы «STATISTICA 6.0» [Endometrial hyperplasia: a review /Brun J.L., Descat E., Boubli В., Dallay D. //J. Gynecol. Obstet. Biol. Reprod. (Paris). Пер. с франц., 2006. Vol.35, №6. P. 542-550].

Изучение роли комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов цитокинов в формирование пролиферативных процессов матки проводят с помощью программного обеспечения APSampler [http:sources.redhat.com/cygwin/], использующего метод Монте-Карло марковских цепей и байесовсовскую непараметрическую статистику [Favorov A. V. A Gibbs sampler for identification of symmetrically structured, spaced DNA motifs with improved estimation of the signal length /A. V. Favorov, M. S. Gelfand, A. V. Gerasimova [et al.] //Вioinformatics. - 2005. - Vol.21, №10. - Р. 2240-2245].

Оценку уровня статистической значимости полученных результатов проводят с использованием поправки Бонферрони (р_cor), т.е. поправки, минимизирующей вероятность получения ложноположительных результатов [Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. https://sites.google.com/site/oyurebrova/book" \t "_blank /О.Ю. Реброва//М.: МедиаСфера. - 2006 г. - 312 с.].

Возможность использования предложенного способа для оценки риска развития пролиферативных заболеваний матки подтверждает анализ результатов наблюдений 713 больных с различными пролиферативными процессами репродуктивной системы, такими как миома матки, эндометриоз, гиперпластические процессы эндометрия. Среди 713 обследуемых у 78 женщин наблюдается сочетание миомы матки, эндометриоза, гиперпластических процессов эндометрия. Группа популяционного контроля составила 500 человек. Пациенты включались в соответствующую группу больных только после установления диагноза заболевания, подтвержденного с помощью клинических, лабораторно-инструментальных методов обследования и подтвержденного результата гистологического исследования.

В исследуемую группу включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Центрального Черноземья России и не имеющие родства между собой.

Установлено, что сочетание молекулярно-генетических маркеров -403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4 встречается у 28,07% пациенток, что в 3,5 раза чаще, чем в контрольной группе (8,08%, р=0,000007, p_cor=0,05, OR=4,43 95%CI 2,21 - 8,92). Также у больных с сочетанными пролиферативными заболеваниями репродуктивной системы (миома матки, эндометриоз, гиперпластические процессы эндометрия) встречается комбинация генетических вариантов -403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B (50,72%) в 2,1 раза чаще по сравнению с контролем (24,45%, р=0,000007, p_cor=0,05, OR=3,18, 95%CI 1,78 - 5,67).

Конкретные примеры.

Пример 1.

Пациентке М. русской национальности, уроженке Центрального Черноземья России, был проведен забор периферической венозной крови, выделение ДНК из периферической венозной крови; типирование генов+1931 А/Т MIP-1, C/G MCP-1, -801 G/A SDF-1, -403 G/A RANTES, -590 C/T IL-4 методом полимеразной цепной реакции.

Выявлено, что в связи с наличием сочетания аллелей-403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4, пациентку можно отнести в группу риска (OR=4,43).

Пример 2.

Пациентке К. русской национальности, уроженке Центрального Черноземья России, был проведен забор периферической венозной крови, выделение ДНК из периферической венозной крови; типирование генов -403 G/А RANTES,+1931 A/T MIP 1β, -801 G/A SDF1, -511 C/T IL-1B. Выявлено, что в связи с наличием сочетания аллелей-403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B, пациентку можно отнести в группу риска (OR=3,18).

Контроль качества генотипирования с использованием положительных контрольных образцов ДНК с разными генотипами и отрицательного контрольного образца, в котором вместо ДНК к реакционной смеси добавляют воду, показал практически полное совпадение результатов исследования (98,5%) и отсутствие контаминации отрицательного контрольного образца.

Таким образом, полученные данные подтверждают, что сочетания аллелей -403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4 или сочетания аллелей -403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B являются факторами риска развития миомы матки в сочетании с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия (OR=4,43 и OR=3,18, соответственно).

Применение данного способа позволит сформировать группу больных с повышенным риском развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы, эти знания помогут разобраться врачу в конкретной клинической ситуации, вовремя назначить адекватную терапию, что послужит профилактикой дальнейшего прогрессирования/рецидивирования заболевания и улучшит качество жизни пациента в целом.

Способ прогнозирования риска развития сочетанных пролиферативных заболеваний репродуктивной системы у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, включающий выделение ДНК из периферической венозной крови, отличающийся тем, что проводят анализ комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов цитокинов гена регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/А RANTES), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 A/T MIP 1β), фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), интерлейкин-1 (-511 C/T IL-1B), моноцитарного хемоаттарактанта протеина -1 (C/G MCP-1), интерлейкина-4 (-590 С/T IL-4) и прогнозируют повышенный риск развития сочетания миомы матки с эндометриозом и гиперпластическими процессами эндометрия при выявлении сочетания аллелей -403 А RANTES, G MCP-1,+1931 A MIP 1β, -590 C IL-4 или сочетания аллелей -403 А RANTES,+1931 A MIP 1β, -801 G SDF1, -511 C IL-1B.

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования уровня артериального давления у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России.

Способ повышения диагностической эффективности иммунохроматографических систем определения патогенов // 2557936

Изобретение относится к иммунологии и медицинской диагностике и представляет собой способ иммунохроматографического анализа. В основе способа лежит контакт мембранной тест-полоски с анализируемой жидкой пробой и инициируемое этим контактом движение по мембранам тест-полоски реагентов, которые содержатся в пробе или нанесены на мембрану и в ходе взаимодействий в порах мембраны или на ее поверхности формируют детектируемые иммунные комплексы.

Способ мониторинга фиброзного процесса в печени у больных хроническим гепатитом с // 2557926

Изобретение относится к области медицины, в частности гепатологии и инфекционным болезням, и может использоваться для определения стадии фиброзного процесса при мониторинге больных хроническим гепатитом C.

Способ прогнозирования спонтанного наступления беременности у женщин с i и ii стадией наружного генитального эндометриоза // 2557923

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования спонтанного наступления беременности у женщин с I и II стадией наружного генитального эндометриоза.

Способ прогноза успешности биоуправления параметрами вариабельности сердечного ритма с учетом уровня интерлейкина-6 в периферической крови // 2557536

Изобретение относится к медицине, в частности к области медицинской диагностики, и описывает способ прогноза эффективности биоуправления параметрами вариабельности сердечного ритма с учетом уровня интерлейкина-6 в периферической крови.

Диагностика и лечение злокачественных опухолей поджелудочной железы, яичников и других злокачественных опухолей // 2556129

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Описано антитело, которое специфически связывает денатурированный CD70.

Биомаркер для мониторинга пациентов // 2555340

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для определения еx-vivo эффективности лечения рака. Для этого после введения одной или более доз иммуногенной композиции субъекту измеряют уровень активированных Т-лимфоцитов (CD3+ CD69+) в организме.

Способ определения нейтрализующей активности антител к иммуноглобулину е // 2554820

Изобретение относится к иммунологии и представляет собой способ определения нейтрализующей активности антител к иммуноглобулину Е, который заключается в связывании исследуемых антител с IgE человека в растворе с последующим инкубированием данного раствора с периферической кровью человека, индукцией дегрануляции клеток и последующим определением доли клеток с высоким уровнем экспрессии поверхностного маркера CD63 (CD63high) в популяции базофилов с фенотипом CD123+HLA-DR-.

Способ диагностики и терапии фармакологической формы синдрома "сухого глаза" // 2554818

Изобретение относится к медицине, а именно, к офтальмологии и предназначено для лечения фармакологической формы синдрома «сухого глаза» (Ф-ССГ). Для лечения Ф-ССГ выявляют анамнез, определяют снижение относительно нормы объема слезопродукции и повышение показателя ксероза глазной поверхности.

Способ прогнозирования формирования окклюзионной постгеморрагической гидроцефалии у недоношенных детей с экстремально низкой массой тела при рождении // 2554781

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования формирования окклюзионной постгеморрагической гидроцефалии у недоношенных детей с экстремально низкой массой тела при рождении.

Способ определения целесообразности проведения иммунологического обследования у работников животноводческого комплекса // 2557956

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения целесообразности проведения иммунологического обследования у работников животноводства. Для этого выявляют хронические инфекционно-воспалительные заболевания (ХИВЗ). Выполняют общий анализ крови и бактериологическое исследование. Затем рассчитывают индекс аллергизации (ИА) и индекс иммунореактивности (ИИР), определяют общее количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха рабочей зоны с подсчетом общего микробного числа (ОМЧ). При значении ОМЧ менее 500 КОЕ/м3, отсутствии ХИВЗ, значении ИА менее 1,08 усл. ед., значении ИИР менее 13 усл. ед. считают нецелесообразным проведение иммунологического исследования. При значении ОМЧ 500-2500 КОЕ/м3, выявлении одного ХИВЗ, значении ИА 1,08-1,3 усл. ед., значении ИИР 13,1-15,7 усл. ед. считают целесообразным проведение иммунологического исследования тестами первого уровня. При значении ОМЧ более 2500 КОЕ/м3, наличии не менее двух ХИВЗ, значении ИА 1,4-1,5 усл. ед., значении ИИР 15,8-18,3 усл. ед. считают целесообразным проведение иммунологического исследования тестами второго уровня. Изобретение позволяет выявить работников, нуждающихся в дальнейшем обследовании с целью своевременной иммунокоррекции в условиях массовых периодических осмотров. 1 табл., 3 пр.

Способ прогнозирования риска формирования гиперпластических процессов эндометрия // 2557977

Изобретение относится к области медицины, а именно гинекологии, и может быть использовано для выявления риска развития гиперпластических процессов эндометрия у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья России. Выделяют ДНК из периферической венозной крови. Типируют методом полимеразной цепной реакции генетические полиморфизмы гена фактора некроза опухоли α (-308 G/А TNFα), рецептора фактора некроза опухоли 1 (+36 A/G TNFR1), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (А/G I-TAC), интерлейкина 1А (-889 С/Т IL-1A), лимфотаксина α (+250 А/G Ltα). Прогнозируют повышенный риск развития гиперпластических процессов эндометрия при выявлении сочетания аллелей -308 G TNFα, +36 A TNFR1, A I-TAC, -889 T IL-1A и/или сочетания аллелей+36 A TNFR1, A I-TAC, -889 T IL-1A и/или сочетания аллелей -308 G TNFα,+250 G Ltα, -889 T IL-1A. 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ определения иммуно-функционального резерва организма // 2557985

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения иммуно-функционального резерва организма. Для этого определяют лейкоцитарные показатели периферической крови до и после нагрузочной пробы, используя ступенчатую субмаксимальную физическую нагрузку. Проводят дифференцированное выделение различных типов лейкоцитов из крови с получением препарата, определяют уровень общих Т-клеток (То) и активных Т-клеток (Та), рассчитывают индекс То/Та, мононуклеарные клетки инкубируют с гранулоцитами, оценивают индекс гранулоцитосвязывающих лимфоцитов (ИГЛ) по соотношению гранулоциторозеткообразующих (ГРЛ - контактно связанных с тремя гранулоцитами) и гранулоцитоконтактных лимфоцитов (ГЦЛ - контактно связанных с одним гранулоцитом) в препарате, определяют лейкоцитарные индексы: лимфоцитарный индекс (ЛИ), индекс иммунореактивности (ИИР), индекс адаптации, (СПНР), определяют коэффициенты адаптации иммуно-функционального состояния (К) для каждого показателя. Находят суммарный показатель иммуно-функционального состояния организма СПИФСО по формуле СПИФСО=Кспнр+Кли+Киир+Кигл+Китл до нагрузки - СПИФСО1 и после нагрузки - СПИФСО2. Рассчитывают удельный коэффициент иммуно-функционального резерва УКИФ по формуле УКИФ=(СПИФСО1+СПИФСО2)/5 и определяют уровень иммуно-функционального резерва УКИФ. При значениях УКИФ выше +1,0 считают уровень иммуно-функционального резерва оптимальным, при значениях УКИФ от 0 до 1,0 - удовлетворительным, при значениях УКИФ ниже 0 - неудовлетворительным. Данный способ позволяет оценить функциональные резервы организма, используя совокупную характеристику, включающую адаптационный потенциал организма (СПНР, ЛИ), иммунореактивность (ИИР, ИТЛ) и взаимодействие иммунных клеток между собой - лимфоцитов и гранулоцитов. 1 пр.

Способы обнаружения контаминантов полимеров глюкозы // 2557995

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для обнаружения контаминантов полимеров глюкозы. Для этого проводят анализ воспалительного ответа in vitro с применением клеточной линии, которая представляет собой клеточную линию либо макрофагов, либо дифференцируемую в макрофаги, либо клетку, экспрессирующую один или несколько толл-подобных рецепторов (TLR) или NOD-подобных рецепторов, выбранных из TLR2, TLR4 и NOD2. Анализ содержит этапы: (a) размещение макрофагов в присутствии препарата полимеров глюкозы, которые могут содержать провоспалительные контаминанты, и измерение продуцирования цитокина RANTES, причем продуцирование цитокина RANTES указывает на то, что препарат содержит контаминанты, способные к инициации воспалительной реакции, и (b) размещение клеточной линии, которая позволяет обнаружить активность рецептора врожденного иммунитета или нескольких рецепторов врожденного иммунитета, выбранных из TLR2 и NOD2, в присутствии препарата и обнаружение сигнала репортерного гена, связанного с этим рецептором, причем обнаружение данной активности или данного сигнала указывает на присутствие в препарате контаминанта, который представляет собой агонист рецептора. Использование данного способа позволяет обнаружить контаминанты полимеров глюкозы, причем добавление компонентов, таких как MDP или LPS, в тестируемый образец позволяет действовать синергично с контаминантами, что повышает чувствительность и понижает порог обнаружения, при этом синергитический ответ отмечен для RANTES. 27 з.п. ф-лы, 5 пр., 23 ил., 5 табл.

Способ прогнозирования развития гиперплазии эндометрия у пациенток с миомой матки после проведения эмболизации маточных артерий // 2558052

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и касается способа прогнозирования развития гиперплазии эндометрия у пациенток с миомой матки после проведения эмболизации маточных артерий (ЭМА). Сущность способа: до ЭМА всем пациенткам проводят лечебно-диагностическое выскабливание, через 6 мес после ЭМА проводят пайпель-биопсию эндометрия с последующим патоморфологическим исследованием биоптата. При отсутствии патологии биоптаты подвергают иммуногистохимическому исследованию с использованием моноклональных антител к Ki-67, определяют процентное содержание маркера пролиферации Ki-67 в эпителии желез эндометрия - коэффициент А и в строме эндометрия - коэффициент В и вычисляют прогностический индекс Д1 - при исходной (до ЭМА) гиперплазии без атипии и Д2 - при исходном (до ЭМА) эндометрии, соответствующем фазе поздней пролиферации: Д1=А*0.05-0.74 и Д2=В*0,02-0,3. При Д1, более или равном 0, прогнозируют рецидив гиперплазии эндометрия, а при Д1 менее 0 делают заключение о низком риске рецидива гиперплазии эндометрия. При Д2 более 0 судят о низком риске развития гиперплазии эндометрия, а при Д2, менее или равном 0, прогнозируют развитие гиперплазии эндометрия. Предлагаемый способ позволяет с высокой точностью прогнозировать развитие гиперплазии эндометрия после ЭМА, что дает возможность своевременно назначить превентивную гормональную терапию. 4 пр.

Способ прогнозирования риска снижения уровня здоровья ребенка в возрасте 12-16 лет // 2558075

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска снижения уровня здоровья ребенка в возрасте 12-16 лет. Для этого через час после еды полость рта за 15 минут до забора ротовой жидкости промывается раствором натрия хлорида 0,9%. Проводится исследование ротовой жидкости ребенка с определением отношения концентрации иммуноглобулина А к концентрации иммуноглобулина G. Исследование проводится двукратно с разницей в 14 дней. В случае снижения отношения концентрации иммуноглобулина А к концентрации иммуноглобулина G при втором исследовании в 1,4 раза и более ребенка относят в группу риска снижения уровня здоровья. Использование данного способа позволяет проводить скрининг при проведении диспансеризации для планирования оздоровительных мероприятий в группах диспансерного наблюдения. 2 пр.

Способ отбора доноров для получения плазмы крови, эффективной при лечении пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов // 2558114

Изобретение относится к медицине, а именно к гемотрансфузиологии, и может быть использовано при отборе доноров, для получения плазмы крови. Для этого получают плазму крови, выявляют в ней антимикробные пептиды дефензины. При титре дефензинов у мужчин от 180 до 545 нг/мл и у женщин - от 128 до 386 нг/мл отбирают донора для получения плазмы крови. Изобретение позволяет использовать донорскую плазму при лечении пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов.

Способ прогнозирования устойчивого вирусологического ответа при противовирусной терапии хронического вирусного гепатита с на фоне вич-инфекции // 2558793

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может использоваться для прогнозирования устойчивого вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии у больных с гепатитом C на фоне ВИЧ-инфекции. Для этого у коинфицированных пациентов оценивается динамика иммунологических маркеров интерферона α (ИФНα), интерферона γ (ИФНγ) и интерлейкина 4 (ИЛ-4) и их мониторинг до начала терапии и через 4 недели после начала терапии. При этом стабильная ремиссия прогнозируется при начальных уровнях цитокинов более 3,99 пг/мл для ИФНα, от 8,32 до 13,1 пг/мл для ИФНγ, при значении коэффициента ИФНγ/ИЛ-4 более 6,72, а также при увеличении уровня ИФНα в 100 раз и более через 4 недели от начала терапии, уровне ИФНγ от 8,32 до 13,1 пг/мл и увеличении коэффициента ИФНγ/ИЛ-4 в процессе терапии более 6,72. Использование данного способа позволяет на начальном этапе лечения прогнозировать исход противовирусной терапии у ВИЧ-инфицированных пациентов. 2 пр., 4 табл., 3 ил.

Способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности во второй половине беременности у женщин с угрозой невынашивания ранних сроков инфекционного генеза // 2558795

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования плацентарной недостаточности у женщин I триместра с угрозой невынашивания беременности инфекционного генеза. Для этого с 6 недель гестации в сыворотке венозной крови беременных определяют содержание IL-18, и при его значении более 100 пг/мл прогнозируют развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности. Способ позволяет с высокой точностью прогнозировать развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности у женщин с угрозой невынашивания инфекционного генеза на ранних стадиях при его простоте, доступности и экономичности. 1 табл., 3 пр.

Способ лабораторной диагностики пневмонии // 2558843

Изобретение относится к области медицины, а именно к пульмонологии, и может быть использовано при лабораторной диагностике пневмонии. Способ лабораторной диагностики пневмонии заключается в том, что исследуют уровень сурфактантного белка А и/или сурфактантного белка D в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа (ИФА), и при значении уровня сурфактантного белка А более 49,56 ng/ml или уровня сурфактантного белка D более 234,39 ng/ml диагностируют пневмонию. Данный способ не травматичен и позволяет своевременно диагностировать пневмонию. 4 пр.