Способ отбора доноров для получения плазмы крови, эффективной при лечении пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов


 


Владельцы патента RU 2558114:

Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего профессионального образования Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к гемотрансфузиологии, и может быть использовано при отборе доноров, для получения плазмы крови. Для этого получают плазму крови, выявляют в ней антимикробные пептиды дефензины. При титре дефензинов у мужчин от 180 до 545 нг/мл и у женщин - от 128 до 386 нг/мл отбирают донора для получения плазмы крови. Изобретение позволяет использовать донорскую плазму при лечении пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к гемотрансфузиологии, и может быть использовано при отборе доноров, для получения плазмы крови, эффективной при лечении пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов.

Известен способ отбора доноров путем определения бактериальных антител в плазме их крови, широко используемый лабораторными отделениями станций (отделений) переливания крови, в соответствии с планом комплектования и предполагаемых лечебных мероприятий в учреждениях на следующие инфекции с лечебным значимым титром антител:

- антистафилоккоковые в титре 1:1280 и выше;

- антиколибацилярные в титре 1:160 и выше;

- антисинегнойные в титре 1:160 и выше;

- антипротейные в титре 1:160 и выше;

- антиклебсиеллезные в титре 1:160 и выше (А.В. Чечеткин и соавт., 2008 г. / Методические указания «Получение и клиническое применение иммунной плазмы в военно-медицинских учреждениях»).

В практике производственной трансфузиологии использовались два решения вопроса обеспечения иммунной плазмой. Это целенаправленная иммунизация доноров и скрининг антибактериальных антител у доноров, позволяющий выбрать образцы свежезамороженной плазмы с антителами с лечебным титром (титры указаны выше).

Основным показателем отбора образцов плазмы доноров является величина или значимый терапевтический титр антибактериальных антител (AT) для оказания трансфузиологической помощи. Процент обнаружения AT у кадровых доноров варьировал от 12 до 73% и зависел от пола, возраста, времени года и сезонных работ. Контроль активности плазмы доноров со стандартной иммунной сывороткой проводился 1 раз в 3-4 недели. Образцы плазмы в последующем подвергаются хранению. Если проводится заморозка в течение 6 часов после кроводачи, то данная плазма считается замороженной (А.В. Чечеткин и соавт., 2007 г. / Метод. указания - «Организация карантиризации свежезамороженной плазмы в военно-медицинских учреждениях»), а также может быть лиофилизирована в установленные сроки и храниться в сухом состоянии. Ее применение имеет значение в военно-полевых условиях, а также в отдаленных районах от крупных лечебных заведений.

С 2010 года, в связи с отсутствием тестирования на ранее указанные нами инфекции, побудило нас искать новый подход в обследовании доноров с целью определения естественных антибактериальных антител в плазме, крайне необходимых для оказания медицинской помощи и целевого применения донорской плазмы определенной категории больных.

Изыскание высокоэффективных средств терапии и профилактики различных инфекций для службы крови приобретает в настоящее время особую актуальность и неотложную задачу практического здравоохранения.

Применение полииммунной плазмы целесообразно при верифицированной внутригоспитальной инфекции (синегнойная палочка, стафилококк, стрептококк и др., гноеродная флора), ожоговой болезни, осложненной присоединившейся вторичной гнойной инфекцией, и в клинике внутренних болезней (тяжелое течение бактериальной пневмонии, септицемия и пр.).

Недостатками известных способов являются длительность и сложность выявления доноров, а также отсутствие правовой базы практической реализации в клинике указанных выше методов лечения.

Целью изобретения является повышение эффективности лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов за счет использвания плазмы крови доноров, содержащей антимикробные пептиды (дефензины), которые обладают микробоцидной, хемотаксической, иммуномодулирующей и цитотоксической активностью без проведения намеренной иммунизации доноров.

Цель достигается путем исследования иммунологических показателей крови, причем выявляют содержание антимикробных пептидов дефензинов в плазме и забор крови осуществляют у лиц, в плазме которых они содержатся при титре от 180 до 545 нг/мл - у мужчин, от 128 до 386 нг/мл - у женщин.

Способ реализуется следующим образом.

Проводят исследования иммунологических показателей крови доноров, выявляют содержание антимикробных пептидов дефензинов и забор крови для использования ее при лечении тяжелобольных осуществляют у лиц, в плазме которых они содержатся при титре от 180 до 545 нг/мл - у мужчин, от 128 до 386 нг/мл - у женщин.

Практический пример 1. Донор - И. (мужчина) титр антимикробных пептидов составил 550,6 нг/мл; плазма крови направлена в клинику военно-полевой хирургии для лечения тяжелораненого, доставленного из Дагестана

Практический пример 2. Донор - К. (мужчина) титр антимикробных пептидов составил 33,1 нг/мл; плазма крови направлена в клинику факультетской терапии.

Практический пример 3. Донор - Л. (женщина) титр антимикробных пептидов составил - 228,9 нг/мл; плазма крови направлена в клинику военно-полевой терапии для лечения больного с тяжелым отравлением.

Практический пример 4. Донор - И. (женщина) титр антимикробных пептидов составил 116,1 нг/мл; плазма крови направлена в клинику акушерства и гинекологии.

В настоящее время антимикробные пептиды представляют объект повышенного внимания широкого круга специалистов, в том числе рассматривающих такие соединения, как альтернативу антибиотическим средствам. Чтобы противостоять патогенным микроорганизмам, ученые разрабатывают все новые и новые виды антибиотиков, которые по сути являются производными старых. Антимикробные пептиды уступают антибиотикам по эффективности, но действуют быстрее, разрушая бактерии, невосприимчивые к антибиотикам (Garsia A,E, Osapau G, Tran PA, Yuan J, Selsted ME Infect Immun. 2008 Dec. 76 (12):5883-91).

Пептиды постоянно образуются даже в стабильном состоянии организма. А.Е. Абатуров. Журнал «Здоровье ребенка», 3 (38) 2012 год указывает, что даже при низких концентрациях дефензинов ингибируют аденовирусную инфекцию.

Антимикробные пептиды-дефензины - мультифункциональные катионные пептиды человека и представляют собой короткие молекулы длиной от 12 до 50 аминокислот, имеют среднюю молекулярную массу 4 кД, выполняют сложные функции в поддержании и регулировании иммунного ответа на вирусную, микробную и иную антигенную агрессию на основе прямого воздействия на клеточную мембрану микроорганизма, вызывающего разрушение клетки, а также участие в регулировании процесса презентации антигена.

Лекарственные средства на основе антимикробных антител пока не созданы. В тоже время показатели содержания дефензинов в плазме крови (белка нейтрофилов человека) рассматривается как индикатор наличия высокой иммунозащитной функции.

Б.В. Пинегин, А.С. Будихина в журнале «Иммунология» 2008, №5, стр.317-320 указывают, что антимикробные пептиды (дефензины) являются компонентами иммунной системы и обеспечивают первую линию защиты макроорганизма от разных патогенов.

1. Преимущества метода:

- время исследования 3,5 часа;

- минимальная измеряемая концентрация 156 пг/мл;

- измеряемый диапазон 156-10000 пг/мл;

- объем образца 100 мкл, на лунку;

- доступность тест-систем для исследования.

2. Принцип метода.

Основан на «сэндвич» методе твердофазного иммуноферментного анализа с применением диагностического набора HNP 1-3 (дефензины нейтрофилов) ELISA.

2. Подготовка образцов крови доноров к исследованию требует строжайшего выполнения всех рекомендаций методической инструкции.

Нами обследовано 88 кадровых доноров в возрасте 21-34 года, из которых 81 человек - мужского пола, 7 - женщины.

Полученные образцы крови доноров хранили при +2-4°С. Отделение плазмы проводилось центрифугированием не позже 20 минут после эксфузии крови при 1500 g при +4°С 15 мин. Плазму отбирали в чистые полипропиленовые пробирки, осторожно, не прикасаясь к клеточному осадку. Повторно центрифугировали при тех же режимах. Наиболее достоверные результаты получали при использовании в качестве антикоагулянта гепарин или ЭДТА.

Образцы до исследования хранили при -70°С в полипропиленовых пробирках. Хранение при температуре -20°С отрицательно влияет на извлечение дефензинов HNP 1-3.

Исследования образцов донорской крови проводились через 24 часа после оттаивания и предварительного разведения поставляемым в комплекте буфером и смешивания в полипропиленовых пробирках.

Подготовка реагентов, проведение процедуры исследования выполнялось в соответствии с инструкцией.

Из 81 обследованных мужчин у 20 выявлены дефензины HNP 1-3 от 180 до 545 нг/мл - 24,7%, у 2 женщин - от 128 до 386 нг/мл - 28,5%.

Способ отбора доноров для получения плазмы крови путем исследования иммунологических показателей крови, отличающийся тем, что в плазме выявляют содержание антимикробных пептидов дефензинов и при титре дефензинов от 180 до 545 нг/мл - у мужчин и от 128 до 386 нг/мл - у женщин осуществляют забор крови.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска снижения уровня здоровья ребенка в возрасте 12-16 лет. Для этого через час после еды полость рта за 15 минут до забора ротовой жидкости промывается раствором натрия хлорида 0,9%.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и касается способа прогнозирования развития гиперплазии эндометрия у пациенток с миомой матки после проведения эмболизации маточных артерий (ЭМА).

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для обнаружения контаминантов полимеров глюкозы. Для этого проводят анализ воспалительного ответа in vitro с применением клеточной линии, которая представляет собой клеточную линию либо макрофагов, либо дифференцируемую в макрофаги, либо клетку, экспрессирующую один или несколько толл-подобных рецепторов (TLR) или NOD-подобных рецепторов, выбранных из TLR2, TLR4 и NOD2.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения иммуно-функционального резерва организма. Для этого определяют лейкоцитарные показатели периферической крови до и после нагрузочной пробы, используя ступенчатую субмаксимальную физическую нагрузку.

Изобретение относится к области медицины, а именно гинекологии, и может быть использовано для выявления риска развития гиперпластических процессов эндометрия у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья России.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения целесообразности проведения иммунологического обследования у работников животноводства.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития сочетания пролиферативных заболеваний репродуктивной системы у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России.

Изобретение относится к области медицины и касается способа прогнозирования уровня артериального давления у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрально-Черноземного региона России.
Изобретение относится к иммунологии и медицинской диагностике и представляет собой способ иммунохроматографического анализа. В основе способа лежит контакт мембранной тест-полоски с анализируемой жидкой пробой и инициируемое этим контактом движение по мембранам тест-полоски реагентов, которые содержатся в пробе или нанесены на мембрану и в ходе взаимодействий в порах мембраны или на ее поверхности формируют детектируемые иммунные комплексы.

Изобретение относится к области медицины, в частности гепатологии и инфекционным болезням, и может использоваться для определения стадии фиброзного процесса при мониторинге больных хроническим гепатитом C.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может использоваться для прогнозирования устойчивого вирусологического ответа при проведении противовирусной терапии у больных с гепатитом C на фоне ВИЧ-инфекции. Для этого у коинфицированных пациентов оценивается динамика иммунологических маркеров интерферона α (ИФНα), интерферона γ (ИФНγ) и интерлейкина 4 (ИЛ-4) и их мониторинг до начала терапии и через 4 недели после начала терапии. При этом стабильная ремиссия прогнозируется при начальных уровнях цитокинов более 3,99 пг/мл для ИФНα, от 8,32 до 13,1 пг/мл для ИФНγ, при значении коэффициента ИФНγ/ИЛ-4 более 6,72, а также при увеличении уровня ИФНα в 100 раз и более через 4 недели от начала терапии, уровне ИФНγ от 8,32 до 13,1 пг/мл и увеличении коэффициента ИФНγ/ИЛ-4 в процессе терапии более 6,72. Использование данного способа позволяет на начальном этапе лечения прогнозировать исход противовирусной терапии у ВИЧ-инфицированных пациентов. 2 пр., 4 табл., 3 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования плацентарной недостаточности у женщин I триместра с угрозой невынашивания беременности инфекционного генеза. Для этого с 6 недель гестации в сыворотке венозной крови беременных определяют содержание IL-18, и при его значении более 100 пг/мл прогнозируют развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности. Способ позволяет с высокой точностью прогнозировать развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности у женщин с угрозой невынашивания инфекционного генеза на ранних стадиях при его простоте, доступности и экономичности. 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, а именно к пульмонологии, и может быть использовано при лабораторной диагностике пневмонии. Способ лабораторной диагностики пневмонии заключается в том, что исследуют уровень сурфактантного белка А и/или сурфактантного белка D в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа (ИФА), и при значении уровня сурфактантного белка А более 49,56 ng/ml или уровня сурфактантного белка D более 234,39 ng/ml диагностируют пневмонию. Данный способ не травматичен и позволяет своевременно диагностировать пневмонию. 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и позволяет сформировать группу женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, с повышенным риском развития изолированного эндометриоза. Для этого проводят выделение ДНК из периферической венозной крови, типирование и анализ комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов цитокинов интерлейкина 6 (-174 G/C IL-6), интерлейкина 1B (-511 С/Т IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С/А IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 А/Т MIP 1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/A RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A/G I-TAC). Повышенный риск развития изолированного эндометриоза прогнозируют при выявлении комбинаций сочетания аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 С IL-1B, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, А I-TAC, -511 СС IL-1B. Изобретение обеспечивает простой неинвазивный метод диагностики эндометриоза, что повышает риск рецидива заболевания после прекращения любого метода терапии как консервативного, так и хирургического. 5 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и описывает хемилюминесцентный реактив для определения присутствия и/или количества анализируемого вещества в образце с предполагаемым содержанием анализируемого вещества, при этом реактив является недисперсным и растворимым в водной среде и содержит партнера по связыванию для анализируемого вещества и хемилюминесцентную композицию, содержащую олефиновое соединение и хелат металла, где олефиновое соединение является соединением, которое способно реагировать с синглетным кислородом присоединением 2+2 с образованием диоксетана или которое способно реагировать с синглетным кислородом с циклоприсоединением 4+2 с диенами, и где металл или хелат металла представляет собой редкоземельный металл или металл Группы VIII, и где металл координирован с двумя или более атомами той же молекулы или хелирующего агента, где два или более атомов выбраны из группы, состоящей из кислорода, азота и серы. 2 н. и 19 з.п. ф-лы, 5 ил., 11 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано для лечения пациентов с сочетанной травмой носа и черепно-мозговой травмой в первые сутки после травмы. Для этого в первые сутки после травмы носа и/или в момент репозиции костей носа вводят 15 см стерильной марлевой турунды, с нанесением не нее 1 г «КолегельR», содержащего рекомбинантный интерлейкин 1 бэта. Время экспозиции - 48 ч, далее турунду извлекают, а отломки фиксируют за счет гипсовой повязки. Эффективность проведенной терапии оценивают на основании исследования уровней провоспалительных и проаллергических интерлейкинов в назальных смывах до репозиции костей носа и через 7 дней после ее проведения. Эффект считают положительным при снижении в 2-4 раза интерлейкина-4 и/или рецепторного антагониста интерлейкина-1. Изобретение позволяет проводить превентивное лечение осложнений после травм носа. 4 ил., 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимическим методам клинической диагностики, и описывает способ прогнозирования эффективности лечения при алкогольном гепатите в стадии обострения, где до начала лечения у пациента в сыворотке крови определяют активность гамма-глутамилтранспептидазы (ГГП) и концентрацию восстановленного глутатиона (GSH), рассчитывают глутатион-гамма-глутамилтранспептидазный (GγГ) коэффициент по формуле: G γ Г = Е г г п C G S H где Еггп - активность гамма-глутамилтранспептидазы (мккат/л), a CGSH - концентрация восстановленного глутатиона (ммоль/л); и при значении коэффициента более 7,80 устанавливают обострение течения хронического алкогольного гепатита, экстренно госпитализируют и назначают комплексную терапию; через 10 дней от начала лечения повторно определяют коэффициент GγГ, и в случае его снижения до 1,72 делают вывод о нормализации функционирования антиоксидантной системы и уменьшении гибели клеток печени, что позволяет продолжить лечение в условиях поликлиники, в случае значения коэффициента GγГ выше 1,72 следует продолжить лечение в условиях стационара, под строгим контролем клинических и лабораторных показателей. Изобретение обеспечивает повышение специфичности оценки, планирование интенсивности и продолжительности курса лечения. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к набору для детекции спор, происходящих из микобактерий в образце. Набор содержит антитело, которое специфически связывает относящийся к спорам пептид из микобактерий, где относящийся к спорам пептид из микобактерий выбран из группы, состоящей из CotA, CotD, CotT, SpoVK, CotSA, YrbC, SpoVE, Soj, SpoIIIE и SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 22, 24 и 26, где указанное антитело получают иммунизацией человека или организма, не являющегося человеком, указанным относящимся к спорам пептидом. Набор дополнительно содержит молекулу, специфически связывающую комплекс между указанным антителом и указанным относящимся к спорам пептидом из микобактерий. Использование заявленного набора позволяет эффективно осуществить детекцию спор микобактерий в образцах из окружающей среды. 1 з.п. ф-лы, 7 табл., 10 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области компьютерной медицины. Предложен способ поддержки принятия клинического решения, где в компьютерный механизм принятия решений вводят данные, указывающие группу носителей аллергена и значения носителя аллергена, которые получают путем количественного определения антител IgE в биологической жидкости; идентификации носителей с помощью предварительно определенной структуры, представляющей известные взаимосвязи между антителами IgE и носителями аллергена, где по меньшей мере один носитель аллергена ассоциирован с множеством антител IgE; и присваивания значений носителям аллергенов на основании результатов теста антител IgE. Также рассмотрены машиночитаемый носитель, включающий инструкции, предписывающие выполнение компьютером способа по изобретению, и система поддержки принятия клинического решения. Данное изобретение позволяет уменьшить сложность механизма принятия решений за счет сокращения количества данных, вводимых в механизм принятия решений, и может найти применение в диагностике аллергий и других заболеваний. 3 н. и 11 з.п. ф-лы, 8 ил., 3 табл., 9 пр.
Изобретение относится к медицине, кардиологии, аритмологии и предназначено для прогнозирования развития нарушений ритма сердца у пациентов с синдромами предэкзитации желудочков. Сущность способа: в плазме крови больного определяют концентрацию тканевого ингибитора металлопротеиназ - 1 и при его значении менее 381,3 нг/мл прогнозируют неблагоприятное течение с развитием нарушений ритма сердца. Применение изобретения обеспечивает малую инвазивность способа, отсутствие противопоказаний, возможность широкого внедрения в ЛПУ при сохранении высокой чувствительности и специфичности способа. 3 пр.
Наверх