Способ ранней диагностики болезней органов дыхания у телят

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Владельцы патента RU 2558850:

Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии) (RU)

Заявленное изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для ранней диагностики болезней органов дыхания у телят. Способ включает отбор проб крови у телят. У телят в возрасте от 20 суток до 8 месяцев определяют уровень мочевинного гемолиза эритроцитов до и после внесения модификаторов адреналина и адреноблокатора в пробы крови. Затем рассчитывают коэффициент модификации мембран по формуле КМА=Е_ав/Е_бл-ав, где Е_ав - экстинция пробы на длине волны 541 нм с адреналином; Е_бл-ав - экстинция пробы на длине волны 541 нм, в которую вначале внесли блокатор, а затем - активное вещество. При этом КМА у здоровых телят находится в пределах от 0,98 до 1,2, и в случае превышения уровня 1,2 диагностируют начальную стадию болезни органов дыхания. Заявленное изобретение позволяет быстро и точно диагностировать болезни органов дыхания у телят. 4 табл., 2 пр.

Изобретение относится к ветеринарии, касается метода ранней диагностики болезней органов дыхания у телят с целью принятия мер для повышения сохранности и продуктивности животных.

Болезни органов дыхания у телят широко распространены, они наносят большой экономический ущерб и снижают рентабельность животноводства. В отдельных хозяйствах гибель по их причине телят в совокупности с вынужденным убоем достигает 40-55%, а привесы и окупаемость корма у больных и переболевших животных снижаются в 2-3 раза. Болезни этой группы самые распространенные и способны снижать экономическую эффективность отрасли до 20-30% [Красочко П.А., Красочко И.А. Диагностика, профилактика и терапия респираторных желудочно-кишечных заболеваний молодняка // Проблемы патологии, санитарии и бесплодия в жив-ве: Материалы науч.-практ. конф. - Минск, 1998. - С. 15-18. Особенности респираторных инфекций телят / В.А. Мищенко, А.А. Гусев, Н.А. Яременко [и др.] // Ветеринария. - 2000. - №9. - С. 5-6]. Отмеченное указывает на необходимость повышения эффективности диагностики, профилактики и терапии органов дыхания у телят.

Известно проведение ранней диагностики бронхопневмонии на основании результатов общих клинических исследований [Ленец И.А. Диагностика незаразных болезней животных с применением вычислительной техники. - М.: Агропромиздат, 1989. - 163 с.]. К такому способу диагностики можно отнести пальпацию первого трахеального кольца, при которой у животных с повышенной чувствительностью слизистой оболочки регистрируется кашель [Беляков И.М. Диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1975. - 45 с.].

Недостатком данного способа является то, что повышенная чувствительность трахеи регистрируется при выраженном воспалительном процессе, что также проявляется другими симптомами трахеита и бронхита: жесткое везикулярное дыхание, хрипы, одышка и т.д.

С целью повышения информативности указанного выше теста предложена ранняя диагностика выявления трахеобронхита у новорожденных телят на основании проявления кашлевой реакции на пальпацию последнего трахеального кольца [RU №2175214 C1, A61B 5/08, 27.10.2001].

К числу недостатков данного подхода следует отнести то, что он отражает наличие воспалительного процесса в трахеи, но расценивается как диагностический прием при микробронхите и бронхите. Помимо этого воспаление слизистой оболочки трахеи - это уже проявление клинических признаков трахеита, что дает основание для использования его в качестве метода выявления ранних клинических симптомов, но не субклинической стадии патологии.

Известен способ ранней диагностики респираторных заболеваний животных, предусматривающий сравнительный анализ голоса здорового и больного животного, записанного на магнитную ленту [RU №2037316 C1, А61В 5/00, 19.06.1995]. По соотношению спектров звука делают вывод о функциональном состоянии животного, а по узким спектральным полосам и распределению в данных полосах интенсивности сигнала судят о конкретном виде заболевания.

Однако для данного способа требуется специальное оборудование. Во время записи голоса животных высока вероятность наличия фоновых акустических шумов и изменения спектрального состава голоса под действием факторов внешней среды (температура, влажность, запыленность и т.д.), что снижает информативность данного метода диагностики.

Для выявления скрытых патологий органов дыхания используют нагрузочные пробы. Так, известен способ выявления легочной недостаточности у животных, который заключается в применении дозированной физической нагрузки в течение 15 минут. У животных определяют частоту дыхательных движений в покое и после легкой пятнадцатиминутной прогонки, а затем данный показатель определяют до его нормализации. После прогона количество дыхательных движений восстанавливается у здоровых животных через 7-10 минут, а при дыхательной недостаточности - через 20-30 минут и более [Клиническая диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных. - В.И. Зайцев и др. - 3-е издание, перераб. и доп. - М., 1971 - С. 135-136].

Недостатками данного способа являются его трудоемкость и затрата большого количества времени на проведение данного метода, а также влияние состояния сердечнососудистой системы и факторов внешней среды.

Известен способ выявления легочной недостаточности у телят, в котором функциональная нагрузка создается краткосрочным (30 сек) прекращением дыхания, с последующим расчетом индекса легочной недостаточности на основании разницы частоты дыхания [RU №2263467 С1, А61В 5/08, 10.11.2005].

Данный способ диагностики не позволяет в полной мере выявить легочную недостаточность, так как, контактируя с животным, происходит возбуждение его нервной системы, учащается дыхание, что повышает риск ложноположительных результатов.

Предложен способ ранней диагностики трахеобронхита у телят, основанный на внутривенном введении 0,6% раствора перекиси водорода в дозе 0,4 мл на кг массы тела [RU №2372051 С1, A61D 99/00, 10.11.2009]. В случае возникновения кашлевой реакции через 1-7 минут после введения диагностируют трахеобронхит. Авторы отмечают, что в основе данного теста лежит способность перекиси водорода вызывать у больных телят контрактацию трахеи и бронхов, которая проявляется кашлевым рефлексом. Данное явление, по их мнению, наблюдается при повышенном содержании продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ).

Однако активация ПОЛ наблюдается при большом количестве болезней, поэтому высока вероятность получения положительного результата данного теста не только при патологии органов дыхания, но и при других заболеваниях. Так, в медицине имеется способ диагностики легочной гипертензии, предложенный Е.Ф. Онищенко и Н.В. Крашенинниковой. Способ также основан на внутривенном введении 0,3% раствора перекиси водорода и направлен на выявление пороков сердца и заболеваний легких [RU №2103910 C1, A61B 5/02, 10.02.1998]. Помимо этого следует отметить, что введение перекиси водорода больным с повышенным уровнем ПОЛ может привести к ухудшению состояния больного по причине резкого увеличения количества активных форм кислорода и последующего разрушения мембран, а также контрактации бронхов, которая вызывает усиление дыхательной недостаточности. Поэтому данный тест является небезопасным.

В качестве прототипа выбран способ прогнозирования респираторных болезней у телят в течение 24 часов после рождения по уровню соотношения содержания в сыворотке крови кальция и магния. При снижении соотношения меньше 3,5:1 прогнозируют развитие респираторных болезней [RU №2491550 C1, G01N 33/49, 27.08.2013].

Соотношение содержания в сыворотке крови кальция и магния отражает состояние метаболизма мышечных клеток у новорожденных, и его снижение указывает на наличие мышечной дистонии, являющейся следствием нарушения антенатального развития или интранатальной асфиксии. При этом снижается резистентность новорожденного и возрастает риск развития заболеваний, поэтому соотношение кальция и магния является прогностическим показателей, но не тестом диагностики болезней органов дыхания.

Технический результат изобретения - создание эффективного способа ранней диагностики болезней органов дыхания у телят, являющегося информативным и точным.

Технический результат достигается тем, что в способе ранней диагностики болезней органов дыхания у телят, включающем отбор проб крови у телят, согласно изобретению у телят в возрасте от 20 суток до 8 месяцев определяют уровень мочевинного гемолиза эритроцитов до и после внесения модификаторов адреналина и адреноблокатора в пробы крови, а затем рассчитывают коэффициент модификации мембран по формуле КМА=Е_ав/Е_бл-ав, где Е_ав - экстинция пробы на длине волны 541 нм с адреналином; Е_бл-ав - экстинция пробы на длине волны 541 нм, в которую вначале внесли блокатор, а затем - активное вещество, при этом КМА у здоровых телят находится в пределах от 0,98 до 1,2, и в случае превышения уровня 1,2 диагностируют начальную стадию болезни органов дыхания.

Коэффициент модификации мембран адреналином (КМА) отражает состояние бета-адренорецепторов на мембранах эритроцитов. Адренорецепторы - это белковые структуры, расположенные на мембранах клеток, которые распознают и связывают адреналин, норадреналин и их синтетические аналоги. Они присутствуют во всех органах, тканях и клетках организма, отражают состояние симпатического отдела вегетативной нервной системы, участвуют в регуляции обмена веществ и функций всех органов и систем организма. В зависимости от вызываемых эффектов, локализации и чувствительности к фармакологическим препаратам различают альфа- и бета-адренорецепторы. От состояния бета-адренорецепторов зависит частота сердечных сокращений и сократимость миокарда, вазодилатация, тонус бронхов и активность липолиза. Эта группа рецепторов сопряжена с аденилатциклазой, катализирующей превращение АТФ в цАМФ [Шишкина Г.Т., Дыгало Н.Н. Молекулярная физиология адренергических рецепторов // Усп. физиол. наук. - 1997.- Т.28. - №1.- С. 61-74]. Состояние адренорецепторов часто оценивают на основании результатов исследования мембранно-рецепторных комплексов эритроцитов.

Вторичные нарушения симпатического отдела вегетативной нервной системы наблюдаются при многих патологиях, однако наиболее выраженные изменения бета-адренорецепторов преимущественно отмечаются при патологиях сердечнососудистой системы и органов дыхания. Развитие бронхолегочных болезней начинается с повреждения покровного эпителия и активизации клеток воспаления, что приводит к дисбалансу рецепторов бронхов. Наряду с этим, нарушаются регулирующие механизмы на организменном уровне, в основе которых лежит глюкокортикоидная недостаточность и обусловленное ею изменение чувствительности бета-адренорецепторов [Holloway J.W., Dunbar P.R., Riley G.A. et al. Association of beta2-adrenergic receptor polymorphisms with severe asthma // Din. Exp.Allergy - 2000. - V.30(8) - P. 1097-1200; Хроническая обструктивная болезнь легких / Под ред. А.Г. Чучалина. - М.: ЗАО Изд-во БИНОМ; СПб.: Невский диалект, 1998. - 512 с].

Таким образом, теоретическим обоснованием предлагаемого способа диагностики является наличие в патогенезе большинства бронхолегочных болезней изменений состояния бета-адренорецепторов на мембранах клеток-мишеней, в том числе и эритроцитах.

Способ осуществляют следующим образом. У телят берут пробы крови и количественно определяют степень мочевинного гемолиза эритроцитов в интактных пробах и после внесения модификаторов (адреналин и адреноблокатор) в соответствии с авторской методикой [Алехин Ю.Н. Методы диагностики перинатальной патологии у крупного рогатого скота: методическое пособие. - Воронеж, 2013. - 25 с.]. Для этого вначале готовят реактивы: 1. Раствор адреналина гидрохлорида (4 мг на 100 мл дистиллированной воды); 2. Раствор пропранолола гидрохлорида (2,5 мг на 100 мл дистиллированной воды); 3. Рабочий раствор мочевины (1,4 г мочевины, 0,213 г NaCl и до 100 мл дистиллированной воды); 4. Контрольный раствор мочевины (1,8 г и до 100 мл дистиллированной воды); 5. Физиологический раствор натрия хлорида. Из специального оборудования требуются фотоэлектроколориметр и термостат (20°C). Цельную стабилизированную (гепарин) кровь центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин. Удаляют надосадочную жидкость. К осадку добавляют равное количество физиологического раствора натрия хлорида, перемешивают, центрифугируют (3000 об/мин, 5 минут) и удаляют надосадочную жидкость. К осадку добавляют равное количество физиологического раствора натрия хлорида и перемешивают (взвесь эритроцитов). Содержимое пробирок центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут. Экстинцию надосадочной жидкости определяют при длине волны 541 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм против дистиллированной воды. КМА, отражающий баланс соотношения эффекта антагониста и агониста, вычисляют по формуле: КМА=Е_ав/Е_бл-ав, где Е_ав - экстинция пробы с адреналином; Е_бл-ав - экстинция пробы, в которую вначале внесли блокатор, а затем - активное вещество. У здоровых телят КМА=0,98-1,2.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Определение состояния бета-адренорецепторов эритроцитов при болезнях органов дыхания у телят

Проведены исследования клинического статуса и состояния бета-адренорецепторов на мембранах эритроцитов у телят на разных стадиях экспериментальной патологии органов дыхания.

Объектом исследования были клинически здоровые телята в возрасте 2,5-3 месяца, которые содержались в типовом помещении с оптимальными условиями микроклимата (температура воздуха 18,7±0,6°C, относительная влажность 61,0±1,5%). Были сформированы две группы по 30 голов в каждой. Контрольная группа в течение всего опыта находилась в помещении с оптимальными параметрами микроклимата. Телята из опытной группы утром (4 часа) первого дня опыта были переведены в экспериментальное помещение с выраженными нарушениями параметров микроклимата: температура воздуха +5…+8°C, относительная влажность 90-93%, сквозняки. Все задействованные в опыте животные находились под постоянным наблюдением до появления клинических признаков поражения органов дыхания. Они подвергались комплексному обследованию, включающему в себя отбор проб крови и назальной слизи для анализа (5⁰⁰ и 18⁰⁰), а также исследование с использованием клинических и инструментальных методов (5³⁰, 12⁰⁰ и 18³⁰). Показатели соотношения фаз дыхания - выдох/вдох (СФД), дыхательного объема (ДО) и минутного объема дыхания (МОД) определяли с помощью спирометра «MicroRind» (Micro Medical, Великобритания). Биохимические исследования проводили на анализаторе «Hitachi-902» и с использованием диагностических наборов. Оценку состояния мембрано-рецепторных комплексов эритроцитов и расчет коэффициента модификации мембран адреналином (КМА) проводили по авторской методике Алехина Ю.Н., принцип которой заключается в количественном определении степени мочевинного гемолиза эритроцитов в интактных пробах и после внесения модификаторов (адреналин и адреноблокатор). Результаты приведены в таблице 1.

Таблица №1
Порядок проведения исследования
Реактивы	№ пробирки
	1 - экстинция пробы, в которую вначале внесли блокатор, а затем - активное вещество	2 - экстинция пробы с адреналином
Взвесь эритроцитов, мл	0,1
Пропранолол, 0,0025% раствор, мл	1,0
Водяная баня, 20°C, 5 минут
Взвесь эритроцитов, мл		0,1
Натрия хлорида, 0,9% раствор, мл		1,0
Адреналин, 0,004% раствор, мл	1,0	1,0
Водяная баня, 20°C, 5 минут
Рабочий раствор: в 100 мл дистиллированной воды 1,4 г мочевины и 0,213 натрия хлорида, мл	3,0	3,0
Перемешать и оставить при комнатной температуре на 30 минут
Содержимое пробирок центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут
Надосадочную жидкость фотометрируют в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 541 нм против дистиллированной воды
Расчет коэффициент модификации мембран адреналином (КМА): КМА=Е2/Е1, где Е1 - экстинкция надосадочной жидкости в пробирке №1; Е2 - экстинкция надосадочной жидкости в пробирке №2

На протяжении всего опыта у телят, находившихся в помещении с оптимальными параметрами микроклимата, не отмечалось каких-либо изменений состояния здоровья. Показатель КМА находился в пределах от 0,98 до 1,20. У телят, находившихся в неблагоприятных условиях существования (таблицы 2 и 3), частота дыхательных движений (ЧДД) в течение всего опыта имела тенденцию к увеличению, а дыхательный объем и минутный объем дыхания - к уменьшению, однако достоверные изменения этих показателей были отмечены только на 4 день. Помимо этого в этот день было отмечено увеличение на 7,7% длительности выдоха (СФД), а при аускультации грудной клетки фиксировали усиление везикулярного дыхания в области первых трех межреберных промежутков в средней трети груди.

Таблица 2
Клинико-биохимические показатели
Показатели	Дни наблюдения
1	2	3	4
ЧДД/мин	25,0±1,50	26,8±1,03	27,0±0,56	29,2±0,50³
СФД	1,17±0,011	1,15±0,010	1,17±0,010	1,26±0,004³
ОД, мл	543,8±9,7	530,0±8,5	538,8±4,2	527,0±5,1¹
МОД, л	13,8±0,40	14,3±0,42	14,5±0,22	15,0±0,20²
Темп. тела, °C	38,9±0,17	39,0±0,12	38,8±0,15	38,7±0,15
Общий белок, г/л	70,5±1,16	70,8±0,88	71,2±0,82	71,5±0,69
Мочевина, мМ/л	4,8±0,37	4,3±0,21	4,8±0,27	5,3±0,29
ЩФ, нМ/(с.л)	388,0±15,0	397,0±18,1	407,2±18,1	410,0±17,7
АлАт, нМ/(с.л)	120,6±9,03	122,1±7,38	137,0±11,8	140,0±11,5
АсАт, нМ/(с.л)	154,4±6,02	152,0±4,40	169,8±3,91	166,2±5,30
Коэф. ДеРитис	1,29±0,012	1,26±0,020	1,24±0,020	1,18±0,023
Глюкоза, мМ/л	4,2±0,17	4,4±0,20	5,1±0,153	4,8±0,18
Пируват, мкМ/л	127,3±4,0	103,0±3,71	110,0±4,22	107,5±4,22
Лактат, мМ/л	1,35±0,02	1,43±0,011	1,40±0,012	1,9±0,023
Л/П	10,7±0,52	13,9±0,37	12,6±0,38	17,4±0,38
Холестерин, мМ/л	2,8±0,13	2,3±0,091	2,0±0,203	2,0±0,172
Креатинин, мМ/л	0,062±0,0030	0,062±0,003	0,063±0,0012	0,065±0,0010
Примечание: «1» - достоверные различия с предыдущим показателем, «2» - достоверные различия с показателями первого дня наблюдения, «3» - достоверные различия с предыдущим и исходным показателями.

Таблица 3
Показатели аутоинтоксикации и коэффициента модификации мембран в присутствии адреналина с адреноблокатором
Длительность опыта, ч	КМА	ССМ	ССЭ
0	1,00±0,011	0,28±0,003	30,0±0,85
4	1,18±0,008³	0,27±0,003	28,7±0,98
8	1,24±0,011²	0,30±0,005	29,3±1,07
12	1,38±0,010³	0,30±0,005	30,4±1,08
24	1,45±0,011³	0,34±0,02³	32,0±1,11
48	1,44±0,009²	0,36±0,011²	34,4±1,51²
72	1,22±0,012³	0,41±0,013³	37,0±1,35³
96	1,02±0,005¹	0,41±0,032²	39,3±1,30²

Результаты пальпации колец трахеи и перкуссии в области проекции легких были без патологических изменений. У трех телят (10%) появилась экспираторная одышка, а у двадцати одного животного (70,0%) - скудное истечение из носа серозного экссудата и умеренная гиперемия сосудов стенки носовой полости.

На 3 день опыта, т.е. за день до визуализации болезни отмечены достоверные изменения АсАТ, глюкозы, холестерина, пировиноградной и молочной кислоты. Хотя отклонение двух последних показателей было отмечено еще на вторые сутки. Однако наиболее ранние изменения были отмечены со стороны маркеров состояния адренорецепторов (КМА) и аутоинтоксикации. Содержание средних молекул (ССМ) превышало исходный уровень на 21,4% через 24 часа, а сорбционная способность эритроцитов (ССЭ) на 14,7% через 48 часов. В дальнейшем сохранялась постоянная тенденция к повышению этих показателей. КМА уже через 4 часа увеличился на 18,0%, а через 12, 24 и 48 часов превышал уровень в начале опыта на 38,0-45,0%.

Заключение. В результате воздействия неблагоприятных факторов внешней среды на 4-й день у большинства животных появился комплекс симптомов, позволяющий диагностировать ринит и трахеобронхит. Однако визуализации болезни предшествовали изменения состояния ряда биохимических показателей. Первыми происходили изменения состояния бета-адренорецепторов на мембранах эритроцитов, количество или число которых возрастало в течение двух суток воздействия неблагоприятных факторов, но затем наблюдалось их снижение, что уже происходило в сочетании с отклонением большинства показателей внешнего дыхания и состава крови.

Таким образом, изменения чувствительности или количества адренорецепторов относятся к числу наиболее ранних признаков развития болезней органов дыхания.

Пример 2. Определение прогностической и диагностической информативности показателей состояния бета-адренорецепторов эритроцитов при болезнях органов дыхания у телят.

Для определения информативности разработанного способа проведены исследования по изучению влияния уровня коэффициента модификации мембран (КМА) эритроцитов телят на уровень их заболеваемости респираторными болезнями. В условиях специализированного хозяйства по производству говядины во время комплектации на 14-й день после закупки, телята в возрасте 2-3 месяца, подвергались клиническому обследованию. У клинически здоровых животных отбирали пробы крови, в которых определяли состояние бета-адренорецепторов на мембранах эритроцитов. На основании полученных результатов были сформированы две опытные группы: №1 (n=180) телята у которых КМА находился в пределах 0,98-1,2 и №2 (n=207) КМА более 1,2. В течение 30 дней животные находились под клиническим наблюдением, результаты которого представлены в таблице 4.

Из данных таблицы 4 видно, что в группе №1 заболело 6,1% животных, при этом болезнь проявлялась на заключительном этапе опыта, что дает основание предположить возникновение и развитие патологии уже в условиях хозяйства. Заболеваемость в группе №2 составила 70,0%, визуализация болезни наблюдалась в период с 8 по 16 день опыта. В данном случае большинство телят первых дней комплектации, вероятно, находились на преморбидной стадии патологии.

Таблица 4
Уровень заболеваемости респираторными болезнями телят с разным уровнем КМА
Показатели	Группа №
1	2
Всего, гол.	180	207
В течение опыта: Клинически здоровые	169	62
Заболели, гол., всего	11	145
в т.ч. в течение 0-3 сут	0	0
4-7 сут	0	1
8-12 сут	0	37
13-16 сут	0	105
17-20 сут	1	2
21-24 сут	3	0
25-30 сут	7	0

Степень связи определяемого показателя с заболеваемостью животных оценивали на основании показателя достоверности связи по критерию χ² [Хамитов Г.П., Ведерникова Т.И. Вероятности и статистика. Иркутск: БГУЭП, 2006. - 272 с.]. Полученные при этом результаты (табл.4) показали, что χ²=160,92; коэффициент корреляции (r) - 0,65; коэффициент детерминации (r_d) - 0,42, Р<0,001. Это указывает на то, что между уровнем КМА у телят и заболеваемостью их респираторными болезнями имеется достоверная корреляционная связь средней степени выраженности. Доля влияния увеличения КМА (выше 1,20) на заболеваемость составляет 42%, что позволяет расценивать его как достоверный показатель ранней диагностики с высоким уровнем прогностического значения.

Таким образом, новый способ ранней диагностики болезней органов дыхания у телят характеризуется сравнительно высокой информативностью и прогностическим значением. Его применение позволит выявлять животных на ранних стадиях болезни, что будет основанием для проведения превентивной терапии, которая является более эффективной и экономически менее затратной.

Способ ранней диагностики болезней органов дыхания у телят, включающий отбор проб крови у телят, отличающийся тем, что у телят в возрасте от 20 суток до 8 месяцев определяют уровень мочевинного гемолиза эритроцитов до и после внесения модификаторов адреналина и адреноблокатора в пробы крови, а затем рассчитывают коэффициент модификации мембран по формуле КМА=Е_ав/Е_бл-ав, где Е_ав - экстинция пробы на длине волны 541 нм с адреналином; Е_бл-ав - экстинция пробы на длине волны 541 нм, в которую вначале внесли блокатор, а затем - активное вещество, при этом КМА у здоровых телят находится в пределах от 0,98 до 1,2, и в случае превышения уровня 1,2 диагностируют начальную стадию болезни органов дыхания.

Изобретение относится к медицине, а именно к детской гастроэнтерологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики неспецифического язвенного колита и болезни Крона у детей.

Лабораторный способ диагностики биполярного аффективного расстройства // 2558056

Изобретение относится к медицине, а именно к способу диагностики биполярного аффективного расстройства. Сущность способа состоит в том, что выявляют достоверные различия в спектре распределения белков сыворотки крови без белков альбумина, иммуноглобулина G, иммуноглобулина А, антитрипсина, трансферина и гаплоглобина у больных эндогенным психозом.

Способ определения цитотоксичности сыворотки женщины к мужским моноклеарным клеткам // 2558054

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике бесплодия женщин. Для этого проводят определение цитотоксичности сыворотки женщин к мужским лимфоцитам, включая их совместное культивирование с контрольной мужской и исследуемой женской сывороткой в лунках 96-луночного планшета в присутствии питательной среды RPMI 1640 в СО2-инкубаторе.

Высокочувствительный способ определения количества компонентов, полученных из лекарственных трав // 2558042

Изобретение относится к высокочувствительному способу определения количества глицирризина, глицирретиновой кислоты и их фармакологически приемлемых солей, присутствующих в плазме крови человека.

Способ прижизненного сбора оплодотворенных яиц (in vitro) от возбудителя паразитарного зооноза trichuris (=trichocephalus) vulpis // 2557973

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для использования при экспериментальных паразитологических исследованиях в лабораторных условиях. Способ включает отбор только живых, половозрелых самок Trichuris vulpis из толстой, слепой кишок спонтанно зараженных трихоцефалами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии диких или/и домашних хищных в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия (solutio Natrii chlorati isotonica) и экспозицией пробирок с самками Trichuris vulpis при t=37,5°C - 39°C в течение 5 часов в условиях термостата.

Способ прогнозирования веса новорожденного с учетом полиморфных вариантов локуса 10976 g/afvii // 2557952

Изобретение относится к медицине, а именно акушерству и может быть использовано для прогнозирования веса новорожденного у женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России.

Способ дооперационного определения объема операции у больных диффузным токсическим зобом // 2557946

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и может быть использовано для дооперационного определения объема операции у больных диффузным токсическим зобом.

Способ прогнозирования риска раннего развития микрососудистых осложнений сахарного диабета i типа у детей // 2557928

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска раннего развития микрососудистых осложнений у детей с сахарным диабетом 1 типа.

Способ автоматической настройки предупреждения о меняющемся во времени параметре // 2557887

Группа изобретений относится к области медицины и может быть использована для мониторинга состояния пациента. Способ предоставления сигнала предупреждения о меняющемся во времени физиологическом параметре включает мониторинг контролируемого параметра пациента, сравнение контролируемого параметра с начальным пороговым критерием, временное изменение начального порогового критерия на пороговый критерий ухудшенного состояния после проведения терапии, а затем, после определенного периода времени, на пороговый критерий после введения.

Способ раннего прогнозирования кистозной перивентрикулярной лейкомаляции у новорожденных с очень низкой и экстремально низкой массой тела // 2557881

Изобретение относится к области медицины, а именно к неонатологии, и может быть использовано для раннего прогнозирования кистозной перивентрикулярной лейкомаляции (ПВЛ) у новорожденных с очень низкой (ОН) и экстремально низкой массой тела (ЭНМТ).

Способ прогнозирования риска развития эндометриоза // 2558854

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и позволяет сформировать группу женщин русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземья России, с повышенным риском развития изолированного эндометриоза. Для этого проводят выделение ДНК из периферической венозной крови, типирование и анализ комбинаций генетических вариантов полиморфных маркеров генов цитокинов интерлейкина 6 (-174 G/C IL-6), интерлейкина 1B (-511 С/Т IL-1B), интерлейкина 10 (-592 С/А IL-10), генов хемокинов фактора стромальных клеток (-801 G/A SDF1), макрофагального воспалительного протеина -1β (+1931 А/Т MIP 1β), регулятора активности нормальной экспрессии и секреции Т-клеток (-403 G/A RANTES), интерферона индуцебельного хемоаттрактанта Т-клеток (A/G I-TAC). Повышенный риск развития изолированного эндометриоза прогнозируют при выявлении комбинаций сочетания аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, -403 G RANTES, -511 С IL-1B, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, +1931 A MIP1β, -592 С IL-10, аллелей -174 С IL-6, -801 A SDF1, -403 G RANTES, -592 С IL-10, аллелей -801 A SDF1, А I-TAC, -511 СС IL-1B. Изобретение обеспечивает простой неинвазивный метод диагностики эндометриоза, что повышает риск рецидива заболевания после прекращения любого метода терапии как консервативного, так и хирургического. 5 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ прогнозирования риска формирования лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза к фторхинолонам у больных туберкулезом с множественной утойчивостью возбудителя // 2558992

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для прогнозирования риска формирования приобретенной устойчивости микобактерий туберкулеза к препаратам группы фторхинолонов в ходе лечения больных туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя. Для этого выявляют у пациента признаки-предикторы формирования устойчивости микобактерий туберкулёза к фторхинолонам и при наличии их у него присваивают выявленным признакам-предикторам соответствующие значения баллов. Наличие инфильтративно-деструктивных изменений в легких в сочетании с диссеминацией оценивают как +15 баллов. Рост более 100 колоний M. tuberculosis при посеве на плотные питательные среды либо положительный результат прямой микроскопии мазка диагностического материала с окраской по Цилю-Нельсену соответствует +17 баллам. Наличие начальной устойчивости микобактерий туберкулеза (МБТ) к аминогликозидам или/и капреомицину расценивают как +7 баллов. Наличие у пациента сопутствующего нарушения функции почек соответствует +3 баллам, сопутствующей алкогольной или/и наркотической зависимости соответствует +6 баллам. В случае прерывания курса полихимиотерапии МЛУ-ТБ на 2 недели и более присваивают +38 баллов. Назначение фторхинолона в суточной дозе ниже рекомендуемой оценивают как +5 баллов. В случае назначения индивидуализированных режимов полихимиотерапии МЛУ-ТБ с включением менее 5 противотуберкулезных препаратов с сохраненной чувствительностью МБТ присваивают +8 баллов. Применение резекционных методов хирургического лечения оценивают как -3 балла. После этого осуществляют подсчёт суммарного балла риска. Далее определяют вероятность или степень риска формирования устойчивости микобактерий туберкулёза к фторхинолонам. При этом степень риска прогнозируют либо по интервальной шкале, либо путём вычисления точного значения вероятности по формуле: p=1/1+e-0,055x-2,964, где е - основание натурального логарифма, константа, равная 2,718….., х - абсолютное значение суммарного балла. В случае использования интервальной шкалы при суммарном балле < 30 степень риска оценивают как низкую с вероятностью (р), равной 0,0-0,2. При суммарном балле, соответствующем 30-50 баллам, степень риска оценивают как среднюю с р>0,2-0,5. При суммарном балле, соответствующем 50-70 баллам, степень риска расценивают как высокую с р>0,5-0,7. При суммарном балле >70 баллов степень риска расценивают как очень высокую с р>0,7-0,9. Простой в применении способ, не требующий использования вычислительных устройств, обеспечивает возможность прогнозирования риска формирования приобретенной устойчивости микобактерий туберкулеза ко всем препаратам группы фторхинолонов и может быть использован при выборе режима химиотерапии, определении ее продолжительности и может влиять на принятие своевременного решения о проведении хирургического лечения. 1 ил., 4 табл., 2 пр.

Халькогенидная подложка для биочипа // 2559582

Изобретение относится к средствам для анализа белков и может найти применение в клинических и биологических лабораториях. Подложка для биочипа в соответствии с настоящим изобретением выполнена из халькогенидного стекла на стеклянной основе и имеет функциональное покрытие из неорганического материала. В качестве функционального покрытия из неорганического материала подложка содержит слой металлических наночастиц толщиной не более 200 нм. Наночастицы имеют размер не более 50 нм и состоят из инертного металла или смеси нескольких инертных металлов, выбранных из группы, включающей золото, серебро, платину. Изобретение характеризуется высокой чувствительностью и высоким пределом обнаружения. 4 ил., 1 пр.

Набор для детекции спор, происходящих из микобактерий // 2559782

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к набору для детекции спор, происходящих из микобактерий в образце. Набор содержит антитело, которое специфически связывает относящийся к спорам пептид из микобактерий, где относящийся к спорам пептид из микобактерий выбран из группы, состоящей из CotA, CotD, CotT, SpoVK, CotSA, YrbC, SpoVE, Soj, SpoIIIE и SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 18, 20, 22, 24 и 26, где указанное антитело получают иммунизацией человека или организма, не являющегося человеком, указанным относящимся к спорам пептидом. Набор дополнительно содержит молекулу, специфически связывающую комплекс между указанным антителом и указанным относящимся к спорам пептидом из микобактерий. Использование заявленного набора позволяет эффективно осуществить детекцию спор микобактерий в образцах из окружающей среды. 1 з.п. ф-лы, 7 табл., 10 ил., 1 пр.

Устройство для отбора проб жидкости, содержащейся в эластичном контейнере // 2560410

Настоящее изобретение относится к отбору проб жидкости, которая находится в эластичном закрытом контейнере, например, в контейнере для сбора мочи или крови. Устройство для отбора жидкости, находящейся в эластичном контейнере (13, 14), содержит первую секцию (20), имеющую базовую поверхность (21), и элемент (22) для перфорирования пленки, выступающий от базовой поверхности (21). Устройство дополнительно содержит вторую секцию (23), имеющую базовую поверхность (24), которая окружает полость (25), адаптированную для приема элемента (22) для перфорирования пленки, являющегося частью первой секции (20). Первая секция (20) имеет клейкую поверхность, окружающую элемент (22) для перфорирования пленки, а вторая секция (23) имеет клейкую поверхность, окружающую полость (25). Кроме того, одна из двух секций (20, 23) содержит отверстие (26) в базовой поверхности в пределах клейкой поверхности (21). Достигаемый при этом технический результат заключается в получении ровного и стерильного отверстия для доступа к жидкости, а также в предотвращении любого нежелательного выливания или потери жидкости. 7 з.п. ф-лы, 4 ил.

Способ оценки хирургического риска у больных с атеросклеротической окклюзией бедренно-подколенно-берцового сегмента в стадии критической ишемии // 2560666

Изобретение относится к медицине и описывает способ оценки хирургического риска у больных с атеросклеротической окклюзией бедренно-подколенно-берцового сегмента в стадии критической ишемии, включающий балльную оценку сопутствующих заболеваний сердечно-сосудистой системы, где каждому фактору риска присваивают определенное количество баллов, присвоение баллов происходит следующим образом: возраст более 70 лет - 1 балл, острое нарушение мозгового кровообращения или транзиторная ишемическая атака в анамнезе - 2 балла, постинфарктный кардиосклероз - 1 балл, фракция выброса левого желудочка от 46% до 50% - 2 балла, фракция выброса левого желудочка от 41% до 45% - 4 балла, фракция выброса левого желудочка 40% и менее - 6 баллов, ишемическая болезнь сердца: хроническая коронарная недостаточность I функциональный класс - 1 балл, ишемическая болезнь сердца: хроническая коронарная недостаточность II функциональный класс - 2 балла, ишемическая болезнь сердца: хроническая коронарная недостаточность III функциональный класс - 7 баллов, пароксизмальная форма фибрилляции-трепетания предсердий, эктопический ритм, частые (>5 в минуту) наджелудочковые экстрасистолы - 3 балла, постоянная форма фибрилляции-трепетания предсердий - 2 балла, желудочковые экстрасистолы >30 в час - 1 балл, баллы складывают, оценивают уровень хирургического риска данного больного, при сумме баллов 8 и более присваивают высокий хирургический риск, рекомендуют выполнение эндоваскулярной интервениции, при сумме баллов от 0 до 3 присваивают низкий хирургический риск, рекомендуют шунтирующую операцию, в случае суммы баллов от 4 до 7 присваивают средний хирургический риск, возможно использование обоих методов артериальной реконструкции. Изобретение обеспечивает более достоверную оценку хирургического риска у больных с атеросклеротической окклюзией бедренно-подколенно-берцового сегмента в стадии критической ишемии с целью выбора метода артериальной реконструкции - эндоваскулярная интервенция или шунтирующая операция, а также простоту, доступность и объективность определения хирургического риска у данной группы больных. 1 пр., 5 табл.

Средство для диагностики лейкоза крупного рогатого скота и способ его применения // 2560684

Группа изобретений относится к ветеринарии и может быть использована для диагностики лейкоза крупного рогатого скота (КРС). Средство для диагностики лейкоза КРС содержит водорастворимую белковую фракцию клеточной линии почки эмбриона свиньи, контаминированной онкорнавирусами С и D и полученной при культивировании в анаэробных условиях, имеющую молекулярную массу от 75 до 82 кД в количестве 0,49-0,52 масс.% и характеризующуюся наличием пиков при длине волны 214 нм в ультрафиолетовой области спектра, и дополнительно содержит фосфатно-солевой буферный раствор. Способ заключается в отборе крови животного, приготовлении взвеси цитратной крови 0,25%-0,5% концентрации, смешивании взвеси со средством для диагностики при соотношении средства к взвеси 1:4-6, выдерживании смеси при температуре 4-8°С в течение 12-15 часов и учете результата реакции по характеру взаимодействия взвеси цитратной крови со средством для диагностики, при этом о наличии лейкоза судят при положительной реакции взвеси цитратной крови со средством. Использование изобретений позволяет расширить спектр диагностических препаратов, сформировать новые подходы к проблеме диагностики лейкоза КРС, быстро и с минимальными затратами проводить диагностику лейкоза КРС при сохранении эффективности диагностических исследований. 2.н.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр., 1ил.

Способ прогнозирования неразвивающейся беременности // 2560694

Изобретение относится к области медицины. Изобретение представляет способ прогнозирования неразвивающейся беременности путем выявления факторов риска в сыворотке крови с помощью иммуноферментного анализа и дальнейшей обработки полученных результатов методом бинарной логистической регрессии. Изобретение обеспечивает упрощение и повышение чувствительности способа прогнозирования неразвивающейся беременности. 4 табл., 1 ил., 2 пр.

Способ мониторинга состояния пациента после трансплантации органа // 2560705

Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантологии, и может быть использовано для мониторинга состояния пациента после трансплантации органа. Для этого, после трансплантации производят мониторинг редокс потенциала (РП) плазмы крови пациента. При этом ежедневно определяют РП плазмы крови пациента с помощью платинового электрода относительно хлорсеребряного электрода. Платиновый электрод предварительно обрабатывают с помощью катодно-анодного сканирования в растворе неорганического восстановителя в циклическом потенциодинамическом режиме. Проводят ежедневный мониторинг величины РП плазмы крови пациента и выявляют изменения величин РП в одном направлении за сутки или несколько суток. При выявлении изменения РП более 25 мВ за сутки или несколько суток судят о наличии дисфункции трансплантата или высоком риске развития криза отторжения трансплантата. При выявлении изменения величины РП менее 25 мВ судят о нормальном состоянии пациента. Изобретение позволяет осуществить прогноз исходов трансплантации и обеспечить своевременную коррекцию лечения пациентов.1 табл., 4 пр., 3 ил.

Способ прогнозирования достижения полных морфологических регрессий у больных операбельным трипл-негативным раком молочной железы // 2560707

Изобретение относится к онкологии и касается способов прогнозирования достижения полных морфологических регрессий (ПМР) у больных операбельным трипл-негативным раком молочной железы. Проводят иммуногистохимическое исследование ткани опухоли. Значение уравнения регрессии Y определяют по формуле: Y=7,0-4,1X1-0,15Х2+1,8Х3-4,8Х4+1,78Х5+0,56Х6, где: X1 - размер первичного опухолевого узла: 1 - менее 30 мм, 2-30 мм и более; Х2 - состояние регионарного лимфатического аппарата: 0 - отсутствие метастатического поражения лимфатических узлов, 1 - поражение до 4 лимфатических узлов, 2 - поражение 4-9 лимфатических узлов, 3 - поражение 10 и более лимфатических узлов; Х3 - схема химиотерапии: 1 - FAC, 2 - САХ, Х4 - уровень экспрессии EGFR1 в биопсийном материале опухолевой ткани: 1 - менее 10%, 2 - 10% и более; Х5 - уровень экспрессии Ki-67 в биопсийном материале опухолевой ткани: 1 - менее 20%, 2 - 20% и более; X6 - уровень экспрессии VEGFR-2 в биопсийном материале опухолевой ткани: 1 - менее 70%, 2 - 70% и более. Значение вероятности достижения ПМР рассчитывают по формуле: Р=eY/(1+eY). При Р<0,5 прогнозируют низкую, а при Р>0,5 высокая вероятность ПМР. Способ прогнозирования позволяет повысить точность и информативность. 6 табл., 2 пр.