Способ подготовки тканей клеща для биологических исследований



Способ подготовки тканей клеща для биологических исследований
Способ подготовки тканей клеща для биологических исследований

 

G01N1/28 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2562841:

ЗАО "МБС-Технология" (RU)

Изобретение относится к способу подготовки биологических материалов для проведения исследований, в частности подготовки тканей клеща для дальнейшего определения наличия в них вируса клещевого энцефалита, и может быть использовано в здравоохранении, биотехнологиях и иммунологии. Способ пробоподготовки тканей клеща включает промывку тканей клеща в 70-80%-ном растворе этилового спирта, его высушивание, помещение в пробирку, и затем растирание и центрифугирование. Перед растиранием в пробирку добавляют 100-200 мкл лизирующего буфера, а само растирание тканей клеща проводят в растворе в этой же пробирке. Полученный гомогенат центрифугируют в течение 2-10 мин при 2000-6000 об/мин. Способ позволяет обеспечить технологичность процесса без использования дорогостоящего оборудования. 4 з.п. ф-лы, 3 пр., 1 табл.

 

Изобретение относится к способам подготовки биологических материалов для проведения исследований, в частности подготовки тканей клеща для дальнейшего определения наличия в них вируса клещевого энцефалита (ВКЭ), и может быть использовано в здравоохранении, биотехнологиях и иммунологии.

Известен способ подготовки биологического материала для ПЦР генамплифакационной диагностики, который заключается в лизисе образцов раствором NaI, содержащим РНК-носитель, осаждении вирусных, бактериальных и клеточных ДНК и РНК изопропанолом, центрифугировании и их очистке (патент RU №2134871, МПК G01N 1/28, G01N 1/30, опубл. 20.08.1999).

Известный способ является весьма специфичным и не может быть применен для подготовки тканей клеща, поскольку в процессе его осуществления разрушается белковая структура вируса, которая в дальнейшем необходима для проведения исследования.

В качестве прототипа был выбран способ выделения ВКЭ из клеща (интернет-ресурс: http://www.bio-ua.com/index.php/prod?i=l66&PHPSESSID=3fl72c88947d863e65bb76f2a0ff3bb2). Данный способ заключается в том, что ткани клеща промывают в 70-80%-ном растворе этилового спирта, высушивают с помощью фильтровальной бумаги, помещают в пробирку типа "Эппендорф" и плотно закрывают, затем помещают в жидкий азот для замораживания, далее замороженные ткани клеща растирают при помощи пестика для гомогенизации и, добавив раствор для разведения образцов, центрифугируют.

Основным недостатком известного способа является его нетехнологичность, заключающаяся в использовании в нем жидкого азота, для получения и хранения которого требуется узкоспециализированное оборудование.

Задачей заявляемого технического решения является создание технологичного способа пробоподготовки тканей клеща.

Технический результат, получаемый от использования изобретения, заключается в обеспечении простого и надежного процесса пробоподготовки тканей клеща без использования дорогостоящей техники и снижении трудозатрат на стадии гомогонезации клеща.

Технический результат достигается за счет того, что в способе пробоподготовки тканей клеща ткани клеща промывают в 70-80%-ном растворе этилового спирта, высушивают при помощи фильтровальной бумаги или любой другой бумажной салфетки плотной текстуры и помещают в пробирку, затем в пробирку с клещом добавляют 100-200 мкл лизирующего буфера и производят растирание тканей клеща в растворе в этой же пробирке, а полученный гомогенат центрифугируют в течение 2-10 мин при 2000-6000 об/мин.

Высушивание можно осуществлять при помощи фильтровальной бумаги или любого бумажного полотенца.

Растирание тканей клеща можно осуществлять при помощи скальпеля или пестика для гомогенизации.

Лизирующий буфер включает NaCl 145 мМ, Na2HPО4 10 мМ, KH24 1,76 мМ, pH 7,4, NP-40 0,5%, казеин 2,5%, Проклин 300 0,1%.

Для каждого образца клеща следует использовать отдельный пестик во избежание контаминации. Для повторного использования пестик необходимо инактивировать: смочить в 95% этиловом спирте и поджечь на спиртовке, а затем остудить.

Подготовленные для анализа образцы тканей клещей можно хранить в течение 3 ч при температуре 2-8°C или в течение 3-х месяцев при температуре не выше минус 20°C.

Использование в заявляемом способе определенных диапазонов режимов центрифугирования обусловлено достижением требуемых параметров растворения тканей клеща. Результаты опытов приведены в таблице 1.

Поскольку одним из применений описанной пробоподготовки клеща является полимеразная цепная реакция, поэтому помимо визуальной оценки состояния надосадочной жидкости и осадка, проводили проверку получаемой надосадочной жидкости методом полимеразной цепной реакции. Анализ образца методом полимеразной цепной реакцией проводили следующим образом: к гомогенизированному образцу клеща добавляли плазмиду pQE30, содержащую ген GFP. Далее, к 5 мкл образца затем добавляли 5 мкл 5×ПЦР-буфера, 0,5 мкл 10 мкМ dNTP, 0,75 мкл 100 мМ MgCl2, 1 мкл 5 мкМ прямого праймера, 1 мкл 5 мкМ обратного праймера, 3 мкл 5 мкМ флуоресцентно меченной пробы, 1 ед.акт. ДНК-полимеразы. Смесь тщательно перемешивали на вортексе и проводили полимеразную цепную реакцию с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени по программе: 45 циклов: 95°C 15 сек, 60°C 30 сек. Флуоресцентную детекцию проводили при 60°C. Детектируемые прибором значения порогового цикла (Ct) использовали для оценки состояния надосадочной жидкости.

Из полученных данных видно, что при скорости центрифугирования 1000 об/мин в диапазоне продолжительности центрифугирования от 2 до 10 мин наблюдалось неполное осаждение фрагментов клеща, формирование неплотного (подвижного) осадка (что затрудняло отбор надосадочной жидкости без частиц осадка), что, в конце концов, приводило к сдвигу Ct в сторону больших циклов при анализе образца методом ПЦР.

В диапазоне скоростей центрифугирования от 2000 до 6000 об/мин при временах от 2 до 10 мин наблюдалось формирование прозрачной надосадочной жидкости, плотного осадка, приемлемые значения Ct при анализе образцов методом ПЦР.

При больших (более 6000 об/мин) значениях центрифугирования при продолжительности центрифугирования от 2 до 10 мин не наблюдалось заметных отличий получаемых результатов от тех, что получены при скорости центрифугирования 6000 об/мин при 2-10 мин.

Простота описанного способа обусловлена тем, что для его реализации требуется проведение 3 последовательных этапов: 1. Промывка клеща в 70% спирте, 2. Высушивание клеща фильтровальной бумагой или бумажным полотенцем, 3. Гомогенизация клеща в лизирующем буфере, в то время, как для реализации способов-аналогов требуется либо большее количество стадий (например, патент RU №2134871), либо привлечение специализированного оборудования для работы и хранения жидкого азота, специальных одноразовых гомогенизаторов, предназначенных для работы с жидким азотом, что не всегда реализуемо в условиях лаборатории (http://www.bio-ua.com/index.php/prod?i=166&PHPSESSID=3fl72c88947d863e65bb76f2a0ff3bb2).

Надежность реализации способа оценивали методом ПЦР. Из данных, приведенных в таблице 1, видно, что в указанном диапазоне параметров центрифугирования образцы определялись как положительные.

Примеры конкретного выполнения способа.

Пример 1.

Клеща промывают 70%-ным раствором этанола, выкладывают на чистую бумажную салфетку и высушивают клеща 2 минуты. Помещают в пробирку типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл. В пробирку с клещом добавляют 150 мкл лизирующего буфера. Клеща в растворе тщательно гомогенизируют при помощи скальпеля. Полученную суспензию центрифугируют в течение 2 минут при 3000 об/мин.

Пример 2.

Клеща промывают 75%-ным раствором этанола, выкладывают на чистую бумажную салфетку и высушивают клеща 2 минуты. Помещают в пробирку типа «Эппендорф» объемом 0,6 мл. В пробирку с клещом добавляют 120 мкл лизирующего буфера. Клеща в растворе тщательно гомогенизируют при помощи скальпеля или пестика для гомогенизации клещей (каталожный №Е-9259 ЗАО «Вектор-Бест»). Полученную суспензию центрифугируют в течение 5 минут при 2000 об/мин.

Пример 3.

Пинцетом захватывают клеща и помещают в емкость с 80% этанолом, затем клеща перемещают на чистую сухую фильтровальную бумагу для высушивания клеща. Клеща переносят в одноразовую пробирку типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл. В пробирку с клещом добавляют 200 мкл лизирующего буфера. Клеща тщательно гомогенизируют при помощи пестика для гомогенизации клещей (каталожный №Е-9259 ЗАО «Вектор-Бест»).

Полученную суспензию перемешивают на Vortex в течение 30 секунд. Далее гомогенизат центрифугируют в течение 3 минут при 4000 об/мин.

Таким образом, заявляемый способ пробоподготовки тканей клеща позволяет обеспечить технологичность процесса без использования дорогостоящего оборудования.

1. Способ пробоподготовки тканей клеща, включающий промывку тканей клеща 70-80% раствором этилового спирта, его высушивание, помещение в пробирку, растирание и центрифугирование, отличающийся тем, что перед растиранием в пробирку добавляют 100-200 мкл лизирующего буфера, само растирание тканей клеща производят в растворе в этой же пробирке, а полученный гомогенат центрифугируют в течение 2-10 мин при 2000-6000 об/мин.

2. Способ пробоподготовки тканей клеща по п.1, отличающийся тем, что для высушивания используют фильтровальную бумагу.

3. Способ пробоподготовки тканей клеща по п.1, отличающийся тем, что для высушивания используют бумажное полотенце.

4. Способ пробоподготовки тканей клеща по п.1, отличающийся тем, что для растирания клеща используют пестик для гомогенизации.

5. Способ пробоподготовки тканей клеща по п.1, отличающийся тем, что для растирания клеща используют скальпель.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к держателю предметного стекла, в частности предназначенному для автоматизированной обработки предметных стекол устройству держателя предметного стекла, а также технологии автоматической обработки материала, зафиксированного на предметном стекле.

Настоящее изобретение относится к отбору проб жидкости, которая находится в эластичном закрытом контейнере, например, в контейнере для сбора мочи или крови. Устройство для отбора жидкости, находящейся в эластичном контейнере (13, 14), содержит первую секцию (20), имеющую базовую поверхность (21), и элемент (22) для перфорирования пленки, выступающий от базовой поверхности (21).

Изобретение относится к технологии и технике отбора проб жидкости из трубопровода, резервуаров, различных емкостей и может найти применение в нефтедобывающей и других отраслях промышленности, где требуется осуществление отбора представительной пробы ручным или автоматическим способом.

Изобретение относится к устройству автоматического дозирования, доставки проб различных сыпучих материалов пневмопочтой в контейнерах для химического и физического анализа на горно-обогатительных, металлургических, химических и др.
Изобретение относится к способу пробоподготовки биоорганических, в том числе медицинских, образцов для определения в них изотопного соотношения 14С/12С и 14С/13С с помощью ускорительного масс-спектрометра (УМС).

Изобретение относится к области биотехнологии. Система состоит из следующих элементов: а) модуля подготовки образца, выполненного с возможностью захвата аналита из биологического образца в немикрожидкостном объеме на захватывающей частице, реагирующей на магнитное поле, и направления связанной с аналитом захватывающей частицы, реагирующей на магнитное поле, через первый микрожидкостный канал; б) реакционного модуля, включающего реакционную камеру, имеющую жидкостное сообщение с первым микрожидкостным каналом, и выполненного с возможностью иммобилизации связанной с аналитом захватывающей частицы, реагирующей на магнитное поле, и проведения реакции амплификации множества STR-маркеров аналита.

Группа изобретений относится к способу количественного переноса аналитических образцов и устройству для его осуществления. Способ заключается в переносе количества аналитов, таких как микроорганизмы, антитела/антигены, вещества антибактериального действия, нуклеотиды, антибиотики, гормоны, последовательности ДНК, ферменты, органический материал, биологический материал или материал биологического происхождения, обогащающие добавки или селективные добавки для сред культивирования.

Группа изобретений относится к способу, вариантам системы и устройству для анализа, локализации и/или идентификации видов тканей и может быть использована в операционной, преимущественно как интегрированная часть одного или более хирургических инструментов или рассекающих инструментов.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для использования при экспериментальных паразитологических исследованиях в лабораторных условиях. Способ включает отбор только живых, половозрелых самок Trichuris vulpis из толстой, слепой кишок спонтанно зараженных трихоцефалами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии диких или/и домашних хищных в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия (solutio Natrii chlorati isotonica) и экспозицией пробирок с самками Trichuris vulpis при t=37,5°C - 39°C в течение 5 часов в условиях термостата.

Изобретение относится к области медицины и биологии, а именно к способу дополнительного электронноплотного контрастирования кислых групп биомолекул при гистохимическом выявлении катионов натрия в ультраструктурах клеток и тканей легких и трахеи.

Изобретение относится к табачной отрасли и предназначено для использования в исследовательских лабораториях. Установка для отбора пробы газовой фазы дыма кальяна состоит из четырех отдельных линий, связанных соединительными трубками в одной точке. В первую линию входят кальян и запорный вентиль. Во вторую линию входят компрессор, создающий разряжение, газометр, осуществляющий измерение затяжки заданного объема, ротаметр, контролирующий объемный расход газов, запорный вентиль для осуществления затяжки и регулировочный вентиль для установки заданного объемного расхода. Третья линия состоит из резервуара для накопления газов и вытеснения их водой, мерной емкости для слива воды из резервуара и двух вентилей для заполнения резервуара водой и ее слива. Четвертая линия содержит герметичный мешок для сбора пробы газа с перекрывающим клапаном и фильтр для очистки дыма от твердожидкой фазы. Установка позволяет осуществить сбор большого количества проб газа и исследовать широкий диапазон факторов, влияющих на состав газовой фазы дыма кальяна. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.

Группа изобретений относится к области экспериментальной биологии и медицины для приготовления тотальных препаратов биологических тканей для оптической проекционной томографии, конфокальной, мультифотонной и светоплоскостной микроскопии и может быть использована для предклинических испытаний фармакологических препаратов и оценки физиологических воздействий на организм, а также для работы с материалом биопсий в диагностических и исследовательских целях. Способ иммуногистохимического окрашивания тотальных препаратов образцов биологической ткани включает фиксацию ткани раствором параформальдегида. Также способ включает постфиксацию, которую сначала проводят 0,5-1%-ным параформальдегидом в течение 48 ч при 4°C, а затем после трехкратной отмывки фосфатным буфером при комнатной температуре, в растворе 20%-ного диметилсульфоксида в 100%-ном метаноле в течение 1-2 ч при комнатной температуре. После этого образец ткани отбеливают в растворе, содержащем 100%-ный метанол:диметилсульфоксид: 30% Н2О2 в соотношении 4:1:1, в течение 2-4 ч на ярком свету при комнатной температуре до полного обесцвечивания. Затем образец отмывают 3 раза по 60 мин в 100%-ном метаноле при комнатной температуре и замораживают не менее чем на 1 час при -70…-80°C, после чего регидратируют последовательно в 50, 25 и 12,5%-ных растворах метанола в фосфатном буфере по 45-60 мин в каждом при комнатной температуре. Затем образцы трижды отмывают от метанола фосфатным буфером, причем два раза отмывают по 1-2 ч при комнатной температуре, а последнюю отмывку проводят в течение ночи при 4°C. Последующую пермеабилизацию образца проводят в фосфатном буфере, содержащем 2%-ный Triton Х-100, 5%-ную нормальную сыворотку, 5%-ный диметилсульфоксид, в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем образец отмывают трижды в фосфатном буфере, содержащем 0,2%-ный Triton Х-100, причем два раза отмывают по 30-60 мин при комнатной температуре, а последнюю отмывку проводят в течение ночи при 4°C. После этого проводят инкубацию последовательно в растворах первичных и вторичных антител, приготовленных на буфере, состоящем из 0,05 М Tris-HCl с pH 7,5; 0,15 М NaCl; 0,2% Triton Х-100, 5% диметилсульфоксид и 2,5-5,0% нормальной сыворотки животного-хозяина вторичных антител, при 4°C в течение 2-7 суток, с отмывками после каждой инкубации в буфере, состоящем из 0.05 М Tris-HCl с pH 7,5; 0,15 М NaCl; 0,2% Triton Х-100, сначала 3 раза по 60 мин при комнатной температуре, а затем в течение ночи при 4°C. Окрашенные образцы дегидратируют последовательно в 50, 96%-ных растворах этанола в фосфатном буфере по 45-60 мин в каждом при комнатной температуре. Затем образцы выдерживают сначала в 100%-ном этаноле при комнатной температуре 2-3 раза по 45-60 мин, а после в 2-бутоксиэтаноле при 4°C в течение 12-18 ч. Дегидратированные образцы просветляют при комнатной температуре в смеси бензил бензоата:бензиловый спирт, взятых в соотношении 2:1 в течение 3-4 ч. При этом способ окрашивания, начиная с операции постфиксации, проводят при помешивании со скоростью 650-800 об/мин. Второй вариант способа заключается в том, что инкубацию проводят в растворе флуоресцентно-меченных первичных антител, приготовленных на буфере, состоящем из 0,05 М Tris-HCl с pH 7,5; 0,15 М NaCl; 0,2% Triton Х-100, 5% диметилсульфоксид и 2,5-5.0% нормальной сыворотки, при 4°C в течение 2-7 суток. Достигаемый при этом технический результат заключается в осуществлении окрашивания тотальных препаратов образцов биологических тканей с сохранением их морфологии и обеспечением более широкого охвата выявляемых антигенов, а также в возможности проведения количественного анализа иммуногистохимически выявленных меток за счет высокого соотношения фон-сигнал и снижения аутофлуоресценции. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 пр.

Изобретение относится к определению механических характеристик труб, а именно к моделям, предназначенным для испытаний материалов труб малого диаметра на трещиностойкость, и может быть использовано при производстве и эксплуатации труб. Модель изготавливают в виде кольца, вырезанного из исследуемой трубы, а имитатор усталостной трещины выполняют в виде симметричных и диаметрально противоположных сквозных надрезов на одном из торцов модели вдоль образующей кольца. Технический результат: создание модели, обеспечивающей повышение достоверности определения трещиностойкости труб малого диаметра. 1 ил.

Изобретение предназначено для оценки деформативности соединений в изделиях из импрегнированной ткани, подвергаемых двухосному напряжению неразрушающими нагрузками с целью определения деформативных характеристик пневматической конструкции в целом. Образец для испытания соединений импрегнированной ткани включает соединение двух Т-образных деталей, расположенное по оси образца в одном из двух взаимоперпендикулярных направлений. Способ испытания образца соединений импрегнированной ткани, осуществляемый с возможностью учета соединения при оценке напряженно-деформированного состояния опытного образца, вызванного двухосным растяжением, за счет корректировки прикладываемых к образцу усилий из условия обеспечения идентичности его напряженного состояния состоянию образца без соединения. Изобретение обеспечивает сохранение в последующем заданной формы изделия, подвергаемого испытанию. 2 н.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к технологии контроля качества измерений, проводимых с использованием компьютерных систем анализа изображений, и может быть использовано для оценки систематической погрешности морфологических характеристик структуры материалов тел в конденсированном состоянии. Способ включает получение изображения поверхности стандартного образца, обработку этого изображения и выделение на нем объектов измерений, проведение измерений и сравнение полученного результата с опорным значением. В качестве стандартного образца используют поверхность с имитациями структуры материала, рисунок которой получен цифровой обработкой изображения репрезентативного участка этого материала, подготовленного в соответствии с оцениваемой методикой. Стандартный образец содержит поверхность, на которой с сохранением масштаба сформированы имитации структуры материала, рисунок которой получен цифровой обработкой изображения репрезентативного участка этого материала, подготовленного в соответствии оцениваемой методикой. При этом обеспечивается оценка и контроль показателей точности методики измерений в целом, упрощается технология оценки и контроля за счет исключения подготовки репрезентативного участка поверхности образца, а также повышается стабильность метрологических характеристик стандартного образца и обеспечивается возможность тиражировать его в неограниченном количестве при идентичности всех производимых экземпляров. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 7 ил.

Изобретение относится к области технического обустройства нефтедобычи, в частности к обеспечению поточных измерений количества и показателей качества скважинного флюида. Способ измерения показателя качества скважинного флюида включает дегазацию потока флюида и измерение по меньшей мере одного показателя качества дегазированной жидкости, выходящей из сепаратора. При этом измерение по меньшей мере одного показателя качества дегазированной жидкости производят на части выходящей из сепаратора дегазированной жидкости, которую перепускают по возвратному контуру на вход сепаратора с обеспечением постоянства расхода возвратного потока дегазированной жидкости. Кроме того, осуществляют гомогенизацию дегазированной жидкости перед измерением по меньшей мере одного показателя качества. Изобретение позволяет повысить точность измерения показателей качества скважинного флюида за счет обеспечения постоянного расхода возвратного потока дегазированной жидкости через средства измерения с помощью насоса. 2 з.п. ф-лы, 2 ил.
Группа изобретений относится к получению стандартных образцов состава крови, содержащих ртуть, кадмий и свинец, и может быть использована в токсикологии, медицине и ветеринарии при определении содержания указанных токсичных металлов в крови. Способ получения биологического референтного материала для производства стандартных образцов состава крови, содержащих токсичный металл, включает введение в организм животного, по меньшей мере, одного токсичного металла в виде его водорастворимой соли, отбор крови животного после анализа на содержание в ней токсичного металла, а также замораживание отобранной крови и ее лиофилизацию. При этом введение в организм животного токсичного металла в виде его водорастворимой соли осуществляют парентерально путем инъекций животному водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, или водорастворимую соль кадмия, или водорастворимую соль свинца, или водного раствора, содержащего водорастворимую соль ртути, водорастворимую соль кадмия и водорастворимую соль свинца. Группа изобретений относится также к биологическому референтному материалу, полученному указанным способом. Группа изобретений обеспечивает быстрое контролируемое накопление в крови животных указанных выше токсичных металлов, что позволяет получить референтные материалы, пригодные для изготовления стандартных образцов крови, содержащих ртуть, кадмий, свинец. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 пр.

Изобретение относится к области анализа текучей среды и может быть использовано для выполнения анализа проб жидкости при помощи дистанционного анализатора. Система для перемещения текучей среды от источника жидкости к дистанционному анализатору содержит капиллярную линию, соединяющую источник жидкости и анализатор проб жидкости. Система выполнена таким образом, что при ее работе жидкость протекает от источника к анализатору проб жидкости по капиллярной линии, которая образует замкнутый контур между источником жидкости и анализатором. Система включает средства для перекачки пробы жидкости по капиллярной линии, причем объем пробы жидкости, перемещаемой по капиллярной линии, мал по сравнению с объемом жидкости в источнике жидкости. При этом обеспечивается возможность непрерывного или автоматического анализа текучей среды, а также анализа в реальном времени за счет регулирования пределов чувствительности. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 9 ил.
Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской диагностике, и описывает способ прогнозирования выживаемости у больных с метастазами колоректального рака в печени после ее резекции. Способ включает исследование опухолевых биоптатов печени после ее резекции с помощью иммуногистохимического метода и анализ характеристик микроокружения опухоли, а именно величины площади стромы, наличия и величины площади лимфоцитарной инфильтрации, наличия и количества сосудов с гладкомышечным актином в их стенке в опухолевой строме метастаза печени в трех полях зрения микроскопа, при этом поля зрения выбирают по максимально выраженной иммуногистохимической реакции и при наличии не менее чем в двух полях зрения микроскопа величины площади стромы 50% и более от общей площади поля зрения, величины площади лимфоцитарной инфильтрации 50% и более от опухолевой стромы, наличия сосудов с полноценно развитой гладкой мускулатурой в их стенке пациента определяют в группу благоприятного прогноза общей выживаемости, а при величине площади стромы менее 25% от общей площади поля, отсутствии лимфоцитарной инфильтрации или ее площади менее 10% от площади стромы и отсутствии сосудов с гладкомышечным актином в опухолевой строме метастаза печени не менее чем в двух полях зрения микроскопа пациента определяют в группу неблагоприятного прогноза. Способ повышает точность прогноза общей выживаемости после резекции печени по поводу метастатического колоректального рака и может быть использован в хирургии и онкологии. 7 пр., 1 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, гистологии и патологической анатомии, и может быть использовано для оценки анаболического действия лекарственных препаратов. Сущность заявляемого способа заключается в том, что дополнительно определяют интенсивность биосинтетических процессов в миосимпластах путем подсчета среднего количества гранул серебра на 1 ядро и определения процентного содержания ядер с 1, 2, 3 и более гранулами, на основании которого делают заключение об анаболическом действии лекарственных препаратов. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности морфологической оценки анаболического действия лекарственных препаратов за счет применения комплекса современных методов исследования (гистологического, гистохимического и морфометрического). Заявляемый способ обладает высокой точностью, прост в применении, эффективен и легко выполним в любой гистологической лаборатории. 2 пр.
Наверх