Кислородо-проницаемая камера для хранения живых микроорганизмов и контейнер для транспортировки живых микроорганизмов

Авторы патента:

ПИРС Джереми Д. (GB)

КАРПЕНТЕР Мэри Энн (GB)

ХОАР Энтони Роберт (GB)

C12M1/00 - Устройства для работы с ферментами или микроорганизмами

Владельцы патента RU 2562860:

БАСФ Корпорейшн (US)

Группа изобретений относится к области биотехнологии, в частности к оборудованию для хранения живых микроорганизмов и контейнеру для транспортировки живых микроорганизмов. Кислородо-проницаемая камера для хранения живых микроорганизмов содержит две стенки, соединенные друг с другом вдоль каждой внешней границы двух стенок с образованием внутренней полости. Каждая из двух стенок включает первую пленку, определяющую внутреннюю стенку камеры, причем первая пленка имеет тонкую проницаемую для кислорода эластичную пленку и обладает проницаемостью для кислорода, составляющей по меньшей мере, 5500 см³/м²/день, и расположенную поблизости от внешней поверхности первой пленки вторую пленку, включающую множество перфорационных отверстий, причем вторая пленка механически прочнее и более устойчива к проколам, чем первая пленка. Одна из двух стенок имеет горлышко для сообщения по текучей среде с внутренней полостью камеры. Кислородо-проницаемая камера может дополнительно иметь крышку. Первая пленка стенки камеры может иметь толщину в интервале от 15 мкм до 100 мкм, предпочтительно от 15 мкм до 90 мкм, и включает полиэтилен или полипропилен. Вторая пленка стенки камеры может иметь толщину в интервале от 40 мкм до 80 мкм и включает полиэфир, полиэтилен, полипропилен или полиамид. Каждое из множества перфорационных отверстий второй пленки может иметь диаметр в интервале от 0,1 мм до 3 мм. Первая и вторая пленки стенки камеры могут быть скреплены друг с другом только по каждой внешней границе двух стенок, в частности только вдоль четырех внешних границ. Контейнер для транспортировки живых микроорганизмов представляет собой по существу жесткий внешний контейнер и выполнен с возможностью для размещения внутри него кислородно-проницаемой камеры. Группа изобретений позволяет обеспечить повышение жизнеспособности микроорганизмов при их хранении и транспортировке и удобства пользования. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл.

Область техники

Различные примеры воплощения, раскрытые в данном документе, относятся к контейнеру с улучшенной проницаемостью для кислорода для хранения и транспортировки микроорганизмов. Более конкретно, некоторые примеры воплощения относятся к контейнеру, имеющему тонкую внутреннюю стенку и внешнюю стенку с перфорационными отверстиями.

Уровень техники

Жидкие инокуляты клубеньковых бактерий (rhizobium) стали широко доступными в последние годы. Инокулят упаковывали, главным образом, для продажи и отгрузки в контейнеры "пакет в коробке" ("BIB"), которые, как правило, состоят из пластикового пакета или камеры, расположенных внутри картонной коробки. Для иллюстративных целей понятно, что контейнеры BIB используются для хранения продуктов, таких как вино и фруктовые соки.

Во время транспортировки и хранения жидких инокулятов, целесообразно, чтобы количество жизнеспособных клеток оставалось высоким, а также чтобы клубеньковые бактерии сохраняли жизнеспособность при применении к семенам перед посевом. Жидкие инокуляты клубеньковых бактерий не являются продуктами, находящимися в состоянии покоя, микробные клетки активно дышат, приводя к потребности в кислороде. В результате упаковка инокулятов должна обладать проницаемостью для кислорода. Другим микроорганизмам для целей хранения и транспортировки также требуется упаковка, которая бы обладала проницаемостью для кислорода.

Известные контейнеры BIB для упаковки жидких инокулятов клубеньковых бактерий представляют собой пакеты, сделанные из полиэтилена низкой плотности ("LDPE") или из его родственных вариантов, таких как полиэтилен очень низкой плотности ("VLDPE"). Предполагается, что эти пленки являются безбарьерными пленками. То есть они проницаемы для кислорода и диоксида углерода. Камеры, используемые в данных контейнерах BIB, как правило, сделаны из однослойных пленок или из двухслойных пленок, причем и те и другие сделаны из одного и того же материала, который, как правило, непроницаем для жидкости.

В данной области существует необходимость для создания улучшенной упаковки для жидких инокулятов клубеньковых бактерий и других микроорганизмов.

Краткое изложение сущности изобретения

В данном документе раскрыты разнообразные конструкции кислородо-проницаемых камер для хранения и транспортировки живого материала, включающего микроорганизмы.

В Примере 1, кислородо-проницаемая камера включает две стенки, соединенные друг с другом по внешней границе каждой из двух стенок. Каждая из двух стенок включает первую пленку и вторую пленку. Первая пленка определяет внутреннюю стенку камеры и включает тонкую безбарьерную эластичную пленку. Вторая пленка располагается поблизости от внешней поверхности первой пленки и включает множество перфорационных отверстий.

Пример 2 относится к камере согласно примеру 1, где первая пленка обладает кислородной проницаемостью, составляющей по меньшей мере 5500 см³/м²/день.

Пример 3 относится к камере согласно Примеру 1, где одна из двух стенок включает горлышко, отходящее от одной из двух стенок, причем горлышко определяет отверстие для сообщения по текучей среде с внутренней полостью камеры.

Пример 4 относится к камере согласно примеру 3 и дополнительно включает крышку, сконструированную так, что она способна присоединяться к горлышку.

Пример 5 относится к камере согласно примеру 1, где первая пленка имеет толщину в интервале от примерно 15 мкм до примерно 90 мкм.

Пример 6 относится к камере согласно примеру 1, где первая пленка включает полиэтилен или полипропилен.

Пример 7 относится к камере согласно примеру 1, где вторая пленка механически прочнее и более устойчива к проколам, чем первая пленка.

Пример 8 относится к камере согласно примеру 1, где вторая пленка имеет толщину в интервале от примерно 40 мкм до примерно 80 мкм.

Пример 9 относится к камере согласно примеру 1, где вторая пленка включает полиэфир, полиэтилен, полипропилен или полиамид.

Пример 10 относится к камере согласно примеру 1, где каждое из множества перфорационных отверстий имеет диаметр в интервале от примерно 0,1 мм до примерно 3 мм.

Пример 11 относится к камере согласно примеру 1, где первая и вторая пленки скреплены друг с другом только по каждой внешней границе двух стенок.

Пример 12 относится к камере согласно примеру 1, где камера сконструирована так, чтобы быть расположенной внутри внешнего контейнера.

В Примере 13, кислородо-проницаемая камера включает по меньшей мере одну стенку. Указанная по меньшей мере одна стенка включает внутреннюю кислородо-проницаемую пленку, внешнюю перфорированную пленку и скрепляющее соединение. Внутренняя кислородо-проницаемая пленка включает безбарьерную эластичную пленку. Внешняя перфорированная пленка располагается поблизости, но без соединения по реальному длинному участку внешней перфорированной пленки с внутренней кислородо-проницаемой пленкой. Скрепляющее соединение сконструировано для скрепления внутренней кислородо-проницаемой пленки с внешней перфорированной пленкой, и расположено около внешнего участка по меньшей мере одной стенки.

Пример 14 относится к камере согласно примеру 13, где внутренняя кислородо-проницаемая пленка обладает кислородной проницаемостью, составляющей по меньшей мере 5500 см³/м²/день.

Пример 15 относится к камере согласно примеру 13, где одна из по меньшей мере одной стенки включает горлышко и крышку. Горлышко связано с указанной одной из по меньшей мере одной стенки и определяет отверстие для сообщения по текучей среде с внутренней полостью камеры. Крышка сконструирована с возможностью соединения с горлышком.

Пример 16 относится к камере согласно примеру 13, где внешняя перфорированная пленка механически прочнее, чем внутренняя кислородо-проницаемая пленка.

В Примере 17, контейнер для транспортировки живых микроорганизмов включает по существу жесткий внешний контейнер и кислородо-проницаемую камеру, сконструированную так, чтобы помещаться внутри по существу жесткого внешнего контейнера. Кислородо-проницаемая камера включает внутреннюю пленку и внешнюю пленку. Внутренняя пленка включает безбарьерную эластичную пленку с толщиной в интервале примерно от 15 мкм примерно до 100 мкм. Внешняя пленка располагается поблизости от внутренней пленки и включает множество перфорационных отверстий. Кроме того, внешняя пленка прикреплена к внутренней пленке только вдоль четырех внешних границ внешней пленки.

Пример 18 относится к камере согласно Примеру 17, где внутренняя пленка обладает проницаемостью для кислорода, составляющей по меньшей мере 5500 см³/м²/день.

Пример 19 относится к камере согласно Примеру 17, где внешняя пленка механически прочнее, чем внутренняя пленка.

Пример 20 относится к камере согласно примеру 17, где камера дополнительно включает горлышко, соединенное с камерой.

В то время как раскрыто множество примеров воплощения, другие примеры воплощения настоящего изобретения станут при этом очевидными для специалиста в данной области благодаря следующему подробному описанию изобретения, которое представляет и описывает иллюстративные воплощения изобретения. При реализации изобретение способно к модификациям в различных очевидных аспектах, не выходя при этом за рамки идеи и сущности настоящего изобретения. Соответственно, чертежи и подробное описание следует рассматривать как иллюстративные, а не ограничивающие.

Краткое описание чертежей

ФИГ.1A представляет собой схематический вид сбоку кислородо-проницаемой камеры согласно конкретному воплощению.

ФИГ.1B представляет собой перспективное изображение камеры ФИГ.1A.

ФИГ.2 представляет собой линейный график, сравнивающий жизнеспособность в течение времени при 7°C для микроорганизмов в коммерчески доступной камере по сравнению с двухслойной камерой согласно конкретному воплощению.

ФИГ.3 представляет собой линейный график, сравнивающий жизнеспособность в течение времени при 22°C для микроорганизмов в коммерчески доступной камере по сравнению с двухслойной камерой согласно конкретному воплощению.

ФИГ.4 представляет собой линейный график, сравнивающий выживаемость в течение времени при 22°C для микроорганизмов на семенах после хранения в коммерчески доступной камере, по сравнению с двухслойной камерой согласно конкретному воплощению.

ФИГ.5 представляет собой линейный график, сравнивающий жизнеспособность в течение времени при 4-5°C для микроорганизмов в коммерчески доступной камере по сравнению с двухслойной камерой согласно конкретному воплощению.

Подробное описание

Разнообразные примеры воплощения, раскрытые в данном документе, относятся к улучшенным контейнерам BIB для микроорганизмов, включающих жидкие инокуляты клубеньковых бактерий, и относятся к способам получения таких контейнеров. Воплощения включают контейнеры, содержащие камеры с повышенной проницаемостью для кислорода, которые могут улучшать обеспечение микроорганизмов кислородом, приводя в результате к лучшей жизнеспособности при хранении и к последующей эффективности микроорганизмов при применении. Как правило, разнообразные воплощения камер, раскрытые в данном документе, имеют двухслойные стенки, где каждая стенка содержит две несвязанные пленки: внутреннюю пленку и внешнюю перфорированную пленку.

На Фиг.1A и 1B изображено конкретное воплощение проницаемого контейнера 10 для применения в контейнере BIB. Структура данного контейнера 10 является наиболее распространенной для камер, используемых в контейнерах BIB. То есть контейнер 10 имеет две стенки 12, 14, которые фиксированы, скреплены, приклеены или соединены другим способом друг с другом вдоль каждой из четырех границ 16, 18, 20, 22 (лучше всего представлено на ФИГ.1B), определяя таким образом внутреннюю полость 24 контейнера 10. Согласно конкретному воплощению, две стенки 12, 14 скреплены вместе по границам 16, 18, 20, 22 с использованием процесса нагревания. Альтернативно, стенки 12, 14 могут быть скреплены вместе по границам 16, 18, 20, 22 с использованием клея. Альтернативно, может использоваться любой известный способ или состав для соединения двух стенок 12, 14 вместе. В следующей альтернативе, контейнер может быть сформирован с помощью любой известной конструкции, которая приводит в результате к получению контейнера, имеющего внутреннюю полость и двухслойные кислородо-проницаемые стенки согласно любому из множества воплощений, раскрытых в данном документе. Лучше всего это представлено на ФИГ.1B, где контейнер 10 также может иметь горлышко 26, расположенное на контейнере 10 для обеспечения доступа жидкости во внутреннюю полость 24. Горлышко 26 также может иметь крышку 28, расположенную на горлышке 26.

Согласно конкретному воплощению, каждая из стенок 12, 14 является "двухслойной" или "сдвоенной" стенкой. То есть каждая имеет внутреннюю пленку 30 и внешнюю пленку 32. Две пленки 30, 32 физически не скреплены или не соединены каким-либо другим способом друг с другом вдоль длины полости 24. Вместо этого, пленки 30, 32 просто располагаются поблизости или в контакте друг с другом в неприкрепленном или в несвязанном виде и прикреплены друг к другу только по каждой из границ 16, 18, 20, 22, как описано выше.

Внутренняя пленка 30, согласно конкретному воплощению, представляет собой тонкую пленку, которая обладает высокой проницаемостью для кислорода. Пленка 30 может быть легковесной, высокопроницаемой пленкой. Согласно конкретному воплощению, пленка 30 тоньше и, таким образом, обладает меньшей прочностью и, следовательно, является более проницаемой, чем требуется в известных двухслойных контейнерах. В конкретном воплощении, внутренняя пленка 30 сделана из смеси полиэтилена высокой плотности ("HDPE") полиэтилена ультранизкой плотности (ULDPE"). Альтернативно, внутренняя пленка 30 может быть сделана из различных типов полиэтилена, включая, в частности, любой один тип или несколько из HDPE, полиэтилена средней плотности ("MDPE"), полиэтилена низкой плотности ("LDPE"), полиэтилена очень низкой плотности ("VLDPE"), ULDPE, линейного полиэтилена низкой плотности ("LLDPE"), металлосодержащего линейного полиэтилена низкой плотности ("mLLDPE") и полиэтилена низкого давления ("LPPE"). Согласно другой альтернативе, внутренняя пленка 30 может быть сделана из полиэтилена. В следующей альтернативе, внутренняя пленка может представлять собой любую безбарьерную эластичную пленку, включающую любую однослойную пленку, используемую в известных камерах BIB, включая те однослойные пленки, которые используются в двухслойных камерах. Для целей данного применения, "безбарьерная эластичная пленка" обозначает любую тонкую, эластичную полимерную пленку, которая проницаема для кислорода.

Внутренняя пленка 30, в одном воплощении, представляет собой экструдированную (или соэкструдированную) пленку. В данном воплощении, пленка 30 может быть изготовлена с использованием стандартного экструзионного способа путем сначала слияния или смешивания вместе в экструдере различных компонентов, таких как любой один или несколько из типичных компонентов, описанных выше. Затем экструдер образует гомогенную пленку с использованием этих компонентов. Альтернативно, внутренняя пленка 30 может быть сделана с помощью любого известного экструзионного способа.

Согласно конкретному воплощению, внутренняя пленка 30 может иметь толщину в интервале примерно от 15 мкм примерно до 90 мкм. Альтернативно, внутренняя пленка 30 имеет толщину, составляющую примерно 50 мкм.

В одном типичном воплощении, внутренняя пленка 30 представляет собой смесь коммерчески доступного полимера и HDPE. Более конкретно, коммерчески доступный полимер продается под торговой маркой Dow Affinity PF 1140G, который доступен в Dow Chemical Co., расположенной в Мидлэнде, штат Мичиган. В конкретном воплощении, полученная в результате внутренняя пленка 30 состоит примерно на 82% из Dow-полимера и примерно на 18% из HDPE. Как представлено в Таблице 1, где показано сравнение проницаемости данной конкретной внутренней пленки 30 со стандартной пленкой LDPE, внутренняя пленка 30 обладает проницаемостью для кислорода, составляющей примерно 5977 см³/м²/день.

Таблица 1
Тип пленки	см³/м²/день
Внутренняя пленка (Dow Affinity PF 1140G)/HDPE	5977
Стандартная пленка	3300

Внешняя пленка 32, согласно конкретному воплощению, представляет собой пленку, имеющую множество перфорационных отверстий 30. Внешняя пленка 32 может быть сделана из полиэфирной/полиэтиленовой пленки, в которой пленка по составу состоит из смеси, представляющей собой 24% полиэфира и 76% полиэтилена. Дополнительно к полиэфиру и полиэтилену следующие неограничивающие примеры материалов включают полипропилен и полиамид. Альтернативно, внешняя пленка 32 может быть сделана из любой термосвариваемой ламинированной пленки. Термосвариваемая пленка может быть сделана из таких материалов, как LDPE или ULDPE. В следующей альтернативе, внешняя пленка 32 может быть сделана из любой эластичной пленки, включающей, например, пленки, сделанные из полиэфира. В одном конкретном воплощении, внешняя пленка 32 представляет собой смесь полиэфира и полиэтилена, которая коммерчески доступна в виде Corapan PS/LLE 12+40 в Corapack, которая располагается в Бренне в Италии, и в которой полиэфир составляет примерно 24% пленки и полиэтилен составляет примерно 76% пленки.

Согласно конкретному воплощению, внешняя пленка 32 представляет собой ламинированную пленку, которая может быть сформирована с использованием способа ламинирования. В одном примере, сначала формируют слой полиэфира и слой плиэтилена и затем их вместе ламинируют. В одном воплощении, два слоя ламинируют вместе с использованием клеевого слоя между ними. Альтернативно, два слоя могут ламинироваться вместе с использованием любого известного способа. Согласно конкретному воплощению, слой полиэтилена формируется с использованием известного способа получения пленки экструзией с раздувкой. Альтернативно, слой полиэтилена может быть сформирован с использованием любого известного способа. Слой полиэфира может быть сформирован с использованием известного способа получения пленки поливом. Альтернативно, слой полиэфира может быть сформирован с использованием любого известного способа.

В конкретном воплощении, внешняя пленка 32 обладает толщиной в интервале примерно от 40 мкм примерно до 80 мкм. Альтернативно, внешняя пленка 32 имеет толщину, составляющую примерно 52 мкм. Каждое из перфорационных отверстий имеет диаметр в интервале примерно от 0,1 мм примерно до 3 мм с шагом примерно от 5 мм примерно до 30 мм. Альтернативно, перфорационные отверстия могут иметь диаметр дырки примерно 1 мм с шагом примерно от 10 до 20 мм.

Внешняя пленка 32 механически прочнее, чем внутренняя пленка 30. Согласно конкретному воплощению, внешняя пленка 32 может быть механически прочнее, чем пленки, используемые в известных камерах BIB, имея при этом более высокую проницаемость для кислорода благодаря перфорационным отверстиям. То есть характеристики проницаемости внешней пленки 32, полученные в результате перфорации, не зависят от механических свойств пленки 32, с получением, таким образом, перфорированной внешней пленки, которая механически прочная и при этом высокопроницаема для кислорода. Таким образом, в некоторых воплощениях, внешняя пленка 32 обеспечивает контейнеру 10 механическую прочность и устойчивость к проколам. Эта прочность делает возможным для внутренней пленки 30 быть легковесной, высокопроницаемой, с меньшей прочностью, как описано выше.

Благодаря свойствам двух пленок 30, 32, в данном документе описаны различные варианты воплощений двухслойных стенок, обладающих высокой проницаемостью для кислорода, но при этом также имеющих достаточную прочность для сохранения жидких инокулятов внутри контейнера 10. В то время как различные известные камеры обладают проницаемостью для кислорода, большинство имеет только однослойную пленку или два слоя, которые физически скреплены друг с другом с получением одного слоя. Эти однослойные пленки жертвуют проницаемостью по отношению к толщине, требуемой для достижения прочности, необходимой для содержания жидкостей без разрушений или физических нарушений в какой-либо степени. В различных воплощениях, раскрытых в данном документе, воздухопроницаемая, высокопроницаемая тонкая внутренняя пленка объединяется с высокопроницаемой, но механически прочной перфорированной внешней пленкой, которая располагается поблизости, но без скрепления или физического соединения с внутренней пленкой, с созданием высокопроницаемой, но механически прочной стенки, которая может использоваться для содержания жидкостей, содержащих микроорганизмы.

Различные воплощения двухслойных стенок, имеющих внутреннюю и внешнюю пленки, раскрытые в данном документе, обладают, согласно конкретному воплощению, более высокой проницаемостью для кислорода, чем стандартные камеры, известные в данной области. Согласно конкретному воплощению, две пленки 30, 32 создают двухслойную стенку, обладающую суммарной проницаемостью для кислорода в интервале примерно от 4000 см³/м²/день примерно до 12000 см³/м²/день. Альтернативно, полученная в результате двухслойная стенка обладает суммарной проницаемостью для кислорода, составляющей примерно 6000 см³/м²/день. При условии что проницаемость конкретной известной стандартной двухслойной камеры (которая была сконструирована с использованием двух частей одной и той же пленки LDPE, коммерчески доступной в виде FlexiOne™ 27 в Scholle Packaging Inc., которая располагается в Нортлэйк, штат Иллинойс) составляет примерно 1650 см³/м²/день (по расчетам с использованием стандартного метода определения проницаемости, представленного как ASTM # F1927-28, который осуществлялся с помощью Исследовательской Ассоциации Упаковочной Промышленности (Packaging Industry Research Association) в Ледерхед, графство Суррей, Англия), данное конкретное двухслойное воплощение, обладающее проницаемостью, составляющей примерно 6000 см³/м²/день, демонстрирует проницаемость, которая на 363% выше, чем у известной камеры.

Понятно, что разнообразные воплощения проницаемых контейнеров или камер, описанных в данном документе, представляют собой в конкретных воплощениях проницаемые контейнеры или камеры, расположенные внутри внешнего контейнера (с получением, таким образом, контейнера, имеющего внешний контейнер и камеру, или с получением проницаемого контейнера, расположенного внутри внешнего контейнера, - конфигурации, как правило, обозначаемой как контейнер "пакет в коробке", как обсуждалось выше). В данных воплощениях, внешний контейнер может представлять собой любой известный внешний контейнер для применения в контейнерах BIB. В одном типичном воплощении, внешний контейнер представляет собой по существу жесткую картонную коробку. Альтернативно, рассматривается любой другой известный внешний контейнер.

Примеры

Пример 1 - Стабильность B. japonicum в Контейнерах при 7°C

Два образца по 12,4 литров ферментационного бульона Bradyrhizobium japonicum упаковывали в две различные камеры. Один образец упаковывали в стандартную двухслойную камеру, сделанную из FlexiOne™ 27, как описано выше (маркированную "Стандартная" на ФИГ.2), и второй образец упаковывали в двухслойную камеру конкретного воплощения (маркированной "Высокопроницаемая" на ФИГ.2). Двухслойная камера конкретного воплощения имеет размеры 460×600 мм, с внутренней пленкой с толщиной 50 мкм, которая была сделана из смеси 82% Affinity 1140 G и 18% HDPE, и с внешней пленкой, сделанной из перфорированной полиэфирной/полиэтиленовой пленки, содержащей 24% полиэфира и 76% полиэтилена.

Материал в обеих камерах хранили при 7°C и образцы отбирали в асептических условиях каждый месяц на протяжении 6 месяцев. Результаты представлены в графической форме на ФИГ.2. Как можно видеть на фигуре, через 12 недель бактерии, содержащиеся в известном стандартном BIB-контейнере, демонстрировали резкое снижение жизнеспособности. Напротив, содержание бактерий в двухслойной камере конкретного воплощения оставалось высоким до 26 недель.

Пример 2 - Стабильность B. japonicum в Контейнерах при 22ºC

Два образца по 6,4 литров ферментационного бульона Bradyrhizobium japonicum упаковывали в две различные камеры. Один образец упаковывали в такую же камеру, как описано в Примере 1 выше (маркированную "Стандартная" на ФИГ.3), и второй образец упаковывали в двухслойную камеру конкретного воплощения (маркированную "Высокопроницаемая" на ФИГ.3).

Материал в обеих камерах хранили при 22°C и образцы отбирали в асептических условиях каждый месяц на протяжении 6 месяцев. Результаты представлены в графической форме на ФИГ.3. Эти результаты демонстрируют, что хотя существует снижение количества бактерий как в известной камере, так и в двухслойной камере конкретного воплощения, при этом снижение в стандартной системе упаковки гораздо более сильное, чем в двухслойном воплощении.

Пример 3 - Стабильность B. japonicum на семенах после хранения

В данном эксперименте использовали два образца из Примера 2. Через 5 недель хранения при 22°C, как описано выше, каждый образец применяли по отдельности к 500 граммам семян.

Количество выживших клубеньковых бактерий в каждой партии тестировали периодически, как показано на ФИГ.4. Результаты демонстрируют, что выживание на семенах клеток клубеньковых бактерий, которые хранили в двухслойной камере конкретного воплощения в Примере 2, было выше, чем выживание клеток клубеньковых бактерий, которые хранили в стандартной камере. Кроме того, клетки, которые хранили в двухслойной камере конкретного воплощения, поддерживались в количестве, превышающем количество по спецификации (минимальное приемлемое количество жизнеспособных клеток на семя перед посадкой, согласно Канадским правилам) 100000 клеток на семя в течение около 5 недель, в отличие от клеток, которые хранили в стандартной камере, количество которых падало ниже количества по спецификации в течение примерно 3 недель. Другими словами период времени между обработкой семян и посадкой обработанных семян в поле может быть увеличен с использованием двухслойной камеры конкретного воплощения, применяемой в данном Примере.

Пример 4 - Стабильность B. japonicum в Контейнерах при 4-5°C

Два образца по 12,8 литров ферментационного бульона Bradyrhizobium japonicum известного штамма 532С упаковывали в две различные камеры. Один образец упаковывали в такую же камеру, как описано в Примере 1 и 2 выше (маркированную "Стандартная" на ФИГ.5), и второй образец упаковывали в двухслойную камеру конкретного воплощения, также описанную в Примерах 1 и 2 (маркированную "Высокопроницаемая" на ФИГ.5).

Материал в обеих камерах хранили при 4-5°C и образцы отбирали в асептических условиях каждый месяц на протяжении периода 8 месяцев. Результаты представлены в графической форме на ФИГ.5. Как можно видеть на фигуре, содержание бактерий в известном стандартном BIB-контейнере начало снижаться в значительной степени начиная примерно с 9 недель. В двухслойной камере конкретного воплощения содержание бактерий оставалось высоким до 35 недель, в то время как снижение их содержания в стандартном контейнере было выше более чем в два log.

Хотя настоящее изобретение описано со ссылкой на предпочтительные примеры воплощения, специалисту в данной области понятно, что могут быть сделаны изменения в форме и деталях, не выходя при этом за рамки идеи и сущности изобретения.

1. Кислородо-проницаемая камера для хранения живых микроорганизмов, включающая две стенки, соединенные друг с другом вдоль каждой внешней границы двух стенок, где каждая из двух стенок содержит:
первую пленку, определяющую внутреннюю стенку камеры, причем первая пленка включает тонкую проницаемую для кислорода эластичную пленку и обладает проницаемостью для кислорода, составляющей по меньшей мере, 5500 см³/м²/день; и
вторую пленку, расположенную поблизости от внешней поверхности первой пленки и включающую множество перфорационных отверстий, причем вторая пленка механически прочнее и более устойчива к проколам, чем первая пленка;
при этом одна из двух стенок включает горлышко, исходящее из указанной одной из двух стенок, причем горлышко определяет отверстие для сообщения по текучей среде с внутренней полостью камеры.

2. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, дополнительно включающая крышку, выполненную с возможностью присоединения к горлышку.

3. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, где первая пленка имеет толщину в интервале от примерно 15 мкм до примерно 100 мкм, предпочтительно от примерно 15 мкм до примерно 90 мкм.

4. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, где первая пленка включает полиэтилен или полипропилен.

5. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, где вторая пленка имеет толщину в интервале от примерно 40 мкм до примерно 80 мкм.

6. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, где вторая пленка включает полиэфир, полиэтилен, полипропилен или полиамид.

7. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, где каждое из множества перфорационных отверстий имеет диаметр в интервале от примерно 0,1 мм до примерно 3 мм.

8. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, где первая и вторая пленки скреплены друг с другом только по каждой внешней границе двух стенок, в частности только вдоль четырех внешних границ.

9. Кислородо-проницаемая камера по п. 1, где камера выполнена с возможностью расположения внутри внешнего контейнера.

10. Контейнер для транспортировки живых микроорганизмов, включающий по существу жесткий внешний контейнер и приспособленную для размещения внутри него кислородно-проницаемую камеру по п. 1.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ введения целевых молекул в клетки.

Способ изготовления муляжей, имитирующих посевы микроорганизмов на питательных средах // 2546244

Изобретение относится к медицинской микробиологии, к способам изготовления муляжей, имитирующих посевы микроорганизмов на питательных средах, и может быть использовано в учебных заведениях в качестве наглядного пособия на занятиях при изучении культуральных и ферментативных свойств бактерий, а также для демонстрации результатов определения токсигенности бактерий.

Установка для выращивания планктонных водорослей и светильник установки для выращивания планктонных водорослей // 2540011

Группа изобретений относится к области выращивания микроводорослей. Предложена установка для выращивания хлореллы и светильник для установки.

Биогазовая установка // 2539100

Изобретение относится к области переработки и утилизации органических отходов путем сбраживания биомассы для получения биогаза и удобрения, в том числе в зонах с холодным климатом.

Биореактор // 2536984

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к оборудованию, предназначенному для очистки воды биологическим способом от аммонийного азота, нитрита, нитрата и поддержания pH на уровне 6,5-7,2, и может быть использовано для очистки природных и доочистки сточных вод.

Планшет для образцов, его применение и способ фиксации гранулы или микросферы реагента в планшете для образцов // 2535880

Группа изобретений относится к области биологии, в частности к иммунологическим исследованиям, являющимися предпочтительным методом тестирования биологических продуктов и при которых используется планшет для образцов, в частности, при осуществлении энзим-связывающего иммуносорбентного анализа - ELISA, или других процедур, связанных с иммунным анализом, использующих нуклеиново-кислотный зонд, а также при использовании для проведения тестирования на наличие ДНК- или РНК-последовательностей.

Способ и набор для иммуноферментного определения функциональной активности компонента с3 комплемента человека по способности связываться с пептидогликаном // 2535159

Группа изобретений относится к медицинской иммунологии, а именно к способам определения функциональной активности компонентов комплемента в сыворотке крови человека при диагностике ряда заболеваний и в биологических препаратах.

Способ культивирования дрожжей phaffia rhodozyma для получения кормовой добавки, содержащей астаксантин // 2529715

Способ культивирования дрожжей Phaffia rhodozyma для получения кормовой добавки, содержащей астаксантин, предусматривает приготовление культуры дрожжей на твердой агаризованной среде, выращивают посевной материал на качалке в колбах.

Установка для наращивания суспензий микроорганизмов // 2528779

Изобретение относится к области микробиологии и биотехнологии, а именно к мобильным комплексам для наращивания суспензий микроорганизмов в полевых условиях, и может быть использовано в методах биологической рекультивации земель, очистке водных поверхностей и/или биологических методах увеличения нефтеотдачи.

Способ выращивания колоний микробных клеток и устройство для его реализации // 2522005

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложен способ выращивания колоний микробных клеток на поверхности пористой пластины.

Гибкая производственная система // 2564250

Изобретение относится к гибкой полипродуктовой политехнологичной расширяемой установке для производства продуктов, таких как биологические средства, фармацевтические препараты или химические вещества, и к производственным процессам с использованием элементов такой установки. Технический результат - уменьшение времени простоя за счет возможности переключения с изготовления одного продукта на другой посредством отсоединения одного отсека от ядра и подсоединения другого отсека к этому ядру. Производственная система содержит ядро, которое предназначено для снабжения одного или более производственных отсеков двумя или более средствами общего пользования; два перемещаемых производственных отсека, выполненные с возможностью разъемного соединения с ядром и приема средств общего пользования; два рабочего пространства, которые определены первым и вторым перемещаемыми производственными отсеками и вмещают первую и вторую установки для выполнения первого и второго производственных процессов. 5 н. и 56 з.п. ф-лы, 7 ил.

Способ и устройство для гидролиза предпочтительно твердых органических субстратов // 2566997

Группа изобретений относится к области биотехнологии, в частности к оборудованию для гидролиза предпочтительно твердых органических субстратов: энергетических растений и растительных отходов. Устройство содержит накопительный резервуар (1), транспортировочное средство (4), выполненный в виде циклона пароотделитель (14), размещенный перед пароотделителем расширительный бак (15), гидролизер (10) с загрузочным приспособлением (7). Гидролизер имеет на стороне выхода приспособление (12) для сброса давления с управляемой с помощью клапана нажимной диафрагмой (13) и пароотделителем (14). Транспортировочное средство (4) выполнено в форме транспортировочного шнека (4') с полым валом (25), в который подается горячий пар из пароотделителя (14). Полый вал (25) в зоне транспортировки органического субстрата в зоне (18) нагревания имеет отверстия (26) для выхода пара для непосредственного воздействия горячим паром на органический субстрат, а на конце вала (25) выполнено перепускное отверстие (27), управляемое с помощью клапана, или переключательный клапан (32) для удаления субстрата, проникающего в полый вал (25) через отверстие (26) для выхода пара. В способе гидролиза с использованием устройства для гидролиза твердых органических субстратов, включающем термогидролиз под давлением, отделение горячего пара посредством сброса давления после выпуска частичного количества субстрата с последующим использованием его для нагрева подаваемых на гидролиз органических субстратов, осуществляют ввод (вдувание) отделяемого горячего пара в полый вал (25) транспортировочного шнека (4´) через отверстие (26) для выхода пара и для удаления субстрата из полого вала (25), попадающего через отверстие (26). Группа изобретений обеспечивает повышенный выход субстрата с улучшенным качеством. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 4 ил.

Установка для непрерывного выращивания планктонных водорослей // 2571939

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к технологии непрерывного выращивания планктонных водорослей, преимущественно хлореллы. Установка содержит расположенные на каркасе два аквариума для суспензии, светильники, емкости для приготовления питательного раствора и для сбора и хранения готовой суспензии, соединенные с аквариумами трубопроводами. Два аквариума для суспензии микроводорослей установлены на каркасе с возможностью изменения расстояния между ними и соединены между собой в нижней части вертикальных стенок трубопроводом для уравновешивания объема суспензии в обоих аквариумах. Каждый аквариум для суспензии имеет два сливных отверстия, одно из них выполнено в нижней части боковой стенки для слива готовой суспензии хлореллы и ее отвода по трубопроводу в емкость для сбора и хранения суспензии, а второе отверстие выполнено в нижней плоскости. Один из аквариумов для суспензии выполнен с возможностью выращивания маточной культуры и обеспечением единого биотехнологического процесса. Светильники в каждом аквариуме расположены эксцентрично по отношению к продольной оси его. Светильник, размещенный между аквариумами, крепится на отдельной раме независимо от каркаса и аквариумов с возможностью свободного перемещения и съема при переходе на солнечное освещение. Емкость для питательного раствора размещена по уровню выше аквариумов и имеет выполненные в вертикальной боковой стенке два отверстия, первое из которых расположено на уровне 0,5 объема, а второе - в придонном слое с возможностью присоединения к ним трубопроводов для слива питательного раствора в аквариумы. Изобретение обеспечивает повышение производительности культивирования хлореллы, удобство эксплуатации и безопасность работы. 2 ил.

Аппарат для синтеза олиго(поли)нуклеотидов // 2593943

Изобретение относится к устройствам для осуществления синтеза фрагментов молекул ДНК и РНК в автоматическом режиме, используется в молекулярной биологии, генной инженерии, медицине. Аппарат для синтеза олиго(поли)нуклеотидов включает соединенные между собой реакционную колонку с размещенным в ней твердофазным носителем, емкости с реактивами для синтеза и вспомогательными реактивами, средство подачи реактивов в реакционную колонку и средство удаления из нее реактивов, источник газа избыточного давления, емкость с промывочной жидкостью, газовые и жидкостные клапаны. Аппарат снабжен средством управления и контроля, выполненным в форме программируемой ЭВМ. Реакционная колонка выполнена в форме цилиндрической емкости с размещенным в ее полости поршнем, установленным с возможностью перемещения вдоль оси емкости. Реакционная колонка снабжена датчиком положения поршня и приводом и имеет как минимум два ввода для подачи и удаления реактивов. Один из вводов размещен в поршне, а второй размещен напротив - в основании цилиндрической емкости. Изобретение обеспечивает повышение качества синтеза олиго(поли)нуклеотидов при использовании твердофазных носителей с обеспечением возможности изменения их объема в процессе синтеза и снижение расхода реактивов. 3 з.п. ф-лы, 1 ил.

Композиция, набор и способ извлечения целевых соединений из биомассы // 2605328

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен способ извлечения целевых соединений из биомассы, гранулярная композиция и набор. Способ включает сушку биомассы, измельчение высушенной биомассы для получения мелкодисперсных фракций, агломерацию мелкодисперсных фракций для получения агломерированных частиц и перколяцию растворителя через агломерированные частицы для получения целевых соединений. Гранулярная композиция образована из микробной биомассы и предназначена для экстракции целевых соединений. Композиция содержит множество агломерированных мелкодисперсных фракций, полученных вышеуказанным способом, и нейтральную подложку. Набор для извлечения целевых соединений из биомассы содержит вышеуказанную гранулярную композицию и контейнер. Изобретения обеспечивают улучшенное выщелачивание биомассы и увеличенное извлечение биомассы. 3 н. и 17 з.п. ф-лы, 24 ил., 3 табл., 12 пр.

Способ детектирования и характеризации токсиногенного штамма clostridium difficile // 2612789

Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ детектирования и характеризации токсиногенного штамма Clostridium difficile в пробе, в котором выполняют следующие стадии: a. предоставляют пробу; b. в мультиплексном ПЦР-анализе: i) эту пробу анализируют в отношении присутствия или отсутствия гена tcdB цитотоксина; ii) эту пробу анализируют в отношении присутствия или отсутствия следующих делеций в гене tcdC: a) делеций 18 п.н. в SEQ ID NO: 1 от нуклеотида 330 до нуклеотида 347; b) делеций 39 п.н. в SEQ ID NO: 1 как представлено в SEQ ID NO: 14; c) делеций единственного нуклеотида в положении 117 SEQ ID NO: 1. При этом мультиплексная ПЦР-амплификация является количественной ПЦР реального времени, где пробу дополнительно анализируют в отношении присутствия или отсутствия делеций 1,8 т.п.н. гена tcdA энтеротоксина, где пробу дополнительно анализируют в отношении присутствия или отсутствия cdtA и/или cdtB бинарного токсина, и, где a. если присутствует последовательность гена tcdB, отсутствует делеция tcdA, не присутствует ни делеция единственного нуклеотида в положении 117 SEQ ID NO: 1, ни делеция 18 п.н., ни делеция 39 п.н., то эта проба оценивается как токсиногенный штамм Clostridium difficile, b. если присутствует последовательность гена tcdB, отсутствует делеция tcdA, присутствует делеция единственного нуклеотида в положении 117 SEQ ID NO: 1, присутствует делеция 18 п.н. и присутствует ген бинарного токсина cdtA/B, то эта проба оценивается как штамм риботипа 027 Clostridium difficile, c. если присутствует последовательность гена tcdB, присутствует делеция tcdA, не присутствует ни делеция единственного нуклеотида в положении 117 SEQ ID NO: 1, ни делеция 18 п.н., ни делеция 39 п.н. в SEQ ID NO: 1 как представлено в SEQ ID NO: 14, и отсутствует ген cdtA/B бинарного токсина, то эта проба оценивается как штамм риботипа 017 Clostridium difficile, и d. если присутствует последовательность гена tcdB, отсутствует делеция tcdA, присутствует делеция 39 п.н. в SEQ ID NO: 1 как представлено в SEQ ID NO: 14, присутствует ген cdtA/B бинарного токсина, то эта проба оценивается как штамм риботипа 078 Clostridium difficile. Изобретение расширяет арсенал способов диагностики. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

Мобильный противоэпидемический комплекс // 2623367

Изобретение относится к средствам для ликвидации последствий эпидемиологических ситуаций. Мобильный противоэпидемический комплекс содержит взаимосвязанные и легко разделяемые между собой при развертывании на местности функциональные модули, стыковочный модуль, мобильный пункт управления, штабной автомобиль, модуль для доставки персонала, мобильную лабораторию эпидразведки. Функциональные модули разделены на герметичные салоны с системами жизнеобеспечения, органы управления которых вынесены в технический отсек с доступом снаружи фургона, оборудованы системой принудительной приточно-вытяжной вентиляции с автоматическим поддержанием разницы давления между лабораторными отсеками и оснащены диагностическим оборудованием. Каждый из модулей образован на основе кузова фургона, установленного на шасси автомобиля повышенной проходимости и/или прицепа. Бактериологическая и санитарно-микробиологическая лаборатории при развертывании на местности соосно совмещены передаточными окнами с передаточными шлюзовыми камерами лаборатории поддержки бактериологических исследований посредством установки герметичных стыковочных межсекционных блоков. Изобретение снижает риск биологической опасности и повышает эффективность проведения исследовательских работ. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.

Установка и способ выращивания планктонных штаммов хлореллы // 2643256

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Установка содержит расположенные на каркасе аквариумы из прозрачного материала, связанные между собой трубопроводом, включающим сливные отверстия, соединенные с емкостью готовой суспензии и емкостью для питательного раствора, светильники, размещенные между аквариумами. При этом на каркасе расположены три аквариума для суспензии, суммарный объем двух боковых аквариумов равен объему центрального, лампы расположены вертикально между боковыми аквариумами и горизонтально над центральной емкостью. Все они объединены в светильник, состоящий из единой рамы, закрепленной на каркасе подставки, с возможностью ее перевода в вертикальное положение при обслуживании аквариумов и переходе на солнечное освещение. Емкости для приготовления питательного раствора выставлены по уровню выше аквариумов, а каждый аквариум имеет отдельную емкость с соответствующим ему объемом. В нижней стенке каждой емкости имеется по отверстию, к которым присоединены трубопроводы для слива питательного раствора. Каждый аквариум имеет по три отверстия, одно из которых служит для уравновешивания объемов суспензии, второе для слива готовой суспензии, третье расположено в нижней плоскости и предназначено для удаления донных осадков и обмывочных вод при мойке аквариума, и емкости для питательного раствора. Аквариумы и емкость для сбора и хранения готовой продукции соединены между собой трубопроводом. В способе выращивают штаммы хлореллы с использованием источника света, оптимальных питательной среды и температурных условий. Достижение оптимального освещения в начальный период культивирования осуществляют путем включения вертикально расположенных ламп, находящихся между аквариумами. В процессе роста клеток и увеличения оптической плотности культуры подключают горизонтальные лампы, расположенные над центральным аквариумом. Культуру, достигшую нормативной оптической плотности, сливают попеременно, один раз из центрального аквариума, в следующий раз из двух боковых емкостей. В освободившийся аквариум после слива культуры через соединительный трубопровод перетекает исходная культура, после чего добавляют питательный раствор. Получение маточной культуры встроено в единый биотехнологический процесс, который осуществляют попеременно в центральной или боковых емкостях. Культивирование выполняют в различных режимах с использованием отдельных планктонных штаммов: Chlorella vulgaris ИФР С-111, Chlorella vulgaris BIN, Chlorella kessleri ВКПМ Al-12 и оптимального для каждого из них питательного раствора из расчета на 1 л водопроводной воды: предназначенных для получения: по Режиму I - корма для сельскохозяйственных животных, по Режиму II - альголизант водоемов, по Режиму III - биомассы хлореллы. Изобретения позволяют оптимизировать освещение выращиваемых культур. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 3 пр.