Способ получения наноразмерной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих



Способ получения наноразмерной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих
Способ получения наноразмерной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих
Способ получения наноразмерной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих

 


Владельцы патента RU 2563171:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) (RU)

Изобретение относится к области химии, биологии и молекулярной медицины. Способ относится к получению наноразмерной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих и включает модификацию носителя, в качестве которого используют коммерческие аминосодержащие наночастицы диоксида кремния размером до 20 нм, путем суспендирования последних в ДМСО, содержащем 5% триэтиламин, до конечной концентрации 50-100 мг/мл с последующей обработкой полученной суспензии равным объемом 5% N-гидроксисукцинимидного эфира 5-(пропинилокси)-5-оксопентановой кислоты или 10% пентафторфенилового эфира 6-пропинилоксигексановой кислоты в ДМСО и последующую иммобилизацию трифосфата азидотимидина на полученных алкино-модифицированных наночастицах. Изобретение обеспечивает сокращение длительности способа и повышение функциональных возможностей целевого продукта. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл., 6 пр.

 

Изобретение относится к области химии, биологии и молекулярной медицины и может быть использовано для получения наноразмерной системы доставки трифосфата азидотимидина в эукариотические клетки с целью создания эффективного противовирусного препарата.

Наночастицы вносят существенный вклад в развитие методов доставки лекарственных препаратов. В качестве наночастиц используются золотые наночастицы (Young K.L., et al., Nano Lett. 2012, v. 12, p. 3867-3871), полимеры (полимерные наночастицы, мицеллы, дендримеры) и органометаллические соединения (наночастицы, нанотрубки) (Cho К., et al., Clin. Cancer Res. 2008, v. 14, p. 1310-1316).

Известно использование наночастиц диоксида кремния (SiO2) для увеличения эффективности действия терапевтических агентов в раковых клетках, решения проблем растворимости и стабильности некоторых лекарств, а также адресной доставки лекарств и их последующего контролируемого высвобождения (Slowing I.I, et al., Adv. Drag Deliv. Rev. 2008, v. 60, p. 1278-1288; Manzano M., et al., Expert Opin. Drag Deliv. 2009, v. 6, p. 1383-1400; Vivero-Escoto J.L., et al., Small 2010, v. 6, p. 1952-1967).

В качестве противовирусных, противораковых и в меньшей степени противогрибковых препаратов достаточно широко используются аналоги нуклеозидов (N). Активной формой, воздействующей на вирус, являются не сами по себе аналоги нуклеозидов, а их фосфорилированные формы - 5′-трифосфаты (pppN), которые являются основными субстратами для ДНК и РНК полимераз (Galmarini С.М., et al., Lancet. Oncol. 2002, v. 3(7), p. 415-424).

Известен аналог нуклеозида - азидотимидин (AZT), который, попадая в клетку, подвергается фосфорилированию клеточными ферментами с образованием трифосфата AZT (pppAZT), избирательно подавляющего репликацию вирусной ДНК, конкурируя с трифосфатом тимидина (природного нуклеозида) за встраивание в растущие цепи вирусной РНК-зависимой ДНК-полимеразы (обратная транскриптаза) и подавляя тем самым репликацию вирусной ДНК (Lavie A. et al. Nat Med. 1997 v. 3(8), p. 922-941; Olivero O.A. Environ Mol Mutagen. 2007 v. 48(3-4), p. 215-223). Как и во всех случаях использования аналогов нуклеозидов, pppAZT проникает в клетки с низкой эффективностью, поэтому используют нефосфорилированный азидотимидин, что влечет необходимость использования больших доз препарата.

Решением проблемы токсичности может быть использование в качестве антивирусных препаратов не аналогов нуклеозидов (N), а уже готовых фосфорилированных форм - трифосфатов. Создание эффективного способа доставки трифосфатов нуклеозидов (pppN) является, таким образом, актуальной задачей, решение которой позволит использовать эти соединения в качестве лекарственных препаратов.

Известен способ получения наноразмерной системы доставки pppN в клетки путем их инкапсулирования в эритроциты (Magnani Μ., et al., J. Leukoc. Biol. 1997, v. 62, p. 133-137). Использование такой системы доставки pppN ограничено из-за трудности хранения, возможности загрязнения и недостаточной разработанности процедуры приготовления.

Известен способ получения наноразмерной системы доставки pppN в клетки в виде комплекса pppN с катионными наногелями, представляющими собой сополимер полиэтиленимина и полиэтиленгликоля (Vinogradov S.V., Expert Opin. Drug. Deliv. 2007, v. 4(1), p. 5-17; Vinogradov S.V., Curr. Pharm. Des. 2006, v. 12, p. 36). Предварительно полученный наногель диспергируют в воде при рН 10 для депротонирования аминогрупп, затем титруют его полученным раствором нуклеозидтрифосфата до рН 7.5, концентрируют в вакууме, пропускают через колонку NAP-20 и лиофилизуют.

Недостатками известного способа являются длительность и низкое качество целевого продукта, вследствие недостаточно прочной связи pppN с носителем.

Во всех упомянутых выше способах молекулы pppN связаны с носителями нековалентно, в частности за счет ионообменных взаимодействий. Это является причиной относительно быстрой кинетики высвобождения pppN из наноконструкции, его деградации и выведения из организма и, как следствие, больших потерь лекарства. Этот недостаток может быть преодолен путем создания такой системы доставки, в которой pppN ковалентно, т.е. достаточно прочно, связан с носителем.

Наиболее близким к заявляемому способу - прототипом - является способ получения системы доставки pppN в клетки млекопитающих (патент RU 2527681 C1, опубл. 10.09.2014), включающий модификацию носителя, в качестве которого используют коммерческие аминосодержащие наночастицы диоксида кремния (SiO2~NH2) размером до 24 нм, путем обработки последних N-гидроксисукцинимидным эфиром алифатической азидокислоты, далее получение модифицированного нуклеозидтрифосфата (pppN) путем обработки последнего смесью трифенилфосфин/дитиодипиридин с последующим инкубированием образующегося активного производного pppN с 3-пропинилоксипропиламином и последующую иммобилизацию модифицированного pppN на полученных азидо-модифицированных наночастицах в течение 2-4 ч. Полученный нанокомпозит SiO2~pppN выделяют центрифугированием. Емкость полученных наночастиц SiO2~pppN по нуклеозиду составляет 0.2-0.3 мкмоль/мг.

Недостатками известного способа являются длительность и ограниченные функциональные возможности целевого продукта, поскольку в качестве трифосфата нуклеозида используют трифосфат цитидина или уридина (природных нуклеозидов), не обладающие противовирусными свойствами.

Задачей изобретения является создание более простого способа получения наноразмерной системы доставки трифосфата нуклеозида в клетки.

Техническим результатом является упрощение и сокращение длительности способа, а также расширение функциональных возможностей целевого продукта.

Поставленная задача достигается заявляемым способом, заключающимся в следующем.

Предварительно получают алкино-модифицированные наночастицы диоксида кремния (≡L~SiO2). Для этого исходные аминосодержащие наночастицы (SiO2~NH2) размером до 20 нм добавляют в диметилсульфоксид (ДМСО), содержащий 5% триэтиламина (ТЭА), до конечной концентрации 50-100 мг/мл и суспендируют с помощью ультразвука. Затем к полученной суспензии добавляют равный объем 5% N-гидроксисукцинимидного эфира 5-(пропинилокси)-5-оксопентановой кислоты или 10% пентафторфенилового эфира 6-пропинилоксигексановой кислоты в ДМСО. Реакционную смесь перемешивают в течение 40-60 минут при комнатной температуре. Полученные алкино-модифицированные наночастицы (≡L~SiO2) отделяют центрифугированием, промывают ацетоном и серным эфиром и высушивают на воздухе. Замена аминогрупп на линкер с алкиногруппами происходит с выходом 85%. Процедура получения ≡L~SiO2 занимает около 2-х часов.

Далее проводят ковалентное присоединение трифосфата азидотимидина (pppAZT), полученного известным способом (Abramova T.V., et al., Tetrahedron Letters, 2004, v. 45, p.4361-1364), к алкино-модифицированным наночастицам. Для этого к ≡L~SiO2, суспендированным в воде с помощью ультразвука до конечной концентрации 30-70 мг/мл, добавляют 3-5-кратный объем 10 мМ водного раствора pppAZT и 1-1.5-кратный объем 1 М буферного раствора ацетата триэтиламмония, рН 7.0, содержащего 50 мМ сульфата меди(II) и 0.1 Μ аскорбата натрия. Реакционную смесь дегазируют 2 мин аргоном и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Полученный целевой нанокомпозит (pppAZT*~L~SiO2) отделяют центрифугированием, затем высушивают и получают 10-20 мг целевого нанокомпозита (85-90% выход). В целом процесс получения наноразмерной системы доставки (нанокомпозита pppAZT*~L~SiO2) занимает не более 1 суток. Емкость полученных наночастиц pppAZT*~L~SiO2 по нуклеозиду составляет 0.3-0.39 мкмоль/мг.

Заявляемый способ позволяет сократить число стадий приготовления нанокомпозита и общую длительность приготовления целевого продукта с 3-х до 1 суток. При этом обеспечивается практически такая же высокая прочность связывания pppAZT с частицами, большая емкость нанокомпозита и способность проникать в клетки и быть субстратом для ДНК-полимеразы, как и в известном способе (прототипе).

Определяющими отличиями предлагаемого способа от прототипа, являются:

1. В качестве объекта для присоединения к системе доставки используют трифосфат азидотимидина (pppAZT), обладающий противовирусными свойствами, что позволяет расширить функциональные возможности целевого продукта, а также сократить длительность процесса получения целевого продукта, поскольку не требуется дополнительная модифицкация трифосфата нуклеозида. В прототипе в качестве трифосфата нуклезида использовали трифосфаты цитидина или уридина (природных нуклеозидов), не обладающие ингибирующими противовирусными (или противоопухолевыми) свойствами.

2. Суспензию, содержащую ДМСО, 5% ТЭА и коммерческие SiO2~NH2 в концентрации 50-100 мг/мл, обрабатывают равным объемом 5% N-оксисукцинимидным эфиром 5-(пропинилокси)-5-оксопентановой кислоты или 10% пентафторфениловым эфиром 6-пропинилоксигексановой кислоты, что позволяет получить алкино-модифицированные наночастицы (≡L~SiO2) для последующего присоединения трифосфата азидотимидина (pppAZT). При этом первый линкер несет в своей структуре сложноэфирную группировку, которая в дальнейшем под действием клеточных ферментов внутри клетки может разрушаться, приводя к высвобождению из нанокомпозита трифосфата производного азидотимидина. В прототипе использовались азидо-модифицированные наночастицы и линкеры, не содержащие эфирные группы.

3. Полученные алкино-модифицированные наночастицы суспендируют в воде с помощью ультразвука до конечной концентрации 30-70 мг/мл, к полученной суспензии добавляют 3-5-кратный объем 10 мМ водного раствора pppAZT и 1-1.5-кратный объем 1М буферного раствора ацетата триэтиламмония, рН 7.0, содержащего 50 мМ сульфата меди(II) и 0.1 Μ аскорбата натрия, что обеспечивает получение стабильной и эффективной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Пример 1. Получение нанокомпозита pppAZT*~L~SiO2 (1) (Фиг. 1, соединение 4)

Вначале получают алкино-модифицированные наночастицы (≡L-SiCO2). Для этого исходные NH2~SiO2-наночастицы (SkySpring Nanomaterials, Inc., USA) размером до 20 нм (10 мг, 5 мкмоль NH2-групп) суспендируют с помощью ультразвука в 0.1 мл ДМСО, содержащего 5% ТЭА, добавляют 0.1 мл 5% раствора N-оксисукцинимидного эфира 5-(пропинилокси)-5-оксопентановой кислоты (ООО «Нанотех-С», Новосибирск, Россия), предварительно растворенные в ДМСО. После перемешивания в течение 40 мин при комнатной температуре реакционную смесь центрифугируют (7000 об/мин, 5 мин), супернатант удаляют, а частицы промывают ацетоном (2×1 мл), эфиром (1×1 мл) и сушат на воздухе 30 мин. Получают 10 мг модифицированных наночастиц ≡L~SiO2 (SiO2-NH-CO-(CH2)3-CO-O-CH2-C≡CH, Фиг. 1, соединение 1) с выходом 86%. Замена аминогрупп на линкер с алкиногруппами происходит с выходом 85% (количество непрореагировавших аминогрупп определяют титрованием пикриновой кислотой и составляет не более 15%).

Затем полученные модифицированные наночастицы ≡L~SiO2 (10 мг, 4.3 мкмоль алкиногрупп), суспендируют в 0.3 мл воды с помощью ультразвука, добавляют 1 мл 10 мМ водного раствора pppAZT (~5 мг), 50 мМ раствор сульфата меди(II) в воде (0.1 мл), 1М ТЭААс буфер (рН 7, 0.1 мл) и 0.1 Μ свежеприготовленный раствор аскорбата натрия в воде (0.1 мл). Реакционную смесь дегазируют 2 мин аргоном и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Полученный целевой нанокомпозит (pppAZT*~L~SiO2) (Фиг. 1, соединение 4) отделяют центрифугированием и промывают последовательно физиологическим раствором NaCl (1.5 мл), 10% ЭДТА, водой (2×1,5 мл), ацетоном (1.5 мл) и серным эфиром (1.5 мл). Частицы высушивают на воздухе и получают 10.37 мг целевого нанокомпозита (90% выход). Емкость нанокомпозита по нуклеозидтрифосфату, определенная по количеству присоединенного pppAZT*, составляет 0.39 мкмоль/мг.

Пример 2. Получение нанокомпозита pppAZT*~L~SiO2 (Фиг. 1, соединение 5)

Способ осуществляли аналогично примеру 1, за исключением того, что в реакции используют 20 мг SiO2~NH2-наночастиц, суспендированных в 0.4 мл ДМСО, содержащего 5% ТЭА, и пентафторфениловый эфир 6-пропинилоксигексановой кислоты (0.4 мл 10% раствора в ДМСО) (С6Н5-O-СО-(СН2)5-O-СН2-С≡СН (ООО «Нанотех-С», Новосибирск, Россия)), а перемешивание осуществляют в течение 60 мин. Получают 20 мг (92%) модифицированных наночастиц ≡L~SiO2 (SiO2~NH-CO-(CH2)3-CO-O-CH2-С≡СН, Фиг. 1, соединение 2). Замена аминогрупп на линкер с алкиногруппами происходит с выходом 85%.

Полученные наночастицы (20 мг, 8.4 мкмоль алкиногрупп) суспендируют в 0.3 мл воды, а все остальные реагенты используют в 1.5 раза большем количестве, чем указано в примере 1. Получают 19.5 мг целевого нанокомпозита (85% выход) (pppAZT*~L~SiO2) (Фиг. 1, соединение 5). Емкость нанокомпозита по нуклеозидтрифосфату, определенная по количеству присоединенного pppAZT*, составляет 0.3 мкмоль/мг.

Пример 3. Получение флуоресцеин-содержащего нанокомпозита pppAZT*~L~SiO2-Flu (Фиг. 1, соединение 6)

Вначале получают алкино-модифицированные наночастицы ≡L~SiO2(Flu), несущие остаток флуоресцеина (Фиг. 1, соединение 3). Для этого исходные NH2~SiO2-наночастицы (10 мг, 5 мкмоль NH2-групп) суспендируют с помощью ультразвука в 0.2 Μ растворе NaHCO3 (0.1 мл), добавляют раствор флуоресцеинизотиоцианата (1 мг, 2.6 мкмоль, 0.5 экв) в ДМСО (20 мкл). После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь центрифугируют (7000 об/мин, 5 мин), супернатант удаляют, а частицы промывают 0.1 Μ раствором NaCl (1 мл), водой (2×1 мл), ацетоном (2×1 мл), эфиром (1 мл) и сушат на воздухе 30 мин.

Полученные наночастицы (SiO2(Flu)~NH2 (10 мг) суспендируют в 0.2 мл ДМСО, содержащего 5% ТЭА, и далее проводят реакцию с пентафторфениловым эфиром 6-пропинилоксигексановой кислоты (0.2 мл 10% раствора в ДМСО). Получают 10 мг модифицированных наночастиц (SiO2(Flu)-NH~NH-CO-(CH2)5-O-CH2-C≡CH (80%) (=L~SiO2(Flu), Фиг. 1, соединение 3). Замена аминогрупп на остаток Flu и затем на линкер с алкиногруппами происходит на 10% и 75%, соответственно.

На следующей стадии получают флуоресцеин-содержащий нанокомпозит pppAZT*~L~SiO2-Flu (Фиг. 1, соединение 6) аналогично примеру 1, за исключением того, что вместо алкино-модифицированных частиц ≡L~SiO2 без остатка флуоресцеина используют флуоресцеин-содержащие наночастицы ≡L~SiO2(Flu) (10 мг). Получают 9.7 мг целевого нанокомпозита pppAZT*~L~SiO2-Flu (90% выход). Емкость нанокомпозита по нуклеозидтрифосфату, определенная по количеству присоединенного pppAZT*, составляет 70 наномоль/мг. Флуоресцентная метка необходима для дальнейшего исследования способности нанокомпозита проникать в клетки.

Пример 4. Оценка способности нанокомпозитов pppAZT*~L~SiO2-Flu проникать в клетки

В эксперименте используют клетки Vero, Hoechst 33343, Cell Mask Plasma Membrane Stain, клеточную среду IMDM, эмбриональную телячью сыворотку (ЭТС), антибиотики, фосфатный буфер (PBS), рН 7.4. Для экспериментов клетки рассеивают в необходимой концентрации на 8-луночные камеры (Chamber Slide, Nunc. Inc.) и культивируют в среде IMDM, содержащей 10% ЭТС и антибиотики (пенициллин и стрептомицин, по 100 ед./мл) до достижения 70% монослоя, после этого заменяют культуральную среду на среду (200 мкл) без сыворотки и антибиотика. К клеткам добавляют суспензию, содержащую исследуемый образец pppAZT*~L~SiO2-Flu, полученный, как описано в примере 3, разбавленный буфером до концентрации 0.1 мг/мл (конечная концентрация в клеточной среде - ~0.01 мг/мл). После 24 ч инкубации клетки отмывают PBS, фиксируют 3.7% формалином (10 мин) и окрашивают Hoechst 33343 и Cell Mask Plasma Membrane Stain в течение 10 мин. Полученный образец анализируют с помощью конфокального лазерного сканирующего микроскопа LSM 510 UV Meta Microscope (Carl Zeiss, Inc., Германия) (Центр коллективного пользования ИЦИГ СО РАН).

На Фиг. 2 представлено изображение клеток после инкубации с исследуемым образцом pppAZT*~L~SiO2-Flu. В черно-белом изображении нанокомпозиты внутри клеток проявляются в виде белых точек.

Пример 5. Оценка цитотоксичности наночастиц и нанокомпозитов

Для оценки токсичности и противовирусной эффективности препаратов используют перевиваемую культуру клеток Vero, полученных из коллекции культур клеток ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор». Суспензию клеток с концентрацией 1×105 кл./мл питательной среды DMEM (ООО «БиолоТ» г. Санкт-Петербург) вносят в объеме 100 мкл/лунку 96-луночного планшета. Планшеты с клетками помещают в термостат на 2-3 сут до образования монослоя при температуре 37°С, 5% CO2 и 100% влажности.

При определении токсических доз препараты pppAZT*~L~SiO2, AZT и pppAZT разводят средой DMEM до концентраций 150, 75, 30, 15 и 7,5 нмоль/мл (в случае препартов с наночастицами это соответствует концентрациям 1000, 500, 200, 100 и 50 мкг/мл по наночастицам при емкости нанокомпозитов по нуклеозиду по AZT 150 нмоль/мг). Образцы разведений препаратов вносят в лунки, содержащие монослой клеток Vero, по 100 мкл/лунку, и планшеты оставляют при температуре 37°С, 5% CO2 и 100% влажности. Через 4 сут с помощью инвертированного микроскопа оценивают деструктивные изменения в монослое клеток Vero, инкубированных с разными концентрациями препаратов. В качестве контроля используют монослой культуры клеток Vero без препарата. Результаты приведены в Табл. 1

Концентрация нанокомпозита pppAZT*~L~SiO2, приводящая к гибели 50% клеток (ТС50), оценена как 500 мкг/мл (75 нмоль/мл для нуклеозида в составе нанокомпозита), в то время как ТС50 для AZT оценена как 150 нмоль/мг, а трифосфат AZT не вызывал гибель клеток во всей области исследуемых концентраций.

Пример 6. Исследование противовирусных свойств исследуемых образцов

В работе использовали ортопоксвирусы: вирус осповакцины (штамм Л-ИВП) и вирус простого герпеса 2-го типа (штамм MS), полученные из коллекции ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор».

При исследовании противовирусной активности препаратов использовали нетоксические концентрации, в несколько раз меньшие по сравнению с величиной ТС50 (100 мкг/мл по частицам или 15 нмоль/мл по нуклеозиду).

В среде DMEM готовили 8 разведений вируссодержащей культуральной жидкости (ВКЖ) с десятикратным шагом. На монослой клеток Vero вносили разведения препарата в объеме 100 мкл/лунку и разведения ВКЖ (с 1-го по 8-е) в объеме 100 мкл/лунку. Клетки инкубировали 4 сут при температуре 37°С в атмосфере 5% CO2. Затем в каждой лунке с помощью инвертированного микроскопа регистрировали цитопатическое действие в монослое клеток. Определяли титры вирусов в клетках в величинах log ТЦД50/мл в опыте и контроле (т.е. с препаратом и без препарата). Для того чтобы определить, во сколько раз исследуемые препараты подавляют репродукцию вирусов, величины log ТЦД50/мл переводили в ТЦД50/мл (Табл. 2) и полученные значения ТЦД50/мл сравнивали с соответствующим значением для титра вируса в клетках, не обработанных препаратами:

Контрольные образцы AZT и pppAZT, не связанные с наночастицами, а также исходные наночастицы SiO2~NH2 показали очень низкую противовирусную активность (подавление репродукции вирусов происходило не более чем на один порядок). В то же время полученный препарат pppAZT*~L~SiO2 оказался эффективным и ингибировал вирус осповакцины и простого герпеса в ~300 и ~1000 раз соответственно.

Использование предлагаемого способа позволит существенно сократить его длительность и обеспечить получение стабильной и эффективной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих.

1. Способ получения наноразмерной системы доставки трифосфата азидотимидина в клетки млекопитающих, включающий получение модифицированных наночастиц диоксида кремния с последующим присоединением к полученным модифицированным наночастицам трифосфата нуклеозида, отделением целевого продукта центрифугированием и высушиванием, отличающийся тем, что исходные аминосодержащие наночастицы добавляют в диметилсульфоксид, содержащий 5% триэтиламина, до конечной концентрации 50-100 мг/мл и суспендируют, затем к полученной суспензии добавляют равный объем 5% N-оксисукцинимидного эфира 5-(пропинилокси)-5-оксопентановой кислоты или 10% пентафторфенилового эфира 6-пропинилоксигексановой кислоты в ДМСО, далее полученные алкино-модифицированные наночастицы суспендируют в воде до конечной концентрации 30-70 мг/мл, к полученной суспензии добавляют 3-5-кратный объем 10 мМ водного раствора трифосфата азидотимидина и 1-1.5-кратный объем 1М буферного раствора ацетата триэтиламмония, pH 7.0, содержащего 50 мМ сульфата меди(II) и 0.1 M аскорбата натрия, с последующим отделением и высушиванием целевого продукта.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что суспендирование наночастиц в реакционной смеси осуществляют при помощи ультразвука.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что все реакции с участием наночастиц диоксида кремния проводят при перемешивании при комнатной температуре, а промежуточные и целевые продукты выделяют центрифугированием.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к технологии обработки кремниевых монокристаллических пластин и может быть использовано для создания электронных структур на его основе. Способ электрической пассивации поверхности кремния тонкопленочным органическим покрытием из поликатионных молекул включает предварительную подготовку подложки для создания эффективного отрицательного электростатического заряда, приготовление водного раствора поликатионных молекул, адсорбцию поликатионных молекул на подложку в течение 10-15 минут, промывку в деионизованной воде и сушку подложки с осажденным слоем в потоке сухого воздуха, при этом в качестве подложки использован монокристаллический кремний со слоем туннельно прозрачного диоксида кремния, с шероховатостью, меньшей или сравнимой с толщиной создаваемого покрытия, предварительную подготовку кремниевой подложки проводят путем ее кипячения при 75°C в течение 10-15 минут в растворе NH4OH/H2O2/H2O в объемном соотношении 1/1/4, для приготовления водного раствора поликатионных молекул использован полиэтиленимин, а во время адсорбции поликатионных молекул на подложку осуществляют освещение подложки со стороны раствора светом с интенсивностью в диапазоне 800-1000 лк, достаточной для изменения плотности заряда поверхности полупроводниковой структуры за время адсорбции.

Изобретение относится к способам получения наноструктурированных материалов. Технический результат изобретения заключается в получении структурированных сплошных и наноостровковых пленок без использования сложных технических средств.

Изобретение относится к области металлургии, а именно к изготовлению длинномерных прутков с нанокристаллической структурой для медицинских изделий. Способ включает интенсивную пластическую деформацию заготовки при температуре, не превышающей температуру рекристаллизации материала заготовки.

Изобретение относится к химии и водородной энергетике и может быть использовано в транспортном машиностроении. Водород получают в генераторе 1, направляют в приёмник 2, разделяют на два потока 3 и воздействуют на них импульсным магнитным полем с амплитудой магнитной индукции В более 100 гаусс.

Изобретение относится к технологиям получения наноструктурированного углеродного материала и может быть использовано в химической, электротехнической, машиностроительной промышленности при изготовлении усиливающих наполнителей резин и пластмасс, пигментов для типографских красок, в производстве сплавов, специальных сортов бумаги, электродов, гальванических элементов.

Изобретение относится к области резки стекла и может применяться в составе ручного и механического инструмента. При изготовлении режущей головки стеклореза в качестве режущего элемента используют графеновый кластер в виде пачки плоскопараллельных графенов, связанных между собой по одному из торцов (графеновую пемзу), или графеновый ламинат - материал в виде параллельных слоёв плоских графенов, связанных твёрдым материалом по поскостям.

Изобретение относится к области исследования физических свойств металлов и сплавов, а именно к анализу вязкости разрушения тонких пленок многокомпонентных аморфно-нанокристаллических металлических сплавов (АНКМС) после их перехода из одного состояния в другое, в результате термической обработки, то есть определению условий, при которых данные сплавы приобретают требуемые свойства.

Изобретение относится к технологиям получения массивов углеродных нанотрубок на поверхности подложки. В реакционной камере формируют поток рабочего газа, содержащего несущий газ, газообразный углеводород и предшественник катализатора для синтеза углеродных нанотрубок.

Изобретение относится к области порошковой металлургии и может быть использовано при изготовлении твердых сплавов, режущего инструмента и износостойких покрытий.

Изобретение относится к химической технологии. На первой стадии производства наночастиц антипирена гидроксида магния осуществляют взаимодействие водного раствора хлорида магния с щелочным компонентом при температуре не выше 100°C и мольном отношении ионов ОН-: Mg++ в пределах (1,9-2,1):1.
Изобретение относится к области нанотехнологии, в частности нанокапсулирования при получении нанокапсул аминогликозидных антибиотиков в оболочке из альгината натрия.

Изобретение относится к технологии обработки кремниевых монокристаллических пластин и может быть использовано для создания электронных структур на его основе. Способ электрической пассивации поверхности кремния тонкопленочным органическим покрытием из поликатионных молекул включает предварительную подготовку подложки для создания эффективного отрицательного электростатического заряда, приготовление водного раствора поликатионных молекул, адсорбцию поликатионных молекул на подложку в течение 10-15 минут, промывку в деионизованной воде и сушку подложки с осажденным слоем в потоке сухого воздуха, при этом в качестве подложки использован монокристаллический кремний со слоем туннельно прозрачного диоксида кремния, с шероховатостью, меньшей или сравнимой с толщиной создаваемого покрытия, предварительную подготовку кремниевой подложки проводят путем ее кипячения при 75°C в течение 10-15 минут в растворе NH4OH/H2O2/H2O в объемном соотношении 1/1/4, для приготовления водного раствора поликатионных молекул использован полиэтиленимин, а во время адсорбции поликатионных молекул на подложку осуществляют освещение подложки со стороны раствора светом с интенсивностью в диапазоне 800-1000 лк, достаточной для изменения плотности заряда поверхности полупроводниковой структуры за время адсорбции.

Изобретение относится к химической технологии. Способ предусматривает растворение в дистиллированной воде янтарной кислоты при температуре 20°C, фильтрацию нерастворившейся янтарной кислоты и добавление к полученному раствору низкомолекулярного хитозана, выдерживании при перемешивании со скоростью 200 об/мин в течение 2 часов.
Изобретение относится к полимерным пленочным материалам, модифицированным нанокомпозитными соединениями, предназначенным для применения в электронной промышленности, электротехнике, машиностроении.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения нанокапсул витаминов А, С, D, Е или Q10. Способ получения нанокапсул витаминов А, С, D, Е или Q10 заключается в том, что определенное количество витамина А, С, D, Е или Q10 добавляют в суспензию каррагинана в бутаноле, содержащую каррагинан в присутствии Е472с, при перемешивании, после чего приливают гексан, отфильтровывают полученную суспензию и сушат.

Изобретение относится к химии и водородной энергетике и может быть использовано в транспортном машиностроении. Водород получают в генераторе 1, направляют в приёмник 2, разделяют на два потока 3 и воздействуют на них импульсным магнитным полем с амплитудой магнитной индукции В более 100 гаусс.

Изобретение относится к технологиям получения наноструктурированного углеродного материала и может быть использовано в химической, электротехнической, машиностроительной промышленности при изготовлении усиливающих наполнителей резин и пластмасс, пигментов для типографских красок, в производстве сплавов, специальных сортов бумаги, электродов, гальванических элементов.

Изобретение относится к области оптики, а именно к острой фокусировке электромагнитного излучения, и может быть использовано для высокоразрешающей оптической записи и сканирующей оптической микроскопии.

Изобретение относится к способу инкапсуляции аспирина в ксантановой камеди. Указанный способ характеризуется тем, что суспензию аспирина смешивают с бензолом и диспергируют полученную смесь в суспензию ксантановой камеди в бутаноле в присутствии препарата Е472с при перемешивании 1000 об/с, далее приливают хлороформ, полученную суспензию нанокапсул отфильтровывают и сушат, при этом соотношение оболочка/ядро в нанокапсулах составляет 1:5, 3:1 или 1:1.

Изобретение относится к способу получения нанокапсул цефалоспориновых антибиотиков в альгинате натрия. Указанный способ характеризуется тем, что в суспензию альгината натрия и препарата Е472с в бутаноле добавляют порошок цефалоспорина в бензоле, после образования цефалоспорином самостоятельной твердой фазы добавляют четыреххлористый углерод, полученную суспензию нанокапсул отфильтровывают, при этом соотношение ядро/оболочка в нанокапсулах составляет 1:3.
Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, а именно к препаратам для лечения синдрома «сухого глаза». Препарат содержит поливинилпирролидон, натрия хлорид, калия хлорид, кальция хлорид, магния хлорид, натрия гидрокарбонат, дексаметазона фосфат, декстрозу и воду для инъекций.
Наверх