Способ оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови


 

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Владельцы патента RU 2563814:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского" Российской академии медицинских наук (RU)

Изобретение относится к медицине и описывает способ оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови, заключающийся в том, что в сыворотке крови больного определяют суммарную концентрацию фенилуксусной (ФУК), пара-гидроксифенилуксусной (п-ГФУК), фенилмолочной (ФМК) и пара-гидроксифенилмолочной (п-ГФМК) кислот до и после очистки крови и при снижении ее в 2 и более раз очистку крови оценивают как эффективную. Способ обладает высокой методической точностью и объективностью и позволяет своевременно определить эффективность проводимой операции очистки крови у больных с разными заболеваниями. 8 табл., 6 пр.

 

Область применения

Изобретение относится к области медицины, а именно анестезиологии-реаниматологии и нефрологии. Способ может быть применен для больных, которым показано проведение диализно-фильтрационной очистки крови, а именно гемодиализа (ГД) или гемодиафильтрации (ГДФ) - для пациентов с хронической (ХПН) и острой (ОПН) почечной недостаточностью, у пострадавших с тяжелой сочетанной, хирургической и ожоговой травмой, у больных с панкреатогенным и септическим шоком.

Непосредственным результатом проведения операции ГД и ГДФ является удаление из организма растворенных химических соединений, участвующих в развитии эндогенной интоксикации. При ГД и ГДФ растворенные вещества способны проходить через поры мембраны с помощью двух механизмов - диффузии и ультрафильтрации (конвекции), при этом из организма происходит удаление веществ с низкой и средней молекулярной массой.

Ранее были предложены разные способы оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови.

В реаниматологии широко распространен способ, определяющий эффективность операции ГДФ по объему ультрафильтрации в мл на кг веса пациента в час (Руководство по экстракорпоральному очищению крови в интенсивной терапии / Под ред. Л.А. Бокерия, М.Б. Ярустовского. - М.: НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН, 2009, раздел VII). Однако существенным недостатком данного способа является то, что он не обладает индивидуальной чувствительностью, ровно как не дает четкого понимания, как долго необходимо проводить ГДФ и с какой интенсивностью.

Для хронического ГД был предложен аналогичный подход, и эффективность операции, например, оценивали в часах диализа на квадратный метр поверхности мембраны (Babb A.L., Popovich R.P., Cristopher T.G., Scribner B.H. The genesis of the square meter-hour hypotesis // Trans. Am. Soc. Artif. Intern. Organs. 1971 - Vol.17. - P.81-91). Из-за низкой универсальности этот метод не получил широкого распространения, и оценку эффективности операции ГД у больных с ХПН и ОПН в настоящее время осуществляют на основе динамики концентрации мочевины - низкомолекулярного эквивалента уремической интоксикации (А.Ю. Николаев, Ю.С. Милованов. Лечение почечной недостаточности. Рук. для врачей. - М.: МИА. 2011; Клинический диализ: руководство / С. Ахмад; пер. с англ., под ред. Е.А. Стецюка. - М.: Логосфера, 2011).

Известен способ, с помощью которого возможно оценить эффективность диализно-фильтрационной очистки крови, используя способ оценки эндогенной интоксикации, как содержание в крови молекул средней и низкой молекулярной массы [RU 2324943 C2; Карякина Е.В., Белова С.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2004; 3:3-8]. Существенным недостатком способа является то, что в состав анализируемых молекул входят вещества с существенно различающейся молекулярной массой (от 150 до 6000 дальтон), следовательно, со сложнопрогнозируемым движением молекул через полупроницаемую мембрану фильтра. Спектр данных соединений может существенно отличаться в зависимости от причины эндогенной интоксикации, что влияет на величину оптической плотности и снижает универсальность способа при интерпретации результатов анализа до и после операции экстракорпоральной очистки крови при разных заболеваниях.

Задачей изобретения является разработка способа оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови, универсального для ГД и ГДФ, позволяющего своевременно определить эффективность проводимой операции очистки крови у больных с разными заболеваниями, обладающего высокой методической точностью и объективностью.

Поставленная задача решается способом оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови, заключающимся в том, что в сыворотке крови больного определяют суммарную концентрацию фенилуксусной (ФУК), пара-гидроксифенилуксусной (п-ГФУК), фенилмолочной (ФМК) и пара-гидроксифенилмолочной (п-ГФМК) кислот до и после очистки крови и при снижении ее в 2 и более раз очистку крови оценивают как эффективную.

При синдроме эндогенной интоксикации в независимости от этиологии заболевания происходит повышение суммарной концентрации ФУК, ФМК, п-ГФУК и п-ГФМК, при этом обнаруживается прямая корреляция между суммой кислот и тяжестью состояния больного, что позволяет использовать этот параметр в качестве объективного биохимического эквивалента тяжести синдрома эндогенной интоксикации. В ходе анализа всегда исследуется содержание одних и тех же соединений, что облегчает врачу интерпретацию лабораторного теста при динамической оценке применительно к разным категориям больных. Предложенный способ обладает универсальностью для оценки эффективности операции ГД и ГДФ. Получение результата исследования сыворотки крови предложенным способом газохроматографического анализа происходит в пределах 1,5 часов, что удовлетворяет критериям экспресс-анализа и удобно для реализации в клинике. Метод газовой хроматографии позволяет получать результаты анализа в количественном измерении, в то время как метод измерения оптической плотности является количественным относительно, т.к. результат измерения зависит от соотношения в пробе неустановленного числа химических соединений. Метод газовой хроматографии более распространен в клинической практике, нежели метод измерения оптической плотности.

Сущность изобретения

Для оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови (гемодиализа (ГД) и гемодиафильтрации (ГДФ)) до начала операции у больного оценивают суммарную сывороточную концентрацию четырех ароматических кислот (ФУК, п-ГФУК, ФМК, п-ГФМК). Повторно суммарную концентрацию четырех кислот определяют после операции, и в случае если концентрация кислот снизится в 2 и более раз относительно исходной концентрации, очистку крови определяют как эффективную.

В процессе операции очистки крови диализно-фильтрационными методами происходит закономерное снижение суммарной концентрации анализируемых кислот в крови, т.к. их удаление происходит как за счет диффузии, так и за счет конвекции (ультрафильтрации).

Исходным материалом для анализа служит сыворотка крови. В описании приведена методика количественного определения содержания определяемых кислот в крови методом газовой хроматографии с пламенно-ионизационным детектором (ГХ-ПИД), но способ по изобретению не исключает также определение указанных кислот и другими методами.

Методика определения ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК в сыворотке крови методом газовой хроматографии (ГХ)

Исходным материалом для анализа служит сыворотка крови. В центрифужную пробирку отбирают 800 мкл воды для инъекций и 200 мкл сыворотки крови больного. В полученный раствор вносят внутренний стандарт для ГХ-анализа (10 мкл спиртового раствора 3,4-дигидроксибензойной кислоты, содержащего 400 нг кислоты). Далее добавляют NaCl (0,35-0,5 г) до получения насыщенного раствора и производят подкисление 50% серной кислотой до pH=2,0. После высаливания и подкисления производят 3-кратную экстракцию внутреннего стандарта и анализируемых кислот эфиром (по 1 мл эфира на раз), пробирки центрифугируют при скорости 3000 об/мин в течение 5 мин - экстракт переносят в виалу на 1,5 мл и упаривают при 60°C досуха. Для получения триметилсилильных (ТМС) производных остаток обрабатывают 20 мкл N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида при 80° в течение 15 мин. Полученный препарат растворяют в 80 мкл гексана и анализируют методом ГХ. Объем анализируемой пробы - 2 мкл.

Газохроматографическое определение кислот проводят с использованием газового хроматографа, оснащенного пламенно-ионизационным детектором.

Хроматографическое разделение проводят на кварцевой капиллярной колонке CP SIL 5CB длиной 30 м, диаметром 0,25 мкм. Газ носитель - гелий, скорость потока - 30 мл/мин. Температурный режим анализа: температура испарителя - 270°C, начальная температура термостата колонки - 80°C, время выдержки 4 мин, далее нагрев до 240°C со скоростью 7°C/мин и далее до 270°C со скоростью 15°C/мин, затем термостатирование при 270°C до конца анализа. Общее время анализа 30 мин. Времена удерживания определяемых соединений представлены в таблице 1.

Таблица 1
Времена удерживания определяемых компонентов хроматограммы
Компонент ПИД, время удерживания, мин
ФУК 13,265
ФМК 19,155
ГФУК 19,926
3,4-дигидроксибензойная кислота (внутренний стандарт) 23,087
ГФМК 24,352

Для расчетов используют хроматограммы. Идентификацию пиков проводят по времени выхода исследуемых кислот. Расчет концентрации анализируемых кислот проводят по площади пиков. Суммарную концентрацию анализируемых кислот определяют путем сложения концентраций отдельных кислот.

Пример 1.

Суммарная концентрация фенилуксусной, пара-гидроксифенилуксусной, фенилмолочной и пара-гидроксифенилмолочной кислот в сыворотке крови здорового добровольца, пациента с терминальной стадией ХПН и пациента в критическом состоянии. Результаты приведены в таблицах 2, 3 и 4A.

Таблица 2
Суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК в сыворотке крови здорового добровольца Р-в, 38 лет, мкмоль/л
Суммарная концентрация 4-х кислот Сыворотка крови
4,53
Таблица 3
Суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК в сыворотке крови пациента с терминальной стадией ХПН перед началом операции ГД, Ш-в, 56 лет, мкмоль/л
Суммарная концентрация 4-х кислот Сыворотка крови
44,2
Таблица 4A
Суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК в сыворотке крови больного Г-х, 54 лет с тяжелым сепсисом, мкмоль/л
Суммарная концентрация 4-х кислот Сыворотка крови
69,29

Пример 2.

Пациентка Л-ко, 76 лет с диагнозом: «Хроническая почечная недостаточность, терминальная стадия. Программный гемодиализ с 2007 г.» Поступила в отделение экстракорпоральных методов очистки крови в общем удовлетворительном, стабильном состоянии для проведения плановой операции ГД. При исследовании сыворотки крови суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК составила 65,05 мкмоль/л, сывороточная концентрация мочевины - 26,8 ммоль/л (N 2,5-8,3). Через 4 часа операции ГД суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК снизилась в 2,83 раза и составила 22,94 ммоль/л, а уровень мочевины снизился до 6,9 ммоль/л (процент снижения мочевины (URR - urea redaction rate) 74,2% - общепринятый эквивалент эффективной операции ГД (Клинический диализ: руководство / С. Ахмад; пер. с англ., под ред. Е.А. Стецюка. - М.: Логосфера, 2011., стр.94).

Таким образом, согласно формуле изобретения операция ГД у данного пациента определяется как эффективная, при этом эффективность ГД подтверждается общепринятым критерием URR=74,2% (N>65%).

Пример 3.

Пациент С-ко, 64 лет с диагнозом: «Хроническая почечная недостаточность, терминальная стадия. Программный гемодиализ с 2009 г.» Поступил в отделение экстракорпоральных методов очистки крови в состоянии средней степени тяжести с признаками уремической интоксикации - бледные кожные покровы, потеря аппетита, вялость, сонливость, характерный запах. Причина ухудшения состояния - пропуск предшествующей плановой операции ГД. При исследовании сыворотки крови суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК составила 83,96 мкмоль/л, сывороточная концентрация мочевины - 32,7 ммоль/л (N 2,5-8,3). В связи с клиническим ухудшением состояния больного за счет уремической интоксикации продолжительность текущей операции ГД была увеличена на 1 час по сравнению с расчетной стандартной процедурой для данного больного и составила 5,5 часов. Через 4 часа от начала операции ГД суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК составила 47 мкмоль/л - снижение составило менее 2 раз. Через 5,5 часов удалось достичь снижения суммарной концентрации ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК в 2,27 раза (до 36,95 ммоль/л), а уровень мочевины снизить до 9,9 ммоль/л (процент снижения мочевины (URR - urea redaction rate) 69,72% - показатель приближается к минимально достаточному уровню эффективности операции ГД - URR>65%, что также соответствует минимальному критерию в 2 раза формулы изобретения). На фоне проведенного лечения самочувствие больного улучшилось, однако для восполнения пропущенных часов программного ГД решено провести внеочередную операцию ГД на следующий день.

Пример 4.

Пациент 3-в, 51 года с диагнозом: «Хроническая почечная недостаточность, терминальная стадия. Программный перитонеальный диализ. Перитонит».

В результате инфицирования перитонеального диализного катетера у пациента развился перитонит. Уровень биомаркера микробной нагрузки, прокальцитонина (ПКТ) составил 0,7 нг/мл (N<0,25 нг/мл), лейкоцитоз 16×109/л, максимальная температура тела до 38°C. На этом фоне отмечен рост суммарной концентрации ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК до 140 мкмоль/л, что соответствовало трехкратному превышению фоновой междиализной суммарной концентрации исследуемых кислот у данного больного в 3 раза. При этом междиализный уровень мочевины оставался в пределах обычных значений. С целью лечения эндогенной интоксикации смешенной этиологии пациенту была проведена операция по очистке крови - гемодиафильтрация (ГДФ). Результаты динамики интегральной концентрации исследуемых 4-х кислот представлены в таблице 4Б.

Таблица 4Б
Результат проведения процедуры ГДФ (фильтр EMIC 2), у пациента З-в
Суммарная концентрация кислот в сыворотке крови, мкмоль/л Исходное значение, сыворотка В конце операции ГДФ, сыворотка
140,41 70,03
ПКТ, нг/мл 0,7 0,35

Таким образом, в результате операции ГДФ произошло снижение суммарной концентрации ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК в 2 раза. На фоне проведенного лечения уровень лейкоцитов крови снизился до 12×109/л, а ПКТ в 2 раза, пациент также отметил субъективное улучшение самочувствия. Объем ультрафильтрации составил 35 мл/кг/час (общепринятый критерий эффективности операции ГДФ при эндогенной интоксикации (Руководство по экстракорпоральному очищению крови в интенсивной терапии / Под ред. Л.А. Бокерия, М.Б. Ярустовского. - М.: НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН, 2009, раздел VII). Продолжительность операции ГДФ составила 6 часов.

Таким образом, согласно формуле изобретения операция ГДФ была эффективной.

Пример 5.

Пациент М-н, 65 лет с диагнозом: «Состояние после протезирования митрального клапана, аорто-коронарного шунтирования. Нозокомиальная пневмония. Острая почечная недостаточность. Сепсис».

В послеоперационном периоде у пациента было отмечено развитие ОПН и нозокомиальной пневмонии. С целью лечения эндогенной интоксикации смешанной этиологии пациенту была проведена операция по очистке крови - ГДФ. Тяжесть состояния больного до начала операции ГДФ документирована следующими показателями: температура тела составляла 37,2°С, лейкоцитоз 14,3×109/л, тахикардия 105 в мин, гипервентиляция (парциальное давление углекислоты в артериальной крови (PaCO2) 27 мм рт.ст.), оценка 16 баллов по шкале SAPS II. Суммарная концентрация 4-х кислот в сыворотке крови повышена более чем в 10 раз относительно нормы и составила 57,40 мкмоль/л. Результаты динамики суммарной концентрации исследуемых кислот на фоне лечения в первые 5 часов операции ГДФ с показателем ультрафильтрации 25 мл/кг/час представлены в таблице 5.

Таблица 5
Результат проведения процедуры ГДФ (фильтр EMIC 2) у пациента М-н, мкмоль/л
Суммарная концентрация кислот в сыворотке крови Исходное значение, сыворотка В конце операции ГДФ, сыворотка
57,40 34,20

Суммарная концентрация ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК снизилась в 1,8 раза (менее чем в 2 раза). Таким образом, в процессе операции ГДФ не было выполнено условие формулы изобретения, определяющего дозу диализно-фильтрационного метода очистки крови как эффективную. Клинически также не было отмечено положительной динамики - сохранялась тахикардия 97 в мин (в динамике незначительно меньше), гипервентиляция с частотой дыхания до 27 в минуту, признаки нарушения микроциркуляции. В связи с чем был сделан вывод о необходимости продления времени операции по очистки крови и увеличении интенсивности самой операции.

Пример 6.

Пациент О-в, 74 лет с диагнозом: «Панкреонекроз. Панкреатогенный шок. Перитонит. Нозокомиальная пневмония. Сепсис». Находился на лечении в отделении реаниматологии. Больному ежедневно по 12 часов проводились операции ГДФ с показателем ультрафильтрации 35 мл/кг/час. На стадии асептического некроза и ферментемии операция ГДФ оставалась эффективна, что отражено в таблице 6А.

Таблица 6А
Эффективность операции ГДФ у больного О-ва на стадии асептического панкреонекроза (5 сутки наблюдения в ОРИТ)
до ГДФ в конце ГДФ
Суммарная концентрация кислот в сыворотке крови, мкмоль/л 42,16 12,98
Лейкоцитоз, ×109 16,0 12,3
Мочевина, ммоль/л 11,40 9,7
Температура, °C 38,3 37,0

Однако на стадии гнойных осложнений - нагноение забрюшинной клетчатки, фибринозно-гнойный перитонит, двусторонняя пневмония, операции ГДФ на предельных параметрах работы аппаратуры стали неэффективными, что отражено в таблице 6Б.

Таблица 6Б
Эффективность операции ГДФ у больного О-ва на стадии гнойных осложнений (21-22 сутки наблюдения в ОРИТ). Продолжительность операции ГДФ 18 часов. Скорость ультрафильтрации 35 мл/кг/час
до ГДФ сразу после ГДФ
Суммарная концентрация кислот в сыворотке крови, мкмоль/л 35,33 33,23
Лейкоцитоз, ×109 16,3 30
Мочевина, ммоль/л 11 8,4
Температура, °C 37,8 38,8

Больной погиб на 25 сутки наблюдения в отделении реаниматологии в результате септического шока. При этом отмечено значительное нарастание суммарной концентрации ФУК, п-ГФУК, ФМК и п-ГФМК ко дню летального исхода (до 105 мкмоль/л), несмотря на практически непрерывное проведение ГДФ.

Таким образом, предложенный способ оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови является универсальным для ГД и ГДФ, позволяет своевременно определить эффективность проводимой операции очистки крови у больных с разными заболеваниями, обладает высокой методической точностью и объективностью.

Способ оценки эффективности диализно-фильтрационной очистки крови, заключающийся в том, что в сыворотке крови больного определяют суммарную концентрацию фенилуксусной (ФУК), пара-гидроксифенилуксусной (п-ГФУК), фенилмолочной (ФМК) и пара-гидроксифенилмолочной (п-ГФМК) кислот до и после очистки крови и при снижении ее в 2 и более раз очистку крови оценивают как эффективную.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования депрессии тяжелой степени у мужчин с ишемической болезнью сердца (ИБС). Сущность способа состоит в том, что у мужчин с ИБС устанавливают временную и структурную связь между ИБС и признаками депрессии, измеряют уровень личностной тревожности с помощью теста Спилбергера-Ханина.

Изобретение относится к гинекологии и представляет собой способ прогнозирования риска развития пролапса гениталий (ПГ) у женщин с родовыми травмами в анамнезе, включающий отбор биоматериала для выделения ДНК, проведение генотипирования ДНК методом тетра-праймерной аллель-специфической полимеразной цепной реакции, выявление полиморфизма гена FBLN5 по сайтам rs12586948, rs2018736, rs12589592 и rs2474028, в котором высокий риск развития пролапса гениталий прогнозируют при выявлении совокупности генотипов: rs12586948-A/*, rs2018736-C/*, rs12589592-G/G и rs2474028-T/*, а низкий риск - при совокупности генотипов: rs12586948-G/G, rs2018736-A/A, rs12589592-A/A и rs2474028-С/С.
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики меланоцитарных новообразований кожи. Способ включает получение биоптата исследуемого новообразования кожи, затем с исследуемым образцом проводят ПЦР в реальном времени для количественного определения относительного уровня экспрессии микроРНК по нормализующей микро-РНК - snRNA-U6, при этом маркером дифференциальной диагностики является ген hsa-miR-205.
Изобретение относится к медицине, а именно к медицине труда, и описывает способ диагностики ранних нарушений от воздействия вредных производственных факторов в организме работников, занятых в производстве синтетических смол не более 5 лет.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к нефрологии и относится к применению комбинации метаболитов, включающей по меньшей мере две аминокислоты, по меньшей мере два ацилкарнитина и по меньшей мере два биогенных амина, в качестве массива биомаркеров, предназначенного для оценки хронической болезни почек в образце крови.

Изобретение относится к медицине, а именно к детской терапевтической стоматологии, и предназначено для диагностики воспаления пульпы временного зуба. Для этого проводят исследование десневой жидкости в области проблемного зуба, определяя активность ферментов ACT и АЛТ.

Изобретение относится к медицине, в частности к области медицинской диагностики, и описывает способ прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ).

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования лимфогенного метастазирования при трипл негативной инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.
Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и предназначено для прогнозирования эффективности антиэстрогенной терапии тамоксифеном. У пациенток с люминальным типом рака молочной железы проводят иммуногистохимическое исследование ткани опухоли, определяют характер распределения экспрессии рецепторов эстрогенов альфа в ткани опухоли.

Группа изобретений раскрывает антительные матрицы для определения активационного состояния и/или общего количества одного или нескольких онкогенных слитых белков в таких биологических образцах, как цельная кровь или раковая ткань, а также способы их применения.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения иммуностимулятора из нервной ткани головоногих моллюсков, мозга морских млекопитающих и рыб. Способ получения иммуностимулятора из нервной ткани головоногих моллюсков, мозга морских млекопитающих и рыб, включающий размораживание и измельчение сырья, затем измельченное сырье обрабатывают ферментами протеолитического типа, полученную надосадочную жидкость отделяют и сушат конечный продукт, при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет повысить выход конечного продукта. 1 з.п. ф-лы, 5 табл., 4 пр.

Группа изобретений относится к области молекулярной биологии, иммунологии и медицины и предназначена для идентификации популяций аутореактивных Т-клеток у индивидуумов с аутоиммунными заболеваниями. Для взятия аутоиммунных Т-клеток у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, получают пептоид, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками. Указанный пептоид связан с носителем. Выполняют контактирование образца, взятого от указанного индивидуума, с указанным пептоидом, связанным с носителем, в течение периода времени, достаточного для связывания аутоиммунных Т-клеток с указанным пептоидом, связанным с носителем. Затем отделяют указанный носитель от указанного образца. В других воплощениях обеспечиваются способы уничтожения аутоиммунных Т-клеток, взятых у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием. Использование группы изобретений обеспечивает более эффективную идентификацию аутоиммунных заболеваний различного типа и проведение терапии, направленной против таких популяций. 4 н. и 46 з.п. ф-лы, 15 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение касается способа выявления ионов кальция в эритроцитах периферической крови беременных. Способ включает выполнение гистохимической реакции на монослойных мазках периферической крови с помощью их последовательной обработки растворами, состоящими из 5% нитрата серебра, промывки 5% тиосульфатом натрия и дистиллированной водой с последующей докраской 1% раствором сафранина на 96% этиловом спирте, дифференцировки в 96% этиловом спирте, обезвоживание в спиртах возрастающей концентрации, просветление в кислоте и заключение в бальзам. Затем изучают компьютерным цитофотометрическим методом содержание кальция в отдельно взятых эритроцитах и устанавливают. При обострении цитомегаловирусной инфекции до титра антител 1:1600, снижении содержания кальция в мембранах эритроцитов до 12,80±0,40 усл. ед., при контроле - 34,00±0,07 усл. ед., увеличении количества дегенеративных форм эритроцитов до 12,0±0,95% и снижении содержания оксигемоглобина до 92,3±1,5% определяют угрозу формирования в организме беременной гипоксии. 2 ил.
Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и гастроэнтерологии, и описывает способ оценки риска развития язвенной болезни у хакасов на основе генетического анализа. Способ характеризуется тем, что устанавливают факторы риска - определяют полиморфизм интерлейкина IL-8 методом рестрикционного анализа при выделении ДНК из лимфоцитов венозной крови, а также определяют генотип Helicobacter pylori методом ПЦР при выделении ДНК из биоптатов слизистой оболочки желудка у пациентов, относящихся к коренным жителям Республики Хакасия. Факторам риска присваивают числовые значения и затем определяют прогностические коэффициенты P1, Р2. При Р1>Р2 прогнозируют низкий риск, а при Р1<Р2 прогнозируют высокий риск развития язвенной болезни. Предложенный способ обладает высокой прогностической значимостью положительного результата в оценке риска развития язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у хакасов (89,7%). Изобретение может использоваться для повышения точности оценки риска развития язвенной болезни двенадцатиперстной кишки на основе генетического анализа на стадии доклинических проявлений и для проведения эффективных мероприятий, направленных на превенцию распространенного заболевания. 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии, а именно к способу определения неизвестной концентрации клостридиального нейротоксина в первом образце по отношению к известной концентрации клостридиального нейротоксина во втором образце и к способу определения относительной активности клостридиального нейротоксина в первом образце по отношению к активности клостридиального нейротоксина во втором образце, где способ включает следующие этапы: (а) контактирование клеточной культуры с указанным вторым образцом, содержащим клостридиальный нейротоксин в известной концентрации; (c) измерение второго эффекта, вызванного в указанной клеточной культуре указанным клостридиальным нейротоксином в известной концентрации; (d) повторение этапов (а)-(с) при различных концентрациях указанного клостридиального нейротоксина; (e) регистрацию измеренного второго эффекта этапа (d) в зависимости от концентрации клостридиального нейротоксина с регистрацией, таким образом, второго набора данных; (f) контактирование клеточной культуры с указанным первым образцом, содержащим указанный клостридиальный нейротоксин в неизвестной концентрации; (h) измерение первого эффекта, вызванного в указанной клеточной культуре указанным клостридиальным нейротоксином в неизвестной концентрации; (k) определение концентрации клостридиального нейротоксина, при которой указанный первый и указанный второй эффекты идентичны; и (l) сравнение концентрации клостридиального токсина, определенной в (k), с указанной неизвестной концентрацией клостридиального нейротоксина; где до указанного измерения в этапе (с) и этапе (h), и после контакта в этапе (а) и этапе (f), указанную клеточную культуру подвергают контакту в течение от 0,5 до 100 ч с водной средой, которая не содержит клостридиальный нейротоксин, и где этап (с) выполняют при отсутствии указанного второго образца, а этап (h) выполняют при отсутствии указанного первого образца. Применение способа для определения неизвестной концентрации клостридиального нейротоксина в первом образце по отношению к известной концентрации клостридиального нейротоксина во втором образце. Использование заявленного способа позволяет повысить точность определения неизвестной концентрации клостридиального нейротоксина и относительной активности клостридиального нейротоксина в образце. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики болезни Альцгеймера или умеренного когнитивного расстройства. Сущность способа состоит в том, что способ включает измерение в крови десмостерола, бета-амилоида, гельсолина. При уровне десмостерола в крови субъекта ниже эталонного значения, или при уровне десмостерола и Aβx-42 или Aβx-42/Aβx-40 в крови субъекта ниже эталонных значений, или при уровне десмостерола и Aβx-42 или Aβx-42/Aβx-40 и уровне гельсолина в крови субъекта ниже эталонных значений, или при уровне десмостерола и гельсолина в крови ниже эталонных значений диагностируют болезнь Альцгеймера или умеренное когнитивное расстройство. Использование заявленного способа позволяет эффективно диагностировать болезнь Альцгеймера или умеренное когнитивное расстройство. 4 н.п. ф-лы, 8 ил., 4 табл., 6 пр.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Способ диагностики наличия гломерулонефрита у кошки предусматривает измерение уровня экспрессии одного или нескольких биомаркеров, выбранных из группы, состоящей из люмикана; цепи коллагена альфа 1 (III), варианта 12; декорина; секретируемого родственного frizzled белка 2; ретинол-связывающего белка 5; MMP-2; MMP-7 и MMP-19, в биологическом образце, полученном от кошки. При этом значимое отличие в экспрессии одного или нескольких биомаркеров в образце по сравнению с контрольным значением для экспрессии в образце, полученном от здорового животного, свидетельствует о наличии расстройства почек. В группу изобретений также входит набор для осуществления указанного способа, с возможным использованием для диагностики нуклеотидных последовательностей комплементарных указанным выше генам. Проведение диагностика гломерулонефрита с использованием данной группы изобретений позволяет выявлять и прогнозировать развитие гломерулонефрита на ранних стадиях. 3 н. и 19 з.п. ф-лы, 16 ил., 4 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ качественного определения адаптационной способности к мостовидным конструкциям ортопедических протезов по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области, причем, если определяют содержание в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 (ТИМП 1) в количестве 118,9-145,7 нг/мл и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 (ТИМП 2) в количестве 42,4-56,9 нг/мл, то диагностируют низкую адаптационную способность пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к мостовидным конструкциям ортопедических протезов, а если определяют содержание в ротовой жидкости пациента ТИМП 1 в количестве 68,2-77,4 нг/мл и ТИМП 2 в количестве 21,9-37,7 нг/мл, то диагностируют полную функциональную адаптацию пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к мостовидным конструкциям ортопедических протезов. Осуществление изобретения обеспечивает повышение точности определения адаптационной способности и чувствительности дифференциальной диагностики адаптационной способности. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой способ скрининга агента, пригодного для лечения синдрома сухого глаза и/или поражения роговицы и конъюнктивы при синдроме сухого глаза 3-й и более степени, который включает приготовление кроличьей модели поражения роговицы и конъюнктивы путем абразии эпителия роговицы и конъюнктивы инстилляцией раствора n-гептанола в глаз кролика; и введение испытуемого агента в глаз кролика модели и оценку эффекта восстановления ткани роговицы под действием испытуемого агента, в котором наносимый объем раствора n-гептанола составляет всего от 0,03 до 0,05 мл, который капают 2-4 раза, и в котором кролика заставляют моргать 2-4 раза, в котором стадия приготовления дополнительно включает принуждение кролика к закрытию глаза на период от около 1 до около 3 минут после инстилляции раствора n-гептанола в глаз. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 7 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к области морской медицины, может быть использовано в практике водолазной медицины для определения степени эндогенной интоксикации у водолазов. Способ осуществляется следующим образом: определяют концентрацию молекул средней массы в сыворотке крови, причем исследования проводят до погружения и повторно через 40 минут после его завершения, и при увеличении концентрации молекул средней массы до 1,4 раза включительно степень эндогенной интоксикации полагают легкой, при увеличении от 1,4 до 2,2 раза - выраженной и более 2,2 раза - тяжелой. Изобретение позволяет выявить нарушения, формирующиеся при декомпрессионном внутрисосудистом газообразовании у водолазов. 1 пр.
Наверх