Способ диагностики муковисцидоза


 


Владельцы патента RU 2563835:

Калмыкова Ангелина Станиславовна (RU)
Леденева Лариса Николаевна (RU)
Водовозова Элла Владимировна (RU)
Дубовой Роман Михайлович (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и описывает способ диагностики муковисцидоза. Способ характеризуется тем, что определяют концентрации Na, В и Pb в пробоподготовленных волосах детей раннего возраста методами атомной эмиссионной спектрометрии с индукционно связанной аргоновой плазмой и/или масс-спектрометрии с индуктивно связанной аргоновой плазмой, при этом у больных муковисцидозом относительно контрольной группы увеличивается содержание Na и В соответственно в 8,5; 3,3 раза и уменьшается содержание Pb в 1,3 раза. Предложенный способ является простым в исполнении, достоверным. Изобретение может использоваться при диагностике муковисцидоза у детей с первых дней жизни. 1 табл.

 

Изобретение относится к медицине, в частности педиатрии, и может быть использовано при диагностике муковисцидоза.

Муковисцидоз (MB) или кистофиброз поджелудочной железы - наиболее распространенное тяжелое моногенное заболевание человека, обусловленное мутацией гена трансмембранного регулятора белка муковисцидоза, характеризующееся поражением экзокринных желез жизненно важных органов и систем, имеющее обычно тяжелое течение и прогноз (Капранов Н.И., Каширская Н.Ю. Муковисцидоз (Современные достижения и актуальные проблемы) // Методические рекомендации. М. 2008. - С. 43-100).

Ген, ответственный за развитие заболевания, был картирован в 1989 г., а продукт его (белок) назван «муковисцидозный трансмембранный регулятор проводимости муковисцидоза» (Cystic Fibrosis transmembrane conductance regulator - CFTR) (Rinrdan J.R., Rnmmens J.M., Kc.rc.t B.Sh. fit al. Identification of the cystic fibrosis gene: Cloning and characterization of complementary DNA. Science 1989; 245: 1066-1073).

К настоящему времени обнаружены около 1500 мутаций в гене CFTR, приводящих к развитию заболевания. По данным Международного консорциума менее 10 мутаций в гене CFTR можно считать часто встречающимися в мире.

После выделения MB в отдельную нозологическую категорию его относили к разряду «фатальных» заболеваний, так как средняя продолжительность жизни больных не превышала 5 лет.

В 70,0% случаев MB выявляется в течение первых двух лет жизни ребенка. В наши дни благодаря расширению знаний о MB и разработке новых эффективных методов лечения средняя продолжительность жизни увеличилась.

Несмотря на огромные достижения в области MB, остаются не решенными многие жизненно важные вопросы: недостаточная диагностика, неполное лекарственное обеспечение, отсутствие комплексной программы наблюдения за больным (Намазова Л.С., Симонова О.И. Научно-практическая конференция «Муковисцидоз вчера, сегодня, завтра» // Педиатрическая фармакология. - 2009. - т. 6, №1. - С. 93-95).

Исследования последних лет свидетельствуют о нарастании неблагоприятных тенденций в состоянии здоровья как взрослого, так и детского населения Российской Федерации, одной из причин которого является нарушение минерального обмена в организме человека вследствие изменения концентрации и соотношения микроэлементов в окружающей среде, питьевой воде и пищевых продуктах (Оберлис Д., Харланд Б., Скальный А. Биологическая роль макро- и микроэлементов у человека и животных. - СПб.: Наука, 2008. - 544 с.).

Важным вопросом остается ранняя диагностика заболевания, так как только в случае своевременного адекватного лечения можно рассчитывать на качественную и продолжительную жизнь данного контингента больных.

Для диагностики MB используют ряд методов, различающихся по информативности и трудоемкости. К ним относят определение концентрации Na и Cl в поте, копрологическое исследование, ДНК-диагностику, измерение разности назальных потенциалов, определение активности эластазы-1 в кале.

Основанием для постановки диагноза MB, как правило, становятся типичные клинические проявления заболевания в сочетании с высоким содержанием хлорида натрия в секрете потовых желез, что до сих пор считается основным «золотым стандартом» диагностики MB (Пат. РФ №2141670, опубл. 20.11.1999).

Недостатком данного способа можно считать то, что сбор пота у детей раннего возраста представляет достаточно сложную задачу, так как существуют технические погрешности непосредственно при сборе пота (сниженное потоотделение в данной возрастной группе), неаккуратность при транспортировке пота, очистки кожных покровов, взвешивании и определении концентрации электролитов, необходимость многократности исследования (2-3 раза).

Все это усложняет раннюю диагностику заболевания и, соответственно, приводит к позднему диагностированию и назначению лечения.

Известен также способ диагностики MB с помощью лабораторных исследований слюны больного до и после воздействия на нее мукосальвином (Пат. РФ №2009491, опубл. 15.07.1994 г.)

Недостатком данного способа является необходимость проведения анализа в лабораторных условиях, его продолжительность (до 30-40 мин).

Наиболее близким к заявляемому изобретению являются разработки по исследованию элементного статуса человека, в которых выбор волос в качестве объекта анализа обусловлен многими фактами, подтверждающими пригодность этого биосубстрата как наиболее информативного объекта (Скальный А.В. Микроэлементы: бодрость, здоровье, долголетие. М.: Эксмо, 2010. 288 с.).

Недостатком данного метода является дороговизна, так как определяются от 25 до 40 элементов.

Целью изобретения является разработка способа диагностики MB путем определения содержания Na, В и Pb в волосах пациентов.

Технический результат изобретения достигается путем определения Na, В и Pb в волосах пациентов методами атомной эмиссионной спектрометрии с индукционно связанной аргоновой плазмой (АЭС-ИСП) и масс-спектрометрии с индуктивно связанной аргоновой плазмой (МС-ИСП) на приборах Optima 2000 DV и Elan 9000 по стандартной методике в соответствии с методическими указаниями МУК 4.1.1482-03, 4.1.1483-03.

Аналитические исследования выполнены лабораторией АНО «Центр Биотической Медицины», аккредитованной в Федеральном центре Госсанэпиднадзора при МЗ РФ (аттестат аккредитации ГСЭН.RU.ЦОА.311, регистрационный номер в Государственном реестре РОСС RU.0001.513118 от 29 мая 2003).

Все образцы подвергались пробоподготовке согласно требованиям МАГАТЭ и методическим рекомендациям «Скрининговые методы для выявления групп повышенного риска среди рабочих, контактирующих с токсичными химическими элементами», утв. МЗ СССР (1989 г.), методическим рекомендациям №41 «Выявление и коррекция нарушений обмена макро- и микроэлементов», утв. КЗ г. Москвы 12.09.2000, методическим рекомендациям «Методика определения микроэлементов в диагностируемых биосубстратах методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ИСП-МС)», утвержденным ФЦГСЭН 26.03.2003, «Методика определения микроэлементов в диагностирующих биосубстратах атомной спектрометрией с индуктивно связанной аргоновой плазмой», утвержденным ФЦГСЭН 29.01.2003, а также МУК 4.1.1482-03, МУК 4.1.1483-03 «Определение химических элементов в биологических средах и препаратах методами атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой и масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой», утвержденным МЗ РФ в 2003 г.).

Практическое осуществление заявляемого способа заключается в следующем.

Волосы состригают с затылочной части головы на всю длину в количестве не менее 0,1 г. Для снятия поверхностного загрязнения и обезжиривания волос применяется способ подготовки проб волос, рекомендованный МАГАТЭ. Для этого волосы обрабатываются ацетоном в течение 10-15 минут, а затем три раза промываются дистиллированной водой. Сушка волос производится при комнатной температуре в течение 10-15 минут.

В подготовленных образцах проводится определение содержания химических элементов методами атомно-эмиссионной и/или (в зависимости от спектра определяемых элементов) масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой согласно методическим указаниям МУК 4.1.1482-03, МУК 4.1.1483-03 «Определение химических элементов в биологических средах и препаратах методами атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой и масс-спектрометрией», утв. Федеральным Центром госсанэпиднадзора Минздрава России 29.06.2003.

Авторами были обследованы все 47 детей Ставропольского края, которые были зарегистрированы в 2010 году как больные MB, 54 ребенка с атипичной пневмонией (АП) и 68 детей с обструктивным бронхитом с рецидивирующим течением (ОБ).

Контролем служили нормативы содержания Na, В и Pb в волосах у здоровых детей (Скальный А.В. Эколого-физиологическое обоснование эффективности использования макро- и микроэлементов при нарушениях гомеостаза у обследуемых из различных климатогеографических регионов: автореф. дис. … докт. мед. наук / А.В. Скальный. - М., 2000. - 44 с.). (Табл. 1).

Для сравнения всем обследуемым детям были проведены потовая проба и определение концентрации Na, В и Pb в волосах.

При проведении потовой пробы у 34 детей (20,0%) отмечались технические трудности при сборе пота за счет слабого потоотделения, из-за чего результаты их анализов были расценены как сомнительные.

Выявлено, что концентрация Na и B в волосах в десятки раз выше, а Pb - ниже у детей раннего возраста, страдающих MB по сравнению не только со здоровыми сверстниками, но и с ровесниками, больными другими бронхолегочными заболеваниями, сопровождающимися бронхобструкцией инфекционного генеза.

Таким образом, можно сделать вывод о правомерности диагностики MB путем определения концентрации Na, В и Pb в волосах обследуемых детей, так как данный метод исследования высоко достоверен, мало инвазивен и необходимые количества исследуемого материала ничтожно малы и легко доступны.

По отношению к известным способам диагностики MB, заявляемый способ прост, надежен, доступен и позволяет определить отсутствие или наличие болезни даже у новорожденных детей.

Cпособ диагностики муковисцидоза, отличающийся тем, что определяют концентрации Na, В и Pb в пробоподготовленных волосах детей раннего возраста методами атомной эмиссионной спектрометрии с индукционно связанной аргоновой плазмой и/или масс-спектрометрии с индуктивно связанной аргоновой плазмой, при этом у больных муковисцидозом относительно контрольной группы увеличивается содержание Na и В соответственно в 8,5; 3,3 раза и уменьшается содержание Pb в 1,3 раза.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования ранней гипогалактии - перед родами у беременных женщин при анализе анамнеза, течения настоящей беременности выявляют факторы риска гипогалактии.
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для использования при экспериментальных паразитологических исследованиях в лабораторных условиях. Способ включает отбор только живых, половозрелых самок Trichuris vulpis из толстой, слепой кишок спонтанно зараженных трихоцефалами при исследовании гельминтологическими методами на вскрытии диких или/и домашних хищных в отдельные пробирки с официнальным изотоническим раствором (0,9%) хлорида натрия (solutio Natrii chlorati isotonica) и экспозицией пробирок с самками Trichuris vulpis при t=37,5°C - 39°C в течение 5 часов в условиях термостата.
Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии и педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования тимомегалии в трехмесячном возрасте у доношенных новорожденных с внутриутробным гриппом В, осложненным плацентитом.
Изобретение относится к медицине, в именно к гематологии, и может быть использовано для морфометрической оценки прогноза течения апластической анемии после спленэктомии.

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки контроля рН желудочного содержимого у пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии. Проводят динамическую оценку рН желудочного содержимого с использованием назогастрального зонда, определяют суммарную рН желудочного содержимого и эффективность антисекреторных препаратов в течение суток, а при необходимости - более длительное время, с интервалом 3 ч.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и описывает способ диагностики нейросифилиса, включающий микроскопическое исследование образцов спинномозговой жидкости, причем проводят краевую дегидратацию образцов спинномозговой жидкости, а их микроскопическое исследование проводят в поляризованном свете и при выявлении анизотропных структур в виде дендритов либо сферолитов, внутри которых расположены образования в форме овалов, содержащих липиды, диагностируют раннюю форму нейросифилиса, а при выявлении множества овалов, сгруппированных в форме шаров, включенных в анизотропные структуры и/или отдельно расположенных, диагностируют поздний менинговаскулярный нейросифилис.

Группа изобретений относится к медицине, косметологии, производству продуктов питания, витаминов, БАДов, лекарственных средств и описывает варианты устройства для реализации неинвазивного потенциометрического определения оксидантной/антиоксидантной активности биологических тканей, включающего прибор для измерения потенциалов и двухсторонний электрод, выполненный в виде пластины с одинаковыми рабочими поверхностями, покрытыми электропроводящим гелем, содержащим медиаторную систему.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки эффективности коррекции сперматогенеза у животных в условиях воздействия микроволнового излучения.

Изобретение относится к медицине, а именно к кюветам для исследования дзета-потенциала и размеров частиц дисперсной фазы коллоидных жидкостей организма человека.
Изобретение относится к медицине, онкологии и может применяться для ранней диагностики опухолей позвонков. Проводят трехступенчатую диагностику всем больным с опухолевыми заболеваниями различной локализации.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения адаптационной способности пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов. Для этого методом иммуноферментного анализа определяют количественный уровень биомаркеров в ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 мин после приема пищи. В качестве биомаркера выбирают матриксную металлопротеиназу 2 (ММП 2) или матриксную металлопротеиназу 8 (ММП 8). Для группы клинического сравнения ММП 2 принимают уровень 1,89-2,69 нг/мл; при уровне 4,2-6,6 нг/мл диагностируют низкую адаптационную способность, а при 2,9-3,8 нг/мл - полную функциональную адаптацию пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов. Для группы клинического сравнения ММП 8 принимают уровень 21,65-41,85 нг/мл; при уровне 433,0-1011,6 нг/мл диагностируют низкую адаптационную способность, а при 52,8-186,3 нг/мл - полную функциональную адаптацию пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов. Изобретение позволяет повысить точность экспресс-диагностики адаптационной способности к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области в день обращения пациента. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу определения адаптационной способности пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов. Для этого методом иммуноферментного анализа определяют количественный уровень биомаркеров в ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 мин после приема пищи. В качестве биомаркера выбирают матриксную металлопротеиназу 8 (ММП 8) или матриксную металлопротеиназу 9 (ММП 9). Для группы клинического сравнения ММП 8 принимают уровень 21,65-41,85 нг/мл; при уровне 171,25-524,7 нг/мл диагностируют низкую адаптационную способность, а при 58,7-162,7 нг/мл - полную функциональную адаптацию пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов. Для группы клинического сравнения ММП 9 принимают уровень 134,9-207,7 нг/мл; при уровне 526,5-919,1 нг/мл диагностируют низкую адаптационную способность, а при 236,8-492,3 нг/мл - полную функциональную адаптацию пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов. Изобретение позволяет повысить точность экспресс-диагностики адаптационной способности к съемным пластиночным конструкциям ортопедических протезов пациента с новообразованиями челюстно-лицевой области в день обращения пациента. 1 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 пр.

Изобретение относится к ветеринарии и предназначено для оценки степени нарушения рубцового пищеварения у жвачных животных. Определяют в содержимом рубца количество веществ, имеющих «средний» (500-5000 D) диапазон молекулярной массы. На клинически здоровое состояние животных указывает уровень содержания средних молекул (ССМ) в рубцовой жидкости, определяемый на волне 237 нм - менее 2,0 усл. ед., на волне 254 нм - менее 1,0 усл. ед., на волне 280 нм - менее 1,0 усл. ед. О наличии патологии рубцового пищеварения свидетельствует увеличение ССМ на волне 237 нм более 2,0 усл. ед., на 254 нм более 1,0 усл. ед. и на 280 нм более 1,0 усл. ед. Способ позволяет выявлять патологию на ранних этапах развития, а у больных - оценивать степень нарушения рубцового пищеварения и эффективность проводимого лечения. 4 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, и может быть использовано при выборе тактики лечения гипертрофии глоточной миндалины и хронического аденоидита. Проводят комплексное обследование больного ребенка: сбор жалоб, фибровидеоэндоскопию носа, носоглотки и гортани, тимпанометрию. Проводят потенциометрическое исследование антиоксидант/окислительной активности кожи (АОА/ОА) на внутренней стороне предплечья пациента. При значении АОА/ОА кожи 2,5-4,0*105 М-экв и больше и при наличии у пациента трех из следующих результатов: наличия улучшения от ранее проведенного консервативного лечения, длительности храпа и сопения во сне до трех месяцев, отсутствия синдрома обструктивного апноэ сна, снижении слуха до трех месяцев, отсутствии рецидивирующих острых средних отитов в последние три месяца в анамнезе, гипертрофии глоточной миндалины II-III степени, тимпанометрии - тип А, В, С, типе тимпанометрии В длительностью до 3 месяцев, пациенту проводят консервативный курс лечения. При значении АОА/ОА кожи менее 2,5-4,0*105 М-экв и при наличии у пациента трех из следующих результатов: неэффективность минимум двух курсов консервативного лечения, длительности храпа и сопения во сне более трех месяцев, наличии синдрома обструктивного апноэ сна, снижении слуха более трех месяцев в анамнезе, либо рецидивирующих острых средних отитах в последние три месяца в анамнезе, гипертрофии глоточной миндалины II-III степени, тимпанометрии - тип В, длительностью более 3 месяцев, пациенту проводят аденотомию. Способ позволяет провести диагностику неинвазивно, быстро, объективно, своевременно начать лечение за счет комплексного обследования пациентов, проведения потенциометрического исследования АОА/ОА кожи. 4 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных, включающий исследование биологического материала, отличающийся тем, что в 10% гомогенате плаценты, взятой сразу после преждевременных родов, методом капиллярного электрофореза определяют содержание глутамата и агматина, рассчитывают их соотношение и при величине коэффициента, равного 1,70 и ниже, прогнозируют перинатальное поражение ЦНС у недоношенных новорожденных. Осуществление изобретения позволяет повысить точность прогнозирования перинатального поражения ЦНС у недоношенных новорожденных. 2 пр.

Предложен способ определения антиоксидантной активности вещества, предусматривающий приготовление контрольных проб, содержащих буферный раствор и биолюминесцентный сенсор, определения исходной интенсивности биолюминесценции. Добавляют в часть контрольных проб исследуемое вещество с получением рабочих проб. Уравнивают объемы контрольных и рабочих проб. Определяют интенсивность биолюминесценции контрольных и рабочих проб после их инкубации для определения токсичности исследуемого вещества. Добавляют в контрольные и рабочие пробы оксидант и определяют интенсивность биолюминесценции контрольных и рабочих проб с оксидантом после их инкубации для определения антиоксидантной активности исследуемого вещества. Изобретение позволяет определять антиоксидантную активность вещества с одновременным определением его токсичности с сокращением времени определения. 7 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 пр.

Группа изобретений относится к области мониторинга здоровья по части функции иммунной системы и измерения эффектов токсинов и других воздействий. Способ включает в себя предоставление аппарата, предоставление образца крови, установление базового значения молекулярного кислорода, приложение воздействия на упомянутый образец, получение данных об изменении концентрации молекулярного кислорода и скорости ее изменения, а также сравнение полученных данных с данными здорового индивидуума. При этом аппарат содержит первый и второй датчики, а также процессор, функционально связанный с первым и вторым датчиками. Также раскрывается аппарат для определения состояния иммунной системы индивидуума и способ улучшения работы иммунной системы. Заявленная группа изобретений позволяет оценить и количественно определить способность иммунной системы индивидуума противостоять заболеванию и отвечать на стимулирующие иммунную систему лекарственные средства. 3 н. и 30 з.п. ф-лы, 8 ил., 6 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к фибробронхоскопии, и описывает способ прогнозирования развития тяжелого гнойного трахеобронхита при термоингаляционном поражении дыхательных путей методом хемилюминесценции. Способ характеризуется тем, что во время бронхоскопии производят забор биоптатов слизистой, в которых определяют светосумму Fe2+- индуцированной хемилюминесценции (Sind-1), Н2O2 - индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции (Sind-2) и максимум амплитуды Н2О2 - индуцированного люминолзависимого свечения (Н). В случае, если значение Sind-1 - 0,500 у.е. и более, Sind-2 - 0,400 у. е. и более и H - 0,300 у. е. и более, прогнозируется развитие тяжелого гнойного трахеобронхита III степени интенсивности воспаления, в случае, если полученные одновременно по всем трем показателям Sind-1 -0,499 у. е. и менее, Sind-2 - 0,399 у. е. и менее и H - 0,299 у. е. и менее, прогнозируется развитие катарального или гнойного трахеобронхита I-II степени интенсивности воспаления. Предложенный способ позволяет быстро (в течение 30 минут) и в ранние сроки прогнозировать развитие гнойного трахеобронхита после термоингаляционного поражения дыхательных путей и обосновать необходимость проведения многократных ежедневных санационных бронхоскопий. 1 табл., 4 пр.

Настоящее изобретение относится к области биоаналитических исследований и представляет собой способ анализа цитохрома С в интактных митохондриях с помощью спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния (ГКР), включающий подготовку митохондрий и их нанесение на подложку на основе диэлектрического химически инертного материала с наноструктурированным покрытием толщиной 1-10 мкм в виде кольцевых наноструктур серебра, при этом ободки серебряных колец состоят из сообщающихся друг с другом пористых агрегатов серебра, на поверхности которых расположены округлые наночастицы серебра размером 2-90 нм, с последующей иммобилизацией митохондрий на данные наноструктурированные покрытия, детектирование спектров ГКР с последующей расшифровкой характеристических колебаний анализируемой пробы спектров ГКР с использованием стандартного программного обеспечения. Осуществление изобретения позволяет расширить область применимости ГКР и проводить исследования в интактных функционирующих митохондриях. 11 з.п. ф-лы, 4 пр., 1 ил.
Наверх