Способ получения микротрубок из хитозана (варианты)



Способ получения микротрубок из хитозана (варианты)
Способ получения микротрубок из хитозана (варианты)
Способ получения микротрубок из хитозана (варианты)
Способ получения микротрубок из хитозана (варианты)
Способ получения микротрубок из хитозана (варианты)
Способ получения микротрубок из хитозана (варианты)

 


Владельцы патента RU 2564921:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Саратовский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского" (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ получения микротрубок из хитозана, заключающийся в том, что готовят раствор хитозана в органической кислоте, опускают стержень в раствор хитозана в органической кислоте, отличающийся тем, что в качестве кислоты выбран 1.5% водный раствор гликолевой кислоты, причем раствор содержит хитозан в количестве 2.5-4 мас.%; стержень с нанесенным на него слоем раствора хитозана погружают в 0.1 М водный раствор додецилбензосульфата натрия и оставляют на 12 часов. Изобретение обеспечивает упрощение технологии изготовления полой цилиндрической структуры из раствора полимера и сокращение времени его реализации, повышение экологичности процесса, повышение биосовместимости готового продукта. 2 н.п. ф-лы, 34 пр., 1 табл., 5 ил.

 

Изобретение относится к области химической и биохимической технологии, медицине, а именно к способам получения полимерных материалов в форме полых цилиндрических структур из растворов природных и искусственных полимеров, в частности, микротрубок хитозана. Полые полимерные структуры на основе хитозана предположительно могут использоваться в качестве протезов и заплат кровеносных сосудов, контейнеров для хранения лекарств и их доставки в зону запланированной локализации, компонентов медицинских мембран различного назначения и т.п.

Наряду с широко используемыми в настоящее время имплантируемыми протезами кровеносных сосудов из бионедеградируемых полимеров, все большее значение приобретают протезы, биодеградируемые в организме естественным метаболическим путем с последующим восстановлением клеточного состава сосудистой стенки. Применение таких протезов позволяет избежать повторного ремоделирования сосуда и особенно актуально в случаях физиологического взросления организма. Одним из перспективных полимеров для создания таких протезов является аминополисахарид хитозан.

Хитозан - продукт частичного или полного деацетилирования биополимера хитина. Благодаря таким свойствам как биосовместимость, близость по физиологической активности к компонентам живых тканей, биоразлагаемость, нетоксичность находит широкое применение в различных областях медицины, фармакологии, косметологии, биотехнологии. Например, хитозан широко используют для получения пленок медицинского назначения [Патент РФ №2108114, МПК A61L15/28;Патент РФ №2219954, МПК A61L15/28; Патент РФ №2254145, МПК A61L15/28, A61L15/32, A61L26/00; Патент РФ №2270646, МПК A61F13/02(2006.01), A61L15/22(2006.01), A61L15/44(2006.01), A61L15/60 (2006.01); Патент РФ №2314834, МПК A61L15/18 (2006.01), A61L15/44 (2006.01), A61P17/02 (2006.01), A61F13/00 (2006.01); Патент РФ №2429022, МПК А61L15/16 (2006.01), А61L15/28 (2006.01); Патент РФ №2461575, МПК C08B37/08 (2006/01), C08J5/18 (2006/01)], пористых мембран [Патент РФ №2270209, МПК C08L5/08 (2006.01), C08L89/00 (2006.01), A61K38/39 (2006.01), A61K47/36 (2006.01), C08J9/00 (2006.01)], макропористых гранул [Патент РФ №2234514, МПК C08B37/08, C08J9/28, C08L5/08, C12N5/00], губок [Свидетельство на полезную модель РФ №8606, МПК A61L15/44; Свидетельство на полезную модель РФ №8607, МПК A61L15/44], волокон [Патент WO 2009/049565 A2, МПК D01D5/00; D01D5/06; D01F4/00; D01F9/00; Патент РФ №2468129, МПК D01F4/00 (2006.01), A61L15/22 (2006.01), A61L15/28 (2006.01)]. Поскольку температура плавления хитозана значительно выше температуры его термического разложения, все эти материалы получают из растворов этого аминополисахарида. Способы получения микротрубок на основе хитозана в научной литературе встречаются крайне редко, а в патентной литературе - отсутствуют.

Известен способ формирования микротрубок из нановолокон хитозана, получаемых методом электроформования и используемых для регенерации вегетативных нервов [Matsumoto I., Kaneko M., Oda M., Watanabe G. Repair of intra-thoracic autonomic nerves using chitosan tubes //Interact. Cardiovasc. Thorac. Surg. 2010. V.10. №4. Р.498-501]. Готовят раствор хитозана (степень деацетилирования 93 мольн.%) в трифторуксусной кислоте с добавкой метиленхлорида. Полученный раствор фильтруют и используют для электроформования волокна. Электроформование осуществляют на вращающийся стержень из нержавеющей стали диаметром 2 мм. После удаления стержня остается трубка, стенки которой представляют собой пористую структуру из хаотически уложенных (переплетенных) нановолокон хитозана. Согласно данному способу получают трубки из хитозана в солевой форме длиной 1.8 см и внутренним диаметром 2 мм.

Недостатком способа является использование агрессивных растворителей: трифторуксусной кислоты (8 класс опасности) и метиленхлорида (4 класс опасности). Хитозан в полученных трубках находится в солевой форме, скорость биодеградации которой значительно выше скорости эпителизации биоткани. Кроме этого, трубки из нетканых материалов обладают высокой механической порозностью. Все сказанное делает невозможность применения таких трубок как в качестве протезов и заплат кровеносных сосудов, так и в других медико-биологических приложениях.

Известен способ получения методом многостадийного электроформования композитных трубок длиной 40 мм и внутренним диаметром 4.5 мм с наружным слоем изнановолоконполилактида и внутренним слоем из бикомпонентных волокон фиброина шелка и желатины [Wang S., Zhang Y., Wang H., Yin G., Dong Z. Fabrication and properties of the electrospun polylactide/silk fibroin-gelatin composite tubular scaffold //Biomacromolecules. 2009. V.10. №8. P.2240-2244]. Электроформование осуществляют на вращающийся стержень путем последовательного нанесения слоев: сначала из бикомпонентных нановолокон желатины и фиброина шелка, затем из однокомпонентных нановолокон полилактида. Для увеличения стабильности и прочности, полученные композитные трубки дополнительно погружают в этанол на 15 минут и сушат в течение 24 часов при комнатной температуре. Прочность на разрыв таких композитных трубок составляет 2.21±0.18 МПа.

Недостатком способа является его многостадийность получения трубок, их многокомпонентность. Задача формирования композитных трубок с использования хитозана в способе не ставилась.

Известно получение хитин-хитозановых микротрубок различного диаметра [Freier T., Montenegro R., Koh H.S., Shoichet M.S. Chitin based tubes for tissue engineering in the nervous system //Biomaterials. 2005. V.26. Р.4624-4632]. Способ осуществляют следующим образом. Готовят 3%-ый раствор хитозана в смеси 2% уксусной кислоты с этанолом (1:1 по объему). Раствор охлаждают до 10ºC и смешивают с двукратным молярным избытком уксусного ангидрида. Реакционную смесь обрабатывают ультразвуком для удаления пузырьков воздуха. Для получения микротрубок используют герметически закрываемую форму, состоящую из стеклянного цилиндра диаметром 4 мм и вставленного в него стеклянного стержня диаметром 1.7 мм. Реакционную смесь вводят в полую часть формы, расположенную между цилиндром и стержнем, и оставляют на 24 часа для протекания реакции ацетилирования хитозан→хитин. Полученные хитиновые гидрогелевые микротрубки вынимают из формы, промывают и хранят в дистиллированной воде. Для увеличения прочности хитиновых микротрубок снижают степень ацетилирования хитина, проводя его модификацию щелочным гидролизом, т.е. осуществляют химическую реакцию полимераналогичного превращения хитин→хитозан. Для этого хитиновую микротрубку одевают на стеклянный стержень и выдерживают в 40% водном растворе NaOH при 110ºC в течение 2 часов. Затем микротрубки промывают дистиллированной водой, сушат на воздухе в течение 3 часов при комнатной температуре и нормальном давлении, снимают со стеклянного стержня и хранят в воде. Такую процедуру повторяют от 1 до 3 раз, снижая степень ацетилирования хитина с 94 мольн.% до 1 мольн.%.

Недостатком способа является многостадийность, сложность, длительность и низкая производительность процесса получения микротрубок, необходимость использования специальной формовочной конструкции. Для получения хитиновых трубок, т.е. проведения реакции полимераналогичного превращения хитозан→хитин, используют агрессивный растворитель уксусный ангидрид (3 класс опасности).

Известен способ получения пористых микротрубок из хитозана диаметром ~ 0.5-8 мм, толщиной стенок ~ 0.2-1 мм, средним размером пор ~0.02-0.1 мм и пористостью 20-90% [Zhang X.F., Cao W.L., Gong Y.D., Gao Y., Li J.M. A method for the preparation of porous chitosan tube. China Patent №ZL 02 149086.4.2005]. Для осуществления способа хитозан растворяют в уксусной кислоте, полученный раствор фильтруют и удаляют пузырьки воздуха под вакуумом (давление не менее 100 Па). Затем раствор хитозана под давлением вносят в цилиндрическую форму из нержавеющей стали, вставляют стержень и выдерживают при температуре -5 - -196ºС в течение 8-15 часов до полного замораживания. Далее снимают цилиндрическую часть формы, трубку из хитозана на стержне промывают водой и сушат в сублимационной камере для удаления влаги. Сухую трубку на стержне помещают в раствор NaOH на 8-15 минут для удаления остаточной уксусной кислоты, промывают деионизированной водой до нейтральной реакции, затем опускают в фосфатный буфер (рН = 7,4) на 10-30 минут, сушат фильтровальной бумагой и удаляют стержень.

Недостатком способа является большое количество физико-химических и технологических операций, используемых для получения микротрубок хитозана; использование высоких давлений и низких температур; сложность введения раствора хитозана в форму, требующая применения избыточного давления; необходимость использования сублимационной сушки. Все это приводит к удорожанию готового продукта.

Известен способ получения биополимерных микротрубок из кровеносного сосуда животного [Патент РФ 2385689, МПК A61F2/06(2006.01), A61L27/38(2006.01), A61L33/10(2006.01)]. Способ включает следующие этапы. Кровеносные сосуды животных фиксируются путем сшивания фиксирующим агентом и обрабатываются с целью удаления антигенов. На внутреннюю поверхность обработанного сосуда наносят активное покрытие, содержащее антикоагуляционные компоненты. Полученныемикротрубки используют в качестве искусственного биологического кровеносного сосуда.

Недостатком способа является многостадийность получения микротрубок, применение большого количества химических реагентов. Кроме того, использование микротрубок из биотканей животного происхождения в качестве искусственного кровеносного сосуда может приводить к проявлению аллергических и аутоиммунных реакций. Задача получения микротрубок из хитозана в способе не ставилась.

Известен способ получения двухслойных хитозановых микротрубок, используемых для регенерации нервов [Wang W., Itoh S., Matsuda A., Ichinose S., Shinomiya K., Hata Y., Tanaka J. Influences of mechanical propertiesand permeability on chitosan nano/microfiber mesh tubes as a scaffold for nerve regeneration //J. Biomed. Mater. Res.A. 2008. V.84. №3. Р.557-566]. Микротрубки состоят из двух слоев: внутреннего и внешнего. Каждый слой имеет форму полого цилиндра, но отличается морфологическим рельефом. Первый (внутренний) слой диаметром 1.2 мм и толщиной стенок 0.3-0.5 мм получают методом электроформования. Хитозан (степень деацетилирования 78 мольн.%) растворяют в трифторуксусной кислоте при 50ºС в течение 12 часов, затем добавляют метиленхлорид в соотношении трифторуксусная кислота:метиленхлорид = 4:1. Полученный раствор фильтруют и используют для электроформования нановолокна, которое осуществляют на вращающийся стержень из нержавеющей стали диаметром 1.2 мм. Затем стержень с нановолокнистым слоем хитозана опускают в этиловый спирт, оставляют на 3 минуты, вынимают, снимают со стержня, помещают в 28%-ный водный раствор аммиака и оставляют при комнатнойтемпературе на 12 часов для нейтрализации трифторуксусной кислоты и метиленхлорида. Далее промывают дистиллированной водой при комнатной температуре в течение 2 часов, погружают в 99.5% этанол, вынимают и сушат на воздухе при комнатной температуре в течение 2 часов. Для получения второго (внешнего) слоя микротрубки с внешним диаметром 2.1 мм и внутренним диаметром 2.0 мм готовят 5%-ный раствор хитозана (степень деацетилирования 93 мольн.%) в 6%-ой уксусной кислоте и погружают в него проволоку из нержавеющей стали диаметром 2 мм в вертикальном положении. Проволоку с нанесенным слоем раствора хитозана в уксусной кислоте вынимают и сушат на воздухе при температуре 50ºС в течение 20 минут. Данную процедуру повторяют 4 раза. Затем полученный внешний слой микротрубки погружают в 5% раствор каустической соды на 10 минут при комнатной температуре, вынимают и промывают водой в течение 2 часов. Для формирования двухслойной микротрубки внутреннюю и внешнюю части механически совмещают, погружают в дистиллированную воду при комнатной температуре на 30 минут и хранят в 70% этаноле. Разрывное напряжение двухслойных хитозановых трубок составляет σ = 4.82±0.42 МПа, относительное удлинение при разрыве ε = 11.23±1.97%).

Недостатком данного способа является сложность, многостадийность, длительность и высокая трудоемкость процесса получения микротрубок, требующие значительных энергетических и сырьевых затрат, высокой квалификации оператора. В способе используется агрессивная трифторуксусная кислота и метиленхлорид.

Известен способ получения микротрубок из фиброина шелка [Lovett M., Cannizzaro C., Daheron L., Messmer B., Vunjak-Novakovic G., Kaplan D. Silk fibroin microtubes for blood vessel engineering //Biomaterials. 2007. V.28. №35. P.5271-5279]. Готовят 6-8%-ный водный раствор фиброина шелка из коконов тутового шелкопряда. Для этого коконы обрабатывают 0.02 М раствором карбоната натрия, промывают дистиллированной водой, растворяют в 9.3 М растворе бромида лития при нагревании и подвергают диализу против дистиллированной воды в течение 48 часов. Затем полученный 6-8%-ный раствор фиброина шелка концентрируют путем диализа против 10 мас.% полиэтиленгликоля до получения концентрированного 20-30%-ного водного раствора фиброина шелка и хранят при 4ºС до использования. Получение микротрубок осуществляют путем погружения стальной проволоки (диаметр 0.12-6 мм) в 20-30 %-ный раствор фиброина шелка. После равномерного покрытия проволоки концентрированным раствором фиброина шелка (формирование жидкого слоя) ее извлекают и погружают в метанол (формирование твердого слоя). При этом фиброин шелка из аморфной жидкой фазы (жидкий слой) переходит в кристаллическую фазу (твердый слой) -β-форму, характеризующуюся антипараллельными β-слоями. Процессы погружения проволоки в раствор фиброина шелка с последующим ее переносом в раствор метанола, т.е. формирования жидкого и твердого слоев, проводят 2-4 раза. Нанесенное на проволоку покрытие из фиброина шелка высушивают в течение 12 часов, затем помещают в раствор ПАВ для снятия микротрубки со стальной проволоки. Микротрубки рекомендуют использовать в качестве микрососудистых трансплантатов. Способ также предусматривает введение 1-20 мас.% полиэтиленоксида в состав формовочного раствора фиброина шелка для повышения пористости микротрубок.

Недостатком способа является большое количество (2-4 раза) процедур перехода жидкого слоя в твердый слой, используемых для формирования стенок микротрубки; сложность приготовления концентрированного раствора фиброина шелка, требующего проведения большого количества различных химических и физико-химических реакций. Материалом микротрубки является фиброин шелка, т.е. белок, который может вызывать аллергию и даже реакции отторжения. Кроме того, в способе используетсяэкологически опасная жидкость - метанол-сильный яд, действующий преимущественно на нервную и сосудистую систему. В организм человека может проникнуть через дыхательные пути и даже через неповрежденную кожу [ГОСТ 2222-95: Метанол технический. Технические условия]. Задача получения микротрубки из аминополисахарида хитозана в способе не ставилась.

Наиболее близким решением к предлагаемому способу является способ получения композитных трубок на основе хитозана (степень деацетилирования 83.7 мольн.%, молекулярная масса 1800 кДа), желатины и хитозановой пряжи с диаметром волокон 12 мкм производства QingdaoJifaCo (China) [ZhangL., AoQ., WangA., LuG., KongL., GongY., ZhaoN., ZhangX.A sandwich tubular scaffold derived from chitosan for blood vessel tissue engineering //J. Biomed. Mater.Res. 2006. V.77A. Р.277-284]. Готовят 2%-ый раствор хитозана в 1%-ой уксусной кислоте, а также его смесь с 10%-ым водным раствором желатины в объемном соотношении 4:1 при 50°C в течение 2 ч. Из хитозановой пряжи ткут трикотажную хитозановую трубку, которую используют в качестве основы для получения композитных трубок. Тканую хитозановую трубку надевают на цилиндрический стержень из нержавеющей стали с тефлоновым покрытием, опускают в вертикальном положении в 2% раствор хитозана, выдерживают 1 минуту, вынимают и сушат на воздухе при 50°C. Данную процедуру повторяют три раза, пока толщина стенок образца не достигнет ~ 0.5 мм. Высушенный образец, состоящий из тканой хитозановой трубки с пленочным покрытием из хитозана, снимают со стержня, надевают на стержень меньшего диаметра (на 1 мм), опускают в горизонтальном положении в раствор смеси хитозана и желатины на несколько секунд и вынимают. Полученную композицию помещают в предварительно охлажденный до -8°C толуол для быстрого замораживания, обезвоживают в предварительно охлажденном этаноле с перенасыщенной гидроокисью натрия, отмывают три раза деионизованной водой и сушат на воздухе.

Недостатком способа является многостадийность процесса получения композитных хитозансодержащих трубок и их высокая себестоимость, необходимость использования агрессивного растворителя толуола (3-ий класс опасности, при высоких концентрациях пары толуола действуют наркотически, горюч и пожароопасен) и низких температур для формирования конечной структуры композитных трубок. Кроме того, в состав трубки входит желатина, получаемая из тканей животных, которая может вызывать аллергические реакции и даже анафилактический шок, что ограничивает применение готового продукта в медицинской практике, фармакологии и др.

Задача предлагаемого решения заключается в получении микротрубок на основе хитозана с заданными морфологией, физико-химическими и биохимическими свойствами.

Технический результат заключается в упрощении технологии изготовления полой цилиндрической структуры из раствора полимера и сокращении времени его реализации, повышении экологичности процесса, а также в повышении биосовместимости готового продукта.

Поставленная задача решается тем, что, согласно мокрому способу получения микротрубок из хитозана, готовят раствор хитозана в органической кислоте, опускают стержень в раствор хитозана в органической кислоте, в качестве кислоты выбран 1.5% водный раствор молочной или гликолевой кислоты, причем раствор содержит хитозан в количестве 2.5-4 мас.%; стержень с нанесенным на него слоем раствора хитозана погружают в 5% водный раствор NaOH или в 0.1 М водный раствор додецилбензосульфата натрия (ДДБСН) и оставляют на 12 часов. Согласно сухому способу получения микротрубок из хитозана, готовят раствор хитозана в органической кислоте, опускают стержень в раствор хитозана в органической кислоте, сушат в сушильном шкафу при 45-50°С до полного испарения растворителя, в качестве кислоты выбран 1.5% водный раствор молочной или гликолевой кислоты, причем раствор содержит хитозан в количестве 2.5-4 мас.%; перед сушкой стержень с нанесенным на него слоем раствора хитозана погружают в 50%-ный водный раствор триэтаноламина или в 0.1 М водный раствор додецилбензосульфата натрия (ДДБСН) на 1 мин, а после сушки стержень с нанесенным на него слоем хитозана погружают в 5% водный раствор NaOH или в 0.1 М водный раствор додецилбензосульфата натрия (ДДБСН) на 10-20 минут.

Изобретение поясняется примерами и чертежами, где на фиг. 1 приведено схематическое изображение микротрубки хитозана. На фиг. 2 представлена культура эпителиоцитов почки эмбриона макаки (МА-104) через 7 сут культивирования на поверхности микротрубки, полученной из раствора хитозана концентрации 4.0 мас.% в 1.5%-ном водном растворе гликолевой кислоты по мокрому способу. На фиг. 3 представлена культура эпителиоцитов почки эмбриона макаки (МА-104) через 7 сут культивирования на поверхности микротрубки, полученной из раствора хитозана концентрации 4.0 мас.% в 1.5%-ном водном растворе гликолевой кислоты по сухому способу. На фиг. 4 представлена культура фибробластов человека через 7 сут культивирования на поверхности микротрубки, полученной из раствора хитозана концентрации 4.0 мас.% в 1.5%-ном водном растворе гликолевой кислоты по мокрому способу. На фиг. 5 представлена культура фибробластов человека через 7 сут культивирования на поверхности микротрубки, полученной из раствора хитозана концентрации 4.0 мас.% в 1.5%-ном водном растворе гликолевой кислоты по сухому способу.

Способ получения микротрубок хитозана включает приготовление формовочного раствора из воздушно-сухой навески хитозана и раствора органической кислоты без и с добавкой пентаэритрита, нанесение полученного раствора на стержень с последующим формированием стенок микротрубки мокрым или сухим способом формования, снятие полученных образцов со стержня, отмывку микротрубок дистиллированной водой до нейтральной реакции и их хранение в набухшем состоянии в дистиллированной воде. Заявляемый способ позволяет получить бесшовные микротрубки на основе хитозана длиной L см, внутренним диаметром D см, и толщиной стенок dср мм (фиг. 1).

Способ осуществляется следующим образом.

1. Приготовление формовочного раствора. Воздушно-сухую навеску хитозана в количестве 2.5-4 мас.% растворяют в 1.5% водном растворе молочной или гликолевой кислотыв течение 1 сут, периодически встряхивая. Для гомогенизации раствора на последнем этапе используют перемешивание на магнитной мешалке.

2. Нанесение формовочного раствора на стержень. Используют стержень с круглым или овальным сечением. Стержень может быть выполнен из стекла, нержавеющей стали или эластичного материала, например, силикона. Стержень может быть одноосным или бифуркационным (т.е. иметь два разветвления). Стержень погружают вертикально в формовочный раствор хитозана и выдерживают в течение 1 мин для покрытия поверхности стержня равномерным слоем раствора хитозана.

3. Формирование стенок микротрубки.

3.1. Мокрый способ формования. Стержень с нанесенным слоем раствора хитозана концентрации 2.5-4 мас.% погружают в 5%-ный водный раствор NaOH или в 0.1 М водный раствор ДДБСН и оставляют на 12 часов для формирования стенок микротрубки в форме полого цилиндра посредством протекания реакции полимераналогичного превращения полисоль→полиоснование и фазового разделения сначала на границе двух жидких фаз, затем на границе твердая фаза-жидкая фаза.

3.2. Сухой способ формования. Стержень с нанесенным слоем раствора хитозана концентрации 2.5-4 мас.% погружают в 50%-ный водный раствор триэтаноламинана или в 0.1 М водный раствор ДДБСН 1 мин для формирования внешней поверхности стенки микротрубки, вынимают и сушат в сушильном шкафу при45-50°С в течение 2.5-4-х часов до полного испарения растворителя. Затем погружают в 5%-ный водныйраствор NaOH или в 0.1 М водный раствор ДДБСН на 10-20 минут для формирования стенок микротрубки в форме полого цилиндра посредством проведения химической реакции полисоль→полиоснование.

4. Снятие микротрубок со стержня, отмывка и хранение. Полученные по сухому и мокрому способам микротрубки снимают со стержня и промывают большим количеством дистиллированной воды до нейтральной реакции. Образцы микротрубок хранят в набухшем состоянии в дистиллированной воде.

Использовали хитозан с молекулярной массой 700 кДа, степенью деацетилирования 80 мольн.% производства ЗАО «Биопрогресс».

Толщину стенок микротрубок (d, мм) хитозана измеряли микрометром с ценой деления 10 мкм. Измерения проводили несколько раз на различных участках трубки, затем рассчитывали среднее значение толщины.

Морфологию образцов микротрубок оценивали визуально по следующим параметрам: цвет, прозрачность, однородность внутренней и внешней поверхности.

Упругопластические свойства микротрубок определяли согласно ГОСТ №14236-81 [Пленки полимерные. Метод испытания на растяжение] на разрывной машине одноосного растяжения TiraTest 28005 с ячейкой нагружения50 Н. Разрывную нагрузку и удлинение определяли при разрыве. Разрывное напряжение (σ, МПа) определяли с учетом площади поперечного сечения образца, взятого для испытания. Относительное удлинение при разрыве (ε, %) рассчитывали с учетом первоначальной длины образца микротрубки, взятого на испытание.

Применимость заявляемого решения иллюстрируется примерами, таблицей и рисунками.

Группа примеров №1-12: получение микротрубок хитозана мокрым способом формования, используя в качестве реагента перевода протонированной полисоли в полиоснование - водный раствор NaOH.

Пример 1. Готовят раствор хитозана концентрации 2.0 мас.% в 1.5%-ном водном растворе молочной кислоты. Полученный раствор наносят на стеклянный стержень с круглым сечением диаметром 5 мм, затем выдерживают в растворе NaOH в течение 12 час. Полученную микротрубку снимают со стеклянного стержня, отмывают до нейтрального рН дистиллированной водой и хранят в набухшем состоянии в воде. Образец микротрубки визуально выглядит прозрачным, но хрупким, в связи с чем, физико-механические свойства не анализируют (таблица).

Пример 2 выполнен аналогично примеру 1. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 2.5 мас.%. Визуально образец микротрубки выглядит прозрачным и эластичным, имеет гладкие внешнюю и внутреннюю поверхности без видимых дефектов. Сформированный образец подвергают одноосному растяжению на разрывной машине. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 27% при разрывном напряжении σ = 0.10 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки dср = 0.5 мм.

Пример 3 выполнен аналогично примеру 2. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 2.75 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 30%, σ = 0.22 МПа (таблица); dср = 0.41 мм.

Пример 4 выполнен аналогично примеру 2. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.0 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 34%, σ = 0.70 МПа (таблица); dср = 0.52 мм.

Пример 5 выполнен аналогично примеру 2. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.25 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 45%, σ = 0.30 МПа (таблица); dср = 0.40 мм.

Пример 6 выполнен аналогично примеру 2. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.5 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 23%, σ = 0.25 МПа (таблица); dср = 0.54 мм.

Пример 7 выполнен аналогично примеру 2. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 4.0 мас.%. Хитозан растворяется частично, вязкость получаемого раствора чрезмерно высока, микротрубка не получается (таблица).

Пример 8 выполнен аналогично примеру 1. Отличие состоит в том, что вместо молочной кислоты используют гликолевую кислоту той же концентрации. Образец микротрубки визуально выглядит непрозрачным и хрупким, в связи с чем, физико-механические свойства не анализируют (таблица).

Пример 9 выполнен аналогично примеру 8. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 2.5 мас.%. Визуально образец микротрубки выглядит непрозрачным и эластичным, имеет гладкие внешнюю и внутреннюю поверхности без видимых дефектов. Сформированный образец подвергают одноосному растяжению на разрывной машине. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 14.4% при разрывном напряжении σ = 0.24 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки = 0.42 мм.

Пример 10 выполнен аналогично примеру 9. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.0 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 13.8%, σ = 0.40 МПа (таблица); dср = 0.4 мм.

Пример 11 выполнен аналогично примеру 9. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.5 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 20%, σ = 0.83 МПа (таблица); dср = 0.4 мм.

Пример 12 выполнен аналогично примеру 9. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 4.0 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 23.6%, σ = 0.7 МПа (таблица); = 0.7 мм.

Увеличивать концентрацию раствора хитозана в гликолевой кислоте выше 4 мас.% нецелесообразно в силу сложности его приготовления и высокой вязкости.

Примеры №13, 14: получение микротрубок хитозана мокрым способом формования, используя в качестве реагента перевода протонированной полисоли в полиоснование - водный раствор ДДБСН.

Пример 13 выполнен аналогично примеру 11. Отличие состоит в том, что для формирования стенок микротрубки в качестве реагента перевода протонированной полисоли в полиоснование используют ДДБСН. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 64.3% при разрывном напряжении σ = 0.61 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки = 0.48 мм.

Пример 14 выполнен аналогично примеру 13. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 4.0 мас.%..Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 63.6% при разрывном напряжении σ = 0.78 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки = 0.35 мм.

Группа примеров №15-22: получение микротрубок хитозана сухим способом формования, используя в качестве реагента перевода протонированной полисоли в полиоснование - водный раствор NaOH.

Пример 15. Готовят раствор хитозана концентрации 2.75 мас.% в 1.5%-ном водном растворе молочной кислоты. Полученный раствор наносят на стеклянный стержень с круглым сечением диаметром 5 мм, погружают в 50%-ный водный раствор триэтаноламина на 1 мин для формирования внешней поверхности стенки, вынимают и сушат в сушильном шкафу при 45-50°С в течение 2.5-3 часов до полного испарения растворителя. Затем погружают в 5%-ный водный раствор NaOH на 10-20 минут. Полученную микротрубку снимают со стеклянного стержня, отмывают до нейтрального рН дистиллированной водой и хранят в воде в набухшем состоянии. Образец микротрубки визуально выглядит прозрачным и эластичным, имеет гладкие внешнюю и внутреннюю поверхности без видимых деффектов. Сформированный образец подвергают одноосному растяжению на разрывной машине. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 8.0% при разрывном напряжении σ = 8.0 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки dср = 0.29 мм.

Пример 16 выполнен аналогично примеру 15. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.0 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 21%, σ = 12 МПа (таблица); dср = 0.2 мм.

Пример 17 выполнен аналогично примеру 15. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.25 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 27%, σ = 5.5 МПа (таблица); dср = 0.35 мм.

Пример 18 выполнен аналогично примеру 15. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.5 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 38.5%, σ = 4.2 МПа (таблица); dср = 0.24 мм.

Пример 19 выполнен аналогично примеру 15. Отличие состоит в том, что вместо молочной кислоты используют гликолевую кислоту той же концентрации и раствор хитозана концентрации 2.5 мас.%. Образец микротрубки визуально выглядит прозрачным и эластичным, имеет гладкие внешнюю и внутреннюю поверхности без видимых дефектов. Сформированный образец подвергают одноосному растяжению на разрывной машине. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 8.70% при разрывном напряжении σ = 0.73 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки dср = 0.15 мм.

Пример 20 выполнен аналогично примеру 19. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.0 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 10.6%, σ = 2.23 МПа (таблица); dср = 0.18 мм.

Пример 21 выполнен аналогично примеру 19. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 3.5 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 14.7%, σ = 2.69 МПа (таблица); dср = 0.12 мм.

Пример 22 выполнен аналогично примеру 19. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 4.0 мас.%. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 16.5%, σ = 2.06 МПа (таблица); толщина стенки dср = 0.15 мм.

Примеры №23, 24: получение микротрубок сухим способом формования из растворов хитозана с добавкой пентаэритрита, используя в качестве реагента реакции полисоль→полиоснование водный раствор NaOH.

Пример 23 выполнен аналогично примеру 21. Отличие состоит в том, что в формовочный раствор добавляют 5 об.% пентаэритрита. Пентаэритрит (2,2-бис(гидроксиметил)пропан-1,3-диол) - четырехатомный спирт, применяется в качестве пластификаторапри получении полимерных материалов, в том числе и медико-биологического назначения [Cervera M.F., Karjalainen M, Airaksinen S., Rantanen J., Krogars K., Heinämäki J.,Colarte A.I., Yliruusi J. Physical stability and moisture sorption of aqueous chitosan-amylose starch films plasticized with polyols //Eur. J. Pharm. Biopharm. 2004. V.58. №1. Р.69-76].

Образец микротрубки визуально выглядит прозрачным и сравнительно эластичным, имеет гладкие внешнюю и внутреннюю поверхности без видимых дефектов. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 7.75%, σ = 7.85 МПа (таблица); dср = 0.3 мм.

Пример 24 выполнен аналогично примеру 22. Отличие состоит в том, что в формовочный раствор добавляют 5 об.% пентаэритрита. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 12.3%, σ = 8.74 МПа (таблица); dср = 0.1 мм.

Из сравнения примеров 23, 24 и 21, 22 видно, что добавка пентаэритрита значительно повышает прочность (σ) образцов микротрубок. Эластичность (ε) микротрубок при этом несколько снижается, но не существенно.

Примеры №25, 26: получение микротрубок сухим способом формования из растворов хитозана с добавкой пентаэритрита, используя в качестве реагента реакции полисоль→полиоснование водный раствор NaOH, путем двукратного нанесения формовочного раствора на стержень и двукратного формирования стенок микротрубки.

Пример 25 выполнен аналогично примеру 23. Отличие состоит в том, что процедуры нанесения формовочного раствора на стержень и формирования стенок микротрубки согласно сухому способу формования повторяют двукратно. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 6.8%, σ = 4.3 МПа (таблица); dср = 0.25 мм.

Пример 26 выполнен аналогично примеру 24. Отличие состоит в том, что процедуры нанесения формовочного раствора на стержень и формирования стенок микротрубки согласно сухому способу формования повторяют двукратно. Физико-механические характеристики образца микротрубки: ε = 14.2%, σ = 3.7 МПа (таблица); dср = 0.65 мм.

Из анализа примеров 25, 26 и 23, 24 следует, что двукратное нанесение формовочного раствора хитозана с добавкой пластификатора пентаэритрита с последующим формированием стенок микротрубки понижает прочность (σ) и незначительно влияет на эластичность (ε) по сравнению с однократным выполнением данных процедур.

Группа римеров №27-30: получение микротрубок сухим способом формования, используя в качестве реагента перевода протонированной полисоли в полиоснование - водный раствор ДДБСН.

Пример 27 выполнен аналогично примеру 21. Отличие состоит в том, что в качестве реагента перевода протонированной полисоли (в воздушно-сухом слое микротрубки) в полиоснование используют ДДБСН. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 10.4% при разрывном напряжении σ = 7.3 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки = 0.17 мм.

Пример 28 выполнен аналогично примеру 27. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 4.0 мас.%. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 12.5% при разрывном напряжении σ = 6.15 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки = 0.25 мм.

Пример 29 выполнен аналогично примеру 27. Отличие состоит в том, что для формирования внешней поверхности стенки микротрубки используют ДДБСН. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 24.4% при разрывном напряжении σ = 4.45 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки = 0.18 мм.

Пример 30 выполнен аналогично примеру 29. Отличие состоит в том, что используют раствор хитозана концентрации 4.0 мас.%. Величина относительного удлинения при разрыве составляет ε = 23% при разрывном напряжении σ = 6.20 МПа (таблица); усредненная толщина стенок микротрубки = 0.3 мм.

Группа примеров 31-34: оценка биосовместимости образцов микротрубок in vitro.

Примеры №31, 32: культивирование эпителиоподобных клеток МА-104 (макака резус, эмбриональная почка) на микротрубках хитозана.

Пример 31. Используют образец микротрубки, полученный по примеру 14, и эпителиоподобные клетки МА-104 (макака резус, эмбриональная почка). Работа с культурами клеток in vitro проводится в стерильных условиях: в лаборатории, специально оборудованной комплексом «чистых» ламинаров (2-ой класс защиты (Nuaire, USA)). Образец микротрубки стерилизуют в 70%-ном растворе этилового спирта в течение 20 минут, помещают в стерильные чашки Петри (FalconBD), заливают питательной средой ДМЕМ (Биолот, Россия) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FetalBovineSerum, HyCloneUK) и смеси антибиотика антимикотика и вносят суспензию клеточной культуры в концентрации 1·104 кл./см3. Культивирование осуществляют в СО2-инкубаторе SanyoMCO-18 M (Sanyo, Япония) в атмосфере 5% СО2 при Т = 37°С. Смену питательной среды проводят при изменении цвета индикатора среды. Культивирование клеток осуществляют в течение 7 суток, оценку проводят ежедневно на инвертируемом микроскопе МИБ-Р (Россия). Показатели адгезии и пролиферации клеточной культуры МА-104 на микротрубках анализируют на сканирующем электронном микроскопе MIRA\\LMU(Tescan). Для этого образцы с выращенной на их поверхности культурой клеток омывают фосфатным буфером PBS (Биолот, Россия), покрывают 5% раствором формалина и подвергают высушиванию в течение 24 часов при температуре Т = 23±2°С.

Исследование в сканирующем электронном микроскопе показало высокую адгезивную активность эпителиоподобных клеток МА-104 к поверхности микротрубки (фиг. 2).

Пример 32 выполнен аналогично примеру 31. Отличие состоит в том, что используют образец микротрубки, полученный по примеру 22.

Исследование в сканирующем электронном микроскопе показало высокую адгезивную активность эпителиоподобных клеток МА-104 к поверхности микротрубки (фиг. 3).

Примеры №33, 34: культивирование эпителиальных клеток (фибробластов человека) на микротрубках хитозана.

Пример 33 выполнен аналогично примеру 31. Отличие в том, что используют клеточную культуру фибробластов человека (культура ФЛЭЧ-104 Биолот) в концентрации 1·104 кл./см3.

Исследование в сканирующем электронном микроскопе показало высокую адгезивную активность фибробластов человека к поверхности материала (фиг. 4).

Пример 34 выполнен аналогично примеру 32. Отличие в том, что используют клеточную культуру фибробластов человека (культура ФЛЭЧ-104 Биолот) в концентрации 1·104 кл./см3.

Исследование в сканирующем электронном микроскопе показало высокую адгезивную активность фибробластов человека к поверхности материала (фиг. 5).

Группа примеров 31-34 показывает высокую биосовместимость микротрубок хитозана с дермальными клеточными культурами, что позволяет дать положительные рекомендации к их применению в медицине, фармакологии, косметологии и т.п.

Таблица. Параметры формовочных растворов и характеристика образцов микротрубок из хитозана, полученных мокрым и сухим способами формования

′ - с добавкой пентаэритрита 5 об.%

′′ - двукратное нанесение формовочного раствора на стержень с последующим формированием стенок микротрубки

′′′ - использование ДДБСН для формирования внешней поверхности стенки микротрубки.

1. Способ получения микротрубок из хитозана, заключающийся в том, что готовят раствор хитозана в органической кислоте, опускают стержень в раствор хитозана в органической кислоте, отличающийся тем, что в качестве кислоты выбран 1.5% водный раствор гликолевой кислоты, причем раствор содержит хитозан в количестве 2.5-4 мас.%; стержень с нанесенным на него слоем раствора хитозана погружают в 0.1 М водный раствор додецилбензосульфата натрия и оставляют на 12 часов.

2. Способ получения микротрубок из хитозана, заключающийся в том, что готовят раствор хитозана в органической кислоте, опускают стержень в раствор хитозана в органической кислоте, сушат в сушильном шкафу при 45-50°С до полного испарения растворителя, отличающийся тем, что в качестве кислоты выбран 1.5% водный раствор молочной или гликолевой кислоты, причем раствор содержит хитозан в количестве 2.5-4 мас.%; перед сушкой стержень с нанесенным на него слоем раствора хитозана погружают в 50%-ный водный раствор триэтаноламина или в 0.1 М водный раствор додецилбензосульфата натрия на 1 мин, а после сушки стержень с нанесенным на него слоем хитозана погружают в 5% водный раствор NaOH или в 0.1 М водный раствор додецилбензосульфата натрия на 10-20 минут.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для введения лекарственных веществ в витреальную полость глаза. Слои импланта выполнены в виде конгруентных друг другу эллипсоидов вращения, состоящих из полимеров и/или сополимеров гликозаминогликанов, молочной кислоты и поливинилпирролидона, при этом слои, насыщенные лекарственным веществом, чередуются со слоями, не насыщенными лекарственным веществом, а растворимость каждого слоя импланта обеспечивается гидролизом поперечных сшивок и прямопропорционально зависит от их количества.

Группа изобретений относится к медицине. Описан медицинский абсорбируемый гемостатический и ранозаживляющий материал для костных ран и способ его получения.
Изобретение относится к медицине, в частности к травматологии, ортопедии, челюстно-лицевой хирургии, стоматологии и нейрохирургии. Биодеградируемый материал для замещения костной ткани содержит 50-52% мас.

Группа изобретений относится к материалу медицинского назначения и к способам его получения. Материал медицинского назначения на основе полиакриламидного гидрогеля содержит в мас.%: акриламида - 0,9-8,2, N-N′ метилен-бис-акриламида - 0,1-1,8, гиалуроновой кислоты - 0,1-2,0 и воды - до 100.

Группа изобретений относится к медицине. Описаны композиции, включающие гиалуроновую кислоту с низкой степенью модификации функциональных групп, и смеси, получаемые в результате регулируемой реакции такой слегка модифицированной гиалуроновой кислоты с подходящими дифункциональными или многофункциональными сшивающими реагентами.

Изобретение относится к набору, содержащему гемигидрат сульфата кальция, спрессованные частицы дигидрата сульфата кальция, дополнительно содержащие одно или более терапевтически, профилактически и/или диагностически активных веществ, и натрий-карбоксиметилцеллюлозу (Na-CMC) и водную среду, включая воду.

Изобретение относится к медицине. Описан способ синтеза конъюгатов гликозаминогликанов (GAG) с биологически активными молекулами различной природы, включающими низкомолекулярные соединения и макромолекулы.
Группа изобретений относится к медицине. Описан биологический материал, включающий: a) жидкий носитель, включающий вязкий раствор, содержащий, по меньшей мере, один натуральный и/или полусинтетический полисахарид и имеющий динамическую вязкость, измеренную при 20ºС и при скорости сдвига D=350 с-1, в диапазоне от 100 до 250 сантипуаз и/или кинематическую вязкость в диапазоне от 99 до 248 сантистокс (измеренную в тех же условиях); b) культуру мезенхимальных стволовых клеток аутологичного или гетерологичного типа и/или c) обогащенный тромбоцитами продукт крови.

Изобретение относится к медицине, а именно к сердечно-сосудистой хирургии. Описан способ нанесения хитозанового покрытия на поверхность перикарда биологического протеза клапана сердца путем нанесения хитозана прямым методом из абсолютно биосовместимого для организма человека неиммуногенного растворителя, обладающего антимикробными свойствами, - воды, насыщенной углекислым газом при высоком давлении, на перикард биологического протеза клапана сердца, предварительно обработанного 0,625% глутаровым альдегидом.

Изобретение относится к медицине. Описана композиция для костной пластики, которая содержит смесь гиалуроновой кислоты, хондроитин сульфата и гепарина в растворе хлорида натрия и в качестве остеокондуктивного материала содержит не деминерализованный костный коллаген или деминерализованный костный коллаген при следующем соотношении компонентов, мас.%: гиалуроновая кислота 0,1-4,0, хондроитин сульфат 0,1-4,0, гепарин 0,1-0,5, не деминерализованный костный коллаген или деминерализованный костный коллаген 25-94,0, натрия хлорид 0,8-0,85, вода дистиллированная - остальное.

Изобретение относится к области медицины, точнее к сосудистой хирургии, и может быть использовано при изготовлении протезов сосудов малого диаметра. Способ обработки протезов сосудов малого диаметра, изготовленных методом электроспиннинга из биодеградируемых полимеров, заключается в их облучении напрямую или через шаблон пучком быстрых электронов, генерируемых ускорителем электронов, с дозой облучения 100-400 кГр.
Изобретение относится к медицинской технике, а именно к средствам доставки лекарств имплантируемыми устройствами, управляемыми магнитным полем. Устройство состоит из корпуса, внешней периферии и покрытия, занимающего хотя бы часть внешней периферии и включающего в себя следующие слои в порядке от внутренних к наружным: первый изолирующий слой, слой магнитного материала с положительным или отрицательным магнитокалорическим эффектом не меньше 3 К/Т, слой чувствительного материала, содержащего активное вещество и способного к удержанию и контролируемому выпуску активного вещества, второй изолирующий слой, проницаемый для активного вещества.
Изобретение относится к медицине, а именно к имплантируемым медицинским устройствам. Устройство доставки лекарственного средства содержит имплантируемый внутрипросветный каркас, имеющий люминальную поверхность и аблюминальную поверхность; множество сквозных отверстий во внутрипросветном каркасе, где каждое из множества сквозных отверстий содержит композицию, выбранную из следующих групп.

Изобретение относится к способу автоматического создания ориентиров для замены сердечного клапана и к устройству обследования для автоматического создания ориентиров для замены сердечного клапана.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к кардиохирургии, и касается создания гомографтов сердечнососудистой системы (ГССС), применяемых в качестве сосудистых биологических протезов при операциях на сердечно-сосудистой системе.

Группа изобретений относится к медицине, в частности к регенеративной медицине и тканевой инженерии. Предложены сконструированные многослойные сосудистые трубочки, содержащие, по меньшей мере, один слой дифференцированных взрослых фибробластов, по меньшей мере, один слой дифференцированных взрослых гладкомышечных клеток.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для закрывания отверстий дефектов в теле человека или животного. Устройство имеет в первом состоянии форму вытянутой трубки с шлицованными сегментами и принимает во втором состоянии укороченную форму с образованием по меньшей мере одной открытой или по существу закрытой полой структуры с большим поперечным размером.
Изобретение относится к области медицины и тканевой инженерии и может быть использовано в сердечно-сосудистой хирургии при выполнении шунтирующих операций на сосудах малого диаметра.
Изобретение относится к области медицины, в частности к способам повышения биосовместимости трансплантатов клапанов сердца и сосудов за счет снижения их иммуногенности и предотвращения их кальцификации.

Изобретение относится к области медицины и тканевой инженерии, а именно к сердечно-сосудистой хирургии, и может быть использовано при аорто-коронарном шунтировании, а также хирургической реконструкции периферических сосудов.

Группа изобретений относится к области медицины. Описан способ, который включает растворение исходного синтетического полимера и белка в гексафторизопропаноле, смешивание раствора полимера с раствором белка в соотношении полимер : белок, равном (7-9):(1-3), при этом согласно первому варианту на первом этапе электроспиннинга на электрод-коллектор наносят 1,0-10,0% от требуемого объема раствора полученной композиции, затем сформированный внутренний слой протеза пропитывают раствором белка в концентрации 1,0-5,0%, а на втором этапе на сформированный внутренний слой наносят оставшиеся 90-99% раствора композиции и формируют внешний слой протеза. По второму варианту способа на сформированный внутренний слой протеза, составляющий 0,1-90,0% от заданной толщины стенки протеза, наносят раствор композиции, содержащей смесь полимера и белка в соотношении полимер : белок, равном (1-3):(1-7), и формируют промежуточный слой, составляющий 1,0-10,0% от заданной толщины стенки протеза, на который затем наносят оставшийся объем раствора композиции и формируют внешний слой протеза, составляющий 9,0-98,9% от заданной толщины стенки протеза, при этом для формирования внутреннего и внешнего слоя протеза могут быть использованы разные полимеры. Технический результат: получение протезов сосудов малого диаметра с низкой пористостью, улучшение прочностных и эластических характеристик, а также повышение био- и гемосовместимости протезов сосудов. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 7 пр.
Наверх