Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа



Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа
Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа
Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа
Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа
Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа
Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа
Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа

 


Владельцы патента RU 2567724:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности иммунологии, и предназначено для определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека. Изобретение раскрывает способ непрямого твердофазного иммуноферментного анализа, в котором в качестве антигена на поверхность полистирола иммобилизуют конъюгат прогестерона с гемоцианином: гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон, гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон. Предлагаемый способ технически прост, информативен, обладает высокой чувствительностью и специфичностью при определении антител к прогестерону в сыворотке и плазме крови больных с привычным невынашиванием беременности и бесплодием, его применение позволяет получить достоверные результаты при хранении готовых планшетов до 1 года. Изобретение может быть применено для обследования больных с различной акушерско-гинекологической патологией. 7 табл., 7 пр.

 

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу определения антител к прогестерону, и может быть использовано в биологии и медицине для определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека при акушерско-гинекологической патологии, а именно при привычном невынашивании беременности, бесплодии, у больных с гипоплазией эндометрия, неудачами в программах экстракорпорального оплодотворения, с акушерскими осложнениями (гипоплазия хориона, угроза прерывания беременности, хроническая плацентарная недостаточность), с предменструальным синдромом, после применения гормональных контрацептивов и препаратов, содержащих прогестерон.

Известен способ определения антител к прогестерону [1], заключающийся в том, что на поверхность лунок полистирольного микропланшета иммобилизуют конъюгат прогестерона с БСА из 0,1 М карбонат-бикарбонатного буферного раствора (рН 9,5) в концентрации 10 мкг/мл при 4°С в течение ночи; планшет промывают трисовым солевым буферным раствором (рН 7,4), содержащим 0,05% твина-20; планшет обрабатывают смесью 1,5% БСА и 1,5% желатина в трисовом солевом буферном растворе при комнатной температуре в течение 2 часов и затем при 4°С в течение ночи; сыворотки крови для определения IgM и IgG исследуют в разведении 1:100 по объему и инкубируют при комнатной температуре в течение 2 часов, для определения IgE сыворотки исследуют в разведении 1:2 по объему и инкубируют в течение ночи; антитела козы, меченные щелочной фосфатазой, к IgM, IgG или IgE человека инкубируют при комнатной температуре в течение 2 часов; инкубацию с субстратно-хромогенной смесью, содержащей паранитрофенилфосфат, проводят в течение 45 минут. К недостаткам следует отнести сложность и многоэтапностъ методики, включение длительных инкубации, в том числе в течение ночи. Многокомпонентность системы, использование длительных инкубаций, конъюгата поликлональных антител с ферментом для детекции антител к прогестерону приводят к недостаточно высокой чувствительности, специфичности, точности и воспроизводимости определения.

Наиболее близким к заявляемому по технической сущности является способ определения антител к прогестерону [2], заключающийся в том, что конъюгат прогестерона с БСА (БСА-11α-гидроксипрогестерон) иммобилизуют на полистирольную поверхность лунок микропланшета из фосфатно-солевого буферного раствора при 20±2°С в течение 18±2 часов; сыворотки крови разводят 1:100 в фосфатно-солевом буферном растворе, содержащем 0,5% желатина и 0,5% твина-20, и инкубируют на встряхивателе при 20±2°С в течение 1 часа; планшет промывают фосфатно-солевым буферным раствором, содержащим 0,5% твина-20; планшет инкубируют с мышиными моноклональными антителами к IgM, IgG человека, меченными пероксидазой хрена, при 20±2°С в течение 1 часа; планшет инкубируют с субстратно-хромогенным раствором, содержащим 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода. Использование в качестве антигена конъюгата прогестерона с БСА, в котором содержание прогестерона ограничивается 12-16 молекулами прогестерона на 1 молекулу БСА, отсутствие дополнительной обработки поверхности твердой фазы блокирующим раствором, содержащим инертные белки, использование высокой концентрации поверхностно-активного вещества в буфере для промывки и разведения сывороток и конъюгата приводят к ограничению чувствительности, специфичности и точности определения.

Технической задачей изобретения является создание чувствительного, специфичного и простого в исполнении способа определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом ИФА. Эта задача решается описываемым способом определения антител к прогестерону, заключающимся в использовании в качестве антигена конъюгата прогестерона с гемоцианином с высоким содержанием прогестерона от 120 до 150 молекул на 1 молекулу гемоцианина, иммобилизации антигена на поверхность полистирола из водного буферного раствора (рН 7,2±0,2), обработке поверхности водным буферным раствором, содержащим 5-20 мг/мл инертного белка (БСА, желатина), инкубации сывороток крови, разведенных в соотношении 1:10-1:100 по объему в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка (БСА, желатина) и 0,05-0,1% по объему твина-20, промывании поверхности до и после инкубации водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, использовании для детекции антител к прогестерону конъюгата моноклональных антител к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, с ферментом.

Практически способ осуществляется следующим образом.

Конъюгат прогестерона с гемоцианином из лимфы улитки Megathura crenulata (гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон, гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон) в водном буферном растворе (фосфатно-солевом, трисовом) с рН 7,2±0,2, содержащем 0,05-0,1% проклина 300, в концентрации 1-5 мкг/мл иммобилизуют на поверхность полистирола при 20±2°С в течение 18±2 часов, поверхность промывают указанным водным буферным раствором, поверхность обрабатывают водным буферным раствором, содержащим 5-20 мг/мл инертного белка (БСА, желатина) при 20±2°С в течение 60-90 минут, промывают водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% по объему твина-20. Образцы сыворотки, плазмы крови, разведенные в соотношении 1:10-1:100 по объему в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05-0,1% по объему твина-20, инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200-300 об/мин в течение 60-120 минут, поверхность твердой фазы до и после инкубации промывают водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, и инкубируют с конъюгатом мышиных моноклональных антител к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, с пероксидазой хрена в разведении в соотношении 1:2000-1:60000 по объему в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05-0,1% твина-20, при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200-300 об/мин в течение 60±10 минут. После промывания водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, инкубируют с субстратно-хромогенной смесью, содержащей 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода, при 20±2°С в течение 15-20 минут, ферментативную реакцию останавливают 0,5М H2SO4 результат анализа оценивают инструментально путем измерения оптической плотности (ОП) на фотометре при длине волны 450 нм.

Отличительной особенностью предлагаемого способа является то, что в качестве антигена используют конъюгат прогестерона с гемоцианином, адсорбцию антигена на поверхность полистирола проводят из водного буферного раствора с рН 7,2±0,2 при 20±2°С в течение 18±2 часов, поверхность промывают водным буферным раствором и обрабатывают раствором инертного белка (БСА, желатина) с концентрацией 5-20 мг/мл при 20±2°С в течение 60-90 минут, образцы сыворотки, плазмы крови разводят в водном буферном растворе, содержащем 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05-0,1% по объему твина-20, в соотношении 1:10-1:100 по объему и инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200-300 об/мин в течение 60-120 минут, поверхность полистирола до и после инкубации промывают водным буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% твина-20, инкубируют с конъюгатом мышиных моноклональных антител к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, с пероксидазой хрена в водном буферном растворе, содержащим 5-10 мг/мл инертного белка и 0,05%-0,1% твина-20.

Пример 1. Для подтверждения возможности получения технического результата с помощью заявленного способа определения аутоантител к прогестерону используют образцы сыворотки, плазмы крови здоровых доноров и пациенток с привычным невынашиванием беременности и бесплодием.

Конъюгат гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон (Michigan Diagnostics, США) в фосфатно-солевом буферном растворе (ФСБР) с рН 7,2±0,2, содержащем 0,05% проклина 300, в концентрации 1 мкг/мл вносят по 100 мкл в лунки полистирольного микропланшета (Nunc MaxiSorp, Thermo Fisher Scientific, Дания) и инкубируют при 20±2°С в течение 18±2 часов. Планшет промывают 4 раза ФСБР. В лунки планшета вносят по 200 мкл ФСБР, содержащего 10 мг/мл БСА, и инкубируют при 20±2°С в течение 90±10 минут. После 4-кратного промывания планшета ФСБР, содержащим 0,05% по объему твина-20, в лунки вносят по 100 мкл образцов сыворотки, плазмы крови, предварительно разведенных в ФСБР, содержащем 5 мг/мл БСА и 0,05% по объему твина-20, в соотношении 1:100 по объему, инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200 об/мин в течение 60±10 минут. После 4-кратного промывания планшета ФСБР, содержащим 0,05% твина-20, в лунки вносят конъюгат мышиных моноклональных антител с пероксидазой хрена к IgM человека в разведении в соотношении 1:30000 по объему, к IgG человека в разведении в соотношении 1:50000 по объему в ФСБР, содержащем 5 мг/мл БСА и 0,05% твина-20, по 100 мкл в лунку, инкубируют при 20±2°С на орбитальном шейкере при 200 об/мин в течение 60±10 минут. После 4-кратного промывания планшетов ФСБР, содержащим 0,05% твина-20, в лунки вносят по 100 мкл субстратно-хромогенного раствора, содержащего 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода, инкубируют при 20±2°С в течение 15-20 минут, реакцию останавливают добавлением в лунки по 100 мкл 0,5 М H2SO4. Оценку результатов проводят инструментально путем измерения ОП на фотометре при длине волны 450 нм.

Пример 2. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена для иммобилизации на твердую фазу используют гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон (Michigan Diagnostics, США).

Пример 3. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена для иммобилизации на твердую фазу используют БСА-11α-гидроксипрогестерон (Michigan Diagnostics, США).

Пример 4. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что выполняют 2-кратное титрование образцов сыворотки крови больных с привычным невынашиванием беременности (1:100-1:6400).

Пример 5. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена на поверхность твердой фазы иммобилизуют гемоцианин из лимфы улитки Megathura crenulata (Sigma-Aldrich, США).

Пример 6. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 1, за исключением того, что в качестве антигена на поверхность твердой фазы иммобилизуют БСА (Sigma-Aldrich, США).

Пример 7. Анализ проводят аналогично способу, описанному в примере 2, за исключением того, что используют планшет, который после иммобилизации антигена и обработки раствором инертного белка, хранят в вакуумной упаковке при +4°С в течение 1 года.

Способ определения аутоантител к прогестерону в сыворотке и плазме крови человека методом иммуноферментного анализа, включающий адсорбцию конъюгата прогестерона с белком-носителем на поверхность полистирола, обработку поверхности водным раствором инертного белка, инкубацию с разведенной сывороткой, плазмой крови, инкубацию с конъюгатом антител к иммуноглобулинам человека с ферментом, инкубацию с субстратно-хромогенным раствором, отличающийся тем, что на полистирольную поверхность адсорбируют конъюгат прогестерона с гемоцианином (гемоцианин-11α-гидроксипрогестерон, гемоцианин-3α-гидроксипрогестерон) в водном буферном растворе (фосфатно-солевом, трисовом) с pH 7,2±0,2, содержащем 0,05-0,1% проклина 300, при 20±2°С в течение 18±2 часов, поверхность промывают указанным буферным раствором и обрабатывают буферным раствором, содержащим инертный белок (БСА, желатин) в концентрации 5-20 мг/мл, инкубируют с образцами сыворотки, плазмы крови, разведенными в соотношении 1:10-1:100 по объему в буферном растворе, содержащем инертный белок в концентрации 5-10 мг/мл и 0,05-0,1% по объему твина-20, поверхность до и после инкубации промывают буферным раствором, содержащим 0,05-0,1% по объему твина-20, инкубируют с мышиными моноклональными антителами к иммуноглобулинам человека класса М, G, А, Е, конъюгированными с пероксидазой хрена, используют субстратно-хромогенный раствор, содержащий 3,3′,5,5′-тетраметилбензидин и перекись водорода измеряют оптическую плотность при длине волны 450 нм.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к способу получения многослойных покрытий на основе полиэлектролитных микрокапсул, содержащих биологически активные материалы, для применения в областях диагностики и медицины.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу оценки угрозы гибели ворсинок плаценты и неполноценного развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и перинатологии, может быть использовано для прогнозирования развития инфекционно-воспалительных заболеваний у новорожденных.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы повреждения фетоплацентарного барьера при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается прогнозирования развития кардиоваскулярных осложнений острого коронарного синдрома с подъемом сегмента ST.

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и описывает способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и предназначено для диагностики ранений ободочной кишки, в частности ранений ее забрюшинного отдела. Пострадавшему с подозрением на повреждение ободочной кишки выполняют первичную хирургическую обработку раны с ее ревизией.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу дифференциальной диагностики между туберкулезным плевритом, экссудативным плевритом при неспецифической пневмонии и плевритом на фоне рака легкого.
Изобретение относится к медицине и предназначено для диагностики начальной стадии хронической болезни почек. В крови больного определяют уровень липокалина-2 и альбумина, рассчитывают отношение липокалина-2 к альбумину и при значении больше 0,27 диагностируют хроническую болезнь почек.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики возникновения рестеноза в ранее стентированном сегменте. Сущность способа состоит в том, что исследуют кровь пациентов, определяют уровень циркулирующих СD45+ и при показателе, равном 0,91% и более от общего числа тромбоцитов, судят о наличии рестеноза.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения глубины залегания липидных ядер, являющихся центром атеросклеротических бляшек. Изобретение представляет способ определения глубины залегания липидных ядер атеросклеротических бляшек методом ИК-Фурье спектроскопии, заключающийся в том, что подготавливаются срезы атеросклеротически измененного участка сосудистого русла, записываются инфракрасные спектры пропускания подготовленных срезов, идентифицируются характеристические пики поглощения, отличающийся тем, что определяется срез, имеющий максимальное поглощение в диапазоне 1720-1760 см-1, соответствующем валентным колебаниям связей C=O сложных эфиров холестерина, который отвечает глубине залегания липидного ядра. Изобретение обеспечивает определение качественного состава атеросклеротических бляшек и глубину залегания липидных ядер. 2 ил.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ оценки эффективности антибактериальной терапии при диализном перитоните, включающий введение антибактериальных препаратов в пакет с диализным раствором с последующим введением в брюшную полость, морфологическое исследование диализата, отличающийся тем, что после проведения цикла обмена диализирующего раствора проводят исследование диализата методом клиновидной дегидратации, при этом диализат центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10-15 минут и отбирают 2 пробы - первую из верхней половины пробирки, вторую - из нижней, выявляют структуру кристаллов солей в диализате и при наличии линейных кристаллов в центральной зоне фаций обеих проб оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и не требующую ее продолжения, при наличии линейных кристаллов только в первой пробе оценивают эффективность терапии как удовлетворительную и требующую ее продолжения, при их отсутствии - как неудовлетворительную. Применение способа позволяет ускорить оценку эффективности антибактериальной терапии и повысить точность оценки. 4 пр., 3 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для прогноза тромбоцитопении у больных хроническим гепатитом С (ХГС) в результате проведения комбинированной противовирусной терапии (КПТ). У больных ХГС перед началом КПТ определяют уровень вирусной нагрузки (ВН, МЕ/мл). Определяют уровень фиброза по результатам непрямой фиброэластографии печени (F, кПа). Определяют количество тромбоцитов в крови перед началом КПТ (Трисходн, х109/л). На основании полученных данных проводят расчет прогнозируемой величины минимального количества тромбоцитов (Tpmin, х109/л) в крови с помощью метода множественной линейной регрессии. Значения Tpmin≤150,0х109/л свидетельствуют о наличии риска развития тромбоцитопении у больных ХГС, получающих КПТ. Причем значения Tpmin от 75,0х109/л до 150,0х109/л позволяют предполагать развитие легкой, от 50,0х109/л до 75,0х109/л - умеренной и <50,0х109/л - тяжелой степени тромбоцитопении. Способ позволяет точно, быстро и просто провести прогноз развития тромбоцитопении за счет комплексной оценки наиболее значимых факторов возникновения тромбоцитопении. 1 табл., 2 пр.
(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для посмертной диагностики токсокароза плотоядных животных. Способ включает отбор проб массой 50,0 г. Пробу измельчают на мясорубке с диаметром решетки 3-4 мм. Приготовливают искусственный желудочный сок по следующей прописи: 11,0 см3 концентрированной соляной кислоты (удельная масса 1,2) доводят до 1000,0 см3 водопроводной водой, подогретой до 41-42°С, добавляют 7,0 г пищевого свиного пепсина. ИЖС заливают в реактор аппарата «Гастрос» и прогревают до 41-42°С. Помещают стакан с измельченной пробой и аппарат устанавливают в режим переваривания 50 мин с активным перемешиванием и временем отстоя перевара 10 мин. Осадок сливают в объеме 20,0 см3. Наличие личинок определяют под лупой. Для концентрации применяют метод центрифугирования при 5000 об/мин в течение 10 мин. Далее из пробирки аспирируют 10,0 см3 верхнего слоя жидкости. Оставшийся осадок с личинками сохраняют для дальнейших исследований замораживанием при -20°С. Заявленный способ позволяет эффективно обнаруживать возбудителя токсокароза при посмертной диагностике данной болезни. 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к терапии, и может быть использовано в гепатологии и гастроэнтерологии для диагностики фибротических процессов печени. Сущность неинвазивного способа диагностики степени фиброза печени: формируют группу условно здоровых обследуемых (F0), группу пациентов с установленной гистологически умеренной степенью фиброза (F1-F2) и группу пациентов с установленной гистологически выраженной степенью фиброза (F3-F4), измеряют средние скорости движения суспензии эритроцитов и минимальные, средние и максимальные диаметры эритроцитов в период воздействия переменного электрического поля у группы условно здоровых обследуемых (F0) и у групп пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) и с выраженной степенью фиброза (F3-F4). На основании полученных данных определяют электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов, сравнивают электрические и вязкоупругие параметры эритроцитов группы условно здоровых обследуемых (F0) с группой пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) и группой пациентов с выраженной степенью фиброза (F3-F4). На основании полученных результатов формируют массив данных для диагностики степени фиброза печени. Затем проводят аналогичные измерения образцов проб эритроцитов пациента с неясной степенью фиброза с определением электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов с последующим их сравнением с соответствующими значениями, определенными для группы условно здоровых обследуемых (F0), группы пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) и группы пациентов с выраженной степенью фиброза (F3-F4) и при наличии 60% и более отличающихся параметров от группы условно здоровых обследуемых (F0) и входящих в границы значений для групп пациентов с умеренной степенью фиброза (F1-F2) или с выраженной степенью фиброза (F3-F4) и выявляют степень фиброза печени для данного пациента. Использование способа позволяет более точно определить степень фиброза печени у пациента на ранних стадиях заболевания независимо от этиологии возникновения заболевания. 3 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу прогнозирования риска развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ишемической болезнью сердца с ишемической и/или постинфарктной дисфункцией миокарда на фоне хронической сердечной недостаточности. Сущность способа состоит в том, что при выявлении уровня тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ-1 более 242,8 нг/мл и сердечно-сосудистого сопряжения более 1,29 риск развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий оценивается как высокий. Использование заявленного способа позволяет точно осуществить прогноз риска развития неблагоприятных сердечно-сосудистых событий у больных ишемической болезнью сердца с ишемической и/или постинфарктной дисфункцией миокарда на фоне хронической сердечной недостаточности. 2 ил., 3 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области ветеринарии и животноводства и может быть использовано при искусственном осеменении для выявления генетически неполноценных сперматозоидов. Способ включает добавление в пробы эякулята in vitro в среде для разбавления перекиси водорода в концентрации 0,5-1,0 мМоль с последующим выявлением и определением в сперматозоидах первичных морфологических признаков апоптоза, одноцепочечных разрывов и фрагментации ДНК, интенсивности процессов перекисного окисления липидов. При этом при выявлении низкого процента апоптотически гибнущих сперматозоидов до 10-15% достаточно яркого и выраженного свечения Гало, возрастания содержания ТБК-реактивных продуктов не более чем на 30-40% по отношению к контролю, оценивают сперматозоиды как генетически полноценные. Использование изобретения позволяет улучшить диагностику патологических нарушений в сперматозоидах на хроматиновом уровне.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для количественного определения оксима пиностробина в плазме крови. Для этого проводят определение оксима пиностробина в плазме крови методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии с использованием смеси плазмы крови с оксимом пиностробина и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу. Разделение продуктов проводят методом обращенно-фазной хроматографии на колонке размером 4,6×100 мм, термостатируемой при 30°C, скорость элюирования 0,5 мл/мин. В качестве элюента используют смесь 10 мМ ацетата аммония и ацетонитрила в соотношении 10:90 соответственно. Пик оксима пиностробина детектируют по иону с m/z 269.10, образующемуся в результате фрагментации иона оксима пиностробина с m/z 286.10, а его концентрацию рассчитывают по формуле: Coxime=2,073299×RS, где Coxime - концентрация оксима пиностробина (мкг/мл); RS - отношение площади хроматографического пика оксима пиностробина к площади пика внутреннего стандарта. Изобретение обеспечивает метод количественного определения оксима пиностробина в плазме крови для использования в экспериментальной и клинической фармакокинетике. 2 табл., 6 ил.

Группа изобретений относится к анализу биологических жидкостей с помощью биосенсорных систем. Способ определения концентрации анализируемого вещества в образце включает: генерацию выходного сигнала, соответствующего концентрации анализируемого вещества в образце и входному сигналу; компенсацию выходного сигнала с помощью основной функции и первой функции невязки для определения скомпенсированного выходного сигнала, причем основная функция предназначена для компенсации основной ошибки в выходном сигнале, а первая функция невязки предназначена для компенсации оставшейся ошибки в выходном сигнале; и определение концентрации анализируемого вещества в образце по скомпенсированному выходному сигналу. Также описана биосенсорная система аналогичного назначения. Достигается повышение точности и надежности анализа. 2 н. и 28 з.п. ф-лы, 25 ил., 8 табл.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для укупорки реакционных кювет, содержащих высушенные реагенты для биоаффинных исследований. Система (20) для биоанализа содержит картридж (4) для биоанализа с реакционной камерой (6) и прокалываемую герметичную крышку (2). Крышка (2) содержит верхний слой (8), средний слой (10), нижний слой (12) и места (14), предназначенные для прокалывания. Крышка (2) имеет в местах (14), предназначенных для прокалывания, полость (18) между верхним слоем (8) и нижним слоем (12), причем верхний слой (8) герметичен до прокалывания, а нижний слой (12) предварительно надрезан так, что при прокалывании иглой прокол не является газонепроницаемым, а позволяет газу свободно вытекать из реакционной камеры (6), и упомянутый слой (12) обеспечивает плотное смыкание следа иглы после отведения упомянутой иглы. Изобретение позволяет исключить перекрестное загрязнение, вызванное случайными переливами или испарением реагента. 7 з.п. ф-лы, 7 ил., 7 пр.
Наверх